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  • 转化生长因子β1对肾小管上皮细胞转分化和细胞外基质成分的调节与阿魏酸钠的干预效果 免费阅读 下载全文
  • 背景:细胞外基质在肾间质的积聚是肾小管间质纤维化的主要特征。肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化在肾间质纤维化发病机制中起了重要作用。目的:从细胞水平观察阿魏酸钠对转化生长因子β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化及细胞外基质主要成分Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和纤维粘连蛋白的影响。设计:以细胞为观察对象,随机对照实验:单位:四川大学华西医院肾脏科、材料:大鼠肾小管上皮细胞株NRK52E来源于American Type Culture Collection(ATCC),由澳大利亚Monash医学中心肾内科实验室提供,本实验所用细胞株为第36代。阿魏酸钠为白色晶体,可溶于水,纯度〉98.0%,由成都亨达药业有限公司提供,实验时终浓度分别125,250,500μmol/L。兔抗大鼠α平滑肌肌动蛋白多克隆抗体为武汉博士德产品;ELISA试剂盒为上海森雄公司产品;人重组转化生长因子β1为R&D公司产品:DNA Engine Opdcon^TM实时荧光定量聚合酶链反应仪为MJ Research产品。方法:将体外培养的细胞株NRK52E分为5组;空白对照组:仅加入含血清的DMEM培养基;转化生长因子β1刺激组;培养液中加入终质量浓度为5ng/L的转化生长因子β1;阿魏酸钠低、中、高浓度组:培养液中加入终质量浓度为5ng/L转化生长因子β1和125,250,500μmol/L的阿魏酸钠。主要观察指标:应用相差显微镜、实时荧光定量聚合酶链反应、酶联免疫吸附法观察阿魏酸钠对转化生长因子β1诱导的NRK52E细胞转分化的作用及对细胞外基质主要成分胶原Ⅰ胶原Ⅲ和纤维粘连蛋白的影响。结果:①NRK52E细胞形态:与空白对照组相比,转化生长因子β1刺激组细胞在培养3d后,细胞株NRK52E从原有典型的铺路石样上皮细胞形态转变为长梭形类似成纤维细胞的形态。阿魏酸钠3个浓度组细胞受转化生长因子β1的刺激而出现的形态学改变得到不同程度的改善,并呈剂量依赖性。②α-平滑肌肌动蛋白mRNA表达:转化生长因子β1 5ng/L诱导6h后α-平滑肌肌动蛋白mRNA较空白对照组上升,在72h达高峰;经过不同剂量阿魏酸钠干预72h后α-平滑肌肌动蛋白mRNA显著下调并呈剂量依赖性(P〈0.05)。③细胞外基质变化;经转化生长因子β1 5ng/L诱导72h后,细胞培养上清中Ⅰ型胶原,Ⅲ型胶原和纤维粘连蛋白含量明显增加(P〈0.05)。经过不同剂量的阿魏酸钠干预后,不同程度地抑制了转化生长因子β1促Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和纤维粘连蛋白增多的作用,并呈剂量依赖性(P〈0.05)。结论:转化生长因β1可以诱导大鼠肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化,刺激细胞外基质成分Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原和纤维粘连蛋白的升高。阿魏酸钠可剂量依赖性地抑制转化生长因子β1所导致的肾小管上皮细胞-肌成纤维细胞转分化作用。
  • 心房钠尿肽合成细胞在大鼠胃的超微结构定位 免费阅读 下载全文
  • 背景:心房钠尿肽不仅存在于心脏且分布于全身许多部位,心房钠尿肽合成细胞在大鼠胃中形态学定位及在胃黏膜不同分区的分布特点仍处于研究阶段。目的:对心房钠尿肽合成细胞在大鼠胃中进行超微结构定位,观察其在胃不同区域的分布及形态。设计:重复测量实验。单位:承德医学院。材料:实验于2004-10/2007-07在承德医学院中药研究所免疫学实验室(省级重点实验室)完成,选用18只成年Wistar大鼠,体质量175-300g,雌雄不拘,由承德医学院实验动物科提供。实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。实验用心房钠尿肽抗体及血清为美国Santa Cruz Biotechnology公司产品,胶体金标记抗体液(胶体金颗粒的直径为15nm,华美生物工程公司产品),CMTAS多功能真彩色病理图象分析系统由北京航空航天大学研制开发,日本产JEM-1200EX透射电镜。方法:大鼠经麻醉后,剪下胃及右心房(为心房钠尿肽抗体免疫组织化学染色时的阳性对照),沿大鼠胃贲门区、胃底区、幽门区的方向纵行取材。①将右心房作为阳性对照与胃组织在同一条件下进行免疫组织化学染色,观察心房钠尿肽在胃组织中不同部位的分布特点,确定心房钠尿肽合成细胞所在部位。②免疫电镜胶体金标记法对胃黏膜心房钠尿肽合成细胞的超微结构定位,采用CMTAS多功能真彩色病理图象分析系统对心房钠尿肽合成细胞细胞在不同的分布区域(贲门区、幽门区及胃底区)面密度的百分比。主要观察指标:胃心房钠尿肽合成细胞形态、所在部位及胃的不同分区面密度百分比。结果:①心房钠尿肽合成细胞形态及部位:阳性对照大鼠心房肌的心房钠尿肽合成细胞呈现阳性表达。大鼠胃中心房钠尿肽合成细胞也呈阳性表达,主要位于胃黏膜的下1/3。心房钠尿肽合成细胞的形态为圆形、锥体形和烧瓶型。阴性染色的部位为黏膜表层。黏膜下层和肌层。②心房钠尿肽合成细胞面密度的百分比:胃贲门区面密度的百分比最大,各面密度的百分比分布顺序是贲门区〉幽门区〉胃底区。结论:心房钠尿肽合成细胞主要位于胃黏膜的下1/3;大鼠胃不同分区心房钠尿肽合成细胞的面密度的百分比不相同,以胃贲门区最大。
  • 内皮抑素与佐剂性关节炎大鼠血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9的表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:大多数证据支持关节炎症时滑膜表面形成血管翳与血管内皮细胞生长因子及其基质金属蛋白酶有关。目的:实验拟验证不同剂量内皮抑素对佐剂性关节炎模型大鼠血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9表达的影响。设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-01/06在桂林医学院完成。材料:清洁级雄性Wistar大鼠40只,鼠龄6~8周,体质量146~153g,建立佐剂性关节炎大鼠模型,内皮抑素为烟台麦得滓生物工程股份有限公司产品。方法:造模后第6天选出右后足和两前足关节炎指数之和≥6的30只大鼠,随机数字表法分为4组。模型对照组以10mL/(kg·d)生理盐水14d灌服,小剂量内皮抑素治疗组以终浓度2.5mg/(kg·d)加2~4mL生理盐水14d灌服,大剂量内皮抑素治疗组以终浓度10mg/(kg·d)加2~4mL生理盐水14d灌服,不加干预的10只正常Wistar大鼠作为正常对照组,每组大鼠均10只。主要观察指标:模型组动物停止灌服后第6天应用酶联免疫吸附法检测各组血清血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9的表达;滑膜炎症的组织病理学评分;关节炎症评分和关节X射线评分。结果:①小剂量和大剂量内皮抑素治疗组大鼠关节滑膜无明显肿胀等炎症表现,模型对照组关节滑膜增厚的炎症现象明显,3组关节滑膜组织病理学评分比较差异有显著性意义(P〈0.01)。②与模型对照组相比,正常对照组、小剂量及大剂量内皮抑素治疗组血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶9表达均降低(P〈0.01),且下降幅度与内皮抑素的浓度呈正相关。结论:内皮抑素能下调佐剂性关节炎滑膜细胞血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶9的水平。
  • 构建人热休克蛋白22基因真核表达载体pEGFP-N1/HSP22及在血管内皮细胞中的表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:己有实验证实,人热休克蛋白22(Heat shock protein22,HSP22)存在于人的多种组织中,但构建其真核表达质粒是否可转染人血管内皮细胞并完整表达。目的:构建pEGFP-N1/HSP22真核表达质粒外观察在内皮细胞中的表达。设计、时间及地点:单一样本观察。于2007-03/10在南昌大学第二附属医院分子中心完成。材料:pEGFP-N1真核表达质粒及DH5α为南昌大学第二附属医院分子中心保存,MCF-7细胞来源于南昌大学生化实验室馈赠,人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)株购至南京基凯生物技术公司。方法:采用反转录聚合酶链式反应从人MCF-7细胞中扩增热休克蛋白22基因,将热休克蛋白22基因连接到真核表达载体pEGFP-N1中,并转化DH5α,获得阳性克隆进行双酶切和测序鉴定。用脂质体法将重组质粒转染人脐静脉血管内皮细胞。主要观察指标:荧光显微镜、反转录聚合酶链反应法及Western blot检测热休克蛋白22在人脐静脉内皮细胞中的表达。结果:①琼脂糖凝胶电泳检测聚合酶链反应扩增产物,热休克蛋白22基因片段长约613bp,与预期分子量相符,测序结果证实克隆完全正确;其阳性克隆进行酶切鉴定与热休克蛋白22理论值相符。②反转录-聚合酶链反应法检测转染的人脐静脉血管内皮细胞中有热休克蛋白22mRNA表达:Western blot检测可见一特异性热休克蛋白22蛋白条带存在。结论:成功构建了携带人热休克蛋白22及pEGFP-N1真核表达质粒,并验证已在人脐静脉血管内皮细胞中表达。
  • 结缔组织生长因子在红参虫草胶囊干预糖尿病大鼠肾脏的表达 免费阅读 下载全文
  • 目的:分析中药红参虫草胶囊对糖尿病大鼠干预过程中对肾脏结缔组织生长因子表达的影响及其机制。方法:实验于2005-05/2006-02在延边大学医学部药理实验室、病理实验室和吉林大学再生医学研究所病理实验室完成。选择清洁级Wistar大鼠70只,按随机数字表法分为4组,正常对照组(10只)、模型组(20只)、苯那普利治疗组(20只)和红参虫草胶囊治疗组(20只)。红参虫草胶囊由延边大学附属医院制剂室提供,红参与冬虫夏草分别用中药磨粉机粉成细末,并按一定比例混合。采用单次腹腔注射链脲佐菌素(50mg/kg)制备糖尿病大鼠模型。①采用全自动生化分析仪测定实验12周末大鼠血糖、血肌酐、尿素氮、尿肌酐,并计算内生肌酐清除率;尿微量白蛋白定量采用ELISA法测定,并计算尿白蛋白排泄率。②应用反转录-聚合酶链反应检测肾皮质结缔组织生长因子mRNA表达。③免疫组织化学检测肾内纤维连接蛋白和Ⅳ型胶原蛋白表达水平。结果:①空腹血糖:模型组明显高于正常对照组(P〈0.01),红参虫草胶囊治疗组较模型组和苯那普利治疗组显著降低(P〈0.01)。②尿素氮、血肌酐、内生肌酐清除率、尿白蛋白排泄率:模型组均明显高于正常对照组(P〈0.01),苯那普利治疗组和红参虫草胶囊治疗组明显低于模型组(P〈0.05-0.01)。③结缔组织生长因子mRNA表达:模型组大鼠肾皮质结缔组织生长因子mRNA表达升高,是正常对照组的3.77倍;苯那普利治疗组和红参虫草胶囊治疗组结缔组织生长因子mRNA的表达比模型组分别降低44.44%和52.14%。④纤维连结蛋白、Ⅳ型胶原蛋白的表达:模型组明显高于正常对照组(P〈0.01),苯那普利治疗组和红参虫草胶囊治疗组明显低于模型组,高于正常对照组(P〈0.01)。结论:红参虫草胶囊对糖尿病肾脏病变育保护作用,该作用发挥是通过下调糖尿病模型大鼠肾脏结缔组织生长因子mRNA的表达,从而减少细胞外基质沉积来实现的。
  • 青蒿素对免耳创面瘢痕增生的抑制效应 免费阅读 下载全文
  • 目的:许多研究报道青蒿素能抑制多种肿瘤细胞的增殖活性,临床证实青蒿素对增殖性瘢痕也有抑制作用,但是其机制不详。实验拟验证青蒿素对兔耳增生性瘢痕的影响。方法:实验于2006-09/2007-03在重庆市神经病学重点实验室完成。①实验分组:新西兰大白兔16只,体质量(2.5±0.3)kg,兔耳健全,雌雄不拘,随机数字表法分为对照组(n=4)和青蒿琥酯组(n=12);青蒿琥酯由广西桂林南药股份有限公司提供。②实验方法:建立兔耳增生性瘢痕动物模型,术后第6天,开始向创面基底部及创面灶内局部注射50g/L NaHCO3:青蒿琥酯组各选4只兔分别注射浓度为40,80,120g/L的青蒿琥酯钠。③实验评估:术后28,56d测定瘢痕发生率及瘢痕增生指数的变化:苏木精-伊红染色后光镜下观察瘢痕的变化情况。结果:纳入大白兔16只,均进入结果分析。①青蒿琥酯可以降低兔耳瘢痕发生率及瘢痕增生指数,与对照组相比,差异显著(P〈0.05,P〈0.01);其抑制瘢痕增生效果与青蒿琥酯浓度呈剂量依赖性。②术后28d光镜下见青蒿琥酯能明显抑制成纤维细胞增殖及降低胶原纤维的含量。③苏木精-伊红染色显示,青蒿琥酯组:真皮层变薄,成纤维细胞数量较少,胶原纤维密度下降,胶原纤维排列规则,无胶原结节或者胶原结节不明显。而对照组真皮层较厚,成纤维细胞密集,胶原纤维旋涡状,形成胶原结节。结论:青蒿琥酯可明显抑制兔耳创面增生性瘢痕的形成及瘢痕组织增生。
  • 成骨细胞不同体外培养方式的耗氧速率检测 免费阅读 下载全文
  • 背景:近年来组织工程种子细胞结合微胶囊技术在细胞治疗、基因治疗和药物控制释放等方面的应用越来越广泛,检测成骨细胞的耗氧量和耗氧速率,可为成骨细胞在不同培养模式中的体外培养、扩增和工程化骨组织的三维构建以及以上方面的实验提供相关的理论依据。目的:实验拟对比成骨细胞在体外静态直接培养和包囊培养两种不同方式中的耗氧量和耗氧速率。设计、时间及地点:对比观察,于2007-03/09在大连理工大学精细化工国家重点实验室干细胞与组织工程研发中心完成。材料:出生二三天SD大鼠10只,SPF级,雌雄不拘;海藻酸钠溶液购白天津远航化学品有限公司。方法:无菌条件下取大鼠颅骨,剔净后剪成1mm×1mm碎组织块,经2.5g/L胰蛋白酶溶液和1g/L Ⅱ型胶原酶溶液分别消化后,加入含体积分数为0.1小牛血清的DMEM培养基,调节细胞浓度为10^9L^-1后接种在T-25培养瓶内。取二三代细胞分别接种于培养瓶中直接静态培养和经海藻酸钙微胶囊包囊后培养。主要观察指标:倒置相差显微镜下观察成骨细胞在静态培养瓶中和包囊培养过程中的黏附、伸展、分布情况,并测定细胞生长曲线。检测成骨细胞的生物学性能及不同体外培养方式中成骨细胞消耗氧的速率。结果:①原代培养的成骨细胞为贴壁生长,形态多为梭形或多边形。经包囊培养后成骨细胞在海藻酸钙微胶珠中呈圆形,细胞分布均匀。②体外培养的成骨细胞各种生物学性能良好。③体外静态培养瓶与包囊培养效果良好,耗氧速率分别为5.56×10^-6μmol/min和1.25×10^-7μmol/min。结论:体外静态直接培养的耗氧量和耗氧速率高于包囊培养法,体外静态培养与包囊培养的成骨细胞各种生物学性能都良好,适于作为组织工程的种子细胞进行下一步的实验。
  • 携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒体外转导培养关节软骨细胞 免费阅读 下载全文
  • 目的:胰岛素样生长因子Ⅰ通常被认为是软骨生长和稳定中最关键的生长因子之一,可以促进软骨细胞合成Ⅱ型胶原和蛋白多糖。应用携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒(Adenovims-human insulin like growth factor-Ⅰ transgene construct,Ad-hIGF-Ⅰ)体外转导培养关节软骨细胞,探讨其在体外促进软骨细胞外基质成分生成的能力。方法:实验于2005—01/2007—04在大连医科大学附属四院骨科实验室完成。分离培养3周龄兔膝关节及股骨头软骨细胞,将受测细胞随机分为转导组与未转导组,以500感染复数的Ad-hIGF-Ⅰ转导第1代软骨细胞,转导组中的第1,3,5,7代细胞分别为转导后48h,3周,7周和9周的软骨细胞。采用样本碱水解法、阿利新蓝法和酶联免疫吸附方法检测转导组和未转导组的第1,3,5,7代细胞羟脯氨酸、糖胺多糖、胰岛素样生长因子Ⅰ蛋白浓度。结果:①倒置显微镜观察,转导组兔关节软骨细胞生长增殖稳定,至第7代仍旧以三角形、梭形及纺锤形细胞为主,偶见长梭形和树根形细胞,且轮廓清晰,透亮度大,折光性强;而未转导组细胞培养至第4代时即已出现长梭形细胞,自第5代细胞形态几乎全部变成长梭形。②随着培养时间延长和传代次数增加,软骨细胞上清液中胰岛素样生长因子Ⅰ蛋白、羟脯氨酸和糖胺多糖浓度的逐渐降低,转导组软骨细胞均高于同代未转导组细胞(P〈0.05)。结论:携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒体外转导的关节软骨细胞,可以稳定产生内源性的胰岛素样生长因子Ⅰ,并进而促进软骨细胞分泌Ⅱ型胶原和蛋白多糖。
  • 含双顺反子绿色荧光蛋白人骨形态发生蛋白2表达载体的构建 免费阅读 下载全文
  • 目的:骨形态发生蛋白2是目前研究最为广泛、诱导成骨活性最强的骨形态发生蛋白之一。实验拟构建绿色荧光蛋白标记的人骨形态发生蛋白2(human Bone Morphogenetic Protein-2,hBMP2)真核表达载体,为在真核细胞的高效表达和基因治疗打下基础。方法:实验于2006-03/2007-03在天津医科大学卫生部激素与发育重点实验室完成。①实验材料:含完整人骨形态发生蛋白2基因片段的pcDNA3、1/CT-hBMP2质粒由李曦铭博士惠赠;双顺反子真核表达载体pSELECT-GFPzeo-MCS(Invivogen公司),Zeo(Invivogen公司):pTA2-TEasy(鼎国生物技术有限公司)。②实验过程及评估:以重组质粒pcDNA3、1/CT-hBMP2为模板,结合已设计好的特异性引物,采用聚合酶链反应方法亚克隆出人骨形态发生蛋白2目的片段,将该片段分别与克隆载体pTA2-T-easy和双顺反子真核表达载体pSELECT-GFPzeo-MCS连接,转化入感受态DH5α细胞中,通过筛选得到含有绿色荧光蛋白的重组表达载体pSELECT-GFPzeo-hBMP2,并进行测序鉴定。结果:①聚合酶链反应获得长度约1216bp的目的片段,与预期片段相符。②经与克隆载体pTA2-T-easy和真核表达载体pSELECT-GFPzeo-MCS连接,筛选及序列分析后,证实所插入目的片段与GenBank检索的骨形态发生蛋白2cDNA序列(NM-001200)100%匹配。结论:成功构建含双顺反子绿色荧光蛋白人骨形态发生蛋白2真核表达载体。
  • 不同功能状态大鼠骨骼肌抗氧化能力的变化 免费阅读 下载全文
  • 目的:以往关于运动训练对组织抗氧化能力影响的研究主要集中在耐力训练,在此基础上,进一步观察大鼠在不同功能状态下骨骼肌抗氧化能力与运动训练的关系,认识生物体对运动训练所产生的适应性变化机制。方法:实验于2003-04/06在曲阜师范大学体育科学学院生理实验室完成。①分组干预:选取雄性Wistar大鼠56只,随机分为对照组和训练组2组各28只,训练组进行8周的跑台训练,对照组不干预。然后两组分别在塑料桶中进行2d适应性游泳,第3天,两组大鼠分别于安静状态、定量负荷运动后、力竭运动后即刻、力竭运动24h后麻醉处死,每个时相点7只大鼠。②观察指标:观察不同功能状态下大鼠骨骼肌中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性以及总抗氧能力变化。结果:56只大鼠进入结果分析。①在安静状态、力竭运动24h后,对照组骨骼肌中超氧化物歧化酶的活性、总抗氧能力、谷胱甘肽过氧化物酶活性部明显低于训练组(P〈0.05)。②定量负荷运动后,对照组骨骼肌中总抗氧能力明显低于训练组(P〈0.05),而骨骼肌中超氧化物歧化酶的活性明显高于训练组(P〈0.05)。③力竭运动后训练组骨骼肌中超氧化物歧化酶的活性、总抗氧能力都明显高于对照组(P〈0.05)。结论:运动训练能提高大鼠安静状态下骨骼肌中超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性以及总抗氧化能力可因,抑制因力竭运动导致的超氧化物歧化酶活性、总抗氧能力的下降。
  • CRTER发表文章被SCI引文库、CA、EM数据库收录的最新数据 免费阅读 下载全文
  • 肌内神经对股直肌损伤修复的作用 免费阅读 下载全文
  • 背景:既往对损伤骨骼肌的处理主要是修复肌膜及肌外神经。目的:实验拟观察肌内神经对损伤股直肌的修复作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验。组织学观察,于2006-09/2007-08在重庆医科大学动物实验中心完成。材料:新西兰大白兔20只,体质量2.0~2.5kg,右侧股直肌用于制备骨骼肌损伤模型,左侧股直肌作为对照。方法:20只大白兔随机数字表法分为2组。肌内神经完整组采用不全离断方式,在神经入肌点以远4.0~5.0mm处横断股直肌而保留肌内神经完整,肌内神经断裂组采用完全离断方式在神经入肌点以远4.0~5.0mm处横断股直肌及肌内神经。主要观察指标:①术后28周测量股直肌的湿重、股直肌等长收缩力的变化。②苏木精-伊红染色观察股直肌形态变化,Masson三色染色观察纤维化程度,肌球蛋白三磷酸腺苷酶染色及还原型辅酶Ⅰ四唑氮还原酶染色区别肌纤维的类型,并计算肌纤维横断面面积。结果:①与对照侧相比,肌内神经断裂组实验侧股直肌湿重下降,等长收缩力下降(P〈0.05)。②与对照侧相比,肌内神经完整组Ⅰ型、Ⅱa型肌纤维横断面面积恢复较佳。Ⅱb型肌纤维较差(P〈0.05),各型肌纤维构成比例基本恢复;肌内神经断裂组Ⅰ型、Ⅱa型、Ⅱb型肌纤维横断面面积均恢复较差(P〈0.05)。结论:肌内神经能够促进损伤骨骼肌的肌纤维再生,减轻肌肉萎缩及纤维变性,恢复肌纤维的正常形态及组成方式,从而促进损伤骨骼肌的恢复。
  • 抗骨增生胶囊含药血清对软骨细胞增殖凋亡及基质金属蛋白酶分泌的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:抗骨增生胶囊在治疗骨关节疾病方面有很好的疗效,基础研究多集中于颈椎病等骨关节疾病上。目的:拟观察抗骨增生胶囊含药血清对白细胞介素10引起的软骨细胞增殖凋亡及基质金属蛋白酶分泌的影响。设计、时间及地点:分组对照体外细胞学实验,于2007-03/09在河北医科大学解剖教研室细胞培养中心完成。材料:新生1周SD大鼠,用于培养软骨细胞;体质量200g左右SD大鼠10只,以中药水溶液灌胃后定时取血制备含药血清。方法:采用胶原酶NB4消化法从大鼠关节软骨中分离出软骨细胞并进行原代和传代培养,实验分为3组:空白血清组:90%L-DMEM+10%空白血清,每日给予同等量的生理盐水;白细胞介素10组(90%DMEM+10%空白血清+白细胞介素1β);中药血清+白细胞介素10组(90%DMEM+10%中药血清+白细胞介素1β)。白细胞介素10加入量为5μg/L,培养72h。将实验用细胞消化传代后制成单细胞悬液,以1×10^8L^-1的密度接种于96孔培养板,100μL/孔,每组6孔。主要观察指标:倒置显微镜下观察中药含药血清对软骨细胞增殖的影响;四甲基偶氮唑盐比色法检测其各孔吸光度变化;流式细胞仪分析凋亡细胞百分率;基质金属蛋白酶13Elisa试剂盒检测不同组基质金属蛋白酶13分泌情况。结果:在正常培养基条件下,细胞形态均匀,死亡脱落细胞较少。空白血清组软骨细胞的增殖速度缓慢,细胞较稀疏。白细胞介素10组细胞明显稀疏,部分细胞胞浆中空泡增多,细胞核形态不规则。在中药血清培养基作用下,软骨细胞增殖的速度较白细胞介素10组快,胞体显著增大,细胞核形态规则。白细胞介素1β组细胞增殖数量减少,凋亡细胞百分率增加,其培养的细胞上清液中基质金属蛋白酶13含量升高,抗骨增生胶囊含药血清可对抗白细胞介素10对软骨细胞的影响。结论:体外条件下,抗骨增生胶囊含药血清能够抑制白细胞介素10诱导的软骨细胞凋亡;降低基质金属蛋白酶13水平。
  • 脂联素对成骨细胞核因子κB受体活化素配体表达的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:成骨细胞分泌的核核因子κB受体活化素配体的主要作用为保持破骨细胞的分化和活性,抑制破骨细胞的凋亡。目的:观察脂联素对成骨细胞核因子κB受体活化素配体表达的影响,拟进一步探讨其对破骨细胞生成的作用。设计、时间及地点:单一样本观察,于2005-08/2006-03在中南大学湘雅二医院代谢内分泌研究所完成。材料:外科手术中弃之5份取正常成人(35~55岁)髂前上棘松质骨由供者自愿提供;人重组脂联素蛋白购自Calbiochem公司。方法:正常成人髂前上棘松质骨体外培养成骨细胞。分别用0,3,10和30mg/L脂联素干预人成骨细胞48h。成骨细胞和CD14+外周血单核细胞共培养14d,用30mg/L脂联素干预14d,以25μg/L巨噬细胞集落刺激因子+50μg/L核因子κB受体活化素配体干预14d作为诱导破骨细胞阳性对照。主要观察指标:分别采用荧光定量聚合酶链反应和酶联接免疫吸附剂测定的方法检测核因子κB受体活化素配体的表达;并用脂联素蛋白干预成骨细胞与外周血单核细胞共同培养系统,观察对破骨细胞生成的作用。结果:①脂联素呈剂量和时间依赖性促进人成骨细胞核因子κB受体活化素配体的表达。②脂联素呈时间和剂量依赖性促进人成骨细胞可溶性破骨细胞异化因子蛋白的分泌。③脂联素干预成骨细胞与CD14+外周血单核细胞共同培养系统可诱导破骨细胞生成。结论:脂联素可通过诱导成骨细胞核因子κB受体活化素配体表达,诱导破骨细胞生成。
  • 血管内皮细胞生长因子165基因重组腺病毒的构建及其鉴定 免费阅读 下载全文
  • 目的:基因重组腺病毒具有较高的转染率,且宿主范围广。实验拟构建携带人血管内皮细胞生长因子165基因的重组腺病毒载体(Ad.VEGF165),为后续基因转染、微囊化基因工程细胞及其动物模型研究提供实验基础。方法:实验于2007-01/05在解放军第二军医大学长海医院胸心外科研究所实验室完成(国家级重点实验室)。①实验材料:pAxCAwt.VEGF165由长海医院胸心外科研究所惠赠。②实验方法:采用脂质体转染法,将pAxCAwt.VEGF165与DNA-TPC共转染人胚肾293细胞,扩增后获得载人血管内皮细胞生长因子165基因的复制缺陷型重组腺病毒。③实验评估:应用聚合酶链反应及酶切征实重组腺病毒中的目的基因。并根据50%组织培养感染剂量法计算病毒滴度。结果:①重组腺病毒Ad.VEGF165的构建:采用脂质体法可使pAxCAwt.VEGF165与DNA-TPC有效转染人胚肾293细胞,扩增出载人血管内皮细胞生长因子165基因的复制缺陷型重组腺病毒。②重组腺病毒Ad.VEGF165的鉴定:聚合酶链反应的产物进行NcoⅠ酶切鉴定,可得到597bp、146bp2个片段,与GeneTool软件理论上计算的结果完全一致,计算病毒滴度为2.2×10^15 pfu/L。结论:采用pAxCAwt.VEGF165与DNA-TPC系统经脂质体转染法成功构建的复制缺陷的重组腺病毒Ad.VEGF165滴度高、毒性低、效率高、体外转染安全。
  • 去卯巢大鼠体质量和骨密度的相关性分析 免费阅读 下载全文
  • 目的:探讨去卵巢大鼠体质量与骨密度的相关性,并观察淫羊藿、补骨脂等补肾中药对其作用的影响。方法:实验于2006-09/2007-03在广州中医药大学动物中心和广州中医药大学附属骨伤科完成。①造模:选择雌性末孕的SD大鼠68只,随机分为手术组46只,空白组22只,手术组行双侧卵巢切除,空白组不切除卵巢。术后3个月,从两组中各随机选取10只大鼠,测量体质量和骨密度。②治疗:造模成功后,将手术组剩下36只大鼠随机分为手术模型组、雌激素组、中药组。中药组给予由淫羊藿、补骨脂、丹参、黄芪等10味中药组成的补肾中药4.8g/kg灌胃,1次/d;雌激素组给予尼尔雌醇1mg/kg灌胃,1次/周:另2组给予蒸馏水按10mL/kg灌胃,1次/d。连续治疗3个月。③观察指标:各组大鼠造模前后及治疗后体质量,并用双能X射线骨密度测量仪测量活体全身骨密度、腰椎骨密度、右股骨骨密度和体外右股骨骨密度。结果:①造模后手术组的骨密度低于空白组(P〈0.05),体质量明显高于空白组(P〈0.05);手术组的骨密度和体质量存在负相关关系(r=-0.854.P〈0.05)。②治疗后中药组的活体全身骨密度、腰椎骨密度、活体右股骨骨密度和体外右股骨骨密度高于手术模型组,而体质量低于手术模型组(P〈0.05)。③活体和体外右股骨骨密度不存在相关性(r=0.089.P〉0.05)。结论:①体质量和骨质疏松的发生有相关性,而补肾中药对提高骨密度有明显的作用。②活体和体外骨密度不存在相关关系,这可能同双能X射线的局限性有关。
  • 大强度运动大鼠血脂和过氧化水平变化与白藜芦醇的影响 免费阅读 下载全文
  • 目的:大强度运动不利于人体脂蛋白的改善,只有低强度、长时间的有氧运动能有效地改善脂蛋白水平,防止疾病的发生。实验观察白藜芦醇对大强度运动训练大鼠血浆脂质过氧化水平和血脂含量的影响。方法:实验于2004-03/06在陕西师范大学运动人体科学实验室完成。①实验动物:选择雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、运动组、白藜芦醇+运动组,每组10只。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。②实验方法:运动组大鼠于动物跑台上进行8周的大强度运动训练,每天训练30min,每周6天,坡度为0,跑速每周递增,分别为15m/min,22m/min,27m/min,31m/min,35m/min,38m/min,40m/min,42m/min。白藜芦醇+运动组每天按50mg/kg体质量的剂量灌喂白藜芦醇,其他两组灌喂同剂量的生理盐水。末次训练结束后,禁食8h,乙醚麻醉,股动脉取血,肝素抗凝,制备血浆。③实验评估:测定血浆中超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性和丙二醛含量,三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇含量。结果:30只大鼠均进入结果分析。运动组、白藜芦醇+运动组大鼠血浆丙二醛、低密度脂蛋白胆固醇水平较运动组分别下降47.7%(P〈0.01)和15.0%(P〈0.05),血浆谷胱甘肽过氧化物酶、高密度脂蛋白胆固醇水平较运动组分别升高10.1%(P〈0.05)和16.6%(P〈0.05)。结论:白藜芦醇对大强度运动所引起的抗氧化能力下降和脂质代谢紊乱有明显的改善作用。
  • 构建小鼠肝细胞磷酸化蛋白质组分析鉴定的方法模型 免费阅读 下载全文
  • 背景:磷酸化蛋白质组的分析鉴定是目前蛋白质组学技术研究的主要目标之一,然而以质谱为核心的鉴定技术尚不完善。目的:建立一种简便易行、适于在一般实验室普及的分析鉴定磷酸化蛋白质组的方法并应用于小鼠肝细胞磷酸化蛋白质组的模型。设计、时间及地点:观察对比实验,于2003-07/2004-06在泸州医学院生物化学教研室及医学分子生物学实验室完成。材料:封闭群乳昆明小鼠100只,年龄1-3d,体质量3-6g,雌雄各半;^32P-NaH2PO4由中国北京原子能研究所提供。方法:将长势相当的体外培养的乳小鼠肝细胞随机分成两组。一组作同位素^32P标记后液氮终止反应,裂解细胞,收集蛋白并定量,双向电泳分离蛋白,干胶及放射自显影,建立小鼠肝细胞磷酸化蛋白质组的放射自显影图谱,初步确定6种靶标磷酸化蛋白EPs15等;另一组直接裂解细胞,收集蛋白并定量,双向电泳分离蛋白后半干式电转移至PVDF膜,根据靶标蛋白EPs15等的理论等电点和分子量剪下6张小膜。主要观察指标:采用持久性化学发光检测技术确证初步鉴定的6种靶标蛋白EPs15等。结果:①小鼠肝细胞磷酸化蛋白质组的放射自显影图谱显示约100个蛋白质斑点,经PDQuest 2D软件结合蛋白质数据库初步鉴定出已知的6种磷酸化蛋白EPs15等。②6种靶标蛋白的免疫印迹-化学发光图谱上均只出现了1个特异蛋白质斑点,与放射自显影图谱上的斑点基本匹配。结论:实验建立的同位素标记结合免疫印迹-化学发光的方法分析鉴定磷酸化蛋白质组简单、实用、灵敏、高效。
  • 程序性细胞死亡分子5在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的表达与意义 免费阅读 下载全文
  • 目的:程序性细胞死亡分子5作为一个重要的凋亡正调控分子,在许多疾病的发生发展过程中起着重要的作用,但有关其在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的作用研究甚少。实验拟验证程序性细胞死亡分子5在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的表达水平及细胞定位分布,探讨程序性细胞死亡分子5在类风湿关节炎发病中的可能作用。方法:实验于2005-06/2006-10在北京大学人民医院关节病诊疗研究中心完成。①实验材料:滑膜均取材于北京大学人民医院关节病诊疗研究中心行人工全膝关节表面置换术的类风湿关节炎或骨关节炎患者。所有患者均参照美国风湿病学会标准确诊。术前获得患者知情同意,并经北京大学人民医院伦理委员会批准。②实验方法:原代培养并传代分离获得型别均一的成纤维样滑膜细胞,提取细胞RNA和蛋白。③实验评估:实时定量聚合酶链反应及蛋白免疫印迹检测类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞和骨关节炎成纤维样滑膜细胞中程序性细胞死亡分子5mRNA和蛋白的表达水平;制备细胞爬片采用免疫组织化学技术分析程序性细胞死亡分子5在成纤维样滑膜细胞中的定位分布特征。结果:①相对于骨关节炎,分离培养的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中程序性细胞死亡分子5在mRNA和蛋白水平上表达下调。②类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中程序性细胞死亡分子5的下调与抗凋亡分子Bcl-2的上调是协调一致的。③程序性细胞死亡分子5蛋白主要定位于体外培养的成纤维样滑膜细胞的胞浆中。结论:程序性细胞死亡分子5可能参与类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞对凋亡刺激信号所产生的凋亡抑制过程,在类风湿关节炎的病理演变过程中可能具有抑制凋亡的作用。
  • 2008年版权归《中国组织工程研究与临床康复》杂志社所有 免费阅读 下载全文
  • 筋膜瓣包裹组织工程骨修复免大段骨缺损的动态变化 免费阅读 下载全文
  • 背景:组织工程骨的血管化是构建过程中的关键环节。目的:动态观察带蒂筋膜瓣包裹组织工程骨的血管化过程,以及其修复大段骨缺损的一般规律。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-10/2006-04在南方医科大学南方医院创伤骨科实验室完成。材料:6月龄健康新西兰大白兔12只双侧髂骨抽取骨髓分离骨髓基质干细胞诱导分化成骨细胞。圆柱状(3×15)mm多孔D-磷酸三钙为法国贝奥路公司产品。方法:将成骨细胞与D-磷酸三钙复合培养7d后细胞量达到1×10^9L^-1为组织工程骨,实验组兔左侧前肢内侧剥离带蒂筋膜瓣(2×1.5)cm包裹圆柱状组织工程骨植入1.5cm桡骨缺损处,对照组于同一只兔右侧桡骨1.5cm骨缺损处植入未包裹组织工程骨。主要观察指标:植入后2,4,6,8,12周进行大体观察、组织学、放射学、骨密度和放射性核素骨显像检测。结果:①从第4周以后各时间点实验组修复效果均优于对照组,X射线相对阻射值定量分析实验组的评分高于对照组(P〈0.05),骨密度值高于对照组(P〈0.05),放射性强度高于对照组(P〈0.05)。②从第4周以后各个观察点实验组在血管化程度、新骨形成量、材料降解速度、骨缺损修复时间、骨修复改建质量都优于对照组。结论:采用蒂筋膜瓣包裹组织工程骨修复骨缺损,4周后,在血管化程度、新骨形成量、材料降解速度及骨缺损修复时间方面均优于无筋膜包裹的组织工程骨,提示早期的快速血管化直接影响到骨缺损修复的全过程。
  • 手工组织显微切割后的快速DNA提取技术 免费阅读 下载全文
  • 目的:为寻找一种操作简便、结果稳定可靠的组织处理及切片染色技术,尝试应用组织切片手工显微切割后快速提取DNA的方法,观察提取的DNA质、量是否能满足后续分子水平研究的需要。方法:实验于2004-07/2007-07在广东医学院病理学实验室完成。取广东医学院附属医院病理科提供的子宫颈癌石蜡包埋组织切片,将切片贴于载玻片长时间完全脱蜡后,用苏木精对细胞核进行淡染,再在倒转置显微镜下进行显微切割,将切割下的组织放入装有提取缓冲液的EP管中,整个过程不需更换EP管,不经过复杂的酚-氯仿抽提,采用细胞裂解并蛋白酶K消化的方法,快速、简便提取DNA。结果:经分光光度计检测提取的DNA浓度为0.14~5.25g/L,A260/A280值在1.6~1.8;PCR检测扩增出了预期长度为231bp的目的片段。结论:手工组织显微切割后快速DNA提取法可以提供足量浓度的DNA,PCR反应模板结果稳定可靠,可满足后续分子水平研究的需要。
  • 2008年版权归《中国组织工程研究与临床康复》杂志社所有 免费阅读 下载全文
  • 从细胞凋亡角度验证隔药灸对溃疡性结肠炎大鼠环氧合酶2及前列腺素E2的调节作用 免费阅读 下载全文
  • 背景:研究证实,艾灸有可能通过细胞因子调节环氧合酶2及前列腺素E2表达、影响细胞凋亡。目的:实验拟观察环氧合酶2、Bcl-2、Bax的表达及前列腺素E2的含量与溃疡性结肠炎的关系,探讨灸疗的影响作用并比较隔药灸和温和灸治疗作用的差异。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-04/2007-03在上海中医药大学实验动物中心和国家中医药管理局针灸免疫实验室完成。材料:SPF级雄性SD大鼠40只,体质量(140±20)g,采用免疫学方法加局部刺激制备溃疡性结肠炎大鼠模型。方法:40只大鼠随机数字表法分为正常组、模型组、隔药灸组、温和灸组,每组10只。正常组:不做任何治疗。模型组:只作与各治疗组相同的抓取固定。温和灸组:选取天枢、气海穴悬灸,每次每穴灸10min。隔药灸组:选取天枢、气海穴隔药灸,每次每穴灸2壮。疗程:1次,d,共灸14次。主要观察指标:免疫组织化学法检测溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中环氧合酶2、Bcl-2、Bax的表达;放射免疫法测定溃疡性结肠炎大鼠结肠组织中前列腺素E2的含量。结果:纳入SD大鼠40只,造模过程有1只大鼠死亡,解剖见结肠明显扩张,未见穿孔,39只进入结果分析。模型组大鼠结肠组织环氧合酶2、Bcl-2的表达及前列腺素E2的含量高于正常组(P〈0.01);而Bax的表达低于正常大鼠(P〈0.01)。经过灸治后,与模型组比较,隔药灸组和温和灸组环氧合酶2、Bcl-2的表达及前列腺素E2的含量均显著降低旧〈0.01);隔药灸组Bax的表达上调(P〈0.05)。结论:灸疗干预可调节溃疡性结肠炎大鼠结肠组织环氧合酶2、Bax、Bcl-2的表达并降低前列腺素E2的含量,隔药灸的作用优于温和灸。
  • 间接刺激大鼠自主神经对2型糖尿病造模过程中胰腺代谢的影响 免费阅读 下载全文
  • 目的:建立胰腺自主神经间接刺激的2型糖尿病动物模型,观察模型大鼠糖代谢、胰岛素水平及胰腺病理的变化。方法:实验于2005-05/2007-05在青岛大学医学附属医院动物实验室完成。①硅胶模型制作:特制的硅胶片,15mm×1mm×1mm大小,质量(60±3)mg,消毒备用。②分组处理;10周龄雄性SD大鼠52只随机分为4组,左、右侧模型组及双侧模型组各14只,对照组10只。左、右侧模型组分别在左、右T8-12椎间关节神经根处植入硅胶模型,双侧模型组在双侧T8-12椎间关节神经根处植入硅胶模型术,对照组进行背肌切开暴露椎间关节手术。不植入模型。③观察指标:备组大鼠术后45d空腹血糖、糖耐量、胰岛素、胰腺病理,并观察术后0,28,45d体质量变化。结果:8只手术过程中死亡,44只进入结果分析。①糖代谢特征:造模后45d,左侧模型组、双侧模型组血糖明显高于对照组(P〈0.05),3个模型组胰岛素水平明显低于对照组(P〈0.01)。②糖耐量结果:造模后45d。3个模型组的空腹血糖、服糖30,60,120min后血糖均明显高于对照组(P〈0.05),3组之间差异无显著性意义(P〉0.05)。③体质量变化:3个模型组术后28,45d体质量明显低于对照组(P〈0.05)。④胰腺病理:模型组大鼠胰岛β细胞内颗粒减少。结论:间接刺激大鼠自主神经会影响大鼠的糖代谢、胰岛素水平及胰腺组织形态,可用于2型糖尿病动物模型的制作。
  • 胰岛素抵抗模型的建立与评价 免费阅读 下载全文
  • 背景:胰岛素抵抗是代谢综合征、糖尿病和动脉粥样硬化的共同病理基础。目的:比较相同体质量不同饮食诱导及不同体质量相同饮食诱导建立胰岛素抵抗大鼠模型的可行性。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-10/2007-09在泰山医学院生命科学研究所完成。材料:SPF级1个月龄雄性SD大鼠20只;胰岛素溶液为江苏万邦生化医药股份有限公司产品,按照4mU/(kg·min)的滴速标准用前临时配制。方法:按体质量分组4组:体质量在(140±10)g范围的为普通饲料组、高盐高脂饲料组、高糖高脂饲料组,体质量在(180±10)譬范围为高糖高脂饲料组,每组5只。主要观察指标:用高脂饮食诱导建立胰岛素抵抗模型;用正常葡萄糖-高胰岛素钳夹试验验证是否有胰岛素抵抗;不同体质量、不同饮食配方与胰岛素抵抗模型的关系。结果:轻体质量和重体质量大鼠在基础血糖、基础血压方面差异无显著性,20只大鼠全部进入结果分析。①高脂喂养4个月后,两组大鼠体质量、肾脏和附睾周围脂肪重量及GIR60-120差异已无显著性意义,血压差异有显著性意义(P〈0.05),Ln(FINS)、Ln(SINS)差异有极显著性意义(P〈0.01)。②体质量(140±10)g大鼠经高脂喂养4个月后,高脂喂养组与普通饲料组体质量差异无显著性意义。肾脏周围脂肪重量、喂养后血压、Ln(FINS)、Ln(SINS)及GIR60-120差异都有极显著性意义(P〈0.01);高脂高糖及高脂高盐喂养大鼠除Ln(SINS)差异有极显著性意义外,其他指标之间差异无显著性意义。结论:基础体质量较低的大鼠易出现胰岛素抵抗,高脂饮食能更易成功诱导低体质量大鼠胰岛素抵抗模型,在高脂喂养中,饲料中的高糖与高盐对胰岛素抵抗生成影响的差别不大。
  • 高脂饮食诱导胰岛素抵抗模型大鼠血清内脂素变化 免费阅读 下载全文
  • 目的:研究发现内脂素在多种代谢性疾病患者体内出现升高或高表达。实验旨在构建高脂饮食诱导胰岛素抵抗大鼠模型,并观察脂肪细胞因子内脂素在血清中的变化。方法:实验于2007-06/11在广州体育学院运动生化省重点实验室进行。①实验动物:将24只雄性SD大鼠随机分为对照组和高脂组,每组12只。实验过程中对动物处置符合动物伦理学要求。高脂饲料配方:猪油15%、白糖20%、蛋黄粉5%、胆盐0.2%、维生素0.05%、氯化胆碱0.15%、矿物质0.2%、基础饲料59.4%。②实验方法:适应性饲养1周后,分别喂以普通饲料和高脂饲料。6周末,禁食12h,麻醉后,腹主动脉取血,检测两组大鼠空腹血糖和空腹血胰岛素水平,用胰岛素抵抗指数模型评价胰岛素抵抗造模是否成功,并测定血清内脂素的浓度。分离附睾及肾脏周围脂肪垫,称质量,计为内脏脂肪总质量。结果:24只大鼠均进入结果分析。06周末高脂组空腹胰岛素水平、胰岛素敏感指数和胰岛素抵抗指数高于对照组(P〈0.01,P〈0.05)。②6周末高脂组大鼠内脏脂肪总质量高于对照组(P〈0.01)。③高脂组大鼠血清内脂素水平高于对照组(P〈0.01)。结论:高脂饮食成功诱导胰岛素抵抗大鼠模型。胰岛素抵抗大鼠血清内脂素浓度明显增加,提示血清内脂素在胰岛素抵抗的发生和发展过程中可能起一定的作用。
  • CRTER杂志对投稿、组稿、修稿中如何体现本刊宗旨文字内容的要求及说明 免费阅读 下载全文
  • 构建熏烟致慢性支气管炎小鼠模型 免费阅读 下载全文
  • 背景:目前制备慢性支气管炎模型的方法主要有二氧化硫吸入法、脂多糖注入法,两种方法均不能直接反映吸烟与慢性支气管炎的关系。目的:建立小鼠熏烟致慢性支气管炎模型并探讨成模机制。设计、时间及地点:随机分组设计、对照动物实验,于2005-09/2006-01在广东医学院药理学教研室实验室完成。材料:选择健康4周龄昆明种小鼠40只,按随机数字表法分为2组,正常对照组和熏烟模型组,每组20只。方法:以单一烟丝为刺激物制备慢性支气管炎模型。熏烟模型组置于自制熏烟箱中进行熏烟,4次,d,0.5h/次,连续60d。每次熏烟燃烧3g烟丝,烟雾用换气扇抽入熏烟箱。正常对照组小鼠不熏烟,最后一次熏烟后24h麻醉后处死小鼠。主要观察指标:左肺组织苏木精-伊红染色行组织形态学观察,支气管肺泡灌洗液蛋白含量检测并进行白细胞计数和分类;血浆和肺组织匀浆超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量和总抗氧化能力检测。结果:40只小鼠均进入结果分析。与正常对照组比较,熏烟模型组小鼠支气管壁炎性细胞浸润,分泌物增多;肺泡灌洗液中蛋白含量、白细胞总数显著增加(P〈0.01),血浆和肺组织匀浆中超氧化物歧化酶活性、总抗氧化能力降低,丙二醛含量增加(P〈0.05)。结论:成功建立了小鼠熏烟致慢性支气管炎模型,成模机制可能与氧化应激过强有关。
  • 构建复合因素致慢性疲劳大鼠模型及血生化动态变化 免费阅读 下载全文
  • 背景:以往构建慢性疲劳动物模型多采用悬吊、束缚、游泳、跑台等复合性物理因素。目的:以睡眠剥夺与负重力竭游泳复合为慢性疲劳因素,构建慢性疲劳大鼠模型并观察其血液生化指标的变化。设计、时间及地点:2007-03/06在南方医科大学中医症候实验室完成的随机对照动物观察。材料:SPF级健康雄性SD大鼠40只,取8只进行预实验确定观察时间点为造模第1,4,13天,剩余32只随机分为正常对照组8只、模型组24只。方法:模型组大鼠建立慢性疲劳模型,即放入水深1.5cm的盒子中剥夺睡眠20h,按其体质量5%负重后再于水深50cm的玻璃缸内进行力竭游泳训练,以沉入水中10s无法浮出水面判定达到力竭状态。正常对照组不给予任何刺激,自然饲养。主要观察指标:造模第1,4,13天各取8只模型鼠麻醉后腹主动脉采血,离心取上清检测血液生化指标的变化。结果:与正常对照组比较,造模第1天仅尿素氮水平升高,尚未引起血液生化指标的明显改变,大鼠处于急性应激状态;造模第2-4天进入适应阶段,门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、尿素氮等肝肾功能指标发生异常(P〈0.01),大鼠尚可承受该运动强度;造模第5~13天,肝肾功能、C-反应蛋白、血糖、血脂及血清离子等常规血液生化指标几乎均发生异常(P〈0.01),大鼠机体受到严重损伤。结论:随造模时间的延长,慢性疲劳大鼠血液生化指标呈逐渐恶化状态,机体损伤趋势加重。
  • 结核杆菌Hsp65和Esat-6基因共表达质粒的构建和表达
  • 应用细胞培养技术观察黄芩苷对损伤子宫内膜细胞凋亡的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:研究表明脂多糖对子宫内膜细胞具有损伤作用。目的:通过噻唑蓝和流式细胞术观察黄芩苷对脂多糖诱导的子宫内膜细胞活性、周期和凋亡率的影响。设计、时间及地点:以细胞为对象的分组对比观察实验,于2005-11/2007-03在湖南中医药大学完成。材料:子宫内膜组织标本3例,来自中南大学湘雅医学院第三附属医院和湖南省妇幼保健医院因不孕症行诊断性刮宫术,或子宫肌瘤行子宫全切除的患者;黄芩提取物由长沙艾菌生物科技开发有限公司提供,黄芩苷含量≥90%,由湖南中医药大学药学院药物制剂室制备黄芩苷药物,原液浓度为80g/L。方法:体外培养人子宫内膜细胞。将细胞随机分为空白组、黄芩苷组(8,0.8,0.08,0.008g/L)。根据细胞活性最好的黄芩苷浓度以下实验将细胞随机分为空白组、脂多糖组、脂多糖+黄芩苷组(0.08g/L)。主要观察指标:①采用噻唑蓝法检测黄芩苷对子宫内膜细胞活性的影响。②采用流式细胞术检测黄芩苷对脂多糖诱导子宫内膜细胞凋亡率及周期的影响。结果:①噻唑蓝法检测显示黄芩苷组除0.008g/L外,其余各浓度对子宫内膜细胞活性均有抑制作用,选择0.08g/L进行后续实验。②流式细胞术检测显示黄芩苷干预后G0/G1和G2/M期细胞百分比较脂多糖组明显降低,S期明显增高,细胞凋亡率明显降低。结论:黄芩苷可以使G0/G1期细胞被诱导进入S期,从而促进细胞的增殖,降低了脂多糖诱导的细胞凋亡。
  • 构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C与质粒PQE-4.0的重组质粒 免费阅读 下载全文
  • 背景:研究表明柯萨奇B4病毒感染与1型糖尿病发病有关,但目前尚未明确其关系的确切机制。目的:构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C与质粒PQE-4.0的重组质粒,转入大肠杆菌中表达,并对表达产物进行功能鉴定。设计、时间及地点;随机对照实验,于2007-03/08在吉林大学免疫学教研室完成。材料:CVB4、HeLa细胞病毒均为吉林大学病原生物教研室保存;菌株E.coli DH5α与M15为东北师范大学遗传所保存:质粒PUCm-T载体、PQE4.0载体由东北师范大学曾宪录教授惠赠。方法:提取柯萨奇B4病毒总RNA,经反转录-聚合酶链反应扩增非结构蛋白P2C基因,与PUCm-T载体连接,将PUCm-T-P2C质粒进行BamHⅠ和HindⅢ双酶切,回收目的片断并定向克隆到PQE4、0表达载体中酶切鉴定。将PQE4.0+P2C阳性重组质粒转化大肠杆菌M15,在IPTG诱导下表达。主要观察指标:①以十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C的表达。②采用淋巴细胞转化实验和酶联免疫吸附实验检测大肠杆菌M15细胞重组蛋白粗提物。结果:①反转录-聚合酶链反应扩增得到的987bp的cDNA片段,克隆入PUCm-T载体,酶切释放出长度约2773bp和987bp的两条片段,其中一条与非结构蛋白P2C的聚合酶链反应扩增产物片段大小基本一致,序列分析与Genbank报道的序列一致。目的片段克隆入PQE4.0载体,酶切释放出长度约3400bp和987bp的两条片段,其中一条与非结构蛋白P2C的聚合酶链反应扩增产物片段大小基本一致,获得PQE4.0-P2C重组表达质粒。②十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示未诱导组无明显蛋白带,而诱导组在31000位置均出现较明显的蛋白带,且随着诱导时间延长蛋白表达量也随之增加。③淋巴细胞转化实验与酶联接免疫吸附试验测定结果表明,表达产物具有良好的抗原性与特异性。结论:柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C在大肠杆菌中高效表达,且表达产物具有一定的免疫活性。
  • NRR杂志2007年出版稿件的基本参数及被SCI引文库、CA、EM收录情况 免费阅读 下载全文
  • 组织工程化肌腱的实验研究与临床应用 免费阅读 下载全文
  • 学术背景:肌腱损伤的治疗方法由于供体肌腱缺乏或免疫排斥反应等因素,使肌腱移植受限,随着细胞培养技术和移植技术的发展以及生物材料科学的发展,一种全新的理想肌腱替代物——组织工程化人工肌腱将最终解决缺损肌腱的修复问题。目的:总结目前组织工程人工肌腱的研究历程和最新成果。检索策略:应用计算机检索PubMed数据库1994-01/2007-12的相关文献,检索词“tissue engineering,artificial biocompatible tendon”,限定文章语言种类为English。同时计算机检索万方数据库1994-01/2007-12的相关文献,检索词“组织工程,肌腱”,限定文章语言种类为中文。共检索文献80篇,中文55篇,英文25篇。纳入标准:①具有原创性,论点论据可靠的实验文章。②观点明确,分析全面的文章。③文献主体内容与此课题联系紧密的文章。排除因研究目的与本综述无关者8篇,内容重复性的研究40篇。文献评价:最终纳入符合标准的文献32篇。其中动物实验和在体、离体、细胞学实验10篇,综述、述评、讲座类文献12篇,临床研究10篇。资料综合:肌腱损伤后若未予以及时修复常会导致肢体功能障碍,组织工程化人工肌腱修复缺损肌腱可对肌腱缺损进行形态修复和功能重建,并达到永久性替代。目前,组织工程学研究进展迅速,但要真正应用于临床仍存在一些问题。首先,种子细胞的来源不能仅限于自体肌腱细胞,其次,如何对材料进行合理改进,使其成为理想的塑造器官形状的三维支架材料,最重要的是如何模拟体内环境,在体外成功构建肌腱组织。结论:在体外利用生物反应器模拟体内环境,进行组织工程化肌腱的构建,将是未来的研究方向。
  • 组织工程化神经移植治疗臂丛神经根性撕脱伤 免费阅读 下载全文
  • 学术背景:臂丛神经根性撕脱伤是臂丛神经损伤中最严重的类型,属节前损伤,预后极差,目前传统的神经移植术疗效并不满意,因此研究组织工程化神经移植治疗臂丛神经根性撕脱伤尤为必要。目的:探讨组织工程在神经损伤中的作用及其效果,为临床组织工程化神经移植治疗臂丛神经根性撕脱伤提供参考。检索策略:应用计算机检索PubMed数据库和中国期刊全文数据库2001-01/2007-10的有关文献,英文检索词“brachial plexus avulsion”,中文检索词为“臂丛神经损伤”。共检索到410篇相关文献,其中中文文献255篇,英文文献155篇,对文献进行筛选,纳入标准:①选取针对性强,相关度高的文献。②对同一领域的文献选择近期发表或权威杂志的文献;排除重复研究和Meta分析类文章。最后34篇被选用。文献评价:选用34篇文献,其中1篇为综述、其余均为临床与实验研究。资料综合:传统的神经移位术和撕脱神经根再植术为临床上治疗臂丛神经根性撕脱伤的两种方法,效果有限。神经营养因子、唾液酸酶、软骨素酶ABC、N-乙酰半胱氨酸对受损神经元有保护和促进作用。骨髓干细胞及脊髓神经干细胞移植到脊髓受损部位后能分化成神经细胞。结论:组织工程化神经移植治疗臂丛神经根性撕脱伤可能成为更有效的临床治疗方法。
  • 组织工程化脂肪组织构建的研究与进展 免费阅读 下载全文
  • 学术背景:软组织缺损的修复是整形外科最重要的难题,目前的各种方案都存在一定缺陷,脂肪组织工程技术为解决上述难题提供了一种新的途径。目的:分析脂肪组织工程的研究现状及目前方案的缺陷,对其将来可能的临床应用进行相应展望。检索策略:应用计算机检索Medline数据库1991-01/2007-07相关组织工程化脂肪组织构建的文献,检索词“fat,Tissue engineering”,限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库1991-01/2007-07的相关文献,检索词“脂肪,组织工程”,限定文章语言种类为中文。共检索到英文文献241篇,中文文献101篇。阅读标题和摘要进行初筛,纳入标准:与组织工程化脂肪组织构建相关的文献。排除重复研究276篇。文献评价:保留66篇中英文文献进一步分析,最终纳入符合标准的文献30篇。资料综合:构建组织工程化脂肪的要素包括细胞类型、支架和血液供应及微环境。脂肪组织的缺损和不足是常年困惑整形外科医生的问题。通常采用的自体游离组织移植中,移植物的吸收限制了其进一步应用。组织工程技术的发展为解决上述问题提供了可能的途径。目前,鉴于重建美容外科的巨大需求,脂肪组织的组织工程构建已经逐渐成为了一个研究的焦点。结论:组织工程化的脂肪组织真正应用于临床,移植物必须能长年保持正常的形态和功能,组织工程化的脂肪将能为临床彻底解决软组织缺损等难题展示美好的前景。
  • 组织工程皮肤的结构和特性 免费阅读 下载全文
  • 人体组织和器官的结构是其功能的基础。人体皮肤丢失的同时也丧失了其相应的功能。当皮肤缺失面积相当大时,用自体皮来封闭皮肤缺损创面就存在皮源不足的问题。而组织工程研究的进展,使应用人工皮肤来修复皮肤缺损成为可能。为了使研制出的组织工程皮肤的功能与正常皮肤接近甚至相同,在结构上,也应使它们尽可能地接近与相似。本文就表皮替代物、真皮替代物、复合人工皮肤的构建及其特性和应用作一综述。相信随着多学科的发展和基础与临床研究的深入,制备的组织工程皮肤替代物在结构与特性上将更接近正常皮肤。
  • 热休克蛋白70热耐受性获得与运动应答的反应 免费阅读 下载全文
  • 学术背景:热休克蛋白70是机体在正常或较高温度下存活的基础,同时在提高机体的耐高温能力,由于能量缺失、缺血等应激造成的细胞破坏中起关键保护作用。目的:总结热休克蛋白70热耐受性获得的机制,探讨不同运动热休克蛋白70应答的变化及其原因。检索策略:应用计算机检索PubMed数据库1994-01/2007-10的相关文献,检索词“HSP70,Heat Tolerance,Sports Stress”,限定文章语言种类为English。同时计算机检索万方数据库1994-01/2007-10的相关文献,检索词“热休克蛋白70,热耐受,运动应激”,限定文章语言种类为中文。并通过手工检索,共检索文献533篇。纳入标准:①具有原创性,论点论据可靠的实验文章。②观点明确,分析全面的文章。③文献主体内容与此课题联系紧密的文章。排除标准:实验设计不合理的文章及观点模糊的综述。选出166篇符合标准的文献。对所得文献进行提炼,按上述标准纳入中文5篇,英文32篇。文献评价:对166篇中英文文献进一步分析,最终纳入符合标准的文献37篇。综述、评述性文献8篇,人体和动物实验文献29篇,其中包括热休克蛋白70热耐受性和调控问题12篇;运动与热休克蛋白70应答相关的17篇。资料综合:所有组织中的细胞通过热休克蛋白的快速合成对各种应激源作出反应,其中热休克蛋白70是最主要的热休克蛋白之一。它是热休克蛋白中具有最高温度敏感性和高度保守性的。许多研究已经证实,由应激诱导的热休克蛋白70的聚集,有提高细胞或机体的耐热能力。熟休克蛋白70对细胞受到包括热应激、缺氧和感染等应激因素刺激时有保护作用。急性运动造成机体细胞热休克蛋白70合成增加,并且作出的应答程度可能主要依赖强度的诱导;长期训练会造成热休克蛋白70对急性运动应答的减弱,可能表明对运动的适应。结论:①热休克蛋白70通过分子伴侣作用、抗氧化作用、协同免疫作用和抗细胞凋亡作用对再次出现的应激有保护耐受作用,并可能是使机体细胞对长期训练产生适应的原因。②急性运动和长期训练对热休克蛋白70应答产生不同影响,而年龄也是重要的影响因素。
  • 运动预适应与心肌细胞的保护 免费阅读 下载全文
  • 学术背景:剧烈运动可诱发心肌损伤。研究表明,心肌缺血预适应是有效的保护心肌免于损伤的内源性保护措施。另有研究表明,运动可诱导机体产生内源性保护物质,从而提高机体耐受缺血缺氧的能力称为运动预适应。目的:探讨运动预适应的心肌细胞保护机制,为在运动实践中保护心脏提供新的思路。检索策略:作者应用计算机检索Pubmed数据库2000-01/2007-12的相关文献,检索词”Exercise preconditioning,Ischemic preconditioning,Adaptive cytoprotection”,限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库、万方数据库2000-01/2007-04期间的相关文章,检索词”缺血预适应;运动预适应;适应性细胞保护”,限定文章语言种类为中文。共检索到37篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①与缺血预适应和运动预适应相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:重复性研究。文献评价:文献的来源主要是缺血预适应与运动预适应的随机对照试验。所选用的30篇文献中,8篇为综述,其余均为临床或基础实验研究。资料综合:①多年来,人们一直认为缺血是造成心肌损伤的最主要最基本的发病因素,短暂的心肌缺血引起可逆性心肌损伤,使心肌难于承受再次缺血,反复多次短暂的缺血发作有可能引起累积性心肌梗死。②研究表明,缺血预适应能对随后长时间的心肌缺血再灌注损伤有保护作用,这种现象称为缺血预适应。缺血预适应使心脏遭受短暂缺血后能耐受较长时间的缺血,是心脏的一种自我保护机制。③激烈运动作为一种应激,可极大提高心肌耗氧量,造成暂时的心肌相对缺血或绝对缺血,反复的运动则造成反复的短暂缺血,这种通过运动诱导机体产生内源性保护物质,从而提高机体耐受缺血缺氧的能力称为运动预适应。运动预适应对心脏具有保护作用,其具体的作用机制还不清楚。目前大量的研究表明,运动预适应的机制与运动诱导心肌细胞适应性保护有关。结论:运动预适应的机制与运动诱导心肌细胞适应性保护有关。这种适应性心肌细胞保护可能与抗氧化酶活性提高、热休克蛋白产生、一氧化氮的作用、心肌细胞凋亡的抑制,以及与运动导致冠状动脉解剖、生理适应和心肌肌浆网Ca^2+-ATP酶活性提高有关。
  • 低氧适应对糖代谢的影响及其机制 免费阅读 下载全文
  • 学术背景:低氧应激状态下糖作为首当其充的能源物质优先被动用,长期低氧应激机体糖代谢过程发生深刻影响,包括糖的摄取、利用、氧化等。因此研究低氧适应对糖代谢的影响及其机制尤为必要。目的:探讨低氧适应对糖代谢的影响及其可能机制,为低氧应用研究提供理论参考。检索策略:应用计算机检索PubMed数据库和中国期刊全文数据库1990-01/2007-07的有关文献,检索词为“低氧(缺氧),代谢酶,胰岛素,GLUT,HIF-1,AMPK”,限定文章语言分别为英语和中文。共检索到338篇相关文献,其中中文文献215篇,英文文献123篇,对文献进行筛选,纳入标准:①选取针对性强,相关度高的文献。②对同一领域的文献选择近期发表或权威杂志的文献;排除重复研究和Meta分析类文章。最后40篇被选用。文献评价:选用40篇文献,其中8篇为综述、其余均为临床与实验研究。资料综合:伴随着低氧适应,机体糖磷酸化酶与糖原合成酶含量升高、活性增强,葡萄糖转运能力增强,可能是低氧诱导因子1上调了糖代谢有关的低氧基因表达;AMPK的激活通过一条未知的途径调节糖代谢过程。结论:糖代谢能力增强是低氧适应的重要标志之一;低氧适应糖代谢能力增强,在高原训练、预防和改善胰岛素抵抗方面有着广泛的应用前景。
  • 转化生长因子β1基因与中医证型相关性 免费阅读 下载全文
  • 检索重庆维普中文科技期刊数据库、清华同方中文数据库及Medline数据库1994-01/2007-10期间的有关转化生长因子β1基因多态性与部分中医证型的关联性文章36篇进行归纳分析。研究证实,转化生长因子β1是一种多功能细胞因子,在肝、肾等脏器的纤维化、气道壁结构重构的形成、椎间盘退行性变进程、类风湿关节炎及骨关节炎疾病的发生等均有不同程度的干预作用。转化生长因子β1基因多态性与中医血瘀证、湿热证、肝肾亏虚及寒湿证等证型的关联性得到了部分实验及临床的验证,但缺乏系统相关性研究。
  • 大负荷运动过程中的心肌钙代谢 免费阅读 下载全文
  • 学术背景:研究表明,心肌细胞内钙急剧增多与心脏结构功能的损伤有重要关系。机体完成长时间剧烈运动时,心脏等其他内脏系统主动发生缺血缺氧,以满足运动器官的血液供应,而心肌由于缺氧复氧出现钙超载。目的:总结大负荷运动对心肌细胞钙代谢影响的研究进展。检索策略:应用计算机检索Sportdiscuss1981-01/2007-11有关大负荷运动影响心肌钙代谢的文章,检索词“Exercise,Myocardial,cytoplasm,cell nuclear,Sarcoplasmic ret-iculum,mitochondria,calcium”,限定文章语言种类为“English”,文章来源限定为“Journals article”;计算机检索中国期刊全文数据库2000-01/2007-11期间的相关文章,检索词“运动:心肌:细胞浆;肌浆网;线粒体;细胞核;钙”,限定文章语言种类为中文;同时手工查阅相关书籍。共检索到60篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①与大负荷运动对心肌钙代谢的影响密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:重复性研究。文献评价:文献的来源主要是大负荷运动对心肌钙代谢影响方面的随即对照实验。所选用的30篇文献中,6篇为综述,其余均为基础实验研究。资料综合:①心肌细胞内钙的稳定主要由细胞膜、肌浆网以及线粒体来调节。②大负荷运动会引起机体心脏发生缺血再灌注,从而影响心肌细胞膜与肌浆网对钙的正常转运,细胞外钙内流增多而胞浆内钙泵出减少,同时肌浆网摄钙能力下降,胞浆内钙离子浓度急剧升高。③大负荷运动由于引起心肌细胞浆内的钙离子过度升高,线粒体通过其膜上的单向转运机制摄取胞浆内过多的Ca^2+离子而缓解细胞浆内钙超载,从而造成自身的钙超载,表现为线粒体内钙盐沉积,总钙增多,而基质游离钙浓度却下降。结论:大负荷运动可导致心肌细胞钙代谢紊乱,出现钙超载。有关运动性缺氧复氧对心肌钙代谢影响的研究已取得一些进展,但还不够深入,还存在一些空白。
  • NRR已出版的文章被SCI引文库、CA、EM数据库收录情况 免费阅读 下载全文
  • 中国21个省市心理治疗师的自我表露调查 免费阅读 下载全文
  • 目的:了解中国文化背景下心理治疗师的自我表露特征。方法:调查于2006-10/12进行。选取中国东北、华北、华南、华中、西南、东南各地区21个省市从事心理咨询工作的治疗师为调查对象,要求年龄在20~69岁,进行个体心理治疗并且有至少2年实践经验。采用自编治疗师自我表露调查问卷进行调查,通过E-mail发送问卷,问卷由15道题目组成,其中人口统计学相关题目6道,治疗师自我表露特征的题目共9道,调查心理治疗师自我表露的倾向、内容、方式、原因、影响因素,及其与性别、理论取向间的关系。结果:实际发放问卷390份,回收问卷191份,回收率为49%,其中有效问卷182份,有效回收问卷率为47%。①大部分心理治疗师在治疗中主动运用了自我表露技术,且性别差异显著,男性比女性治疗师主动。②治疗师表露最多的是对来访者的情感体验,表露最少的是个人的优势或弱点。③大多数治疗师以探索的方式应对自我表露情境。④来访者问题类型和严重程度、治疗阶段、治疗联盟的品质是影响咨询师自我表露的主要因素。⑤治疗师自我表露的主要目的是增加来访者转变观念和选择的意识。⑥与刚开始从业相比较,大部分治疗师的自我表露减少了。结论:无论是在主动,还是在被动自我表露情况下,中国治疗师均显示出了较高的表露倾向,治疗师对不同表露内容的使用频率不同,作为一项治疗技术,治疗师的自我表露是积极而富有成效的。
  • 2008年版权归《中国组织工程研究与临床康复》杂志社所有 免费阅读 下载全文
  • 能量代谢指标与肥胖评价方法关系分析 免费阅读 下载全文
  • 目的:根据肥胖的定义,建立肥胖评价标准应该参照体内多余能量堆积程度能否破坏健康和引发相关疾病这一依据。实验试图找出能量代谢指标与不同肥胖评价方法测试结果之间的相关关系,探索以能量指标为参照依据不同方法评价肥胖的合理性。方法:于2002-11采用多阶段随机抽样方法,随机选取西安市3个城区,每个城区再随机选取2个社区,每个社区中再随机抽取居住5年或以上的常住女性居民120名,剔除有明显严重急、慢性疾患和肥胖遗传史者70名及无效问卷者93人,共557名纳入分析,年龄50-60岁,平均年龄(54.1±2.6)岁。按国民体质监测工作手册的测试要求,采用3种测量方法测试能量指标与形态指标。分别为ZW法,即采用张薇体密度推算公式来计算体脂率;BIA法,采用日本TANITA公司提供的人体组成分析仪用生物电阻抗技术来测定体脂率;体质量指数法,是按《中国成人体质监测标准》进行测量身高和体质量,计算体质量指数。ZW法和BIA法评价成年女子肥胖的标准为体脂率≥30%。体质量指数法为体质量指数≥28kg/m^2为肥胖。结果:①不同肥胖评价方法测试结果与能量摄入和能量消耗均呈中度相关关系,与剩余能量呈显著相关,相关系数均在0.77以上。②不同肥胖评价方法测试结果与剩余能量的关系曲线图大致趋势一致,随剩余能量的增加,各方法测试结果也不断增加,尤其是BIA法体脂率与剩余能量指标的一致程度最好。结论:不同肥胖评价方法与能量代谢指标密切相关,可以以能量指标为参照依据评价方法的合理性。
  • 办公室人员保健操的适用性 免费阅读 下载全文
  • 目的:介绍“办公室人员适宜性保健操”,验证其是否适用于办公室人员,并观察其对办公室人员常出现的颈、肩、腰、腿痛症状的影响。方法:①对象:2002-01/2004-04选择了兰州市商业银行中山支行、甘肃省水利水电设计院、兰州鼎泰塑料有限公司3个单位133人,进行为期28个月的“办公室人员适宜性保健操”锻炼,其中35岁以下72人,35~45岁46人,45岁以上15人,所有受试者均自愿参与。②方法:整套保健操包括18节动作,受试者可以根据自己的实际情况,在每个工作日选择全套操或其中的几节操进行锻炼,每天上下午各做1次,10~15min/次。③观察指标:试验前后测试肺活量、30秒30次蹲起的心脏功能指数、手反应时、俯卧背伸、立位体前屈、转体幅度、肩臂上抬等7个生理指标;并统计锻炼后肩围套症状、腰背症状和颈项症状等3个病理指标的改善情况。结果:133名受试者均完成锻炼和测试进入结果分析。经过28个月的保健操锻炼,所有受试者的7个生理指标都较做操前有了明显的提高:做操前有肩围套症状、腰背症状、颈项症状者,原有症状或消失或者明显减轻。结论:“办公室人员适宜性保健操”适用于办公室人员,可以增强体质,防治颈、肩、腰、腿痛的症状,并能起到放松痉挛肌肉、牵引挛缩肌腱和韧带、提高和恢复身体软组织及各关节活动能力的效果。
  • 2008年CRTER杂志论著类稿件体例(4.0-6.0版/篇) 免费阅读 下载全文
  • 膝关节骨性关节炎患者接受针刀治疗后不同阶段的运动处方 免费阅读 下载全文
  • 目的:观察针刀治疗结合康复运动训练对膝关节骨性关节炎患者的治疗效果,并采用随机对照分组与单纯针刀治疗相比较。方法:选择2005-01/2007-05在海军总医院康复理疗科就诊的膝关节骨性关节炎患者52例,均自愿参加观察。按随机数字表法分为两组,对照组24例,治疗组28例。前者采用针刀治疗并配合药物。治疗组在针刀治疗基础上,配合运动康复训练(直腿抬商法、屈伸髋膝法、坐位摆腿法),在3个动作基础上适当加阻力锻炼,以后可逐渐增加运动量及锻炼时间。根据患者个人的心脏功能水平,制定出系统、有针对性的康复运动处方。运动共持续6周,分3个阶段进行。运动频度为1次/d,60min/次,5次/周。评定两组患者治疗前及治疗3个疗程后患膝关节症状及功能恢复情况,包括疼痛、步行能力、膝关节活动度、膝不稳定感、肿胀、上下楼梯及绞锁等项目。结果:纳入膝关节骨性关节炎患者52例,全部进入结果分析。对照组患者经过3个疗程治疗后,疼痛、膝不稳定感、步行能力、膝关节活动度、上下楼梯能力均较治疗前改善,但肿胀、绞锁治疗前后变化差异无显著性(P〉0.05)。治疗组患者经过3个疗程康复运动处方锻炼后。疼痛、步行能力、膝关节活动度、上下楼梯能力,膝不稳定感,肿胀均较治疗前显著改善(P均〈0.01);但绞锁治疗前后变化差异无显著性。两组患者经过3个疗程的不同处理,除绞锁症状外,治疗组患者的膝关节症状及功能较对照组明显改善,两组变化差异有显著性意义(P均〈0.05)。结论:在常规针刀治疗后结合康复运动训练可以显著改善膝关节骨性关节炎患者的关节功能,优于单纯针刀治疗。
  • 小鼠主动脉平滑肌细胞及肌源性泡沫细胞与格列本脲共孵育的反应 免费阅读 下载全文
  • 目的:观察磺酰脲类药物格列本脲对平滑肌细胞及肌源性泡沫细胞内酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)酶活性的影响。方法:实验于2003-06/2005-07在华中科技大学同济医学院实验中心完成。①用组织贴块法培养小鼠主动脉平滑肌细胞,采用两步超速离心法制备低密度脂蛋白后,运用CuCl2氧化法制备氧化低密度脂蛋白,采用100mg/L的氧化低密度脂蛋白作用于平滑肌细胞72h,建立泡沫细胞模型。②在平滑肌细胞和泡沫细胞分别加入格列本脲,使终浓度为200μmol/L,孵育24h,用放射性同位素标记法检测ACAT1酶活性。结果:①平滑肌细胞转变为泡沫细胞后,ACAT1酶活性上升(P〈0.05)。②平滑肌细胞被格列本脲干预后,ACAT1酶活性无明显变化(P〉0.05);肌源性泡沫细胞加入格列本脲后,ACAT1酶活性下降(P〈0.05)结论:格列本脲能抑制肌源性泡沫细胞内ACAT1的酶活性,抑制平滑肌细胞向泡沫细胞的转化,有可能成为防止动脉粥样硬化的有效药物。
  • NRR近期组稿重点内容 免费阅读 下载全文
  • 高住低训模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物的活性:线粒体习服过程所需时间分析 免费阅读 下载全文
  • 背景:以往的研究发现,高原训练的有效时间为4~6周,而高住低训的有效训练时间、尤其是线粒体的习服所需要的时间还未见系统报道。目的:构建模拟“高住低训”训练法大鼠模型,观察低氧和高原训练刺激作用下,高住低训习服过程中模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物活性的动态变化,分析线粒体呼吸链酶复合物的高住低训习服过程所需时间。设计:分组对照动物实验。单位:辽宁师范大学体育学院运动生理实验室。材料:实验选用健康成年SD大鼠40只,雌雄不拘,由大连医科大学实验动物中心提供。实验动物的处置符合动物伦理学。实验用模型常压低氧环境所用低氧分压系统由美国Hypoxico公司制造,氧气监测仪为美国产TOXIBLAEPGM-36型。方法:随机将大鼠分为5组:常氧对照组,高住低训1,2,3,4周组,每组8只。高住低训组大鼠每天在低氧分压系统模拟的海拔2500m的高原环境生活,同时模拟海拔1300m环境下游泳运动1h,每周训练6d。主要观察指标:采用可见分光光度法测定每组大鼠心肌线粒体呼吸链复合酶体Ⅰ-Ⅳ活性,用Bradford法进行线粒体蛋白定量检测。结果:①心肌线粒体呼吸链复合酶活性:高住低训1周大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ~Ⅳ活性较对照组显著降低,差异有显著性意义(P〈0.05~0.01);高住低训2周时酶复合Ⅲ活性与对照组比较,差异无显著性意义(P〉0.05),而其他酶复合物在高住低训3周时与对照组比较,差异无显著性意义(P〉0.05)。②线粒体蛋白含量:高住低训1,2周时与对照组比较,差异无显著性意义(P〉0.05),高住低训3,4周时高于对照组,差异有显著性意义(P〈0.05)。结论:模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ~Ⅳ活性的高住低训习服过程需要3周。
  • 2008年版权归《中国组织工程研究与临床康复》杂志社所有 免费阅读 下载全文
  • 重组人骨形态发生蛋白2在组织工程及基因治疗中的应用 免费阅读 下载全文
  • 学术背景:在能够促进新骨形成的许多生长因子中,骨形态形成蛋白可能是最具效应的。临床病例随机控制试验是分析其效应的金标准,但是仅有骨形态发生蛋白2及骨形态发生蛋白7的研究达到了这个水平。目的:探讨重组人骨形态发生蛋白2在组织工程及基因治疗中的应用进展及理想的运送时间和运送方式。检索策略:由该论文的研究人员检索PubMed数据库1997-01/2006-12的相关文献,检索词“recombinant human bone morphogenic proteins(rhBMPs),tissue engineedng,gene therapy”,并限定文章语言种类为English,共检索到81篇文献,对资料进行初审,纳入标准:①与重组人骨形态发生蛋白2在组织工程及基因治疗中的应用密切相关。②同一领域选择近期发表或在权威杂志上发表的文章。排除标准:重复性研究。文献评价:文献的来源主要是重组人骨形态发生蛋白2在组织工程及基因治疗中的应用实验及临床研究。所选52篇文献中,12篇为综述或会议文章,其余均为临床或基础实验研究。资料综合:①骨形态形成蛋白是转化生长因子β超家族的成员,它们由骨祖细胞分泌,典型地促进骨的生长。②骨组织工程是指在骨的再生过程中,生长因子,细胞及组织工程支架的应用。重组人骨形态形成蛋白2在组织工程中的应用,为骨与软组织的修复的控制及增强提供了很大的希望。③通过基因治疗手段,可以发展一种生物细胞运送工具把重组人骨形态形成蛋白2直接运送来促进新骨形成,重组人骨形态形成蛋白2在基因治疗中的应用,为骨与软组织的修复的控制及增强提供了很大的希望。④研究表明,为了到达理想的部位,重组入骨形态形成蛋白2的剂量,给予时间,运送方式成为面临的挑战。未来的研究,应该着力于重组人骨形态形成蛋白2的理想剂量,给予时间,运送方式,而且这种运送具有价效比,并且能够精确地控制。结论:未来骨与软组织的修复,很可能建立在康复及组织再生的生物学增强基础上。重组人骨形态形成蛋白2在组织工程和基因治疗中的应用,为这种控制及增强提供了很大的希望。
  • 应用基因芯片技术检测中国成年肥胖者外周血的基因表达谱 免费阅读 下载全文
  • 背景:肥胖是全世界最常见、花费最大的代谢性疾病,基因及环境因素已经成为肥胖研究的焦点因素之一,基因芯片技术已被用于脂肪组织的研究。目的:采用基因芯片技术,首次测定中国成年肥胖者的外周血基因表达谱。设计:对照观察。单位:北京中医药大学。对象:由北京中医药大学基础医学院于2003-08/2004-05组织,按国际体质量标准在北京市工人疗养院筛选5例肥胖者和3例体质量正常者。5例肥胖者中男4例,女1例,年龄(21±1)岁;3例体质量正常者中男2例,女1例,年龄(26±5)岁。所有受试人员对实验方案均知情同意,且得到医院伦理道德委员会批准。方法:取上述受试者的外周血,提取总RNA并进行扩增和标记,用Test3芯片检测受试样品的质量,用U133A芯片进行基因表达谱观察,并将所得数据进行统计学分析,从基因BANK中查出具有显著差异的序列所标志的基因。主要观察指标:基因表达信号值。结果:与体质量正常者相比,肥胖者外周血基因表达谱显著上调的基因有66个,显著下调的基因有28个;其中上调超过2倍的有11个,下调超过2倍的有6个。肥胖者表达上调超过4倍的基因为HLA-DQAI,CRAT,MAPK813和DKFZP434N1923,其中表达上调超过20倍的基因为HLA-DQAI。结论:首次发现肥胖成人的外周血相关基因表达与体质量正常者有明显差异,肥胖与MHCⅡ类抗原HLA-DQA1,HLA-DQB1表达密切相关。
  • 转化生长因子β1对肾小管上皮细胞转分化和细胞外基质成分的调节与阿魏酸钠的干预效果(谢席胜 左川 米绪华 李会娟 付平)
    心房钠尿肽合成细胞在大鼠胃的超微结构定位
    内皮抑素与佐剂性关节炎大鼠血管内皮细胞生长因子、基质金属蛋白酶3及基质金属蛋白酶9的表达(周润华 莫汉有 朱姗姗 杨敏 覃央)
    构建人热休克蛋白22基因真核表达载体pEGFP-N1/HSP22及在血管内皮细胞中的表达(鲍慧慧 程晓曙 陈琦 洪葵 李萍 王玲)
    结缔组织生长因子在红参虫草胶囊干预糖尿病大鼠肾脏的表达
    青蒿素对免耳创面瘢痕增生的抑制效应(冯登超 贺光照 江川 杨天荣 张恒术)
    成骨细胞不同体外培养方式的耗氧速率检测
    携带人胰岛素样生长因子Ⅰ基因的重组腺病毒体外转导培养关节软骨细胞(江海良 夏青 魏振 黄爽 贾静)
    含双顺反子绿色荧光蛋白人骨形态发生蛋白2表达载体的构建
    不同功能状态大鼠骨骼肌抗氧化能力的变化(李涛)
    CRTER发表文章被SCI引文库、CA、EM数据库收录的最新数据
    肌内神经对股直肌损伤修复的作用(郑江 陈富 邓忠良)
    抗骨增生胶囊含药血清对软骨细胞增殖凋亡及基质金属蛋白酶分泌的影响
    脂联素对成骨细胞核因子κB受体活化素配体表达的影响(杨玲凤 谢辉 袁凌清 罗湘杭)
    血管内皮细胞生长因子165基因重组腺病毒的构建及其鉴定(韩焱福 宋建星 刘军)
    去卯巢大鼠体质量和骨密度的相关性分析
    大强度运动大鼠血脂和过氧化水平变化与白藜芦醇的影响
    构建小鼠肝细胞磷酸化蛋白质组分析鉴定的方法模型
    程序性细胞死亡分子5在类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞中的表达与意义
    2008年版权归《中国组织工程研究与临床康复》杂志社所有
    筋膜瓣包裹组织工程骨修复免大段骨缺损的动态变化
    手工组织显微切割后的快速DNA提取技术(唐泽立 罗泊涛 苏维勇 胡新荣 郑晓娟)
    2008年版权归《中国组织工程研究与临床康复》杂志社所有
    从细胞凋亡角度验证隔药灸对溃疡性结肠炎大鼠环氧合酶2及前列腺素E2的调节作用(崔云华 周爽 吴焕淦 王晓梅 谭琳蓥 刘慧荣)
    间接刺激大鼠自主神经对2型糖尿病造模过程中胰腺代谢的影响(于兆华 于尉杰 陈福香 王琳)
    胰岛素抵抗模型的建立与评价
    高脂饮食诱导胰岛素抵抗模型大鼠血清内脂素变化(李颖 翁锡全 林文弢)
    CRTER杂志对投稿、组稿、修稿中如何体现本刊宗旨文字内容的要求及说明
    构建熏烟致慢性支气管炎小鼠模型(覃冬云 吴铁 廖芸芸 王勤 陈志东)
    构建复合因素致慢性疲劳大鼠模型及血生化动态变化
    结核杆菌Hsp65和Esat-6基因共表达质粒的构建和表达
    应用细胞培养技术观察黄芩苷对损伤子宫内膜细胞凋亡的影响
    构建柯萨奇B4病毒非结构蛋白P2C与质粒PQE-4.0的重组质粒
    NRR杂志2007年出版稿件的基本参数及被SCI引文库、CA、EM收录情况
    组织工程化肌腱的实验研究与临床应用(邱南海 夏英鹏)
    组织工程化神经移植治疗臂丛神经根性撕脱伤(张小雪 王斌)
    组织工程化脂肪组织构建的研究与进展(李志刚 李为儒)
    组织工程皮肤的结构和特性(陈剑平 刘德伍 毛远桂)
    热休克蛋白70热耐受性获得与运动应答的反应(黄文聪)
    运动预适应与心肌细胞的保护
    低氧适应对糖代谢的影响及其机制
    转化生长因子β1基因与中医证型相关性
    大负荷运动过程中的心肌钙代谢
    NRR已出版的文章被SCI引文库、CA、EM数据库收录情况
    中国21个省市心理治疗师的自我表露调查
    2008年版权归《中国组织工程研究与临床康复》杂志社所有
    能量代谢指标与肥胖评价方法关系分析(李米环 李国强)
    办公室人员保健操的适用性
    2008年CRTER杂志论著类稿件体例(4.0-6.0版/篇)
    膝关节骨性关节炎患者接受针刀治疗后不同阶段的运动处方(陈裔英 沈红星 付本升)
    小鼠主动脉平滑肌细胞及肌源性泡沫细胞与格列本脲共孵育的反应
    NRR近期组稿重点内容
    高住低训模型大鼠心肌线粒体呼吸链酶复合物的活性:线粒体习服过程所需时间分析(李永春)
    2008年版权归《中国组织工程研究与临床康复》杂志社所有
    重组人骨形态发生蛋白2在组织工程及基因治疗中的应用
    应用基因芯片技术检测中国成年肥胖者外周血的基因表达谱
    《中国组织工程研究与临床康复》封面

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