设为首页 | 登录 | 免费注册 | 加入收藏
文献检索:
  • RNA干预法特异性抑制核激活因子受体配体诱导破骨细胞的形成 免费阅读 收费下载
  • 目的:使用RNA干预来特异性减少核激活因子受体配体的表达从而抑制破骨细胞的形成。 方法:实验于2005-01/2006-10在解放军第四军医大学全军骨科研究所完成。①构建由U6启动子引导产生小干预RNA的质粒载体mU6pro-dsRANKL。②按0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0μg的梯度将质粒mU6pro-dsRANKL及对照质粒mU6pro转染大鼠骨髓基质细胞,48h后提取细胞总RNA。③采用Northern blot法检测,以核激活因子受体配体与内参β-肌动蛋白扩增产物的吸光度比值来反映核激活因子受体配体mRNA的表达情况。④再将质粒mU6pro-dsRANKL按0,1.0,2,3μg转染破骨细胞,抗酒石酸染色显微镜下观察。 结果:①Northern blot结果:显示转染骨髓基质细胞后细胞中核激活因子受体配体mRNA的表达量随着质粒载体量的增加而减少。②破骨细胞抗酒石酸染色显示:破骨细胞的数量也随着质粒载体量的增加而减少。 结论:U6启动子引导产生小干预RNA的质粒载体能有效的减低核激活因子受体配体的表达从而抑制破骨细胞的形成。
  • 兔下颌垂直牵张骨形成中Smad1的表达 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察细胞内信号转导分子Smad1在兔下颌骨垂直牵张后骨组织中的表达,探讨Smad1在新骨形成中的作用。 方法:实验于2006-01/03在辽宁医学院动物实验中心完成。实验材料:健康日本大耳白兔18只,雌雄不限,体质量1.5~1.75kg。自制双螺旋种植型骨牵张器:外直径4.0mm,螺距0.75mm;内直径2.0mm,内螺距0.25mm。实验分组:根据随机排列表分为空白对照组3只(非手术)、牵张组15只,其中牵张组1d,1,2,4,6周每个时间点各3只。实验干预:①用摆动锯对兔下颌骨截骨,形成8mm×5mm骨升段,建立动物模型。②根据升骨段所在的位置安放种植牵张器,对兔下颌骨垂直牵张,1mm/d,2次/d,牵张4d。实验评估:分别于牵后第1天,1,2,4,6周取材,通过X射线及苏木精-伊红染色观察新骨形成情况,并用免疫组织化学法检测兔下颌骨垂直牵张过程中不同时期Smad1的表达与分布。 结果:18只兔均进入结果分析。①X射线及组织学观察:牵张1周,牵张区呈大的透射区,骨皮质连续性中断,牵张间隙两端界面清晰可见,牵张间隙呈低密度影像,牵张间隙内新骨逐渐形成,6周时牵张区基本被成熟新生骨充填。②免疫组织化学观察,牵张结束后Smad1表达增强,阳性信号主要在间充质细胞和新生骨小梁边缘的成骨细胞表达。Smad1/5在牵张成骨中的定量分析结果,在牵张成骨1d,1,2,4,6周及空白对照组Smad1表达灰度值分别为:98.18±7.18,78.94±8.58,115.50±14.60,138.48±15.69,150.01±12.81,151.06±12.85。Smad1表达高峰在牵张后1周,以后逐渐下降,牵张后4周在骨细胞微弱表达,6周时恢复到正常水平(P〉0.05)。 结论:Smad1参与兔下颌骨垂直牵张新骨形成过程,并在牵张成骨的早期诱导间充质细胞分化为成骨细胞过程中可能起重要作用。
  • 四甲基偶氮唑盐法观察三水白虎汤含药血清对体外培养关节炎滑膜细胞增殖的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:采用四甲基偶氮唑盐比色法观察三水白虎汤含药血清对体外培养热痹证型关节炎滑膜细胞增殖的影响。 方法:实验于2006-06/09在南方医科大学动物实验中心、中医药学院实验中心及组织工程研究中心完成。实验材料:滑膜组织取自南方医院脊柱外科收治的膝骨关节炎患者(女,68岁)行膝关节镜手术中切除的滑膜组织,患者知情同意。SPF级45d龄Wistar雌性大鼠15只,体质量(120±10)g。三水白虎汤中草药制剂(由南方医院中药房提供,主要成分水牛角、寒水石、白芥子、虎杖、鸡血藤等),来氟米特片(由美国欣凯公司提供)。实验分组:大鼠随机分为三水白虎汤组、来氟米特组以及生理盐水组,分别给予相应药液灌胃7d,制取含药血清。细胞培养实验共分4组,包括正常对照组以及三水白虎汤组、来氟米特组、生理盐水组3组含药血清组。实验干预:滑膜采自膝骨关节滑膜炎滑膜组织,采用体外细胞组织块培养技术,含药血清法接种培养。将第4代的滑膜细胞浓度为5×10^6L^-1接种于板孔,在3组含药血清终浓度分别为10%,20%,30%,40%,50%下培养,正常对照组为完全培养液组。实验评估:①用四甲基偶氮唑盐检测法观察滑膜细胞的增殖。②锥虫蓝染色计数活细胞数,并进行B型细胞鉴定。 结果:①滑膜细胞活性鉴定、计数及B型细胞鉴定:滑膜组织块培养后锥虫蓝拒染细胞计数为2×10^7,测得活性率达97%。免疫组织化学示Vimentin阳性,为B型滑膜细胞特征染色。②各组含药血清对滑膜细胞增殖的影响:生理盐水组和正常对照组的活细胞均明显增加;与生理盐水组和正常对照组比较,三水白虎汤组及来氟米特组的细胞增殖显著受抑致,活细胞数剧减(P〈0.001)。在培养前5d,同一含药血清浓度下,三水白虎汤组随着培养天数增加,对细胞增殖的抑制作用增强,5d后抑制作用不再明显增加。同条件下比较活细胞数,三水白虎汤组和来氟米特组之间差异不明显(P〉0.05),生理盐水组和正常对照组的活细胞数之间差异不明显(P〉0.05)。 结论:三水白虎汤含药血清对体外培养关节炎滑膜细胞增殖有显著抑制作用,抑制滑膜增生的途径可能为三水白虎汤治疗类风湿关节炎(热痹证型)的作用机制之一。
  • 骨关节炎大鼠关节软骨修复与橄榄叶提取物的干预效应 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察橄榄叶提取物对白陶土及鹿角菜胶诱导的大鼠骨关节炎组织炎症的预防作用及对关节软骨的修复作用。 方法:试验于2005-11/12在大连医科大学中日合作医药科学研究所进行。实验动物:选择健康雄性SD大鼠80只。实验材料:受试物橄榄叶提取物[由日本国Eisai食品与化学有限公司(日本国东京市)提供]。实验分组及给药:按体质量将大鼠随机分为5组,每组16只。模型对照组,灌胃给予蒸馏水,消炎痛组,灌胃给予消炎痛2mg/kg体质量,其余3组为橄榄叶提取物组,分别给予橄榄叶提取物(活性成分为以羟基酪醇为主的多酚)25,50,100mg/kg体质量灌胃,连续5d。第1天给药后1h,采用白陶土与鹿角菜胶诱发大鼠单发亚急性关节炎。实验评估:①诱发关节炎后1,3,5d,用容积测量法测定每组8只大鼠的左右后肢足跖体积,计算肿胀度,并同时用游标卡尺测定其胫跗骨关节最大径。②诱发关节炎后第5天,测定大鼠足跖伊文思蓝含量。每组的另8只大鼠,在诱发关节炎第5天麻醉后处死,剪下右足跖做组织病理学检查,观察橄榄叶提取物对大鼠骨关节炎中组织炎症的预防作用及对关节软骨的修复作用。 结果:80只大鼠全部进入结果分析。①足跖肿胀度及胫跗骨关节径:诱发关节炎后1,3,5d,橄榄叶提取物50mg/kg组和100mg/kg组大鼠的右后足跖肿胀度均明显小于模型对照组大鼠[1d:(46.7±4.2)%,(44.8±6.8)%,(52.5±4.0)%;3d:(40.4±4.8)%,(37.4±5.7)%,(45.0±2.9)%;5d:(34.5±4.8),(31.7±5.3)%,(40.4±4.0)%,P〈0.05],橄榄叶提取物25mg/kg体质量组,50mg/kg体质量组,100mg/kg体质量组大鼠的右后胫跗骨关节径与模型对照组大鼠比较差异无显著性(P〉0.05)。②足跖伊文思蓝含量:诱发关节炎后第5天,橄榄叶提取物50mg/kg,100mg/kg组大鼠的右后足跖伊文思蓝含量均明显小于模型对照组大鼠(P〈0.05)。③组织病理学检查及评分:组织病理学检查可见,与模型对照组比较,橄榄叶提取物50mg/kg组,100mg/kg组大鼠骨关节炎中组织炎症浸润明显减少,软骨组织无破坏,且组织病理学评分也明显小于模型对照组(P〈0.05)。 结论:橄榄叶提取物在50mg/kg体质量及以上剂量能有效地预防白陶土与鹿角菜胶诱发的大鼠骨关节炎中组织炎症,且对软骨有修复作用。
  • 携带半乳糖苷酶报告基因重组腺相关病毒体内转染骨组织的实验观察 免费阅读 收费下载
  • 目的:腺相关病毒载体因具有安全性好、免疫源性低、能感染分裂和非分裂细胞且能介导外源基因稳定长期表达等优点而备受瞩目,是最有希望应用于临床的病毒类载体。观察携带半乳糖苷酶报告基因的重组腺相关病毒(rAAV-LacZ)体内转染骨组织的效果。 方法:实验于2005-01/2006-01在北京大学医学部第三医院和皖南医学院弋矶山医院骨科实验室完成。实验材料:8周龄雄性SD大鼠8只,体质量220g左右。rAAV-LacZ载体(本元正阳公司,病毒滴度为6×10^12v·g/mL);Ⅰ型胶原海绵载体(上海其胜公司)。实验分组:将大鼠随机分为实验组和对照组,每组4只。实验方法:实验组4只大鼠在胫骨前外侧做骨缺损槽后,将滴有6×10^11v·g病毒量的rAAV-LacZ和Ⅰ型胶原载体复合物植入骨缺损槽;对照组4只大鼠仅在胫骨骨缺损槽内植入Ⅰ型胶原载体。实验评估:①手术后6周取材行x-gal染色后,分别行标本大体病理观察和组织学观察以了解β-半乳糖苷酶特异表达的情况。②同时提取实验部位以远器官肝和心脏组织RNA,反转录-聚合酶链反应检测这些部位有无β-半乳糖苷酶特异表达。 结果:8只SD大鼠均进入结果分析。①大体病理观察结果:实验组动物胫骨骨缺损处取材经x-gal染色后可见骨质蓝染,即有特异性β-半乳糖苷酶表达,而骨缺损临近处肌肉也表达β-半乳糖苷酶,Ⅰ型胶原载体植入部位以远的骨质和肌肉则没有特异性β-半乳糖苷酶的表达。②组织学观察结果:实验组骨缺损处肌肉肌纤维特异性表达β-半乳糖苷酶且没有明显的淋巴细胞局部浸润。蓝染的骨皮质切片显示骨陷窝内的骨细胞特异性表达β-半乳糖苷酶。对照组则没有实验组上述特异性β-半乳糖苷酶的表达。③反转录-聚合酶链反应结果:实验组实验部位有特异性β-半乳糖苷酶的表达,而其以远的心、肝器官内没有特异性β-半乳糖苷酶的表达。而对照组实验部位和实验部位以远的心、肝器官内均没有特异性β-半乳糖苷酶的表达。 结论:腺相关病毒载体直接注射到骨缺损和骨折部位可以有效转染骨和临近肌肉组织,并能长期(6周)表达所携带的外源基因,具有一定的安全性。
  • 人骨关节炎滑膜组织cDNA文库的构建及分析 免费阅读 收费下载
  • 目的:构建骨关节炎滑膜组织的cDNA文库,为筛选与骨关节炎的发生特异相关的基因及探讨骨关节炎发病机制奠定基础。 方法:实验于2006-01/10在深圳市人民医院骨关节科完成,选取骨关节炎患者滑膜,以Trizol一步法从骨关节炎滑膜组织中提取总RNA,分离纯化mRNA,反转录合成双链cDNA,以pBlueScriptII为载体,构建关节炎滑膜组织cDNA文库,对随机挑取的克隆进行鉴定。 结果:①总RNA及mRNA的质量:总RNA经分光光度计测定,测得mRNA的A260nm吸光度值为0.245,平均得率为0.45g/L,A260nm/A280nm=1.84,无DNA、蛋白质及小分子污染。符合建库要求。②cDNA的合成及分析:10μg mRNA反转录合成cDNA,合成的cDNA大小为0.5-9.0kb,且主要集中在1.0-2.0kb之间。③文库的鉴定:将50ng的cDNA与质粒载体pBlueScriptⅡ连接过夜,采用电转化法转化受体菌DH5A,经稀释铺板测定原始文库的滴度为1.45×10^9pfu/L,总克隆数为4.6×10^5,重组率为96.2%,扩增后文库总滴度为6.4×10^12pfu/L,插入片段多分布在0.5~2.6kb之间。 结论:构建关节炎滑膜组织cDNA文库具有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段,为克隆关节炎相关功能基因的研究奠定了基础。
  • 用骨髓干细胞培养出人类心脏瓣膜细胞首次在英国成功 免费阅读 免费下载
  • 由伦敦帝国学院雅各布教授领导的研究小组在英国黑尔菲尔德医院成功使用从人骨髓中提取的干细胞培养出了心脏瓣膜细胞。这些心脏瓣膜细胞被植入到骨胶原制作的支架上,发育成了直径3cm的心脏瓣膜片。但目前培植出来的瓣膜还无法抵抗循环系统的拉力。也不合重要神经。研究小组认为,如果今年下半年的动物实验取得成功。3年内这项技术就可能用于人类心脏瓣膜的移植手术。
  • 转化生长因子β1转染骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化 免费阅读 收费下载
  • 目的:通过转化生长因子β1基因转染大鼠的骨髓间充质干细胞,观察目的基因的分泌情况及干细胞向软骨细胞分化效果,为构建新型的软骨组织工程学种子细胞提供新思路。 方法:实验于2005-10/2006-09在中国医科大学细胞生物实验室完成。实验材料:6周龄Wistar大鼠10只,质粒pcDNA3.1-TGF-β1(由吉林大学徐莘香教授惠赠),转化生长因子β1、Ⅱ型胶原小鼠抗大鼠单克隆抗体(Neomaker公司)。实验分组:分为未经转染的骨髓间充质干细胞(未转染组)、转染空载的骨髓间充质干细胞(转染空载体组)和转染转化生长因子β1的骨髓间充质干细胞(转染转化生长因子β1组)。实验方法:①密度梯度离心法和贴壁分离法相结合分离、纯化大鼠骨髓间充质干细胞,免疫荧光法检测细胞表面标志。②质粒pcDNA3.1-TGF-β1扩增、提取、鉴定。③转化生长因子β1基因转染骨髓间充质干细胞。实验评估:①四甲基偶氮唑盐法测定筛选后细胞的增殖活性。②Westernblot检测转染后细胞转化生长因子β1和Ⅱ型胶原蛋白表达。 结果:①免疫荧光法检测骨髓间充质干细胞:CD29和CD44表达阳性,CD34和CD45表达阴性。②pcDNA3.1-TGF-β1真核表达载体的酶切鉴定:基因测序与GeneBank cDNA序列相符。③转染基因对骨髓间充质干细胞增殖活性的影响:基因转染后骨髓间充质干细胞的增殖力变强,转染组的细胞增殖力高于未转染组和转染空载体组。④转化生长因子β1表达:转染后的骨髓间充质干细胞较未转染和转染空载体的骨髓间充质干细胞分泌转化生长因子β1蛋白增加。⑤Ⅱ型胶原的蛋白表达:在转化生长因子β1目的基因转染后的骨髓间充质干细胞Ⅱ型胶原蛋白表达较未染和转染空载体的骨髓间充质干细胞增强。 结论:应用基因转染技术将转化生长因子β1目的基因导入骨髓间充质干细胞中,在蛋白质水平鉴定转染成功,且骨髓间充质干细胞成软骨分化所需的特异性细胞外基质Ⅱ型胶原明显升高,使骨髓间充质干细胞在保持很强的体外传代增殖能力同时,又能产生、表达转化生长因子β1。
  • 恒河猴体内构建组织工程骨的生物学安全性评价 免费阅读 收费下载
  • 目的:对恒河猴体内构建的组织工程骨进行生物学安全性评价。 方法:实验于2003-05/2004-12在解放军第一军医大学完成。雄性恒河猴6只,体质量4~6kg,分别抽取实验动物的骨髓,体外培养骨髓基质干细胞并向成骨细胞诱导,将诱导后的骨髓基质干细胞以5×10^9L^-1的浓度与可吸收羟基磷灰石复合,体外培养3d后回植入恒河猴背阔肌异位构建组织工程骨,分别于术前、术后2,4,12周4个时间点进行长期毒性试验(观察植入后动物的生理状况及血生化指标在术后各时间点与术前的变化)、肌内植入试验(观察炎性浸润、纤维包囊形成及有无异形细胞)、遗传毒性试验(观察嗜多染红细胞,记录微核数)等检测。 结果:纳入恒河猴6只,均进入结果分析。①体内构建组织工程骨后,动物精神、行为、活动、摄食及粪便无异常,无血尿,体质量逐渐增加。术后2,4,12周和术前相比,外周血象、血生化指标差异均无显著性意义(P〉0.05),②各时间点骨髓相均增生活跃、形态正常;植入试验2周周围肌肉可见少量炎性细胞浸润,4,12周未见明显炎性细胞和异型细胞。③各组骨髓涂片在镜下难以见到嗜多染红细胞,均未发现有微核形成。 结论:恒河猴体内构建组织工程骨具有良好的生物学安全性。
  • 特发性脊柱侧凸患者椎旁肌结蛋白和波形蛋白的特征表达 免费阅读 收费下载
  • 目的:研究表明,结蛋白和波形蛋白可反映肌肉损伤再生的情况,同时结蛋白可反应肌力的大小。比较特发性和先天性脊柱侧凸患者顶椎处凹凸两侧椎旁肌形态和结蛋白及波行蛋白的表达,探讨椎旁肌在特发性脊柱侧凸发生发展中的作用。 方法:①选择2005-07/2006-11间南方医科大学南方医院脊柱骨病科收治的部分特发性脊柱侧凸患者12例,Cobb角平均73.8°;先天性脊柱侧凸患者5例,Cobb角平均36.0°;腰椎间盘突出症患者2例和胸腰椎管内占位性病变患者3例作为正常对照。所有患者年龄均在10~20岁。②对脊柱侧凸患者顶椎凹凸两侧及正常对照组患者椎旁肌进行活检,术前均签署知情同意书。③采用光镜和电镜下观察椎旁肌的形态改变;SP法分别对光镜切片的结蛋白和波行蛋白进行免疫组织化学染色,在光镜下观察蛋白表达;应用图像分析系统测量结蛋白免疫组织化学染色后反应椎旁肌蛋白表达强弱的吸光度(A)。 结果:22例患者全部进入结果分析。①椎旁肌组织形态:特发性脊柱侧凸患者椎旁肌在光镜及电镜下均有病变,凹侧椎旁肌病变较重,凸侧椎旁肌相对正常。②结蛋白免疫组织化学的阳性表达:结蛋白在各组椎旁肌中均有不同程度的表达,组间比较差别显著(P〈0.01)。特发性脊柱侧凸及先天性脊柱侧凸患者椎旁肌在顶椎凸侧比正常组结蛋白表达稍强(0.2727±0.0478,0.2768±0.0372,0.2429±0.0272,P〈0.05),特发性脊柱侧凸及先天性脊柱侧凸患者椎旁肌在顶椎凹侧相对于正常组表达减弱(0.1898±0.0258,0.1869±0.0306,0.2429±0.0272,P〈0.05)。③波行蛋白免疫组织化学的阳性表达:各组间椎旁肌肌纤维内均无波形蛋白表达。特发性脊柱侧凸与先天性脊柱侧凸患者同侧椎旁肌两组间在形态和结蛋白及波行蛋白表达无明显差别(P〉0.05)。 结论:特发性脊柱侧凸患者椎旁肌内波形蛋白表达均为阴性,提示椎旁肌不存在再生现象。与先天性脊柱侧凸类似,特发性脊柱侧凸患者椎旁肌结蛋白表达凸侧增强及凹侧减弱为继发性改变。
  • 新生鼠股骨破骨细胞存在位置的确定及其噬骨能力验证 免费阅读 收费下载
  • 目的:确定新生鼠体内破骨细胞的存在位置,观察分离纯化后的破骨细胞形态结构,并检测其噬骨能力。 方法:实验于2006-07/11在沈阳医学院中心实验室完成。①市售新鲜成年牛股骨皮质,临用前锯成1cm宽条,磨片机磨成厚50μm的1cm×1cm骨片,乙醇浸泡,晾干,紫外线照射消毒骨片的两面,放于DMEM培养基中4℃备用。②选取新生大鼠10只,处死取其后肢股骨,于中间位置截成两段,多聚甲醛固定,甲苯胺蓝染色确定体内破骨细胞的存在位置,并进行形态结构观察。③另选取新生大鼠6只,处死取其四肢长骨,刮取骨髓腔内及干骺端表面直至骨干成为极微小的碎片,机械分离破骨细胞,胰蛋白酶+乙二胺四乙酸联合消化。④吉姆莎染色观察细胞形态结构,抗酒石酸酸性磷酸酶染色检测破骨细胞酶活性,扫描电镜观察破骨细胞形态结构,通过破骨细胞在骨片上的陷凹情况验证噬骨能力。 结果:①鼠后肢股骨行甲苯胺兰染色,大量破骨细胞位于靠近干骺端骨小粱的骨陷凹中,核呈深蓝色,核大且多。②分离培养的破骨细胞数量较少,体积大,胞浆丰满,细胞突起延展,细胞核呈圆形或椭圆形,积聚在细胞中央或排列在细胞周边。胰蛋白酶+乙二胺四乙酸联合消化后可使混杂的单核基质细胞脱落,培养皿上大部分为多核巨细胞,破骨细胞纯化率达80%。③抗酒石酸酸性磷酸酶染色后的破骨细胞呈阳性表达,胞质内酶活性部位为红橙色。④成熟破骨细胞体积大,细胞突起延展,细胞周围出现伪足。破骨细胞在牛皮质骨片上培养时产生骨陷凹,吸收陷窝大部分呈梅花瓣形或腊肠形。 结论:新生鼠体内破骨细胞多位于靠近干骺端骨小粱的骨陷凹中,具有噬骨能力,可使牛皮质骨片产生骨陷凹。为体外分析破骨细胞生物特性、骨吸收功能及骨组织工程应用提供丰富的细胞来源。
  • 遗传性牙釉质发育不全家系分析 免费阅读 收费下载
  • 目的:分析一遗传性牙釉质发育不全家系的发病情况及病变特征,明确其遗传方式,为进一步基因定位和克隆奠定基础。 方法:2003-05在中国山东某市发现一遗传性牙釉质发育不全家系,先证者为1名43岁男性牙釉质发育不全患者。该家系现存活3代,共有36名家庭成员。对先证者及其家族进行口腔检查和全身检查,制备牙齿磨片镜下观察,对该患者及其亲属成员进行家系调查,系谱分析,明确可能的遗传方式。 结果:①口腔及全身临床表现:口腔检查可见大量牙石,釉质病变涉及全口牙齿,牙体呈黄褐色,磨耗重,釉质易碎裂剥脱。X射线显示牙釉质密度基本与牙本质相同,髓腔形态未见异常。临床表现符合Witkop1989年分类中的钙化不全型牙釉质发育。全身系统检查排除系统性疾病。无四环素用药史,家族中无近亲结婚者,附近居民无相似病变。②牙齿磨片观察结果:可见釉丛及釉板明显,且数目增多,表明釉质发育较差。③遗传方式:该家系36名成员,3代中均有患者,共检出遗传性牙釉质发育不全患者13人,其中男7例,女6例,传递方式符合常染色体显性遗传的特点。 结论:该家系为常染色体显性遗传性钙化不全型牙釉质发育不全家系,为下一步定位该家系致病基因奠定基础。
  • 藻酸钠凝胶三维培养条件下胰岛素样生长因子Ⅰ对兔关节软骨细胞表型的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察胰岛素样生长因子Ⅰ对藻酸盐凝胶三维培养条件下兔关节软骨细胞表型的影响。 方法:实验于2004-10/2006-10在上海长海医院血管外科实验室完成。实验材料:4周龄雄性新西兰兔6只。实验方法:利用机械与酶消化的方法获得均一的兔关节软骨细胞,在单层培养条件下将软骨细胞增殖至P2代;将P2代细胞高密度条件下转入藻酸盐凝胶培养介质,进行三维培养。细胞培养分组:①不含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养。②含50μg/L胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组。③单层培养。实验评估:①三维培养细胞于培养的2,4,6周行冰冻切片苏木精-伊红染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测。②单层培养细胞每传代1次行细胞爬片苏木精-伊红染色及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测。 结果:①细胞学外观形态变化:两组藻酸盐凝胶三维培养体系中的软骨细胞在6周的培养过程中始终保持了圆形的细胞外观。单层培养软骨细胞在第5代以前,均保持了星形及多角形的正常软骨细胞外观。②免疫组织化学显示结果:培养6周后,含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养软骨细胞特异性Ⅱ型胶原细胞仍呈强阳性染色,表达水平较转入三维体系前未见降低,培养细胞保持了良好的分化表型。单层培养软骨细胞在第5代以前,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阳性。第6代以后,大部分细胞呈梭形,向成纤维细胞转化,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色为阴性。 结论:胰岛素样生长因子Ⅰ对藻酸盐三维培养条件下的关节软骨细胞表型具有维持作用。
  • TNP-470和碱性成纤维细胞生长因子在血管内皮细胞增生中的相互作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:检测TNP-470对内皮细胞增生的影响及其与碱性成纤维细胞生长因子的相互作用,并探讨其可能机制。 方法:实验于2005-05/2006-10在沈阳医学院完成。采用本室改进的Jaffe法进行人脐静脉内皮细胞原代培养,细胞生长达亚融合状态后,换成无血清培养液使其停止生长。实验分组:依据施加的实验因素不同,将培养的人脐静脉内皮细胞分为4组:对照组(DMEM无血清)、TNP-470组(10^-4g/L)、碱性成纤维细胞生长因子组(500μg/L)、碱性成纤维细胞生长因子+TNP-470组。实验评估:采用四甲基偶氮唑盐比色分析测定各组内皮细胞吸光度,流式细胞计数仪检测内皮细胞周期各时相相对细胞数,免疫组织化学SABC法检测内皮细胞中核因子Kappa B p65和ki-67蛋白的表达阳性率。 结果:①人脐静脉内皮细胞的生长活性:TNP-470显著抑制内皮细胞增生;碱性成纤维细胞生长因子显著刺激内皮细胞增生,与对照组相比,差异显著(0.119±0.002,0.168±0.004,0.138±0.003,P〈0.05)。②内皮细胞周期各时相相对细胞数:TNP-470阻滞内皮细胞进入增殖期,使G0/G1期内皮细胞比例上升,S期+G2/M期比例下降;而碱性成纤维细胞生长因子具有很强的促内皮细胞分裂增殖活性,使G0/G1期内皮细胞比例减少,S期+G2/M期比例增加,与对照组相比,差异显著(P〈0.05)。③各组人脐静脉内皮细胞中NF-κB p65蛋白及Ki-67蛋白的表达阳性率:对照组人脐静脉内皮细胞中NF-κB p65蛋白呈棕褐色染色、ki-67极少表达;TNP-470可显著降低碱性成纤维细胞生长因子诱导的内皮细胞核内NF-κB p65蛋白及Ki-67蛋白的表达,与碱性成纤维细胞生长因子组比较,差异显著[NF-κB p65蛋白:(16.200±1.344)%,(68.400±1.204)%;Ki-67蛋白:(1.500±0.813),(65.700±1.113)%,P〈0.05]。 结论:TNP-470通过细胞周期阻滞作用抑制内皮细胞分裂与增殖;TNP-470抑制成纤维细胞生长因子诱导的内皮细胞增生与其影响内皮细胞中NF-κB的表达有关。
  • 血管内皮生长因子mRNA表达及ARPE-19细胞增生与缺氧的诱导效应 免费阅读 收费下载
  • 目的:研究缺氧对人视网膜色素上皮细胞-19(ARPE-19)的增生和血管内皮细胞生长因子表达的诱导作用。 方法:实验于2004-10/2005-12于南京医科大学生理学实验室完成。实验材料:ARPE-19细胞购自美国American Type Culture Collection。实验方法及分组:ARPE-19细胞被暴露在含体积分数为0.05的CO2和0.95的N2的缺氧培养缸中培养为缺氧组。同代同一培养瓶中传代的细胞在常氧情况下培养,作为正常对照组。实验评估:2,12,24,36h后,光镜下观察ARPE-19细胞形态学变化,采用四甲基偶氮唑盐法检测两组ARPE-19细胞增殖的情况;用半定量反转录聚合酶链反应检测两组ARPE-19细胞血管内皮细胞生长因子mRNA的表达。 结果:①缺氧对ARPE-19细胞增殖的影响:ARPE-19细胞缺氧组2,12,24,36hA值均比正常组明显增高,除缺氧2h外,其他各时间点均能明显诱导ARPE-19细胞增殖(P〈0.05)。②缺氧对血管内皮生长因子mRNA表达的影响:缺氧组血管内皮生长因子mRNA表达明显增高,缺氧2,12,24,36h血管内皮生长因子mRNA表达均高于正常对照组(1.567±0.080,1.868±0.176,5.061±0.407,1.748±0.277,0.603±0.017,P〈0.05,n=8),并且呈时间依赖性,在24h达到表达最高峰。 结论:缺氧可以促进ARPE-19细胞增殖和血管内皮生长因子mRNA表达增加,为研究缺血缺氧性视网膜疾病提供了一个新的思路,即控制缺氧造成的视网膜色素上皮细胞增殖和血管内皮细胞增殖对治疗缺血缺氧性视网膜疾病是绝对必要的。
  • 局部注射血管内皮生长因子基因促进大鼠坐骨神经再生:组织学与电生理指标的评估 免费阅读 收费下载
  • 目的:局部应用血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白可加速神经再生,促进其功能恢复。探讨局部注射pHVEGF165质粒对周围神经再生的作用。 方法:实验于2004-03/06在武汉协和医院手外科实验室完成。实验动物:成年雄性Wistar大鼠45只。实验分组:随机分成3组,每组15只。即对照组、pHVEGF165质粒25μg和50μg组。实验方法:①制备pHVEGF165质粒。②制成双侧坐骨神经损伤动物模型,于神经断端间及周围肌肉内对照组局部注射生理盐水,pHVEGF165质粒25μg组和50μg组局部分别注射pHVEGF16525μg,50μg。实验评估:①术后4,6和8周行腓肠肌湿重检测与组织形态学观察。②术后6,8周行神经断面图象分析,测量有髓纤维密度、平均轴突直径、髓鞘厚度与有髓纤维总数。③术后8周通过电生理检测记录复合肌肉动作电位波幅,潜伏期,计算出运动神经传导速度。统计分析以上数据比较各组大鼠坐骨神经再生情况。 结果:45只大鼠全部进入结果分析。①坐骨神经组织学检查结果:术后4周,各组大鼠神经均以大量变性的髓鞘为主;6,8周时,对照组神经断面仍可见到一些变性神经纤维,再生之神经纤维数量少,pHVEGF165质粒组的再生神经纤维数量增多也更加成熟,且pHVEGF165质粒50μg组再生神经纤维已接近正常神经组织。②腓肠肌湿重:神经损伤6周及8周,pHVEGF165质粒50μg组均明显优于对照组、pHVEGF165质粒25μg组[6周:(733.64±41.69),(491.82±40.21),(680.08±48.70)mg,8周:(906.68±35.03),(577.26±57.22),(772.74±61.14)mg,P〈0.05]。③坐骨神经图象分析:6周和8周,pHVEGF165质粒25μg组、50μg组明显优于对照组(P〈0.05),pHVEGF165质粒50μg组最优(P〈0.05)。④电生理检测结果:术后8周,pHVEGF165质粒50μg组运动神经传导速度、复合肌肉动作电位波幅及潜伏期指标显示明显优于pHVEGF165质粒25μg组和对照组(P〈0.05),pHVEGF165质粒25μg组居中。 结论:局部注射phVEGF165质粒治疗周围神经损伤具有可行性,可促进神经轴突再生,加速神经功能恢复。并且这种作用可能存在剂量依赖性。
  • 利骨素防治去卵巢大鼠骨矿盐丢失机制的研究 免费阅读 收费下载
  • 目的:通过测定大鼠骨矿盐含量和血清相关激素及白细胞介素6水平,探讨利骨素对去卵巢大鼠骨矿盐代谢的影响及其机制。 方法:实验于2003-04/2004-03在广东医学院生理教研室完成。实验材料:普通级4个月龄雌性SD大鼠18只。利骨素由筛选海洋生物中某些贝类的壳和鱼类的骨骼进行组合,配制成粉剂,含Ca6.66mg;Mg0.039mg;Zn8.54μg;P7.32μg;S0.025mg;Co0.078μg;Mn0.61μg。实验分组:用抽签法随机分成3组,即假去卵巢组、去卵巢组、去卵巢+利骨素组,每组6只。实验方法:去卵巢组和去卵巢+利骨素组大鼠切除双侧卵巢。假去卵巢组大鼠手术过程同去卵巢组,但不切除卵巢。去卵巢+利骨素组大鼠于术后第2天开始给予利骨素混悬液按3.0mL/kg体质量灌胃,1次/d,持续11周。实验评估:各组实验动物在第11周末,麻醉状态下动脉放血处死,观察骨干重、骨干重/体质量、骨灰重、骨灰重/体质量、骨灰重/骨干重变化。动脉血血清样本-20℃保存待测,放免法同批测定卵泡刺激素、黄体生成素、雌二醇、孕酮、促甲状腺激素、甲状腺素、降钙素、皮质醇、生长素和白细胞介素6。 结果:18只大鼠实验数据均进入结果分析。①大鼠骨干重、骨干重/体质量、骨灰重、骨灰重/体质量、骨灰重/骨干重变化:去卵巢大鼠各指标均低于假去卵巢组[(504±24),(575±41)mg;(1.55±0.61),(1.82±0.19)g/kg;(293.31±14.00),(381.17±23.00)mg;(0.90±0.04),(1.21±0.14)g/kg;(58.6±0.8)%,(66.3±1.5)%,P〈0.05];去卵巢+利骨素组各指标均较去卵巢组高[(613±64),(504±24)mg;(1.89±0.19),(1.55±0.61)g/kg;(405.56±47.00),(293.31±14.00)mg;(1.25±0.13),(0.90±0.04)g/kg;(66.1±0.9)%,(58.6±0.8)%,P〈0.05]。②血清相关激素水平:与假去卵巢组比较,去卵巢大鼠血清雌二醇、孕酮、促甲状腺激素、甲状腺素、降钙素、皮质醇、生长素水平低[(2.98±0.72),(23.93±4.48)ng/L;(11.22±1.16),(21.85±2.62)μg/L;(4.10±0.53),(20.07±2.32)mU/L;(5.65±0.77),(13.60±1.74)μg/L;(49.92±6.33),(74.27±6.42)ng/L;(1.70±0.17),(3.81±0.61)μg/L;(2.50±0.51),(6.53±0.73)μg/L,P〈0.05],卵泡刺激素、黄体生成素、白细胞介素6水平高[(6.24±1.04),(2.71±0.37)U/L;(14.06±1.22),(3.00±0.24)U/L;(448.33±29.03),(361.50±33.45)ng/L,P〈0.05];与去卵巢组比较,去卵巢+利骨素组血清孕酮、生长素、皮质醇、促甲状腺激素、甲状腺素水平高[(14.47±1.40),(11.22±1.16)μg/L;(4.16±0.76),(2.50±0.51)μg/L;(4.95±0.74),(1.70±0.17)μg/L;(13.85±1.99),(4.10±0.53)mU/L;(9.14±1.76),(5.65±0.77)μg/L,P〈0.05];血清黄体生成素水平低[(11.19±1.26),(14.06±1.22)U/L,P〈0.05]。 结论:利骨素可对抗去卵巢所致的骨矿盐丢失,改变去卵巢大鼠体内相关激素水平是对抗去卵巢大鼠骨矿盐丢失的重要机制。
  • 《口腔颌面外科杂志》征订征稿启事 免费阅读 免费下载
  • 骨质疏松性椎体骨折模型的建立 免费阅读 收费下载
  • 目的:建立大鼠的骨质疏松性椎体骨折模型,探讨骨折愈合程度与X射线、骨结构和力学性能的相互关系,以期能为临床治疗提供科学的指导和理论依据。 方法:实验于2005-07/2006-07在解放军兰州军区总医院骨研所完成。实验动物:选择雌性SPF级8个月龄SD大鼠54只。实验分组:采用随机数字法将大鼠分为2组:骨质疏松组和对照组,每组27只。实验干预:骨质疏松组经双背侧手术切除卵巢,对照组行伪手术。术后3个月,所有动物麻醉下,采用L5椎体手术开窗刮除术区内松质骨方法建立人工椎体骨折模型。实验评估:于术后1,2,4,6,8,12周观察两组大鼠腰椎影像学、骨组织切片组织学与受累椎体力学性能。 结果:54只SD大鼠全部进入结果分析。①影像学观察:术后两组X射线片示L5椎体有一骨折缺损透光区。对照组在术后6周时原透光区与周围骨质无明显差别,而骨质疏松组原透光区仍清晰可见,于8周时无明显差别。②组织学观察:两组软骨细胞在骨愈合1周时出现,形成软骨岛,但骨质疏松组软骨细胞每高倍视野数量明显少于对照组,另外,软骨细胞改建成成熟骨细胞,骨小梁形成数量,胶原纤维排列与对照组比较有显著性差异。③力学性能:在骨质愈合6~12周,L5椎体的最大载荷、弹性模量、最大应力明显低于同期对照组,差异有显著性意义(P〈0.05)。 结论:骨质疏松性椎体骨折SD大鼠模型,符合动物模型标准,可用于研究新骨形成与正常骨质结构关系,观察骨质疏松性椎体骨折愈合机制,并证明骨质疏松性松质骨骨折修复过程中,骨折愈合质量降低。
  • 中年女性骨代谢相关指标变化与冬泳运动的干预 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察冬泳运动对中年女性骨密度、骨矿含量和血清性激素水平的影响,以及与骨代谢相关血生化指标的变化。 方法:实验于2004-10/2005-03在沈阳体育学院进行。由沈阳市冬泳协会组织冬泳爱好者和非冬泳试验对象各36人,年龄50~55岁,其中冬泳爱好者作为冬泳组,非冬泳者为对照组。纳入标准:较经常参加户外活动,均无明显胃肠道疾病、肾脏疾病、甲状腺疾病、糖尿病等骨代谢疾病,近期未服用激素类和抗癫痫类对骨代谢有影响的药物。冬泳组经3周适应性运动后,每周在2~10℃水温中游泳3次,5~10min/次,每次游泳前后分别进行5~10min的热身和调整运动;对照组未进行任何干预措施。运动周期结束采用单光子骨密度仪测试试验对象骨密度;放射免疫法和生化法分析睾酮、雌二醇和骨代谢等指标的变化。 结果:纳入冬泳爱好者36人及非冬泳36人,均进入结果分析。①干预后各组骨密度测量结果:冬泳组桡骨远端的骨密度、骨矿物质均高于对照组[(0.98±0.04),(0.96±0.08)g/cm^2;(0.72±0.15),(0.62±0.24)g/cm;P〈0.05],骨宽无显著变化(12.25±0.17),(12.20±0.16)cm。②干预后各组血清生化指标的测量结果:冬泳组血清中骨钙素、睾酮、雌二醇值均较对照组显著增高[(13.40±3.60),(11.60±3.20)μg/L;(2.67±0.75),(2.23±0.67)μg/L;(64.60±22.50),(53.90±20.50)ng/L;P〈0.05],血清钙、磷、皮质醇两组无显著差异[(2.25±0.16),(2.20±0.24)mmol/L;(1.35±0.22),(1.26±0.23)mmol/L;(313.60±122.00),(300.10±118.00)mg/L;P〉0.05]。③干预后冬泳组各项指标与骨密度相关分析:冬泳运动改善血清睾酮、雌二醇和骨钙素的浓度,与骨密度呈正相关(r=0.323,0.311,0.407)。 结论:冬泳运动影响中年女性的骨代谢,增加骨密度和骨矿物质的含量,提高骨钙素、睾酮、雌二醇的血液浓度,对于预防骨质疏松的发生有重要意义。
  • CRTER近期组稿重点 免费阅读 免费下载
  • 外侧半月板切除术后膝关节周围骨密度的改变 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察外侧半月板切除术后膝关节周围骨密度的改变。 方法:选择1984/2002年唐山市第二医院骨科、华北煤炭医学院附属医院以及开滦医院施行外侧半月板切除术的患者128例,其中男64例,女64例;年龄14~68岁。实验分组:根据术后时间分为:0~1年组32例,2~4年组32例,5~10年组30例和11~17年组34例,设健侧为对照组。方法及评估:应用双能X射线骨密度仪分别测量膝关节周围6个感兴趣区骨密度(6区:以胫骨上端松质骨区腓骨小头水平面作为参考平面,在胫骨外、内侧分别作0.8cm×0.8cm的感兴趣区,称为R1,R2。以股骨下端股骨髁间切迹水平面作为参考平面,在股骨内外侧髁分别作0.8cm×0.8cm的感兴趣区,称为R3,R4。在胫骨上端密质骨区胫骨平台外、内侧软骨下分别作1.4cm×0.4cm的感兴趣区,称为R5,R6)并计算出外侧、内侧骨密度的变化值,用均数百分数±标准差表示。 结果:128例患者全部进入结果分析。①在术后17年内胫骨上端外内侧(R56)密质骨骨密度变化值:0~17年术侧均明显高于健侧[0~1年:(-10.20±13.62)%,(-22.80±13.54)%;2~4年:(-8.87±15.05)%,(-17.82±11.06)%;5~10年:(5.06±18.64)%,(-8.62±12.97)%;11~17年:(6.17±14.56)%,(-7.86±10.73)%,t=2.41~8.95,P〈0.05]。②5~17年胫骨上端外内侧(R12)松质骨骨密度变化值:5~17年术侧均明显高于健侧[5~10年:(12.15±22.48)%,(0.40±14.40)%,11~17年:(8.16±13.37)%,(-4.90±10.44)%,t=2.31,2.40,P〈0.05]。③11~17年股骨下端近膝关节区外内侧(R43)骨密度变化值:术侧明显高于健侧[(4.43±13.70)%,(-4.68±17.68)%,t=2.17,P〈0.05]。 结论:外侧半月板切除术后可引起膝关节周围骨密度的改变,发生适应性的骨重构:胫骨上端密质骨区最早发生,胫骨上端松质骨区其后发生,股骨下端近膝关节区最后发生。
  • 兔膝关节内注射透明质酸钠后胶原纤维及关节外相关韧带组织的变化 免费阅读 收费下载
  • 目的:在兔固定的膝关节内定期注入透明质酸钠,观察关节内外组织的变化。 方法:实验于2003-10/2004-04在大连医科大学完成。实验分组:新西兰兔24只,随机分为透明质酸钠组、生理盐水组、单纯对照组,每组8只。实验干预:用树脂绷带将兔右膝关节固定于伸直位,膝关节注射部位开窗,左膝自由活动(自身对照侧)。透明质酸钠组膝关节腔内注入透明质酸钠0.1mL,生理盐水组注射同等剂量的生理盐水,单纯对照组不向关节内注射任何药物,每周1次,共5次。实验评估:5周后麻醉下处死动物,去除外固定,采用改良Clarke-Weeknesser关节伸屈范围检查标准测量右膝关节的活动范围;采用改良的Rydell-Balazes肉眼粘连评分标准评估膝关节内纤维粘连情况;光镜下观察股间肌、股直肌、髌内外侧支持带的纤维变性情况。 结果:动物饲养过程中死亡4只,进入结果分析透明质酸钠组7只,生理盐水组6只,单纯对照组7只。①右膝关节的活动范围:透明质酸钠组大于生理盐水组和单纯对照组[(37.86±2.94)°,(15.67±2.23)°,(14.29±1.96)°,P〈0.01]。②膝关节内纤维粘连评分:透明质酸钠组小于生理盐水组和单纯对照组(1.44±0.49,3.33±0.44,3.44±0.57,P〈0.01)。③光镜下透明质酸钠组股间肌、股直肌的纤维变性较生理盐水组和单纯对照组减轻,髌内外侧支持带胶原纤维成分的变化也减轻。 结论:在固定的兔膝关节内注射透明质酸钠不但可以明显抑制关节内的纤维性粘连;还可以抑制关节外股间肌、股直肌、髌内外侧支持带的组织变性。
  • 一侧兔膝关节注射外源性尿激酶型纤溶酶原激活物引起双侧膝关节软骨降解的实验 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察关节腔内注射外源性尿激酶型纤溶酶原激活物对关节软骨的影响。 方法:实验于2005-01/2006-06在新疆石河子大学动物实验中心完成。将48只大白兔按体质量、性别随机分为实验组(n=24)、空白对照4周组(n=6)、盐水对照组(n=18)。实验组每只兔子在右膝关节内注射外源性尿激酶型纤溶酶原激活物0.2mL(0.4μg);空白对照4周组,未行任何处理;盐水对照组在右膝关节内注射生理盐水0.2mL。造模后4,8,12周分批麻醉处死后取兔双膝关节软骨进行组织学观察及电镜检查。 结果:纳入大白兔48只,均进入结果分析,实验过程中无1例膝关节感染发生。①实验组兔双膝关节软骨表面不规则、缺损及结构破坏,软骨细胞数目明显减少、纤维增生,并出现潮线的完整性破坏。②Mankin's评分结果显示,盐水对照组与空白对照4周组之间比较,软骨没有任何变化(0.83±0.75,0.80±0.74,P〉0.05),而与实验组之间比较,不论4,8,12周,差异均有显著性意义(0.83±0.75,5.38±0.92;1.00±0.63,8.25±1.39;0.83±0.75,11.75±0.89;P〈0.01),同时实验组各时间点之间比较,差异也有显著性意义(5.38±0.92,5.35±0.90;8.25±1.39,8.51±0.94;11.75±0.89,12.03±0.91;P〈0.05)。 结论:①实验结果显示,兔双膝关节均出现关节软骨损伤的病理现象。②尿激酶型纤溶酶原激活物可能是关节软骨降解的始动因子,对软骨的降解起着重要的病理作用,促使软骨降解病变的逐步加重。
  • 构建以少突胶质细胞前体为主与人类早产儿脑室周围白质软化病理相似的动物模型 免费阅读 收费下载
  • 目的:建立以晚期少突胶质细胞前体为主、与人类早产儿脑室周围白质软化病理相似的可靠动物模型。 方法:实验于2005-10/2006-06在上海交通大学医学院附属新华医院科研中心完成。2d龄和7d龄SD同窝清洁级新生大鼠各43只,雌雄不拘,以随机数字表法分为4组,即2d龄模型组(n=25)、2d龄假手术组(n=18)、7d龄模型组(n=25)和7d龄假手术组(n=18),脑室周围白质软化动物模型建立:结扎双侧颈总动脉,手术时间短于10~15min,术后将新生大鼠送入缺氧箱缺氧30min,混合气体为体积分数0.08的O2和0.92的N2,输入流量为1~2.5mL/min。假手术组游离双侧颈总动脉,但不予结扎和缺氧。将各组大鼠分别于术后1d测定脑梗死体积,术后2d进行少突胶质细胞系列免疫组织化学染色分析、脑片TTC染色观察脑梗死情况以及光镜下脑病理研究,术后21d进行电镜下病理研究。 结果:实验86只新生大鼠,14只制作脑室周围白质软化模型死亡,余72只计入统计。①术后1d各组脑片大体观察:模型组脑内呈现大面积白色梗死区,多为大脑前、中动脉供血区域,2,7d龄模型组梗死体积分别为(53.45±33.90),(68.78±20.22)mm^3,梗死百分比分别为(24.98±15.44)%,(11.84±4.14)%;假手术组脑片颜色鲜红,未见白色梗死区。②新生大鼠少突胶质细胞系列标志物免疫组织化学结果:2d龄新生大鼠脑白质内以少突胶质细胞前体为主,7d龄新生大鼠则以成熟少突胶质细胞为主。模型大鼠的相应少突胶质细胞系列阳性标记物的积分吸光度值均显著低于同日龄对照新生大鼠(P〈0.05~0.01)。③各组大鼠术后2d光镜下脑病理检查结果:2d龄模型组新生大鼠的脑室周围以及皮层下白质呈现囊性坏死和细胞凋亡,而皮质神经元损伤轻微;而7d龄模型组在白质和皮质部位均呈明显损伤。④术后21d电镜下各组幼鼠脑病理检查结果:2d龄模型组幼鼠的脑白质内未见髓鞘形成,7d龄模型组幼鼠中见少量髓鞘形成,而同日龄假手术对照幼鼠的脑白质内则髓鞘形成正常。 结论:通过对2d龄新生大鼠双侧颈总动脉结扎伴缺氧30min缺氧缺血法创建的脑室周围白质软化新生大鼠模型中存在少突胶质细胞前体和少突胶质细胞的明显受损和丢失,成功建立了2d龄新生大鼠以少突胶质细胞前体为主、与人类早产儿脑室周围白质软化病理相似的脑室周围白质软化动物模型。
  • 大鼠炎性神经根髓鞘形态学变化及复方中药栓剂对神经根损伤的修复 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察腰痛灵栓直肠给药后神经根炎模型大鼠痛阈的恢复情况,髓鞘数量的变化以及神经根组织形态学改变与症状改善的相关性,探讨其作用机制。 方法:实验于2004-04/05在成都中医药大学附属医院病理生理实验室完成。实验分组:取SD大鼠72只,雌雄各半,体质量150~180g,按性别体质量随机分为正常组、模型组、大剂量组、中剂量组、小剂量组、阳性对照组,每组12只。实验方法:建立大鼠化学神经根炎模型,模拟腰椎间盘突出症,腰痛灵栓直肠给药,大、中、小剂量组给腰痛灵栓分别为1.0,0.5,0.25g生药/kg,给药容量为0.35mL/kg;正常组、模型组给等容量的5g/L羧甲基纤维素钠溶液;阳性对照组给消炎痛栓5mg/kg,给药容量为0.35mL/kg,1次/d,连续给药20d。实验评估:各组分别在术后1,3,6,9,12,15,18d时观察记录大鼠的活动征象(痛阈)、髓鞘数量的变化,并检测再生神经的神经纤维髓鞘含量平均黑度、髓鞘积分吸光度、髓鞘总面积与神经组织截面积的百分比。 结果:纳入SD大鼠72只,实验过程中模型组、小剂量组与阳性对照组有大鼠死亡,解剖发现手术处有脓肿形成3只(3组各1只),模型组不明原因死亡1只,为了提高统计效率,使各组动物数相等,在治疗结束检测前,随机剔除多余只数,最后每组10只,共60只大鼠进入结果分析。腰痛灵栓大剂量组大鼠的痛阈第9天恢复8只,第15天10只全部恢复,与阳性对照组比较差异有显著意义(P〈0.05);腰痛灵栓大、中、小剂量组神经纤维髓鞘含量平均黑度分别为(98.33±24.84,83.42±26.34,75.10±13.69);髓鞘积分吸光度/截面积分别为(26.48±12.70,15.60±9.60,57.57±65.13);髓鞘总面积/截面积分别为(0.11±0.06,0.12±0.21,0.24±0.30),与模型组及正常组比较,差异均有显著意义(P〈0.05) 结论:①腰痛灵栓大剂量组能显著恢复模型大鼠的痛阈,并与剂量有关。②腰痛灵栓使大鼠神经根炎局部神经髓鞘的数量有明显增加及对大鼠化学神经根炎所致神经髓鞘损伤有修复与再生的作用。③大鼠炎症所致疼痛的改善与神经髓鞘的数量有相关性。
  • 欢迎订阅《实用骨科杂志》 免费阅读 免费下载
  • 心肌梗死大鼠血管内皮功能及心功能变化与培哚普利的干预效应 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察心肌梗死后心力衰竭大鼠血管内皮功能和心功能的变化与血管紧张素转换酶抑制剂培哚普利的干预关系。 方法:实验于2004-12/2006-03于中山大学附属第二医院医学实验中心完成。实验动物:成年雄性SD大鼠75只,体质量250~300g。实验分组:取60只大鼠结扎冠状动脉左前降支建立心肌梗死大鼠模型,另取15只为假手术组做对照。实验方法:术后1周行超声心动图检查,以centerline方法判断心肌梗死面积。术后第2周,心肌梗死大鼠中30只给予培哚普利灌胃,另30只为对照组给予盐水灌胃。评估标准:10周后测定左室血流动力学参数,循环血液中一氧化氮,内皮素-1和C-反应蛋白的水平,并观察离体胸主动脉环对内皮依赖性扩血管物质乙酰胆碱的舒张反应。 结果:75只大鼠进入结果分析:①血浆内皮素-1和血清一氧化氮、C-反应蛋白含量的变化:与假手术组相比,心肌梗死盐水组血浆内皮素-1水平上升,血清一氧化氮含量下降,血清C-反应蛋白水平升高(P均〈0.05);与心肌梗死盐水组相比,培哚普利治疗组血浆内皮素-1水平下降,血清一氧化氮含量上升,血清C-反应蛋白水平下降(P均〈0.05)。②各组大鼠胸主动脉环对乙酰胆碱的反应性测定:心肌梗死盐水组胸主动脉环对乙酰胆碱介导的最大舒张反应显著小于假手术组和培哚普利治疗组(39.5±6.38,79.4±7.59,67.9±6.92,P均〈0.05);与假手术组相比,心肌梗死盐水组胸主动脉环对各个浓度的乙酰胆碱介导的舒张反应显著减弱(P均〈0.05);与心肌梗死盐水组相比,培哚普利治疗组显著改善各个浓度乙酰胆碱介导的舒张反应(P均〈0.05)。③各组大鼠血流动力学指标改变:与假手术组相比,心肌梗死盐水组大鼠出现明显的心力衰竭,表现为左室内收缩压降低,左室舒张末期压升高,室内压最大上升/下降速率降低(P均〈0.05);与心肌梗死盐水组相比培哚普利治疗组大鼠的心功能显著改善(P均〈0.05)。④各组大鼠存活率:10周后培哚普利治疗组存活率显著高于心肌梗死盐水组(67%,43%,P〈0.05)。 结论:心肌梗死大鼠血管内皮功能和心功能在长期应用培哚普利治疗后得到改善,其机制可能与抑制炎症反应有关。
  • 磷脂酰胆碱注射液Lipostabil局部注射溶脂实验 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察磷脂酰胆碱注射液Lipostabil的局部注射溶脂作用。 方法:实验于2006-08/10在南方医科大学动物实验中心完成。①实验分组:成年广西巴马小型猪12头,体质量50~60kg,将12头猪分别按序编号,随机分为实验组和阴性对照组,每组各6头。随机选择动物左侧或右侧腰背部、侧腹部、大腿局部范围为药物注射区,对侧为空白对照。②实验方法:在实验组猪皮下脂肪组织、真皮组织与肌肉组织内分别局部注射磷脂酰胆碱注射液Lipostabil0.5mL,共5次,每周1次。阴性对照组猪给予等量生理盐水注射。③实验评估:大体观察皮肤注射区表面红肿情况、组织病理学检查注射区局部组织变化及毒副作用,B超分别测量注射区及其对侧空白对照区的脂肪层厚度。 结果:纳入成年广西巴马小型猪12头,均进入结果分析,未发现明显的全身毒副作用。①皮肤脂肪层注射区表面红肿情况:实验组猪皮肤注射区在药物注射后,皮肤红肿严重,有局部坏死发生;阴性对照组皮肤反应轻微。②磷脂酰胆碱注射液Lipostabil对实验组猪的皮下脂肪组织结构产生了明显的破坏作用,阴性对照组未见明显破坏。③B超测量注射区及其对侧空白对照区脂肪层厚度:与对侧空白对照区相比,实验组脂肪层厚度有不同程度的变薄[(0.444±0.284),(0.542±0.227)cm,P〈0.01],阴性对照组无明显差异[(0.539±0.036),(0.538±0.036)cm,P〉0.05]。磷脂酰胆碱注射液Lipostabil注射区的肌肉组织也有变性坏死。 结论:磷脂酰胆碱注射液Lipostabil局部注射溶脂具有一定的作用,但其对组织的破坏不具有特异性。在进行进一步的研究前,不推荐进入临床应用于局部注射溶脂。
  • 整合素α2在小鼠肾发育中的表达 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察整合素α2在小鼠肾发生发育过程中表达的时空顺序,揭示其在肾发生发育中的作用。 方法:实验于2006-06/10在辽宁医学院科学实验中心与组织胚胎学实验室完成。选取健康昆明系小白鼠40只,体质量25~30g,将小白鼠按雌雄比例3∶1同窝饲养,以观察到雌鼠阴道栓脱落的最早时间计为胚龄0d;以观察到仔鼠出生的最早时间计为生后0d。分别选取胚龄14,16,18d的孕鼠和生后1,3,7,14,21,28,40d的仔鼠,每组4只,共40只。实验评估:采用免疫组织化学方法结合体视学方法和蛋白免疫印迹技术测定不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织中的整合素α2的表达及含量变化。 结果:纳入小白鼠40只,均进入结果分析。①免疫组织化学结果显示整合素α2在生肾区及间充质都有表达;在未成熟肾小球有瞬时表达,在成熟肾小球没有表达;在发育各个时期的肾小管都有明显表达。②体视学测量结果显示整合素α2在肾小管的表达规律是随着肾的发育成熟表达逐渐增多。③蛋白免疫印迹结果显示整合素α2蛋白表达随着肾脏的发育含量逐渐增加。 结论:整合素α2主要在发育各个时期的肾小管表达,提示整合素α2对胚胎肾发育的诱导主要在肾小管。
  • 《中国组织工程研究与临床康复》杂志介绍 免费阅读 免费下载
  • 大鼠卵巢组织中早期卵泡发育及卵母细胞凋亡与白藜芦醇的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察白藜芦醇对大鼠卵巢组织中早期卵泡发育及凋亡的影响。 方法:实验于2006-07/12在汕头大学医学院细胞衰老实验室完成。成年SD大鼠合笼,所生的新生雌鼠分为3组:①对照组:正常出生者,不干预。②腹腔注射组:正常出生后12h内开始腹腔注射白藜芦醇25mg/(kg·d),1次/d。③母鼠灌胃组:正常怀孕的母鼠在孕12d(以发现阴道栓为怀孕0.5d)开始进行白藜芦醇25mg/(kg·d)灌胃,1次/d,直至分娩后生下的雌鼠。各组大鼠分别在出生2,4d处死取卵巢,应用苏木精-伊红染色观察大鼠早期卵泡发育情况(计算卵母细胞巢中卵母细胞及原始卵泡和发育卵泡的比率),应用TUNEL染色观察卵母细胞凋亡的情况。 结果:①腹腔注射组和母鼠灌胃组大鼠卵母细胞巢内卵母细胞比例高于对照组[2d龄:(39.78±9.22)%,(53.20±5.08)%,(15.76±6.68)%;4d龄:(9.39±1.82)%,(5.39±2.12)%,(2.62±1.18)%;P均〈0.05];2d龄母鼠灌胃组和腹腔注射组大鼠原始卵泡和发育卵泡比例低于对照组[原始卵泡:(57.64±7.23)%,(46.40±5.20)%,(74.57±9.36)%;发育卵泡:(2.58±2.41)%,(4.51±4.60)%,(9.67±4.70)%;P均〈0.05]。②生后第2天是大鼠卵母细胞凋亡的高峰期,母鼠灌胃组和腹腔注射组卵泡凋亡率高于对照组,但差异不显著[(9.88±3.30)%,(12.95±3.34)%,(8.50±4.13)%,P〉0.05]。 结论:白藜芦醇可以延缓大鼠卵巢组织中卵母细胞巢破裂,抑制原始卵泡的发育启动;但是对于卵母细胞的凋亡没有明显影响。
  • 两种低聚糖对乳酸菌体外增殖的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察低聚异麦芽糖和低聚果糖对禽源嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌和乳酸链球菌体外增殖的影响。 方法:实验于2004-03/07在南京农业大学动物医学院药理毒理实验室完成。乳酸乳杆菌、嗜酸乳杆菌、乳酸链球菌分离自健康雏鸡肠道中。实验分别在MRS肉汤培养基中和普通肉汤培养基中进行,观察低聚糖对3株乳酸菌增殖的影响。每个部分分为干预情况相同的3组,分别为低聚异麦牙糖组、低聚果糖组和对照组,两种低聚糖的添加浓度为30g/L。每组每株菌初始接种浓度为108cfu/L,分别于0,24,48h,取菌液进行平板计数,观察每组乳酸菌的生长情况。 结果:在MRS培养基中,随着时间的延长,低聚异麦芽糖组和低聚果糖组3株乳酸菌的菌落对数值增加,与对照组相比,差异无显著性意义[嗜酸乳杆菌:(5.00±0.15),(7.76±0.15),(8.99±0.30);(5.00±0.01),(7.81±0.14),(8.87±0.08);(5.00±0.04),(7.25±0.15),(8.30±0.21);乳酸乳杆菌:(5.00±0.14),(7.97±0.10),(9.26±0.31);(5.00±0.07),(8.12±0.17),(9.24±0.24);(4.90±0.09),(7.40±0.64),(8.79±0.05);乳酸链球菌:(5.00±0.01),(8.59±0.30),(9.41±0.28);(5.00±0.08),(8.64±0.31),(9.56±0.11);(5.00±0.03),(8.16±0.21),(8.98±0.19);P〉0.05];在营养贫瘠的普通肉汤培养基中,乳酸菌在前24h处于增殖阶段,不过增殖幅度较为缓慢,而24~48h乳酸菌活菌数量呈现下降趋势;添加低聚异麦芽糖和低聚果糖,3株乳酸菌的增殖速度明显加快,24h和48h乳酸菌数量与对照组比较,差异有显著性意义[嗜酸乳杆菌:(5.0±0.15),(7.24±0.32),(8.56±0.27);(5.00±0.17),(7.20±0.31),(8.69±0.15);(5.00±0.24),(6.42±0.45),(6.03±0.24);乳酸乳杆菌:(5.00±0.06),(7.66±0.34),(8.99±0.64);(5.00±0.12),(7.98±0.08),(8.86±0.25);(4.90±0.08),(6.24±0.53),(5.83±0.05);乳酸链球菌:(5.0±0.14),(8.43±0.24),(9.33±0.21);(5.00±0.02),(8.50±0.33),(9.19±0.40);(5.00±0.09),(7.56±0.45),(7.44±0.06),P〈0.05]。提示低聚异麦芽糖和低聚果糖可促进乳酸菌的生长增殖。 结论:低聚异麦芽糖和低聚果糖可促进禽源乳酸菌的生长增殖,在普通肉汤培养基中增殖效果更加明显。
  • 小干扰RNA抑制neuro-2a细胞内源β位淀粉样前体蛋白裂解酶1基因的表达 免费阅读 收费下载
  • 目的:分析小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)抑制neuro-2a细胞内源β位淀粉样前体蛋白裂解酶1基因(Beta-site APP cleaving enzyme protein,BACE1)的表达情况。 方法:实验于2004-12/2006-06在中山大学中山医学院和上海交通大学农业与生物学院完成。①用脂质体将EGFP基因表达载体pEGFP-C1 Vector和体外转录合成的针对EGFP基因的小干扰RNA(siEGFP)分别或同时转染neuro-2a细胞,在倒置荧光显微镜下计算EGFP在neuro-2a细胞中的表达率。②将体外转录合成的siBACE1-1,siBACE1-2,siBACE1-3转染neuro-2a细胞,干扰24,48,72h后分别用Real time RT-PCR定量分析siBACE1对内源BACE1基因表达的抑制率和干扰的时效性。 结果:①外源EGFP基因转染neuro-2a细胞后,43%neuro-2a细胞高表达EGFP蛋白。通过转染siEGFP则可有效抑制EGFP基因表达。②3个干扰位点的siBACE1对BACE1基因表达有不同的抑制效率,siBACE1-3使BACE1m RNA表达水平下降60%,siBACE1-1为13%,siBACE1-2对BACE1 mRNA无明显的抑制作用。③siBACE1抑制内源BACE1基因的表达与干扰时间相关,siBACE1干扰24h、48h后BACE1 mRNA的表达与正常组无明显差异(P〉0.05),但干扰72h后,siBACE1-3和siBACE1-1均使BACE1 mRNA表达量下降。 结论:体外转录合成的siBACE1能有效抑制neuro-2a细胞内源BACE1基因表达,其抑制率与BACE1基因的干扰位点和干扰时间相关。
  • 骨量下降期成年人骨密度与体质量指数的相关性 免费阅读 收费下载
  • 目的:通过对骨量下降期成年人的跟骨进行骨密度的测试,探讨骨量下降期成年人骨密度与体质量指数的关系。 方法:实验于2005-02/05在苏州市体育科学研究所进行测试,随机选取苏州市骨量下降期40~65岁成年912人作为受试对象,其中男517人,女395人。记录受试者的性别、出生年月,分别测试身高、体质量、体质量指数;采用sonost-2000超声骨密度仪测试跟骨骨密度,算出跟骨骨质量指数;测量不同体质量指数组间超声参数和骨质疏松发生率;并进行体质量指数与各指标的相关性分析。 结果:受试对象912人全部进入结果分析。①体质量指数与各指标的相关性分析:体质量指数越高与超声波衰减系数和骨质指数相关性越高(r=0.573和0.525,P〈0.01),体质量指数与骨密度和骨强度呈显著性正相关。②不同体质量指数组间骨质疏松率的比较:根据体质量指数测量结果分为≤18.50kg/m^2组,18.50~24.9kg/m^2组和≥25.0kg/m^2组。结果表明,体质量指数≤18.5kg/m^2组骨质疏松发生率为12.5%,18.50~24.9kg/m^2组骨质疏松发生率为5.45%,≥25.0kg/m^2组骨质疏松发生率为3.89%。 结论:①体质量指数与骨密度和骨强度呈正相关。体质量指数越大,骨密度和骨强度越高,即骨承受和抵抗外力的能力强,骨质疏松发生率低。②保持适当的体质量指数有利于防止骨质疏松的发生,低体质量指数是发生骨质疏松的危险因素之一。
  • 第十届全军骨科学术大会暨国际骨科学术研讨会征文通知 免费阅读 免费下载
  • 骨形态发生蛋白4转基因治疗大鼠的胫骨缺损 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察基因工程技术构建人骨形态发生蛋白4复制缺陷腺病毒的成骨效果。 方法:实验于2006-03/08在安徽医科大学第一附属医院实验动物中心完成。实验分组:选取普通级雄性SD大鼠30只,体质量(200±10)g,全部动物胫骨上端部分分别造成8mm×5mm长方形缺损。采用自身对照法,右侧骨缺损为实验组,左侧骨缺损为对照组。实验组植入人骨形态发生蛋白4复制缺陷腺病毒复合明胶海绵,对照组植入单纯明胶海绵。实验评估:术后分别于4,6,8周麻醉后处死10只动物,取材行X线、组织病理、免疫组织化学、透视电镜检查,观察成骨情况。 结果:纳入30只大鼠,全部进入结果分析。①大鼠胫骨缺损X线、组织病理学检查结果:术后8周实验组和对照组骨缺损均得到修复,但实验组无论从成骨时间、成骨效果、新生骨量等方面都要优于对照组。其中各时间点实验组骨密度明显高于对照组,差异有显著性意义[4周:(95.91±16.33),(87.93±11.52);6周:(128.34±10.64),(102.41±9.81);8周:(138.36±10.49),(121.56±9.63);P〈0.01]。各时间点实验组新生骨占骨缺损面积比明显高于对照组,差异有显著性意义[4周:(41.39±5.65)%,(26.58±5.62)%;6周:(80.35±7.25)%,(65.41±6.52)%;8周:(96.45±2.76)%,(82.22±7.30)%;P〈0.01]②术后4周免疫组织化学染色结果:实验组软骨及骨痂内呈强阳性反应,而对照组骨痂内骨形态发生蛋白4表达微弱。 结论:人骨形态发生蛋白4重组腺病毒具有良好的成骨活性,骨形态发生蛋白4直接转基因治疗能够加快骨缺损的修复。
  • 益气生骨颗粒对大鼠骨折愈合骨痂中无机质及钙含量的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:中药黄芪有补气固表作用,当归、川芎、红花、有补血活血散瘀止痛功效。观察由黄芪、党参、当归、川芎、红花等组成的新药制剂益气生骨颗粒对骨折大鼠骨痂无机物和钙含量的影响,探讨其促进骨折愈合的机制。 方法:实验于2006-04/09在河南省正骨研究院生物医学工程研究室完成。实验分组:选择SD雄性大鼠36只,随机分为空白组、模型组、对照组和益气生骨颗粒剂组,每组9只。实验材料:益气生骨颗粒(自行研制,由黄芪、党参、当归、川芎、红花等组成)。实验过程:①除空白组外其余3组动物称质量后,以30g/L戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔注射麻醉,用手术剪剪断左侧桡骨,造成左侧桡骨骨折模型,缝合切口,不包扎。②造模后第2天开始灌胃给药,模型组动物给予颗粒剂辅料9.6g/(kg·d),每日分2次灌胃;对照组给予恒古骨伤愈合剂2.5mL/(kg·d),每2日1次灌胃;益气生骨颗粒组给予益气生骨颗粒12g/(kg·d),每日分2次灌胃;空白组正常喂养。实验评估:6周后动物麻醉后处死。取骨痂,用焚烧法测定骨痂无机质和有机物含量,利用原子吸收分光光度法测定骨痂钙含量。 结果:空白组因麻醉死亡2只大鼠,共34只进入结果分析。①骨痂无机质和有机质含量:益气生骨颗粒剂组和阳性药物对照组无机质含量都高于空白组和模型组[(29.039±3.082)%,(27.761±2.885)%比(24.450±3.620)%,(25.989±3.749)%,P〈0.05],而有机质含量均低于空白组和模型组(P〈0.05)。②骨痂钙含量:益气生骨颗粒剂组骨痂钙含量高于空白组[(4.365±0.435)%,(3.743±0.239)%,P〈0.05]。 结论:益气生骨颗粒通过提高骨痂无机质含量和促进钙的沉积促进骨折愈合。
  • 异种脱细胞海绵体尿道基质修复兔尿道缺损 免费阅读 收费下载
  • 目的:探索应用猪脱细胞尿道基质修复兔尿道缺损的可行性。 方法:实验于2004-01/12在中山大学第二附属医院实验中心完成。实验分组及方法:取新西兰雄性大白兔52只,体质量2.5~3.5kg;雄性家猪6只,体质量100kg左右。将大白兔随机分为实验组:用猪脱细胞海绵体尿道基质修复兔尿道缺损;自体尿道黏膜组:用镶嵌有自体尿道黏膜上皮的猪脱细胞海绵体尿道基质修复尿道缺损;对照组:未行手术作对照,其中实验组和自体尿道黏膜组每组24只,对照组4只。实验评诂:术后1,2,4,8,12,24周行逆行尿道造影,麻醉后处死动物,取再造尿道标本作组织病理学检查。 结果:纳入大白兔52只,均进入结果分析。所有实验动物存活,除2例发生狭窄、2例发生尿瘘外,其余均取得满意效果。组织学观察显示,术后2周自体尿道黏膜组再造尿道管腔完全上皮化,4周实验组再造尿道腔面完全上皮化。在再造尿道的组织中,术后1个月时开始有血管生长,3个月时有平滑肌细胞生长;6个月时平滑肌及胶原纤维排列整齐,血管数量接近正常尿道的血管数量。 结论:猪脱细胞海绵体尿道基质可以一期再造兔尿道,镶嵌自体尿道黏膜可以加速再造尿道管腔的上皮化。
  • 佐剂性关节炎大鼠细胞因子和淋巴细胞亚群变化与可铁宁的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察吸烟者体内尼古丁代替主要产物可铁宁在佐剂性关节炎动物模型抗炎和调节免疫方面的作用。 方法:实验于2005-10/2006-09在南方医科大学南方医院检验科及实验动物中心完成。实验动物:SD大鼠50只。实验分组和给药:随机选取SD大鼠40只注射完全弗氏佐剂,致炎建立佐剂性关节炎模型,剩余的10只SD大鼠为正常组。将40只佐剂性关节炎大鼠随机分为炎症组10只,可铁宁低、中、高剂量组各10只,可铁宁各组于佐剂注射后1周开始灌胃给药,分别给0.5,1.5,4.5g/kg体质量剂量药物,连续7d。实验评估:致炎后28d开始进行运用ELISA及流式细胞术,检测用药后对白细胞介素1β、白细胞介素2,T细胞增殖等指标(CD4^+,CD8^,CD4^+/CD8^+)的影响。 结果:50只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠血清中白细胞介素1β、白细胞介素2含量:与炎症组相比,可铁宁高、中、低剂量各组白细胞介素1β含量明显下降[(101.4±11.24),(53.40±8.23),(60.34±5.97),(72.31±8.06)ng/L,P〈0.05],白细胞介素2含量明显升高[(121.3±21.2),(195.9±51.6),(174.3±40.3),(169.7±53.2)ng/L,P〈0.05],且作用有一定的剂量依赖性。②各组大鼠淋巴细胞亚群CD4^+,CD8^+,CD4^+/CD8^+变化:造模第28天,与正常组相比,炎症组的CD4^+增加,CD8^+明显降低(P〈0.05),CD4+与CD8^+的比值显著增加(P〈0.05);与炎症组相比较,可铁宁高剂量组的CD4^+显著降低(P〈0.05);可铁宁各组的CD8+明显增加(P〈0.05),CD4^+与CD8^+比值显著下降,呈剂量依赖性。 结论:可铁宁可调节大鼠血清中异常的白细胞介素1及白细胞介素2含量,可铁宁在试验动物水平有抗炎和免疫调节的作用。
  • 先天性肌性斜颈程度与胸锁乳突肌胶原含量变化的关系 免费阅读 收费下载
  • 目的:分析先天性肌性斜颈临床轻重程度与其病理变化的关系。 方法:实验于2003-10/2006-11在武警新疆总队医院完成。选择本科收治的30例先天性肌性斜颈患儿行胸锁乳突肌切断术切取的标本,年龄3~13岁,其中男18例,女12例;左侧9例,右侧21例。取材部位为患侧胸锁乳突肌锁骨头。斜颈程度据术前临床检查评估,轻度9例,中度15例,重度6例。采用免疫组织化学方法对30例标本进行Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原检测,以图像分析系统对其结果进行分析,并进行统计学处理. 结果:轻中重度先天性肌性斜颈胸锁乳突肌Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的阳性表达,差异有显著性差异[Ⅰ型胶原:(19.13±5.24),(27.87±6.71),(40.58±6.15);Ⅲ型胶原:(14.76±3.66),(22.39±4.17),(30.11±3.41);P〈0.05]。 结论:先天性肌性斜颈胸锁乳突肌胶原含量与其纤维化病变程度一致,即斜颈程度越重,其胶原含量越高。
  • 肿瘤坏死因子α诱导蜕膜细胞凋亡模型建立及黄芩苷对蜕膜细胞凋亡的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:探索建立肿瘤坏死因子诱导蜕膜细胞凋亡模型,观察黄芩苷对早孕蜕膜细胞凋亡的影响,初步分析黄芩清热安胎作用机制。 方法:实验于2006-04/09在湖南中医药大学国家重点二级实验室病理生理实验室完成。取湖南中医药大学第一附属医院门诊人流手术室正常妊娠40d健康孕妇人流组织,患者知情同意。体外常规进行蜕膜细胞培养,选取经鉴定的4、5代细胞蜕膜细胞,用不同浓度(0.5,2.0,10.0,50.0μg/L,共设4组,并设空白对照组)的肿瘤坏死因子α作用于蜕膜细胞,四甲基偶氮唑盐比色实验分析肿瘤坏死因子α对蜕膜细胞活力的影响,荧光细胞染色观察确定蜕膜细胞凋亡模型的建立。选取适宜浓度的黄芩苷作用于正常蜕膜细胞及肿瘤坏死因子α诱导的凋亡蜕膜细胞(设肿瘤坏死因子α模型组,黄芩苷组,肿瘤坏死因子α加黄芩苷组,并设空白对照组),培养24h后,四甲基偶氮唑盐比色实验分析黄芩苷对蜕膜细胞活力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡率。 结果:实验成功获取足够量的细胞,经泌乳素免疫组化鉴定为较高纯度的蜕膜细胞。①肿瘤坏死因子α作用后的蜕膜细胞活性均低于空白对照组,并且随着肿瘤坏死因子α浓度越大,活力越小。10.0,50.0μg/L肿瘤坏死因子α作用后蜕膜细胞活性与空白对照组比较,差异有显著性意义[(0.196±0.040),(0.106±0.020),(0.317±0.020),P〈0.05]。但50.0μg/L时经形态学观察有部分细胞漂浮、死亡。②肿瘤坏死因子α模型组蜕膜细胞活性低于黄芩苷组和肿瘤坏死因子α加黄芩苷组,差异具有显著性意义[(0.27±0.03),(0.49±0.01),(0.38±0.02),P〈0.05]。③流式细胞术示空白对照组蜕膜细胞凋亡率低于其他各组,差异均有显著性意义[(1.48±0.45)%,(16.40±0.82)%,(9.78±0.26)%,(10.96±0.92)%,P〈0.05]。在荧光显微镜下,肿瘤坏死因子α作用后凋亡的蜕膜细胞细胞核变小皱缩,可见致密强荧光。 结论:肿瘤坏死因子α能明显抑制人蜕膜细胞增殖分裂的过程,诱导该细胞凋亡,可用于人蜕膜细胞凋亡模型的建立。而黄芩苷对肿瘤坏死因子α诱导的蜕膜细胞凋亡具有一定对抗抑制作用。
  • 碱性成纤维细胞生长因子干粉剂并中药修复放射性溃疡创面愈合18例 免费阅读 收费下载
  • 目的:采用碱性成纤维细胞生长因子干粉剂并中药治疗放射性溃疡,探索一种新的保守疗法对放射性溃疡的治疗效果。 方法:选择2000-03/2006-06北京积水潭医院烧伤科收治放射性溃疡患者18例共18个创面。男5例,女13例;年龄35~75岁;病程6个月~4年。患者均知情同意。所有溃疡创面清创后采用碱性成纤维细胞生长因子干粉剂(北京双鹭药业有限公司生产)与橡皮生肌膏(天津达仁堂生产)混合内敷,外用溃疡贴(丹麦康乐保公司生产)的方法,每两三天换药1次。观察溃疡创面愈合状况及完全愈合所需时间。由于入选的病例均是经过常规方法治疗半年后尚未愈合的创面,故在实验中除统计每一个创面完全愈合所需的时间外,还以6个疗程(42d)作为疗效判定标准。 结果:18例患者均进入结果分析。18例溃疡创面都产生了明显的愈合,其中3周内愈合者1例,4周内愈合者7例,5周内愈合者4例,6周内愈合者3例,超过6周愈合者3例(其中2例植皮后愈合),6周内总愈合率为83.3%,愈合所需时间平均为34.4d。追踪随访14例患者,至少半年内没有复发,最长的已达3年,另有4例出院后失去联系,未能随访。 结论:采用碱性成纤维细胞生长因子干粉剂与橡皮生肌膏混合内敷,外用溃疡贴保守疗法能够有效地促进放射性溃疡的愈合。
  • 脑源性神经营养因子对周围神经修复与再生的促进效应 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察脑源性神经营养因子对周围神经损伤修复与再生的作用。 方法:实验于2000-06/2002-08在大连医科大学神经解剖研究室完成。取健康SD大鼠24只,体质量180~200g,雌雄各半。腹腔内麻醉后,暴露左、右侧坐骨神经,在距梨状肌出口侧1.0cm处切除5mm长的坐骨神经,两断端用硅胶管桥接形成神经再生室。局部用药右侧再生室内注入0.5mL脑源性神经营养因子作为实验组,左侧再生室内注入生理盐水0.5mL作为对照组,观察局部应用脑源性神经营养因子对神经再生的影响。实验评估:术后9周对动物进行损伤肢体行为功能评价、小腿三头肌湿重测定、轴突计算机图像分析轴突数目及直径。 结果:纳入SD大鼠24只,均进入结果分析。①各组动物精神状态及行为变化:对照组大鼠第3~4周时出现脱趾、溃疡加剧至第9周仍无愈合及减轻迹象。实验组于第4~5周时溃疡相继愈合,至9周时基本恢复正常。②小腿三头肌湿重测定:实验组明显重于对照组,差异显著[(0.677±0.112),(0.546±0.155)g,P〈0.01]。③轴突计算机图像分析轴突计数及直径:实验组均高于对照组,差异显著[轴突数目:(2.361±0.180)×10^3,(1.757±0.113)×10^3个,P〈0.01;轴突直径:(0.800±0.120),(0.530±0.170)μm,P〈0.01]。 结论:局部应用脑源性神经营养因子对周围神经再生有明显的促进作用。
  • Survivin、血管内皮生长因子及微血管密度在正常胆管组织和胆管癌组织中的比较 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察Survivin基因表达与胆管癌血管发生的关系。 方法:实验于2006-02/05在安徽省立医院实验室完成。选取安徽省立医院1999-03/2006-02手术切除胆管癌标本32例,其中男16例,女16例,术前均未作放疗、化疗等抗肿瘤治疗;正常胆管组织9例,来源于法医系获得的交通意外死亡者标本,所有标本均经病理证实,应用免疫组织化学S-P法检测Survivin、血管内皮生长因子、微血管密度在32例胆管癌组织标本和9例正常胆管组织标本中的表达。 结果:①在胆管癌组织中检测到CD34、血管内皮生长因子和Survivin的表达,而在正常胆管组织中无Survivin表达,且胆管癌组织中微血管密度值、Survivin、血管内皮生长因子的阳性表达率显著高于正常胆管组织。②胆管癌组织微血管密度值、血管内皮生长因子、Survivin的表达与转移有相关性。Survivin基因的表达与患者的性别、年龄、肿瘤的大小、分化无关。③32例胆管癌病例中,血管内皮生长因子阳性表达的有21例,其平均微血管密度为62.97;在Survivin表达阴性的9例病例中,只有1例血管内皮生长因子表达阳性,表明血管内皮生长因子表达与Survivin表达密切相关。 结论:Survivin与胆管癌血管发生有密切联系,其在胆管癌中高度表达可能与胆管癌的发生、发展、转移有关。
  • 反义基质金属蛋白酶2基因对人增殖期血管瘤内皮细胞的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察Ad-aMMP-2cDNA转染原代培养的增殖期血管瘤内皮细胞后,对体外培养的血管内皮细胞生物学特性的影响。 方法:实验于2003-10/2004-06在四川大学华西临床医学院肿瘤实验室,四川大学基础与法医学院电镜室完成。选用1名出生52d女性患儿左胸壁的海绵状血管瘤(病理诊断为增殖期血管瘤)作组织块原代培养,分离、纯化并传代培养至4代后,经形态学观察、免疫组织化学染色和电镜观察鉴定确认为增殖期血管瘤内皮细胞。将血管瘤内皮细胞分3组:①M199组:继续用无血清M199培养24h。②Ad-GFP组:用10μLAd-GFP(MOI=100)转染每孔的细胞,1h后追加无血清M199培养24h。③Ad-aMMP-2组:用10μLAd-aMMP-2cDNA(MOI=100)转染每孔的细胞,1h后追加无血清M199培养24h。观察Ad-aMMP-2组血管内皮细胞转染后24,48,120h基质金属蛋白酶2mRNA的表达。逆转录-聚合酶链反应、免疫印迹技术和明胶酶谱试验的方法检测在核酸水平和蛋白水平基质金属蛋白酶2基因的表达。 结果:①组织块法原代培养的增殖期血管瘤内皮细胞:获取的第1代血管瘤内皮细胞纯度达70%,椎虫蓝染色显示成活率在95%以上。②逆转录-聚合酶链反应定量检测mRNA:Ad-aMMP-2组血管瘤内皮细胞转染Ad-aMMP-2后24h,与同时段的Ad-GFP组比较,基质金属蛋白酶2mRNA表达水平均开始下降0.327±0.034,0.531±0.158;48h后下降的趋势更加明显0.189±0.028,0.505±0.083,(P〈0.05);120h后基质金属蛋白酶2mRNA的表达显著下降0.106±0.014,0.510±0.106,(P〈0.01)。③明胶酶谱试验和免疫印迹技术检测表明:Ad-GFP组血管瘤内皮细胞表达基质金属蛋白酶2与M199组无明显差异,而Ad-aMMP-2组血管瘤内皮细胞表达基质金属蛋白酶2明显低于Ad-GFP组和M199组。 结论:①用组织块法原代培养增殖期血管瘤内皮细胞,能获得纯度较高的血管瘤内皮细胞。②在体外实验中,反义基质金属蛋白酶-2cDNA可以有效抑制血管瘤内皮细胞分泌基质金属蛋白酶2。
  • 《临床和实验医学杂志》征稿函 免费阅读 免费下载
  • 完全去神经大鼠皮肤愈合过程中神经纤维再生和降钙素基因相关肽的变化 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察完全去神经对大鼠皮肤伤口愈合的影响及愈合过程中神经纤维再生和降钙素基因相关肽的变化情况,探讨神经纤维再生和降钙素基因相关肽与伤口愈合的关系。 方法:实验于2006-02在北京大学人民医院中心实验室完成。雌性Wistar大鼠32只,体质量250~300g。切断所有大鼠右下肢的坐骨神经和股神经,然后分别制造1cm的圆形皮肤缺损作为去神经组,在大鼠左下肢相应部位制造同样皮肤缺损作为对照组,于伤后1,3,7,14d每个时间点随机处死8只大鼠,用3M贴膜覆盖于伤口,然后沿切口周围1cm切取伤口组织,观察伤口愈合情况,组织化学染色观察神经丝蛋白和降钙素基因相关肽的变化。 结果:纳入大鼠32只,均进入结果分析,伤口无感染。①两组大鼠伤后7d的伤口面积比伤后1d均明显缩小[去神经组:(0.195±0.053),(0.687±0.053)cm^2;对照组:(0.131±0.041),(0.562±0.088)cm^2]。与对照组相比,去神经组伤后3d大鼠的伤口面积无明显变化[(0.366±0.031),(0.408±0.079)cm^2,P〉0.05]。②去神经组伤口的神经丝蛋白和降钙素基因相关肽阳性染色在伤后第1,3,7,14天均明显少于对照组。 结论:完全去神经后皮肤伤口愈合缓慢,而伤口内的神经纤维再生缓慢和降钙素基因相关肽的减少与皮肤伤口愈合缓慢有着密切关系。
  • 欢迎订阅2007年《临床小儿外科杂志》 免费阅读 免费下载
  • 神经营养因子Neuritin的生物学特性与神经再生 免费阅读 收费下载
  • 目的:总结Neuritin基因表达调控、分子特征及在神经再生领域的研究。 资料来源:应用计算机检索Pubmed和Springlink数据库2005-01/2006-10相关神经营养因子Neuritin、神经再生方面的文献,检索词“Neuritin、nerve regeneration”,限定文献语言种类为English。 资料选择:对资料进行初审,选取包括Neuritin的全部文献和神经再生相关的文献,开始查找全文。纳入标准:与神经再生有关的神经营养因子的机制研究。排除标准:神经再生相关的药物及功能研究。 资料提炼:在Pubmed共检索到与Neuritin相关的文章17篇,在Springlink检索到49篇与神经再生相关的生物医学和生命科学的文献,最终纳入39篇符合标准的文献。 资料综合:Neuritin是一种新近发现的与神经可塑性相关的神经营养因子,能促进树突和轴突的生长和突触成熟,调节突触回路的形成。它是一条编码糖基磷脂酰肌醇锚定的糖蛋白基因,在神经组织中表达最多,其中以齿状回最高,其次为海马,大脑皮层和小脑。Neuritin作为神经活动和神经营养素发挥作用的共同下游因子,在促进突触成熟、防止神经细胞凋亡、保护运动神经元和促进血管生成等方面具有重要作用。本文就Neuritin的生物学特性及在神经再生领域的研究做一综述。 结论:Neuritin作为一种新的、与神经可塑性相关的营养因子,在神经再生领域中具有潜在的、良好的应用前景。
  • 胎盘生长因子在肺纤维化发病机制中的作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:总结并分析肺纤维化的发生机制,探讨胎盘生长因子及其受体与肺纤维化发病的联系,为临床治疗肺纤维化提供新的启示。 资料来源:应用计算机检索PubMed数据库1990-01/2007-01有关肺纤维化、胎盘生长因子的文章,检索词“pulmonary fibrosis,placenta growth factor”,限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库1994-01/2007-01期间的相关文章,检索词“肺纤维化、胎盘生长因子”,限定文章语言种类为中文。 资料选择:对资料进行初审,选取符合研究要求的有关文章找全文。纳入标准:①有关胎盘生长因子及其受体的结构、生物特性及功能的研究。②肺纤维化发生机制及肺纤维化与胎盘生长因子相关性研究。排除标准:重复性研究。 资料提炼:共收集到符合上述要求的文献69篇,排除重复或类似的研究,31篇符合研究要求,其中14篇关于胎盘生长因子生物特性研究,17篇关于肺纤维化与胎盘生长因子相关性研究。 资料综合:①胎盘生长因子是病理条件下控制血管生成的开关,能显著增强血管内皮生长因子的生物学活性,而血管内皮生长因子可能促进肺泡炎发生及肺纤维化形成。②胎盘生长因子是促血管生成因子,同时能促进炎症反应,而肺部炎症的产生是肺纤维化发生的基础。③胎盘生长因子能促进肺泡上皮细胞凋亡,而肺泡或细支气管上皮细胞凋亡是导致肺纤维化形成的主要原因。④异常失控的血管生成、炎症反应、细胞凋亡等因素均可能参与了肺纤维化的进程,胎盘生长因子可能通过各种影响因子,促进肺纤维化。 结论:胎盘生长因子通过增强血管内皮生长因子的生物学活性,促进炎症反应和细胞凋亡在肺纤维化中发挥重要作用,胎盘生长因子及其受体与肺纤维化的发病有着密切的联系,通过干预其表达可能为治疗肺纤维化提供新的方向。
  • 欢迎订阅《感染、炎症、修复》杂志 免费阅读 免费下载
  • 内分泌因子、生长因子、细胞因子与卵巢卵泡的发育 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨内分泌因子、生长因子、细胞因子等因素对卵巢卵泡发育以及凋亡调控机制的研究进展。 资料来源:应用计算机检索PubMed数据库1995-01/2006-09关于卵巢卵泡发育和卵泡凋亡研究的文章,检索词“follicular development,follicular atresia,oocyte,apoptosis”,限定文章的语言种类为English。 资料选择:对资料进行初筛,选取近年发表的关于卵巢卵泡发育和卵泡凋亡的文献,纳入标准:①具有原创性,论点论据可靠的试验文章。②观点明确,分析全面的文章。③文献主体内容与此课题联系紧密的文章。排除标准:实验设计不合理的文章及观点模糊的综述。 资料提炼:共检索到225篇关于卵巢卵泡发育和卵泡凋亡研究的文献,最终纳入56篇符合标准的文献。 资料综合:哺乳动物卵巢卵泡发育和凋亡过程包括卵母细胞凋亡、原始卵泡形成、原始卵泡发育启动、卵泡发育成熟和卵泡闭锁等阶段。在卵泡腔形成前,卵泡的存亡不依赖于促性腺激素,主要是受各种生长因子和细胞因子的调节;卵泡腔形成后,促性腺激素是卵泡的主要存活因子,它主导卵泡的命运。本文拟对内分泌因子、生长因子、细胞因子等因素对卵巢内生殖细胞和卵泡的存活以及凋亡调控的机制进行综述。 结论:在哺乳动物卵巢中,雌性生殖细胞的发育和凋亡是一个复杂的多因素调控过程,除遗传因素外,内分泌因子、生长因子、细胞因子等也起关键性作用。
  • 组织工程化血管构架及构建环境相关研究与进展 免费阅读 收费下载
  • 目的:介绍组织工程血管的支架材料设计、种子细胞的选择及体外动态培养系统的应用现状及进展。 资料来源:应用计算机检索PUBMED 1996/2007与组织工程化血管相关的文章,检索词“tissue engineering,vascular,scaffold,seed cell,bioreactor”,限定文献语种为“English”;同时检索万方数据库2000/2007相关文章,检索词“组织工程,血管,支架材料,种子细胞,生物反应器”,限定文献语种为中文。 资料选择:共检索到相关文献200余条,选择与组织工程血管构建、组织工程血管支架材料及其生物相容性研究、种子细胞选择相关的文章,无论观察对象为人或动物、无论是否有对照组均纳入,排除综述和重复文献。 资料提炼:根据以上标准共纳入30篇进行综述。其中12篇陈述了血管构架材料,12篇介绍种子细胞选择,8篇论述了构建环境对组织工程血管的影响。 资料综合:①根据血管构架的来源和性能,可分为天然生物生材料和人工合成材料,因为2种材料均有其缺陷,目前已有研究将天然材料的重要氨基酸序列接在合成聚合物的表面,形成复合生物材料以克服两种材料各自的缺陷。②选取种子细胞的一种途径是从组织活检中直接捕获成熟的血管壁细胞,来源包括自体的非必须大血管壁细胞及微血管壁细胞;另一种途径就是通过构建具有自我更新、多向繁殖分化能力的干细胞工程来获得相应的种子细胞。③组织工程血管的培养环境应尽可能模仿生物体内血管生发的环境条件。 结论:到目前为止,组织工程血管的研究主体仍处于实验阶段,现有的临床应用仅仅是少量的尝试性探索。只有从应力与生长关系出发,摸索出能够成功诱导分化成血管壁细胞的干细胞系,在体外完全模拟出新生血管的相同环境,并解决体内移植的组织相容性等问题,才能形成可生长性、可塑形性和高度顺应性的组织工程血管。
  • 5'-一磷酸腺苷激活蛋白激酶对运动骨骼肌糖代谢的调节效应 免费阅读 收费下载
  • 目的:综述5'-一磷酸腺苷激活蛋白激酶对运动中骨骼肌糖代谢的作用及其机制。 资料来源:应用计算机检索Medline和Highwire1986-01/2006-10有关运动、5'-一磷酸腺苷激活蛋白激酶、骨骼肌糖代谢的文献,检索词“AMPK,glycometabolism,skeletal muscle,exercise”,限定文章语言种类为English。 资料选择:对资料进行初审,选取5'-一磷酸腺苷激活蛋白激酶与运动骨骼肌糖代谢有关的文献,排除重复研究。 资料提炼:共收集相关文献120篇,排除重复研究,纳入28篇。 资料综合:运动激活骨骼肌5'-一磷酸腺苷激活蛋白激酶(5'-AMP activated protein kinase,AMPK),AMPK激活后通过促葡萄糖转运和氧化、抑制糖原合成及促进糖原酵解而调节运动中的糖代谢。AMPK促葡萄糖转运的机制主要与促葡萄糖转运体4转位于胞膜有关,此过程涉及到AS160、一氧化氮、肌细胞增强因子2及过氧化物酶体增殖子γ辅激活因子1α等AMPK的下游靶:促糖原分解与抑制糖原合成的机制分别涉及到对糖原合成酶的抑制和磷酸果糖激酶的激活。 结论:AMPK在调控运动骨骼肌糖代谢中发挥着重要作用,阐明其机制有助于理解运动骨骼肌能量代谢的原理。
  • 《中国神经再生研究(英文版)》杂志介绍 免费阅读 免费下载
  • 瞬时性受体电位通道香草酸受体5、6与骨代谢的关系 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨瞬时性受体电位通道香草酸受体5、6与骨代谢的关系。 资料来源:应用计算机检索PubMed数据库1999-01/2006-07相关瞬时性受体电位通道方面的文献,检索词“TRPV”,限定文献语言种类为English。 资料选择:对资料进行初审,选取包括瞬时性受体电位通道香草酸受体5、6的文献,开始查找全文。纳入标准:对两者及瞬时性受体电位通道家族进行研究的文章。排除标准:研究内容局限于瞬时性受体电位通道香草酸受体1~4的文章。 资料提炼:共检索到106篇关于瞬时性受体电位通道香草酸受体的文献,最终纳入30篇符合标准的文献。 资料综合:瞬时性受体电位通道香草酸受体5、6是瞬时性受体电位通道超家族中的成员,是专门的上皮样钙离子通道。目前研究已经证明它们在肠道和肾脏等组织中有表达,并对跨细胞钙离子转运起着关键性调控作用。但在骨组织中表达情况相关报道较少,在骨代谢机制上的研究更少,本文针对目前两者与骨代谢的关系进行综述。 结论:深入研究瞬时性受体电位通道香草酸受体5、6钙离子通道在骨代谢中的作用,对于那些与骨代谢相关疾病的治疗将能从分子水平上找到解决的方法。
  • 2007年第二届全国骨坏死及髋关节疾病研讨会暨全国股骨头缺血性坏死修复与再造学习班通知 免费阅读 免费下载
  • 运动性骨骼肌微损伤的特性 免费阅读 收费下载
  • 目的:分析运动性骨骼肌微损伤的特性。 方法:应用计算机检索HighWire Press1989-01/2006-12关于运动性骨骼肌微损伤的文章。检索词“musclemicro-damage”并限定文章的语言种类为English。同时利用计算机检索中国期刊全文数据库1989-01/2006-12的相关文章,限定文章语言种类为中文,检索词“运动性骨骼肌微损伤”。 结果:运动后骨骼肌微损伤的发生的直接证据主要表现在运动对骨骼肌微结构和超微结构的影响,其间接证据主要表现在血液中肌肉酶活性和肌红蛋白含量增加、血液中C-反应蛋白含量升高、尿液中肌肉蛋白质分解产物增加和骨骼肌组织中炎症反应标志物增高。 结论:了解运动性微损伤的特性可以预防和干预运动后微损伤的发生,为有效地预防延迟性肌肉酸痛提供理论参考。
  • 蛋白质组技术在类风湿关节炎实验及临床中的应用 免费阅读 收费下载
  • 目的:从蛋白质组学技术在类风湿关节炎临床与实验研究中的应用现状出发,探讨蛋白质组学在类风湿关节炎发病及防治方面的作用。 方法:应用计算机检索PubMed数据库1995-01/2006-10相关蛋白质组学技术在类风湿关节炎临床与实验研究中应用的文献,检索词“rheumatoid arthritis,arthritis、proteome、synovium”,限定文献语言种类为English,同时检索CNKI数据库1995-01/2006-10相关蛋白质组学技术在类风湿关节炎临床与实验研究中应用的文献,检索词“类风湿关节炎,蛋白质组,滑膜”,限定文献语言种类为中文。对资料进行初审,选取包括类风湿关节炎或实验性关节炎不同病变部位的蛋白质组研究水平的文献,开始查找全文。纳入标准:①类风湿关节炎的蛋白质组研究。②实验性关节炎的蛋白质组研究。排除标准:①综述文献。②重复研究类文章。 结果:共检索到20篇关于蛋白质组技术在类风湿关节炎临床与实验研究中应用的文献,最终纳入18篇符合标准的文献。人类基因组计划的胜利完成,使得生命科学的研究进入了后基因组时代,研究热点逐渐发生了由结构基因组学向功能基因组学的转变。蛋白质组学的产生,使人们能够在分子水平上从动态的、整体的角度探讨生命现象本质和生命活动规律及药物作用机制。类风湿关节炎是一个多分子、多基因、多蛋白参与的复杂病理过程。本文叙述了近年来蛋白质组技术在类风湿关节炎临床研究与实验研究中的应用,为进一步揭示类风湿关节炎的发病机制及防治类风湿关节炎提供了有利的线索。 结论:蛋白质组学技术为类风湿关节炎的发病机制、诊断及防治提供了有力的依据,今后需加强这方面的研究。
  • 欢迎访问《中国组织工程研究与临床康复》杂志网站www.zglckf.com 免费阅读 免费下载
  • 利用增强型绿色荧光蛋白体外表达探讨逆转录病毒转染软骨细胞的最佳条件 免费阅读 收费下载
  • 背景:增强型绿色荧光蛋白是目前最佳标记分子,具有荧光特异性高、易于检测等独特的优势,利用基因工程技术构建能稳定表达增强型绿色荧光蛋白的重组逆转录病毒载体EGFP-pLNCX2,转染同种异体软骨细胞值得研究。 目的:构建能稳定表达增强型绿色荧光蛋白的重组逆转录病毒载体EGFP-pLNCX2,探讨转染同种异体软骨细胞的最佳条件。 设计:随机对照观察。 单位:上海交通大学。 材料:选用30只出生1周的新西兰白兔,雌雄不限,均购自中国科学院实验动物研究中心。双嗜性逆转录病毒包装细胞系PT67购自Clontech公司;小鼠成纤维细胞NIH3T3细胞购自ATCC公司;DH5a大肠杆菌由本实验室保存;逆转录病毒载体pLNCX2购自Clontech公司;带有增强型绿色荧光蛋白的pEGFP-C1质粒由中科院细胞所丛笑倩教授惠赠。 方法:实验于2005-08在上海交通大学完成。分离提取并培养新西兰白兔软骨细胞,利用基因工程技术构建能稳定表达增强型绿色荧光蛋白的重组逆转录病毒载体EGFP-pLNCX2,转染培养后的新西兰白兔软骨细胞,荧光显微镜观察转染的效果。于直径10cm的平皿接种6×10^5个软骨细胞,分别立即转染及接种12,24,48h后转染逆转录病毒-EGFP,1周后作流式细胞仪测定EGFP表达效率,观察逆转录病毒转染原代软骨细胞最佳时机。软骨酶消化后的软骨细胞接种24h后转染逆转录病毒,分别于第2,3,4,5,6天加250mg/LG418进行筛选。PBS洗涤后作流式细胞仪检测其效率,观察G418筛选的最佳时机。 主要观察指标:①EGFP-pLNCX2转染效果。②逆转录病毒转染原代软骨细胞及G418筛选最佳时机。 结果:①重组逆转录病毒载体EGFP-pLNCX2转染原代兔软骨细胞,经G418初步筛选而获得的高表达格局,可见软骨细胞经过筛选和表达绿色荧光蛋白后,保持正常的形态学,细胞伸出伪足贴壁,基质分泌旺盛。②逆转录病毒转染原代软骨细胞的最佳时机为细胞接种培养后24h,第7天用流式细胞仪测定转染效率为19.14%,G418筛选的最佳时机为培养后第5天,第7天测定表达效率提升为55.75%。 结论:重组逆转录病毒载体EGFP-pLNCX2能有效地转染软骨细胞,逆转录病毒转染原代软骨细胞的最佳时机为细胞接种培养后24h,G418筛选的最佳时机为培养后第5天。
  • 神经生长因子促进再生坐骨神经中血管生成的量效关系 免费阅读 收费下载
  • 背景:对于神经生长因子的促血管生成作用的研究,目前还处于探索阶段。 目的:探讨神经生长因子对再生坐骨神经中血管形成的剂量效应及其机制。 设计:随机对照动物实验。 单位:解放军第三二四医院神经内科,解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室。 材料:健康成年Wistar大鼠32只,雌雄不拘,体质量200~250g。硅胶管(上海新亚医用橡胶厂出产);神经生长因子(美国Sigma公司)。 方法:实验于2003-08/2005-02在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所三室完成。实验分组:采用随机数字法将大鼠分成4组:生理盐水组、50,100,500ng神经生长因子组,每组8只。实验干预:切除大鼠后肢坐骨神经,造成10mm缺损,用单通道的硅胶管桥接大鼠坐骨神经缺损,在桥接管内给药。生理盐水组注入5μL生理盐水。50,100,500ng神经生长因子组注入20mg/L的神经生长因子2.5,5,25μL。实验评估:在第30天时,用免疫组织化学的方法检测大鼠再生坐骨神经新生血管内皮细胞中CD34、vWf、血管内皮生长因子、trkA的表达,并作形态计量分析。 主要观察指标:各组大鼠神经再生普通病理及组织化学染色观察。 结果:32只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠神经再生病理切片结果:术后30d的坐骨神经近远端完全连接,硅胶管内坐骨神经粗壮程度为:500ng神经生长因子组〉50ng、100ng组〉生理盐水组。各神经生长因子组再生的坐骨神经的纤维数目和排列规则程度要好于生理盐水组,术后30d可见明显的血管生成。②免疫组织化学染色观察:3种不同剂量的神经生长因子组与生理盐水组比较,4种抗原的表达皆有显著性差异(P〈0.05);500ng神经生长因子组4种抗原的表达与100ng和50ng神经生长因子组比较增加(CD34:94.2±6.4,74.2±10.9,77.0±11.0;vWf:116.2±20.0,72.0±13.1,68.0±9.7;TrkA:105.4±10.6,57.8±11.5,58.8±6.5;血管内皮生长因子:89.0±3.0,48.6±7.4,35.2±2.9;P〈0.05或P〈0.01)。 结论:神经生长因子能促进再生周围神经的血管生成,且具有剂量效应;其机制可能与神经生长因子促进trkA、血管内皮细胞生长因子的表达密切相关。
  • 骨折端微动应力对局部碱性成纤维细胞生长因子的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:研究表明骨折端一定形式的微动可以促进骨痂的形成,但微动影响骨折愈合的分子生物学机制还不明确。 目的:研究骨折端微动时应力对断端碱性成纤维细胞生长因子的影响。 设计:随机对照的动物实验。 单位:解放军第二炮兵总医院骨科,解放军总医院第一附属医院骨科,解放军总医院第一附属医院药剂科。 材料:实验于2003-03/2004-04在解放军总医院第一附属医院动物实验室及解放军军事医学科学院八室完成。选取健康纯种新西兰大耳白兔72只,清洁级,月龄5~6个月,体质量2.5~3.0kg,由军事医学科学院动物中心提供。按随机数字表法分为两组:微动组和固定组,每组36只。两组动物又分别分为术后7,14,21,28,42,56d6个时间点进行观察,每个时间点6只。 方法:应用氯胺酮、速眠新肌注麻醉所有动物,于胫骨平台下3,3.5,5.5,6cm分别旋入固定针,安装外固定架,夹具距内侧骨皮质1.5cm,胫骨平台下4.5cm处横行截断胫骨,固定组、微动组骨折间隙分别为2.0,2.5mm。固定组动物应用单臂外固定架固定,解剖复位骨折端。微动组动物截骨固定后使外固定架中间杆有0.5mm的轴向移动。术后动物自由行走,依靠自身体质量使外固定架产生微动。术后7,14,21,28,42,56d处死动物。以骨折端为中心,切取1cm长标本,分割,固定12h。术后7,14,21,28,42,56d采用免疫组织化学染色和JVC图像分析处理系统行碱性成纤维细胞生长因子定量分析和显色强度判定。 主要观察指标:①碱性成纤维细胞生长因子显色强度判定;②碱性成纤维细胞生长因子定量分析。 结果:纳入72只白兔均进入结果分析。碱性成纤维细胞生长因子存在于间质细胞、血管内皮细胞、成骨细胞、成软骨细胞、骨细胞胞浆内表达。术后14,21,28d微动组碱性成纤维细胞生长因子蛋白阳性指数分别为1.98±0.14,2.04±0.12,2.13±0.17,明显大于固定组(1.59±0.14,1.68±0.15,1.63±0.27,P〈0.05)。 结论:微动应力可使骨折端碱性成纤维细胞生长因子增多,促进骨折愈合。
  • RNA干预法特异性抑制核激活因子受体配体诱导破骨细胞的形成(杨旻 戴先文 陶惠人 闫铭 胡蕴玉 李明全)
    兔下颌垂直牵张骨形成中Smad1的表达(张志纯 魏薪莉 莘晓陶)
    四甲基偶氮唑盐法观察三水白虎汤含药血清对体外培养关节炎滑膜细胞增殖的影响
    骨关节炎大鼠关节软骨修复与橄榄叶提取物的干预效应
    携带半乳糖苷酶报告基因重组腺相关病毒体内转染骨组织的实验观察
    人骨关节炎滑膜组织cDNA文库的构建及分析
    用骨髓干细胞培养出人类心脏瓣膜细胞首次在英国成功
    转化生长因子β1转染骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化(贺明 付勤 王厂斌 宫树一)
    恒河猴体内构建组织工程骨的生物学安全性评价
    特发性脊柱侧凸患者椎旁肌结蛋白和波形蛋白的特征表达(陈旭琼 陈建庭 金大地 瞿东滨 张忠民 杨春露)
    新生鼠股骨破骨细胞存在位置的确定及其噬骨能力验证
    遗传性牙釉质发育不全家系分析
    藻酸钠凝胶三维培养条件下胰岛素样生长因子Ⅰ对兔关节软骨细胞表型的影响
    TNP-470和碱性成纤维细胞生长因子在血管内皮细胞增生中的相互作用
    血管内皮生长因子mRNA表达及ARPE-19细胞增生与缺氧的诱导效应
    局部注射血管内皮生长因子基因促进大鼠坐骨神经再生:组织学与电生理指标的评估
    利骨素防治去卵巢大鼠骨矿盐丢失机制的研究
    《口腔颌面外科杂志》征订征稿启事
    骨质疏松性椎体骨折模型的建立
    中年女性骨代谢相关指标变化与冬泳运动的干预(符谦 杜晓平 曹师承)
    CRTER近期组稿重点
    外侧半月板切除术后膝关节周围骨密度的改变
    兔膝关节内注射透明质酸钠后胶原纤维及关节外相关韧带组织的变化
    一侧兔膝关节注射外源性尿激酶型纤溶酶原激活物引起双侧膝关节软骨降解的实验(王维山 史晨辉 周卓浩 王永明 董金波 刘维钢 何斌 管兴发)
    构建以少突胶质细胞前体为主与人类早产儿脑室周围白质软化病理相似的动物模型(贺月秋 陈惠金 钱龙华 陈冠仪)
    大鼠炎性神经根髓鞘形态学变化及复方中药栓剂对神经根损伤的修复
    欢迎订阅《实用骨科杂志》
    心肌梗死大鼠血管内皮功能及心功能变化与培哚普利的干预效应(张玉玲 周淑娴 雷娟 王景峰)
    磷脂酰胆碱注射液Lipostabil局部注射溶脂实验(刘海波 姜平 鲁峰)
    整合素α2在小鼠肾发育中的表达
    《中国组织工程研究与临床康复》杂志介绍
    大鼠卵巢组织中早期卵泡发育及卵母细胞凋亡与白藜芦醇的影响
    两种低聚糖对乳酸菌体外增殖的影响(万荣峰 王丽平 江善祥)
    小干扰RNA抑制neuro-2a细胞内源β位淀粉样前体蛋白裂解酶1基因的表达
    骨量下降期成年人骨密度与体质量指数的相关性(黄何平)
    第十届全军骨科学术大会暨国际骨科学术研讨会征文通知
    骨形态发生蛋白4转基因治疗大鼠的胫骨缺损(孙洋 赵宇 汪春兰 丁浩 王帮河 程文丹)
    益气生骨颗粒对大鼠骨折愈合骨痂中无机质及钙含量的影响(谢艳 朱太咏 毕军花 张国梁)
    异种脱细胞海绵体尿道基质修复兔尿道缺损
    佐剂性关节炎大鼠细胞因子和淋巴细胞亚群变化与可铁宁的影响(苏冰 王前 孙德华 裘宇荣 郑磊 刘飞)
    先天性肌性斜颈程度与胸锁乳突肌胶原含量变化的关系(高宏 朱良 夏力 潘华 余理)
    肿瘤坏死因子α诱导蜕膜细胞凋亡模型建立及黄芩苷对蜕膜细胞凋亡的影响(秦明春 王若光 李春梅 刘小丽 秦莉花 刘惠萍)
    碱性成纤维细胞生长因子干粉剂并中药修复放射性溃疡创面愈合18例(陈辉 张国安)
    脑源性神经营养因子对周围神经修复与再生的促进效应
    Survivin、血管内皮生长因子及微血管密度在正常胆管组织和胆管癌组织中的比较
    反义基质金属蛋白酶2基因对人增殖期血管瘤内皮细胞的影响
    《临床和实验医学杂志》征稿函
    完全去神经大鼠皮肤愈合过程中神经纤维再生和降钙素基因相关肽的变化(褚亚明 姜保国 张殿英 傅中国 徐峰 赵富强)
    欢迎订阅2007年《临床小儿外科杂志》
    神经营养因子Neuritin的生物学特性与神经再生
    胎盘生长因子在肺纤维化发病机制中的作用
    欢迎订阅《感染、炎症、修复》杂志
    内分泌因子、生长因子、细胞因子与卵巢卵泡的发育
    组织工程化血管构架及构建环境相关研究与进展(杨智)
    5'-一磷酸腺苷激活蛋白激酶对运动骨骼肌糖代谢的调节效应(张国华)
    《中国神经再生研究(英文版)》杂志介绍
    瞬时性受体电位通道香草酸受体5、6与骨代谢的关系(李福春 谷贵山 孙大辉 车明学 张德宝 杨震)
    2007年第二届全国骨坏死及髋关节疾病研讨会暨全国股骨头缺血性坏死修复与再造学习班通知
    运动性骨骼肌微损伤的特性(魏源)
    蛋白质组技术在类风湿关节炎实验及临床中的应用(杨波 梁清华)
    欢迎访问《中国组织工程研究与临床康复》杂志网站www.zglckf.com
    利用增强型绿色荧光蛋白体外表达探讨逆转录病毒转染软骨细胞的最佳条件
    神经生长因子促进再生坐骨神经中血管生成的量效关系
    骨折端微动应力对局部碱性成纤维细胞生长因子的影响
    《中国组织工程研究与临床康复》封面

    主管单位:中华人民共和国卫生部

    主办单位:中国康复医学会 《中国组织工程与临床康复》杂志社

    社  长:王莉莎

    主  编:刘昆

    地  址:沈阳市和平区南京南街121号

    邮政编码:110004

    电  话:024-23380576 23389106

    电子邮件:[email protected]

    国际标准刊号:issn 1673-8225

    国内统一刊号:cn 21-1539/r

    邮发代号:8-584

    单  价:13.00

    定  价:689.00