设为首页 | 登录 | 免费注册 | 加入收藏
文献检索:
  • 计算机辅助下相关数字影像资料对人工全膝关节置换术的优化作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:基于Ceravision系统辅助人工全膝关节置换的手术结果,讨论相关数字影像资料对优化人工全膝关节置换术的作用。方法:选择2002-11/2003-06法国亨利蒙多医院(HOPITAL HENRI MONDOR)矫形与创伤外科用三维骨建模Ceravision导航系统辅助完成的21例人工全膝关节置换术患者的影像资料进行对比分析,根据术前的常规膝关节X射线片,下肢全长片、全麻下膝关节内外翻应力X射线片和髋、膝、踝扭转的CT片,以及术中Ceravision系统检测和术后X射线片,效果评估以重建的下肢力线膝关节内外翻≤3°为满意。①术前和术中膝关节内、外翻角度。②应力下术前和术中膝关节内、外翻角度。③术毕膝关节内、外翻角度。④并发症。结果:按意向处理分析,21例患者均进入结果分析。①下肢力线测量结果:术前X射线下肢全长片与术中电脑导航系统的测量平均外翻2.36°(内翻13°~外翻13°),3.33°(内翻12°~外翻10°),二者比较有显著差异(P=0.0025)。②应力下膝内翻、外翻测量结果:术前X射线正位片测量与术中导航系统的测量平均8.47°(内翻2°~内翻20°),3.63°(内翻7°~外翻12°),6.47°(内翻0°~内翻24°),4.32°(内翻8°~外翻15°),二者比较有显著差异(P<0.0001)。③术毕时膝内外翻测量结果:导航系统测得的膝内外翻平均为0.175°(内翻2°~外翻3°),术后X射线下肢全长片测量平均0.3°(内翻3.5°~外翻1.5°),二者比较,无明显差别(P>0.05)。④不良事件和副反应:所有的膝关节胫、股骨部件都得到满意的摆位置入。无髌骨失稳和脱位等并发症,且无异常的关节松弛度。结论:Ceravision系统辅助全膝人工关节置换术,有利于术中人机互动,取得精确的假体定位及韧带平衡和准确置换,达到下肢力线在内外翻3°以内范围的满意效果。
  • 高能震波治疗节段性骨缺损的成骨效能 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察应用高能震波修复节段性骨缺损的成骨效能。方法:实验于2004年在桂林医学院附属医院泌尿外科完成。实验兔18只,制造两侧兔桡骨中段10mm的骨缺损。一侧骨缺损的两骨断端于第2周及第8周用高能震波进行冲击处理(水囊式体外冲击波碎石机,12.5kV,500次),作为高能震波1组;另一侧骨缺损的两骨断端仅于第2周用同等条件高能震波处理,作为高能震波2组。于术后第2,4,8,12周分别行双侧桡骨X射线检查及X射线影像评分(分值高表示骨愈合好)。于术后第2,4,8,12周各处死3只切取标本行组织学检查。结果:18只兔子中因分阶段取材共处死12只,满12周存活6只。①高能震波1组满12周6只中5只获骨性愈合,1只未愈;高能震波2组满12周6只中2只获骨性愈合,4只未愈。②两组术后12周X射线评分高能震波2组低于高能震波1组[(2.33±0.51),(4.67±1.86)分,P<0.05]。③两组术后12周时组织学改变,高能震波1组出现骨连接,骨痂成熟并朝板层骨转化。高能震波2组出现成熟的板层骨,缺损区出现大量结缔组织增生,玻璃样变。结论:高能震波能有效地促进骨缺损的修复与再生,为节段性骨缺损的治疗提供了一种微创的新方法。
  • 膝关节韧带断裂重建术后的早期康复干预:与非系统康复的效果比较 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨膝关节韧带断裂重建术后早期康复介入对膝关节功能恢复的影响。方法:中山大学附属第二医院骨科病房2001-04/2003-10收治膝关节韧带断裂患者68例。①实验组38例,术后第3天起进行屈膝<90。的膝关节连续被动运动;术后疼痛减轻时,对前后交叉韧带断裂重建术后患者分别进行腘绳肌或股四头肌等长收缩练习,术后7d,分别进行股四头肌或胭绳肌肌力训练,3次/d,10min/次;出院后活动型膝支具保护半年。②对照组30例,术后无正规的康复治疗,患者出院时予活动型膝支具保护半年。③分别记录两组患者在治疗半年后的疼痛缓解程度、关节稳定性和膝关节的活动度。自拟疗效评价标准为优:无主诉疼痛,关节稳定,膝关节屈伸活动度正常;良:轻度疼痛,偶有关节不稳定,但上下楼无明显困难者,屈伸膝受限<10°;可:中度疼痛,膝关节不稳定,上下楼困难,屈伸膝受限>10°。结果:按实际处理分析,实验组38例患者中,疗效优20例,良12例,一般6例;对照组30例患者中,疗效优6例,良14例,一般10例。实验组疗效明显优于对照组(r=7.86,P<0.05)。结论:对膝关节韧带重建术后的患者早期进行膝关节的持续被动运动,训练膝关节周围肌肉以增强其肌力,以及术后给予膝部保护,不仅可以减轻疼痛、增加关节的稳定性以及减少膝关节的活动受限,同时也提高了患者的功能水平。
  • 人工肩关节置换术18例2年肩关节功能恢复效果随访 免费阅读 收费下载
  • 目的:分析人工肩关节置换术后功能障碍的影响因素。方法:于2002-10/2004-10选择武汉大学医学院附属中南医院骨科收治的18例肩部疾病拟行人工肱骨头置换手术的患者。男11例,女7例。其中单纯肱骨头粉碎性骨折13例(大小结节完整2例,被撕脱但与肌肉相连者11例),肱骨近端(波及头和外科颈)粉碎性骨折(Ⅳ型)4例,肩关节夏科氏关节病1例。全部采取人工肱骨头置换手术,手术后对肱骨近端(波及头和外科颈)粉碎性骨折(Ⅳ型)患者先行肩外固定4周后在外展架上进行抬肩锻练,2周后拆除外展架进行肩部功能锻练,而对单纯肱骨头粉碎性骨折和肩关节夏科氏关节病患者应在2周后尽早开始功能训练。评估标准:采用美国肩肘关节医师协会评分,包括患者自我主观评估和医师客观评估2个部分,前者包括疼痛、稳定度和功能3个部分,疼痛和稳定度自我评定总分为110分,功能评分通过10个日常生活活动的完成情况进行评定。医师客观评估包括活动度、肌力、稳定性以及是否存在异常体征(如局部压痛、撞击等)。最后的评分仅由自我主观评分的得分计算得出(疼痛占50%,功能占50%)。总分在90分以上为优,80~90分为良,70~80分为可,70分以下为差。术后随访2年。主要观察患者手术后肩关节功能恢复的情况。结果:18例人工肩关节置换术后患者均完成2年随访,随访率100%。功能恢复情况为优15例,良2例,可1例,优良率为94%。仅1例出现半脱位。结论:对肩关节破坏严重的患者,人工肩关节置换术是一个可望取得良好功能恢复的治疗方法,尽管影响术后功能不良的因素很多,但严格把握手术指证、术中重建肩关节诸结构、术后积极的功能锻练,可避免术后功能障碍。
  • 计算机辅助个体化下颌骨缺损的功能性修复 免费阅读 收费下载
  • 目的:应用计算机辅助技术,从生物力学分析和个体化钛网制作两个方面,进行下颌骨缺损的个体化功能性修复。方法:实验于2003-12/2004-09在第二军医大学长海医院口腔科与上海理工大学机械学院完成。通过CT扫描获取下颌骨断层解剖信息,然后进行三维重建,在三维重建的基础上,首先进行下颌骨缺损个体化功能性修复三维有限元模型的建立和相应的生物力学分析,然后探讨依靠镜像技术、快速成型技术、铸造技术等完成个体化三维钛网修复体的制作,再将种植体与钛网相连接,构建个体化功能性修复体。结果:在计算机辅助基础上,成功构建下颌骨缺损个体化功能性修复的三维有限元模型,并能为个体化功能性修复提供生物力学分析,所制作的个体化带种植体三维钛网与下颌骨连接良好,能个体化恢复颌骨的解剖性态,所带种植体可望为后期义齿修复提供基础。结论:下颌骨个体化功能性修复三维有限元模型的建立及相应力学分析,能为下颌骨缺损的个体化功能性修复提供生物力学基础;以快速原型技术为基础,成功制作了下颌骨个体化功能性钛网修复体,为下颌骨缺损的个体化功能性修复提供了现实基础。
  • 数字化三维重建技术定量评估青少年特发性脊柱侧弯胸椎椎弓根的形态变化 免费阅读 收费下载
  • 目的:应用数字化三维重建技术,对青少年特发性脊柱侧弯患者胸椎椎弓根的形态变化进行观察,分析其形态变化的规律。方法:随机选取2000-10/2004-10解放军总医院骨科需要手术矫正的青少年特发性脊柱侧弯患者18例,男4例,女14例,年龄14~19岁。18例患者均经过手术矫正内固定治疗,术后未出现严重并发症。①患者拍摄脊柱正侧位X线片,测量脊柱侧弯的Cobb角。②根据18例青少年特发性脊柱侧弯患者CT断层扫描DICOM数据,采用Mimics和3D View软件进行脊柱数字化三维重建和显示,直接在计算机上观察胸椎椎弓根的形态,测量胸椎椎弓根的横径、椎弓根-肋骨头结合体横径、椎弓根矢状径。结果:按意向处理分析,18例患者全部纳入实验。①脊柱侧弯度数测量结果:18例患者主胸弯凸向右侧,X线和CT均未发现椎体和肋骨畸形。Cobb角45°~125°,平均68.3°。②椎体形态观察:随着脊柱侧弯和椎体旋转的变化,上下关节突、横突、椎板及椎体都出现不对称变化,一般凹侧关节突和横突小于凸侧。从冠状面断层可观察到椎弓根内侧壁皮质骨厚度明显比外侧壁皮质骨厚。③胸椎椎弓根的横径、椎弓根-肋骨头结合体横径、椎弓根矢状径测量结果:椎弓根横径为3.27~7.94mm,T4左侧最小,凹侧椎弓根横径小于凸侧;胸椎椎弓根-肋骨联合体横径为11.32~15.91mm,T5右侧椎弓根-肋骨联合体横径最小;双侧椎弓根矢状径自T1-12逐渐增大,双侧无明显差异。T1右侧矢状径最小,为7.97mm,而T12左侧矢状径最大,为12.92mm。结论:数字化三维重建技术可精确测量青少年特发性脊柱患者椎弓根的各项径线。一般情况下凹侧关节突和横突小于凸侧,凸、凹侧椎弓根各个节段的形态变化存在一定规律。
  • 经颅多普勒血流变化量化评估穴位手法推拿治疗椎动脉型颈椎病的疗效 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨穴位手法推拿治疗对椎动脉型颈椎病患者眩晕、颈肩痛、头痛症状的改善状况,并以经颅多普勒检测其血液流变学变化为量化评估标准进行治疗前后自身对照比较。方法:实验于2001-01/2003-12在佛山市中医院推拿科完成。选择诊断明确的椎动脉型颈椎病患者60例,采用穴位手法推拿治疗。先于风池、风府穴施用按、揉、指掐等手法,约5min,接着于肩井穴施用滚法、拿法,约5min,再于双侧太阳穴施用环揉手法约3min,并点按百会、按揉翳风约3min,最后结合按、揉、滚等手法作用于颈项肩背部,待肌肉放松后,行颈椎关节拔伸手法,约5min,1次/d,3周为1个疗程。治疗前后进行自拟的临床症状评分(严重影响工作、学习和日常生活,不能坚持工作为重度均计3分,影响工作、学习和日常生活,但能坚持工作为中度计2分,对工作生活影响不大为轻度计1分,无计0分)评估其眩晕、颈肩痛及头痛症状改善情况;经颅多普勒检查评估基底及左、右椎动脉血流变化情况,测量参数为收缩期最大血流速度、舒张末期最大血流速度、平均血流速度、时间平均血流速度、血流量。60例患者均知情同意。结果:实验纳入标准的患者60例,治疗前后经颅多普勒检查资料完整的有40例,20例由于资料不完整未进入结果分析。①临床症状评分结果:治疗后眩晕、颈肩痛、头痛计分较治疗前明显降低(1.0±0.6,2.4±0.5;0.9±0.6,2.3±0.7;0.8±0.8,2.1±0.6,P<0.05,P<0.01)。②基底动脉血流变化结果:治疗后基底动脉收缩期最大血流速度、平均血流速度、时间平均血流速度较治疗前明显增高[(57±9,50±11;37±8,33±7;25±6,22±6)cm/s,P<0.01)[,舒张末期最大血流速度与治疗前相比增高不明显[(27±7),(25±9)cm/s,(P>0.05)]。③椎动脉血流变化结果:治疗后左侧椎动脉收缩期最大血流速度、舒张末期最大血流速度、平均血流速度、时间平均血流速度、血流量均较治疗前明显升高[(58±11,42±12;22±7,17±6;30±8,23±6;16±4,14±4)cm/s,(0.09±0.03,0.08±0.04)L/min,(P<0.01)]。右侧椎动脉的收缩期最大血流速度、舒张末期最大血流速度、平均血流速度、时间平均血流速度、血流量均较治疗前明显升高[(53±12),(44±16);(20±7).(16±8);(29±9),(22±8);(16±5),(13±5)cm/s;(0.08±0.04),(0.07±0.04)L/min,P<0.01或P<0.05]。结论:穴位手法推拿治疗可提高基底动脉和椎动脉的血流速度和血流量,从而改善椎动脉型颈椎病患者的眩晕、颈肩痛和头痛症状。
  • 应用脑电双频谱指数监测和评估瑞芬太尼与芬太尼的中枢抑制作用对大脑皮质功能的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:以反映大脑皮质功能状态的脑电双频谱指数监测和评估瑞芬太尼与芬太尼对意识消失所需的异丙酚效应室的浓度,以及两药对大脑皮质功能的影响。方法:选择2004-01/11中国医科大学附属第一医院骨科择期手术患者30例作为观察对象。美国麻醉医师协会病情估计分级Ⅰ~Ⅲ级,随机分为3组,芬太尼组、瑞芬太尼组及对照组,每组10例。术前开放静脉,芬太尼组2.5μg/(kg·h)持续输注,瑞芬太尼组4μg/L血浆药物浓度靶控输注,对照组给予90g/L氯化钠液。达到平衡10min后开始异丙酚靶控输注,目标浓度逐步升高(1.0mg/L,2.0mg/L,3.0mg/L,4.0mg/L)。每一效应室浓度达平衡2min后调节靶控浓度至下一目标值,并同时记录脑电双频指数值,进行镇静评分(当镇静评分<3时,每30秒记录各项指标,直到意识消失。对口头指令有反应视为清醒,镇静评分5~3分。无反应视为意识消失,镇静评分0分),记录脑电双频指数,效应室浓度。异丙酚浓度达4.0mg/L 2min后结束实验,进行脑电双频指数值监测。结果:按意向处理分析,所有病例均完成测试且进入结果分析。①脑电双频谱指数值与异丙酚效应室浓度间的关系:对照组、芬太尼组。瑞芬太尼组脑电双频谱指数值与异丙酚效应室浓度间相关系数分别为0.98,0.97,0.92。各组间无显著差别。②镇静评分与异丙酚效应室浓度间的关系:两个阿片药物组在异丙酚1,0mg/L及2.0mg/L时镇静评分显著低于对照组[(4,5,5),(1.5,3),P<0.05]。各组患者在异丙酚4.0mg/L时均出现意识消失。③意识消失时脑电双频谱指数均值与异丙酚效应室浓度平均值的关系:在意识消失时点瑞芬太尼组、芬太尼组脑电双频谱指数值均高于对照组(69.0±9.0;64.5±6.9;63.5±7.2;P<0.05),瑞芬太尼组高于芬太尼组(P<0.05)。瑞芬太尼组、芬太尼组意识消失时异丙酚效应室浓度显著低于对照组(1.6±0.5;1.9±0.7;2.3±0.2mg/L,P<0.01)。结论:瑞芬太尼和芬太尼均能够显著降低意识消失所需异丙酚的效应室浓度,并出现较低的镇静评分,说明两种药物间相互加强中枢抑制均具有作用,加速诱导期意识消失出现及提高镇静程度。但并未证实两药对脑电双频指数值产生影响。
  • 影响非手术治疗腰椎间盘突出症患者康复的相关因素分析 免费阅读 收费下载
  • 目的:对影响腰椎间盘突出症患者康复因素的问卷调查,了解腰椎间盘突出症患者的认知缺陷。方法:选择2001-07/2002-01深圳市宝安区中医院康复理疗科门诊腰椎间盘突出症患者40例,利用调查问卷记录可能影响腰椎间盘突出症康复的有关项目,以腰部功能障碍问卷评定腰椎间盘突出症患者康复疗效,分析两者关系。结果:4例在治疗过程中失访,90%(36例)完成问卷调查。①腰椎间盘突出症的发病年限和发病次数与其康复效果显著相关。②不同年龄,文化程度,病变节段,是否有腰椎间盘突出症家族史及对腰椎间盘突出症了解程度不同的患者,其康复效果之间也有显著差异。③67%的患者存在着对腰椎间盘突出症相关康复知识的认知缺陷。结论:非手术治疗的腰椎间盘突出症患者的康复结果受到生理、社会、疾病本身等多种因素影响,并与多数患者存在着对腰椎间盘突出症知识认知的缺陷有关。
  • 不同康复干预技术治疗腰椎间盘突出症的疗效:多因素非条件Logistic回归分析 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨不同康复干预技术与腰椎间盘突出症预后的关系。方法:锦州医学院附属第一医院康复科1996-04/2004-04收治的腰椎间盘突出症患者404例。对404例腰椎间盘突出症患者的年龄、性别、发病后的就诊时间,是否首次发病、入院时腰椎疾患成绩评分、病变节段数目,卧床休息的时间、是否牵引治疗、是否推拿按摩、是否针灸、是否理疗,是否进行封闭、是否应用药物等因素进行多因素非条件Logistic回归分析。结果:404例患者均进入结果分析。多因素非条件Logistic回归分析发现腰椎问盘突出症预后与是否首次发病(X^2=6.503,P=0.011)、入院时腰椎疾患成绩评分(X^2=4.073,P=0.044)、病变节段数目(X^2=3.886,P=0.049)、卧床休息的时间(X^2=5.485,P=0.019)、是否牵引治疗(X^2=7.944,P=0.005),是否推拿按摩(X^2=5.667,P=0.017)的相关性具有统计学意义。结论:不同康复方法治疗腰椎间盘突出症的效果评估之间差别很大,是否首次发病、入院时腰椎疾患成绩评分、病变节段数目、卧床休息时间、牵引治疗、推拿按摩等单一或综合因素都可能对腰椎间盘突出症预后产生影响。
  • 微粒化地奥司明缓解创伤及骨科手术后患者下肢肿胀和疼痛症状的定量评估 免费阅读 收费下载
  • 目的:定量评估微粒化地奥司明缓解创伤及骨科手术后患者下肢肿胀和疼痛症状的效果。方法:于2002-03/12在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科选择下肢手术或创伤后患者62例,随机分为微粒化地奥司明组31例和对照组31例。微粒化地奥司明组患者给予口服微粒化地奥司明500mg/次,2次/d,连续14d。对照组术后仅使用抗生素和止血剂。治疗前对所有患者均进行疼痛及下肢肿胀程度的评价。疼痛程度根据视觉模拟评分法(0分表示无痛,10分表示难以忍受的最剧烈的疼痛)评价。肿胀程度应用LEG-O-METER评估下肢周径。治疗后每2天对上述指标进行反复测定、记录直至接受治疗后14d。结果:按意向处理分析,2组62例均进入结果分析。①微粒化地奥司明组治疗后4d下肢周径较治疗前明显减小[治疗前(44.8±5.9)cm,治疗后(43、6±5.7)cm,t=5.47,P<0.05];对照组治疗后8d下肢周径较治疗前明显减小[治疗前(44.6±6.4)cm,治疗后(43.7±5.8)cm,t=4.56,P<0.05]。②微粒化地奥司明组治疗后4d疼痛程度较治疗前明显减轻[治疗前(5.2±2.3)分,治疗后(3.1±2.5)分,t=6.34,P<0.05];对照组治疗后8d疼痛程度较治疗前明显减轻[治疗前(4.9±1.7)分,治疗后(2.3±1.4)分,t=7.61,P<0.05]。结论:骨科手术后患者下肢疼痛程度的变化与肿胀消退程度的变化基本一致,微粒化地奥司明组与对照组相比肿胀及疼痛缓解明显提前且缓解速度亦明显加快。
  • 不同浓度罗比卡因用于骶管内肛肠术后患者的镇痛效果 免费阅读 收费下载
  • 目的:对不同浓度罗比卡因用于骶管麻醉肛肠手术患者术后镇痛效果的比较,并探讨其最低有效浓度的最佳镇痛效应。方法:选择2000-03/2004-06在右江民族医学院附属医院麻醉科拟行骶管麻醉肛肠手术患者120例。随机分为05,0.75,1和1.25g/L罗比卡因组,每组30例。术毕接硬膜外自控镇痛泵,分别给于相应浓度罗比卡因+舒芬太尼1mg/L,二者比例(mL)为1:1。硬膜外自控给药0.5mL/次,锁定时间为15min。观察镇痛后4,8,16,24,48,72h疼痛和镇痛后24,48,72h下肢运动神经阻滞情况(取平均值)。疼痛采用目测类比评分法(VAS)评定(0分为无痛,10分为最痛).下肢运动神经阻滞采用Bromage评分法评定(0分为无阻滞.4分为阻滞)。结果:按意向处理分析,120例患者均进入结果分析。①疼痛目测类比评分:术后8,16,24h,0.5g/L罗比卡因组高于其他3组(P<0.05),0.75,1和1.25g/L罗比卡因组间比较无显著性差异(P>0.05);术后48,72h时0.5和0.75g/L罗比卡因组分值高于1和1.25g/L罗比卡因组(P<0.05),1和1.25g/L罗比卡因组间比较无明显差别。②下肢运动神经阻Bromage评分:1.25g/L罗比卡因组为0.9±0.8,明显高于其他3组(P<0.05),0.5,0.75和1g/L罗比卡因组间比较无明显差异(0.5±0.5,0.6±0.4.0.7±0.6,P>0.05)。结论:1g/L罗比卡因加1mg/L舒芬太尼用于骶管麻醉肛肠手术患者术后镇痛是较为适宜的浓度,并可产生较为满意的镇痛效果。
  • 钐^153-乙二胺四撑膦酸改善骨转移患者癌性疼痛 免费阅读 收费下载
  • 目的:对钐^153-乙二胺四撑膦酸治疗的转移性骨肿瘤患者进行随访调查,探讨其治疗骨转移性癌痛的效果,并分析年龄、性别、原发肿瘤的类型以及治疗前Karnofasky评分、疼痛严重程度和止痛剂使用分级的相关性。方法:在接受钐^153-乙二胺四撑膦酸治疗的转移性骨肿瘤患者中,选取158例进行16周的随访。该组患者具有不同程度的癌痛,并能够合作汇报、记载癌痛的症状;预期寿命>6个月;接受治疗前至少4周未行放射治疗和抗肿瘤药物治疗;无肝、肾及其他重要器官功能障碍;无病理性骨折或其他机械性失稳的临床和放射学表现;白细胞>4、0×10^9L^-1,血小板>100×10^9L^-1。随访内容包括:疼痛程度、止痛剂的使用、Karnofsky评分、血常规及血生化学变化。用骨痛缓解情况和止痛剂使用的变化评价治疗效果。同时分析疗效与年龄、性别、原发肿瘤的类型以及治疗前Karnofasky评分、疼痛严重程度和止痛剂使用分级的相关性。结果:158例患者均进入结果分析。①127例骨痛减轻,125例止痛剂使用减少。Karnofsky评分治疗前为57.8±27.6,治疗后增加为66.4±24.4。②最常见副反应为可逆性骨髓抑制。③Binary Logistic回归分析示仅原发肿瘤的类型可能是影响钐^153-乙二胺四撑瞵酸疗效的主要因素(DR=1.8),对肺癌性性疼痛的止痛效果低于乳腺癌和前列腺癌性疼痛,而后者之间止痛效果比较基本接近。结论:钐^153-乙二胺四撑膦酸对各种骨转移癌引起的疼痛有不同程度的止痛效果,原发肿瘤的类型是影响止痛效果的主要因素。
  • 慢性中耳炎患者396耳发病年龄与听力丧失的相关性分析 免费阅读 收费下载
  • 目的:回顾性分析慢性中耳炎患者396耳发病年龄与听力的关系。方法:对中国医科大学附属第一医院耳鼻喉科1993-01/1998-12收治的慢性中耳炎患者396耳进行了患者年龄与听力关系的回顾性调查和统计学分析。396耳中男212耳,女184耳。用美国08822型电测听检测仪测定患者的骨气导阈值,记录出听力图。将患者按年龄分成6组,<19岁,20~29岁,30~39岁,40~49岁,50~59岁,>60岁。观察术前骨气导阈值,听骨链改变,手术前后纯音听力改变。资料用t检验或X^2检验进行统计学分析。结果:396耳均取得各项测试值,全部进入结果分析。①患者发病年龄6~71岁胆脂瘤型中耳炎占53.0%(210/396);非胆脂瘤型中耳炎占470%(186/396);全聋占4.8%(19/396),6~71,以>60岁以上组患者多见(3/13)。②术前骨导阈:术前平均骨导阈在各个年龄组之间有明显的差异,随着年龄的增加,骨导阈提高,各年龄组平均骨导阈值依次为(5.4±6.3,9.1±8.2,11.2±9.6,15.1±9.8,19.5±11.6,26.2±11.2)。骨导阈值超过30dB以上占6.1%(24/396)。胆脂瘤型术前骨导阈明显高于非胆脂瘤型(14.6±9.9,8.9±8.2,P<0.01),尤其在骨导阈超过30dB以上胆脂瘤型发病明显高于非胆脂瘤型(23/11.0,1/0.5,P<0.05)。③听骨链改变:术中发现听骨链破坏的患者年龄多在30岁以上,胆脂瘤型中耳炎的听骨链破坏占76%,而非胆脂瘤型中耳炎患者听骨链破坏只占23%,两者比较差异显著(P<0.05)。④各年龄组术后听力改变:<60岁各年龄组之间术后听力提高情况没有明显的差异,而>60岁者术后听力改善较差。胆脂瘤型中耳炎患者术后听力平均增高5.2dB;而非胆脂瘤型中耳炎术后听力平均提高为12.7dB。非胆脂瘤型中耳炎术后听力恢复效果明显(P<0.05)。结论:①年龄对骨导阈的水平有明显的影响,青少年患者很少出现感觉神经性聋。②随着年龄的增长,骨导阈明显升高,胆脂瘤型中耳炎患者的骨导阈升高常见。③在30岁以上的患者中耳结构的变化比青少年更严重,特别是听骨链的破坏更为明显。④鼓室成型术对青少年和成年人各年龄组中耳炎患者的听力改善有效,60岁以上的患者在条件具备的情况下也应尽可能行鼓室成型术提高和弥补损伤的听力。
  • 大龄腭裂手术方式对语音效果的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:对大龄腭裂单纯行裂隙关闭术和同期行咽后壁咽成形术的患者术前、术后发音效果进行检测分析和对比,评定手术改善发音的治疗效果。方法:第四军医大学口腔医学院颌面外科2000-01/2004-06收治24例同期行腭裂关闭术及咽后壁组织瓣咽成形术治疗和22例单纯行裂隙关闭术的大龄腭裂患者,术前术后用鼻咽纤维镜检测其腭咽闭合情况,应用通用音频谱分析系统对腭裂语音进行声学分析。结果:所有腭裂修复术后创口均达到临床Ⅰ期愈合,语音也有不同程度改善。大龄腭裂患者采用腭裂关闭及同期咽成形术修复组,术后发音改善明显优于单纯行裂隙关闭组。结论:大龄腭裂患者采用腭裂关闭及同期咽成形术是提高腭咽闭合和改善发音的比较好的手术方法。
  • 应用负压封闭引流的物理学技术修复会阴部软组织损伤 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨应用负压封闭引流的物理学方法修复损伤创面会阴部软组织缺损的效果。方法:负压封闭引流组为第三军医大学大坪医院1998-08/2003-07住院患者32例,对照组为1996-01/1998-12创伤中心收治的采用常规换药或引流的同类创伤患者17例。清创后将Vacuseal材料覆盖在相应大小的创面上或创腔内,维持负压在50~60kPa,7~9d后二期缝合、植皮或皮瓣转移。治疗后进行形态学和治疗效果观察。结果:按实际处理分析,32例患者中,5例未能完成治疗,27例患者完成整个负压封闭引流治疗过程。①患者负压封闭引流治疗后形态学观察:创面缩小约20%,死腔完全消灭,创面肉芽组织平坦、新鲜,毛细血管丰富,创面有渗血,肉芽无水肿,创面无渗出。②27例患者创面经二期处理后全部治愈;创面或创腔直接通过负压封闭引流治愈4例,采用局部转移皮瓣关闭7例,植皮关闭13个,二期缝合3例。③二期缝合、植皮、皮瓣转移时间,住院时间负压封闭引流组均显著小于对照组[(8.5±2.0),(15.1±5.8)d;(22.4±7.5),(32.1±12.6)d,P<0.01]。负压封闭引流组创面缩小程度大于对照组[(5.2±2.3),(2.0±0.3)cm,P<0.01]。结论:应用药理治疗技术的负压封闭引流方法,能防止创面污染,充分引流可剌激创面肉芽组织快速良好生长,缩短治愈时间。对创伤后的急慢性软组织缺损患者的治疗简单,并易于接受。
  • 经皮激光颈椎间盘减压术对颈椎稳定性的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:经皮激光椎间盘减压术是一项脊柱微创手术新技术,逐步在临床广泛应用。目的:评价经皮激光椎间盘减压术对颈椎稳定性的影响。设计:以患者为研究对象,前后对照观察研究。单位:暨南大学附属第二医院深圳市人民医院脊柱外科。对象:2001-10/2003-04暨南大学附属第二医院深圳市人民医院脊柱外科收治侧旁型颈椎间盘突出症患者28例,29个椎间盘,男17例,女11例。干预:在X射线监视下,9号穿刺导针颈前穿刺,将4001μm光导纤维导入病损椎间盘内,使用波长1060nm的ND:YAG激光,输出功率15W,对髓核进行汽化、减压,接受激光剂量为500~950J。主要观察指标:观察治疗前及术后6个月手术椎间盘相邻椎体前后横向位移及成角情况。结果:过屈位、过伸位手术前后手术椎间盘相邻椎体的位移差异无显著性意义(t=0.8117~0.8272,P>0.05);其相邻椎体角度大小差异无显著性意义(t=0.7687~0.8271,P>0.05)。结论:经皮激光椎间盘减压术治疗侧旁型颈椎间盘突出症,操作简易,损伤小,影响颈椎稳定性。
  • 腰椎间盘突出症患者的腰背等速肌力评定 免费阅读 收费下载
  • 背景:躯干生物力学的变化可能是腰椎间盘突出症发病和病后不愈的重要因素。目的:通过对腰椎间盘突出症患者进行腰背肌力测试,以了解其躯干生物力学变化。设计:以患者为研究对象.非随机化同期对照的回顾性研究。单位:解放军第二军医大学长海医院康复医学科。对象:200-102/2002-01在第二军医大学长海医院康复医学科门诊治疗的腰椎间盘突出症患者30例为测试组.同期治疗非腰椎间盘突出症患者30例做对照组,均知情同意。方法:利用多关节等速测试系统对受试者躯干的等速力矩进行测试。观察记录指标为腰背屈伸肌群的峰力矩(PT)、相对峰力矩(PT/BW)、到达峰力矩的时间(TPT)、0.2s的力矩([email protected].2)、总功(TW)和平均功率(AP)。同时测试了腰背屈/伸比值(F/E)。结果利用SPSS9.0软件包分析.采用t检验进行统计学处理。主要观察指标:主要结局:腰背部屈肌、伸肌等速肌力评定结果。次要结局:腰背部屈伸比值评定结果。结果:各种收缩速度时测试组患者的屈、伸肌力量均显著下降,肌肉的爆发力和做功的效率指标也变化明显,屈肌力量的下降比伸肌力量的下降更严重。F/E评定测试组等速向心收缩60°/s,180°/s分别为57.99±5.68,65.74±8.12;对照组分别为95.25±5.18,83.03±7.6l,两组比较差异有显著性意义(P<0.01)。结论:腰椎间盘突出症患者其力学改变是明确的,康复治疗应在准确评定这种改变的基础上,制订合适的、有针对性的训练方案,彻底纠正这种力学平衡,打断恶性循环。
  • 加热疗法辅助持续被动运动对肘膝关节功能恢复的作用 免费阅读 收费下载
  • 背景:用加热疗法来辅助持续被动运动,能促进四肢关节活动度的恢复。目的:加热疗法辅助持续被动运动用于改善单纯上肢或下肢骨折术后患者的关节活动度。设计:随机对照观察。单位:四川大学华西医院。对象:选择2000-10/2002-07在四川大学华西医院骨科收治的四肢骨折患者84例。上肢肘关节活动障碍16例,下肢膝关节功能障碍68例,并随机分成两组,治疗组42例,对照组42例。方法:治疗组42例采用先预热关节部位,然后进行持续被动运动治疗,对照组42例则采用单纯的持续被动运动治疗,应用关节活动度量表评定两组治疗前后关节活动度改善的差异。主要观察指标:肘、膝关节治疗前后活动度的比较和治疗前后肘膝功能评分比较。结果:按意向处理分析,84例均完成治疗进入结果分析。治疗组肘、膝关节活动度治疗后比对照组显著提高[(101.40±25.76)°,(86.14±27.66)°,t=5.25,P<0.01];治疗后肘、膝关节评分治疗组显著高于对照组[(84.32±16.54),(64.89±13.76)分,t=4.24,P<0.01]。结论:采用加热辅助持续被动运动治疗改善关节活动度和肘、膝关节功能的作用优于单纯应用持续被动运动。
  • 人工髓核置换腰椎间盘成形术改善患者腰腿痛症状及腰椎活动度33例随访观察 免费阅读 收费下载
  • 背景:人工髓核椎间盘成形术与人工椎间盘置换术相比,其手术创伤小,操作简单,手术风险也较小。目的:观察人工髓核假体置换术对腰椎间盘突出症患者症状的恢复及腰椎活动度改善的效果。设计:以患者为观察对象的自身前后对照。单位:南方医科大学珠江医院骨科。对象:2002-01/2003-10南方医科大学珠江医院收治的腰椎间盘突出症患者施行人工髓核置换术33例,男21例,女12例。方法:患者均行人工髓核置换椎间盘成形术。术后3个月复查腰椎X射线观察椎间隙高度和形态。随访8个月。根据患者腰椎间盘突出症症状恢复情况(分为优、良、进步、差)进行腰椎功能测评。主要观察指标:患者术后腰腿痛症状及腰椎活动度。结果:按意向处理分析,33例患者均进入结果分析。随访时患者腰腿痛症状及腰椎活动度优29例,良好3例,差1例,优良率为96.97%(32/33)。术后3个月X射线片显示:29例保持正常形态和高度,3例未达到正常的高度,但较术前有增高,未发现邻近椎间隙退行性变加重。结论:人工髓核置换椎间盘成形术可以有效的缓解患者腰腿痛症状,恢复脊柱节段的运动,减少邻近椎间隙和关节突的退行性变。
  • 循经走罐法改善颈椎病患者症状与病程及年龄的关系 免费阅读 收费下载
  • 背景:循经走罐法治疗颈椎病,主要是起到疏通经络,行气活血,消除瘀滞的目的。目的:探讨循经走罐法改善颈椎病患者症状,疗效与病程及年龄的关系。设计:患者自身前后对照观察。单位:解放军空军总医院理疗科。对象:2000-12/2003-12空军总医院理疗科门诊治疗的颈椎病患者100例。其中男39例,女61例;年龄≤30岁9例,31~40岁38例,41~50岁42例,>50岁11例。病程<1年36例,1~5年49例,>5年15例。颈型51例,椎动脉型25例,神经根型24例;其中有69例患者经过X射线检查显示颈椎生理曲度变直或反向,或有不同程度的退行性改变。有23例患者脑血流图显示椎动脉供血不足。干预:患者俯伏坐位,暴露颈肩部和上背部,用负压罐吸拔于颈部,使颈肩部和背部疼痛部位的皮肤出现瘀斑,每周治疗一两次,治疗1个月后。根据患者治疗前后的自觉症状和体征以及X射线片、脑血流图的检查结果进行治疗效果评定。症状消失:疼痛0级;颈椎的生理弯曲恢复10°~15°;脑血流图显示椎动脉收缩峰速度恢复正常范围。明显好转:疼痛降低2级以上;颈椎的生理弯曲恢复6°~9°;脑血流图椎动脉收缩峰速度恢复正常范围的80%。好转:疼痛降低1级;颈椎的生理弯曲恢复3°~5°;脑血流图椎动脉收缩峰速度恢复正常范围的40%~80%。无效:疼痛无变化;颈椎的生理弯曲恢复3°以下;脑血流图椎动脉收缩峰速度在正常范围的40%以下。主要观察指标:①各型患者治疗后症状改善情况。②病程与治疗效果的关系。③年龄与治疗效果的关系结果:按意向处理分析,100例患者均进入结果分析。症状消失、明显好转、好转、无效,颈型分别为27,17,5,2例;椎动脉型分别为8,10,4,3例;神经根型分别为4,9,7,4例;病程<1年分别为19,12,3,2例;病程1.5年分别为18,19,7,5例;病程>5年分别为2,5,6,2例;年龄<30岁分别为5,3,1例;31~40岁分别为18,13,4,3例;41~50岁分别为15,18,5,4例;>50岁分别为1,2,6,2例。结论:循经走罐法对改善颈型颈椎病患者的效果较好,椎动脉型次之,神经根型治疗结果较差。病程越短,年龄越小,治疗效果越好。
  • 胸腰椎爆裂型骨折并截瘫患者术后脊髓功能恢复与手术方式及内固定系统的相关性 免费阅读 收费下载
  • 背景:胸腰椎爆裂型骨折的主要危害是原发和/或继发性损伤所造成的脊髓神经损伤,有报道经后路器械复位内固定对爆裂骨折的复位和对椎管的间接减压是有效的。目的:探讨经前路减压后应用史塞克胸腰椎前路钢板内固定系统治疗胸腰椎爆裂型骨折并截瘫患者,改善术后椎管狭窄及脊柱力线的效果。设计:病例报告。单位:一所市级医院骨科。对象:选择2001-09/2002-02东莞市太平人民医院骨科收治的胸腰椎爆裂型骨折并脊髓功能障碍患者5例,男4例,女1例;年龄17~34岁。方法:对5例患者进行前路彻底减压,取髂骨或/和肋骨行椎间植骨,应用史塞克胸腰椎前路钢板内固定系统进行复位、内固定。于术后1,3,5,9个月拍X射线片,观察植骨融合情况、椎管狭窄面积及后凸角改善效果;随访时采用Frankel分级评定脊髓功能(A级为差,E级为优)。主要观察指标:①手术前后脊髓功能Frankel分级。②后凸成角情况及椎管狭窄面积。结果:5例患者均进入结果分析。随访时间8个月。①椎间植骨全部完全融合,融合时间平均4个月。②Frankel分级除1例患者达2级以上改善外,其余患者均获得行走功能,Frankel分级达E级。③椎管狭窄面积术前平均为68.9%,术后椎管无狭窄。④术前脊柱后凸成角15°~30°,术后为0°~6°,术后脊柱后凸角较术前明显改善。结论:经前路减压直接彻底,为脊髓神经功能的恢复提供了良好环境。史塞克胸腰椎前路钢板内固定系统治疗胸腰椎爆裂型骨折并截瘫患者可以有效地恢复脊柱生理弯曲,且操作简单,固定牢固,具有内固定材料的生物学特征。
  • 创伤性颈椎间盘突出症患者临床表现与MRI影像学的变化 免费阅读 收费下载
  • 背景:磁共振成像已被公认为是诊断颈椎间盘突出症的重要手段。目的:探讨创伤性颈椎间盘突出症的临床表现与MRI影像学变化的相互关系。设计:回顾性分析。单位:解放军第三军医大学新桥医院骨科。对象:选择1982-06/2002-06第三军医大学新桥医院骨科收治外伤性颈椎间盘突出症患者123例。临床表现为4种不同类型:①呈四肢对称性不全瘫,肌力一二级58例,其中14例呈四肢运动性丧失而触觉存在或损害轻微。②中央管综合症34例。表现为双上肢肌力显著减退或丧失,肌力0.2级。③半脊髓综合征27例。表现为一侧上下肢肌力及触觉明显减退。④表现为一侧上肢剧痛,运动损害轻微,对侧下肢痛觉减退,但肌力良好4例。方法:对创伤性颈椎间盘突出症患者123例进行MRI检查。主要观察指标:123例患者的临床表现与MRI影像学结果的关系。结果:123例患者临床表现和MRI影像学资料进入结果分析。①MRI分为横型突出58例,临床表现呈四肢对称性不全瘫痪。②MBI呈中央型突出34例,临床表现呈中央管综合征,双上肢肌力显著减退或丧失。③MRI呈旁侧型27例,临床表现呈不典型性半脊髓综合征。④MRI呈边缘型4例,临床表现为一侧神经根性痛,对侧痛温觉障碍。结论:MRI分型说明了确定的椎间盘突出的节段、位置及形状,其产生的4种不同的临床表现说明了该解剖位置支配相应神经所产生功能障碍的一致性。
  • 两种不同干预方式影响腰椎间盘摘除患者腰椎功能恢复比较 免费阅读 收费下载
  • 背景:经皮激光椎间盘减压术和经皮自动腰椎间盘摘除术是近年来应用较多的腰椎间盘突出症的治疗方法。目的:对比经皮激光椎间盘减压术和经皮自动腰椎间盘摘除术后患者症状和体征的改善情况。并分析两种术式的特征。设计:同期非随机对照观察。单位:解放军第四七四医院。对象:选择解放军第四七四医院有不同程度腰腿痛病的住院患者106例作为观察对象,按照不同干预措施分为经皮自动腰椎间盘摘除术组(n=46)和经皮激光椎间盘减压术组(n=60)。干预措施:①经皮自动腰椎间盘摘除术组:逐级插入扩张管留置4.8mm工作套管,用环锯在纤维环上“开窗”,髓核钳夹取髓核约1~5g;电动切吸器吸取髓核0.5~1.5g。术毕拔出电动切吸器和工作套管。②经皮激光椎间盘减压术组:拔出针芯,插入光导纤维,其前端5mm裸露段正好超出针尖。用15W激光烧灼,每持续1s,间隔4s,调整激光总输出功率1200~1700J。术后患者仰卧,检查疼痛缓解情况和功能恢复情况。根据改良的Macnab标准进行疗效评估,结果用百分率表示。主要观察指标:①治疗后两组患者功能恢复情况。②术式及其不良反应比较。结果:①经皮自动腰椎间盘摘除术组术后恢复情况:优22例(47.8%)、良18例(39.1%)、可5例(10.9%)、差1例(2.2%),优良率86.9%。②经皮激光椎间盘减压术组术后恢复情况优29例(48.4%)、良20例(33.3%)、可9例(15.0%)、差2例(3.3%),优良率81.7%。③两组优良率比较:无明显差别(X^2=0.704,P>0.05)。④不良反应:两组患者术后下肢疼痛均缓解,腰部酸痛持续数天后逐渐缓解、消失。经皮自动腰椎间盘摘除术组出现1例椎间盘感染,经皮激光椎间盘减压术组无并发症发生。结论:经皮自动腰椎间盘摘除术和经皮激光椎间盘减压术两种方法治疗腰椎间盘突出症,术后两组优良程度无明显差别。但两种干预方式比较,经皮自动腰椎间盘摘除术操作简便,损伤小,不易出现并发症。
  • 全膝关节表面置换术后不同持续被动活动方式对膝关节功能康复的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:全膝置换术后需要有计划康复治疗,其目的是恢复关节活动度和肌力。膝关节持续被动活动仪早期使用,可以减轻疼痛,防止术后粘连,缩短术后恢复时间,增强康复信心,对膝关节活动度恢复非常重要。
  • 老年口腔癌患者疼痛的护理评估和干预 免费阅读 免费下载
  • 背景:老年患者的痛觉减退或异位,对疼痛不能作出准确的描述。如何准确地评估老年口腔癌患者的疼痛,为临床护理提供科学的证据资源,是口腔护理工作者关注的问题。
  • 腰椎内固定术后便秘的相关因素 免费阅读 免费下载
  • 背景:腰椎内固定术后便秘的发生给患者带来很大痛苦。分析其相关因素,或许会对改善便秘有所帮助。
  • 乳腺癌根治术患者围手术期的系统性程序化干预措施 免费阅读 收费下载
  • 目的针对乳腺癌患者术后上肢功能受限问题,探讨其围手术期康复护理。方法河南大学准河医院肿瘤外科2000-01/2003-12收治行乳腺癌根治手术患者126例。均指导进行系统性程序化功能锻炼并评价效果。结果126例患者中,114例术后1个月患肢功能恢复良好,无关节强直、肌肉萎缩、肢体肿胀,占90.5%(114/126);116例患者皮瓣生长良好,占92.1%(116/126)。结论持续有效的康复训练,是促进乳腺癌患者术后功能恢复的有效手段之一。
  • 椎弓根螺钉系统治疗对胸腰椎骨折患者神经功能恢复的作用 免费阅读 免费下载
  • 背景:脊柱是一个三维空间的生物力学环境,脊柱骨折脱位治疗的主要目的在于恢复生理曲度,重建脊柱的稳定性。根据Denis的三柱理论,脊柱的稳定性主要取决于中柱胸腰椎爆裂型骨折是在轴向多能量冲击载荷作用下发生的椎体四方爆裂。脊柱前、中、后三柱破坏,失去原有的三维空间的生理形态.必须在具备三维空间的多重矫正力作用下,才能使被破坏的结构恢复到原有的形态,20世纪90年代椎弓根内固定系统的出现,使脊柱骨折后达到三维空间的复位、固定成为可能。通过后路经椎弓根进入前方椎体的螺钉连通了脊柱的三柱,而椎弓根是椎骨强度最大的部分(力核)。椎弓根内固定系统的作用原理正是通过此力核达到三维固定的目的。
  • 伸直型膝关节僵直的功能重建 免费阅读 收费下载
  • 目的观察采用改良式膝关节粘连松解术辅以术后早期功能锻炼对伸直型膝关节僵直功能重建的作用。方法选取1995-1/2003-12池州市中医院骨科膝关节僵直患者18例,术前膝关节活动度为30°~70°,屈曲度10°~70°,平均22°。采用改良式膝关节松解术解除膝关节僵直,术后行早期功能锻炼,术后第2天开始,每日松开石膏板数次,行被动膝关节伸屈活动数次,同时每周更换不同屈曲角度石膏板,第1周固定膝关节屈曲位1000~110°,第2周80~900,第3周60~70°,3周后除去石膏夹板,鼓励患者坚持锻炼,随访2年。疗效按iudet标准:关节活动度>100°为优,80°~100°为良,50°~80°为可,<50°为差进行疗效评估。结果所有患者均完成手术及早期功能训练,并获2年随访,随访率100%。根据judet的疗效评定标准:优15例,良2例,可1例,优良率94%。术后膝关节屈曲改善50~100°,平均60°。结论改良式膝关节松解术配合术后功能锻炼可以有效改善僵直膝关节的活动能力,重建膝关节功能。
  • 肘关节屈曲康复器的设计及应用 免费阅读 免费下载
  • 介绍一种肘关节屈曲功能障碍的新型治疗设备,可长时间将肘关节固定在治疗所需要的屈曲角度,减小治疗后的弹性回缩,以获得最大的治疗效果。同时阐述其作用机制,使用方法及使用注意问题。
  • 高乌甲素芬太尼复合液静脉镇痛用于晚期癌痛 免费阅读 免费下载
  • 背景:高乌甲素是从毛莨科植物高乌头中提取的总碱,为非成瘾性镇痛药,芬太尼是强效阿片类镇痛药物,高乌甲素复合芬太尼应用能否减少芬太尼用量,降低副作用,提高镇痛安全性。
  • 重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的制备及其在齿槽外科的应用 免费阅读 收费下载
  • 目的观察重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵对牙科创面止血及伤口修复愈合的影响。方法实验于2003-01/2004-03在暨南大学医学院附属广州市红十字会医院创伤研究所和口腔科完成。首先用Ⅰ型胶原蛋白、碱性成纤维细胞生长因子与壳聚糖配制成混合物,冷冻干燥成复合胶原海绵备用。收治60例错he畸型患者需行牙齿对称减数进行正畸治疗。共计对称拔除双尖牙212颗、磨牙14颗。左侧为实验组牙槽窝置入复合胶原海绵,右侧为对照组置入医用明胶海绵。记录拔牙创面止血时间,观察术后2,7d拔牙面创愈合情况。结果60例236颗牙拔除后的止血时间,实验组(45.9±12.8)s,对照组(89.0±16.4)s。实验组2d拔牙创面愈合78例(66%)、7d拔牙创面愈合117例(98%);对照组2d拔牙创面愈合25例(2l%)、7d拔牙创面愈合95例(79%)。实验组创面愈合均好于对照组。结论重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的止血效果和促进创面愈合作用明显优于明胶海绵。
  • 髋关节置换术及传统方法治疗骨质疏松性髋部骨折术后2年疗效随访比较 免费阅读 免费下载
  • 目的比较髋关节置换术与传统方法治疗骨质疏松性髋部骨折的疗效。方法选择1993-01/2002-12佛山市顺德区桂洲医院骨科收治新鲜髋部骨折患者167例,随机分为3组,髋关节置换术治疗组(n=53),内固定术治疗组(n=46),牵引治疗组(n=68)。根据病情按照选定的治疗方案进行髋关节置换术、内固定术治疗和牵引治疗。自患者受伤入院起.对其手术及术后功能恢复情况进行跟踪随访。疗效评估采用Merle d’Aubigne髋关节功能评价标准,从疼痛、运动幅度、步行3个方面18项内容按照0~6分进行评估,三项相加17~18分为优;13~16分为良;9~12分为中;8分以下为差。随访2年,对住院时间、并发症、扶拐下地时间、功能恢复情况及1年内死亡率进行评估。计量资料用,检验而计数资料采用F检验。结果术后随访2年,151例患者获得随访,随访率90.4%。①平均住院时间:牵引治疗组明显高于髋关节置换术治疗组和内固定术治疗组(74,23,20d,F=8.71,P<0.05)。②扶双拐下地行走时间:髋关节置换术治疗组和内固定术治疗组为7~12d和90d;牵引治疗为90d。③功能恢复评估:髋关节置换术治疗组优良占89%(47/53);中占6%(3/53);差占6%(3/53);内固定术治疗组优良占74%(34/46);中占4%(2/46);差占22%(10/46);牵引治疗组优良占53%(36/68);中占18%(12/68);差占29%(20/68)。结论髋关节置换术治疗骨质疏松性髋部骨折可缩短治疗时间,提早扶双拐下地行走时间,降低并发症,避免髋部骨折不愈合及股骨头坏死,提高患者生活质量。
  • 微创治疗及术后主动髋操锻炼改善青少年早期股骨头坏死患者术后疼痛及髋关节功能 免费阅读 免费下载
  • 目的观察青少年早期股骨头骨坏死外科微创介入治疗效果。方法西安交通大学第一医院骨科1995-09/2003-11收治30例青少年股骨头无菌性坏死患者。应用外科微创治疗技术,对早期青少年股骨头骨坏死患者通过介入方法拟行髋关节周围血管扩张术。结果患者治疗后疼痛缓解25例(83%,25/30),减轻3例(10%,3/30),无效2例(7%,2/30)。结论外科微创介入治疗方法对早期青少年股骨头坏死有解除疼痛的作用。并能延缓病灶发展,减少患者髋关节功能致残率。
  • 坚固内固定对颌骨骨折术后张口度改善评估 免费阅读 免费下载
  • 目的观察应用钛板作骨内坚固术后骨折愈合及康复情况。方法收集北京大学口腔医院2004-06/12收治的颌骨骨折钛板坚固内固定患者26例,男21例,女5例,进行钛板坚固内固定治疗,并对术后功能恢复情况进行分析。结果26例患者中除1例咬合关系不良外,其余均Ⅰ期愈合,对牙周及颞颌关节影响小,不限制开口,功能恢复快。结论坚固内固定治疗颌面部骨折,可以早期恢复张口度及咀嚼功能,治疗期间对语言、进食及呼吸功能影响较小,口腔卫生状况也得以改善,固定效果准确可靠。
  • 中药离子导入并中医伤科手法治疗膝关节滑膜炎146例 免费阅读 免费下载
  • 目的观察中药离子导入结合手法推拿对膝关节滑膜炎治疗前后膝关节功能评分的影响。方法选择上海第二医科大学附属第九人民医院中医科门诊于2002-03/2004-04收治的膝关节滑膜炎患者146例,男34例,女112例,排除其他膝关节病患者。将生川乌、生草乌、延胡索和当归等具有活血化淤、祛风化湿、消肿止痛的中药水煎后,用纱布袋浸透药汁,湿热敷于患者膝关节处,通过离子导入治疗仪作离子导入;并应用中医伤科手法中的揉法、按法、点法、拿法和摇法施于患处。配合不负重的膝关节自主运动。参照日本学者提出的膝关节损伤的评定方法进行膝关节功能评定:>90分为优良;小于50分为差。结果进入结果分析146例。患者治疗前总平均分为71.20分,治疗后总平均分为83.84分,比治疗前提高12.64分。结论中药离子导入配合中医伤科手法治疗后患者膝关节功能评分明显提高。
  • 烧伤后会阴部瘢痕挛缩畸形的整形治疗 免费阅读 免费下载
  • 目的探讨烧伤后会阴部瘢痕的修复与康复方法。方法解放军白求恩国际和平医院烧伤整形科1989-10/2004-10住院治疗的烧伤患者60例。术前强调肠道清洁和局部瘢痕清洗;术中根据瘢痕挛缩畸形的具体情况,采用“Z”成形术或五瓣成形术加厚中厚皮片移植24例;局部皮瓣及大张厚中厚皮片移植18例,全厚皮片移植10例,单纯用局部皮瓣移植8例。术后注意保持创面的清洁干燥和进行及时有效的功能锻炼。结果60例患者均进入结果分析。①皮瓣及植皮均成活良好,局部畸形完全纠正,阴茎、阴囊、大阴唇恢复到正常位置,患者对治疗后效果满意。②治疗后两侧髋关节活动正常,皮肤质地柔软占87%(52/60)。外生殖器恢复正常位置,局部畸形基本纠正,两侧髋关节活动良好占10%(6/60)。局部仍有瘢痕牵拉,经Ⅱ期手术修复后外生殖器基本恢复正常位置,两侧髋关节活动良好占33%(2/60)。结论根据会阴部瘢痕挛缩畸形的特殊性,合理设计、选择手术方法,结合术后功能锻炼,能够获得满意的治疗效果。
  • 骶髂关节半脱位患者功能障碍及影像学变化的164例2年随访 免费阅读 免费下载
  • 目的观察骶髂关节半脱位的影像学特征和相应的诊断分型,并进行骶髂关节半脱位的功能障碍的分析。方法选择2001-10/2004-04武警总医院骨科诊治的急、慢性骶髂关节半脱位的患者164例。详细观察记录患者功能障碍及X射线特征。拍摄站立位骨盆正位X射线片以了解负重下骶髂关节的情况。急、慢性骶髂关节半脱位(骶骨位置正常)的X射线片特征观察:髂骨有4种基本的移位①髂骨向后下移位。②髂骨向前上移位。③髂骨内旋。④髂骨外旋。其他半脱位如髂骨外旋向后下移位,髂骨内旋向后下移位,髂骨外旋向前上移位,髂骨内旋向前上移位,一侧髂骨外旋,另一侧内旋等为基本脱位的叠加。结果所有患者均获X射线片及2年随访,全部进入结果分析。①功能障碍情况:主要症状为下腰部疼痛,即髂后上嵴周围的疼痛,站立或坐位时疼痛加重,床上翻身困难。体征主要为单侧或双侧髂后上嵴周围轻度肿胀,压痛明显,骨盆床边或“4”实验(+),站立位触诊可见双侧髂后上嵴不等高。②X射线片与临床分型结果:髂骨向后下移位47例;髂骨向前上移位11例;髂骨向外移位14例;髂骨向内移位6例;髂骨向后下、向外移位41例;髂骨向前上、向内移位13例;髂骨向后下、向内移位16例;髂骨向前上、向外移位3例;一侧髂骨向外,另一侧向内13例。结论临床急、慢性下腰痛患者,需根据病史、症状、体征及骨盆正位片来检查是否有骶髂关节的半脱位,如诊断为骶髂关节半脱位,需进一步明确诊断分型,按照分型采取有针对性的矫正,能有效的减轻疼痛,提高功能,有临床推广应用的价值。
  • 兔骨髓基质细胞体外培养的操作技术特征 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨原代细胞取材、分离方法及首次换液时间对体外培养兔骨髓基质细胞生长、增殖的影响。方法:实验于2004-01/06在山东中医药大学细胞学实验室完成。选择普通级4周龄雌性新西兰大白兔1只,抽取其两侧股骨大转子部骨髓液2mL,加入到盛有等体积Ficoll淋巴细胞分离液的离心管中分离单个核细胞,进行首次提纯获取骨髓基质单细胞,置培养箱中培养传代,逐日在倒置显微镜下观察细胞生长情况。培养5d后,轻轻振荡培养瓶,吸除培养液,以后每两三天换液1次。继续传代。观察、记录、绘制细胞生长曲线并测定细胞群体贴壁及融合单层时间,观察细胞形态变化和生长增殖情况。在操作方法中注重了以下3点:①原代细胞培养取材于4~8周龄的新西兰大白兔。②分离方法采用Ficoll淋巴细胞分离液分离单个核细胞进行初次提纯获取骨髓基质细胞,消化时间不宜超过5min。在分离、纯化操作减少离心次数和时间,减少吹打和抽吸的次数,以避免对细胞的机械性损伤。③首次换液时间:选择在原代细胞接种后5d行初次换液比较合适。结果:①兔骨髓基质细胞体外培养生长增殖及形态变化:原代培养细胞接种后见大量悬浮呈圆形的细胞,轮廓清晰。24~36h后开始贴壁,呈不规则形态或呈类圆形或椭圆形。48~72h时呈集落生长,显示为短梭形或星形。4d时每个细胞集落中心部位细胞轮廓不清,体积较小,周边细胞呈细梭形,向周围呈辐射状排列。6d时贴壁细胞呈长梭形外观,部分区域融合成片。13~16d细胞融合单层,呈典型细长梭形外观,成集束状排列。传代细胞形态一周左右融合成单层。②第1代细胞生长曲线:从传代后第1天细胞数量开始增加,第4天增加幅度最大,至第6天细胞数量最大。以后数量略有下降。说明其潜伏期<24h,传代培养对数增殖期为2~5d,对数增殖期结束后,第6天细胞生长缓慢,进入平台期。由此可以得出细胞群体倍增时间约为24h。③第1代细胞贴壁率:传代细胞接种2h已有部分细胞贴壁,12h细胞基本贴壁完全,14h已有部分细胞开始增殖。传代细胞接种存活率为98%。④兔骨髓基质细胞镜下形态观察:苏木精一伊红染色可见骨髓基质细胞呈梭形、多角形等,有的有多个树状突起。胞浆呈细网状,淡红色略带蓝色。并见较多胞浆颗粒。细胞核清晰、深蓝色,位于中央,中间可见深染的数个点状染色质,可见分裂相。结论:取材于4~8周龄的新西兰大白兔的骨髓基质细胞采用密度梯度离心法培养传代,以原代细胞接种后5d行初次换液,在此体外培养条件模式下,兔骨髓基质细胞早期生长性状稳定,增殖速度快,适应性强,呈典型的成纤维细胞样外观,可连续观察10代以上仍具有以上特征,未出现明显衰老现象,适合用作骨组织工程学的种子细胞。
  • 体外培养的人骨髓间充质干细胞多能性特征:超微结构和细胞化学代谢分析 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨体外培养的人骨髓间充质干细胞多能性的超微结构和细胞化学代谢特征。方法:实验于2001-10/2003-03在吉林大学基础医学院病理生物学教育部重点实验室完成。标本来源于吉林省人民医院胸外科采集的穿刺骨髓血和胸外科手术切弃的肋骨,男7例,女3例,年龄>40岁5例,≤40岁5例(患者知情同意)。采用Percoll密度分离与贴壁筛选结合法,从人骨髓血中分离纯化人骨髓间充质干细胞,通过流式细胞分析、细胞化学检测和透射电镜观察对其多能性和超微结构及细胞化学变化。结果:①流式细胞分析显示,采用聚乙烯吡咯酮包被的二氧化硅壳粒的无菌胶体悬液分离剂与贴壁筛选法能获得高度同源的细胞群;原代人骨髓间充质干细胞的增殖生长速度与年龄因素无关。②阿利辛兰-过碘酸雪夫染色,苏丹黑-B和碱性磷酸酶染色均证明人骨髓间充质干细胞具有特殊的代谢特点,含有大量无酸性粘多糖,无自发分化现象.并维持未分化状态。③超微结构显示人骨髓间充质干细胞表面有许多微绒毛,含有丰富的细胞器和糖原形成糖原池。结论:原代人骨髓间充质干细胞增殖生长速度不受年龄因素影响.提示利用自体人骨髓间充质干细胞移植治疗疾病成为可能。该细胞群在体外能很好地维持未分化增殖状态,提示其具有多向分化潜能。
  • 体外培养兔骨髓基质干细胞复合β-磷酸三钙的肌内成骨能力观察 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察体外成骨诱导培养液条件下骨髓基质干细胞与细胞支架β-磷酸三钙体外复合培养后的成骨活性,以验证兔骨髓基质干细胞在体外向成骨细胞转化的能力,并进行对照比较。方法:实验于2003-10/2004-02在解放军第二军医大学长征医院骨科实验室完成。取健康成年新西兰大白兔7只,将抽取的骨髓置于加入地塞米松、β-甘油磷酸钠及维生素C的DMEM标准培养液中培养。对获得的兔骨髓基质干细胞以倒置显微镜、透射电镜、碱性磷酸酶染色、Ⅰ型胶原免疫组化染色等手段进行生长状态观察及生物学特性鉴定。然后将骨髓基质干细胞与β-磷酸三钙体外复合培养1周后自体回植兔肌肉内,分别在4周和8周后取材,观察其成骨能力以组织学方法检测,并与未复合的β-磷酸三钙的细胞做自身对照比较。结果:实验选取的7只兔全部进入结果分析。①细胞的生长状况及形态特征:细胞全骨髓法培养24~48h,细胞开始贴壁,呈短梭形,贴壁细胞呈成纤维细胞集落方式生长。细胞培养5~7d,细胞集落生长逐渐密集,细胞体积逐渐增大,向长梭形转变,部分细胞呈多角形。②细胞生长曲线:传至第3代细胞,1~3d细胞增殖缓慢,为潜伏期,3~5d后细胞大量扩增,6d后细胞达到顶点进入平台期。第1,2,4代细胞的生长曲线基本与第3代相似。③细胞贴壁率:各代细胞的贴壁率未见明显差异,一般2h开始贴壁,2~8h前贴壁率增加较快,8~14h贴壁率达80%~90%。④细胞分裂指数:细胞早期分裂较慢,培养5~8d分裂指数最高,可达10%~15%。表现为胞核增大,双核增多。1~4代核分裂率基本相似。⑤细胞超微结构观察。结果:培养至第2代.骨髓基质干细胞透射电镜下细胞内开始出现大量胶原。⑥血清碱性磷酸酶检测结果:骨髓基质干细胞染色后,血清碱性磷酸酶显示红棕色沉淀,细胞密集区颜色较深。第3代细胞血清碱性磷酸酶染色阳性率可达85%以上。⑦细胞免疫组化Ⅰ型胶原检测结果:各代细胞Ⅰ型胶原免疫组化染色均为阳性.胞浆呈红棕色。⑧肌内成骨活性观察:骨髓基质干细胞/β-磷酸三钙复合物植入体内4周,可见新生骨样基质。8周后新生骨量明显增多,可见典型的骨组织结构。而未复合细胞的人工骨孔隙内仅见大量纤维结缔组织,体内培养4周及10周时均未见骨组织形成。结论:体外培养条件下,骨髓基质干细胞在条件培养液中具有与成骨细胞相似的形态特征、生长特点和功能性表现,短期内可以获得大量具有成骨能力的细胞。复合β-磷酸三钙载体后,出现异位成骨现象,为临床骨组织工程技术的研究提供了理论依据和参数。
  • 骨髓间质干细胞移植对骨桥蛋白表达水平和血管钙化发生的干预作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:研究骨髓间质干细胞对于大鼠血管尤其是大血管钙化的修复作用。方法:实验于2004-01-15/30在武警部队心血管疾病研究所完成。选用8周龄健康Wistar鼠32只。采用尼古丁与维生素D3制作大鼠血管钙化模型,造模后随机将模型组动物分为骨髓间质干细胞干预组(n=12)及单纯造模组(n=12);空白对照组(n=8)采用生理盐水灌胃并注射。14d后处死动物检测不同组别动物组织钙含量、组织中钙容积分数及参与动脉壁钙化的骨桥蛋白的表达水平。结果:最终进入结果分析大鼠32只。①单纯造模组和骨髓间质干细胞干预组大鼠主动脉组织钙含量明显高于空白对照组[(29.90±1.85),(13.80±1.28),(2.61±0.45)mg/g,F=644.996,P<0.01]。②骨髓间质细胞干预组大鼠动脉钙含量明显低于单纯造模组(q=9.361,P<0.01)。组织中钙容积分数明显低于单纯造模组。③单纯造模组动脉壁中可见大量黑色大颗粒物质的沉积.而骨髓间质干细胞干预组的动物切片染色后在动脉内膜部分可见散在的黑色颗粒状物质,并没有聚集成片。④空白对照组骨桥蛋白基本不表达,单纯造模组动物主动脉中骨桥蛋白表达明显增加,骨髓间质干细胞干预组骨桥蛋白虽有表达,但水平明显低于单纯造模组,介于对照组与单纯造模组之间,采用光密度扫描分析同样证实此结果。结论:骨髓间质干细胞移植治疗可以改变血管中钙含量,降低大鼠血管壁中骨桥蛋白表达水平,减少钙在血管组织局部的沉积,从而有效地防止血管钙化的发生。
  • 经冠状动脉移植自体骨髓基质干细胞改善成年心肌梗死犬的心功能 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察经冠状动脉注射成年犬自体骨髓基质干细胞对梗死后心功能的影响。方法:本实验于2001-05/2002-04在解放军第二军医大学附属长征医院心内科实验室完成。选用成年犬8只,随机分为细胞移植组5只,对照组3只。结扎犬冠状动脉前降支制备心肌梗死模型;细胞移植组将体外培养、诱导的自体骨髓基质干细胞标记后在心肌梗死后4周经冠状动脉植入心脏;对照组植入等量培养基。胸内心脏超声检查测定左冠状动脉血流阻断前,再灌注后30min及移植后4周左心室射血分数;胸外心脏超声检查测定左冠状动脉血流阻断前、移植前、移植后4周左心室射血分数。用成组£检验和随机区组方差分析完成统计学分析。结果:进入结果分析犬8只。①植入的骨髓基质干细胞在移植犬心肌组织内存活情况:细胞移植组免疫组织化学检查结蛋白及肌钙蛋白Ⅰ染色阳性,表示已生成心肌样细胞。对照组心脏标本中可见瘢痕组织;心肌细胞结蛋白染色阴性,肌钙蛋白Ⅰ染色阳性。②移植犬左室功能的左室射血分数:经胸外心脏彩色多普勒超声检查提示,细胞移植组细胞移植前明显低于血流阻断前和移植后4周[(54.86±7.12)%,(61.78±5.37)%,(61.74±2.93)%,P<0.01];细胞移植组细胞移植后4周接近血流阻断前(P>0.05);对照组移植后4周和移植前明显低于血流阻断前(P<0.01)。③移植犬左室功能的左室射血分数:经胸内心脏彩色多普勒超声检查反映,细胞移植组再灌注后30min明显低于血流阻断前和移植后4周[(49.98±6.79)%;(61.56±3.71)%,(64.56±5.27)%,P<0.01]。移植后4周明显高于血流阻断前(P<0.05)。对照组移植后4周和再灌注后30min明显低于血流阻断前(P<0.05,0.01)。结论:成年心肌梗死犬自体骨髓基质干细胞经冠状动脉移植后,在心肌组织内存活并分化为肌源性细胞使左心室功能改善。
  • 骨髓间质干细胞抑制大鼠肝纤维化形成的可能性:受体肝内干细胞存活时间、肝星状细胞活化程度及生存分析的7周观察 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察在体外培养条件下,具有强大的增殖和分化为肝细胞能力的骨髓间质干细胞输注治疗肝纤维化模型大鼠对其肝纤维化形成的影响及肝功能和生存分析,并对治疗组、空白对照组和病理对照组7周内的相关情况予以对照比较。方法:实验于2003-08/2004-10在中山大学基础医学院病理学于病理生理实验室完成。①动物分组:选用雄性6周龄Wistar大鼠5只为供体,供分离骨髓间质干细胞;雌性6周龄Wistar大鼠60只,其中50只被造成肝纤维化模型,在首次用二甲基亚硝胺处理后的第10天,将造模大鼠随机分为2组:骨髓间质干细胞治疗组10只(为受体),于治疗39d后结束实验,取材分析病理对照组40只。另10只作为空白对照组(仅静脉注射生理盐水)。②肝纤维化模型制作:在实验的当天,给予10g/L二甲基亚硝胺溶液(生理盐水配置)1mL/kg,腹腔注射,每周连续3次,共6周。③骨髓间质干细胞治疗组:每只大鼠输注3×106个骨髓间质干细胞;病理对照组:使用等体积生理盐水代替骨髓间质干细胞。④动物的一般生活状态:每天观察饮食、活动、二便、体质量、皮毛、呼吸情况等。⑤肝脏的组织细胞形态结构:将肝组织以苏木精-伊红染色后观察。⑥肝星形细胞及其活化程度检测:前者检测肝脏α-平滑肌肌动蛋白含量,用免疫组织化学染色法,后者以德国IBAS2.5图像分析软件半定量分析。⑦肝脏胶原分布的相对含量检测:采用Masson三色染色法,从而反映肝纤维化程度。⑧肝脏羟脯氨酸含量测定:采用氯胺T法。⑨血清总胆红素和谷丙转氨酶水平检测:采用全自动生化分析仪。⑩血清层粘蛋白和透明质酸水平测定:采用放射免疫法。(11)雄性大鼠骨髓间质干细胞在雌性大鼠肝内的Y染色体性别决定区基因的表达检测:采用聚合酶链式反应。(12)统计学分析:两组样本均数比较采用t检验;多组样本均数比较采用方差分析,两两比较采用q检验;生存分析采用Kaplan-Meier法。结果:雌性大鼠60只进入结果分析。①实验动物生存状况:造模6周后,骨髓间质于细胞治疗组生存率为80%,而病理对照组生存率为10%,空白对照组生存率为100%,说明骨髓间质干细胞治疗可能通过阻止肝纤维化发展,从改而善大鼠的生存率。②肝脏组织学显示,骨髓间质干细胞治疗组的肝脏结构明显改善,炎症减轻、假小叶结构减少或消散。相反,病理对照组出现广泛的肝脏结构重塑,包括增厚的纤维间隔形成和明显的桥接坏死。半定量分析胶原染色,骨髓间质干细胞治疗组较病理对照组显著减低(8.12±1.98.15.71±2.13,t=6.11,P<0.05)。③肝脏星状细胞活化的标志α-平滑肌激动蛋白的阳性表达:空白对照组仅见血管壁有少量α-平滑肌激动蛋白的阳性表达,而病理对照组和骨髓间质干细胞治疗组可见在纤维间隔、肝窦和汇管区内明显表达。半定量分析α-平滑肌激动蛋白的阳性染色,骨髓间质干细胞治疗组较病理对照组显著减低(11.06±2.03,18.50±3.87,t=4.47,P<0.05)。④Y染色体性别决定区基因的表达:经雄性Wistar大鼠(供体)骨髓间质干细胞治疗39d的雌性大鼠,肝脏DNA经聚合酶链式反应检测结果显示,Y染色体性别决定区基因的表达阳性,而空白对照组和病理对照组则无此阳性信号。说明骨髓间质干细胞移植后,能够在受体肝内存活5周以上。⑤反映肝脏纤维化程度的肝脏羟脯氨酸含量及血清层黏蛋白和透明质酸水平:骨髓间质干细胞治疗组明显高于空白对照组(P<0.05)但明显低于病理对照组(P<0.05),说明骨髓间质干细胞治疗后能够减少肝脏胶原蛋白的含量,从而减少肝纤维化的形成,使肝纤维化得到控制。⑥反映肝功能的血清总胆红素、谷丙转氨酶水平:骨髓间质干细胞治疗组明显低于病理对照组(P<0.05),接近空白对照组。说明了骨髓间质干细胞治疗有助于改善肝功能状态。结论:①二甲基亚硝胺能成功诱导大鼠肝纤维化模型的建立。②骨髓间质干细胞可改善肝纤维化大鼠的生存状况和肝功能。③骨髓间质干细胞能够减少肝脏胶原蛋白的产生,抑制肝纤维化形成。④肝纤维化发生发展过程中活化态的肝星状细胞数量减少可能是骨髓间质干细胞抑制肝纤维化形成的原因之一。⑤雌性大鼠肝脏内存在雄性供体Y染色体性别决定区基因的信号说明骨髓间质干细胞能够在受体肝内存活5周以上。
  • 经Nurr1基因转染的骨髓间充质干细胞移植对帕金森病大鼠旋转行为及纹状体多种神经因子的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察对中脑腹侧多巴胺能神经元分化、成熟及存活起重要作用的Nurr1基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞脑内移植后,对帕金森病大鼠旋转行为及纹状体多巴胺、二羟苯乙酸及高香草酸含量比值的影响。方法:实验于2003-08/2004-12在中山大学附属第一医院神经病学国家重点实验室进行。取SD雄性大鼠,右侧中脑黑质致密区注入6-羟基多巴(2g/L)3μL制备帕金森病模型,4周后将69只成功帕金森病模型随机分为3组:①对照组24只:右侧纹状体尾状核头部注入生理盐水4.5μL。②骨髓间充质干细胞组24只:相同部位注入培养纯化的骨髓间充质干细胞4.5μL。③转Nurr1基因骨髓间充质干细胞组21只:用脂质体转染法转染PcDNA3.1(+)-Nurr1入大鼠骨髓间充质干细胞并稳定表达,然后移植入模型大鼠脑内,部位和剂量与其他两组相同。观察各组大鼠旋转行为学变化,并用免疫组化、反转录-聚合酶链反应等方法检测移植细胞的Nurr1,DAT和酪氨酸羟化酶表达;利用高效液相色谱检测大鼠脑内多巴胺、二羟苯乙酸和高香草酸含量。结果:59只大鼠进入结果分析。①旋转行为学变化:与对照组相比,移植前1周无明显差异(P>0.05),移植后2~8周,另2组大鼠旋转行为明显改善(P<0.05);转Nurr1基因骨髓间充质干细胞组在移植后2~4周较骨髓间充质干细胞组轻(P<0.05),但至8周时两组无差异(P>0.05),②Norr1及DAT和酪氨酸羟化酶阳性表达:免疫组化结果显示转Nurr1基因骨髓间充质干细胞组移植区能够稳定表达Nurr1且少量细胞表达DAT,但未发现酪氨酸羟化酶阳性细胞,其他两组移植区未发现阳性细胞。③Nurr1及DAT和酪氨酸羟化酶mRNA表达:移植后2~8周,聚合酶链反应产物经电泳、3组大鼠术侧纹状体染色后均可见1030bp片段(DAT),241bp片段(Nurr1),438bp片段(β-actin),但未发现酪氨酸羟化酶条带(647bp)。④脑内纹状体多巴胺、二羟苯乙酸、高香草酸术侧与健侧比值:移植后2,8周,两治疗组均较对照组增高(P<0.05),但8周时两治疗组比较无差异(P>0.05)。结论:转Nurr1基因大鼠骨髓间充质干细胞在帕金森病大鼠模型纹状体内可以存活(8周以上),在该环境中Nurr1基因的过表达可以促进大鼠骨髓间充质干细胞的DAT基因表达,能显著改善帕金森病大鼠的旋转行为,并在一定时期内维持纹状体内相对较高的多巴胺、二羟苯乙酸、高香草酸水平。
  • 自体外周血单个核细胞移植及其在动员剂参与下对坏死心肌的修复作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:外周血干细胞趋向成熟细胞,分化为其他细胞的潜能较小,需在动员剂参与下移植发挥其于细胞分化作用。观察将自体外周血单个核细胞作为移植细胞,在动员剂参与下的成心肌样细胞形成和促进微血管生成的作用。方法:实验于2003-04/2004-03在哈尔滨医科大学附属二院动物实验中心和病理科完成。选用60只日本大耳白兔,随机分成3组,移植组和动员剂组及对照组,每组20只。移植组和动员剂组结扎冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,而后连续给予粒细胞集落刺激因子7d,移植组在模型建立后1周,将5-溴-2′-脱氧脲苷标记的细胞悬液心外膜注射到心肌梗死及邻近区,动员剂和对照组只给予等量的生理盐水注射。以苏木精-伊红染色发现5-溴-2′-脱氧脲苷阳性细胞和肌动蛋白表达阳性(为移植后成活为心肌样细胞的标志)。以Masson和免疫组化染色检测移植的自体外周血单个核细胞存活及分化情况,评估移植后细胞成活的组织学变化.并测定含梗死区心肌的毛细血管密度。结果:按意向处理分析,进入结果分析的白兔60只,每组20只。①移植后4周,移植组免疫组化染色在梗死区可发现5-溴-2′-脱氧脲苷阳性细胞,且表达肌动蛋白阳性。②苏木精-伊红染色显示对照组梗死区结构紊乱,而动员剂和细胞移植组梗死区细胞排列有序,同时动员剂和细胞移植组可见大量的新生毛细血管,其密度明显高于对照组[(58.2±11.5),(523±6.0),(21.6±4.9)个/高倍视野,P<0.01)]。结论:在动员剂参与下,自体外周血单个核细胞移植后4周可以在梗死区检测到5-溴-2′-脱氧脲苷阳性细胞,且心肌特异性蛋白肌动蛋白表达阳性,在一定程度上证实了植入的细胞可存活并分化成心肌样细胞,同时促进了心肌局部的毛细血管生成。
  • 微载体悬浮培养体系对人脂肪基质干细胞增殖与分化的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察微载体悬浮培养系统对成人脂肪基质干细胞的培养效果及培养后细胞的分化能力。方法:实验于2004-09/12在军事医学科学院组织工程中心完成。悬浮培养系统采用Cytodex3微载体为贴壁依赖性细胞脂肪基质干细胞提供贴壁条件,浓度为5g/L。常规静止培养在12孔培养板中进行。两系统细胞接种密度均为1×10^8L^-1。分别观察细胞增殖情况,并对用悬浮培养体系培养的细胞进行细胞表型及分化能力检测。结果:微载体悬浮培养9d后达到最大活细胞密度(1.60×10^9L^-1),常规静止培养第7天就达到最大活细胞密度(3.38×10^8L^-1)。在微载体悬浮培养条件下,脂肪基质干细胞生长更为旺盛,细胞产量更高,优于常规静止培养。微载体悬浮培养11d后,脂肪基质干细胞依然保持多向分化能力。结论:利用悬浮培养体系系统以及微载体技术有利于脂肪基质干细胞的大规模快速生长,细胞扩增后仍然保持其细胞表型及分化能力。获得的脂肪基质干细胞可以作为组织工程种子细胞实验研究及其临床应用。
  • 自制血清替代物行无血清条件培养人表皮干细胞 免费阅读 收费下载
  • 目的:建立一种人表皮干细胞的无血清培养方法,并与目前表皮干细胞常用的有血清培养方法进行比较,探讨该条件是否更适合表皮干细胞的生长和有利于实施表皮干细胞的调控,提高实验的准确性。方法:实验于2002-05/2004-07在江西医学院第二附属医院医学分子中心完成。①从幼儿包皮中分离表皮细胞、用胶原Ⅳ分别黏附表皮细胞10~15min,收集黏附细胞,即为纯化的表皮干细胞。②分3组进行培养,3组培养条件均有无钙低糖Dulbecco改良的Eagle培养基,0.05mmol/LCaCl2,10μg/L表皮细胞生长因子,1×10^-6mol/L氢化可的松;有血清培养组还含有100g/L螯合钙的干细胞专用血清;无血清培养组1还含有100g/L无血清培养基血清替代物。无血清培养组2还含有100g/L无血清培养基血清替代物和50μg/L牛垂体提取物。③培养20d后。在倒置显微镜下对所培养细胞进行形态学观察;同时计数细胞数(大于100个细胞团为1个集落称克隆),计数各组克隆数;采用胰酶消化传代,计数传代数及多次传代后所得细胞总数;流式细胞术分析α6,CD71(人表皮干细胞表面标记)的表达情况,计算人表皮干细胞α6bri CD71dim细胞百分率;采用流式细胞术进行细胞周期分析处于静止期/DNA合成前期人表皮干细胞百分率,采用免疫组化法鉴定细胞角蛋白19及5/8(均表明人表皮干细胞生长情况,且以角蛋白19更能明确表明人表皮干细胞生成情况)和角蛋白10表达情况。结果:①人表皮干细胞细胞形态学观察结果:应用倒置显微镜下观察检测,无血清培养组1与有血清培养组人表皮干细胞细胞形态学基本相同,无血清培养组1集落形成时间稍晚于有血清培养组。②形成的克隆数及经胰酶消化可传代数、细胞总得数:胰酶消化传代后,形成的克隆数、细胞总得数及细胞传代数无血清培养组1与有血清培养组相近(P>0.05),两组形成的克隆数、细胞总得数明显低于无血清培养组2(P<0.05)而细胞传代数组明显高于无血清培养组2(P<0.05)。③细胞周期分析及α6,CD71鉴定结果:采用流式细胞术检测,有血清培养组与无血清培养组1中人表皮生长干细胞α6^briCD71^dim细胞百分率及处于静止期/DNA合成前期细胞(即人表皮干细胞)百分率相近(P>0.05),且均高于无血清培养组2(P<0.05)。④细胞角蛋白19和5/8及10表达情况:免疫细胞化学鉴定结果,有血清培养组与无血清培养组1角蛋白19和5/8及10阳性细胞百分率相近(P>0.05),而两组角蛋白19阳性细胞百分率明显高于无血清培养组2(P<0.05),角蛋白5/8和10阳性细胞百分率明显低于无血清培养组2(P<0.05)。结论:①利用自制的无血清培养基血清替代物.添加一些辅助因子(0.05mmol/L CaCl2,10μg/L表皮细胞生长因子,1×10^-6mol/L氢化可的松)能较好的培养表皮干细胞,传代次数多,培养时间长,形成克隆数较多,说明此类细胞具有较强的自我复制能力,结合所培养细胞中人表皮干细胞α6^briCD71^dim细胞及角蛋白19和5/8阳性细胞比例较高等特点,表明该无血清培养条件适合表皮干细胞的生长。②自制的无血清培养基血清替代物添加一些辅助因子(0.05mmol/LCaCl2,10μg/L表皮细胞生长因子,1×10^-6mol/L氢化可的松,50μg/L牛垂体提取物)的无血清培养组2能较快获得大量人表皮细胞,当组织工程需要大量细胞时可用此种培养扩增方法。
  • 大鼠牙髓干细胞的基本细胞学特征以及增殖和矿化能力:分化为牙本质样细胞的可能性 免费阅读 收费下载
  • 目的:实验观察大鼠牙髓干细胞的基本细胞学特征和增殖及矿化特性。方法:实验于2003-07/10在军事医学科学院组织工程研究中心实验室完成。采用光学显微镜观察大鼠牙髓干细胞生长变化。①细胞爬片固定后用苏木精-伊红染色观察细胞的基本形态,②采用四甲基偶氮唑盐法对大鼠牙髓干细胞和骨髓间充质干细胞的生长及增殖能力进行检测比较。③应用矿化液对大鼠牙髓干细胞进行诱导并采用Von Kossa染色的方法检测大鼠牙髓干细胞矿化能力。结果:①大鼠牙髓干细胞基本形态特征:为成纤维细胞样生长。细胞呈梭形,密集区细胞形态多样,可见多角形或椭圆形细胞密集排列。②细胞生长曲线及群体倍增时间:大鼠牙髓干细胞群体倍增时间为:58.3h;骨髓间充质干细胞的生长较牙髓干细胞旺盛,其群体倍增时间为:41.8h。③大鼠牙髓干细胞矿化能力:Von Kossa染色可见细胞密集区为黑褐色,呈结节状分布,表明有钙化结节形成。结论:大鼠牙髓干细胞形态正常,虽比骨髓间充质干细胞稍弱,但仍具有较强的增殖性能,还有一定的矿化能力,说明在一定条件下可向牙本质样细胞分化。
  • 低氧条件小鼠胎肝间质细胞血管内皮生长因子的表达:对侧支和新血管生成的促进作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察低氧培养条件下小鼠胎肝间质细胞中血管内皮生长因子的表达情况。方法:实验于2004-08/12在暨南大学医学院血液病研究所完成。取孕14.5d小鼠胚胎肝细胞进行贴壁培养及传代。生长至次融合状态的第5代细胞分别在体积分数0.95氮气和体积分数0.05二氧化碳混合气和常规条件下培养。在低氧和常氧培养后2,8,16,32h应用半定量反转录聚合酶链反应和蛋白质印迹技术检测其血管内皮生长因子基因mRNA和蛋白表达。结果:低氧培养2h时聚合酶链反应产物血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比明显高于常氧培养[(9.83±3.41)%,(5.47±2.78)%,F=12.33.P<0.01];低氧培养8h时血管内皮生长因子mRNA水平达到高峰,为常氧培养的6.17倍;16h后血管内皮生长因子mRNA表达水平开始下降;32h时血管内皮生长因子mRNA表达水平进一步下降,血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比明显高于常氧培养组[(18.95±6.23)%,F=22.76,P<0.01]。低氧培养4h时血管内皮生长因子蛋白已显著增加,血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比明显高于常氧培养组[(8.38±3.24)%,F=10.87,P<0.01];16h时达到高峰水平,β-肌动;32h时血管内皮生长因子水平显著下降,血管内皮生长因子与β-肌动蛋白信号比仍明显高于常氧培养组[(17.27±6.35)%,F=19.38,P<0.01]。结论:低氧可诱导血管内皮生长因子在小鼠胎肝间质细胞中表达,提示低氧预处理间质细胞在组织缺血损伤如心肌缺血等疾病可能产生治疗作用。
  • 预衬阿胶对涤纶人工血管种植内皮细胞增生特性的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:研究和评价以阿胶为预衬基质,对涤纶人工血管种植内皮细胞增生特性的改善。方法:实验于2003-02/2004-01在解放军第四六三医院中心实验室使用体外内皮细胞分离、种植、培养、^3H-胸腺嘧啶核苷掺入液体闪烁测量法等技术,研究阿胶作为预衬基质在涤纶人工血管对人脐带静脉内皮细胞增生特性的影响,从预衬基质对种植内皮细胞增生特性影响角度研究阿胶作为预衬基质的优劣。结果:预衬基质可改善涤纶人工血管对种植内皮细胞增生的抑制作用,与未预衬组比较,差异有非常显著性意义(t=14.03~383.73,P<0.01).其中阿胶组(11.06±0.28)×10^3min^-1与纤维结合素组(9.64±0.18)×10^3min^-1、明胶组(9.83±0.28)×10^3min^-1和白蛋白组(5.69±0.51)×10^3min^-1比较,差异有非常显著性意义(t=7.80~19.31.P<0.01).与血浆组(11.91±0.59)×10^3min^-1比较,差异无显著性意义(P>0.05)。结论:阿胶作为预衬基质,可明显的改善在涤纶人工血管种植人脐带静脉内皮细胞的增生特性。
  • 细胞移植过程中体细胞克隆提高卵母细胞去核率的最佳方法 免费阅读 收费下载
  • 目的:治疗性克隆应用于临床中需有效解决体细胞克隆及干细胞培养两大技术。观察注射人绒毛膜促性腺激素后不同时间体内成熟卵母细胞MⅡ期染色质与第一极体相对位置,确定以第一极体为标志,盲吸法去核时间和与染色质的位置关系,解决克隆过程中卵母细胞来源与去核率。方法:实验时间为2004-09/11,实验地点为哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室组织工程研究中心层流实验室。4~6周雌性昆明小鼠在明暗循环的环境饲养,做超数排卵处理。卵母细胞用含10mg/L Hoechest33342的M2液染色5min,在Olymopus荧光显微镜下经紫外荧光激发,观察MⅡ期染色质与第一极体的相对位置,并且用不同的角度记录(0°~30°,30°~90°和90°~180°)。Moteic软件测量卵周隙,明确卵周隙变化规律。结果:①注射人绒毛膜促性腺激素12h,开始排卵,可见第一极体的卵母细胞占72.22%,23.08%第一极体已开始退化。排卵后,随着卵母细胞在体内的老化,退化的第一极体增多,到注射人绒毛膜促性腺激素19h退化第一极体的比率达到100%,可见第一极体的卵母细胞比率降到7.14%。②注射人绒毛膜促性腺激素12和14h MⅡ期染色质与第一极体位置比邻,在0°~30°区域的卵母细胞较其他时间段多,为61.54%和50%;注射人绒毛膜促性腺激素13和17h的卵母细胞MⅡ期染色质与第一极体位置以在30°~90°区域为主;注射人绒毛膜促性腺激素15hMⅡ期染色质与第一极体位置在0°~30°和90°~180°区域的卵母细胞数相等,为30.77%,且少于30°~90°区域的卵母细胞(38.46%);注射人绒毛膜促性腺激素16,18和19hMⅡ期染色质与第一极体位置在90°~180°区域的卵母细胞逐渐增多,注射人绒毛膜促性腺激素19h达到最大值66.67%。③卵周隙随卵母细胞在体内的老化逐渐增大。结论:注射人绒毛膜促性腺激素12h可以进行小鼠卵母细胞去核操作,注射人绒毛膜促性腺激素14h为最佳去核时间。
  • 静脉注射表皮角朊细胞在烫伤大鼠各主要器官的分布 免费阅读 收费下载
  • 目的:烧伤创面的修复在很大程度上取决于表皮角朊细胞迁移、增殖和在相应器官的分化,通过静脉注射表皮角朊细胞,了解其在烫伤大鼠主要器官的分布情况。方法:实验于2003-03/2004-06在第三军医大学西南医院全军烧伤研究所完成。取38只Wistar新生鼠的表皮,采用Dispase和胰蛋白酶消化法,制备出角朊细胞悬液,然后用^99Tc^m标记。12只Wistar大鼠麻醉后沸水烫伤背部10s,制作20%Ⅲ度烫伤模型。实验分为对照组(假伤)、烫伤0d、烫伤3d和烫伤7d组,分别在假伤后1h内、烫伤后1h内、3d和7d经尾静脉注射^99Tc^m标记的角朊细胞悬液。注射后4h,单光子发射型计算机断层扫描仪检测大鼠主要器官(心、肝、脾、肺、肾、胸腺、皮肤或/和创面)的放射性活度,计算出各器官放射性计数角朊细胞分布的百分率。结果:4组12只大鼠进入结果分析。①对照组、烫伤0d组、烫伤3d组和烫伤7d组大鼠单光子发射型计算机断层扫描仪检测到的放射性活度主要分布在肺脏(66.8%~77.6%),肝脏10.8%~21.5%。②烫伤7d组大鼠肾脏的放射性活度百分率与对照组比较明显增加(12.2%,2.6%),皮肤或/和创面的放射性活度百分率在伤后仅略有增加(从0.64%到5.11%)。结论:经静脉注射的表皮角朊细胞主要随血循环向正常和烧伤大鼠的肺脏和肝脏迁移;烫伤后7d时角朊细胞向肾脏迁移显著增多,而向肺脏迁移有所减少。烫伤后迁移到皮肤或/和创面的角朊细胞仅略有所增多。
  • 生长相关蛋白在脊髓源性神经干细胞向神经主细胞分化过程中的表达 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨脊髓源性神经干细胞向神经元诱导分化过程中生长相关蛋白43的表达,分析其对脊髓损伤修复的主导作用。方法:实验于2003-03/09在中国医科大学实验动物中心完成。取15只孕14d的胎鼠,自胎鼠的脊髓区提取神经干细胞,经培养及神经巢蛋白免疫细胞化学鉴定,观察在神经干细胞定向诱导分化为神经元过程中,生长相关蛋白43于不同时间点的形态学表达。培养液为添加B27(2%)、碱性成纤维细胞生长因子(20mg/L)、表皮细胞生长因子(20mg/L)的无血清培养基DMEM/F12。置于37℃、体积分数为0.05的CO2培养箱中悬浮培养,观察其生长情况,每3天换液1次,共培养5次。分别于分化1,2,4,8d取出载玻片,对生长相关蛋白的表达进行免疫组化检测。总细胞和阳性细胞在显微镜下计数。结果:15只胎鼠的脊髓源性神经干细胞全部进入结果分析。①神经干细胞的培养情况:培养24h后,可见神经球;第2天时,神经球数目增多,呈桑椹状,折光性强,死细胞无光泽,仅有轮廓。②神经干细胞的鉴定结果:免疫细胞化学染色可见神经球内圆形细胞呈神经巢蛋白抗原强阳性,核未着色。神经干细胞定向分化后,细胞逐渐贴壁,到第4,8天时,细胞逐渐变大,突起变长,偶见多个突起。神经元特异性烯醇化酶阳性的神经元,胞浆及核膜出现棕色阳性反应,细胞核大而圆,无着色。细胞连续计数共712个,其中神经元特异性烯醇化酶阳性细胞296个,比例为41.57%。⑧神经干细胞分化过程中生长相关蛋白表达的测定:神经干细胞分化第1天,胞质内出现生长相关蛋白,第4天表达增强,于核周及突起中明显,逐渐向胞膜转移,并且长的突起与其他细胞的突起之间形成连接,至分化第8天时这种突起生长停止,神经干细胞分化为成熟的神经元细胞,生长相关蛋白反应减弱并消失。细胞连续计数共736个,其中生长相关蛋白阳性细胞246个,比例为33.42%。结论:在神经干细胞分化为神经元的过程中,生长相关蛋白基因呈一过性表达,参与引导突起的生长并发挥促进作用。
  • 人脑神经干细胞对不同储存方式及分离培养和诱导分化条件的要求 免费阅读 收费下载
  • 背景:近年来发现神经干细胞可于体外增殖并分化为神经细胞,是用来修复替代损伤神经组织的较为理想的来源,但是神经干细胞的培养中如何提高它的增殖能力,诱导分化成需要的表现型,尚处于研究探讨阶段。目的:探讨细胞冻存和非冻存方法分离培养人脑神经干细胞及诱导其向成熟神经细胞分化的培养条件。设计:以细胞为观察对象,单一样本研究。单位:江西医学院泌尿外科研究所,江西医学院第二附属医院神经外科。材料:实验于2003-12/2004-06在江西医学院泌尿外科研究所完成。取16周龄新鲜人胚脑组织。方法:用胰蛋白酶消化法从人胚脑中分离单个细胞,细胞冻存1个月后复苏或/和新鲜细胞用无血清培养基进行体外培养,碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子刺激细胞生长,用血清诱导其分化;采用免疫荧光细胞化学染色方法检测培养的细胞神经巢蛋白抗原和分化后成熟神经细胞抗原神经元特异性烯醇化酶的表达。观察碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子及血清对分离培养的人脑神经干细胞增殖与分化的影响。主要观察指标:①冻存与新鲜细胞后续培养的生长状况。②细胞形态变化。③神经干细胞标志物神经巢蛋白及成熟神经细胞标志神经元特异性烯醇化酶的鉴定。结果:①从胚龄16周的新鲜人胚脑中成功分离出神经干细胞。人胚脑原代细胞为圆形亮球状,培养3d后可见细胞开始聚集成神经球,部分呈悬浮生长,2周后神经球增大,部分细胞增大数倍,具有极强折光性,可见分裂增殖。经传代后细胞仍保持原有特征,细胞形态不变。克隆细胞在有血清培养基中培养,24h后可见大部分细胞贴壁生长,细胞从神经球游出分散,形态不规则;48h后多数细胞分化为大量形态不一的、分散成片的多突起星状细胞和神经元样细胞,突起相互交织成网。②分离出的神经干细胞在体外培养条件下传代培养,并表达神经干细胞标志巢蛋白;含血清培养基培养48h分化后的细胞主要表达成熟神经细胞标志神经元特异性烯醇化酶。③冻存复苏的细胞95%,以上为活细胞,与新鲜细胞比较,细胞生长状况无明显差别。结论:用无血清培养条件下结合碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子的作用,使干细胞体外得到了分离培养、增殖和纯化,证实其方法可行,同时冻存和新鲜细胞的比较,说明可用冻存方法保存人胚脑细胞,复苏后使用。
  • 猫骨髓基质细胞诱导为神经干细胞的实验研究 免费阅读 收费下载
  • 背景:骨髓基质细胞是贴壁黏附的非造血多潜能干细胞,其在一定条件体外培养、扩增可被诱导分化为神经元和胶质细胞。目的:观察家猫骨髓基质细胞体外培养及诱导分化成神经干细胞的生长情况。设计:随机取样。单位:南方医科大学附属珠江医院神经外科。材料:实验于2002-01/12在解放军第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所中心实验室进行,实验动物是由第一军医大学动物中心提供健康家猫20只,年龄1.0~2.0岁,体质量2.5~4.0kg,雌雄各半。干预:随机抽取家猫左右下肢的骨髓,从中分离得到骨髓基质细胞,提取的骨髓基质细胞悬液在体外给予神经干细胞培养基培养,增殖后用维甲酸为分化诱导因子进行诱导骨髓基质细胞向神经干细胞转化。CK2型倒置相差光学显微镜(OLYMPAS,JAPAN)追踪观察活细胞培养生长情况,同时观察4,12,24,48h去除非贴壁细胞及不去除贴壁细胞骨髓基质细胞生长情况。采用免疫组织化学染色改良法对干细胞阶段的骨髓基质细胞进行免疫细胞化学检测,OLYMPAS光学显微镜观察。主要观察指标:对接受实验干预的骨髓基质细胞分别进行倒置相差显微镜下观察活细胞生长情况及光镜下观察免疫细胞化学染色情况。结果:20只家猫全部进入结果分析。猫骨髓基质细胞在体外培养中胞体增大,倒置相差显微镜下可见丰富的胞浆颗粒,继之出芽,贴壁生长,可形成克隆团,同时可传代培养。免疫组化染色分析结果显示能表达神经干细胞特异性抗原Nestin,而且能分化出胶质细胞样细胞和神经元样细胞。结论:家猫骨髓基质细胞具有干细胞特征,在合适条件下可扩增、形成克隆并诱导分化出神经胶质细胞和神经元特征细胞。
  • 人羊膜负载猪角朊细胞构建皮肤表皮替代物的实验研究 免费阅读 收费下载
  • 背景:人羊膜为半透明的薄膜,含有多种促进细胞增殖的营养成分,是一种较好的负载角朊细胞的生物材料。目的:将人羊膜负载培养猪角朊细胞构建皮肤表皮替代物。并观察猪角朊细胞在人羊膜上生长增殖的形态特点。设计:以细胞为研究对象,单一样本研究,重复测量观察。单位:解放军第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所。材料:实验于2001-01/11在创伤、烧伤和复合伤国家重点实验室,第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所完成。猪角朊细胞取自3月龄贵州小香猪。方法:将贵州小香猪的角朊细胞原代培养,传代扩增后,将角朊细胞以1.63×10^5/cm^2的密度接种于人羊膜基质面,逐日于倒置显微镜下观察角朊细胞的生长增殖变化情况,并于培养3d与15d进行光镜、电镜观察,检测角朊细胞在人羊膜上的生长情况。主要观察指标:角朊细胞在人羊膜上的生长情况。结果:倒置显微镜下观察接种后30min内明显见到角朊细胞在人羊膜上黏附,24h内大部分黏附生长,3d形成单层完全覆盖人羊膜。光镜下人羊膜负载角朊细胞3d,可见角朊细胞在人羊膜基质面黏附呈单层生长,细胞扁平紧密排列。扫描电镜下可见胞体呈多边形,多见胞膜突起。透射电镜下可见角朊细胞与人羊膜黏附良好,生长在人羊膜上的角朊细胞内有许多角质丝。生长至15d,在倒置显微镜和扫描电镜下均可见,细胞因过于拥挤而隆起,因老化而形成较多碎片,部分细胞有空洞形成。结论:人羊膜是角朊细胞在体外培养的良好载体,对角朊细胞有明显的促增殖作用。但人羊膜负载角朊细胞生长至15d,因老化部分细胞有空洞形成。
  • 血管内皮生长因子基因转染促进成骨细胞的成骨活性 免费阅读 收费下载
  • 背景:外源性的血管内皮生长因子能使体外培养的成骨细胞碱性磷酸酶活性及环磷酸腺苷浓度提高4倍,但外源性血管内皮生长因子基因转染对成骨细胞成骨活性影响如何?目的:了解外源性血管内皮生长因子基因转染及表达对成骨细胞成骨活性的影响。设计:随机对照实验。单位:四川大学华西医院移植免疫实验室。对象:新生两三天雄性SD大鼠颅骨成骨细胞。方法:实验于2003-04/12在四川大学华西医院移植免疫实验室完成。分离培养大鼠颅骨成骨细胞用碱性磷酸酶染色鉴定。①用阳离子脂质体转染将pBLAST49-mVEGF基因导入体外培养的成骨细胞为基因转染组。②未转染组加入杀稻瘟菌素为对照。③将转染成功和未转染的成骨细胞进行同步传代培养共5代,对每代细胞进行血管内皮生长因子和Ⅰ型胶原免疫组织化学染色检查和骨钙素的测定。主要观察指标:①观察外源性血管内皮生长因子在成骨细胞内的表达。②对成骨细胞合成分泌骨钙素及Ⅰ型胶原的影响。结果:pBLAST49-mVEGF基因转染组第1~5代细胞合成分泌骨钙素浓度和Ⅰ型胶原的表达均明显高于对照组,二者间比较差异具有显著性(P<0.05)。结论:pBLAST49-mVEGF质粒转染成功后,成骨细胞合成Ⅰ型胶原明显增强。与对照组相比,通过Mias图像分析,与未转染的对照组比较差异具有显著性,表明pBLAST49-mVEGF质粒转染能明显增加成骨细胞生成骨钙素以及合成Ⅰ型胶原的能力。
  • 骨髓间质干细胞移植在脑梗死大鼠脑内分化及对神经功能恢复的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:间质干细胞的多向潜能性研究目前多处于动物实验阶段,至不同定位组织后是否有向其组织分化并产生相应的功能?目的:观察骨髓间质干细胞移植于脑皮质缺血性梗死灶的周围,观察其向神经分化及其对神经功能恢复的作用。设计:随机对照实验。单位:中山大学基础医学院解剖教研室,中山大学附属第一医院神经内科,暨南大学医学院病理教研室,广州医学院医学检验系。材料:实验于2002-11/2003-11在中山大学医学院完成。选择清洁级雄性SD大鼠48只t,随机分为造模的梗死组32只和不造模的对照组16只。梗死组又随机分成移植组16只和磷酸盐缓冲液组16只;以前囟为参考点,尾侧3mm旁开1.5mm,深度2.0~3.0mm,分别移植5μL(5×10^4L^-1)间质干细胞或磷酸盐缓冲液。方法:从非血液系统疾病的胸外科手术中摘取的肋骨骨髓中分离、纯化而获得的间质干细胞,经体外培养、扩增、鉴定。各组大鼠在移植后第2,6周末麻醉,对标本移植部位进行25μm连续冰冻切片。用免疫组织化学方法检测神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白、巢蛋白的表达,评估间质干细胞向神经元、神经胶质细胞分化的能力。随机抽取移植组8只大鼠,磷酸盐缓冲液组8只大鼠,在移植前和移植后2,6周末用横木行走试验评分法观察大鼠全身状态和反应能力。对照组16只大鼠与移植组和磷酸盐缓冲液组同时测评。主要观察指标:①大脑皮质神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白、巢蛋白的表达。②横木行走试验评定大鼠运动功能。结果:48只大鼠全部进入结果分析。①第2周末移植间质干细胞位置可见胶质纤维酸性蛋白、巢蛋白表达呈现阳性。第6周末移植间质干细胞位置神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白表达也呈出阳性。而磷酸盐缓冲液组相应注射部位神经元特异性烯醇化酶、神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白、巢蛋白表达均为阴性。②对照组无明显神经症状,评分均为9分。移植2周后,移植组运动功能评分高于磷酸盐缓冲液组[(6.7±0.9)分,(5.3±1.0)分,(P<0.05)]。移植6周后,移植组运动功能评分也高于磷酸盐缓冲液组[(8.9±1.1)分,(7.2±0.8)分,(P<0.05)]。结论:骨髓间质干细胞移植后在中枢神经系统有趋向神经元和神经胶质细胞分化的能力,表达了某些神经元胶质细胞的特性。移植组大鼠横木行走试验运动功能评分高于磷酸盐缓冲液组,并显示出明显的神经功能修复作用。
  • 重组腺相关病毒载体2型转染骨髓间充质干细胞的体外实验 免费阅读 收费下载
  • 背景:目前应用于基因治疗的病毒载体中,重组腺相关病毒载体2型载体与腺病毒和反转录病毒载体比较,由于其无致病性,引起学者们的关注。目的:观察体外重组腺相关病毒载体2型转染骨髓间充质干细胞,并用其作为携带基因表达的载体进行急性髓性白血病基因治疗的可能性。设计:开放性实验。单位:南方医科大学南方医院的血液科。材料:实验于2004-02/07在南方医科大学南方医院的血液科实验室完成。本实验所用的骨髓间充质干细胞来自急性髓性白血病6例初发患者和4名健康成年志愿者的第3~5代传代细胞。方法:从初发的急性髓性白血病患者和正常健康志愿者髂后上棘做骨髓穿刺抽取6~10mL肝素抗凝的骨髓,分离培养出间充质干细胞,用包含增强型绿色荧光蛋白的重组腺相关病毒载体2型感染间充质干细胞,将获取的骨髓间充质干细胞加入含一定感染复数(感染复数:1×10^2.1×10^3,1×10^4,1×10^5,1×10^6,1×10^7)的增强型绿色荧光蛋白的重组腺相关病毒载体2型病毒载体的不完全培养液,10~14d后在相差荧光显微镜下或用流式细胞仪观测绿色荧光蛋白的表达。在体外培养条件下观察绿色荧光蛋白在经过重组腺相关病毒载体2型转导的骨髓间充质干细胞中的表达。体外观察经增强型绿色荧光蛋白的重组腺相关病毒载体2型转导并被新霉素筛选后绿色荧光蛋白在被转导的骨髓间充质干细胞中的表达。通过相差荧光显微镜下确证绿色荧光蛋白表达后,在BD流式细胞仪上检测绿色荧光蛋白的表达。主要观察指标:①增强型绿色荧光蛋白的重组腺相关病毒载体2型对骨髓间充质干细胞的转染率分析。②在转染后的不同时间点用相差荧光显微镜和流式细胞仪观察绿色荧光蛋白的表达情况。结果:①转染率分析:增强型绿色荧光蛋白的重组腺相关病毒载体2型对来源于健康志愿者和急性髓性白血病患者的骨髓间充质干细胞的转染率均不高,转染率在0.3%~1.4%。转染后10~14d绿色荧光蛋白开始表达,一般感染条件绿色荧光蛋白阳性骨髓间充质干细胞所占比例为(1.030±0.034)%,重复3轮感染条件下为(1.140±0.036)%,脂质体协助感染条件下为(1.380±0.054)%,改变转染条件(包括重复感染,延长感染时间,增加感染复数,脂质体协助转染)亦不能明显增加转染率(P>0.05),而增强型绿色荧光蛋白的重组腺相关病毒载体2型却能高效的转染其包装细胞293细胞。②绿色荧光蛋白在体外长期稳定表达分析:实验观察61d内,绿色荧光蛋白保持低水平长期稳定表达,在转染后的12~33d,绿色荧光蛋白阳性的骨髓间充质干细胞从起始时的1.16%下降到0.5%~0.6%,33~61d一直维持在这一水平;经过新霉素筛选30d后,表达绿色荧光蛋白的骨髓间充质干细胞达到6.6%左右,在体外继续传代培养,在体外观察的100d中,表达绿色荧光蛋白的骨髓间充质干细胞一直维持在6%的水平。结论:重组腺相关病毒载体2型介导的基因转导的优势是安全、无免疫反应,目的基因能够长期稳定表达。重组腺相关病毒载体和骨髓间充质干细胞可用于体外基因治疗,其将来可能成为全身基因治疗的良好载体。
  • 本刊版面有关组稿问题的说明 免费阅读 免费下载
  • 人腰椎黄韧带Ⅰ和Ⅱ型胶原基因表达随增龄发生软骨骨化的验证:特异性与客观性 免费阅读 收费下载
  • 目的:运用特异性探针观察不同年龄组黄韧带Ⅰ和Ⅱ型胶原基因表达分布、强度及随增龄而发生的变化,采用客观图像分析验证黄韧带退行性变和骨化增龄性变假说。方法:实验于2003-08/2004-08在第二军医大学长征医院中心实验室完成。21块腰椎黄韧带标本取自椎间盘突出症和椎管狭窄行后路椎板减压术患者,对照组标本取自4例青少年腰椎骨折行后路椎板减压术患者。提供标本患者均知情同意。椎间盘突出症和椎管狭窄患者的腰椎黄韧带标本按年龄分为4组:<20岁组、20~40岁组、41~60岁组和>60岁组。用Ⅰ和Ⅱ胶原cDNA探针,对不同年龄组的黄韧带冰冻切片进行原位杂交和图像分析,观察其Ⅰ型胶原表达(成纤维细胞基因表型)和Ⅱ型胶原表达(软骨细胞基因表型)。结果:①原位杂交组织切片观察:<20岁组黄韧带附着点处和体部纤维细胞排列规则,细胞呈梭形细胞数目较多,有明显的Ⅰ胶原表达,无Ⅱ型胶原表达信号;20~40岁组黄韧带细胞排列尚规则,细胞的数量相对减少,出现轻度纤维化,在黄韧带的附着点处有少量的Ⅰ和Ⅱ型胶原阳性表达信号;41~60岁组黄韧带体部细胞排列不规则,细胞的数量相对减少,出现明显纤维化,黄韧带体部无明显的阳性表达,黄韧带的附着点处有较弱的的Ⅰ型胶原阳性表达,阳性表达细胞分布不均匀,但Ⅱ型胶原的表达较41岁以下组表达增强;>60岁组黄韧带出现纤维化,未见Ⅰ型胶原阳性表达信号,黄韧带的附着点处Ⅱ型胶原阳性表达信号增强。②Ⅰ型胶原基因表达:<20岁组、20~40岁组、41~60岁组和>60岁组均显著高于对照组(1.53±0.18,1.34±0.16,0.86±0.13,0.71±0.21,0.51±0.11,P<0.叭),随年龄增长表达逐渐减弱(P<0.05),但41~60岁组和>60岁组无显著差异(P>0.05)。Ⅱ型胶原基因表达:<20岁组、20~40岁组、41~60岁组和>60岁组均显著高于对照组(0.73±0.16,1.14±0.14,1.46±0.13,1.65±0.16,0.53±0.12,P<0.01),随年龄增长表达逐渐增强(P<0.05)。结论:Ⅰ和Ⅱ型胶原cDNA探针具有高度的特异性,随着年龄的增长,ⅠⅠ型胶原表达逐渐减弱,在附着点处出现Ⅱ型胶原的表达增强,提示成纤维细胞基因表达逐渐减弱,而软骨细胞的基因表达逐渐活跃,为黄韧带退行性变和骨化提供了分子生物学依据。
  • 重组胰岛素生长因子1对成骨细胞增殖和分化的影响:量效与时效作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察不同浓度重组胰岛素生长因子对成骨细胞的增殖和分化功能的影响。方法:实验于2004-01/06在广东医学院动物中心完成。无菌取出生24h内的Wistar大鼠颅盖骨,进行成骨细胞的分离、培养、增殖,取第5代鼠成骨细胞,在含体积分数0.1的胎牛血清DMEM培养基中,以配制的5种不同浓度重组胰岛素生长因子[0(对照组),1,10,20,50μg/L]中继续培养1,3,5,7d,反映不同浓度重组胰岛素生长因子对成骨细胞增殖的影响,采用四甲基偶氮噻唑盐法在酶标仪上检测吸光度值表示;反映成骨分化作用采用酶标仪检测碱性磷酸酶活性;反映不同浓度重组胰岛素生长因子对成骨细胞脂质代谢的影响采用分光光度计检测丙二醛。结果:①对细胞增殖的量效作用:四甲基偶氮噻唑盐法吸光度值反映细胞增殖的活性,胰岛素生长因子对成骨细胞有明显的刺激作用,能使细胞的增殖率提高。不同浓度重组胰岛素生长因子对成骨细胞均有较强的促进作用,1~20μg/L范围随着浓度的增加,吸光度值随之增高,存在剂量-效应关系,20μg/L重组胰岛素生长因子的刺激作用最强,随浓度增至50μg/L,吸光度值有所下降,重组胰岛素生长因子的刺激作用不再增加。②对细胞增殖的时效作用:重组胰岛素生长因子对鼠成骨细胞的促增殖作用还存在时间-效应的关系,随着培养作用时间的延长,吸光度值增高,作用5d后,吸光度值达到最高峰,促增殖作用最为明显.到第7天后,吸光度值下降。③早期成骨活性:不同浓度的胰岛素生长因子,能促进反映成骨细胞的成骨活性、可作为早期分化指标的骨细胞碱性磷酸酶的表达,1~20μg/L范围随浓度的增加,碱性磷酸酶的表达亦增高,20μg/L组促碱性磷酸酶的活性作用最明显,增至50μg/L,碱性磷酸酶的表达有所下降。④对丙二醛表达的影响:1~20μg/L范围随浓度的增加,丙二醛的表达随之降低,20μg/L组的作用最明显,增至50μg/L,丙二醛的表达略有升高,提示胰岛素生长因子可降低成骨细胞的脂质过氧化物水平。结论:重组胰岛素生长因子可促进成骨细胞的增殖,提高增殖率,并具有量效、时效关系。同时能促进成骨细胞进一步的分化,可促进反映早期分化指标的骨细胞碱性磷酸酶的表达,提高成骨能力,有助于骨坏死修复过程。还具有影响成骨细胞脂质代谢,降低成骨细胞的脂质过氧化物水平的作用。
  • 碱性成纤维细胞生长因子影响犬平滑肌细胞增殖的合理剂量 免费阅读 收费下载
  • 目的:评价碱性成纤维细胞生长因子调控平滑肌细胞增殖的合理剂量,及其对平滑肌细胞在生物可降解材料上生长的影响。方法:实验于2004-05/12在首都医科大学宣武医院外科实验室完成。原代培养的狗主动脉平滑肌细胞,取其第3代作为实验用细胞。①按给予培养的平滑肌细胞的碱性成纤维细胞生长因子的剂量,分为50,25,10,5,3,1μg/L组,正常对照组(普通体积分数为0.2的胎牛血清的DMEM培养液),空白对照组共8组。分别于作用后24h,48h,4d进行四甲基偶氮唑盐检测,测定光吸收值,计算相对增殖率[相对增殖率=(实验组吸光值-空白对照)/(正常对照组吸光值-空白对照)×100%],比较不同剂量碱性成纤维细胞生长因子组之间的平滑肌细胞增殖情况。②用含3μg/L碱性成纤维细胞生长因子的培养液在生物可降解载体上培养平滑肌细胞作为实验组,对照组加入常规培养液,作用后24h,48h,72h进行四甲基偶氮唑盐检测,测定光吸收值,比较两组间平滑肌细胞增殖的情况。结果:①不同剂量碱性成纤维细胞生长因子组之间的平滑肌细胞增殖情况:各组相对增殖率随时间推移而逐渐增加,在低浓度时(<10μg/L)增殖率于48h达到高峰,以后逐渐降低。②碱性成纤维细胞生长因子的培养液在生物可降解载体上培养平滑肌细胞增殖的情况:应用含3μg/L碱性成纤维细胞生长因子培养液培养的平滑肌细胞在载体上的增殖明显高于对照组(P<0.05)。结论:碱性成纤维细胞生长因子能够明显刺激平滑肌细胞的增殖,其合理剂量为3μg/L,应用3μg/L碱性成纤维细胞生长因子能明显增加平滑肌细胞在载体上的增殖,在构建组织工程化动脉时可以应用碱性成纤维细胞生长因子进行调控。
  • 中国血管外科研究20年——从血管组织工程样(生物化人工血管)研究到干细胞移植 免费阅读 收费下载
  • 组织工程一词最早是由美国国家科学基金会1987年正式提出和确定的。笔者在1985年,已开始做了与“组织工程”类似的研究,在1988年至1993年已发表有关研究:
  • 血管内皮生长因子对大鼠皮瓣断蒂时间的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察血管内皮细胞生长因子对大鼠任意皮瓣断蒂时间的影响。方法:实验于2003-04/2004-04在华北煤炭医学院中心实验室完成。采用SD大鼠背部3cm×7.5cm单蒂任意皮瓣为模型,皮下局部注射内皮细胞生长因子后,通过计算机图像分析技术对不同断蒂时间皮瓣成活率的测定、微血管密度的测定,组织学检查、碱性成纤维细胞生长因子免疫组织化学染色等手段来观察内皮细胞生长因子对皮瓣断蒂时间的影响并探讨其机制。结果:局部应用内皮细胞生长因子后,皮瓣断蒂时间由7d缩短为5d;组织学检查发现内皮细胞生长因子能促进皮瓣毛细血管新生;生理盐水组微血管密度中1/3段为(26.83±1.96)个/cm^2,远1/3段为(26.96±2.11)个/cm^2,内皮细胞生长因子组中1/3段为(30.99±1.93)个/cm^2,远1/3段为(36.11±2.32)个/cm^2,表明内皮细胞生长因子能增加皮瓣中远段微血管密度。生理盐水组碱性成纤维细胞生长因子阳性细胞数中1/3段为(22.2±3.5)个,远1/3段为(18.4±4.5)个,内皮细胞生长因子组中1/3段为(30.8±3.2)个,远1/3段为(33.2±5.1)个,表明内皮细胞生长因子能增加皮瓣中远段碱性成纤维细胞生长因子的表达。结论:内皮细胞生长因子能促进大鼠任意皮瓣早期断蒂,其机制可能与内皮细胞生长因子直接促进血管再生及通过增强另一血管生成因子碱性成纤维细胞生长因子的表达间接促进血管新生有关。
  • 醋酸曲安奈德/硅凝胶药膜的制备及体外释放度观察 免费阅读 收费下载
  • 目的:制备醋酸曲安奈德/硅凝胶药膜,观察其体外释放度和释药均一性,以选择释药量符合临床治疗需要的药膜类型。方法:实验于2004-11-10/2005-01-15于第三军医大学高原医学系中心实验室进行。利用醋酸曲安奈德药物原粉与硅凝胶混合,在150℃高温硫化2h,分别制备醋酸曲安奈德/硅凝胶A,B,C3种药膜,含药量分别为:0.83,1.11,1.39mg/cm^2。各观察时间点样品体外释放度的测定采用高效液相色谱方法(测定样品吸收度,根据标准曲线计算其释放量,得出释放百分比),并观察药膜释药均一性。结果:①醋酸曲安奈德/硅凝胶药膜体外释放度:A,B,C3种药膜的释药趋势基本相同,硅凝胶释药呈稳定释放趋势,符合Higuichi方程;14d时的体外释放度分别达到18.18%,19.38%,22.38%。c型药膜14d内释药约为20~30mg,药膜释药可达到0.3~0.4mg/cm^2。②药膜释药均一性:同型药膜各部分释药在同时间段中的相对标准偏差<3%。结论:从不同药物添加量中,发现C型药膜的释药剂量较为符合临床处方剂量,制膜时使得药膜药物含量达到约1.5mg/cm^2时释放量符合临床治疗剂量的要求。
  • 大鼠异体肢体移植后存活时间与FK506和FTY720的联合免疫抑制作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察联合应用小剂量免疫抑制剂FK506和FTY720对大鼠同种异体肢体移植术后急性移植排斥反应的发生和延长移植肢体存活时间的作用。方法:实验于2003-06/2004-10在哈尔滨医科大学附属第一医院实验动物中心完成。选择雄性Wistar大鼠为供体、SD大鼠为受体,以FK506和FTY720为免疫抑制剂,进行了140例异体肢体移植动物实验。对照组为术后不用药组,实验组根据用药剂量和药物不同分为6组:FK5061mg/(kg·d)组,FK5062mg/(kg·d)组,FTY7200.03mg/(kg·d)组,FTY7200,1mg/(kg·d)组,FTY7200.5mg/(kg·d)组,小剂量联合用药组FK506[mg/(kg·d)]+FTY720[1mg/(kg·d)]。各组用药时间均为术前1d开始,直至肢体坏死。术后通过观察大鼠伤口情况、异体移植肢体的血运变化,判定各组移植肢体急性排斥反应的发生时间和移植肢体存活时间(以在移植肢体皮肤出现红斑水肿持续24h视为急性排斥反应的发生时间,以皮肤脱落或出现干性坏疽为移植肢体坏死标准为);对照组于术后第5天、各实验组于术后第10天切取皮肤,进行组织病理学检查,按Büttemeyer肢体移植组织排斥反应分级标准进行分级(0级为无排斥,1级为轻度排斥,2级为中度排斥,3级为重度排斥),计算平均排斥反应级别。结果:每组纳入结果分析的动物均为20只。①排斥反应出现时间和移植肢体存活时间:各用药组均长于对照组(t=2.89~4.18.P<0.01);小剂量联合用药组明显长于其他用药组(t=4.04~5.79,P<0.01)。②移植肢体皮肤组织平均排斥反应分级:各用药组均低于对照组(1.87±0.42,1.31±0.31,2.21±0.36,1.69±0.33,1.34±0.28,0.35±0.24和2.86±0.38;t=2.74~4.74,P<0.05),小剂量联合用药组明显低于其他用药组(t=3.75~5.12,P<0.01)。结论:①单独口服FK506或FTY720能使移植肢体存活时间不同程度地较对照组延长。②给予FK506和FTY720进行联合免疫抑制时,应用的剂量较小,所产生的副作用也较轻时,仍可使移植肢体存活时间明显延长。
  • 碳酸化羟基磷灰石水泥修复骨缺损特征性效果的验证性实验 免费阅读 收费下载
  • 背景:碳酸化羟基磷灰石骨水泥是一种新型的骨修复材料,已应用在骨缺损临床治疗中。目的:通过动物实验观察碳酸化羟基磷灰石水泥修复骨缺损效果的特征。设计:配对设计、自身对照、验证性实验。单位:解放军骨科研究所和动物实验中心。对象:实验于2002-05/2003-01在解放军骨科研究所和动物实验中心完成。健康成年雄性杂种犬10只,体质量20~22kg。方法:10只杂种犬肱骨近端制作骨缺损动物模型,随机选择实验侧和对照侧。分别采用碳酸化羟基磷灰石水泥和高温烧结羟基磷灰石陶瓷修复骨缺损。分别于术后5d,4,8,12和16周处死动物,通过X射线和组织学观察其修复效果。主要观察指标:①两侧骨缺损处实体显微镜观察结果。②两侧骨缺损处X射线观察结果。③部分脱钙切片苏木精-伊红染色观察结果。④磨片Gimsa染色观察结果。结果:纳入犬lO只,均进入结果分析。①两侧骨缺损处实体显微镜观察及X射线观察结果:实验侧碳酸化羟基磷灰石水泥界面结合紧密,随植入时间延长界面逐渐模糊。对照侧羟基磷灰石始终与骨界面清晰。②部分脱钙切片苏木精-伊红染色及磨片Gimsa染色观察:实验侧8周时新骨长入碳酸化羟基磷灰石水泥,16周时二者互相交错整合成为一体,并且在碳酸化羟基磷灰石水泥中出现围绕新生血管形成的骨岛。对照侧羟基磷灰石始终保持完整,与骨界面清晰,在16周时羟基磷灰石表面有新生骨沉积。结论:碳酸化羟基磷灰石水泥具有原位固化性能和生物相容性及骨传导活性,是一种较为理想的新型骨缺损修复材料。
  • 人发角蛋白人工腱诱导自生腱形成过程胶原Ⅰ型mRNA的表达 免费阅读 收费下载
  • 背景:大量的动物实验和临床应用已经证实,人发角蛋白(human hair keratin,HHK)人工腱能诱导机体形成自生腱,自生腱形成的过程实质上主要是胶原Ⅰ型的合成、分泌和组装的过程。目的:探讨胶原Ⅰ型mRNA在人发角蛋白人工腱诱导自生腱组织形成过程中的表达。设计:以实验动物为观察对象,完全随机对照实验。单位:南方医科大学组织学与胚胎学教研室和生物化学与分子生物学教研室。材料:实验于2003-05/2004-09在解放军第一军医大学实验动物中心完成。实验动物中心提供实验用新西兰大白兔33只,体质量2.0~2.5kg,雌雄不限。随机分成实验3,6,9,12,16,20周组,阴性对照9,20周组和正常对照组,其中实验3,6周组和正常对照组每组3只,其余每组4只。由生物化学与分子生物学教研室提供的人发角蛋白人工腱为经-系列生物化学处理的人发,按降解速度不同可分为快速(F)、中速(B)和慢速(Z)3个不同降解组分。人发角蛋白人工腱是由快速,中速和慢速这3种组分按4:3:3的比例混合编制而成。方法:①实验组行双侧跟腱手术,切断跟腱长1.0~2.0cm,两断端与人发角蛋白人工腱缝合,缝合腱膜,皮肤一期缝合。②阴性对照组为离断兔肌腱1.0~2.0cm,断裂肌腱不进行连接,而缝合腱膜和皮肤。③正常对照组为正常兔肌腱。实验组分别于第3,6,9,12,16,20周取材.阴性对照组分别于第9,20周取材。通过反转录聚合酶链反应技术测量各时期胶原Ⅰ型mRNA表达。主要观察指标:正常肌腱与人发角蛋白人工腱各个时期诱导形成的自生腱中胶原Ⅰ型mRNA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GADPH)mRNA表达的比值。结果:33只大鼠全部进人结果分析。①正常肌腱组织中Ⅰ型胶原mRNA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA表达的比值为0.96±0.02。②阴性对照组9,20周组取材发现,两断端肌腱未连接,并且向两侧回缩。③实验组人发角蛋白人工腱植入后诱导形成的自生腱中Ⅰ型胶原mRNA/甘油醛-3-磷酸脱氢酶mRNA表达在第3周的已经出现,第3~6周为急骤上升,第6周到达高峰,第9~20周表达量呈稳定状态。实验组第6周表达量明显高于正常对照组(F=6.254,P<0.05).实验组其余各周表达量也明显高于正常对照组(F=1.258~1.987.P>0.05)。结论:人发角蛋白人工腱植入后,自生腱的形成主要是腱细胞增殖活化,合成并分泌胶原Ⅰ型蛋白,完成肌腱的修复。
  • 缺血预处理对缺血骨骼肌收缩功能的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:缺血预处理能有效提高骨骼肌缺血耐受性,减轻骨骼肌缺血再灌注期间的坏死范围,但缺血预处理对骨骼肌收缩功能的影响文献报道不多。目的:探讨缺血预处理对骨骼肌缺血再灌注期间收缩功能的影响。设计:以实验动物为研究对象的随机对照研究。单位:华中科技大学同济医学院及解放军第二五二医院。材料:实验地点为解放军第二五二医院中心实验室。选用健康雄性SD大鼠14只。方法:采用大鼠后肢缺血再灌注模型,将14只大鼠随机分为对照组和实验组。对照组:持续缺血4h,再灌注1h;实验组:缺血5min,再灌注5min,重复3次后。持续缺血4h再灌注1h。测定缺血再灌注期间腓肠肌收缩功能变化及再灌注1h后,血清磷酸激酶(CK),丙二醛和腓肠肌^99锝^m亚甲基二磷酸钠(^99Tc^mMDP)吸收量变化。主要观察指标:缺血预处理对腓肠肌收缩力及对血清CK。丙二醛及^99Tc^mMDP吸收量的影响。结果:实验组腓肠肌收缩力在缺血4h时为(14.32±5.05)g,再灌注1h时为(25.71±7.58)g,对照组分别为(0.4.73±2.05)g,两者相比差异有显著性意义(P<0.05),实验组血清CK为(104.85±9.84)nkat/L,丙二醛为(3988.60±455.92)nmol/L,^99Tc^mMDP吸收量为(56.0±8.1)mBq/g·min,对照组CK为(136.36±14.50)nkat/L,丙二醛为(6542.90±536.72)nmol/L,^99Tc^mMDP吸收量为(97.3±5.8)mBq/g·min,两者相比差异有显著性意义(P<0.05,P<0.01)。结论:缺血预处理能有效改善缺血再灌注期间骨骼肌的收缩力,减轻骨骼肌坏死程度。因此,缺血预处理对缺血骨骼肌的收缩功能具有保护作用。
  • 表皮生长因子对肠道放射性损伤保护作用的量效关系 免费阅读 收费下载
  • 背景:表皮生长因子可以抑制胃酸分泌,促进溃疡愈合,对胃肠道黏膜具有保护作用,还具有促进黏膜细胞生长和增殖的作用。目的:观察不同剂量表皮生长因子对放射性肠道损伤后大鼠肠黏膜屏障影响的量效观察。设计:随机对照实验。单位:新疆医科大学第一附属医院及公共卫生学院。材料:实验于2001-08/2003-05在新疆医科大学公共卫生学院和新疆医科大学第一附属医院完成。选用新生Wistar大鼠80只,雌雄各半。方法:将Wistar大鼠随机分成阴性,阳性对照组及表皮生长因子30μg/kg,20μg/kg,10μg/kg组,每组16只,雌雄各半。除阴性对照组外,各组大鼠腹部1射线单次9.5Gy辐射制备动物模型后,皮下注射表皮生长因子1次/d进行干预,8d后观察动物体质量、食物摄入量、食物利用率的变化,并行肠黏膜形态学检查。主要观察指标:①不同剂量表皮生长因子对放射性损伤后大鼠体质量增长、食物摄入量、每日食物摄入量、每日食物利用率的影响。②光镜和电镜下肠黏膜检查结果。结果:①应用表皮生长因子30,20,10μg/kg组大鼠体质量增长与阴性对照组及阳性对照组比较,差异无明显意义(P>0.05)。②应用表皮生长因子30,20,10μg/kg组雄鼠和雌鼠每日食物摄入量与阴性对照组比较,差异有显著意义(P<0.05),与阳性对照组比较差异无显著意义(P>0.05)。③光镜和电镜结果显示,应用表皮生长因子使放射性肠道损伤后肠黏膜形态结构随着表皮生长因子剂量的增加,逐渐改善,其中表皮生长因子30μg/kg组有明显改善,可见上皮细胞显著增生,杯状细胞数目增多。结论:不同剂量表皮生长因子对大鼠体质量、食物摄入量、食物利用率可能没有影响,但大剂量组表皮生长因子对放射性肠道损伤后肠黏膜形态结构的改善,以及肠上皮细胞增生和修复产生促进作用。
  • 软骨细胞增殖与胰岛素和氢化可的松联合应用的关系 免费阅读 收费下载
  • 背景:关节腔内激素注射治疗关节炎能迅速缓解关节疼痛,但可发生进行性软骨损害。加用具有生长因子样作用的胰岛素,是否可产生对关节软骨细胞的保护作用?目的:观察胰岛素和氢化可的松联合作用对软骨细胞生长的影响。设计:分组对比观察,1种药物单独作用采用单因素方差分析,2种药物复合作用采用多因素实验设计资料方差分析的析因分析。单位:广州市创伤外科研究所。材料:4~6周龄的新西兰大白兔膝关节软骨。方法:实验于2000-02/2001-05在广州市创伤外科研究所完成。将软骨碎片分别用透明质酸酶,胰酶及Ⅱ型胶原酶消化,获得软骨单细胞悬液,予以不同作用及其不同剂量的药物干预。根据应用干预药物剂量的不同将其分为4组及相应亚组。对照组(不加氢化可的松和胰岛素),胰岛素(0.035,0.35,3.5,35mg/L)组,氢化可的松(1,5,10,50,100mg/L)组,胰岛素(0.35mg/L)+氢化可的松(50mg/L)组,应用四氮甲基唑蓝比色分析法观察其对软骨细胞增殖的影响。主要观察指标:①胰岛素对软骨细胞增殖的影响。②氢化可的松对软骨细胞增殖的影响。③氢化可的松与胰岛素联合使用对软骨细胞增殖的影响。结果:①胰岛素可促进软骨细胞增殖:单独使用0.035mg/L即可发挥效应,当浓度增至0.35mg/L时,其促进作用达到最大值。②氢化可的松对软骨细胞增殖的抑制作用:单独使用10mg/L时即可发挥效应,随着浓度增大抑制作用显著,当浓度增大至100mg/L,软骨细胞几乎全部死亡。③0.35mg/L胰岛素与50mg/L氢化可的松联合使用:存在着负协同作用(F:164.9,P<0.01)。结论:低浓度胰岛素对软骨细胞的增殖有促进作用。但氢化可的松对软骨细胞的增殖有抑制作用。二者联合使用时,氢化可的松可拮抗胰岛素的作用。
  • 构建人牙囊细胞三维立体培养模型及其用于牙周组织工程的可行性 免费阅读 收费下载
  • 目的:构建人牙囊细胞的体外三维立体培养模型,探讨两种支架材料用于牙周组织工程的可行性。方法:实验于2003-01/2004-10在第四军医大学口腔医学院组织工程实验中心完成。采用酶消化法原代培养人牙囊细胞,传代扩增后,取第4代细胞分别接种于煅烧骨和Ⅰ型胶原膜三维支架上,体外继续培养1周,进行细胞记数和扫描电镜观察细胞生长状况。结果:细胞在两种材料上均能良好贴附并增殖,扫描电镜可见人牙囊细胞在这两种支架材料上均黏附良好,增殖旺盛,伸展充分,并有基质分泌。结论:煅烧骨和冻干胶原膜均有望成为牙周组织工程支架材料。
  • 青少年安氏Ⅰ类恒牙列牙冠超硬石膏模型宽度:与1959年国人离体牙数据参数的比较 免费阅读 收费下载
  • 目的:了解国内当代青少年恒牙列牙冠的宽度,将结果与1959年王惠芸所作的牙冠宽度值相比较,以探讨国人牙齿的变化情况。方法:第四军医大学口腔医院正畸科1999-01/2003-12测量224例安氏Ⅰ类恒牙列青少年牙牙合超硬石膏模型的各牙冠宽度,进行统计分析。结果:国内当代青少年牙冠宽度由大到小依次为(U:上颌,L:下颌,其后数字为牙位):U6>U1>U3>U4>U2>U5,L6>L4>L5>13>L2>L1,不包括第二磨牙。与1959年王惠芸所测国人离体牙牙冠宽度值比较,除下颌第一磨牙差别不显著外,其他牙位平均牙冠宽度均增大。结论:不同时期的健康营养状况使国内当代青少年牙冠宽度较以前有所增加。人类在演化过程中,各牙位受到的影响条件不一致。上下颌骨的生理差异可能导致了上颌牙量的增加大于下颌牙量的增加。
  • 个体化预制医用树脂和羟基磷灰石复合材料修复颅骨缺损 免费阅读 收费下载
  • 目的:个体化预制医用树脂和羟基磷灰石复合人工骨材料应用于不同部位颅骨缺损患者的颅骨修复和重建。方法:纳入2003-01/2004-06上海第二医科大学附属宝钢医院32例脑损伤开颅术后患者,利用计算机三维重建和计算机数控成型技术,将个体化设计成型的医用树脂和羟基磷灰石复合人工骨材料植入脑外伤后颅骨缺损患者的颅骨缺损部位进行重建和修复,并随访6个月,参与者知情同意。结果:32例患者均完成6个月随访,随访率100%。术后6个月随访时颅骨缺损修复后外形效果满意。cT复查显示修复材料位置良好,形态正常,患者及家属对手术效果非常满意,所有病例都没有发生排异现象。结论:医用树脂和羟基磷灰石复合人工骨材料个体化修复颅骨缺损,术后成型效果较好,术后未发生排异反应。
  • 构建创伤性肢体深静脉血栓动物模型及其应用评价 免费阅读 收费下载
  • 目的:建立创伤后肢体深静脉血栓形成动物模型,评估其应用价值。方法:实验于2004-10/12在昆明医学院外科总实验室进行。8~10个月龄新西兰大白兔20只,随机抽取6兔,进行预实验,用高频彩色多普勒血流显像仪观测左下肢伸直位、屈髋屈膝位时股静脉的血流速度和血管内径,将20只兔用创伤后肢体深静脉血栓造模装置进行创伤无骨折造模。造模后3h随机抽取6只兔对击打部位拍摄X射线片和行数字减影血管造影,观察左下肢有无骨折及股静脉受损。第7天随机抽取6只兔行左下肢数字减影血管造影和大体及光镜观察股静脉血栓形成情况。结果:进行各项指标检测时,每次随机抽取6只兔(可重复使用),进入结果分析6只。①造模后兔左下肢X射线片结果:未显示骨折。②兔左下肢大体观察结果:可见大部分股静脉发生血栓。③兔左下肢光镜观察结果:股静脉血栓发生率为80%。⑧兔左下肢股静脉数字减影血管造影结果:造模后3h,6只兔均未显示股静脉受损;造模后第7天5只可见股静脉血栓形成,1只无血栓形成。⑤高频彩色多普勒血流显像仪观测结果:左下肢屈髋屈膝位血流速度显著慢于伸直位时[(0.0229±0.0107),(0.0637±0.0152)cm^3/s,P<0.05];左下肢屈髋屈膝位血管内径也显著小于伸直位时[(0.10±0.04),(0.16±0.04)cm,P<0.01]。结论:创伤性肢体深静脉血栓动物模型经过随机抽样检测结果表明,能成功模拟出具有骨科临床特点的创伤性肢体深静脉血栓形成的病理变化过程,装置简单,操作简便,创伤能量易于量化,而且血栓发生率稳定。
  • 磁共振血管成像评估兔创伤性肢体深静脉血栓:与金标准的一致性 免费阅读 收费下载
  • 目的:通过与金标准数字减影血管造影成像比较,探讨磁共振血管成像对兔创伤性肢体深静脉血栓的诊断价值。方法:实验于2003-10/2004-03在昆明医学院外科总论实验室完成。新西兰大白兔6只随机分为3组,每组2只。采用自制击打装置,建立兔骨折和创伤模型。骨折固定组兔造模后骨折,创伤固定组兔造模后不骨折,单纯固定组兔不造模,3组均行石膏外固定。于处理后7d各组兔分别用磁共振血管成像及数字减影血管造影对兔左股静脉血栓进行检测,并进行组织学观察。结果:3组6只兔均进入结果分析。①磁共振血管造影和数字减影血管造影检测:第7天骨折固定组和创伤固定组各2只血栓阳性,单纯固定组未发生。②组织学观察:骨折固定组和创伤固定组第7天均可见股静脉血栓形成,单纯固定组均未见血栓形成。结论:磁共振血管造影与数字减影血管造影在深静脉血栓形成诊断方面有较好的一致性、准确性和可靠性,磁共振血管造影可作为临床检测深静脉血栓的另一种检查手段。
  • 大鼠视网膜神经节细胞存活和突起生长与可溶性混合晶状体蛋白的促进作用:体外培养实验 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察不同培养基中血清和混合晶状体蛋白对视网膜神经节细胞的影响,探讨晶状体损伤后其促进视网膜神经节细胞存活和再生的作用。方法:实验于2004-04/07在解放军第三军医大学西南眼科医院眼科实验室完成。选择成年Long Evens大鼠8只用于可溶性混合晶状体蛋白的提取;选择新生0~2d Long Evens大鼠30只用于视网膜神经节细胞的培养。分别用下列3组培养基对离体视网膜神经节细胞进行培养:①100mL/L新生牛血清+900mL/L DMEM/F12培养基(新生牛血清+DMEM/F12组)。②100mL/L新生牛血清+100mL/L胎牛血清+800mL/L DMEM/F12培养基(新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组)。③100mL/L胎牛血清+900mL/L DMEM/F12培养基(胎牛血清+DMEM/F12组)。每组又分为6个亚组,其中5个亚组分别加入5种不同终浓度的可溶性混合晶状体蛋白(1,0.5,0.02,0.01,0.005mg/L)溶液,一个亚组不加可溶性混合晶状体蛋白液。每天在倒置相差显微镜下观察细胞生长情况,记录存活细胞数和存活时间。培养2,4,6d后,计数每视野分散的、有突起生长的视网膜神经节细胞数和最长突起长度(每一视野随机取5个细胞进行测量,共30个视野,150个突起)应用Leica QWin图像分析系统。结果:①视网膜神经节细胞存活时间:新生牛血清+DMEM/F12组培养细胞能存活六七天,新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组和胎牛血清+DMEM/F12组培养细胞能存活七八天。②有突起生长的视网膜神经节细胞数目和最长突起长度:在相同培养天数(2,4,6d)和条件下(加入同一终浓度晶状体蛋白)新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组细胞数目均多于新生牛血清+DMEM/F12组[加入0.5mg/L晶状体蛋白,2d时(3.83±4.53比0.14±0.38)个/视野,(4d时14.7±9.62比2.5±3.89)个/视野.P<0.01;6d时(20.13±12.32比5.43±5.62)个/视野,P<0.05];在4d内胎牛血清+DMEM/F12组细胞突起长度明显优于新生牛血清+胎牛血清+DMEM/F12组(P<0.01);加入混合晶状体蛋白后细胞存活时间及突起长度明显长于未加晶状体蛋白组,晶状体蛋白液含量为0.01mg/L时,作用较明显。结论:加入晶状体蛋白液和不同血清的培养基两因素间无交互作用,分别独立地发挥作用。可溶性混合晶状体蛋白可以促进体外培养的视网膜神经节细胞存活和突起生长。
  • 难愈性创面修复局部人血管内皮生长因子165真核表达载体的构建与评价 免费阅读 收费下载
  • 目的:克隆人血管内皮生长因子165cDNA并构建其真核表达载体,为放创复合伤的难愈性创面的促愈修复提供实验基础。方法:实验于2001-09/2003-05在第三军医大学创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室完成。从白血病HL-60细胞提取总RNA,经过反转录-聚合酶链反应扩增编码人血管内皮生长因子165的cDNA序列,将其克隆至pMD18-T载体后进行测序鉴定,然后将该序列插入双顺反子的真核表达载体pIRES2-EGFP的多克隆位点中。观察以下指标①反转录-聚合酶链反应扩增人血管内皮生长因子165 cDNA。②阳性重组质粒pMD18-T-hVEGF165的筛选。③DNA测序鉴定。④阳性重组质粒pIRES2-EGFP-VEGF165的筛选。结果:反转录-聚合酶链反应扩增得到约600bp的目的DNA片段,酶切pMD18-T-hVEGF-65得一与目的片段大小一致的条带,且测序分析其与GeneBank中报道的编码人血管内皮生长因子165cDNA序列完全一致。pIRES2-EGFP-hVEGF165的酶切电泳显示目的条带成功插入真核表达载体pIRES2-EGFP中。结论:成功构建了含有人血管内皮生长因子165cDNA的真核表达载体,如果通过转基因技术可提高血管内皮生长因子165在放创复合伤难愈性创面的局部的表达,有望为修复难愈创面开辟一条新的途径。
  • 牵引成骨两大问题:缩短延迟期与固定期兔下颌骨即刻牵张实验 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察兔下颌骨即刻牵引术后新骨形成情况,并与延迟期骨牵引相比较。方法:实验于2004-05/09在第四军医大学口腔医院颌面外科实验室完成。将18只兔随机分成3组,每组6只。即刻牵张组与延期牵张组均行双侧下颌骨皮质骨切开术,即刻牵张组术后即刻开始骨牵引,延期牵张组术后7d开始骨牵引。两组均牵引10d,2次/d,0.5mm/次,牵引期结束后继续以牵引器固定8周。固定期结束后处死动物,标本行大体、组织学、放射学观察,并进行三点抗弯实验。对照组不进行干预。结果:实验兔3组18只均进入结果分析。①大体测量即刻牵张组和延期牵张组下颌骨平均延长9.5mm,即刻骨牵拉术后下颌骨成骨明显。②X射线示骨间隙内新生骨已基本连接骨缺损,可见骨小梁结构,骨化明显,无骨不连和畸形愈合。③组织学见大量新骨形成,部分形成板层骨,新骨形成以膜内成骨为主。④三点弯法测试牵引区抗弯强度,即刻牵张组成骨区的抗弯强度与延迟牵引组和对照组3组的两两比较数据无差异[(65±18.3),(193±15.4),(197±19.5)MPa,P>0.05]。结论:兔下颌骨即刻牵引术后新生骨质的形成与延迟牵引术后的骨质形成无明显差异。延迟期的长短不会改变下颌骨牵引成骨中新骨形成的特性,在颅颌面骨的牵引中,延迟期并无明显必要。
  • 膝骨关节炎模型兔关节滑液中的糖胺聚糖和透明质酸:变化曲线的意义 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察实验性骨关节炎模型兔关节滑液中作为反映软骨基质分解化化射活性的糖胺聚糖和透明质酸含量的变化趋势。方法:实验于1998-01/1999-12在上海市伤骨科研究所完成。将新西兰大白兔随机分成正常对照组和实验组.每组各18只。实验组用切断兔膝关节前后交叉韧带并切除内侧半月板的方法建立膝骨关节炎模型。正常对照组则常规饲养。术后每组各分为3组,每组63只,分别于4,12和24周时处死。在2,4,8,12,16,20,24周时分别抽取两组大白兔膝关节滑液,用1,9-二甲基亚甲蓝法测定滑液中糖胺聚糖,用放免法测定透明质酸含量,比较两组的差异。结果:正常对照组和实验组在各时点按实验设计处死后取关节软骨进行组织学观察及抽取膝关节滑液进行糖胺聚糖和透明质酸含量的测定,最后纳入结果分析的各组动物数量均为18只。①实验组膝关节滑液中糖胺聚糖水平:随时间而逐渐升高。16周时最高(122±21)mg/L,但到晚期略有下降,至24周时达到(99±11)mg/L,在骨关节炎各期均较对照组显著升高(t=5.4~14.23,P<0.01)。②实验组滑液中透明质酸水平:随时间呈明显下降趋势。2周时最高(385±35)mg/L,24周时最低(111±40)mg/L,在骨关节炎早期(2和4周)较对照组显著升高(t=4.31~5.71,P<0.01);晚期(16.20和24周)较对照组下降(t=2.78,2.67,2.61,P<0.05)。结论:在实验性骨关节炎时.关节滑液中显著升高的糖胺聚糖和早期升高晚期下降的透明质酸反映了骨关节炎过程中软骨基质蛋白聚糖的代谢改变.这种变化曲线对于骨关节炎的病情监测具有一定的价值。
  • 两种固定方法修复股骨髁上骨折的生物力学及生物学性能比较 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨逆行交锁钉与动力髁螺钉固定股骨髁上骨折的生物力学及生物学性能。方法:实验于2003-12-03/19在解放军第一军医大学医学生物力学实验室完成。取成人新鲜尸体股骨下半部标本12具(家属同意),人为造成股骨髁上骨折,用逆行交锁钉行骨折复位内固定与动力髁螺钉行骨折复位内固定,对内固定的标本进行生物力学测试,用SPSS10.0统计软件对实验数据进行分析。结果:逆行交锁钉的垂直压缩位移大于动力髁螺钉[(1.950±0.568),(0.258±0.071)mm.P<0.0001],逆行交锁钉的扭转位移大于动力髁螺钉[(15.165±2.500)。(2.647±0.228)mm。P<0.0001],逆行交锁钉的弯曲度数大于动力髁螺钉(4.568±1.186),(3.052±0.501)°,P<0.0001]。结论:动力髁螺钉的抗压缩、抗弯曲、抗扭转性能比逆行交锁钉大。逆行交锁钉在生物力学性能方面远不如动力髁螺钉,但该器械在手术中可行骨折闭合复位内固定术,骨折愈合快,出血少,可达到骨折的生物学固定要求。
  • 自制异种猪去细胞真皮修复切除瘢痕区创面的愈合质量 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察自制异种猪去细胞真皮基质与自体刃厚皮复合皮移植在瘢痕切除后植皮区的成活率和瘢痕形成情况组织病理学结果,并于单纯行自体中厚皮移植进行比较。方法:选择2004-03/2005-04解放军总医院第三○四临床部烧伤整形科烧烫伤后瘢痕形成患者21例共29处。瘢痕增生伴痛痒症状明显者15例,瘢痕挛缩明显者6例;供皮区正常皮肤者15例,扁平状瘢痕皮肤者6例。其中取23处为实验组;取6例6个部位的另一侧肢体创面作为对照组,参与患者知情同意。①用健康白色家猪制得异种猪去细胞真皮基质。②移植部位:四肢、躯干。完整切除瘢痕,实验组根据创面大小剪裁自制真皮基质,移植最大面积为10cm×8cm,真皮面接触植皮区,自体刃厚皮覆盖其上。对照组切除瘢痕后单纯行自体中厚皮移植。两组切除瘢痕手术操作相同。于术后2周和2个月观察植皮成活率和瘢痕形成情况,13个月时取1例患者复合皮组织进行病理学观察。移植皮成活标准为移植皮片色泽红润平坦,与受皮区基底贴附牢固,创缘愈合好,皮片质地柔软,颜色与周围皮肤接近。结果:按意向处理分析,纳入患者21例,均进入结果分析。①术后两组植皮区大体观察:实验组术后2周,植皮成活率100%(23/23)。可见大部分自体刃厚皮红润,有些植皮区尚可看到自体刃厚皮下的网状真皮支架,刃厚皮与其下的真皮基质结合牢固。术后2个月复查,复合皮平整柔软,弹性较好,关节活动正常,但稍有色素沉着,与对照组的中厚皮覆盖的植皮区效果相似,但实验组供皮区瘢痕形成明显轻于对照组。②组织病理学观察:光镜下可见复合皮皮肤结构完整,但表皮较薄,表皮一真皮连接区较平坦,真皮内可见胶原纤维排列较规整,可见微血管结构及成纤维细胞,少许慢性炎性细胞浸润。结论:应用自制异种猪去细胞真皮支架与自体刃厚皮复合移植,可明显改善瘢痕切除后植皮的愈合质量,经济实用。
  • 瘢痕疙瘩高危个体评估与p53基因第72密码子的多态性 免费阅读 收费下载
  • 目的:应用p53基因检测试剂盒观察不同的p53基因第72密码子多态性基因型及等位基因的表现频率,判断瘢痕疙瘩高危个体。方法:实验于2003-07/2004-10在南方医科大学细胞生物学实验室完成。采用聚合酶链反应-反向点杂交方法建立试剂盒,检测广东地区45例瘢痕疙瘩患者与60例正常对照者外周静脉血标本的p53基因第72位密码子多态性的基因型(脯氨酸/脯氨酸、脯氨酸/精氨酸、精氨酸/精氨酸)与等位基因(脯氨酸、精氨酸),观察不同分布对预测的意义,参与者均知情同意。结果:①脯氨酸/脯氨酸基因型频率:瘢痕疙瘩组明显高于对照组(20/44,15/25,P<0.036)。②脯氨酸等位基因频率;瘢痕疙瘩组明显高于对照组(56/62,57/48,P<0.034)。③脯氨酸/脯氨酸基因型者患瘢痕疙瘩的风险性;与脯氨酸/精氨酸+精氨酸基因型相比明显增高(比值比=2,400.95%可信区间;1.048~5.498)。结论:p53基因检测试剂盒检测出脯氨酸。脯氨酸基因型者患瘢痕疙瘩的风险性高,可以预测瘢痕疙瘩高危个体。
  • 深Ⅱ度烧伤早期电动磨痂对创面愈合的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察深Ⅱ度烧伤早期电动磨痂后大白兔血清肿瘤坏死因子α,白细胞介素6和白细胞介素8浓度的变化情况,以探讨早期电动磨痂术对机体创面修复的影响。方法:实验于2004-03/06在广西医科大学动物实验中心完成。将60只30%深Ⅱ度烫伤大白兔,随机分为磨痂组和非手术组,于伤后不同时间检测两组血清肿瘤坏死因子α,白细胞介素6和白细胞介素8浓度;并记录两组创面的愈合时间。另取6只正常大白兔作对照。结果:伤后24h~3d两组肿瘤坏死因子α,白细胞介素6和白细胞介素-8浓度明显升高并达到峰值,但无明显差别;伤后4~11d,磨痂组血浆肿瘤坏死因子α,白细胞介素6和白细胞介素8浓度明显低于非手术组(t=2.2732,2.0372,1.6991,2.1811,2.0299,P<0.05;t=3.1202,2.5736,3.8060,3.8099,P<0.01);磨痂组创面愈合时间较非手术组明显提前(t=4.3369,P<0.01)。结论:早期电动磨痂治疗大面积深Ⅱ度烧伤创面对机体是安全的,有利于促进创面愈合。
  • 常山酮对人瘢痕成纤维细胞Ⅰ型胶原合成的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:探索常山酮以体外培养的人成纤维细胞胶原合成和生物学行为的影响。方法:于2003-03/06在重庆医科大学附属第一医院,采用人瘢痕体外培养的成纤维细胞,分别将不同浓度的常山酮加入培养基中,在不同时相点观察常山酮对成纤维细胞生物学特性的影响.并应用放射免疫法检测Ⅰ,Ⅲ型胶原含量。结果:常山酮在0.1~10mg/L.对成纤维细胞的形态和增殖活性均未见明显影响;常山酮可抑制成纤维细胞合成Ⅰ型胶原,且随浓度增加作用增强.但不影响Ⅲ型胶原的合成。结论:常山酮可抑制人瘢痕成纤维细胞的Ⅰ型胶原合成,对瘢痕的预防和治疗有实用前景。
  • 不同胎龄胎儿皮肤内应激活化蛋白激酶基因的表达及其变化 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨应激活化蛋白激酶1,应激活化蛋白激酶2,应激活化蛋白激酶3及其上游信号分子(分子丝裂素活化蛋白激酶激酶4和分子丝裂素活化蛋白激酶激酶7)基因在不同胎龄的胎儿皮肤和出生后机体皮肤组织中的表达及其变化特征。方法:实验于2004-01/05在解放军军事医学科学院放射医学研究所毒理研究室完成。用病理学技术检测不同发育时期皮肤的结构特征后,提取18例不同胎龄(13~32周)的胎儿皮肤和6例出生后机体(4~16岁)皮肤组织的总RNA,分离mRNA,用反转录-多聚酶链反应方法检测这5种基因在不同组织中的表达变化规律。结果:在早期妊娠胎儿的皮肤组织中,应激活化蛋白激酶2,应激活化蛋白激酶3,分子丝裂素活化蛋白激酶激酶4和分子丝裂素活化蛋白激酶激酶7基因表达较弱,分别为0.277±0.084,0.077±0.020,0.004±0.005,0.060±0.012,随着胎龄的增加,皮肤组织内这4种基因表达水平逐渐升高,分别为0.383±0.072,0.168±0.078.0.046±0.005,0.105±0.052,在出生后机体皮肤中,这4种基因的转录含量升至最高,分别为0.571±0.061,0.220±0.054,0.081±0.007.0.103±0.027,分别是早期胚胎皮肤的2.1,2.9,20.1和1.7倍(P<0.01)。应激活化蛋白激酶1基因表达水平在中期妊娠胎儿皮肤组织中升至最大为0.307±0.028,然后随着胎龄的增加,该基因表达量逐渐降低,在出生后机体皮肤内该基因表达量是0.111±0.002,与早期妊娠胎儿皮肤相比基因表达水平显著降低(P<0.05)。结论:在早期胚胎皮肤组织中,应激活化蛋白激酶2,应激活化蛋白激酶3,分子丝裂素活化蛋白激酶激酶4和分子丝裂素活化蛋白激酶激酶7基因的低表达可能与皮肤细胞快速增殖、创面迅速愈合、细胞趋向凋亡减少相关。
  • 影响喉癌患者预后因素的多元逐步回归分析 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨喉癌术后影响预后的因素。方法:对沈阳军区总医院耳鼻喉科1992-01/1998-12年收入院手入的209例喉癌标本中随机筛选4例。①40例中按肿瘤TNM分型;声门上型21例,声门型19例,无声门下型,T分期;T2 10例,T3 22例,T4 8例。②患者吸烟情况:20例不吸烟,20例吸烟。③进行5年以上随访,以性别、年龄、病史、吸烟总量、A型血、B型血、AB型血、O型血、术中输血,肿瘤分型,手术范围,颈清扫、肿瘤病理分型、术后放疗、T分期,N分期、肿瘤分期、肿瘤生长方式为自变量,多因素逐步回归分析喉癌手术后影响预后的因不经。结果:①门坎值F=2引入变量,筛选出T分期、吸烟总量及喉癌分型共3项影响预后的显著性因素,他们的偏回归系数分别是-0.453,-0.638,-0.599。②筛选出T分期、吸烟总量及喉癌分型共3项影响预后的显著性因素,吸烟量愈大,T分期愈晚及声门上型患者,预后愈差。结论:①吸烟是一个对喉癌预后有重要影响的因子,喉癌的分型是影响喉癌生存的因素,声门上型喉癌患者较声门型的预后差,局部复发和颈部转移随T分期的提高而增加。②T分期高,吸烟量大,TNM分型为声门上型,是影响喉癌的预后的主要因素。
  • 应用完整原位杂交技术检测人食管癌EC9706细胞中胰岛素样生长因子1受体mRNA的表达 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨人食管癌EC9706细胞中胰岛素样生长因子1受体的表达,及其对反义寡核苷酸胰岛素样生长因子1受体mRNA表达的影响和食管癌发生、转移的意义。方法:实验于2004-09/12在河南省肿瘤病理重点实验室完成。体外分5组培养人食管癌EC9706细胞,其中4组分别用设计合成的3条封闭胰岛素样生长因子1受体不同基因位点的反义寡核苷酸1~3及1条无关寡核苷酸转染.另一组不转染。采用完整细胞原位杂交技术观察各组EC9706细胞中胰岛素样生长因子1受体mRNA表达情况。结果:①胰岛素样生长因子1受体mRNA在食管癌EC9706细胞中呈阳性表达。②3条胰岛素样生长因子1受体反义寡核苷酸转染组EC9706细胞中胰岛素样生长因子1受体mRNA的表达无差异(2.66±0.21,2.63±0.23,2.65±0.22,P>0.05),但均显著低于无关寡核苷酸组及无转染组(5.67±2.86,5.02±2.75,P<0.05)结论:胰岛素样生长因子1受体反义寡核苷酸转染人食管癌EC9706细胞后,可体外抑制EC9706细胞中胰岛素样生长因子1受体mRNA的表达,从而抑制食管癌的发生和转移。为临床预防食管癌的发生、发展和转移提供了理论依据。
  • 表皮生长因子受体与非小细胞肺癌患者预后及术后生存率的关系 免费阅读 收费下载
  • 目的:分析人体表皮生长因子受体1,2,3单独及联合过度表达与非小细胞肺癌患者术后的5年生存率的关系。方法;选用苏州大学附属医院1996-07/1998-12胸外科非小细胞肺癌手术蜡块标本共58例。男39例,女19例;年龄34~78岁。所有患者术前均未接受抗癌治疗。肺鳞癌32例,肺腺癌26例;Ⅰ期肺癌11例,Ⅱ期26例,Ⅲa期14例,Ⅲb期3例,Ⅳ期4例(Ⅲb,Ⅳ期为姑息手术的晚期肺癌);低分化肺癌12例,中分化肺癌31例,高分化肺癌15例;淋巴结转移41例。1999~01/2004~01采用复诊、电话、通信、登门询问的形式对患者的预后进行5年随访。采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法检测有5年随访资料的58例肺癌组织中人体表皮生长因子受体1,2,3的表达。结果;①鳞癌人体表皮生长因子受体1过度表达阳性率[68%(25/37)]明显高于腺癌[32%(12/37)](X^2=6.348,P<0.05);有淋巴结转移患者人体表皮生长因子受体1,2,3及三者联合过度表达阳性率[81%(30/37),82%(27/33),94%(16/17),100%(11/11)]明显高于无淋巴结转移者[19%(7/37),18%(6/33),6%(1/17),(X^2=4.576~6.371,P<0.05);TNM分期Ⅰ+Ⅱ+Ⅲa期人表皮生长因子1,2,3过度表达阳性率[81%(30/37),79%(26/33),65%(11/17)]明显高于TNM分期Ⅲb+Ⅳ期者[19%(7/37),21%(7/33),35%(6/17),X^2=4.518,6.031,12.224,P<0.05~0.01];而人体表皮生长因子受体1,2,3联合过度表达阳性率明显低于TNM分期Ⅲb+Ⅳ期者[45%(5/11),55%(6/11),X^2=23.079.P<0.01]。②人体表皮生长因子受体2,人体表皮生长因子受体3过度表达与病理类型鳞癌和腺癌无相关性(P>0.05);人体表皮生长因子受体1过度表达与肺癌病理类型相关(|r|=0.331,P<0.05)。人体表皮生长因子受体2,1,3过度表达与淋巴结转移及TNM分期相关(|r|=0.279~0.459,P<0.05~0.01),与肺癌的分化程度不相关。人体表皮生长因子受体2过度表达组的5年生存率明显低于非过度表达组(P<0.05)。人体表皮生长因子受体2,1,3联合过度表达组的5年生存率明显低于非联合过度表达组(P<0.01)。结论:有淋巴结转移、鳞癌、TNM分期Ⅰ+Ⅱ+Ⅲa期患者更易检测到人体表皮生长因子受体2,1,3的过度表达阳性;人体表皮生长因子受体2,1,3联合过度表达肺癌患者5年生存率低于人体表皮生长因子受体2,1,3的过度表达患者,人体表皮生长因子受体2的过度表达患者5年生存率低于非过度表达患者。
  • 剂量依赖性热休克处理对肺癌细胞增殖凋亡的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:研究热休克反应在肺癌细胞GLC-82增殖过程中的的作用。方法:采用体外培养人肺癌细胞株GLC-82,并进行增殖实验,将细胞随机分为热休克组和非热休克组,每组再分为4组,对照组,肿瘤细胞坏死因子25μg/L组,肿瘤细胞坏死因子50μg/L组,肿瘤细胞坏死因子100μg/L组。采用吖啶橙荧光染色观察细胞的凋亡情况;采用四甲基偶氮噻唑盐比色法检测肿瘤细胞的细胞增殖情况;以^3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺人试验检测肿瘤细胞的DNA合成情况。每项实验中各组均设5个复孔用于统计分析。主要观察肿瘤坏死因子α对体外GLC-82细胞的细胞毒性作用及热休克对此作用的拮抗作用。热休克对肺癌细胞GLC-82凋亡及对GLC-82DNA合成影响。结果:①肿瘤坏死因子α对体外GLC-82细胞的细胞毒性作用及热休克对此作用的拮抗作用:非热休克组随着肿瘤坏死因子α浓度升高,反应细胞生长抑制率的吸光度值呈明显下降趋势;而热休克组细胞在同样浓度的肿瘤坏死因子刺激作用下,吸光度值下降趋势缓慢,生长抑制作用减弱,表明热休克可拮抗肿瘤坏死因子α对体外GLC-82细胞的细胞毒性作用,促进细胞增殖。②热休克所致肺癌细胞GLC-82凋亡的镜下观察结果:肿瘤细胞经吖啶橙染色后胞核染成黄绿色,胞浆和核仁的RNA为橘红色。加入肿瘤坏死因子α后,细胞呈现凋亡改变。凋亡细胞的荧光镜下特点为:细胞膜及核膜完整;细胞核染色质凝集浓染,呈单个或多个圆球形或月牙形凝集于核膜;细胞体积明显缩小,荧光强度增强,胞膜不断出芽、脱落,细胞变成数个大小不等的内膜包囊的凋亡小体。③热休克对肺癌细胞GLC-82的凋亡作用:经热休克处理后,凋亡细胞数量比较非热休克组明显减少,并与肿瘤坏死因子α呈剂量依赖关系,肿瘤坏死因子α浓度为100μg/L时,热休克组凋亡指数明显低于非热休克组[(9.40±2,12),(16.70±5.19),P<0.01]。④热休克对肺癌细胞GLC-82DNA合成的影响:在非热休克组细胞中,随着肿瘤坏死因子α的浓度增加,闪烁计数率逐渐减低,表明细胞DNA合成就减少:而热休克组细胞在不同浓度的肿瘤坏死因子α作用下,闪烁计数率均比非热休克组增高,表明DNA合成增多,表明热休克拮抗肿瘤坏死因子α的细胞毒作用,而对细胞GLC-82的生长起促进作用。结论:热休克组细胞比非热休克细胞凋亡指数明显降低,细胞生长抑制率明显增高,闪烁计数率值升高,DNA合成增多,热休克明显抑制肿瘤坏死因子α的细胞毒作用,拮抗凋亡作用而促进细胞生长增殖,而且其作用有剂量依赖性。
  • 全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞抑制增殖和诱导分化的实验 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨应用全反式维甲酸处理细胞增殖和分化对人骨肉瘤细胞的影响。方法:实验于2004-08/2005-01在第四军医大学唐都医院解放军骨科中心骨肿瘤研究所完成。以1×10^-6mol/L的全反式维甲酸处理人骨肉瘤OS-9901细胞为试验组,对照组细胞不加全反式维甲酸处理。观察维甲酸对骨肉瘤细胞诱导分化向良性细胞发展的作用。①计算细胞增殖抑制率,通过四唑盐检测。②用药后细胞形态的变化,以显微镜观察。③骨肿瘤较为特异性的碱性磷酸酶表达变化,应用碱性磷酸酶染色观察。④用药对骨形成蛋白2表达的影响,表达增高促进骨肿瘤细胞的增殖,应用免疫组织化学染色观察。⑤细胞的变化应用透射电镜观察。⑥计算成瘤率,并对试验组与对照组肿瘤体积大小进行比较,采用裸鼠移植瘤试验。结果:①全反式维甲酸处理第2天对人骨肉瘤OS-9901细胞生长的平均抑制率为25.2%,第4天达到51.7%,第6天为68.4%。②显微镜下可见处理后的细胞生长及形态有明显改变,增殖缓慢,生长差,数量减少,分裂像少见。③碱性磷酸酶和骨形成蛋白2的表达减少。④透射电镜下出现处理后细胞膜绒毛减少,胞核光滑无切迹,核浆比例下降等良性分化改变。⑤各组肿瘤的成瘤率均为100%,成瘤期对照组约为7d,实验组约为10d,用药组瘤细胞核浆比例较对照组减小,出现大量的凋亡细胞和大片的坏死区,显示有明显抑制增值和向良性转变倾向。结论:全反式维甲酸有抑制骨肿瘤细胞增殖,并诱导其向良性分化作用。
  • 两种膀胱灌注疗法影响浅表性膀胱癌术后患者生活质量和复发等预后因素的比较 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨浅表性膀胱癌术后长期和短期应用吡柔比星膀胱灌注对患者生活质量系数和复发率的影响。方法:纳入解放军总医院泌尿外科2002-04/2005-03浅表性膀胱癌术后患者60例,随机分为改良长期疗法组和短期疗法组,每组30例。改良长期疗法组第1个疗程为8周,行吡柔比星30mg膀胱灌注,1次/周,共8次;第2个疗程为16周,行吡柔比星30mg膀胱灌注每2周1次,共8次;第3个疗程6个月,行吡柔比星30mg膀胱灌注1次/月,共6次;第4个疗程为1年,行吡柔比星30mg膀胱灌注每3个月1次,4次至电切术后2年。短期疗法组疗程为8周,行吡柔比星30mg膀胱灌注,1次/周,共8次。①评价生活质量用自制生活质量量表,包括食欲、精神、睡眠、疲乏、疼痛、泌尿系统排泄、家庭和同事的理解、对癌症的认知、对治疗的态度、日常生活情节10部分。每个项目分5个等级,每个等级标注为1~5分不等,满分50分。②疼痛使用目测类比评分,以10cm垂直线性描述疼痛程度,以患者的感受为标准自己讲述所处疼痛程度并标记分数。分为10个等级,0分为无痛,10分为最痛。③体质量评价通过治疗前后体质量变化,患者治疗后体质量较治疗前增加或减少>3kg为体质量增加或减少;体质量增加或减少≤3kg的患者为体质量稳定。结果:按实际处理分析,术后1年进入结果分析57例,改良长期疗法组28例,短期疗法组29例,术后2年进入结果分析56例,改良长期疗法组27例,短期疗法组29例。①生活质量因子评分:治疗后1和2年改良长期疗法组和短期疗法组疼痛、体质量及生活质量各项指标无差异(P>0.05)。②患者复发率分析:术后1年改良长期疗法组复发与短期疗法组无显著差异[1例(4%,1/57),2例(7%,2/57),X^2=0.316,P>0.05)];术后2年改良长期疗法组复发患者少于短期疗法组[2例(7%,2/56),9例(34%,9/56),X^2=4.945,P<0.05]。结论:浅表性膀胱癌术后采用改良的方法长期应用吡柔比星膀胱灌注,肿瘤复发率低于短期应用组,生活质量系数无明显差别。
  • 头颈部肿瘤患者及一级亲属细胞突变后染色单体断裂率与五加皮的干预效应 免费阅读 收费下载
  • 背景:头颈部肿瘤与遗传因素密切相关,但其一级亲属是否为肿瘤高风险人群?中药五加皮有抗突变的染色体稳定剂,能否提高一级亲属的抗癌能力?目的:探讨头颈部肿瘤的遗传因素及五加皮对其染色体的稳定作用。设计:以人外周血为对象的对照实验。单位:吉林大学基础医学院医学遗传学教研室及第一医院耳鼻咽喉科,英国华威(沃瑞克)大学。对象:对象来源时间为2001-10/2002-03。头颈肿瘤患者及其一级亲属均来自吉林大学第一医院耳鼻喉科,健康人群来自长春市中心血站健康献血者。实验对象共110例,分为3组。①对照组50例,男25例,女25例;来自健康献血者;均无癌家族史,身体健康,无癌症和病史。②患者组30例,男22例,女8例;喉癌20例,鼻咽癌10例;未经放射治疗及抗肿瘤药物治疗。③一级亲属组30例,男19例,女11例;为喉癌、鼻咽癌患者的一级亲属;除有癌家族史外,身体健康。以上参与者均知情同意。方法:采集实验对象外周血,进行淋巴细胞培养,培养周期为72h,在67h时加入致诱变剂博来霉素(15mg/L),抗诱变实验加入博来霉素的同时加入五加皮(800mg/L)。继续培养72h收获细胞,常规方法制片,吉姆萨不显带染色。选择分散好的分裂相,观察染色体的断裂情况。计算平均每细胞染色单体断裂率(即等于本组中所有染色单体断裂的总和除以所有观察的细胞总数)。主要观察指标:每细胞染色单体断裂率。结果:患者3组110例进入结果分析。①应用博来霉素所致的每细胞染色单体断裂率:对照组明显低于患者组及一级亲属组(0.16±0.06.0.48±0.14,0.42±0.12,P<0.01),但患者组及一级亲属组比较无差异(P>0.05)。②应用五加皮和博来霉素后与单纯应用博来霉素所致每细胞染色单体断裂率的比较:患者组及一级亲属组均显著降低(0.48±0.14,0.15±0.08,0.42±0.12.0.17±0.11.P<0.01).结论:头颈部肿瘤患者的一级亲属应列为肿瘤易患高风险人群,加入五加皮发挥了染色体稳定剂的作用,对博来霉素所致的患者及一级亲属每细胞染色单体断裂率有明显的抑制作用。
  • 股骨头缺血性坏死对股骨近端骨组织的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:股骨头缺血坏死可导致患者运动功能障碍,常用的治疗方法是全髋关节置换术,但手术失败原因目前尚不清楚。有作者认为是股骨近端骨组织异常所至,但是缺乏深入研究。目的:探讨股骨头缺血坏死患者的股骨近端骨改变。设计:以患者为研究对象,非随机化同期对照研究。单位:青岛大学医学院附属医院创伤外科。对象:1999-09/2003-05青岛大学医学院创伤外科收治的股骨头缺血坏死患者18例,男12例,女6例;平均年龄(50±5)岁。同期骨关节炎患者18例,男10例,女8例;平均年龄(62±3)岁。方法:对18例股骨头缺血坏死行全髋关节置换术患者的股骨头和股骨近端松质骨标本进行组织学检查,并用18例髋关节骨关节炎患者作为对照组,所有标本采用双盲方式进行检查。主要观察指标:两组患者股骨颈、大转子、小转子、股骨干的坏死评分和坏死阳性率。结果:股骨头缺血坏死患者小转子下方4cm处存在广泛的骨坏死。股骨头缺血坏死组和对照组坏死评分总分分别为82分和16分;坏死阳性率分别为63.89%和19.44%,两组之间股骨近端的骨坏死程度相比较差异有非常显著性意义(P<0.001)。结论:股骨近端的骨改变可能是股骨头缺血坏死行全髋关节置换早期失败的原因之一。
  • 马尾神经受压致腰椎管狭窄模型大鼠脊髓P物质不同时程的表达特征 免费阅读 收费下载
  • 背景:疼痛递质-P物质的表达变化与腰椎管狭窄症所引发的持续性腰腿痛密切相关。但缺乏对马尾神经受压所致腰椎管狭窄模型大鼠脊髓P物质不同时程变化的定性与定量参数的了解。目的:探讨腰椎管狭窄时不同时程脊髓内P物质的表达变化。设计:随机分组对照实验。单位:中国医科大学附属第一医院骨科。对象:实验于2003-02/2004-12在中国医科大学实验动物中心完成。选择成年雄性SD大鼠30只。随机分为5组,1组为正常对照组。其他4组按取材时间不同分为2,4,8,12周组,每组6只。方法:制备大鼠马尾神经受压后的腰椎管狭窄模型,于2,4,8,12周进行取材。应用免疫组化染色方法检测不同时间脊髓中P物质的表达。以光镜下神经元细胞核蓝色着色,细胞浆出现棕褐色颗粒定为P物质表达阳性。每例切片在脊髓横断面随机选取5个高倍视野,计数阳性细胞数。主要观察指标:不同时间脊髓后角中P物质的阳性细胞的表达。结果:在整个实验过程中无动物死亡,全部进入结果分析。①正常对照组偶见神经元细胞阳性着色,但着色较浅。②术后2周组可见大量神经元细胞阳性着色,着色深,阳性细胞数5.08左右。③术后4,8,12周组P物质染色有一定波动,较2周组阳性细胞数降低。但2,4,8,12周组脊髓后角P物质阳性细胞数目均显著高于对照组[(5.08±0.41),(4.02±0.35),(2.58±0.33),(3.45±0.22),(0.85士0.23),t=6.85,5.90,3.49,6.85,P<0.05或P<0.01]。结论:腰椎管狭窄症中马尾神经受压后,不同时程脊髓P物质的阳性细胞数的表达均有不同程度的增高。这种表达是否与伤害性刺激持续传入导致P物质上升,对减轻脊髓水肿和发挥对神经元的保护作用是否有关,有待进一步认证。
  • 构建人突变型p27基因重组腺病毒在结肠癌细胞SW480中的表达 免费阅读 收费下载
  • 背景:大肠癌的发病率呈明显上升趋势。以往的治疗主要为手术治疗、化学治疗和放射治疗。目前基因疗法已应用于大肠癌治疗的临床实践中。目的:构建复制缺陷型重组hp27mt基因腺病毒并检测其在SW480细胞中的表达,探讨腺病毒载体用于基因治疗的可行性及突变p27的抗肿瘤特性。设计:非随机对照实验。单位:郧阳医学院附属人民医院消化内科,郧阳医学院临床医学研究所,武汉大学中南医院消化内科。材料:实验于2002-01/2003-09在郧阳医学院临床医学研究所完成。AgeⅠ,NheⅠ,KpnⅠ,PacⅠ和PmeⅠ等限制性内切酶;Tag酶,T4DNA连接酶;Western blot检测试剂盒;鼠抗人p27kip1多抗,辣根过氧化物酶标记的羊抗鼠IgG单抗;pORF9-hp27mt质粒,腺病毒骨架质粒pAdeasy-1,穿梭质粒pShuttle-CMV,LacZ重组腺病毒,脂质体,结肠癌细胞株SW480。方法:①hp27mt自载体pORF9-hp27mt中切出,经2次亚克隆,插入到穿梭质粒pShuttle-CMV中,形成转移质粒pShuttle-CMV-hp27mt;然后再用PmeI线性化的pShuttle-CMV-hp27mt转化含腺病毒骨架质粒pAdeasy-1的超感受态BJ5183,使其在细菌内发生同源重组。重组质粒鉴定正确后经PacI酶切,转入Ad293细胞,包装成重组腺病毒Ad-hp27mt。采用聚合酶链反应方法对重组腺病毒进行鉴定,用紫外分光光度计进行滴度测定。②用重组p27mt的腺病毒Ad-p27mt感染大肠癌细胞SW480,应用Western Blot检测p27蛋白的表达。主要观察指标:①腺病毒在Ad293细胞中的包装过程。②Ad-p27mt的聚合酶链反应检测Ad-p27mt转染大肠癌细胞后的p27mt的表达。结果:①用含pShuttle-CMV-hp27mt转化含pAdeasy-1的超感受态BJ5183后,可获得约30%的阳性重组质粒。②聚合酶链反应检测表明重组腺病毒DNA中含有目的基因。重组腺病毒滴度为7.95×10^15pfu/L。③转染大肠癌细胞后,p27在SW480中获得了高表达,而未转染细胞和LacZ重组腺病毒转染的细胞中仅有低表达。结论:复制缺陷重组腺病毒能有效介导突变p27基因在肿瘤细胞内表达,为观察突变p27基因对大肠癌的治疗作用提供了有效的基因转移载体。
  • 乳腺癌发生及其5年生存率与bag-1基因的表达 免费阅读 收费下载
  • 背景:bag-1是一种抗凋亡基因,其分泌蛋白是一种已经被确认的多功能结合蛋白。目前bag-1被认为可以作为早期诊断乳腺癌的一种生物标记,但其对乳腺癌预后的评估是否有意义?目的:探讨抗凋亡基因bag-1在乳腺癌组织中的表达及与预后的关系。设计:以乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织为研究对象的对照性实验。单位:解放军第四军医大学西京医院血管内分泌外科。材料:选择1995-05/2000-05手术切除的乳腺癌石蜡包埋组织块100例及2000-03/2000-05手术切除的10例乳腺良性肿瘤和10例正常乳腺组织石蜡标本作对照,以上均来自解放军第四军医大学西京医院病理科存档标本。方法:采用免疫组化链霉素-抗生物素-生物素-过氧化酶复合物法观察100例乳腺癌与10例乳腺良性肿瘤及10例正常乳腺组织的石蜡标本切片中bag-1的表达。主要观察指标:①乳腺癌、乳腺良性肿瘤及正常乳腺组织中bag-1表达水平。②不同bag-1表达水平乳腺癌患者的5年生存率。结果:bag-1在乳腺癌组织中、乳腺良性肿瘤中、正常乳腺组织中阳性表达率分别为85%,10%,10%,差异有显著性(r=29.98,P=0.00);在Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期的乳腺癌组织中bag-1阳性表达率分别为88%,82%,88%,差异无显著性(r=0.61,P=0.75);在导管癌、小叶癌及特殊型癌中bag-1阳性表达率分别为86%,85%,80%,差异无显著性(r=0.16,P=0.95)。对94例获随访的乳腺癌患者中,bag-1阳性表达者5年生存率为79%,bag-1阴性表达者5年生存率为9%,两者差异有显著性(r=0.07.P=0.04)。结论:bag-1在乳腺癌组织中高表达,bag-1在乳腺癌组织中的表达与肿瘤的临床分期,病理分型无关;bag-1可以作为乳腺癌预后的一个生物指标。
  • 肿瘤坏死因子α基因多态性对强直性脊柱炎发病易感性和临床病变程度的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:肿瘤坏死因子α基因多态性与强直性脊柱炎发生与发展的关系是近年强直性脊柱炎遗传学研究的热点。目的:探讨肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性对强直性脊柱炎发病易感性和病变程度的影响。设计:病例-对照观察。单位:第二军医大学长海医院风湿免疫科。对象:随机选择1999-01/2003-12在第二军医大学长海医院风湿免疫科就诊的强直性脊柱炎患者108例,各对象间均无血缘关系。男女比为5.3:1;年龄13~71(30±12)岁,根据骶髂关节破坏程度X射线片评估为Ⅰ~Ⅳ级。另从解放军上海血站(长海医院)随机选取100名健康献血者作为对照,年龄19~56(33±9)岁,男女比为4.9:1,参与者均知情同意。方法:每例参与者取外周血,加乙二胺四乙酸A抗凝后进行肿瘤坏死因子-α基因启动子的聚合酶链反应扩增和纯化;对聚合酶链反应产物测序,并用Chromas 1.62软件展示分析DNA测序结果。②以X射线骶髂关节片分级和肿瘤坏死因子α-308位点(G/C)和(G/A)的对应值评估其对疾病程度的影响。主要观察指标:以DNA直接测序法对-238和-308位点进行基因分型,并分析基因类型与疾病临床表现之间的关系。结果:①肿瘤坏死因子α-238G/G基因型和-238G/A基因型:强直性脊柱炎组有106例(98.1%)和2例(1.9%),正常对照组有95例(95.0%)和5例(5.0%),两组间比较无显著性差异。②肿瘤坏死因子α-308.1.1(G/G)基因型和-308.1.2(G/A)基因型:强直性脊柱炎组有89例(82.4%)和19例(17.6%),正常对照组中有85例(85.0%)和14例(14.0%)。两组比较亦无显著性差异。③根据骶髂关节X射线分级判定疾病严重程度与肿瘤坏死因子α-308位点G/G和G/A基因型之间的关系:强直性脊柱炎患者X射线片Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级时,(G/G)型为3/35/40/11例,(G/A)型为1/12/6/0例。两组差异比较意义显著(GMH:4.77,P<0.05)。结论:在观察对象中未发现肿瘤坏死因子α基因启动子-238和-308位点多态性与强直性脊柱炎发病易感性相关,但根据骶髂关节损害程度X射线分级说明肿瘤坏死因子α基因启动子-308位点的多态性对强直性脊柱炎的严重程度有影响。
  • 颈神经在颈椎间孔及脊神经沟处受嵌压的解剖学因素 免费阅读 收费下载
  • 背景:神经根型颈椎病中神经根能否受累,不仅与所在骨管是否狭窄、周围软组织是否存在炎性病变和肿胀有关,还与神经根外径的相对大小有关。目的:通过颈神经在颈椎间孔及脊神经沟处受累的出现率,探讨神经根型颈椎病发生的解剖学因素。设计:单一样本观察。单位:承德医学院解剖研究室。对象:甲醛固定成尸60具(男28,女32)120侧。方法:在60具成尸上,用精确度0.02mm的游标卡尺和直角规测量:①脊神经沟外口宽度及其沟内段脊神经前支横径。②颈椎间孔及其脊神经根的前后径、上下径。计算颈神经前支横径与相应颈椎脊神经沟外口宽度的比值和脊神经根前后径、上下径与相应椎间孔前后径、上下径的比值。得出颈神经前支横径大于或等于脊神经沟外口宽度的出现率和脊神经根各径线大于或等于相应椎间孔各径线的出现率。主要观察指标:①C3-6经前支横径大于或等于相应脊神经沟外口宽度的出现率。②C3-6上下径、前后径分别大于或等于相应颈椎间孔上下径、前后径的出现率。结果:共测量成尸60具120侧(男56侧,女64侧)。①颈神经根在椎间孔处可造成嵌压男女合计总出现率为24.6%其中女性明显高于男性(35.2%,10.9%,X^=6.272,P<0.01)。②颈神经前支在颈椎脊神经沟处可造成嵌压男女总出现率为6.3%,其中男性明显高于女性(8.9%,3.9%,X^=6.65,P<0.01)。结论:颈神经受累不仅与骨管狭窄有关,而且与周围软组织损伤有关,通过神经根外径与椎间孔的比值和颈神经前支与脊神经沟外口宽度比值.选其≥1的出现率可直接获得神经受压的出现率。
  • 抑癌基因ING1在大肠癌中的表达与突变 免费阅读 收费下载
  • 背景:抑癌基因ING1高表达可使多种癌细胞发生细胞凋亡,并使其细胞在合成前期细胞周期静止。ING1参与p53的信号传递通路,以一种转录活化因子调节p53的活性。目的:探讨人大肠癌组织中ING1基因表达及突变水平与大肠癌临床病理特征的关系。设计:以病理标本为观察对象的对照实验。单位:解放军第三军医大学西南医院普外科。对象:取自1998-10/1999-10在第三军医大学西南医院住院手术患者切除的大肠癌标本52块,于手术中分别取自距肿瘤边缘10cm正常黏膜及新鲜肿瘤组织。患者男29例,女23例;平均年龄50.28岁。方法:检测52块大肠癌组织标本中ING1mRNA及蛋白的表达情况,DNA单链多态性分析法检测基因突变情况。同时应用免疫组织化学方法检测大肠癌中P53蛋白表达情况。主要观察指标:①ING1mRNA及蛋白在结直肠癌中的表达。②P53在结肠癌中的表达。③聚合酶链反应-SSCP分析ING1基因突变情况。结果:①ING1mRNA在结直肠癌标本表达较正常黏膜明显减弱(0.626±0.382,1.166±0.245,P<0.001)。淋巴结转移阳性组肿瘤组织中ING1表达强度较阴性组中显著下降(0.393±0.243,0.960±0.299,P<0.01)。②P53蛋白表达强度与ING1mRNA表达相对强度呈显著正相关(P<0.01)。③52块标本仅检测到1块存在ING1mRNA基因表达突变。结论:ING1基因可能参与了结直肠癌的发生与发展,其降低使结肠癌患者抑癌基因不能发挥。通过ING1mRNA及蛋白表达的下降而不是基因位点的丢失和突变,提示ING1不像传统的抑癌基因那样主要通过基因位点的丢失和突变来参与癌症的发生,可能存在其他机制参与到ING1基因表达的缺失。
  • 轮椅和轮椅使用者(1) 免费阅读 免费下载
  • 川芎嗪注射剂对N-甲基-N-亚硝脲引起大鼠视网膜损伤的拯救效应 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察川芎嗪注射剂对N-甲基-N-亚硝脲诱导SD大鼠光感受器细胞凋亡的保护作用。方法:2003-03/09在中山大学中山医学院实验动物中心,于雌性SD大鼠生后47d,分别经腹腔注射小、中及大剂量的川芎嗪注射剂,1次/d,并于生后50d腹腔注射N-甲基-N-亚硝脲60mg/kg。在N-甲基-N-亚硝脲处理不同时间后处死动物,取眼球。通过dUTP缺口末端标记试剂盒检测光感受器细胞凋亡;视网膜形态学分析测量周边视网膜的总厚度;反转录聚合酶链反应法检测基因c-fos的表达。结果:N-甲基-N-亚硝脲作用24h后,模型组周边视网膜的光感受器细胞凋亡指数为38.0%;川芎嗪注射剂组分别为30.0%,15.6%和8.4%。作用7d后,模型组周边视网膜的总厚度为37μm;川芎嗪注射剂组分别为4l,66和85μm。川芎嗪注射剂可抑制N-甲基-N-亚硝脲诱导的即早基因c-fos的表达。结论:川芎嗪注射剂通过下调基因c-fos的表达,抑制光感受器细胞凋亡,从而部分地保护N-甲基-N-亚硝脲引起的视网膜损伤。
  • 不同浓度雷公藤甲素对光老化皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶的影响:以维甲酸为标准对照 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察基质金属蛋白酶在衰老皮肤真皮成纤维细胞表达中的变化,以及不同浓度雷公藤对其产生的影响,并与标准抗皮肤老化剂芳维甲酸乙酯作比较。方法:实验于2004-01/10在泸州医学院组织学与胚胎学实验室完成。经家属同意后取泸州医学院附属医院产科2004-01/06健康新生儿包皮,建立体外培养真皮成纤维细胞光老化模型,用中药雷公藤的有效成分雷公藤甲素与芳维甲酸乙酯进行干扰。按分组接受处理。正常对照组不予干预;阳性对照组:长波紫外辐射+8-甲氧补骨脂素;维甲酸实验组:长波紫外辐射+8-甲氧补骨脂素+芳维甲酸乙酯;雷公藤甲素实验组:长波紫外辐射+8-甲氧补骨脂素+雷公藤甲素。雷公藤甲素实验组又按剂量分为3组:雷公藤甲素1(10mg/L)、雷公藤甲素2(20mg/L)、雷公藤甲素3(40mg/L)组。①观察衰老皮肤真皮成纤维细胞的基质金属蛋白酶表达的变化用免疫组织化学技术显示。②成纤维细胞形态变化用光学显微镜观察。结果:①阳性对照组基质金属蛋白酶1和基质金属蛋白酶3表达比对照组增强(P<0.05);维甲酸实验组、雷公藤各组比阳性对照组明显减弱(P<0.05);维甲酸实验组、雷公藤各组之间无显著差异(P>0.05)。②各组的成纤维细胞的密度没有明显的差异。在8-甲氧补骨脂素与紫外线作用后2h后,培养成纤维细胞逐渐出现细胞老化的形态学改变。在免疫组织化学染色切片中,可以看到各组成纤维细胞内部基质金属蛋白酶1和基质金属蛋白酶3阳性产物。表达48h最强,然后逐渐减弱,72h逐渐消失。结论:雷公藤甲素3种浓度组对体外培养的真皮成纤维细胞胞质内基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶3的表达的抑制作用均与芳维甲酸乙酯的相似,提示3种浓度雷公藤甲素对皮肤光老化均具有与维甲酸相似的预防和治疗作用,即通过调节基质金属蛋白酶的活性而防治皮肤的光老化。
  • 活血化瘀汤对骨折愈合过程中诱导型一氧化氮合酶基因表达的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察活血化瘀汤对骨折愈合中诱导型一氧化氮合酶mRNA表达的影响,从而调控成骨作用。方法:实验于2002-12/2004-08在华中科技大学基础学院分子生物学实验室完成。将24只SD大鼠胫骨中段闭合骨折骨髓内克氏针固定制成骨折模型,随机分为活血化瘀汤组(n=12)及生理盐水组(n=12);于骨折后4,7,14,21d收集骨痂样本,反转录聚合酶链反应测定诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达水平。结果:24只大鼠均进入结果分析。骨折后7,14,21d所有骨痂样本诱导型一氧化氮合酶的mRNA表达增强,骨折后14d达到峰值,活血化瘀汤组与生理盐水组比较,骨折后7,14d骨痂诱导型一氧化氮合酶基因表达显著性增强(P=0.0037)。结论:活血化瘀汤可能通过增加早期大鼠骨痂诱导型一氧化氮合酶源性一氧化氮,影响骨细胞增殖功能,从而促进骨折愈合。
  • 姜黄素Ⅲ对体内肺腺癌移植瘤裸鼠血管生成的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察中药姜黄的主要活性单体成分中双脱甲氧基姜黄素(姜黄素Ⅲ)抗肿瘤血管生成作用及对内皮细胞生长的抑制作用。方法:本实验于2003-10/2004-04在解放军第三军医大学大坪医院实验动物中心(动物实验)和解放军第三军医大学西南医院烧伤研究所(细胞培养及免疫组化)完成。实验选用BALB/c裸雄性小鼠15只。建立裸小鼠移植模型后,将15只荷有A549肺腺癌的裸小鼠随机分成3个组:①阴性对照组:含60mL/L无水乙醇和60mL/L聚乙二醇400的水溶液,0.2mL/次,隔日腹腔注射1次,共8次。②阳性对照组:O-(氯乙酰甲酰)夫马菌素醇30mg/kg,0.2mL/次,隔日腹腔注射1次,共8次。③姜黄素Ⅲ组:姜黄素Ⅲ100mg/kg,0.2mL/次,隔日腹腔注射1次,共8次。治疗结束后取移植瘤组织,应用免疫组化染色检测移植瘤中CD34,标记微血管密度、血管内皮生长因子、血管内皮生长因子受体1、血管内皮生长因子受体2的表达。结果:15只小鼠全部进入结果分析。姜黄素Ⅲ组微血管密度显著少于阴性对照组[(40.13±7.05),(76.67±10.48)条/200倍视野,P<0.01];姜黄素Ⅲ组血管内皮生长因子及其受体血管内皮生长因子受体1,2表达的阳性组织相对灰度值明显低于阴性对照组(1.63±0.13,1.47±0.12,1.48±0.15;2.49±0.15,1.78±0.12,2.27±0.18,P<0.01)。结论:姜黄素Ⅲ具有确切的抗人肺腺癌细胞系A549裸鼠移植瘤血管生成作用,可能与其抑制移植瘤中肿瘤细胞和/或内皮细胞血管内皮生长因子及其血管内皮生长因子受体1,2的表达有关。
  • 姜黄素对大鼠肠黏膜肿瘤坏死因子α及白细胞介素4的调控作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:探索中药姜黄素制剂对肠炎模型大鼠肠黏膜肿瘤坏死因子α及自细胞介素4的调控作用。方法:实验于2002-01/2005-01在南方医科大学动物实验中心及南方医院消化研究所完成。180只大鼠随机分为正常乙醇对照、模型、柳氮磺胺吡啶对照、姜黄素预防、姜黄素治疗、N-乙酰半胱氨酸对照组,每组30只。除正常乙醇对照组用体积分数为0.5的乙醇2mL灌肠外,其余各组均采用50g/L三硝基苯磺酸50mg溶于体积分数为0.5的乙醇2mL中灌肠,建立大鼠肠炎模型。柳氮磺胺吡啶对照组在造模前3d给予5g/L柳氮磺胺吡啶;姜黄素预防组在造模前3d给予20g/L姜黄素;姜黄素治疗组在造模后立即给予20g/L姜黄素;N-乙酰半胱氨酸对照组在造模前3d给予2g/L N-乙酰半胱氨酸。造模2周后处死存活大鼠,分析大鼠体质量。应用半定量反转录聚合酶链反应检测肿瘤坏死因子α(致炎因子)及白细胞介素4(抑炎因子)mRNA的表达。结果:①实验大鼠造模过程中死亡30只,进入结果分析150只,正常乙醇对照组30只、模型组18只、柳氮磺胺吡啶对照组23只、姜黄素预防组28只、姜黄素治疗组24只、N-乙酰半胱氨酸对照组27只。②大鼠体质量分析:柳氮磺胺吡啶组、姜黄素预防组、姜黄素治疗组、N-乙酰半胱氨酸组显著高于模型组(P<0.05),N-乙酰半胱氨酸组显著高于柳氮磺胺吡啶组、姜黄素预防组、姜黄素治疗组(P<0.05),柳氮磺胺吡啶组、姜黄素预防组、姜黄素治疗组组间比较无显著差异(P>0.05)。③姜黄素可显著抑制肠黏膜肿瘤坏死因子αmRNA的高表达,各组均未见白细胞介素4mRNA的表达。结论:姜黄素与柳氮磺胺吡啶治疗对改善大鼠消瘦效果相同。姜黄素能使肠炎大鼠肠黏膜肿瘤坏死因子α水平下调,从而对其肠黏膜有免疫保护作用,经提纯的天然单体姜黄素可能具有肠黏膜炎性病变的组织修复作用。
  • 猫儿眼提取物对荷瘤小鼠肝癌细胞毒性及免疫功能的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨猫儿眼提取物对荷瘤小鼠肝癌细胞的毒性作用和对免疫功能的影响,并以5-氟尿嘧啶为标准对照。方法:实验于2003-07/10在兰州军区总医院实验动物科完成。选BALB/c小鼠120只,于皮下接种肝癌瘤液0.01mL/g体质量。随机分为4组,每组30只。接种肝癌瘤液24h后,模型组给予等量蒸馏水;5-氟尿嘧啶组每天腹腔注射5-氟尿嘧啶100mg/k异体质量;甘肃猫儿眼提取物1组每天口服甘肃猫儿眼提取物10g/kg体质量;甘肃猫儿眼提取物2组每天口服甘肃猫儿眼提取物20g/kg体质量。连续给药10d后,分别取40只(每组取10只)对荷瘤小鼠瘤体、胸腺和脾脏质量以及免疫功能的影响进行测定分析。结果:120只小鼠均进入结果分析。①甘肃猫儿眼提取物对肝癌细胞增殖的抑制作用:5-氟尿嘧啶组和甘肃猫儿眼提取物2组肝癌细胞的抑制率分别为24.6%和64.7%;甘肃猫儿眼提取物1组肝癌瘤质量比对照组增长了4.7%。②甘肃猫儿眼提取物对肿瘤组织的毒性作用:对照组肝癌细胞生长活跃,核分裂像较多见;5-氟尿嘧啶组、给药组肝癌瘤体均见部分坏死,或在坏死灶边缘出现纤维组织增生,间质水肿。③甘肃猫儿眼提取物对肝癌荷瘤小鼠免疫功能的影响:与对照组比,甘肃猫儿眼提取物2组小鼠碳粒廓清指数提高了59.4%,胸腺和脾脏的质量分别增加了51.9%和33.0%,血清溶血素值增高了31.2%。结论:猫儿眼提取物比5-氟尿嘧啶对肝癌细胞增殖具有更明显的抑制作用,且剂量高抑制作用强,其作用与提高荷瘤小鼠免疫功能有关。
  • 芦荟大黄素对瘢痕成纤维细胞增殖的时间-剂量依赖性效应 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察中药大黄活性成分芦荟大黄素对瘢痕成纤维细胞增殖的影响方法:实验于2001-06/2004-12在广东医学院整形外科研究所完成成纤维细胞取自广东医学院附属医学整形外科患者手术切除的增生性瘢痕组织,瘢痕组织经处理后进行成纤维细胞原代及传代培养至第3~8代细胞分别用不同浓度芦荟大黄素处理对数生长期成纤维细胞[(0为对照组),24,48,72h],观察成纤维细胞生长状况以倒置相差显微镜下观察并拍照。观察加入不同浓度(0,20,40,60,80mg/L)芦荟大黄素后24、48、71h对成纤维细胞增殖的影响采用四甲基偶氮唑盐比色法。不同浓度芦荟大黄素作用24h后对成纤维细胞周期的影响采用流式细胞术检测。结果:①体外培养成纤维细胞的形态学改变:正常存活的成纤维细胞生长增殖旺盛分布密集,平行极性排列连接成片,细胞清晰。细胞呈梭形,胞体饱满,有两三个扁平而长的突起相联系:胞核较大、呈卵圆形,染色质结构疏松。用药组随药物浓度加大、作用时间延长,活细胞数量逐渐减少,细胞间隔增宽。细胞突起明显缩短,甚或消失。细胞变圆,胞体缩小。细胞质减少,有的呈空泡状,染色质浓缩边聚,胞核模糊或断裂成块状。②芦荟大黄素对成纤维细胞增殖的量效及时效影响:四甲基偶氮唑盐比色法显示芦荟大黄素对成纤维细胞的抑制率呈现浓度依赖性增高(F=6602.102.38 214.554,46 427.565,P<0.01),且随着时间的延长,同一浓度情况下抑制率明显增高。③芦荟大黄素对成纤维细胞细胞周期调节的剂量依附性趋势:随着用药浓度增大DNA合成前期细胞百分数增多,DNA合成期、DNA合成后期的细胞含量逐渐减少(F=6813.961,1064.506,1654.187.P<0.01),成纤维细胞增殖指数呈剂量依赖性降低趋势(51.56±1.21,34.50±1.43,25.30±2.11,14.71±0.82,F=6963.487,P<0.01)。结论:芦荟大黄素以剂量、时间依赖性的方式抑制瘢痕成纤维细胞生长,还可剂量依赖性降低成纤维细胞增殖指数并诱导成纤维细胞发生凋亡。通过凋节细胞周期并诱导细胞凋亡从而抑制瘢痕成纤维细胞的生长增殖。
  • 瑞香素对醋酸、热板及电刺激致痛小鼠的镇痛作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨瑞香科植物提取物瑞香素对醋酸、热板测痛仪、电刺激致痛小鼠的镇痛作用。方法:实验于2004-03/07在赣南医学院科研中心实验室完成。①选取昆明种小鼠75只,予以醋酸致痛后随机分为5组,每组各15只,分别为生理盐水组、盐酸吗啡组、瑞香素50mg/kg组、瑞香素25mg/kg组、瑞香素12.5mg/kg组。各组灌胃给药40min后腹腔注射6g/L冰醋酸0.01mL/g,5min后再分别记录各组小鼠10min内的扭体次数。②另选取小鼠75只,随机分为5组,分组同前,采用热板法用GJ-8402型热板测痛仪致痛,准确调节热板温度在(55.0±0.5)℃,并用水银温度计校对。以放入至小鼠舔后足的时间作为痛反应的指标,此时间即为痛阈值,选择痛阈值不超过30s的小鼠。各组腹腔注射给药(药物同前)30min后,测痛阈值。③采用电刺激法观察小鼠80只,随机分为4组,每组20只,生理盐水组、盐酸吗啡组、瑞香素50mg/kg组,瑞香素25mg/kg组。将小鼠固定,用750mL/L乙醇擦去尾部皮脂,待乙醇挥发后,尾部涂一薄层导电胶。用电压3V,连续A脉冲,频率1Hz,波宽为0.04s的方波刺激小鼠尾部,连续3次,每次间隔为5min.连续刺激3次内有2次嘶叫反应者可予采用。给药后15,30,45,60,90min用同样条件重复刺激,凡连续2次不引起嘶叫者,表示药物有镇痛作用,最后分别求各组镇痛抑制率。结果:3种实验275只小鼠均进入结果分析。①扭体反应次数:醋酸致痛后,生理盐水组为(54.28±8.14)次,盐酸吗啡组0次,瑞香素50mg/kg组(8.36±1.63)次,瑞香素25mg/kg组(17.52±4.39)次,瑞香素12.5mg/kg组(30.81±6.76)次,与生理盐水组比较差异显著。②热板测痛仪痛阈反应:生理盐水组痛阈值为(20.41±2.41)s,盐酸吗啡组(42.68±2.47)s,瑞香素50mg/kg组(35.89±2.14)s,瑞香素25mg/kg组(31.67±3.10)s,瑞香素12.5mg/kg组(28.80±3.17)s,与生理盐水组比较差异显著。③对电刺激疼痛的反应率:生理盐水组15,30,45,60,90min镇痛抑制率分别为5%,5%,5%,5%,0,盐酸吗啡组95%,100%,100%,65%,15%,瑞香素50mg/kg组25%.55%,85%,45%,0,瑞香素25mg/kg组15%,30%,35%,20%,0,与生理盐水组比较差异显著。结论:瑞香素具有较明显的镇痛作用,对不同致痛模型显示了对抗作用,同时瑞香素对醋酸诱发的扭体反应,对热板所致疼痛镇痛效果较好,对电刺激引起的疼痛效果稍差,且其镇痛作用以大剂量好,并明显旱剂量依赖关系。
  • 薏苡仁脂抗肿瘤转移反应性基因与微矩阵芯片技术分析 免费阅读 收费下载
  • 背景:从中药薏苡仁中提取具有抗癌活性的康莱特注射液,被广泛应用于肺癌的治疗。实验表明,对多种肿瘤株,包括LA795肺转移具有明显抑制作用。运用基因芯片技术,寻找康莱特小鼠肺腺癌LA795模型肺转移的差异表达基因。目的:应用基因芯片技术观察薏苡仁脂抗肿瘤转移反应性基因。设计:以实验动物为观察对象的对照实验。单位:中国中医研究院西苑医院肿瘤科。对象:实验于2003-02/08在中国中医研究院西苑医院实验室完成。接种LA795肺腺癌瘤株的T739小鼠,共40只,随机分为2组,每组20只。方法:以LA795肺腺癌小鼠肺转移组织,制备mRNA探针,应用含有4096条鼠基因的cDNA表达谱芯片,用ScanAr ray 3000扫描仪扫描芯片荧光信号图像,分析差异表达的基因。主要观察指标:两组实验动物的差异表达基因。结果:发现在康莱特治疗组和空白对照组存在差异表达的基因,其中重复3次均差异表达的基因有27条,均表达增高的基因25条,表达降低的基因2条。其中12条是小鼠肌cDNA文库中的基因。经观察发现6条可能为与肿瘤的发生与发展及转移相关的基因。结论:运用基因表达谱芯片能够有效筛查出中药康莱特的相关差异基因。
  • 脊髓损伤修复的相关阻碍因素 免费阅读 收费下载
  • 目的:损伤脊髓具有再生潜势,但多种抑制因素阻碍了脊髓损伤的修复,如神经细胞凋亡、神经营养因子缺乏、髓鞘蛋白及胶质瘢痕等因素均对脊髓损伤修复起抑制作用。资料来源:应用计算机检索Medline 1993-07/2004-06的文章,检索词为”spinal cord injury,apoptosis,neurotrophic factors,MAG,Nogo,CSPGs”,限定文章语言种类为English;同时检索http://www.wanfangdata.com.cn1993-07/2004-06的文章,检索词为“脊髓损伤、凋亡、神经营养因子、髓鞘相关糖蛋白、轴突生长抑制因子、胶质瘢痕”,限定文章语言种类为中文。资料选择:纳入标准:①抑制脊髓损伤修复因素的研究。②随机对照实验研究。排除标准:①综述文献。②重复研究。资料提炼:共收集到137篇与脊髓损伤修复相关的文献,其中20篇符合纳入标准,排除的117篇文章系同一类重复性研究和综述文献。资料综合:①神经细胞的凋亡:脊髓损伤后bcl-2蛋白仅有少量表达,而bax蛋白大量表达。说明脊髓损伤后促进凋亡因子占优势,而保护因子不足从而使神经细胞向凋亡方向发展。②神经生长的促进因子缺乏:中枢神经系统轴突损伤后,由于星形胶质细胞不能像周围神经系统的许旺细胞那样产生多种神经营养因子,而是产生多种抑制因素,不能形成利于轴突再生的微环境。③髓鞘蛋白的抑制作用:脊髓髓鞘内具有多种蛋白成分,其中髓鞘相关糖蛋白和轴突生长抑制因子-35/250的轴突再生的抑制作用较为明确。而中枢神经系统中髓鞘相关糖蛋白含量为周围神经系统中的10倍。④胶质瘢痕的抑制作用:致密的胶质瘢痕是轴突再生的物理屏障,对轴突的再生起着直接的阻碍作用。而胶质瘢痕内大量的抑制因子则构成阻碍神经轴突再生的化学屏障。结论:神经细胞凋亡、神经营养因子缺乏、髓鞘蛋白及胶质瘢痕等因素对脊髓损伤修复具有抑制作用。
  • 关节软骨损伤后的再生过程及其调节 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨关节软骨损伤后软骨再生的过程和细胞分子水平的调节。资料来源:应用计算机检索Medline数据库1980-01/2002-12关于关节软骨损伤后再生的文章,检索词“articular cartilage,bone regeneration,tissue engineering”,限定文章语言种类为英语。资料选择:对资料进行初审,纳入标准:①关节软骨损伤后的再生试验。②随机对照基础试验。排除标准:①非随机基础实验的研究。②重复研究、综述文献。资料提炼:共收集到151篇关于关节软骨损伤后再生的随机和未随机试验的文献,排除非随机基础实验的研究87篇,重复研究11篇,综述文献31篇。纳入符合标准的文献22篇。资料综合:由于宿主滑膜或骨髓内免疫系统的攻击,异体移植呈现一慢性免疫排斥反应,最终导致手术失败。以受者血浆浸润被移植软骨,可降低免疫反应。骨膜成软骨是其成骨前一过渡阶段,即软骨内骨化前期表现,因而与向骨转化有着必然的联系,这种远期效果不稳定的缺陷,使得必须不断探索更完善的修复方法。单纯组织移植易丢失,且细胞缺乏三维立体空间进行营养交换和生长代谢,细胞不能形成组织。同时,自体细胞来源受限,异体细胞游离于体液中又易受免疫攻击,因而不可能单独用于软骨缺损的修复。随着材料学的进展及组织工程学研究的深入,人们将会找到性能更优越的材料最大限度的促进关节软骨的完全修复。结论:有关关节软骨的愈合和再生,在技术上必须发展适当的支架和附着方法以及局部和短期的生长因子和细胞因子的传递方法,生物学挑战包括产生软骨数量和质量的变化、随年龄改变的衰老、与周围软骨结合和软骨的重建。最重要的是阐明软骨再生的过程和细胞分子水平的调节,最大限度地发展和完善这项技术。
  • 满足脊柱、椎间隙及神经根生物学需求的腰椎间融合器 免费阅读 收费下载
  • 目的:腰椎融合术结合腰椎间融合器植入对治疗腰椎退行性疾病具有维持椎间隙高度、减轻神经根压力、维持脊柱稳定度等优势。介绍各种不同椎间融合器在生物力学、材料及外形上的特点,以及相关手术内容应符合脊柱功能的生物学要求。资料来源:应用计算机检索NCBl Entrez PubMed 1990-01/2004-05相关腰椎间融合器的文章,检索词“lumbar interbody fusion cage”,限定文章语言种类为英语。计算机检索万方数据库1990-01/2004-05关于腰椎间融合器的文章,限定文章语言种类为中文,检索词“腰椎间融合器,椎间融合器,腰椎融合术”。资料选择:对资料进行初审,纳入标准:①腰椎间融合器的种类、材料及外形的进展。②各种腰椎间融合器的生物力学及其生物学特性。③腰椎间融合器的临床应用。排除标准:重复研究、综述、Meta分析类文章。资料提炼:共收集到74篇相关文献。25篇文献符合纳入标准。排除的49篇为重复或雷同内容。资料综合:25篇文献中,8篇从历史沿革、材料、形状等角度介绍了椎间融合器逐渐适应根、椎间隙、脊柱等压力的进程;9篇详细的以相关生物力学、组织学等角度,以试验方式证实了腰椎间融合器能够恢复腰椎正的常生理状态;8篇涉及腰椎间融合器在使用中的并发症及手术注意事项。结论:腰椎间融合器从材料学、生物力学等角度的进展,使其在材质、外形设计、手术方式等方面能够较好的满足椎间隙、神经根、脊柱等的压力,维持腰椎正常生理功能的生物学要求。在手术中,合理的选择可以在发挥融合器功能的同时避免并发症的发生。
  • 皮肤创伤修复与细胞因子的网络式相互调节 免费阅读 收费下载
  • 目的:在皮肤创伤愈合过程中,各种细胞的再生与分化受多种细胞因子的特异性或普遍性的调控。其中发挥重要作用的有转化生长因子、表皮生长因子,纤维母细胞生长因子、血管内皮生长因子、血小板源生长因子、P物质等细胞因子。资料来源:应用计算机检索CNKI、万方数据库1990-01/2004-06期间关于皮肤创伤修复与细胞因子相关文章,检索词为“伤口愈合、细胞因子”,并限定文章语种为中文;同时计算机检索Medline数据库1990-01/2004-06期间关于皮肤创伤修复与细胞因子相关文章,检索词为“wound healing,cytokines”,并限定文章语种为“English”。资料选择:对资料进行初审,选取含有创伤愈合相关细胞因子的文章,然后进一步提取与皮肤愈合相关细胞因子的实验与临床研究,并查找全文。根据相关性大小排序,选取最相关的6种细胞因子作为资料收集纳入标准。资料提炼:共收集82篇关于参与皮肤伤口愈合的细胞因子的文章,27篇符合纳入标准.排除55篇文章。资料综合:27篇文章中包括了6种参与创伤愈合细胞因子,这些因子的分布与作用均有其特点。在伤口愈合过程中各种细胞因子之间形成网络式的相互调节。结论:伤口愈合过程中各种细胞因子之间形成网络式的相互调节,机制复杂,虽然其含量变化及分布已有报道,但是精确的阐述作用机制的却不多。另外瘢痕的形成和及特殊情况下创伤难愈的问题一直是研究的热点,所以无瘢痕愈合以及糖尿病患者促伤口愈合等问题是值得深入研究的。
  • 转录因子在恶性黑色素瘤细胞凋亡失调中的作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨转录因子信号传导和对应的效应基因在抑制恶性黑色素瘤细胞凋亡中的作用。资料来源:应用计算机检索Pubmed 1995-01/2004-10的相关文章、检索词为“transcription factor,melanoma,cell apoptosis,并限定文章语言种类为English。同时计算机榆索中国期刊全文数据库、万方数据库的相关文章,限定文章语言种类为中文、检索词为“转录因子、黑色素瘤、细胞凋亡”。资料选择:对资料进行初审,选取有关黑色素瘤细胞凋亡和转录因子信号传导及其效应基因诱导黑色素瘤凋亡的文章,并查找全文:资料提炼:共收集到60篇英文全文,14篇中文全文,其中15篇英文和3篇中文符合本研究要求,排除重复或类似的同一研究。资料综合:针对转录因子在黑色素瘤细胞凋亡中的作用,对检索出文献中众多观点进行提炼综合,侧重于国外最新进展。结论:转录因子的活性及信号转导的途径变化,改变了下游效应基因的功能,抑制了恶性黑色素瘤细胞的不同凋亡途径,从而使恶性黑色素瘤细胞的自发凋亡减少;通过调控这些转录因子的信号传导或许能使恶性黑色素瘤患者的转移发生率降低,提高治疗的敏感性,对患者机体功能的康复有着重要意义。
  • 肩关节周围炎的多种病因病理学说 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨引发肩关节周围炎的多种病因及病理变化学说。资料来源:应用计算机检索中国期刊全文数据库1994/2004的相关文章.限定文章语言为中文。检索词“肩周炎、肩关节周围炎、发病机制、病因、病理”。资料选择:对资料进行初审,选取实验性研究,然后筛除低水平重复性文章和综述,对剩余文献进行全文阅读。纳入标准:①实验性研究。②临床治疗方法的研究。资料提炼:共收集了59篇文章,19篇符合纳人标准,其余40篇文章均为重复内容。资料综合:在19篇文章中,综合筛选出引发肩关节周围炎的7种病因(年龄因素、风寒湿侵袭、解剖学因素、肩部活动减少、肩部急慢性损伤、神经损伤因素和其他因素)和7种病理变化(慢性炎症学说、微循环障碍学说、退变性因素、纤维增生因素、肩周肌群痉挛、蛋白多糖成分改变和自由基代谢失调)。结论:肩关节周围炎临床症状明确,但所致疾病的病因病理复杂。
  • 骨髓基质细胞与中枢神经系统损伤和修复 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨骨髓基质细胞生物学特性、增殖分化能力和在中枢神经系统的多潜能应用及其作用机制。资料来源:应用计算机检索Medline1994-01/2004-12与骨髓基质细胞和中枢神经系统损伤和修复相关的文章,检索词“bone marrow stem cells,central nervous system,并限定文章语言种类为English,同时计算机检索万方数据库2000-01/2004-12相关的文章,限定文章语言种类为中文,检索词为“骨髓基质细胞,中枢神经系统”。资料选择:就检索到的200余篇文献进行筛选,选择以骨髓基质细胞用于中枢神经系统损伤和修复的基础研究为主要内容的文献60多篇,其中研究内容相似的,以近5年且发表在较权威杂志者优先,排除综述类文献和Meta分析。资料提炼:将筛选的22篇文献进行分类,7篇研究骨髓基质细胞的生物学特性,5篇与骨髓基质细胞增殖分化能力相关,10篇与骨髓基质细胞在中枢神经系统的应用及其作用机制相关。资料综合:骨髓基质细胞修复中枢神经系统损伤有巨大潜力。通过局部、脑室系统及动脉、静脉植入骨髓基质细胞均发现其在中枢神经系统内长时间存活并集中于损伤区,且有着向神经细胞分化的表现。脑内特殊微环境对其迁移、分化起着重要的诱导作用,同时通过移植骨髓基质细胞可改善损伤的神经功能,此外,骨髓基质细胞对中枢神经系统的神经干细胞也有积极的影响作用,可促进神经再生及可塑性的增强。但目前在骨髓基质细胞的分离、鉴别等方面还存在一些问题有待解决。结论:骨髓基质细胞具有多向分化潜能,在适宜条件下可分化为神经元和星形胶质细胞,能在人类中枢神经系统疾病中起到修正和更改的潜在作用,但其对神经功能损伤恢复的具体机制仍不是十分明确。
  • 胚胎皮肤无瘢痕愈合机制研究进展 免费阅读 收费下载
  • 目的:创伤后的愈合方式是创伤愈合过程中的重要环节,胎儿皮肤创伤后的无瘢痕愈合是人们追求的理想愈合模式。回顾近年无瘢痕愈合机制研究的结果,以探索胚胎皮肤无瘢痕愈合的机制。资料来源:应用计算机检索Mediline数据库1970-01/2003-12期间关于胚胎皮肤无瘢痕愈合机制相关文章,检索词“fetus,skin,scarless healing”,限定文章语言种类为“English。资料选择:对资料进行初审,筛除非愈合机制的研究,对剩余的文献查找全文,以相关无瘢痕愈合机制基础实验作为纳入标准。排除无瘢痕愈合临床实验和现象研究。资料提炼:共收集到48篇与胚胎无瘢痕愈合相关的实验研究,16个实验符合纳入标准,排除32篇。资料综合:16个实验从胎儿的生长环境、对创伤的炎症反应、肌体内纤维母细胞及细胞外基质、以及众多细胞因子的调节等等方面寻找其与无瘢痕愈合的关系。结论:胎儿的生长环境与伤后无瘢痕愈合机制关系不大。胎儿对炎症的低反应性、胎儿不同的细胞外基质、胶原纤维的成分、细胞因子可能也参与了无瘢痕愈合过程、基因表达调控在其过程中可能也起重要作用,但无瘢痕愈合的具体机制还不明了,有待进一步研究阐明。
  • 慢性疼痛的生理学基础(2) 免费阅读 免费下载
  • 如果把初级传入神经元(脊髓后根神经节神经元)称为伤害信息传导通路的第一级,第二级神经元就位于脊髓后角或三叉神经脊束核。后角按其细胞结构不同可分为10层。特异性伤害性感受神经元主要位于第Ⅰ层;非特异性伤害性感受神经元主要位于第Ⅴ层。疼痛的高级中枢位于何处?目前还不能作出明确的答复。丘脑的某些核团(腹后外侧核、中央外侧核、束旁核等)肯定起着重要作用,大脑皮质的体感Ⅰ区、Ⅱ区及眶额皮质、运动皮质等也都参与。但是,迄今为止,应用正电子扫描术(PET)、功能性磁共振术(fNMR)。尚未发现脑内某一恒定的部位专司疼痛。
  • 余英豪主任医师·硕士导师 免费阅读 免费下载
  • 现任南京军区福州总医院病理科主任,主任医师,硕士生导师中国人民解放军病理专业委员会常务委员,军事病理专业组、诊断病理专业组委员,国际肾脏病学会会员,中华医学会福建分会理事福建省病理学会副主任委员,南京军区医学科学委员会委员及病理专业委员会副主任委员等学术职务,同时受聘担任国家科技部国际科技合作重点项目计划项目评审专家。
  • 王佩华教授·主任医师 免费阅读 免费下载
  • 上海医科大学医学系本科。上海第二医科大学九院整形外科硕士。曾进入“上海市中医专科紧缺人才培训班”学习。担任上海医学会耳鼻咽喉专业委员会青年委员,上海医学会变态反应专业委员会委员,上海中医药学会耳鼻咽喉分会委员和上海市耳鼻咽喉专家咨询会诊中心秘书,兼任《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》通讯员,《中国临床康复》编委。
  • 游庆军副主任医师·医学博士 免费阅读 免费下载
  • 研究方向:肺癌的基础及临床研究。
  • 余慧华副主任医师·康复科主任 免费阅读 免费下载
  • 在工作中将中医学“天人相应”的整体观念和辨证施治的学术思想运用于指导临床康复对象的选择、康复适应证的辨证、康复治疗原则的确定及康复方法的运用等多方面,将丰富的中医养生康复医学的理论和方法应用于临床,反复验证,不断总结、整理提高,与现代康复理论和方法相结合形成了西医辨病、中医辨证、中西医结合康复治疗的特色,取得了整体康复、辨证康复、功能康复的良好疗效。
  • 樊仁才副主任医师·医学硕士 免费阅读 免费下载
  • 从事骨科临床工作10余年,先后在南方医院、成都军区昆明总医院、广州军区武汉总医院学习,能开展骨科各类手术,对四肢及脊柱创伤、老年骨质疏松的治疗有一定的造诣。
  • [临床研究]
    计算机辅助下相关数字影像资料对人工全膝关节置换术的优化作用
    高能震波治疗节段性骨缺损的成骨效能
    膝关节韧带断裂重建术后的早期康复干预:与非系统康复的效果比较
    人工肩关节置换术18例2年肩关节功能恢复效果随访(刘洋 蔡林 余国荣 顾洁夫)
    计算机辅助个体化下颌骨缺损的功能性修复
    数字化三维重建技术定量评估青少年特发性脊柱侧弯胸椎椎弓根的形态变化(张永刚 王岩 刘郑生 刘保卫 肖嵩华 毛克亚)
    经颅多普勒血流变化量化评估穴位手法推拿治疗椎动脉型颈椎病的疗效(张盛强 石星 张继平)
    应用脑电双频谱指数监测和评估瑞芬太尼与芬太尼的中枢抑制作用对大脑皮质功能的影响
    影响非手术治疗腰椎间盘突出症患者康复的相关因素分析
    不同康复干预技术治疗腰椎间盘突出症的疗效:多因素非条件Logistic回归分析(刘义富 姜华茂 崔煜艳)
    微粒化地奥司明缓解创伤及骨科手术后患者下肢肿胀和疼痛症状的定量评估(熊伟 李锋 陈璟 夏仁云)
    不同浓度罗比卡因用于骶管内肛肠术后患者的镇痛效果
    钐^153-乙二胺四撑膦酸改善骨转移患者癌性疼痛(陈璟 胡健 周健)
    慢性中耳炎患者396耳发病年龄与听力丧失的相关性分析(乔秀艳 姜学钧 惠莲 李敏)
    大龄腭裂手术方式对语音效果的影响(秦瑞峰 吴炜 胡开进 封兴华)
    应用负压封闭引流的物理学技术修复会阴部软组织损伤(姚元章 孙士锦 王韬 李英才 麻晓林 黄显凯)
    经皮激光颈椎间盘减压术对颈椎稳定性的影响
    腰椎间盘突出症患者的腰背等速肌力评定(成鹏 毕霞 仇瑶琴 禚红红 沈小丽)
    加热疗法辅助持续被动运动对肘膝关节功能恢复的作用(宁宁 曾建成 刘晓燕)
    人工髓核置换腰椎间盘成形术改善患者腰腿痛症状及腰椎活动度33例随访观察(靳安民 张辉 吴继功)
    循经走罐法改善颈椎病患者症状与病程及年龄的关系(柳霞 刘桂玲 张弘)
    胸腰椎爆裂型骨折并截瘫患者术后脊髓功能恢复与手术方式及内固定系统的相关性(宋能良 陈汝昌 黄建民 廖穗波)
    创伤性颈椎间盘突出症患者临床表现与MRI影像学的变化(王卫东 任先军 梅芳瑞)
    两种不同干预方式影响腰椎间盘摘除患者腰椎功能恢复比较
    [经验交流]
    全膝关节表面置换术后不同持续被动活动方式对膝关节功能康复的影响(张卫国 杨晓琴 杨华清 张鹏 徐昕)
    老年口腔癌患者疼痛的护理评估和干预(毕小琴)
    腰椎内固定术后便秘的相关因素
    乳腺癌根治术患者围手术期的系统性程序化干预措施(李稚辉)
    椎弓根螺钉系统治疗对胸腰椎骨折患者神经功能恢复的作用(周双利 王金堂 李军)
    伸直型膝关节僵直的功能重建
    肘关节屈曲康复器的设计及应用
    高乌甲素芬太尼复合液静脉镇痛用于晚期癌痛(王姝媛 杜弘 陈继荣)
    重组人碱性成纤维细胞生长因子复合胶原海绵的制备及其在齿槽外科的应用
    髋关节置换术及传统方法治疗骨质疏松性髋部骨折术后2年疗效随访比较
    微创治疗及术后主动髋操锻炼改善青少年早期股骨头坏死患者术后疼痛及髋关节功能(王民 周双利 王栋琪 闫堃 李新友 韩学哲 杨益民)
    坚固内固定对颌骨骨折术后张口度改善评估
    中药离子导入并中医伤科手法治疗膝关节滑膜炎146例(黄燕兴 蒉刚 赵李清)
    烧伤后会阴部瘢痕挛缩畸形的整形治疗(刘建春 孙志刚 杨建民 齐顺贞)
    骶髂关节半脱位患者功能障碍及影像学变化的164例2年随访(白晓东 张韶峰 庞晓东 董安立)
    [干细胞生物学特征研究]
    兔骨髓基质细胞体外培养的操作技术特征
    体外培养的人骨髓间充质干细胞多能性特征:超微结构和细胞化学代谢分析
    体外培养兔骨髓基质干细胞复合β-磷酸三钙的肌内成骨能力观察
    骨髓间质干细胞移植对骨桥蛋白表达水平和血管钙化发生的干预作用
    经冠状动脉移植自体骨髓基质干细胞改善成年心肌梗死犬的心功能
    骨髓间质干细胞抑制大鼠肝纤维化形成的可能性:受体肝内干细胞存活时间、肝星状细胞活化程度及生存分析的7周观察
    经Nurr1基因转染的骨髓间充质干细胞移植对帕金森病大鼠旋转行为及纹状体多种神经因子的影响(徐浩文 朱蔚文 叶钦勇 刘焯霖 徐评议 黎锦如)
    自体外周血单个核细胞移植及其在动员剂参与下对坏死心肌的修复作用(刘文华 于玲范 姜雪松)
    微载体悬浮培养体系对人脂肪基质干细胞增殖与分化的影响
    自制血清替代物行无血清条件培养人表皮干细胞(李剑 李洁 戴育成)
    大鼠牙髓干细胞的基本细胞学特征以及增殖和矿化能力:分化为牙本质样细胞的可能性
    低氧条件小鼠胎肝间质细胞血管内皮生长因子的表达:对侧支和新血管生成的促进作用(刘革修 张洹 何冬梅)
    预衬阿胶对涤纶人工血管种植内皮细胞增生特性的影响
    细胞移植过程中体细胞克隆提高卵母细胞去核率的最佳方法
    静脉注射表皮角朊细胞在烫伤大鼠各主要器官的分布
    生长相关蛋白在脊髓源性神经干细胞向神经主细胞分化过程中的表达(刘宏志 杨永利 李佐文)
    人脑神经干细胞对不同储存方式及分离培养和诱导分化条件的要求
    猫骨髓基质细胞诱导为神经干细胞的实验研究(柯以铨 成文平 李钢 姜晓丹 徐如祥 王松青)
    人羊膜负载猪角朊细胞构建皮肤表皮替代物的实验研究
    血管内皮生长因子基因转染促进成骨细胞的成骨活性
    骨髓间质干细胞移植在脑梗死大鼠脑内分化及对神经功能恢复的影响
    重组腺相关病毒载体2型转染骨髓间充质干细胞的体外实验(谢政军 尹芳 郑维扬 宋兰林 易正山 伍志坚 周淑芸)
    [信息]
    本刊版面有关组稿问题的说明
    [组织工程研究]
    人腰椎黄韧带Ⅰ和Ⅱ型胶原基因表达随增龄发生软骨骨化的验证:特异性与客观性
    重组胰岛素生长因子1对成骨细胞增殖和分化的影响:量效与时效作用(魏波 布林白乙 宋丽君)
    碱性成纤维细胞生长因子影响犬平滑肌细胞增殖的合理剂量
    中国血管外科研究20年——从血管组织工程样(生物化人工血管)研究到干细胞移植(汪忠镐)
    血管内皮生长因子对大鼠皮瓣断蒂时间的影响
    醋酸曲安奈德/硅凝胶药膜的制备及体外释放度观察
    大鼠异体肢体移植后存活时间与FK506和FTY720的联合免疫抑制作用(曹杨 陆晓峰 韩成龙 张信英)
    碳酸化羟基磷灰石水泥修复骨缺损特征性效果的验证性实验
    人发角蛋白人工腱诱导自生腱形成过程胶原Ⅰ型mRNA的表达
    缺血预处理对缺血骨骼肌收缩功能的影响
    表皮生长因子对肠道放射性损伤保护作用的量效关系
    软骨细胞增殖与胰岛素和氢化可的松联合应用的关系
    [康复工程研究]
    构建人牙囊细胞三维立体培养模型及其用于牙周组织工程的可行性
    青少年安氏Ⅰ类恒牙列牙冠超硬石膏模型宽度:与1959年国人离体牙数据参数的比较
    个体化预制医用树脂和羟基磷灰石复合材料修复颅骨缺损
    [技术方法研究]
    构建创伤性肢体深静脉血栓动物模型及其应用评价
    磁共振血管成像评估兔创伤性肢体深静脉血栓:与金标准的一致性
    大鼠视网膜神经节细胞存活和突起生长与可溶性混合晶状体蛋白的促进作用:体外培养实验
    难愈性创面修复局部人血管内皮生长因子165真核表达载体的构建与评价
    牵引成骨两大问题:缩短延迟期与固定期兔下颌骨即刻牵张实验(田磊 何黎升 刘瑞峰 周树夏)
    膝骨关节炎模型兔关节滑液中的糖胺聚糖和透明质酸:变化曲线的意义
    两种固定方法修复股骨髁上骨折的生物力学及生物学性能比较
    自制异种猪去细胞真皮修复切除瘢痕区创面的愈合质量(京萨 柴家科 陈敏亮 许明火 宋慧锋 吴炎秋)
    瘢痕疙瘩高危个体评估与p53基因第72密码子的多态性
    深Ⅱ度烧伤早期电动磨痂对创面愈合的影响(黎洪棉 梁自乾 毛庆龙)
    常山酮对人瘢痕成纤维细胞Ⅰ型胶原合成的影响(张恒术 薛斌 黄崇本)
    不同胎龄胎儿皮肤内应激活化蛋白激酶基因的表达及其变化
    影响喉癌患者预后因素的多元逐步回归分析
    应用完整原位杂交技术检测人食管癌EC9706细胞中胰岛素样生长因子1受体mRNA的表达
    表皮生长因子受体与非小细胞肺癌患者预后及术后生存率的关系
    剂量依赖性热休克处理对肺癌细胞增殖凋亡的影响(赵劲松)
    全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞抑制增殖和诱导分化的实验(张强 范清宇 张殿忠 文艳华 刘云燕)
    两种膀胱灌注疗法影响浅表性膀胱癌术后患者生活质量和复发等预后因素的比较(朱捷 徐阿祥 洪宝发 叶林阳 张磊 王晓雄)
    头颈部肿瘤患者及一级亲属细胞突变后染色单体断裂率与五加皮的干预效应
    股骨头缺血性坏死对股骨近端骨组织的影响
    马尾神经受压致腰椎管狭窄模型大鼠脊髓P物质不同时程的表达特征
    构建人突变型p27基因重组腺病毒在结肠癌细胞SW480中的表达
    乳腺癌发生及其5年生存率与bag-1基因的表达(贠军 王岭 王廷 凌瑞 易军)
    肿瘤坏死因子α基因多态性对强直性脊柱炎发病易感性和临床病变程度的影响
    颈神经在颈椎间孔及脊神经沟处受嵌压的解剖学因素
    抑癌基因ING1在大肠癌中的表达与突变(王自强 周燕虹 蔡志民 余佩武)
    [国外临床康复医学信息]
    轮椅和轮椅使用者(1)
    [中医康复研究]
    川芎嗪注射剂对N-甲基-N-亚硝脲引起大鼠视网膜损伤的拯救效应
    不同浓度雷公藤甲素对光老化皮肤成纤维细胞基质金属蛋白酶的影响:以维甲酸为标准对照
    活血化瘀汤对骨折愈合过程中诱导型一氧化氮合酶基因表达的影响
    姜黄素Ⅲ对体内肺腺癌移植瘤裸鼠血管生成的影响(唐春兰 杨和平 李剑明 宫亮 胡建林 周向东)
    姜黄素对大鼠肠黏膜肿瘤坏死因子α及白细胞介素4的调控作用
    猫儿眼提取物对荷瘤小鼠肝癌细胞毒性及免疫功能的影响
    芦荟大黄素对瘢痕成纤维细胞增殖的时间-剂量依赖性效应
    瑞香素对醋酸、热板及电刺激致痛小鼠的镇痛作用
    薏苡仁脂抗肿瘤转移反应性基因与微矩阵芯片技术分析(吴煜 杨宇飞 邬冬华)
    [综述]
    脊髓损伤修复的相关阻碍因素(蒋涛 任先军)
    关节软骨损伤后的再生过程及其调节
    满足脊柱、椎间隙及神经根生物学需求的腰椎间融合器(徐格 许建中)
    皮肤创伤修复与细胞因子的网络式相互调节
    转录因子在恶性黑色素瘤细胞凋亡失调中的作用(李蠡 邢新 薛春雨)
    肩关节周围炎的多种病因病理学说(田惠林 王舒英)
    骨髓基质细胞与中枢神经系统损伤和修复
    胚胎皮肤无瘢痕愈合机制研究进展(邱俊 周继红)
    [继教园地]
    慢性疼痛的生理学基础(2)(赵英)
    [科研报道]
    余英豪主任医师·硕士导师
    王佩华教授·主任医师
    游庆军副主任医师·医学博士
    余慧华副主任医师·康复科主任
    樊仁才副主任医师·医学硕士
    《中国临床康复》封面

    主管单位:中华人民共和国卫生部

    主办单位:中国康复医学会

    社  长:王莉莎

    主  编:刘昆

    地  址:沈阳1200邮政信箱

    邮政编码:110004

    电  话:024-23384352 23394178

    电子邮件:[email protected]

    国际标准刊号:issn 1671-5926

    国内统一刊号:cn 21-1470/r

    邮发代号:8-587

    单  价:15.00

    定  价:780.00