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  • 同种异体大鼠移植肺中转录因子T-bet和GATA结合蛋白3的定量表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:急性排斥反应的发病机制主要是T细胞介导的免疫应答,Th1,Th2细胞及其分泌的细胞因子互相调节、交叉作用在其中起重要作用。研究表明,原始Th细胞向Th1或Th2细胞分化受转录因子T—bet和GATA结合蛋白3的表达所调控。 目的:在前期实验基础上,应用实时荧光定量聚合酶链反应法测定大鼠移植肺组织中转录因子T-bet和GATA结合蛋白3的mRNA表达,初步分析转录因子T-bet和GATA结合蛋白3在肺移植急性排斥反应中的作用及其意义。设计、时间及地点:单一样本观察的随机对照动物实验,于2003-08/2008-04在瑞士苏黎世大学医院胸外科实验室和深圳市人民医院临床研究中心完成。 材料:纳入LBNFI大鼠10只和Lewis大鼠30只,以建立大鼠左侧原位肺移植模型。方法:将大鼠按随机数字表法分为5组,以肺移植后3,5d作为观察急性排斥反应的时间点:①空白对照组(n=5):取正常Lewis大鼠左肺组织。②冷缺血对照组(n=5):冷低钾右旋糖酐液灌注后取Lewis大鼠右侧肺组织。③同系移植组(n=5):Lewis-Lewis大鼠肺移植后5d,取移植左肺组织。④同种异体移植3d组(n=4):LBNF1-Lewis大鼠肺移植后3d,取移植左肺组织。⑤同种异体移植5d组(n=6):LBNF1-Lewis大鼠肺移植后5d,取移植左肺组织。 主要观察指标:应用实时荧光聚合酶链反应法,定量检测各组大鼠肺组织中转录因子T—bet和GATA结合蛋白3的表达。 结果:①T—bet在同种异体移植5d组中的表达有所增高,但与其他各组间差异均无显著性意义(P〉0.05)。②GATA结合蛋白3在同种异体移植5d组中的表达水平低于空白对照组、冷缺血对照组及同系移植组(P〈0.05)。③同种异体移植5d组中T-bet/GATA结合蛋白3比值高于其他各组(P〈0.05),其他各组间差异均无显著性意义(P〉0.05)。 结论:移植肺组织中GATA结合蛋白3比T-bet的改变更敏感.起主导作用;T—bet/GATA结合蛋白3比值可作为评价肺移植急性排斥反应的客观指标之一。
  • 不同器官保存液对停搏供心的保护 免费阅读 下载全文
  • 背景:有研究已经证实应用人停搏供心进行心脏移植可以取得与非停搏供心移植相同的效果,但如何对停搏供心进行处理使之达到或接近非停搏供心移植的效果是一个新的课题。 目的:采用新西兰大白兔离体停搏供心模型,探讨3种不同的器官保存液Celsior液、Pioacidile液和UW液对停搏供心的保护效果。 设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005—03/2006—04在中南大学湘雅二医院胸心外科实验室心功能室完成。材料:选用新西兰大白兔24只,随机分成3组:UW液灌注组、Celsior液灌注组、Pinacidil液灌注组。 方法:制作免离体停搏供心的模型,当心热缺血10min后,分别应用4℃的UW液、Celsior液、Pinacidil液经主动脉根部冠状动脉开口灌注后4℃保存。4h后取出免心固定在Langendorff灌流装置上复灌。 主要观察指标:复灌后30,60,90,120min兔心脏血流动力学、2h内平均冠状动脉流量、心肌含水量及丙二醛含量。 结果:复灌后120min Pinacidil灌注组左室发展压、左室内压最大上升速率、左室内压最大下降速率均优于其余两组(P〈0.05)。UW液灌注组复灌后120min心率高于另两组(P〈0.05)。Pinacidile液灌注组和Celsior液灌注组心肌中含水量少于UW液灌注组,UW液灌注组心肌丙二醛含量高于Celsior液和Pinacidile液灌注组。复灌后120min内Pinacidile液灌注组心肌平均冠状动脉流量大于Celsior液和UW液灌注组。 结论:Pinacidil液对停搏供心的保护优于UW液和Celsior液,表现为左室心功能及冠状动脉流量恢复得更好。
  • 肾移植后药物性IV度骨髓抑制的转归 免费阅读 下载全文
  • 背景:肾移植后由于免疫抑制剂的使用对于骨髓抑制的机会增多,但是重度的骨髓抑制还是比较少见。 目的:对肾移植后药物引起的IV度骨髓抑制进行分析,总结其治疗及转归。 设计、时间及地点:病例分析,于2005—01/2007-01在广西中医学院附属瑞康医院移植泌尿外科完成。 对象:广西中医学院附属瑞康医院移植泌尿外科同种异体肾移植后发生IV度骨髓抑制患者4例,男2例,年龄分别为50,56岁;女2例,年龄分别为56,29岁。4例患者均有不同程度的感染。 方法:经过减少或者停用免疫抑制剂及能够产生骨髓抑制药物的使用;使用环孢素+霉酚酸脂+强的松三联免疫抑制剂,使用粒细胞集落刺激因子7-9d。移植后使用头孢第3代头孢菌素抗生素1周。 主要观察指标:每日检测血常规变化。结果:粒细胞减少的治疗可以在7d左右时间恢复;血小板的恢复的时间大约需要2周左右;对于血红蛋白的影响不大。4例患者感染在10~14d得到控制。 结论:肾移植后的药物性骨髓抑制可以经过对症支持治疗后痊愈。
  • 肾移植前后肺通气、弥散功能及肺部影像学变化 免费阅读 下载全文
  • 背景:慢性肾功能衰竭患者由于内环境的紊乱及免疫功能的低下,易受体内外致病因素的影响而发生心、肺病变。肾移植后传统非特异性免疫抑制剂的联合应用,成为肺损伤发生的高危因素。 目的:随访观察肾移植患者移植前后肺功能检测指标及肺部影像学的动态变化。设计、时间及地点:病例自身对照观察,于2003—02/2006—05在解放军北京空军总医院呼吸科及泌尿外科完成。 对象:纳入52例终末期肾病患者,均在解放军北京空军总医院接受肾移植手术。方法:分别于肾移植前、移植后3,6,12个月随访观察52例患者的自身肺功能变化,同期观察其肺部影像学变化。主要观察指标:肾移植患者肾移植前后肺通气功能、弥散功能及肺部影像学变化。 结果:①肾移植前,肺功能异常者占79%,其中多以阻塞性通气功能障碍和弥散功能下降为突出表现。②移植后3个月,患者的弥散功能和阻塞性通气功能障碍有部分好转,但肺限制性通气功能障碍比移植前突出。③移植后6,12个月,近一半的患者肺功能趋于稳定在正常范围之内。④移植前肺功能和弥散功能的损害较肺部影像学明显,前者发生率为79%,后者为54%。肾移植后,肺部影像学明显改善,且以肺部间质性改变为主要表现。 结论:肾移植能显著改善终末期肾病患者的肺功能,尤其是小气道功能和弥散功能。肾移植前后肺部影像学的异常主要表现为程度不同的肺间质性改变。
  • 肾移植后早期血清脂质紊乱与免疫抑制剂的关系 免费阅读 下载全文
  • 背景:肾移植后早期约有2/3以上患者伴有高脂血症,其是慢性移植肾病以及移植后肾失功的重要危险因素。 目的:分析肾移植后早期患者血清脂质紊乱的特点。 设计、时间及地点:病例-对照观察,于2004-05/2006-05在郑州大学第一附属医院完成。 对象:选择肾移植后患者84例,另外选择同期门诊健康体检者49例作为对照。 方法:84例肾移植患者根据志愿原则和经济条件选择不同免疫抑制剂治疗方案。环孢素A组53例,他克莫司组31例。根据环孢素A组患者服药期间平均环孢素A峰浓度分组,将环孢素A峰浓度≥852.611μg/L设定为高环孢素A峰浓度组(n=22),〈852.61μg/L为低环孢素A峰浓度组(n=31)。 主要观察指标:分别于肾移植前和移植后3,6,12个月检测患者各项血清脂质指标水平,并与同期健康体检者进行对比。 结果:①肾移植组移植后多数时间血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇指标明显高于移植前和对照组(P〈0.05-0.01),高密度脂蛋白胆固醇则明显低于移植前和对照组(P〈0.05—0.01)。②环孢素A组移植后大部分时间血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显高于移植前和他克莫司组(P〈0.05~0.01),高密度脂蛋白胆固醇则明显低于移植前和他克莫司组(P〈0.05~0.01)。③高环孢素A峰浓度组移植后大部分时间血清总胆固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇水平均明显商于移植前和低环孢素A峰浓度组(P〈0.05~0.01),高密度脂蛋白胆固醇则明显低于移植前和低环孢素A峰浓度组(P均〈0.05-0.01)。 结论:肾移植后早期患者存在着明确的血清脂质紊乱.与使用环孢素A类免疫抑制药物及其血药峰浓度密切相关。
  • 雄性受体大鼠同种肾移植慢性排斥反应中性激素、性别、雄激素受体拮抗剂的作用 免费阅读 下载全文
  • 背景:在肾移植慢性排斥中,性别、受体体内的激素水平以及雄性激素受体等因素可能对慢性排斥的发生起到一定作用。 目的:观察性激素、雄激素受体拮抗剂及性别对雄性受体大鼠移植肾慢性排斥反应的影响。 设计、时间及地点:观察对照动物实验,于2005—06/2007—06在中山大学动物实验中心完成。 材料:以80只雄性Lewis大鼠为受者,雌性和雄性Fisher大鼠各40只作为供者,建立大鼠同种肾移植慢性排斥反应动物模型。 方法:根据干预药物以及供体性别不同,将大鼠分为8组(n=10),分别为雄性供体对照组、雄性供体睾酮组、雄性供体雌二醇组、雄性供体氟他胺组及雌性供体对照组、雌性供体睾酮组、雌性供体雌二醇组、雌性供体氟他胺组。其中干预药物剂量分别为雌二醇0.025mg/kg、睾酮0.5mg/kg、氟他胺25mg/kg,2个阴性对照组未服用药物,喂养期为20周。 主要观察指标:移植后每4周检测受体大鼠的24h尿蛋白、血肌酐及肌酐清除率;移植后20周处死受体大鼠,对移植肾进行显微镜检、免疫组化、核糖核酸酶保护测定。 结果:①与阴性对照组相比,不论雄性还是雌性供体大鼠的24h尿蛋白水平在睾酮组均升高(P〈0.05),在雌二醇、氟他胺组均降低(P〈0.05):血肌酐水平、肌酐清除率、平均动脉压各组差异无显著性意义(P〉0.05)。②不同性别的供体以及不同药物对移植肾组织血管内膜增厚、肾小球硬化和间质纤维化程度以及单核巨噬细胞浸润、转化生长因子β mRNA表达程度均有一定影响。③雌性供体组的肾损伤大于雄性供体组。睾酮可以加重肾功能损伤,雌二醇、氟他胺可以减少肾功能损伤。 结论:在大鼠同种肾移植慢性排斥动物模型上,供者的性别对移植肾的功能和组织形态具有明显的影响。睾酮可以加重慢性排斥反应的发生,雌二醇、氟他胺可以明显抑制慢性排斥反应的发生。
  • 异种脱细胞真皮基质膜修复全层皮肤损伤的疗效和安全性分析——多中心、随机、对照试验 免费阅读 下载全文
  • 背景:目前,国内尚无批准上市的植入性异种真皮基质。 目的:评价异种脱细胞真皮基质修复真皮组织缺损创面的疗效和安全性。 设计、时间及地点:多中心、随机、空白自身对照。选择2006—03/2007—07来自上海交通大学附属瑞金医院灼伤整形科、解放军第四军医大学西京医院烧伤科、解放军兰州军区兰州总医院烧伤整形科3个研究中心72例患者。 对象:72例真皮层缺损患者,男61例,女11例,其中火焰烧伤35例、电击伤11例、化学烧伤4例、烫伤9例、整形美容1例、其他12例。平均年龄(35.6±10.7)岁,修复的缺损面积平均(59.2±33.8)cm^2。采用随机数字表法创面分为试验区或对照区,各72个创面。脱细胞真皮基质由烟台正海生物技术有限公司生产并提供。 方法:试验区进行脱细胞真皮基质及自体薄皮片复合移植;对照区单纯自体薄皮片移植。主要观察指标:试验区、对照区复合移植成活率及移植后3、6个月瘢痕增生情况。 结果;移植后4周,试验区植皮成活率为(98.4±11.8)%;对照区植皮成活率为(99.2±5.9)%。两者疗效差异无显著性(P=0.992)。随访病例移植后3,6个月温哥华瘢痕评分中,试验区各项评分及总分均显著低于对照区(P〈0.05,P〈0.01)。移植后6个月试验区各项评分及总分均显著低于3个月时(P〈0.05),移植后6个月对照区色泽、色素评分及总分均显著低于3个月时(P〈0.05)。试验过程中未见与材料有关的实验室检查异常及其他不良反应。 结论,该异种脱细胞真皮基质可作为安全的真皮替代物,与自体薄皮片复合移植后有利于真皮组织缺损的修复,减轻创面愈合后瘢痕增生。
  • 自体微粒头皮与第二层头皮微粒混合移植修复特重度烧伤创面 免费阅读 下载全文
  • 背景:以往治疗大面积深度烧伤患者,常采用带有表皮的正常头皮微粒+异体(异种)皮混合移植。由于患者自身皮源缺乏,手术次数多,创面暴露时间长,死亡率高。 目的:观察自体微粒头皮与第2层微粒头皮混合移植治疗特重度烧伤患者的效果,并与常规微粒头皮移植进行对比。 设计、时间及地点:观察对照实验,于2005—01/2008-01在唐山钢铁公司医院烧伤科、唐山工人医院烧伤科、山西省烧伤救治中心、唐山路北红十字医院、唐山二五五医院烧伤科及唐山市第三医院烧伤科完成。 对象:选取特重烧伤患者102例,平均烧伤面积为体表总面积的(60.55±3.21)%,Ⅲ度烧伤面积为体表总面积的(51.74±2.98)%,手术面积为体表总面积的(52.19±5.44)%。 方法:采用自身对照的方法,每例患者选取较为对称、创面性质相同的2处Ⅲ度烧伤切痂创面进行对照。实验组行带表皮的正常自体微粒头皮与缺表皮的第2层自体微粒头皮混合移植;对照组移植常规微粒头皮。自头部取下的皮片面积与受皮区面积之比均为1:10~1:15。 主要观察指标:应用网格计数法统计头皮移植后第3,4,5周末两组的创面愈合率。 结果:移植后第3,4,5周末两组创面愈合率基本相近(P均〉0.05)。结论:自体微粒头皮与第2层微粒头皮混合移植是一种治疗特重度烧伤的有效方法,可使头部供皮增加2倍,缓解了特重度烧伤患者自体皮源匮乏的困难,与传统正常头皮微粒移植相比创面愈合率无明显差异。
  • 猪源性膀胱无细胞基质在异种移植中的生物安全性 免费阅读 下载全文
  • 背景:猪异种移植过程中可能发生猪内源性反转录病毒跨种间传播的潜在危险,由此所带来的异种移植生物安全性问题逐渐受到关注。 目的:观察去细胞过程对猪膀胱内源性反转录病毒的影响,以评价猪源性膀胱无细胞基质生物工程材料在异种移植中的生物安全性。 设计、时间及地点:基因工程与组织工程动物体内实验,于2006—07/2007—03在中国医学科学院北京协和医院中心实验室完成。 材料:正常健康雄性杂种犬8只,随机分为对照组2只,修补组6只,用于膀胱修补替代实验。取材0.5h内的猪新鲜膀胱标本采集自屠宰厂。 方法:采用低渗-去污剂洗涤-核酸酶消化法对新鲜猪膀胱进行脱细胞处理,制备膀胱无细胞基质移植物。对照组犬切除50%膀胱后原位直接缝合,不使用任何材料修补;修补组犬切除50%膀胱后,分别用面积约为原膀胱30%,40%,50%的膀胱无细胞基质移植物进行替代修补。分别于移植前及移植后1个月抽取犬静脉血提取RNA和DNA,以猪Beta-actin序列片段扩增产物作为内参照,针对内源性反转录病毒gag区序列,选用特异性引物,采用PCR和RT-PCR法检测上述提取的DNA和RNA是否存在内源性反转录病毒序列片段,并对扩增产物进行测序用于同源性分析。 主要观察指标:苏木精-伊红染色观察猪膀胱去细胞效果及DNA含量。PCR及RT-PCR扩增及测序结果。 结果:经去细胞处理后,猪膀胱内的细胞成分完全去除,三维纤维支架保持完整,DNA含量低于1%。新鲜猪膀胱PCR和RT-PCR均检测到362bp扩增条带,与Medline公布的内源性反转录病毒有94%的同源性;所制备的生物工程材料膀胱无细胞基质移植物、及其移植前后的犬外周血样本均未检测到内源性反转录病毒序列的表达。 结论:低渗-去污剂洗涤-核酸酶消化法制备的膀胱无细胞基质移植物可以去除猪膀胱内源性反转录病毒,能够有效预防内源性反转录病毒在物种间的交叉感染,具有良好的生物安全性,可作为生物工程材料进行异种移植相关实验。
  • 大鼠SV40LT抗原基因转染的肝细胞脾内移植后早期组织形态学和超微结构改变 免费阅读 下载全文
  • 背景:基础研究表明,肝细胞移植可以改善急性肝功能衰竭动物的生化参数及提高生存率。但其广泛应用于临床之前,还有细胞来源和免疫排斥、移植肝细胞在受体中的分布、形态结构变化等方面的问题需要解决。 目的:观察大鼠脾内移植SV40LT抗原基因转染肝细胞的早期组织形态学和超微结构特点。 设计、时间及地点:随机对照动物实验,细胞病理学观察,于2001-03/12在卫生部肝胆肠外科研究中心实验室完成。 材料:选用Wistar大鼠60只,制作脾内肝细胞移植模型。方法:将60只大鼠按随机数字表法分4组,每组15只。原代组、原代+环孢素A组脾内注射原代肝细胞;SV40LT抗原基因组、SV40LT抗原基因+环孢素A组脾内注射SV40TL抗原基因转染的肝细胞。移植前24h至术后14d,原代组、SV40LT抗原基因组每天经尾静脉注入0.5mL生理盐水:原代+环孢素A组、SV40LT抗原基因+环孢素A组每天经尾静脉注入环孢素A10mg/(kg·d)。 主要观察指标:术后每天每组取1只大鼠,取脾脏行光镜及电镜检查,观察移植肝细胞的存活率、组织形态学和超微结构特点,共观察14d。 结果:①与原代组、SV40LT抗原基因组比较,原代+环孢素A组和SV40LT抗原基因+环孢素A组移植肝细胞的组织形态学及超微结构改变较小,移植肝细胞的存活数增高(P〈0.05)。②SV40LT抗原基因+环孢素A组、原代+环孢素A组移植肝细胞的存活率在术后1~7d差异无显著性意义(P〉0.05);术后8~14d,SV40LT抗原基因+环孢素A组肝细胞存活率高于原代+环孢素A组(P〈0.01)。 结论:SV40LT抗原基因转染的肝细胞脾内移植后,在使用免疫抑制剂的情况下能长时间保持较高的存活细胞数,维持完整的组织形态学结构。
  • 转化生长因子β1基因型与移植肾的慢性排斥反应 免费阅读 下载全文
  • 背景:免疫损伤是慢性排斥反应的主要发病机制,与多种免疫相关基因多态性有关,尤其是转化生长因子β1基因多态性更显重要。目前关于转化生长因子β1基因多态性与移植肾慢性排斥反应的关系,不同的学者研究结果各异。 目的:分析供、受者转化生长因子β1基因型与移植肾慢性排斥反应的关系。 设计:前瞻性病例分析。 单位:解放军南京军区福州总医院泌尿外科,全军器官移植中心。 对象:选择2000-06/2001-05在解放军南京军区福州总医院首次施行尸肾移植的受者144例和其中114例的供者65例(另30例缺乏供者血液标本)。手术方案得到医院伦理道德委员会批准。 方法:用序列特异引物聚合酶链反应方法,在肾移植前对肾移植受者(n=144)和其中114例的供者(n=65)进行转化生长因子β1基因型检测。术后对受者进行5年随访,追踪移植肾慢性排斥反应发生情况,分析受者基因型、供者基因型及供、受者基因型组合对移植肾功能的影响。 主要观察指标:①转化生长因子β1不同基因型的肾移植供、受者慢性排斥反应的发生率。②肾移植供、受者转化生长因子β1不同基因型组合慢性排斥反应的发生率。 结果:①高分泌基因型组受者的慢性排斥反应发生率高于中低分泌基因型组(x^2=10.091,P〈0.01);两组移植肾慢性排斥反应发生率差异无显著性意义(x^2=0.002,P〉0.05)。②供、受者均为高分泌基因型组合的受者移植肾慢性排斥反应发生率高于所有其他基因型组合者(x^2=4.352,P〈0.05);供、受者均为中低分泌基因型的受者慢性排斥反应发生率低于所有其他基因型组合者(x^2=4.134,P〈0.05)。 结论:肾移植术前同时检测移植供、受者转化生长因子β1基因多态性,有助于术前准确预测和评价移植后远期效果,指导术前做出合理的供、受者匹配。
  • 非体外循环与常规体外循环下冠状动脉旁路移植术后肝肾功能的变化 免费阅读 下载全文
  • 背景:非体外循环冠状动脉旁路移植逐渐取代传统的体外循环下冠状动脉旁路移植而成为冠心病外科治疗的发展方向,但两种手术方式对肝肾功能的影响仍有待观察。 目的:分析非体外循环下冠状动脉旁路移植术和体外循环下冠状动脉旁路移植术后肝肾功能的变化规律。 设计、时间及地点:对比观察实验,于2005-06/11在解放军总医院心血管外科完成。 对象:选择2005-06/2005-11在解放军总医院心血管外科50例进行择期冠状动脉旁路移植手术患者,所有患者术前肝肾功能均正常,无严重急性肝、肾功能不全。 方法:根据患者意愿及病情匹配原则将所有患者分为非体外循环下冠状动脉旁路移植术组(30例)和体外循环下冠状动脉旁路移植术组(20例),分别行非体外循环下冠状动脉旁路移植术和体外循环下冠状动脉旁路移植术。两组患者在年龄、性别、体质量指数、术前射血分数、术前肝肾功能及手术危险因素等方面无明显差异(P〉0.05)。 主要观察指标:两组患者分别于术前及术后1d,1及2周抽血测定血丙氨酸氨基转移酶,天冬氨酸转氨酶,尿素氮及肌酐值评价患者肝肾功能。 结果:纳入患者50例患者均进入结果分析。①肝功能变化:非体外循环下冠状动脉旁路移植术组患者术后第1天血丙氨酸氨基转移酶及天冬氨酸转氨酶明显低于体外循环下冠状动脉旁路移植术组,差异比较有显著性意义(P〈0.05),两组患者血丙氨酸氨基转移酶及天冬氨酸转氨酶水平于术后2周内恢复至术前正常水平。②肾功能变化:非体外循环下冠状动脉旁路移植术组患者术后第1天血尿素氮及肌酐值明显低于体外循环下冠状动脉旁路移植术组,差异比较有显著性意义(P〈0.05),两组患者血尿素氮及肌酐值于术后2周内恢复至术前正常水平。 结论:冠状动脉旁路移植术对肝肾功能均有一定的损害,但在术后早期均可恢复;非体外循环冠状动脉旁路移植较之体外循环冠状动脉旁路移植对肝肾功能的不利影响更小,在一定程度上保护了肝肾功能。
  • 对比增强超声心动图对拟肝移植患者肺内分流的评估价值 免费阅读 下载全文
  • 背景:晚期肝病患者的肺内血管异常可以导致肺内右向左分流及严重低氧血症,目前国内对筛查肺内血管扩张尚缺乏一种简便、敏感、有效的方法。 目的:评估对比增强超声心动图对晚期肝病肺内分流的临床诊断价值。 设计、时间及地点:前瞻性病例对比观察,于2004-02/2006-02在解放军第四五八医院肝病中心完成。 对象:解放军第四五八医院肝病中心收治的男性拟行肝移植的晚期肝病患者24例。 方法:在无任何血管扩张药治疗情况下例行常规检查。采用对比增强超声心动图筛查晚期肝病患者肺内右向左分流的发生率,并根据左心室微泡的显示程度半定量分析记录为1^+~3^+。将患者分为经超声心动图证实有肺内分流组和无肺内分流组。 主要观察指标:拟行肝移植的晚期肝病患者肺内右向左分流的发生率及临床特点。结果:①24例患者中10例(41.7%)经对比增强超声心动图证实肺内右向左分流,左心室显影异常程度1^+~2^+,其中6例1^+,4例2^+,出现在右心室显影后6~10余个心动周期。②两组患者的年龄、性别、动脉血气分析指标、肝功能指标差异无显著性意义(P〉0.05)。③经超声心动图证实肺内分流组患者的上消化道出血发生率、门脉高压指征脾脏厚度及右心功能参数肺动脉收缩压、Tei指数均高于无肺内分流组(P〈0.05~0.01)。 结论:晚期肝病合并肺内分流而无低氧血症时肺血管扩张比较常见,对比增强超声心动图为诊断肺内血管扩张提供了一种敏感、非创伤的早期检查手段。门脉高压症是发生肺内血管扩张的主要因素,右心室Tei指数可作为评估肺内血管扩张患者右心功能的重要参数。
  • 白细胞介素10修饰树突状细胞在异基因肝肾联合移植大鼠体内迁移及免疫保护 免费阅读 下载全文
  • 背景:供体抗原递呈细胞迁移至受体,可能诱导受体T细胞对供体产生免疫耐受,导致移植物最终被接受。利用白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)对供体树突状细胞进行修饰,使其保持在所需的分化状态,对提高肝肾联合移植的肾脏保护作用是一种有效策略。 目的:观察经IL-10修饰的树突状细胞在肝肾联合移植大鼠体内的迁移情况,探讨其免疫保护的诱导作用。 设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2004-06/2006-02在中山大学医学院完成。 材料:清洁级成年DA雄性供鼠、Lewis雌性受鼠各60只。受鼠随机分为3组:IL-10修饰细胞组、单纯细胞组、模型对照组,20只/组。 方法:采用肝、肾联合法切取供体鼠的肝、肾,各组受体鼠均施行原位肝移植和原位左肾移植,建立肝肾联合移植免疫排斥模型。无菌状态下分离供体鼠的股骨和胫骨,用DMEM培养基冲出骨髓.去除红细胞后贴壁法分离培养树突状细胞,加入终浓度20μg/L的IL-10修饰72h,经阴茎背静脉输入IL-10修饰细胞组大鼠体内,2×10^7个细胞/只:单纯细胞组同法输入等量树突状细胞:模型对照组不给予任何干预措施。 主要观察指标:肝肾联合移植后大鼠的生命体征、尿量及肝肾功能等指标的变化,病理组织学检测结果,原位杂交检测供体树突状细胞在受体鼠体内的分布。结果:单纯细胞组、模型对照组在移植后5~6d尿量均减至0mL,均呈重度急性排斥反应。IL-10修饰细胞组移植后2周内尿量维持在6-12mL,肝肾移植的急性排斥反应受到明显抑制,平均存活时间为(20.0±2.6)d,明最长于单纯细胞组、模型对照组,LogRank法检验P〈0.05。受体肠系膜淋巴结等组织内有较多Y染色体标记的树突状细胞迁入。结论:IL-10修饰的树突状细胞可以对联合移植的肝肾起到免疫保护作用;供体的成熟前期树突状细胞迁移到受体组织内,能够抑制肝肾联合移植急性排斥反应,并延长肝、肾移植物和受体大鼠的存活时间。
  • 肝移植术后肺部感染的防治 免费阅读 下载全文
  • 背景:由于终末期肝病、肝移植手术本身所带来的复杂病理生理变化以及抗生素滥用导致肝移植后肺部感染新的耐药菌株不断出现。 目的:收集6例肝移植患者的临床资料,分析其肝移植后肺部感染的防治措施。 设计、时间及地点:回顾性病例分析,于200401/12在广州市第一人民医院肝胆外科完成。 对象:选择广州市第一人民医院收治的6例肝移植患者,均行择期同种异体全肝移 植,5例行改良背驮式原位肝移植,1例行经典式原位肝移植。 方法:回顾性分析6例肝移植患者的临床资料。移植后给予基础消毒隔离、感染防护措施;收集病原学资料;移植后早期每日行胸部X射线片了解肺部情况;吸痰时严格无菌操作,保持胃肠减压引流通畅,防止误吸;移植后即开始针对包括细菌、真菌、病毒在内的预防性抗感染治疗。 主要观察指标:观察6例患者肝移植后肺部感染发生情况及治疗转归。结果:6例患者中4例于移植后第4~11天发生肺部感染,1例于移植后第1天即出现肺部感染。其中1例并发呼吸衰竭死亡:其余5例患者经过规范抗感染、呼吸治疗、气道排痰及营养支持,肺部感染治愈。 结论:使用有效抗生素、吸痰时无菌操作和通畅呼吸道引流是防治肝移植后肺部感染的重要措施。
  • 腓肠神经营养皮瓣移植修复足踝软组织缺损中小隐静脉干的处理 免费阅读 下载全文
  • 背景:在临床上应用和报道中小隐静脉在皮瓣中所起的作用及血管近端蒂如何处理意见不尽一致。 目的:应用腓肠神经营养血管皮瓣逆行转移修复足背、足跟及踝部软组织缺损,观察分析不同方式处理小隐静脉对皮瓣成活的影响。 设计、时间及地点:病例对比观察,于1998-03/2007-04在解放军广州军区广州总医院完成。 对象:将56例足背、足跟及踝部软组织缺损的患者按手术方式分为2组,结扎小隐静脉近端蒂皮瓣组38例,小隐静脉近端与受区大隐静脉或其属支吻合组18例。 方法:应用腓肠神经营养血管皮瓣逆行移植修复时,皮瓣切取面积为3.5cm×4.0cm~4.0cm×4.5cm的病例35例:皮瓣切取面积为4.0cm×4.5cm~10.0cm×12.0cm的病例21例。 主要观察指标:不同切取面积及移植方式的皮瓣成活效果。结果:①皮瓣切取面积为(4.0×4.5)cm~(10.0×12.0)cm时,移植后未出现静脉危象;皮瓣切取面积为(3.5×4.0)cm~(4.0×4.5)cm时,结扎小隐静脉近端的患者中5例出现术后静脉危象。②在皮瓣切取面积为(3.5×40)cm~(4.0×4.5)cm时,移植后小隐静脉近端与受区大隐静脉或其属支吻合皮瓣出现坏死的概率低于结扎小隐静脉近端蒂皮瓣(P=0.01767)。 结论:切取皮瓣面积小于(4.0×4.5)cm时,应将小隐静脉近端与受区大隐静脉或其属支吻合。小隐静脉在皮瓣中并非过路浅静脉,对皮瓣有营养作用。
  • 胚胎干细胞源性肝样细胞移植治疗急性肝功能衰竭模型小鼠 免费阅读 下载全文
  • 背景:采用胚胎干细胞源性肝样细胞进行移植治疗时,诱导分化的肝样细胞致瘤性及其对肝脏生化代谢的影响有待观察。 目的:评价胚胎干细胞源性肝样细胞移植对急性肝功能衰竭模型小鼠的治疗效果。 设计:随机对照观察。单位:中山大学附属第一医院。材料:实验于2005-01/2006-02在中山大学附属第一医院中心实验室完成。选用转染绿色荧光蛋白基因的小鼠D3-ES细胞(129系小鼠分离建系),由中山大学眼科中心黄冰教授馈赠。选用40只清洁级6周龄D3-129系小鼠,雌雄不限,由中山大学实验动物中心提供,许可证号码为SCXK(粤)2004-0011,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标 准。转化生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、肝细胞生长因子为美国Gibco BRL公司产品。 方法:①利用转化生长因子、成纤维细胞生长因子和肝细胞生长因子联合诱导小鼠D3-ES细胞分化为肝样细胞,将细胞悬液以2.0×10^6/只注入20只小鼠肝包膜下,其余20只小鼠作为对照组,仅给予生理盐水注射。②注射后24h,采用5μL/20g四氯化碳腹腔注射,诱发两组小鼠急性肝功能衰竭,观察小鼠生存质量及平均生存时间;急性肝功能衰竭24h,取小鼠后腔静脉血进行总胆红素、谷丙转氨酶、白蛋白、血糖、凝血酶原时间等肝功能指标检测;小鼠死亡后取肝脏标本,观察有无肿瘤生成,应用苏木精伊红染色和免疫组化观察移植细胞生长和白蛋白表达情况。 主要观察指标:①小鼠生存质量及平均生存时间。②肝功能指标检测结果。③移植细胞体内生长及肿瘤形成情况。 结果:①小鼠生存质量及平均生存时间:诱发急性急性肝功能衰竭后,对照组先出现共济失调等中枢神经系统症状,对照组14只及移植组8只出现腹水。对照组平均存活时间短于移植组,差异有统计学意义(23,62h,P〈0.05)。②小鼠肝功能指标检测结果:对照组及移植组总胆红素及谷丙转氨酶较造模
  • 内皮型一氧化氮合酶基因转染对移植人工血管内膜增生的作用 免费阅读 下载全文
  • 背景:平滑肌细胞增殖移行和血小板激活导致血栓形成是移植皿管再狭窄的主要原因,一氧化氮可以抑制上述生物反应,但内皮型一氧化氮合酶基因转染是否可以抑制种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生还未得到证实。 目的:拟进一步观察内皮型一氧化氮合酶基因转染对种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生的影响。 设计、时间及地点:重复观察测量,于2006-04/2007-05在西安交通大学医学院中心实验室及分子生物学实验室完成。 材料:1月龄新西兰大白兔1只,用来获取平滑肌细胞。成年新西兰大白兔18只.随机分成3组,正常对照组植入未转染的人工血管.LacZ转染组植入种植转染lacZ的平滑肌细胞的人工血管,内皮型一氧化氮合酶转染组植入种植内皮型一氧化氮合酶的平滑肌细胞的人工血管。6只/组。 方法:构建含有报道基因lacZ和内皮型一氧化氮合酶基因的假型反转录病毒载体小鼠白血病病毒/疱疹性口炎病毒G糖蛋白,并转染平滑肌细胞。将转染了基因的细胞种植在人工血管上,并用血管旁路移植的方法植入兔腹主动脉。 主要观察指标:瓜氨酸法检测细胞培养上清中一氧化氮含量。移植血管内膜X-gal染色观察,种植的平滑肌细胞为蓝色,而内源性细胞为红色。显微镜下测量血管内膜增生厚度。 结果:18只兔均进入结果分析。内皮型一氧化氮合酶转染组一氧化氮含量明显高于正常对照组(P〈0.05)。转染lacZ基因的平滑肌细胞经X-gal染色呈蓝色。血管平滑肌细胞植入30d,各组内膜厚度基本相似(P〉0.05):植入100d.正常对照组与内皮型一氧化氮合酶转染组内膜厚度基本相似(P〉0.05),两组明显均低于lacZ转染组(P〈0.05)。 结论:内皮型一氧化氮合酶基因转染可抑制种植平滑肌细胞的人工血管内膜增生。
  • 靶向CD40小RNA干扰抑制大鼠异体肢体移植急性排斥反应后细胞凋亡及P53,P21,Bcl-2,Bax的表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:对于CD40通路的研究以往多集中在器官移植,涉及异体肢体方面的报道较少。 目的:探讨靶向CD40的小分子RNA干扰对大鼠异体肢体移植急性排斥反应、细胞凋亡的影响,检测CD40通路阻滞后相关基因的表达变化。 设计、时间及地点:细胞基因工程体内实验,于2007—09/2008—02在哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室完成。 材料:清洁级10~12周龄雄性Wistar受鼠、SD供鼠各27只,行同种异体右后肢移植。真核表达质粒pSilencer4.1-CMV neo为Ambion公司产品。pSilencer4.1-CD40shRNA重组质粒由哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室保存。梭华-Sofastr^TM in vivo体内转染试剂为厦门太阳马生物工程有限公司产品。 方法:27只Wistar受鼠异体肢体移植完成后随机分为3组,9只/组。干扰组经阴茎背静脉注入梭华-Sofast(15 μL)-siCD40—2/pSilencer(100μg)载体复合物600μL,空载体组等量注入梭华-Sofast(15μL)-pSilencer4.1-CMV neo(100μg)空载体复合物,对照组等量注入生理盐水,连续注射6d,1次/d。 主要观察指标:观察移植物排斥反应征象及移植肢体存活时间,检测细胞凋亡情况,免疫组织化学染色检测p53,p21,Bcl-2,Bax的表达。 结果:干扰组未见排斥反应征象,且移植物发牛排斥反应的时间及存活时间均显著长于空载体组、对照组(t=3.137~3.519,P〈0.01);空载体组、对照组于移植后近期发生排斥反应。干扰组移植后第1,3,5,7天细胞凋亡指数均明显低于空载体组、对照组(t=3.636-4.786,P〈0.01)。干扰组移植后各时间点P53,P21,Bax的表达均明显低于空载体组、对照组(t=3.586-4.531,P〈0.01);Bcl-2的表达均明显高于空载体组、对照组(t=3.664—4.644,P〈0.01)。 结论:在不应用免疫抑制剂的情况下,靶向CD40的小分子RNA干扰可以减轻大鼠异体肢体移植后的急性排斥损伤,抑制细胞凋亡,可能与其对p53,p21,bcl-2,bax基因的调节密切相关。
  • 局部注射转化生长因子β1质粒与坐骨神经移植后免疫排斥反应的量效关系 免费阅读 下载全文
  • 背景:研究表明,转化生长因子β1被应用于周围神经移植来抑制或减弱移植排斥反应,但在某些情况下,转化生长因子又表现出正向免疫调节作用。所以有必要进行量效关系研究获取可靠的数据佐证。 目的:从剂量学上观察局部注射转化生长因子β1质粒与免疫排斥反应的量效关系。 设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007—06/2008-04在哈尔滨医科大学动物实验中心完成。 材料:选用雄性Wistar大鼠20只为供体。清洁级雄性SD大鼠50只为受体,随机分为5组,每组10只:自体神经移植组、空质粒异体神经移植组、低、中、高剂量转化生长因子β1质粒异体神经移植组。pAdTrack—CMV—TGF-β1质粒,pAdEasy—1—Bj51833细胞由华中科技大学同济医学院附属协和医院传染病实验室曾令兰教授惠赠。 方法:于手术显微镜下,从犁状肌下孔0.5cm处整齐剪下长约1cm的坐骨神经,将供体神经桥接于神经缺损处,异体神经移植组转化生长因子β1质粒注射剂量为10,20,40μg/只,空质粒异体神经移植组注射空质粒。 主要观察指标:术后6周进行运动神经传导速度、病理学、混合淋巴细胞培养和轴突计数检查。 结果:高剂量转化生长因子β1质粒异体神经移植组运动神经传导速度、轴突计数与自体神经移植组接近(P〉0.05),并优于低剂量转化生长因子β1质粒异体神经移植组(P〈0.05)。病理学及透射电镜显示,高剂量转化生长因子β1质粒异体神经移植组移植神经段效果接近于新鲜自体神经移植组(P〉0.05),并优于低剂量转化生长因子β1质粒异体神经移植组。高剂量转化生长因子β1质粒异体神经移植组混合淋巴细胞培养、迟发性超敏反应优于低剂量转化生长因子β1质粒异体神经移植组(P〈0.05)。 结论:局部注射转化生长因子β1质粒减轻大鼠同种异体坐骨神经移植后免疫排斥反应的作用,在10~40μg范围内,随剂量的增加而增强。
  • 免疫抑制剂FK506对大鼠移植肢体Bcl-2与Bax mRNA表达及细胞凋亡的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:肢体移植过程中,细胞凋亡是引起移植物丧失功能的主要机制之一,严重时可导致移植失败。假设免疫抑制剂的作用与细胞凋亡有关。 目的:观察免疫抑制剂FK506对大鼠异体肢体移植模型Bcl-2 mRNA,Bax mRNA表达及细胞凋亡的影响。 设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005—06/2006-11在哈尔滨医科大学附属第一医院实验动物中心实验室完成。 材料:清洁级健康雄性SD受鼠及Wistar供鼠各56只。FK506为日本藤泽药品有限公司产品,批号100143G。 方法:将供鼠右后肢自大腿上段离断,肝素盐水冲洗供肢内残血,对受鼠行右后肢原位异体移植建立损伤模型。造模后受体鼠随机分为两组:免疫抑制组注射FK5061mg/(kg·d),对照组不给予任何免疫抑制剂,28只/组。术后1,3,5,7d切取大鼠右后肢包含皮肤、皮下组织、肌肉、股动静脉的组织块待测。 主要观察指标:RT-PCR法检测移植肢体Bcl-2 mRNA、Bax mRNA的表达,应用细胞凋亡原位末端标记技术检测细胞凋亡情况。 结果:56只模型鼠均进入结果分析。FK506注射3,5,7d,免疫抑制组Bcl-2 mRNA的表达量显著高于对照组(t=7.18~21.20,P〈0.01):Bax mRNA表达量显著低于对照组(t=3.35~14.01,P〈0.01或0.05);细胞凋亡指数显著低于对照组(t=7.17-9.42,P〈0.01)。结论:FK506能使移植肢体中Bcl-2 mRNA表达增强,Bax mRNA表达减弱,抑制细胞凋亡的发生。
  • 人白细胞相关免疫球蛋白样受体1/白细胞相关免疫球蛋白样受体2可能配体的生物信息学分析及鉴定 免费阅读 下载全文
  • 背景:通过筛选小鼠反转录病毒cDNA文库和质谱分析的方法鉴定出一种跨膜的胶原XVII是白细胞相关免疫球蛋白样受体1和白细胞相关免疫球蛋白样受体2的配体之一,然而,二者的其他配体尚未得到鉴定。 目的:采用生物信息学法鉴定白细胞相关免疫球蛋白样受体1和白细胞相关免疫球蛋白样受体2(CD305/306)的候选配体分子。 设计、时间及地点:生物信息学预测及生物学方法验证,于2006—03/2007—09在第四军医大学免疫教研室完成。 材料:人WISH和Hela细胞系由第四军医大学免疫教研室冻存。 方法:应用生物信息学方法搜索白细胞相关免疫球蛋白样受体1和白细胞相关免疫球蛋白样受体2序列同源分子,并通过文献检索初步推测白细胞相关免疫球蛋白样受体1和白细胞相关免疫球蛋白样受体2的配体候选分子。最后应用候选分子基因转染K562细胞,并应用白细胞相关免疫球蛋白样受体1-Fc/白细胞相关免疫球蛋白样受体2-Fc融合蛋白进行活细胞荧光染色,流式细胞术分析鉴定候选分子是否与融合蛋白结合。同时,合成两对候选分子的引物,提取高表达白细胞相关免疫球蛋白样受体1和白细胞相关免疫球蛋白样受体2配体分子的细胞系WISH的cDNA,进行巢式PCR,检测WISH中候选分子的表达情况。 主要观察指标:应用人类基因组数据库对白细胞相关免疫球蛋白样受体1和白细胞相关免疫球蛋白样受体2分子氨基酸序列同源性比对结果,流式细胞术分析白细胞相关免疫球蛋白样受体分子是否与可能配体基因转染细胞结合,巢式PCR分析白细胞相关免疫球蛋白样受体配体高表达细胞是否表达可能配体基因。 结果:应用生物信息学方法和文献枪索初步推测白细胞相关免疫球蛋白样受体1和白细胞相关免疫球蛋白样受体2的配体候选分子为人类白细胞抗原G分子。经流式细胞术鉴定,白细胞相关免疫球蛋白样受体1-Fc/白细胞相关免疫球蛋白样受体2-Fc融合蛋白对人类白细胞抗原G基因转染的K562细胞的荧光染色结果为阴性;经巢式PCR鉴定,高表达白细胞相关免疫球蛋白样受体1和白细胞相关免疫球蛋白样受体2配体分子的WISH细胞系中未发现人类白细胞抗原G基因。 结论:人类白细胞抗原G不是白细胞相关免疫球蛋白样受体1和白细胞相关免疫球蛋白样受体2的配体。
  • SV40T抗原荧光真核表达载体构建及在胰岛细胞中的表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:有研究表明小鼠胰岛细胞永生化以后增殖能力明显增强,但功能减弱。然而,小鼠的端粒和人类的端粒有差别,大鼠的端粒与人类的相似。 目的:设计和构建SV40T荧光真核表达载体,导入大鼠胰岛细胞中进行表达鉴定。 设计、时间及地点:细胞观察实验,于2007—10/2008—04在深圳市人民医院中心实验室完成。材料:选用成年雄性SD大鼠2只;pCMV—SV40T质粒:pSC—A质粒:pIRES2-ZsGreen1质粒。 方法:用Not I和Xho I将SV40T片断从pCMV-SV40T质粒上双酶切下来,回收后克隆到载体pSC-A中成为pSC—SV40T,再用Xho I和Sac II将SV40T片断双酶切下来,回收后正向克隆到荧光真核表达载体pIRES2-ZsGreen1中,酶切鉴定重组质粒;用脂质体转染的方法将构建的载体导入原代培养的大鼠胰岛细胞;检测SV40T基因在胰岛细胞中的表达。 主要观察指标:绿色荧光蛋白的表达:SV40T的转录和翻译。结果:①经XhoI和SacII双酶切后,重组质粒被切成5.3 kb和2.4 kb 2个片段,与理论预期长度相符。②pIRES2-ZsGreen1—SV40T重组基因经脂质体法转染,G418筛选,在胰岛细胞内可见绿色荧光,反转录-聚合酶链反应及细胞免疫荧光染色可见SV40T mRNA转录及其蛋白的表达。 结论:实验成功构建了SV40T荧光真核表达载体,并可在大鼠胰岛细胞中表达。
  • 玻璃化法和低温冷冻法保存免股动脉的形态结构及力学性能比较 免费阅读 下载全文
  • 背景:一种有效的保存方法必须能够保存组织的完整结构。 目的:比较玻璃化法和低温冷冻法保存对动脉形态结构和力学性能的影响。 设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2001-09/2004—08在解放军总医院骨科研究所完成。 材料:新西兰兔18只,按随机数字法分为3组:玻璃化法保存组,低温冷冻法保存组,新鲜血管组,每组6只。 方法:切取股动脉标本,置于平衡液中备用。玻璃化法保存组血管在4℃条件下经25%,50%和100%梯度玻璃化溶液浸泡后,直接投入液氮中。低温冷冻法保存组血管由常温状态下,经过0,-20,-70℃梯度降温,平衡60min,直接投入液氮中。样本在液氮中保存14d以上。 主要观察指标:进行大体形态和显微形态观察,以了解保存后动脉形态结构的改变;观察动脉的滞后环和应力松弛,测定其断裂强度。 结果:两种方法均较好地保存了动脉的结构,玻璃化法保存组完整率为91.67%,低温冷冻法保存组完整率为54.17%(P〈0.01);3组动脉均具有滞后环和应力松弛现象,玻璃化法保存组的断裂张力为(2.2863±0.4176)N,低温冷冻法保存组的断裂张力为(1.9510±0.4130)N,新鲜血管组的断裂张力为(2.5435±0.5454)N,3组之间的差别无显著性意义(P〉0.05)。 结论:玻璃化法和低温冷冻法对动脉的形态结构和力学性能无显著影响;玻璃化法保存造成的组织断裂较少,适合大段血管的保存。
  • 牛肠碱性磷酸酶对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用途径 免费阅读 下载全文
  • 背景:肝移植以及广泛的肝叶切除等手术常见的病理过程为肝脏缺血再灌注损伤。研究表明,外源性碱性磷酸酶能通过对内毒素的脱磷酸作用而减轻其毒性作用。 目的:建立大鼠肝缺血再灌注损伤模型,观察牛肠碱性磷酸酶预处理对肝缺血再灌注损伤的保护作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007~04/11在南方医院消化科实验室完成。 材料:选用SD大鼠72只,用于建立大鼠肝缺血再灌注模型。方法:将72只肝缺血再灌注模型大鼠按随机数字表法分为3组(n=24):①假手术组打开腹腔,不阻断肝脏供血。②生理盐水组阻断入肝血流20min,在再灌注前5min从尾静脉注射生理盐水1mL。③牛肠碱性磷酸酶预处理组阻断入肝血流20min,再灌注前5min从尾静脉注射牛肠碱性磷酸酶0、5U/g。 主要观察指标:3组大鼠分别于缺血再灌注后1,3,6,12h各时点分别取6只,分别采用鲎试剂终点显色法检测血清内毒素水平:采用酶联免疫吸附法检测血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素10水平;检测肝组织髓过氧化物酶活性;应用苏木精-伊红染色法观察肝组织病理改变。 结果:①生理盐水组及牛肠碱性磷酸酶预处理组血清内毒素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平及肝组织髓过氧化物酶活性在再灌注后均高于假手术组(P〈0、05)。②肝脏缺血再灌注损伤后不同时点牛肠碱性磷酸酶预处理组血清内毒素、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平及髓过氧化物酶活性均低于生理盐水组(P〈0、05),白细胞介素10水平高于生理盐水组(P〈0、05),肝组织病理改变也轻于生理盐水组。 结论:牛肠碱性磷酸酶能减少血清内毒素含量,抑制促炎细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素6的释放并促进抗炎细胞因子白细胞介素10的释放,减少中性粒细胞在肝组织的浸润活化,从而减轻肝脏缺血再灌注损伤。
  • 趋化因子RANTES在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定 免费阅读 下载全文
  • 背景:RANTES是典型的趋化性细胞因子,参与很多炎症反应以及器官移植免疫排斥反应。从天然组织中分离RANTES数量有限,难以满足对其生物学功能研究和临床应用的需要:运用基因工程方法生产RANTES具有一定的应用价值。 目的:观察人体趋化因子RANTES基因在毕赤酵母体系中的分泌表达,获得重组RANTES蛋白。 设计、时间及地点:基因水平的实验观察,于2006—07/2007—10在重庆大学生物工程学院313实验室完成。 材料:新鲜人外周血取自志愿者,用以分析人体RANTES基因序列设计引物:质粒pPIC9K、毕赤酵母菌珠Pichia Pastoris GS115均由重庆大学生物工程学院313实验室保存。 方法:将人体趋化因子RANTES基因插入含AOXI启动子和α分泌信号肽序列的酵母表达载体pPIC9K中,用Sal I将重组质粒线性化,电击转化毕赤酵母GS115感受态细胞,筛选阳性整合子进行甲醇诱导表达。 主要观察指标:趋化因子RANTES在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定结果。 结果:人体趋化因子RANTES在酵母培养基BMGY中实现了分泌表达,表达产物经SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳及Western blot鉴定为重组RANTES蛋白。 结论:在毕赤酵母真核系统中实现了人体趋化因子RANTES的分泌表达,为RANTES蛋白进一步的结构和功能研究打下了基础。
  • 趋化因子RANTES对人外周血单个核细胞的免疫活化作用 免费阅读 下载全文
  • 背景:趋化信号的免疫学功能已倍受关注,但趋化因子家族的重要成员RANTES对单个核细胞的免疫活化作用及相关作用途径尚未阐明。 目的:观察RANTES趋化凼子刺激对人外周血单个核细胞的免疫活化作用及分析其作用途径。 设计:观察对比实验。 单位:扬州大学临床医学院泌尿外科。材料:实验于2004-12/2005~08在美国路易维尔大学免疫学系实验室完成。主要试剂与仪器包括RPMI 1640完全培养液,人重组RANTES,抗CD3单克隆抗体,吡咯啉烷二甲基硫脲,CTLA4Ig,LS500型液闪仪及FACS Epics XL流式细胞仪。 方法:分离人外周血单个核细胞,应用不同终浓度的人重组RANTES和/或抗CD3单克隆抗体进行体外刺激,并对增殖反应碌著者给予吡咯啉烷二甲基硫脲或CTLA4Ig进行于预。采用^3H-胸腺嘧啶核苷掺入法枪测单个核细胞增殖程度,应用流式细胞术检测淋巴细胞表型变化。 主要观察指标:^3H-胸腺嘧啶核苷掺入率、CD4/CD8比值,CD25,CCR5及CD28表达水平。 结果:①人重组RANTES终浓度为100,5000 μg/L时,诱导单个核细胞增殖反应出现两次峰值。②100 μg/L人重组RANTES刺激产生的增殖反应明显高于50 μg/L抗CD3单克隆抗体的刺激(P〈0.05),但两者无拮抗或协同作用。③吡咯啉烷二甲基硫脲和CTLA4Ig对100 μg/L人重组RANTES诱导的增殖反应均能产生抑制作用,并呈现剂量依赖性。④与刺激前相比,人重组RANTES刺激后淋巴细胞CD25表达水平增加(P〈0.05),CCR5表达水平降低(P〈0.05),CD28表达水平及CD4/CD8比值无明显改变(P〉0.05)。 结论:RANTES趋化信号具有不依赖于CD3信号、独特的诱导单个核细胞免疫活化的功能,此效应与白细胞介素2信号通路、CD28共刺激通路和核因子KB的活化密切相关。
  • 隐神经支配足内侧皮瓣的解剖学观察及其对跟腱周围组织缺损的修复 免费阅读 下载全文
  • 背景:足内侧皮瓣因其有较好的色泽和质地,还能恢复保护性感觉,在临床应用较广泛,但该皮瓣的支配神经缺乏详细的解剖学资料。 目的:在明确局部解剖关系的基础上.采用带隐神经的足内侧皮瓣修复跟腱周围组织缺损,观察修复效果。 设计:单一样本研究。 单位:遵义医学院附属医院整形科和遵义医学高等专科学校解剖教研室。 对象:选择2004-01/2007-06遵义医学院附属医院整形外科收治的跟腱及局部皮肤缺损患者11例进行缺损修复,其中男7例,女4例,年龄15-40岁。 方法:实验于2004-01/2007-06在贵州省遵义医学高等专科学校解剖教研室完成。20侧下肢标本来自遵义医学高等专科学校解剖教研室12条肢体以及遵义医学院附属医院整形外科患者截肢的8条肢体(患者同意将截肢用于实验)。20侧灌注红色乳胶的成人下肢标本,重点显微解剖:①足底内侧动脉的起源、走行、分支、外径、长度和分布。②隐神经在内踝下的分支、分布。同期在贵州省遵义医学院附属医院整形科完成采用带隐神经的足内侧皮瓣修复跟腱周围组织缺损11例,皮瓣均采用带蒂转移修复缺损,治疗方案经医院伦理委员会批准。术后采用回院复诊的形式完成随访1个月~2年,观察皮瓣的色泽、质地和与对侧足内侧区两点辨别觉差异。 主要观察指标:支配带隐神经的足内侧皮瓣的血管神经情况和该皮瓣转移修复跟腱周围组织缺损后的外观和功能。 结果:①解剖学观测结果:足底内侧动脉在距其起始1.0~2.0cm处分为浅、深两支。浅支穿拇趾展肌,在舟骨粗隆附近浅出,外径(1.0±0.2)mm(成人)。足底内侧动脉深支为足底内侧动脉的直接延续,外径(1.5±0.3)mm(成人),距足底内侧动脉起点2.5~5.0cm处分为内侧深支和外侧深支内侧深支在拇趾展肌深面潜行,在舟骨粗隆下方距内、外侧深支分支处再分为内侧支(皮支)和外侧支。②临床应用;本组共用11个皮瓣,皮瓣早期无血管危象发生、未出现皮瓣坏死、完全成活,无患者发生血管危象。7例获随访,其中2例随访1个月,3例随访6个月,1例随访1年,1例随访2年。随访期间观察到移植的皮瓣色泽、质地、外形良好。皮瓣与对侧足内侧区两点辨别觉无差异。 结论:足内侧皮瓣由足底内侧动脉浅支供血,是隐神经的绝对支配区。隐神经支配的足内侧皮瓣能够修复跟腱及其周围组织缺损,且具有解剖变异少,切取容易等解剖恒定优势,修复效果较好。
  • 静脉内皮细胞功能和组织形态与高脂血症的关系 免费阅读 下载全文
  • 背景:自体静脉移植是临床治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的常用手段,明确其在移植前的基础病变,将为进一步研究移植静脉的保护,降低移植静脉的再狭窄奠定基础。 目的:观察冠状动脉粥样硬化性心脏病的独立影响因素高脂血症对可用于移植静脉内皮功能和组织形态的影响。 设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-04/10在解放军第二军医大学附属长海医院全军心脏外科重点实验室完成。 材料:选用成年雄性健康家兔50只,按随机数字表法分为对照组和高脂血症模型组,每组25只。 方法:对照组予以普通饮食,每只每日喂饲基础饲料100~120g,饮水不限。高脂血症模型组予以高脂饮食,即除普通饮食外,每只每日加喂胆固醇1g。 主要观察指标:分别在实验前和喂养2,4,8,12周末,采集血样本,获取颈内静脉标本,检测血脂水平;观察颈内静脉内皮型一氧化氮合酶蛋白表达、一氧化氮生成量和组织形态变化。获取静脉标本前应用超声多普勒检测颈内静脉和颈动脉血流,并观察其管壁厚度、管腔内径以及有无脂质或粥样硬化斑块等。 结果:①高脂血症模型组家兔高脂喂养8周末血脂水平高于实验前及对照组(P〈0.01),并稳定于此较高水平,同时出现颈动脉脂质斑块。②高脂血症模型组家兔高脂喂养8,12周末颈内静脉内皮型一氧化氮合酶蛋白表达水平、一氧化氮生成量低于实验前及对照组(P〈0.05),可见内皮剥脱,弹力纤维明显减少甚至消失,未见泡沫细胞和粥样斑块。 结论:高脂血症可导致静脉内皮功能不全和组织形态学异常,但若将其作为桥血管材料移植到动脉系统,将会严重影响移植静脉的重塑,甚至导致移植静脉再狭窄。
  • 细胞移植治疗帕金森病诱发运动并发症的研究与进展 免费阅读 下载全文
  • 细胞移植曾被认为是帕金森病治疗领域最具前途的手段,但是相关并发症的报道却打消了人们最初的热情。移植物导致的并发症是在部分接受细胞移植手术的帕金森病患者中发生的严重而持续的运动障碍,这种运动障碍主要表现为不自主或舞蹈样动作或肌张力的异常。关于移植物诱发异动症的诱因主要有以下几个假说:多巴胺浓度过高、移植物形成的斑片状投射、移植物与宿主的异常投射等。目前,上述假说大部分来源于临床试验,需要控制严格的动物实验进—步验证。由于对帕金森病状态下的运动障碍了解尚不十分透彻,所以还不能确定哪一种假说是诱发移植物诱发的异动症的确切因素。
  • 移植血管的低温保存技术 免费阅读 下载全文
  • 人工血管是目前临床常用的血管替代物,但是人工血管无抗凝功能的内皮细胞层,移植后血管破裂和血栓的发生率较高,应用于临床后远期通畅率不高。组织细胞的低温损伤是血管低温保存面临的主要问题,近年来随着低温生物学的快速发展,低温保存设备的更新,高效低毒低温保存液的开发,降温、复温模式的改进,有效地保存了血管的生物活性和管壁机械强度。深低温保存技术能够长期保存血管的生物活性,复温后血管的顺应性、黏滞性和缓冲能力均优于人工血管,与新鲜血管相比差异无显著性。随着低温保存技术的进一步发展和高效低温保存液的开发应用,低温保存人体血管的应用前景将十分广阔。
  • 基因多态性对钙调神经磷酸酶抑制剂的影响 免费阅读 下载全文
  • 环孢素A和他克莫司是钙调神经磷酸酶抑制剂,在临床上常作为基础免疫抑制剂与其他免疫抑制剂联合应用于器官移植后抗排异反应或自身免疫系统疾病。由于治疗窗窄,需要监测血药浓度调整用药。基因多态性对钙调神经磷酸酶抑制剂的免疫效果有重要影响。环孢素A和他克莫司的生物利用度和代谢主要受转运蛋白和细胞色素P450同工酶系统影响。随着基因组学对单核苷酸序列多态性的研究进展,越来越多的研究表明,个体基因水平的差异与药物代谢和生物利用度密切相关。文章综合分析CYP3A4,CYP3A5和多药耐药基因1基因多态性在药物代谢方面的作用,以及对环孢素A和他克莫司代谢的影响。用药前通过检测基因型来合理应用钙调蛋白酶抑制剂并有针对性的进行剂量调整,将有助于免疫抑制剂的个体化应用。
  • CRTER对研究原著稿件修改的语言描述要求 免费阅读 下载全文
  • NRR近期组稿重点内容 免费阅读 下载全文
  • CRTER发表文章被SCI引文库、CA、EM数据库收录的最新数据 免费阅读 下载全文
  • CRTER对研究原著稿件修改的语言描述要求 免费阅读 下载全文
  • NRR杂志2007年出版稿件的基本参数及被SCI引文库、CA、EM收录情况 免费阅读 下载全文
  • CRTER为国际投稿作者服务 免费阅读 下载全文
  • 2008年向CRTER投稿登陆作者稿件远程处理平台 免费阅读 下载全文
  • NRR杂志2006年出版稿件的基本参数及被SCI引文库、CA、EM数据库收录情况 免费阅读 下载全文
  • 2008年CRTER杂志论著类稿件体例(4.0—6.0版/篇) 免费阅读 下载全文
  • NRR已出版的文章被SCI引文库、CA、EM数据库收录情况 免费阅读 下载全文
  • CRTER近期组稿重点内容 免费阅读 下载全文
  • ORTER 2008年综述类稿件体例(4.0-6.0版/篇) 免费阅读 下载全文
  • CRTER杂志对投稿、组稿、修稿中如何体现本刊宗旨文字内容的要求及说明 免费阅读 下载全文
  • 心理防御方式与肾移植前后血液透析患者的抑郁发生 免费阅读 下载全文
  • 背景:经典心理动力学理论认为,特殊的防御方式可能和疾病或症状之间存在特定联系。国内大部分研究表明抑郁症患者心理防御方式存在明显的中间型和不成熟倾向。 目的:了解肾移植前后维持性血液透析抑郁患者的心理防御方式以及心理防御方式与患者产生抑郁的关系。 设计、时间及地点:问卷调查,于2007—01/2008-01在石河子大学医学院第一附属医院和第三附属医院完成。 对象:选择同期石河子大学医学院第一附属医院和第三附属医院肾病科血透室收治的肾移植前后行血液透析治疗的90例患者作为调查对象。纳入标准:①行血液透析治疗3个月以上的终末期肾衰竭患者,前3个月内无透析方式的改变及外科手术史。②文化程度在小学以上,意识清晰,有一定交流能力,能理解并配合调查。③排除脑损伤、脑肿瘤者及有精神病史、人格障碍者。④取得受试者及其家属的同意。 方法:采用问卷调查方式,包括zung抑郁自评量表、防御方式问卷两项。 主要观察指标:患者发生抑郁情况。抑郁与非抑郁患者心理防御方式的比较。抑郁发生与心理防御方式的相关性。结果:发放问卷90份,84份内容完整、真实且没有缺项、漏项的问卷予以回收,有效率93.3%。84例患者抑郁发生率为69%。抑郁与非抑郁患者在不成熟防御机制及其所包括的投射、被动攻击、潜意显现、幻想、退缩因子,成熟防御机制及其所包括的压抑、幽默因子,中间型防御机制及其所包括的期望因子均分比较,差异均肓显著性意义(t=-4.401~-2.270,t=2.521-5.408,P均〈0.05)。患者发生抑郁与不成熟防御机制及其所包括的投射、被动攻击、潜患显现、幻想、分裂因子,中间型防御机制及其所包括的隔离、消耗倾向因子均呈显著正相关(r=-0.219~0.288,P〈0.05或0.01),与成熟防御机制及其所包括的幽默、升华、压抑因子呈显著负相关(r=-0.470~0.1317,P均〈0.01)。 结论:肾移植前后维持性血液透析抑郁患者多采用不成熟防御机制和中间型防御机制,而较少采用成熟防御机制。抑郁的发生与不成熟防御机制呈正相关,与成熟防御机制呈负相关。
  • 肾移植与血液透析患者医学应对方式的比较 免费阅读 下载全文
  • 背景:对疾病治疗的认知评价,直接影响患者的应对活动和身心反应,医学应对是影响临床治疗的重要因素之一。 目的:比较血液透析及肾移植患者医学应对方式的特点和影响因素。 设计、时间及地点:问卷调查,于2005-01/2006-01在首都医科大学附属北京友谊医院泌尿科完成。 对象:选择在首都医科大学附属北京友谊医院门诊接受血液透析治疗的患者及门诊随诊的肾移植患者各60例。接受血液透析治疗/肾移植手术时间≥3个月,移植肾功能正常;自愿参加调查。 方法:采用问卷调查法,由调查者采用统一的解释性语言,指导患者填写下列问卷。①一般情况问卷:包括性别、年龄、文化程度、职业、婚姻状况、子女情况、家庭收入、医疗付费方式、医疗费用对家庭的影响、接受血液透析治疗/肾移植手术时间等。②医学应对问卷:包含面对、回避和屈服3个分量表,各条目按1~4级计分,其分量表得分越高,表明个体越倾向于采用这种应对方式。 主要观察指标:计算血液透析及肾移植患者的医学应对问卷各分量表得分,并与常模进行比较;分析患者的一般情况与各分量表得分的相关性。 结果:120例患者全部进入结果分析,无脱落。①两组患者在医疗付费方式、医疗费用对家庭的影响以及血液透析/移植时间方面,差异存在显著性意义(P〈0.05)。②血液透析患者医学应对方式问卷中面对、屈服量表得分均低于肾移植患者(P〈0.05),两组患者的回避量表得分差异无显著性意义(P〉0.05)。③血液透析患者医学应对方式中面对量表得分低于常模(P〈0.05),回避、屈服量表得分均高于常模(P〈0.05)。肾移植患者的面对量表得分与常模相似,差异无显著性意义(P〉0.05);回避、屈服量表得分均高于常模(P〈0.05)。④血液透析患者的面对量表得分与性别相关(r=-0.277,P〈0.05);屈服量表得分与家庭收入相关(r=-0.287,P〈0.05)。肾移植患者的面对量表得分与婚姻状态相关(r=0.282,P〈0.05)。结论:治疗方法和心理社会因素影响终末期肾病患者的医学应对方式。与血液透析患者相比,肾移植患者更多采用面对、屈服的应对方式。血液透析患者的面对得分与其性别相关,屈服得分与家庭收入相关;肾移植患者的面对得分与其婚姻状况相关。
  • 自体及异体骨软骨移植与骨缺损修复 免费阅读 下载全文
  • 目前临床上可用于修复骨缺损的材料较多,但理想的骨移植材料应具有成骨性、骨诱导性、骨传导性及完全生物相容性。目前常用的移植物包括自体或异体骨软骨、软骨膜或骨膜及软骨细胞。自体骨软骨镶嵌移植具有移植软骨固定可靠、软骨细胞存活率高等优点,由于供区的限制,自体骨软骨移植难以满足修复特长段骨缺损的要求,众学者开始研究应用多种材料来修复关节软骨缺损,其中软骨膜的应用较多,但由于其来源于自身,延长了手术时间,增加了患者的痛苦,使其应用受限。异体骨软骨移植材料获得相对较易,大小形状不受限制,且具有生物活性与受体部分能发生生物愈合,其主要问题是移植后的排斥反应,深低温冷冻处理技术虽然保留了成骨活性又最大限度的降低了免疫源性,但其生物力学强度仍明显低于自体骨。配合各种生长因子的刺激作用增强骨移植物转化成软骨的能力,构成具有生物活性的骨移植物将是骨移植材料研究的主要方向。
  • 国内器官移植供体不足的伦理原因分析 免费阅读 下载全文
  • 器官移植对于挽救晚期脏器功能衰竭患者的生命具有极其重要的意义,但供体器官的严重不足,成为阻碍器官移植临床应用的最棘手问题。器官移植应用中,主要涉及器官来源和器官分配两大方面。从这两个方面分析器官移植中的社会伦理问题,为帮助人们解放思想,冲破传统观念的束缚,以求最大限度地增加器官来源缓解供求矛盾。在器官来源上存在的伦理问题主要是传统伦理观念和死亡标准问题。对于尸体供体及活体供体均应考虑维护供体利益,体现真正意义的“自愿”。从医学伦理学角度来讲器官分配主要考虑患者的剩余寿命、家庭角色、科研价值、历史回顾与对未来的前瞻。但同时更应该遵守器官移植资源分配的原则(尊重生命原则、效用原则、公平公正原则)。
  • 自我认定与人格改变:器官移植引发的心理学思考 免费阅读 下载全文
  • 人格是个人适应环境时在需要、动机、价值观、情绪、气质、性格和体质等方面的整合。包括整体的人,稳定的自我,独特性的个人,具有身心组织的社会化对象4个方面,人格跨时间的持续性和跨情境的一致性是人格稳定性的具体表现。人格与自我是否会在器官移植后发生改变,目前国内外的很多研究发现人格改变的个案,但并不是常态。人格与自我是相对稳定的,但器官移植确实能引起人格和自我的变化。器官移植导致人格改变是抑制免疫力的药物作用、心理暗示作用或者心理社会压力的结果。少数科学家认为器官移植具有遗传的功能,人体细胞有存储信息和记忆的功能,一些主要器官的移植会导致人格的移植。但各种理论假说均需要进一步证实。
  • 接受器官移植大学生受者的心理特点及干预 免费阅读 下载全文
  • 目前器官移植是医治某些重大终末期疾病最为有效的方法,但移植手术并不同于一般手术,患者术前、术后会发生重大的心理变化,这种变化使患者具有什么样的心理特征,大学生作为一个特殊的群体,其生理和心理具有不同于一般人群的特征,而针对器官移植大学生受者心理特点和干预方面的研究很少,本文拟在这方面进行探讨。
  • 自体骨髓移植治疗糖尿病性动脉硬化闭塞症28例 免费阅读 下载全文
  • 为观察自体骨髓移植对糖尿病性下肢动脉硬化闭塞症血液循环的影响,对2003—06/2006—06本院收治的28例糖尿病性下肢动脉硬化闭塞症患者进行自体骨髓移植,观察移植前和移植后30d患肢踝肱指数、多普勒血流的变化。结果显示:自体骨髓移植后30d患者患肢踝肱指数、多普勒血流较移植前显著增加(P〈0.01),皮肤温度升高,下肢疼痛好转的有效率为64.3%,间歇性跛行好转的有效率为39.3%,但与移植前比较差异无统计学意义。
  • 自体颅骨瓣体内保存及再植28例 免费阅读 下载全文
  • 选择鹤壁市第二人民医院外科收治的自体颅骨瓣体内保存及再植患者28例,其中颅脑损伤患者23例,高血压脑卒中患者5例。将开颅去骨瓣减压患者的颅骨瓣保存于自体腹壁下或大腿内侧皮下,待病情稳定,骨窗内陷时即可回植骨瓣。28例患者中无1例感染,无1例皮下积液,外观美观,手术局部无任何不适。固定满意,骨瓣骨窗完全正常,未见修补骨有坏死骨改变,临床效果满意。自体颅骨保存后原位再植成型效果理想,操作简便,患者易于接受,手术时间短,费用低。
  • 新鲜同种异体深板层角膜移植25例 免费阅读 下载全文
  • 回顾性分析解放军南京军区福州总医院眼科中心2001-01/2007-12收治的角膜疾病患者25例(32眼)的临床资料,均施行新鲜同种异体深板层角膜移植,术后予以糖皮质激素眼液+10g/L环孢素A眼液滴眼,观察术后视力、角膜植片愈合情况及并发症发生情况。其中31眼术后角膜植片愈合良好,创面光滑,逐渐恢复透明。平均随访40.6个月,1眼因外伤致角膜上皮缺损延期愈合外,其余眼表保持稳定,视力提高。除角膜层间新生血管及上皮型排斥反应外,未出现明显基质型排斥反应。深板层角膜移植是一种成分角膜移植术,不但能获得与穿透性角膜移植相似的透明性和视力恢复效果,还可以减少术后内皮型排斥反应及眼内手术并发症发生的危险,达到治疗和增视的双重目的。
  • 供体先天性室间隔缺损心脏移植1例 免费阅读 下载全文
  • 本例心脏移植受者为终末期扩张性心肌病患者,供体为先天性室间隔缺损患者,进行原位双腔心脏移植,随访4年结果满意。在当前供体紧缺的情况下,对于一些存在先天性缺陷的供体,适当处理后应用也能取得满意的临床效果。
  • 国际标准化脑死亡供肺获取1例 免费阅读 下载全文
  • 总结国际标准化脑死亡供体肺的获取经验,以形成一套适用于巾国临床肺移植的脑死亡供体获取标准和规范。本例脑死亡患者的判定严格按国际通用标准,项目负责人在确认家属捐献意愿后,组织2位以上的高年资神经内科、颅脑外科、麻醉科或ICU专家严格按“脑死亡判定标准”及“脑死亡判定技术规范”逐条认真检查患者。脑死亡判定成立后患者家属代表向医院方签署停止一切治疗的知情同意书,签署“脑死亡自愿无偿器官捐献申请书”。对机械通气50h的志愿捐献者进行脑死亡评估和供体器官功能评估后,严格按照国际标准化多脏器获取流程行供肺获取术。本例供体成功完成了肺的获取。实践证明这项操作流程规范可靠。
  • 猪小肠移植的围手术期管理 免费阅读 下载全文
  • 实验于2004-02/2006-05在哈尔滨医科大学附属第二医院完成。杂种小猪40只,供体20只,受体20只。①供体手术:原位腹主动脉4℃肝索盐水500mL耀洗,灌洗压力为7.8~9.8kPa,快速切除供体肠管后置于4℃生理盐水中保存。②受体手术:根据探查情况,分别行原位和异位小肠移植。40~45℃生理盐水冲洗腹腔,直至吸引出的冲洗液变温暖为止。③围手术期管理:移植前、移植后讨论,注意体温的监测和控制,尝试早期进食,其中4只移植后自由进水,第2天给予正常饮食,其余移植后2d进水。④移植后评估:实验动物进食后无吻合口漏发生。16只存活超过7d,最长存活超过14d。平均存活9d,小肠移植手术成功率为80%(16/20)。失败原因:静脉血栓1只,失血1只,其他原因2只。结果提示开展的围手术期管理经验经过大量的小肠移植实践取得了较为满意的效果。
  • 原位肝移植后经皮胆道内治疗胆管狭窄 免费阅读 下载全文
  • 背景:肝移植后胆道并发症其常见问题,采用经皮经肝胆管引流球囊扩张或单纯经皮经肝胆管引流已成为改善肝移植后胆道并发症的有效方式。 目的:通过病例随访评价经皮胆道内球囊扩张及肝胆管引流对原位肝移植后胆管狭窄治疗的有效性。 设计、时间及地点:回顾性病例分析,为1999—07/2007—03首都医科大学附属北京朝阳医院放射科接受经皮胆道内治疗的肝移植后胆道并发症患者53例。男46例,女7例,年龄17~64岁。所有患者都因肝移植后血清胆红素水平异常升高,经CT或MRI证实为胆道梗阻。 方法:53例中50例患者接受了经皮经肝胆管引流,36例常规通过右侧肝内胆管进行,14例患者接受了双侧(左侧和右侧肝内胆管)肝胆管引流,其中6例是在第2次治疗中对左侧肝内肝管引流:13例同时进行了胆道球囊扩张:3例患者进行了单纯球囊扩张治疗。 主要观察指标:对53例患者进行平均9.6个月的随访,观察经皮胆道内干预后血清胆红素水平异常升高致黄疸的控制情况。 结果:1例患者带T管治疗随访至1个月时由于急性排斥反应而死亡,1例患者经皮经肝胆管引流随访至1个月时肝功能衰竭自动出院,51例患者到随访结束时黄疸情况均缓解甚至治愈,血清胆红素水平下降甚至正常。一次有效率达79%(42/53),11例患者(21%,11/53)需要多次治疗,其中5例为第~次治疗失败,6例因黄疸复发。治疗与随访过程中未出现与操作相关的严重并发症。 结论:原位肝移植后胆道并发症采用经皮经肝胆管引流和球囊扩张治疗安全性较高,未见特殊并发症。
  • 大鼠左肺原位移植模型的改进 免费阅读 下载全文
  • 选择120只大小、体质量匹配的Lewis大鼠,用套管法进行血管、支气管吻合,共进行60例次原位左肺移植。供、受体手术均由同一人操作,通过对移植物进行X射线摄片、组织病理学检测等手段评估手术操作的可行性和可靠性。手术成功率为96.7%,平均热缺血时间为(14.5±3.2)min,移植肺得到良好的通气和血流灌注,术后14d移植肺显示了良好的X射线征象和肺功能。采用套管法进行血管、支气管吻合建立的大鼠原位左肺移植模型简单、安全、可靠,可操作性强。
  • 编辑观点 免费阅读 下载全文
  • 在器官移植组织器官保存领域,现今的储存技术可以使已停跳肾、肝等欠理想的供体得到实际使用,且利用率以10%的速度递增,缓解了移植供体短缺的压力,本刊密切关注这一方面的研究进展。
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  • 移植物主要组织相容性抗原复合物在异种移植排斥反应中起关键作用,实验资料表明,用反义核酸技术处理人成纤维细胞再移植入帕金森病大鼠纹状体,可降低异种移植排斥反应程度,延长细胞的存活时间。
  • 心中的奥运 免费阅读 下载全文
  • 从2008年8月8日到24日。 从巴塞罗那到亚特兰大,从悉尼到雅典.从一个人的奥运到八百多名运动员参加的奥运,轮换的是16天的奥运会,不变的是全世界人民对体育运动的热情,对奥运会的热情,对和平友谊象征的热情!
  • 人类白细胞抗原A表达沉默对大鼠脑内人细胞移植排斥反应的调节 免费阅读 下载全文
  • 背景:移植物主要组织相容性抗原复合物在移植排斥反应中起关键作用。用慢病毒介导的人类白细胞抗原RNA干扰技术可以降低T淋巴细胞的细胞毒作用和抗体介导的溶细胞作用,但尚未见相关体内研究报道。 目的:拟用携带人类白细胞抗原A小分子干扰RNA序列的慢病毒感染人胚肺成纤维细胞。再将其移植到帕金森大鼠纹状体.观察人类白细胞抗原A表达沉默对移植排斥反应的调节。 设计.时间及地点:细胞基因工程体内实验.于2005—09/2008-01在首都医科大学神经科学研究所完成。材料:清洁级12周龄雌性SD大鼠33只,用于建立帕金森动物模型。原代培养的人胚肺成纤维细胞取材于12周流产人胚胎,由北京京北医院提供,293T为贴壁依赖型成上皮样细胞。慢病毒载体系统由psicoR,pCMV—VSV—G和psPAX2三质粒组成,为美国Addgene公司产品。携带HLA—A2厂cDNA的pcDNA I/Amp—HLA质粒由比利时Ludwig肿瘤研究所Pierre van Bruggen教授惠赠。 方法:以携带HLA—A2 cDNA的pcDNA I/Amp—HLA质粒为模板PCR扩增HLA—A2 cDNA编码区序列.构建人类自细胞抗原A融合蛋白表达载体pEGFP—Flag-HLA,转染293T细胞。用HLA-A2编码区序列设计小分子干扰RNA 4个待选靶点序列.分别起始于编码区的第257,350.833,251位碱基,构建表达小分子干扰RNA慢病毒载体。用带有Flag标签的人类白细胞抗躁AcDNA表达载体转染293T细胞后,再进行不同靶点病毒直接感染。33只帕金森模型大鼠随机分为2组,实验组大鼠纹状体植入人类白细胞抗原A小分子干扰RNA病毒感染的人胚肺成纤维细胞.对照组植入带有小分子干扰RNA对照序列和绿色荧光蛋白病毒感染的人胚肺成纤维细胞。 主要观察指标:免疫组织化学染色检测脑内移植物人类白细胞抗原A、CD4和CD8的表达,用抗人细胞核的阳性表达评价移植细胞的存活情况。 结果:与对照组比较,实验组移植后4d、2周时人类白细胞抗原A阳性细胞均较少(t=3.301,2.631,P〈0.01,0.05).6周时无明显变化;CD4阳性细胞仅移植后6周明显减少(t=2.269.P〈0.05):移植后4dCD8阳性细胞无明显变化,2周及6周时明显减少(t=2.333.P〈0.05):抗人细胞核阳性细胞仅移植后2周明显减少(t=2.952,P〈0.05)。 结论:人类白细胞抗原A表达敲减可以抑制移植排斥反应。但并不能显著延长移植物的存活时间。
  • 重组人生长激素对大鼠肝移植后胆汁淤积的调节作用 免费阅读 下载全文
  • 背景:胆汁淤积是肝移植后的常见并发症之一,严重胆汁淤积可能伴随着不可逆性的肝功能损害。肝移植后早期应用重组人生长激素,能促进移植肝功能的恢复。 目的:拟验证重组人生长激素对大鼠肝移植后胆汁淤积的调节作用。设计、时间及地点:细胞分子水平的随机对照动物实验,于2005—12/2006—12在东方肝胆外科医院及解放军第二军医大学动物实验中心完成。 材料:选用Wistar大鼠105只,按随机数字表法分为3组,假手术组21只;其余大鼠配对建立大鼠肝移植模型后,分为生长激素组和肝移植组(n=21)。 方法:生长激素组大鼠肝移植后即予皮下注射重组人生长激素2U/(kg·d)至处死日:其他组同时皮下注射等量生理盐水。假手术组仅做开腹和关腹,游离肝脏并不行肝移植。 主要观察指标:各组分别于移植后1,3,7d处死取材(n=7),采集血清样本检测碱性磷酸酶、谷氨酰转肽酶、谷丙转氨酶活性及总胆汁酸、总胆红素含量等肝功能指标;应用放射免疫法检测生长激素:取肝组织样本,应用免疫组织化学和聚合酶链反应方法分析毛细胆管膜面上多耐药相关蛋白2和胆盐输出泵表达水平,并对以上指标进行相关性分析。 结果:①肝移植组大鼠在移植后早期出现胆汁淤积,移植后1,3d的各项肝功能指标均高于假手术组(P〈0.05),术后7d呈下降趋势。②生长激素组与肝移植组同期比较,胆汁淤积程度降低,恢复迅速。⑧肝移植组肝脏多耐药相关蛋白2在毛细胆管膜上定位减少、向胞浆内分布,表达亦明显下调;生长激素组大鼠的肝脏多耐药相关蛋白2表达水平明显增高,恢复加快。④胆盐输出泵的表达在各组间差异无显著性意义(P〉0.05)。⑤肝组织多药耐药相关蛋白2表达与血清生长激素呈正相关(r=0.8592.P〈0.05);与血清胆红素呈负相关(r=0.7772.P〈0.05)。 结论:多耐药相关蛋白2的表达减少以及定位异常可能是肝移植后胆汁淤积发生的主要分子途径之一,重组人生长激素促进胆红素的转运可能是通过直接上调多耐药相关蛋白2表达来实现,胆盐输出泵不参与肝移植后早期胆汁淤积。
  • [研究与报告]
    同种异体大鼠移植肺中转录因子T-bet和GATA结合蛋白3的定量表达
    不同器官保存液对停搏供心的保护(胡英斌 周新民 李津 彭昊 胡野荣)
    肾移植后药物性IV度骨髓抑制的转归(高宏君 罗向东 梁泰生 梁方芳 杨欢 谭臻 吴佩钟)
    肾移植前后肺通气、弥散功能及肺部影像学变化
    肾移植后早期血清脂质紊乱与免疫抑制剂的关系
    雄性受体大鼠同种肾移植慢性排斥反应中性激素、性别、雄激素受体拮抗剂的作用
    异种脱细胞真皮基质膜修复全层皮肤损伤的疗效和安全性分析——多中心、随机、对照试验
    自体微粒头皮与第二层头皮微粒混合移植修复特重度烧伤创面
    猪源性膀胱无细胞基质在异种移植中的生物安全性
    大鼠SV40LT抗原基因转染的肝细胞脾内移植后早期组织形态学和超微结构改变(刘会春 周少波 李宗狂)
    转化生长因子β1基因型与移植肾的慢性排斥反应(吕铁明 吴卫真 谭建明)
    非体外循环与常规体外循环下冠状动脉旁路移植术后肝肾功能的变化(任崇雷 高长青 肖苍松 吴扬 邓学峰)
    对比增强超声心动图对拟肝移植患者肺内分流的评估价值
    白细胞介素10修饰树突状细胞在异基因肝肾联合移植大鼠体内迁移及免疫保护(邓素雄 李军良 马毅)
    肝移植术后肺部感染的防治(林帆 夏金堂 古维立 朱光辉 温敏杰 赖越元)
    腓肠神经营养皮瓣移植修复足踝软组织缺损中小隐静脉干的处理(吴文 章莹 夏远军 尹飚)
    胚胎干细胞源性肝样细胞移植治疗急性肝功能衰竭模型小鼠
    内皮型一氧化氮合酶基因转染对移植人工血管内膜增生的作用(裴斐 李俊彦 张莉 伺蕊)
    [技术与方法]
    靶向CD40小RNA干扰抑制大鼠异体肢体移植急性排斥反应后细胞凋亡及P53,P21,Bcl-2,Bax的表达
    局部注射转化生长因子β1质粒与坐骨神经移植后免疫排斥反应的量效关系
    免疫抑制剂FK506对大鼠移植肢体Bcl-2与Bax mRNA表达及细胞凋亡的影响(韩成龙 于占革 沈洪涛 毕郑钢)
    人白细胞相关免疫球蛋白样受体1/白细胞相关免疫球蛋白样受体2可能配体的生物信息学分析及鉴定
    SV40T抗原荧光真核表达载体构建及在胰岛细胞中的表达(谭琪 李富荣)
    玻璃化法和低温冷冻法保存免股动脉的形态结构及力学性能比较(魏民 张伯勋 刘郑生 汪爱媛 赵斌)
    牛肠碱性磷酸酶对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用途径(邓润枢 周杰)
    趋化因子RANTES在毕赤酵母中的表达、纯化与鉴定(邓晓洁 胡宗利 张宁 赵志平 陈国平)
    趋化因子RANTES对人外周血单个核细胞的免疫活化作用
    隐神经支配足内侧皮瓣的解剖学观察及其对跟腱周围组织缺损的修复(魏在荣 王达利 王玉明 祁建平 孙广峰 王波 唐修俊)
    静脉内皮细胞功能和组织形态与高脂血症的关系
    [综述与专论]
    细胞移植治疗帕金森病诱发运动并发症的研究与进展(刘佳 黄红云)
    移植血管的低温保存技术
    基因多态性对钙调神经磷酸酶抑制剂的影响
    [信息导读]
    CRTER对研究原著稿件修改的语言描述要求
    NRR近期组稿重点内容
    CRTER发表文章被SCI引文库、CA、EM数据库收录的最新数据
    CRTER对研究原著稿件修改的语言描述要求
    NRR杂志2007年出版稿件的基本参数及被SCI引文库、CA、EM收录情况
    CRTER为国际投稿作者服务
    2008年向CRTER投稿登陆作者稿件远程处理平台
    NRR杂志2006年出版稿件的基本参数及被SCI引文库、CA、EM数据库收录情况
    2008年CRTER杂志论著类稿件体例(4.0—6.0版/篇)
    NRR已出版的文章被SCI引文库、CA、EM数据库收录情况
    CRTER近期组稿重点内容
    ORTER 2008年综述类稿件体例(4.0-6.0版/篇)
    CRTER杂志对投稿、组稿、修稿中如何体现本刊宗旨文字内容的要求及说明
    [调查分析]
    心理防御方式与肾移植前后血液透析患者的抑郁发生
    肾移植与血液透析患者医学应对方式的比较(郭宏波 付凤齐)
    [学术探讨]
    自体及异体骨软骨移植与骨缺损修复(王慎东)
    国内器官移植供体不足的伦理原因分析(邱达明)
    自我认定与人格改变:器官移植引发的心理学思考(汤万杰)
    接受器官移植大学生受者的心理特点及干预(张运红)
    [病例报告]
    自体骨髓移植治疗糖尿病性动脉硬化闭塞症28例(李斌 辛明霞 孙爱春)
    自体颅骨瓣体内保存及再植28例(赵俊国 武金程 张雪峰)
    新鲜同种异体深板层角膜移植25例(杨丽霞 余鹰翔 郑祥榕 高朋芬)
    供体先天性室间隔缺损心脏移植1例
    国际标准化脑死亡供肺获取1例(叶书高 陈静瑜 刘峰 张稷)
    [实验方法]
    猪小肠移植的围手术期管理
    原位肝移植后经皮胆道内治疗胆管狭窄(黄强 戴定可 于平 钱晓军 翟仁友)
    大鼠左肺原位移植模型的改进(葛晶 翟伟 唐健 王建军)

    编辑观点
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    人类白细胞抗原A表达沉默对大鼠脑内人细胞移植排斥反应的调节(徐云智 梁彩霞 赵春礼 郑德宇 段德义)
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    《中国组织工程研究与临床康复》封面

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