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  • 胶原酶消化时间及质量浓度对大鼠胰岛细胞分离的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:胶原酶消化方法是胰岛细胞分离技术中关键的第1步,其成败关系到胰岛细胞移植的存活与功能。目的:针对不同质量浓度和同一质量浓度条件下不同时间点胶原酶分离纯化所获得胰岛细胞的效果进行对比,以确定理想的胶原酶分离胰岛细胞的标准化方案。设计、时间及地点:单一样本观察,细胞学体外观察,于2006-09/2007-05在解放军总医院第二附属医院全军器官移植实验室完成。材料:胰岛细胞供体为SD大鼠。将32只大鼠按随机数字表法分为4组,即胶原酶0.5g/L,1.0g/L,1.5g/L及2.0g/L组,每组8只。方法:每组前4只动物,采用0.5,1.0,1.5,2.0g/L4种质量浓度的胶原酶对胰腺进行分离,消化过程中每隔10min为1个时间点,双硫腙染色观察分离情况,分析结果并确定最适合获取胰岛量最多的时间点。随后每组另外4只动物按照确定时间点停止消化,应用间断密度梯度离心法纯化胰岛,双硫腙和丫啶橙-碘丙啶荧光染色分析移植物形态和存活率,确定分离所需胶原酶的最佳浓度。主要观察指标:调整胶原酶的质量浓度与消化时间,荧光显微镜下胰岛细胞计数,评估胶原酶最佳质量浓度及消化时间。结果:分析后确定各组胰岛细胞最佳获取时间,胶原酶0.5g/L组50min,胶原酶1.0g/L组40min,胶原酶1.5g/L及2.0g/L组均为30min。胶原酶0.5g/L组分离并纯化后胰岛细胞收获量显著低于其他3组(P〈0.01),胶原酶1.0g/L,1.5g/L及2.0g/L组两两比较差异无显著性意义(P〉0.05)。胶原酶2.0g/L组胰岛细胞平均存活率显著低于其他3组(P〈0.01),胶原酶0.5g/L,1.0g/L及1.5g/L组两两比较差异无显著性意义(P〉0.05)。结论:在胰腺灌注良好情况下,胶原酶消化条件控制在质量浓度1.5g/L,时间30min进行水浴振荡可获得很好的分离效果。
  • 富血小板血浆对体外培养骨骼肌干细胞增殖及成骨活性的作用 免费阅读 下载全文
  • 背景:已有研究发现富血小板血浆可以影响骨髓间充质干细胞和脂肪干细胞的生长和分化。目的:观察富血小板血浆对体外培养的骨骼肌干细胞增殖与诱导成骨的影响,探讨富血小板血浆影响骨骼肌干细胞的机制。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-06/10在上海交通大学附属第六人民医院中心实验室完成。材料:普通级新西兰大白兔9只,体质量2.5~3kg,年龄1岁左右,雌雄不限。方法:取兔右后肢比目鱼肌体外培养新西兰大白兔骨骼肌干细胞。取兔耳中央动脉血,经离心处理后制备富血小板血浆。将细胞分为实验组与对照组,实验组以含12.5%自体富血小板血浆的条件培养液干预,对照组不进行富血小板血浆干预。主要观察指标:①细胞形态学观察。②以四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖活性。③以碱性磷酸酶钙钴法染色、碱性磷酸酶活性测定、茜素红染色和骨钙素免疫荧光染色检测细胞成骨活性。结果:四甲基偶氮唑盐法显示富血小板血浆诱导实验组较对照组增殖明显(P〈0.01);碱性磷酸酶活性较对照组增高明显(P〈0.01)。富血小板血浆诱导实验组碱性磷酸酶染色阳性,骨钙素免疫荧光染色阳性,茜素红染色可见钙结节形成。结论:富血小板血浆对体外培养的骨骼肌干细胞增殖与成骨分化活性具有显著的促进作用。
  • 全身与桡骨骨折局部应用伊班膦酸钠对骨折愈合影响的比较 免费阅读 下载全文
  • 背景:伊班膦酸钠是第3代二膦酸盐的典型代表之一,具有很高的抗骨质吸收作用。目的:验证骨折局部及全身应用伊班膦酸钠对兔骨折愈合的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-10在东南大学医学院中心实验室完成。材料:健康6~8月龄新西兰兔36只,体质量2.1~2.6kg。伊班膦酸钠注射液(1mL∶1mg)由河北医科大学生物医学工程中心提供。方法:新西兰兔36只,随机分成3组,对照组、全身组和局部组,每组12只,建立兔桡骨骨折标准模型。建模后对照组不予处理,全身组和局部组分别通过静脉和局部途径予以伊班膦酸钠0.1mg。于建模后2,4,6,8周通过X射线观察骨折愈合情况,进行评分;于骨折模型建立后的第1,2,3,4周通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP-5b);于建模后2,4,6,8周分批处死兔,摘取骨痂标本,进行病理学观察和通过免疫组织化学检测Ⅰ型胶原的表达。主要观察指标:①骨折愈合评分。②抗酒石酸酸性磷酸酶变化。③骨痂成分面积百分比。④破骨细胞指数。⑤免疫组织化学积分吸光度。结果:36只兔全部进入分析。第2周,全身组和局部组X射线评分较对照组高(P〈0.05),第4,6周,局部组较对照组和全身组评分评分高(P〈0.05)。各周局部组抗酒石酸酸性磷酸酶水平较对照组和全身组低(P〈0.05)。4周,局部组骨小梁面积百分比高于对照组(P〈0.05);6周高于对照组和全身组(P〈0.05)。各周局部组破骨细胞指数均低于对照组和全身组(P〈0.05)。2,4,6周,局部组Ⅰ型胶原表达均高于全身组和对照组(P〈0.05)。结论:局部应用伊班膦酸钠能够促进兔骨折愈合,相同剂量下(0.1mg)比全身应用效用更显著。
  • 复方甘草酸苷对兔骨骼肌缺血再灌注损伤的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:甘草酸苷对缺血再灌注损伤保护作用的研究主要集中于心、肾、肠等器官,对骨骼肌的研究甚少。目的:验证复方甘草酸苷对兔骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用。设计、时间及地点:血清学及组织形态学水平的随机对照动物实验,于2008-02/09在重庆医科大学临床检验诊断学教育部重点实验室完成。材料:选用24只新西兰大白兔,按随机数字表法分为3组,即假手术组、模型组及复方甘草酸苷组,每组8只。方法:模型组动物制备右后肢骨骼肌缺血损伤模型,缺血4h后再灌注24h;复方甘草酸苷组动物缺血4h后给予复方甘草酸苷20mg/kg,再灌注24h;假手术组动物仅游离出股动脉不进行缺血,4h后缝合切口并给予等量生理盐水。主要观察指标:观察肌肉损伤后甘草酸苷对血浆乳酸脱氢酶、肌酸激酶活性及丙二醛浓度,肌组织髓过氧化物酶活性、湿质量/干质量比值及P-选择素mRNA表达水平的影响;光镜下观察骨骼肌的组织形态学改变。结果:假手术组的血浆肌酸激酶、乳酸脱氢酶活性和丙二醛浓度显著低于缺血再灌注组及复方甘草酸苷组(P〈0.05),复方甘草酸苷组显著低于缺血再灌注组(P〈0.01)。假手术组的骨骼肌组织髓过氧化物酶活性和湿质量/干质量比值显著低于缺血再灌注组及复方甘草酸苷组(P〈0.01),复方甘草酸苷组显著低于缺血再灌注组(P〈0.01)。10倍镜下坏死肌纤维数缺血再灌注损伤组显著大于复方甘草酸苷组(P〈0.05)。骨骼肌组织中P-选择素mRNA表达水平假手术组显著低于缺血再灌注组(P〈0.01),复方甘草酸苷组显著低于缺血再灌注组(P〈0.05)。结论:复方甘草酸苷对骨骼肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用。
  • 胰岛素样生长因子1基因转染骨髓基质干细胞治疗裸鼠骨缺损 免费阅读 下载全文
  • 背景:众多的研究已证实胰岛素样生长因子1在成骨细胞的增殖、分化、基质合成中发挥重要的调控作用,并参与调节骨改建及修复的一系列过程。目的:观察人胰岛素样生长因子1基因修饰的骨髓基质干细胞对骨损伤修复的促进作用及能否构建出具有良好生物学活性的组织工程人工骨,提高骨缺损修复质量。设计、时间及地点:对比观察,实验于2004-03/2005-05在苏州大学实验动物中心完成。材料:体外将胰岛素样生长因子1基因通过反转录病毒转入骨组织工程种子细胞骨髓基质干细胞,并与具有良好生物学活性的脱钙骨基质材料复合。方法:BalB/C裸鼠15只制备颅骨8mm缺损模型,随机数字表法分为3组,每组5只。胰岛素样生长因子1转染细胞组和空载体细胞组将两种不同植入物脱钙骨基质/胰岛素样生长因子1转染细胞和脱钙骨基质/空载体细胞分别植入颅骨缺损部位,空白对照组仅造模,不进行任何干预。造模后4周处死动物,取出颅骨进行组织学观察。主要观察指标:①反转录-聚合酶链反应检测转染细胞胰岛素样生长因子1mRNA的表达。同时收集转染后细胞上清,用蛋白免疫印迹检测重组胰岛素样生长因子1的表达。②扫描电镜观察细胞/基质材料复合物共培养3,6d后的生长情况。③颅骨缺损模型大体观察。④苏木精-伊红染色观察造模后4周各组颅骨缺损的修复情况。结果:①经反转录-聚合酶链反应及蛋白免疫印迹检测,胰岛素样生长因子1基因修饰的骨髓基质干细胞中有胰岛素样生长因子1mRNA及蛋白的表达。②扫描电镜观察转染细胞与脱钙骨基质共培养3d时胰岛素样生长因子1转染细胞组脱钙骨基质材料表面已有大量细胞黏附并向深部空隙长入;6d时脱钙骨基质表面黏附的细胞处已分泌出大量胶原纤维;而空载体细胞组各时间点黏附细胞数和胶原纤维产生量则均较少。③造模后4周各组植入物周围均无明显炎症反应,胰岛素样生长因子1转染细胞组植入物与颅骨缺损结合紧密;而空载体细胞组植入物可推动;空白对照组骨缺损处无新骨形成。④苏木精-伊红染色可见胰岛素样生长因子1转染细胞组植入物与颅骨缺损结合紧密,骨折缺损区有新骨及血管形成;空载体细胞组骨缺损区新骨形成较少;空白对照组缺损未见修复。结论:胰岛素样生长因子1转染的骨髓基质干细胞/脱钙骨基质复合物具有较好的骨缺损修复功能。
  • 糖尿病骨折大鼠骨痂组织中成骨细胞增殖和骨钙素表达与骨形态发生蛋白2干预的关系 免费阅读 下载全文
  • 背景:有研究表明,糖尿病患者骨折愈合过程中局部骨形态发生蛋白2明显降低,成骨细胞增殖能力下降,骨折延迟愈合,或者不愈合。目的:观察骨形态发生蛋白2治疗糖尿病大鼠骨折愈合过程中骨痂组织成骨细胞增殖和骨钙素的表达,分析骨形成蛋白在糖尿病大鼠骨折愈合过程中的作用。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-09/12在昆明医学院动物实验中心完成。材料:SD雄性大鼠30只,20只腹腔内注射链脲佐菌素破坏胰岛细胞诱导为糖尿病大鼠后,随机均分为骨形态发生蛋白2组、模型对照组,另10只为正常对照大鼠,腹腔内注射等容量生理盐水。方法:3组大鼠行右胫骨上段骨折建立大鼠胫骨骨折模型。骨形态发生蛋白2组用10μg/kg骨形态发生蛋白2治疗,模型对照组及正常对照组给予等渗量生理盐水。主要观察指标:伤后第1,2,4,6周X射线片观察骨折愈合情况,光镜下观察骨痂内成骨细胞数量,放射免疫法测定血清骨钙素表达。结果:骨形态发生蛋白2、正常对照组X射线片显示骨痂生成量多,骨折愈合程度明显优于模型对照组(P〈0.01)。骨形态发生蛋白2组成骨细胞数量明显多于模型对照组,略低于正常对照组。各组血清骨钙素均呈上升趋势,在第2周达到峰值,第4周下降,至第6周进一步下降。模型对照组骨钙素升高幅度明显低于正常对照组(P〈0.01),并且低于骨形态发生蛋白2组。骨形态发生蛋白2组、正常对照组的骨钙素差异无显著性意义。结论:糖尿病大鼠骨折愈合过程中较正常大鼠,骨钙素水平降低,成骨细胞增殖下降,采用骨形态发生蛋白2治疗可提高骨钙素水平,促进成骨细胞增殖,促进骨折愈合。
  • 心脏瓣膜组织工程中理想种植细胞的来源比较 免费阅读 下载全文
  • 背景:现有的人工瓣膜,无论是机械瓣膜还是生物瓣膜,都存在与取材有关、无法从工艺制作方式改进解决的固有缺陷。组织工程心脏瓣膜概念的提出为解决该难题提供了新的方向。目的:通过比较成熟分化血管内皮细胞和骨髓间充质干细胞骨的获取手段、体外增殖能力以及在脱细胞基质上的生长情况,分析何者更适合作为制备组织工程人工心脏瓣膜的种植细胞。设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-06/09在上海市胸科医院动物实验基地完成。材料:用胰蛋白酶(胰酶)-EDTA、TritonX-100、DNase、RNase消化猪主动脉瓣膜获得脱细胞基质。从1只12kg2岁雄性杂交犬大隐静脉、股外侧动脉及肋骨骨髓获取种植细胞。方法:用胰酶消化并收集内皮细胞,收集骨髓细胞,分别进行培养。通过贴壁法获得内皮细胞及骨髓间充质干细胞。利用内皮细胞生长因子诱导骨髓间充质干细胞向内皮细胞分化,并绘制细胞生长曲线。以抗Ⅷ因子抗体以及抗血管内皮生长因子抗体荧光染色,荧光显微镜观察。将细胞种植于脱细胞瓣膜上培养3d后进行扫描电镜观察。主要观察指标:①试验犬伤口愈合情况。②细胞培养、增殖情况。③骨髓来源骨髓间充质干细胞表型分析以及形态学观察。结果:成熟血管内皮细胞体外增殖能力低下,骨髓间充质干细胞则增殖旺盛。生长曲线显示骨髓间充质干细胞的倍增时间约30h,而成熟内皮细胞生长曲线平直。对骨髓间充质干细胞进行抗Ⅷ因子抗体以及抗VEGF抗体荧光染色,可见荧光染色阳性。扫描电镜见种植骨髓间充质干细胞的脱细胞瓣膜上散在星状细胞贴附。结论:骨髓间充质干细胞体外增殖能力强,在内皮细胞生长因子诱导下可向内皮细胞转化,并可以生长贴附于脱细胞瓣膜,是作为组织工程人工心脏瓣膜制备的理想细胞来源。
  • 不同来源成骨细胞构建组织工程骨膜的特异性基因表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:不同来源的种子细胞在体外黏附、增殖、分化的能力不同,保持生物学性状的能力不同,因而构建的组织工程产品生物活性也有所差异。目的:尝试在分子水平了解骨膜来源之成骨细胞和盖骨来源之成骨细胞在构建组织工程骨膜中的分化能力。设计、时间及地点:对比观察,于2007-07/2008-07在陕西省人民医院中心实验室完成。材料:取健康、剖腹产的人羊膜(已取得产妇及家属的同意),按照文献方法制备脱细胞生物衍生羊膜。方法:分别选用人胚骨膜成骨细胞和颅骨成骨细胞为种子细胞,接种于脱细胞生物衍生羊膜上,经过4,6,8d的体外培养,提取总RNA,经过反转录成cDNA,采用实时定量聚合酶链反应对目的基因成骨细胞特异转录因子,成骨细胞特异基因(osterix)以及骨钙素读取扩增循环数(cyclethreshold,Ct)。主要观察指标:①成骨细胞特异转录因子的表达。②成骨细胞特异基因Osterix的表达。③成骨细胞骨钙素Osteocalcin的表达。结果:在组织工程骨膜中,骨膜成骨细胞对转录因子的表达普遍低于颅骨成骨细胞(P〈0.05)。随培养时间的延长,骨膜成骨细胞和颅骨成骨细胞对Osterix的表达均出现缓慢增加,但二者之间没有明显差异。各时间段检测结果均显示颅骨成骨细胞对骨钙素的表达高于骨膜成骨细胞,其中在4,6d差异有显著性意义(P〈0.05)。结论:骨膜成骨细胞与颅骨成骨细胞在与生物衍生材料接触后,仍可保持终末的分化性状。就分化能力而言,颅骨成骨细胞优于骨膜成骨细胞。生物衍生羊膜有助于骨膜成骨细胞保持分化方向。由此可见,不同来源的成骨细胞分化能力有所不同。
  • 体外培养下可持续分泌人血管抑素和内皮抑素基因工程细胞对血管生成的抑制效应 免费阅读 下载全文
  • 背景:以往实验构建了可持续分泌人血管抑素和内皮抑素的基因工程细胞,即人血管抑素/293细胞和人内皮抑素293细胞,并已证明可持续分泌人血管抑素蛋白和人内皮抑素蛋白。但尚不了解其分泌物是否能发挥血管生成的抑制作用。目的:观察以基因工程技术构建的人血管抑素/293细胞和人内皮抑素/293细胞对鸡胚尿囊膜血管新生的抑制效应。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-06/2007-01在解放军总医院老年医学研究所细胞生物学研究室完成。材料:Hek/293细胞为人胚胎肾细胞,由解放军军事医学科学院提供。人血管抑素/293细胞和人内皮抑素/293细胞由课题组前期构建。SPF级鸡胚购自北京维通利华实验动物有限公司。方法:将鸡胚消毒后,置于37℃无菌恒温箱中孵育5d,在距胚头1cm两条卵黄静脉之间的卵壳投影部位磨切暴露尿囊膜,制成假气室,用无菌滤纸封闭窗口,制成鸡胚尿囊膜模型,备用。用灭菌蒸馏水配制体积分数为0.5%甲基纤维素溶液,制成甲基纤维素小杯。卵壳开窗后第3天,分别吸取浓缩的293细胞、人血管抑素/293细胞、人内皮抑素/293细胞培养上清液各20μL,或人血管抑素/293细胞和人内皮抑素/293细胞培养上清液各10μL,加于甲基纤维素小杯中,将其置于鸡胚尿囊膜的两条大血管之间的无血管区。主要观察指标:观察尿囊膜血管生成的变化。结果:共培养9d时,与单纯293细胞上清液组相比,人血管抑素/293细胞上清液或人内皮抑素/293细胞上清液组,甲基纤维素小杯内及邻近区的鸡胚尿囊膜血管明显发育不良,血管分布稀疏,数量明显减少,其一级血管数量虽未明显减少,但其管径较细,而二级血管和三级以下的血管数量明显减少、管径明显变细,伸入尿囊膜边缘区的血管数量减少,管径明显变细。与人血管抑素/293细胞组或人内皮抑素/293细胞组相比,人血管抑素/293细胞+人内皮抑素/293细胞组的一级血管数量和管径未见明显变化,而其二级血管和三级以下血管数量明显减少,血管树消失。结论:人血管抑素/293细胞和人内皮抑素/293细胞的分泌物对鸡胚尿囊膜的血管新生均具有明显的抑制作用,且联合用药抑制作用增强。
  • 组织工程牙周膜的体外构建 免费阅读 下载全文
  • 背景:利用牙周膜干细胞的多向分化潜能修复牙周缺损是近来研究的热点课题。目的:探讨利用可吸收生物材料冻干胶原膜和犬牙周膜干细胞在体外构建组织工程牙周膜的可行性。设计、时间及地点:单一样本观察,于2003-11/2004-10在解放军第四军医大学口腔医院组织工程实验中心完成。材料:生物膜为冻干胶原膜由解放军第四军医大学口腔医院组织工程实验中心提供。从4只1周岁犬的下颌前牙中分离培养牙周膜干细胞。方法:取第3代犬牙周膜干细胞扩增至1×10^7数量级,种植在冻干胶原膜的表面,形成细胞-生物材料复合物,每日更换培养液,倒置相差显微镜动态观察细胞形态和黏附生长状况,体外培养1周左右,组织做扫描电镜、透射电镜和苏木精-伊红染色,观察细胞在冻干胶原膜材料中的生长、增殖以及基质分泌情况。主要观察指标:①光镜观察细胞接种后生长状况。②电镜和组织学观察细胞支架复合结果。结果:培养6d后,犬牙周膜干细胞分泌的基质与支架材料形成网状结构。复合物体外培养1周,细胞黏附在生物支架上,细胞增殖和生长良好,分泌大量基质并形成纤维状结构,细胞复层生长,伸入膜的内部,增殖的细胞和分泌的基质与膜交接成一整体,复合物成为纤维网状组织,基本具备牙周膜的纤维状结构。结论:利用冻干胶原膜为支架,犬牙周膜干细胞为种子细胞,可在体外成功构建组织工程化牙周膜。
  • 实时定量RT-PCR法检测健侧C7神经移位前后神经生长相关蛋白43的变化 免费阅读 下载全文
  • 背景:已有研究证实,周围神经损伤后大脑皮质会出现功能可塑性变化;神经生长相关蛋白43在发育中神经系统的表达特征提示,它与神经发育中突起延伸和突触形成有关,参与突触重建过程。目的:实时定量RT-PCR方法检测实验动物健侧颈7神经根移位前后,不同阶段相应大脑皮质组织神经生长相关蛋白mRNA的相对表达量及动态变化,探讨周围神经修复与中枢神经可塑性的关系。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-09/2008-12在上海市周围神经重点实验室和复旦大学实验动物科学部完成。材料:成年SD大鼠108只,分为臂丛损伤未修复组(n=48)、臂丛损伤修复组(n=48)及对照组(n=12)。方法:大鼠左侧为实验侧,臂丛损伤未修复组在大鼠左侧取锁骨下横形切口,找到臂丛各神经根并造成全臂丛根性撕脱伤。臂丛损伤修复组同法将大鼠全臂丛神经根性撕脱后,取右侧锁骨下切口,显露健侧颈C7神经根备用;取左侧前臂尺神经通过皮下隧道桥接健侧颈7神经根与正中神经端端吻合。对照组为成年雌性正常大鼠,不进行任何处理。主要观察指标:于术后1d,3d,1周,2周,1个月,3个月,6个月,10个月共8个时段及对照组取材,采用SYBRGreenⅠ实时定量RT-PCR法检测健侧颈7神经根移位术前后对侧(右侧)大脑前肢投射区域皮质组织生长相关蛋白43mRNA相对表达量及动态变化。结果:臂丛损伤未修复组对侧(右侧)大脑前肢投射区域皮质组织生长相关蛋白43mRNA的相对表达量变化规律为术后第1天开始升高,第3天达到高峰,然后逐渐降低。术后1d,3d和1周与对照组比较差异具有显著性意义(P〈0.05,P〈0.01)。臂丛损伤修复组对侧(右侧)大脑前肢投射区域皮质组织生长相关蛋白43mRNA的相对表达量变化规律为术后第1天开始升高,第3天达到高峰,然后逐渐降低,至术后3个月再次升高,6个月达到高峰,然后逐渐降低。术后1d,3d,1周和6个月与对照组比较差异具有显著性意义(P〈0.05,P〈0.01)。结论:臂丛损伤健侧颈7移位术前后相应大脑皮质生长相关蛋白表达变化与临床现象一致,提示生长相关蛋白在大脑皮质及突触可塑性方面发挥作用。
  • 自制旋转持续静脉输液装置在大鼠同种异体小肠移植排斥模型构建中的应用 免费阅读 下载全文
  • 背景:构建大鼠小肠移植模型是研究小肠移植排斥反应的重要基础,实验中对动物无法进行长期持续的静脉输液成为延误实验顺利开展的最大障碍。目的:将自制旋转持续静脉输液装置与大鼠异位小肠移植模型相结合,验证输液装置的可靠性和动物模型的稳定性。设计、时间及地点:随机区组,对照观察实验,于2008-03/06在解放军第四军医大学西京医院消化病研究所全军医学重点实验室完成。材料:选用健康雄性近交系F344/NCrl BR大鼠48只为供体,LEW/Crl大鼠48只为受体,建立同种异体节段性异位小肠移植模型。方法:将移植后的大鼠以随机化完全区组设计分为3组(n=16):对照组、输液组和他克莫司治疗组。对照组大鼠仅行小肠移植,移植前后不做持续静脉输液。输液组大鼠给予持续输注肠外营养液。他克莫司治疗组持续输注肠外营养液+静脉注射他克莫司0.5mg/(kg·d)。主要观察指标:移植后观察移植大鼠的一般状况和存活时间,并于移植后3,5,7d分别取各组大鼠移植肠标本(n=3)进行组织病理学检查,每组剩余的大鼠作存活时间观察,观察期限为5周。结果:对照组大鼠平均存活时间为(5.4±1.7)d,手术成功率56.3%。采用旋转输液装置的输液组和他克莫司治疗组大鼠手术成功率为90.6%,与对照组比较,差异有显著性意义(P〈0.01)。输液组大鼠平均存活(7.2±2.8)d,最终全部死于急性排斥反应。他克莫司治疗组剩余大鼠的输液时间〉30d,存活时间超过5周,与对照组和输液组比较,差异有统计学意义(P〈0.05)。对照组和输液组大鼠术后3,5,7d移植肠组织病理学检查分别符合轻、中、重度排斥反应。他克莫司治疗组大鼠术后3,5,7d未见明显排斥反应征象。结论:旋转持续静脉输液装置制作简单,固定安全可靠,能成功地为研究大鼠连续输液30d以上,与异位小肠移植模型联合应用,能建立稳定可靠的排斥反应模型。
  • 成骨生长肽对骨髓基质细胞增殖和向成骨方向分化的影响(英文) 免费阅读 下载全文
  • 背景:成骨生长肽是新近发现的一种具有促进成骨作用的生长因子,其对骨髓基质细胞增殖分化作用受到越来越多的关注。目的:验证成骨生长肽在体外对骨髓基质细胞增殖和成骨向分化的影响。设计、时间及地点:随机对照实验,于2006-02/06在教育部口腔生物医学工程重点实验室完成。材料:6周龄雄性SD大鼠用于骨髓基质细胞提取;成骨生长肽为Sigma公司产品。方法:体外培养骨髓基质细胞,加入含不同浓度(10^-11,10^-10,10^-9,10^-8,10^-7mol/L)成骨生长肽及小牛血清的α-MEM培养基培养,以单纯含小牛血清的α-MEM培养基培养作对照。主要观察指标:①骨髓基质细胞的鉴定。②用四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖情况。③酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶的表达。④反转录-聚合酶链反应法检测细胞内核心结合因子1mRNA的表达。结果:成骨生长肽对骨髓基质细胞增殖有促进作用(P〈0.05),最大效应浓度为10^-9mol/L;能增加细胞内碱性磷酸酶活性(P〈0.05),最大效应浓度为10^-8mol/L;可诱导核心结合因子1mRNA的表达(P〈0.05)。结论:成骨生长肽可促进骨髓基质细胞的增殖,并通过诱导其内核心结合因子1mRNA的表达促进其成骨向的分化。
  • 结缔组织生长因子对体外培养的兔关节软骨细胞增殖和表型的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:在关节软骨损伤修复的过程中,由于目前实验室中常用的细胞因子存在半衰期短、价格昂贵等缺点,不能广泛应用于临床。目的:假设结缔组织生长因子对体外培养的兔关节软骨细胞增殖和表型有一定的影响,为组织学方法修复关节软骨缺损寻找新的细胞因子。设计、时间及地点:随机区组设计对照实验,于2007-08/2008-02在深圳龙岗中心医院完成。材料:健康1月龄新西兰大白兔2只;结缔组织生长因子为Propetech公司产品。方法:获取兔关节软骨组织,将其剪碎,Ⅱ型胶原酶消化法原代分离培养兔关节软骨细胞,待细胞铺满瓶底80%胰酶消化传代,取其第2代,细胞贴壁后随机分组,实验组分别加入30,50,100,150μg/L的结缔组织生长因子,对照组仅加入DMEM培养液进行体外培养。主要观察指标:采用倒置相差显微镜下观察细胞形态及数量改变,采用四唑盐(MTT)法检测不同浓度的结缔组织生长因子对软骨细胞增殖的影响,免疫组织化学法(SABC法)检测Ⅱ型胶原的表达情况。结果:①结缔组织生长因子作用下的兔关节软骨细胞生长迅速,呈典型的软骨细胞形态,部分细胞聚集成团,形成软骨结节。②结缔组织生长因子能显著促进兔关节软骨细胞增殖,与对照组相比差异具有显著性意义(P〈0.01)。不同质量浓度的结缔组织生长因子均能促软骨细胞增殖,100μg/L为最佳作用质量浓度(P〈0.01)。③结缔组织生长因子作用下的兔关节软骨细胞Ⅱ型胶原表达增多,且始终为阳性。结论:结缔组织生长因子可以刺激体外培养的兔关节软骨细胞增殖,促进软骨特异性Ⅱ型胶原表达,维持软骨表型。结缔组织生长因子可能用来作为组织工程学修复软骨缺损,治疗骨关节炎的新的生长因子。
  • 反义基质金属蛋白酶2基因影响人增殖期血管瘤的体内实验(英文) 免费阅读 下载全文
  • 背景:研究表明,通过转染反义基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)基因抑制增殖期血管瘤组织中MMP-2的分泌将成为增殖期血管瘤治疗的重要手段。目的:观察反义MMP-2cDNA基因感染对人增殖期血管瘤裸小鼠移植瘤生长的影响。设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察,实验于2003-08/2004-09在四川大学华西临床医学院完成。材料:BALB/c-nu/nu裸小鼠(简称为裸鼠)18只,体质量20g左右;取1名出生52d女性患儿左胸壁的海绵状血管瘤,病理诊断证实为增殖期血管瘤。方法:将手术切除的人增殖期血管瘤新鲜标本切分为5mm×4mm×3mm小块,于1h内移植于18只裸小鼠双侧腋部皮下,制备荷瘤裸小鼠血管瘤移植模型。将移植瘤块成活后(45d)15只裸鼠进行分组治疗,Ad-GFP组,Ad-aMMP-2组分别沿肿瘤长径多方向瘤内注射重组腺病毒液Ad-GFP和Ad-aMMP-2,对照组注射等量的PBS,每组5只。隔日瘤内注射1次,共注射4次。主要观察指标:①大体观察肿瘤体积的变化及各组裸鼠肿瘤块坏死面积的比较。②绿色荧光蛋白在各组裸鼠体内的表达。③肿瘤组织形态学变化(大体、苏木精-伊红染色及透射电镜观察)。④免疫组织化学检测MMP-2cDNA基因及微血管密度的表达。⑤流式细胞仪检测肿瘤细胞的生长周期和凋亡。结果:①Ad-aMMP-2能抑制体内血管瘤的生长,没有观察到明显的毒副作用。3组肿瘤均有不同程度的坏死,其中Ad-aMMP-2组面积坏死率明显高于对照组和Ad-GFP组(P〈0.01)。②组织学切片可见Ad-GFP组绿色荧光蛋白基因的表达。③大体观察对照组和Ad-GFP组瘤组织大;Ad-aMMP-2组瘤组织相对较小。苏木精-伊红染色可见对照组和Ad-GFP组内皮细胞密集,细胞呈条索状或团块状排列;Ad-aMMP-2组肿瘤有多处出血和凝固性的片状坏死灶。透射电镜观察对组血管内皮细胞形态正常;Ad-GFP组瘤细胞大,核仁明显;Ad-aMMP-2组部分血管内皮细胞核内染色质固缩,聚积成团块状形成凋亡小体。④Ad-aMMP-2组MMP-2和微血管密度较对照组和Ad-GFP组明显下降(P〈0.05)。⑤Ad-aMMP-2组G0/G1期百分率大于其他两组(P〈0.05),增殖指数降低;Ad-aMMP-2组细胞凋亡率大于对照组和Ad-GFP组(P〈0.05),凋亡指数明显增加。结论:通过反义MMP-2基因阻断人增殖期血管瘤的生长是可行的,其机制主要是通过抑制血管内皮细胞分泌MMP-2导致局部缺血起作用的。
  • X射线电离辐射对成年小鼠睾丸组织的损伤 免费阅读 下载全文
  • 背景:X射线电离辐射对睾丸的损伤,最直观的是通过对组织切片进行染色,近而进行形态学观察,可以直观地观察到组织学的损伤。目的:观察X射线电离辐射后成年小鼠睾丸组织损伤的形态学变化。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/10在延安大学医学院实验室完成。材料:BALB/c健康雄性的成年小鼠(6~8周龄)18只,均购自解放军第四军医大学,体质量(20.0±2.5)g,实验前2周饲养于室温(20±3)℃,空气湿度50%以上,饲料垫料均干燥消毒,标准饲料饮水无限制。方法:采用辐射剂量1.0Gy和2.0Gy的X射线对成年小鼠进行全身照射,于照射后2周取小鼠睾丸组织,称质量,制备标本,苏木精-伊红染色,示睾丸组织变化;对照组不进行照射。主要观察指标:正常小鼠睾丸质量与照射后睾丸的质量之比;正常睾丸组织生精小管与照射后睾丸生精小管结构的变化的对比。结果:正常小鼠体质量与辐射组体质量无明显差异,但睾丸质量/体质量之比随照射剂量不同出现明显差异。苏木精-伊红染色显示睾丸组织在正常对照组小鼠睾丸组织生精小管管腔形状规则,管壁基膜完整,管腔内生精细胞层数多,排列规则紧密,管腔内充满成熟的精子在照射后出现病理性变化:睾丸组织内各级生精细胞排列混乱,生精细胞剥离脱落,空洞形成,管腔内精子数量明显减少;随照射剂量增加,生精小管结构明显紊乱,管腔皱缩、塌陷,生精上皮明显变薄,排列松散,管腔内已无成熟精子。结论:X射线辐射后小鼠睾丸质量明显减少,且随照射剂量的不同有明显差异,损伤程度随剂量的增加而加重。
  • RAC1活化介导缺氧的人脐静脉内皮细胞凋亡 免费阅读 下载全文
  • 背景:目前研究证实,Rac1蛋白能够调控甘油醛-3-磷酸脱氢酶氧化酶的表达,刺激内源性活性氧产生,引起内皮细胞毒性改变。目的:探讨Rac1蛋白在缺氧诱导的人血管内皮细胞凋亡中的作用及其调控机制。设计、时间及地点:单一样本观察,于2007-01/2008-05在解放军沈阳军区总医院医学实验科完成。材料:自备人脐静脉内皮细胞、Phoenix amphotropic 293包装细胞、持续活化型pLNCX-L61Rac1和主导抑制的pLNCX-N17Rac1反转录病毒真核表达载体。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将细胞以体积分数为1%O2、5%CO2及94%N2缺氧条件下培养72h。用持续活化型pLNCX-L61Rac1(L61Rac1感染组)和主导抑制型pLNCX-N17Rac1(N17Rac1感染组)反转录病毒真核表达载体转染人脐静脉内皮细胞,并筛选稳定表达的细胞克隆。主要观察指标:①感染后稳定表达阳性克隆筛选。②采用pull-down和Western blot分析感染前后细胞内Racl的活化。③采用持续缺氧的方法诱导内皮细胞凋亡,用TUNEL染色和Western blot检测缺氧72h后各实验组细胞中cleave-caspase3表达。④应用免疫荧光和Western blot分析血清反应因子的表达和定位。结果:筛选出稳定表达持续活化型pLNCX-L61Rac1和主导抑制型的pLNCX-N17Rac1的人脐静脉内皮细胞克隆;应用pull down和Western blot证实各组细胞内Racl的活化改变;与人脐静脉内皮细胞和N17Rac1感染细胞比较,缺氧72h后L61Rac1细胞发生明显凋亡。进一步应用Western blot分析证实3组细胞中血清反应因子表达无明显改变,但人脐静脉内皮细胞和N17Rac1-HUVECs中血清反应因子为入核表达,而L61Rac1-HUVECs中血清反应因子蛋白在细胞核周大量表达,血清反应因子发生出核转位。结论:Rac1参与了内皮细胞凋亡的调控,机制可能与其调控血清反应因子蛋白核转位有关。
  • 氨基胍干预对第三腰椎横突综合征模型大鼠骨骼肌诱导型一氧化氮合酶及一氧化氮的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:研究表明,诱导型一氧化氮合酶及一氧化氮在急性软组织损伤及其修复过程中起到重要的作用,但目前有关其在慢性软组织损伤修复过程中的作用,及氨基胍对其作用的影响尚不明确。目的:探讨慢性软组织损伤模型——第三腰椎横突综合征模型大鼠损伤局部软组织诱导型一氧化氮合酶活性及一氧化氮含量与炎症反应及软组织损伤程度的关系,并观察氨基胍干预后对以上关系的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-09/2008-09在解放军海军总医院海战伤研究中心二级实验室完成。材料:将96只SD大鼠抽签法随机分为正常组、模型组及氨基胍组共3组,每组32只。方法:模型组将0.3cm×0.3cm大小的明胶海绵置入第三腰椎横突后半段深筋膜中层下制备第三腰椎横突综合征动物模型;氨基胍组从造模14d开始,按50mg/kg剂量经腹膜内给药,2次/d,直至处死前1d为止;正常组为不做任何干预。主要观察指标:于首次氨基胍干预后1,3,7,14d检测各组第三腰椎横突周围骨骼肌及其他软组织诱导型一氧化氮合酶免疫组织化学灰度值、一氧化氮含量及观察组织形态学变化。结果:模型组损伤局部软组织诱导型一氧化氮合酶活性及一氧化氮含量比正常组明显升高(P〈0.01),且与损伤局部炎症反应及组织损伤程度相一致。氨基胍组诱导型一氧化氮合酶活性及一氧化氮含量比模型组明显降低(P〈0.01),损伤局部炎症反应及组织损伤程度明显减轻。结论:第三腰椎横突综合征动物模型中由炎性因子诱导诱导型一氧化氮合酶大量表达生成的高浓度的一氧化氮是造成慢性软组织损伤的重要因素。而这种作用可以被氨基胍所抑制,为慢性软组织损伤的修复创造了有利条件。
  • 兔前交叉韧带断裂后外侧半月板的组织学退变 免费阅读 下载全文
  • 背景:前交叉韧带切断后可引起膝关节透明软骨的退变,导致骨关节炎的发生,但对外侧半月板的影响目前尚未见文献报道。目的:观察兔前交叉韧带切断后外侧半月板组织学变化。设计、时间及地点:同体对照观察,于2007-09/12在中南大学湘雅医学院动物学部完成。材料:6月龄雄性新西兰大白兔48只,实验初始体质量(2.5±0.3)kg。方法:48只大白兔双后侧膝关节按简单随机法配对分为实验侧和对照侧造模。实验侧行前交叉韧带切断手术。对照侧显露前交叉韧带但不行切断,行止血及体积分数为3%双氧水、生理盐水交替冲洗后缝合切口。选取造模后第1,3,6,8周为观测时间点,每个时间点随机处死12只。主要观察指标:对外侧半月板进行大体观察和组织学检查。结果:前交叉韧带切断组外侧半月板第1周即可见退变,随时间延长退变逐渐加重,对照组未见明显退变。半月板纤维软骨退变组织学评分:实验组(第1,3,6,8周)均高于对照组(P〈0.05);实验组第6,8周均高于第1,3周,差异有显著性意义(P〈0.05);实验组第1,3周差异无显著性意义(P〉0.05)。结论:前交叉韧带断裂可引起外侧半月板退变。
  • 氧化应激对大鼠髓核细胞凋亡的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:细胞凋亡在椎间盘退变过程中发挥重要作用,而导致细胞凋亡的因素很多,氧化应激是导致细胞凋亡的一个重要因素。目的:从细胞内信号转导水平验证过氧化氢对大鼠髓核细胞氧化应激损伤的影响。设计、时间及地点:单一样本观察,试验于2008-03/10在山东省创伤骨科研究所完成。材料:p38MAPK特异性阻断剂(SB203580)、JNK特异性阻断剂(SP600125)购自碧云天生物技术有限公司;大鼠椎间盘来自2只新生24h SD大鼠。方法:原代培养大鼠髓核细胞,将生长良好的髓核细胞制成细胞悬液,随即分为4组:H202组:用0,50,100,200,400,800μmol/L H2O2刺激;对照组:不加刺激的细胞;SB203580+H2O2组:给予特异性p38MAPK阻断剂SB203580预孵育细胞,再给予H2O2刺激;SP600125+H2O2组:给予特异性JNK阻断剂SP600125预孵育细胞,再给予H2O2刺激。上述处理后检测相关指标。主要观察指标:以免疫组织化学检测P-p38和P-JNK的表达情况及表达位置;Western印迹法检测SAPK/JNK、p38MAPK及其磷酸化组分的表达。结果:H2O2能够激活髓核细胞内p38和JNK的活性;SB203580能够有效地抑制p38MAPK的活性,而SP600125则能够有效的抑制JNK的活性;免疫荧光显示P-p38MAPK和P-JNK在细胞质和细胞核均有表达中,而对照组未发现。结论:大鼠髓核细胞受氧化应激后可通过p38MAPK和JNK通路导致细胞凋亡。
  • 关节镜下自体、异体骨-髌腱-骨与半腱肌腱3种重建前交叉韧带方法的疗效比较 免费阅读 下载全文
  • 背景:关节镜下重建前交叉韧带的移植物的选择存在很多争论。目前两个以上移植物之间的比较研究还比较少见。目的:比较分析膝关节镜下自体、异体骨-髌腱-骨与半腱肌腱3种重建前交叉韧带的疗效。设计、时间及地点:回顾分析,对比观察,于1998-06/2005-06在解放军广州军区广州总医院骨科完成。对象:选择同期收治的前交叉韧带损伤患者142例,其中异体髌腱移植87例,自体髌腱移植34例,自体双股半腱肌21例。方法:回顾分析34例膝关节镜下自体骨-髌腱-骨移植、21例自体半腱肌腱移植和87例异体骨-髌腱-骨移植重建前交叉韧带的情况,随访31~84个月。采用Lysholm膝关节评分、国际膝关节文献编制委员会分级评估标准(IKDC)和KT2000评价疗效,并检测术后住院期间体温。主要观察指标:①各组患者Lysholm评分、IKDC分级。②不良事件及副反应。结果:3组间患者满意度、关节稳定性及功能差异均无显著性意义。自体骨-髌腱-骨重建组膝前痛发生率较异体骨-髌腱-骨、半腱肌腱组高。异体骨-髌腱-骨术后发热时间平均10.1d,自体骨-髌腱-骨和自体半腱肌组分别为4.9d和5.1d,与异体组相比差异有显著性意义。11例异体骨-髌腱-骨出现排斥反应,表现为胫骨隧道外口持续果酱样液体流出。经换药、激素或消炎痛治疗后痊愈。结论:关节镜下自体、异体骨-髌腱-骨与半腱肌腱移植重建前交叉韧带的疗效相同,但各组间供区并发症、排斥反应等并发症之间的差异将影响人们对移植物的选择。
  • 转化生长因子β1对长波紫外线照射皮肤成纤维细胞胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子表达的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:研究认为衰老和光老化状态下生长因子的表达不一定一致,生长因子与皮肤老化的关系越来越受到重视。目的:验证转化生长因子β1对长波紫外线照射体外培养的皮肤成纤维细胞胰岛素样生长因子1、角质细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子表达的影响。设计、时间及地点:以体外培养细胞为观察对象,随机重复实验,于2006-07/2008-03在解放军第四军医大学全军整形外科研究所进行。材料:成纤维细胞来自解放军第四军医大学整形外科门诊患者包皮,采用组织块法培养获得。方法:通过酶联免疫法(ELISA)使用不同剂量长波紫外线(0,5,10,20J/cm2)照射体外培养的皮肤成纤维细胞,测定上清液中胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子的质量浓度;以长波紫外线15J/cm2为照射剂量,选择不同剂量转化生长因子β1即小剂量组(0.1μg/L)、中剂量组(1μg/L)、大剂量组(10μg/L)对培养的皮肤成纤维细胞进行干预。主要观察指标:不同剂量长波紫外线照射、以及转化生长因子β1处理后皮肤成纤维细胞胰岛素样生长因子1、血管内皮细胞生长因子、角质形成细胞生长因子的表达。结果:长波紫外线照射体外培养的皮肤成纤维细胞导致胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子分泌水平下降,血管内皮细胞生长因子分泌升高;转化生长因子β1处理后,转化生长因子β1剂量依赖性地提高长波紫外线照射体外培养的皮肤成纤维细胞分泌的3种细胞因子的水平。转化生长因子β1大剂量组胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子含量明显高于长波紫外线照射组(P〈0.01)。结论:长波紫外线照射抑制体外培养成纤维细胞中胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子表达,促进血管内皮细胞生长因子表达。转化生长因子β1可提高长波紫外线照射体外培养的皮肤成纤维细胞分泌胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子3种细胞因子的水平,有利于真皮内结构的恢复和重建。
  • 碱性成纤维细胞生长因子促进猫角膜内皮细胞的增殖作用 免费阅读 下载全文
  • 背景:有实验报道,碱性成纤维细胞生长因子能改变角膜内皮细胞形状、促进其分裂和趋化,刺激活体和体外角膜内皮细胞的损伤修复。目的:观察碱性成纤维细胞生长因子对猫角膜内皮细胞增殖的影响。设计、时间及地点:细胞形态学观察实验,2005-01/2006-12在青岛大学医学院附属医院中心实验室完成。材料:家猫购买自青岛大学医学院附属医院动物实验中心。方法:猫角膜内皮细胞原代培养,行NSE免疫组织化学染色鉴定细胞的类型、纯度及生理特性。传1代后,分别在培养液中加1,10,100μL的碱性成纤维细胞生长因子,继续卵化1~5d。主要观察指标:加药后第1,3,5天分别利用MTT法测定在490nm处的吸光度值来判断角膜内皮细胞增殖情况;同时应用倒置相差显微镜观察细胞形态及透射电镜检测细胞超微结构。结果:碱性成纤维细胞生长因子作用组加药后1,3,5d,MTT法测定猫角膜内皮细胞在490nm处的吸光度值明显高于对照组,其中10μg/L作用组差别最显著。结论:碱性成纤维细胞生长因子作用能促进猫角膜内皮细胞的增殖,相对有效浓度为10μg/L。
  • 针刺2型糖尿病大鼠脂肪细胞因子的变化 免费阅读 下载全文
  • 背景:脂肪细胞因子在2型糖尿病发病中的作用尚未明确;针灸治疗2型糖尿病早中期具有良好的疗效,那么针刺对脂肪细胞因子是否也有影响呢?目的:验证脂肪细胞因子与2型糖尿病的关系以及针刺对2型糖尿病机体脂肪细胞因子的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-08/2007-01在南京中医药大学动物实验中心完成。材料:刚断乳的SD雄性大鼠100只,平均体质量50g左右,随机分为普通饲料组20只,高脂饲料组80只,高脂饲料组大鼠体质量高于普通饲料组平均体质量20%为食源性肥胖大鼠。方法:给40只食源性肥胖大鼠腹腔注射小剂量链脲霉素,成功造成2型糖尿病模型27只,随机分为模型组、针刺组(针刺后三里、内庭和胰俞,1次/d)及优降糖组[格列本脲片1.6mg/kg给药,1次/d],每组各9只,处理4周,与随机抽取的9只正常饲料大鼠做对照。主要观察指标:以快速血糖仪检测空腹血糖、放免法检测空腹胰岛素、ELISA法检测血清脂联素、抵抗素和肿瘤坏死因子α质量浓度。结果:模型组空腹血糖、空腹胰岛素、肿瘤坏死因子α明显高于正常组(P〈0.05或0.01);针刺组与模型组比较,空腹血糖、空腹胰岛素、肿瘤坏死因子α明显下降(P〈0.05或0.01),接近正常组水平;优降糖组与模型组比较,空腹血糖明显下降(P〈0.01),接近正常组水平,空腹胰岛素和肿瘤坏死因子α有所下降,和正常组仍有差异;模型组、正常组、针刺组、优降糖组血清脂联素和抵抗素水平差异无显著性意义(P〉0.05)。结论:血清脂联素和抵抗素水平与2型糖尿病的发病无明显关系,血清肿瘤坏死因子α可能参与了2型糖尿病的发病机制;针刺和优降糖均具有明显的降血糖、改善胰岛素抵抗、抑制血清肿瘤坏死因子α作用,针刺作用优于优降糖。
  • 人瘢痕疙瘩成纤维细胞IKKβ特异性siRNA的筛选和载体构建 免费阅读 下载全文
  • 背景:近年来的研究表明核转录因子κB通过调控多种基因的表达,参与细胞生长、发育、凋亡等多种生理功能,并在细胞恶性转化、纤维化等方面起重要作用。核转录因子κB抑制蛋白激酶(inhibitor of kappa B kinase,IKK)β是核转录因子κB激活通路中的关键激酶,被抑制后可以阻断核转录因子κB的活化过程,通过siRNA干扰沉默IKKβ基因,下调核转录因子κB。目的:体外合成并筛选人瘢痕疙瘩成纤维细胞特异性IKKβ-siRNA,并构建其表达载体。设计、时间及地点:细胞观察实验,于2008-04/2008-10在解放军广州军区总医院中心实验室完成。材料:细胞来源为珠江医院整形外科25~40岁患者切除的瘢痕疙瘩标本,患者知情同意。方法:化学合成3条IKKβ-siRNA,分别转染体外培养的人瘢痕疙瘩成纤维细胞,采用反转录-聚合酶链反应技术检测所合成的SiRNA对IKKβ表达的抑制,筛选出特异性IKKβ-siRNA,并采用PU6质粒构建载体。主要观察指标:①RT-Q-PCR检测结果。②载体基因连接产物酶切鉴定。③重组质粒测序鉴定。结果:经实时定量反转录-聚合酶链反应检测,合成的3条IKKβ-siRNA链中,IKKβ-siRNA-2有明显抑制IKKβmRNA表达的作用,IKKβ-siRNA-1、IKKβ-siRNA-3干扰效果不明显。并通过酶切鉴定和测序结果证明成功构建IKKβ-siRNA载体。结论:应用反转录-聚合酶链反应可筛选出针对人瘢痕疙瘩成纤维细胞的特异性IKKβ-siRNA;可构建具有干扰效果的IKKβ-siRNA表达载体。
  • 新鲜与防腐股骨近段标本的生物力学差异 免费阅读 下载全文
  • 背景:由于新鲜标本的缺乏,防腐标本用于实验研究增多。目的:观察新鲜与防腐股骨标本之间的生物力学特性的差异。设计、时间及地点:对比观察试验,于2008-08/09在南方医科大学广东省生物力学重点实验室完成。材料:随机选择地区、种族、性别相同的青壮年新鲜和甲醛浸泡6~12个月的防腐股骨头标本各6个,X射线摄片排除骨折、肿瘤、结核及先天畸形。方法:选择静止站立单腿支撑股骨头受力模型,MTS生物力学测试机测试800N载荷下的股骨近段的载荷-应变关系、垂直位移和刚度,施加在模型上的总载荷为800N,以200N分级增量方式加载;试验机速度控制在1.4mm/min进行加载。主要观察指标:①新鲜与防腐标本的载荷-应变关系。②股骨头的载荷-位移关系。③股骨头的轴向刚度。结果:新鲜和防腐标本在正常生理载荷下的载荷-应变关系都基本呈线性变化;在载荷为800N时,防腐标本的位移明显大于新鲜标本的位移(P〈0.001);新鲜标本的轴向刚度大于防腐标本(P〈0.001)。结论:由于甲醛对防腐股骨标本骨质的影响,平均应变、垂直位移及刚度均与新鲜标本有明显差异,但仍能有效维持近段股骨的正常力学传递,在新鲜标本的获得日益困难的情况下,防腐股骨标本在一定程度上可以替代新鲜标本进行生物力学研究。
  • A型肉毒毒素预防膝关节纤维性粘连 免费阅读 下载全文
  • 背景:A型肉毒毒素通过阻断白细胞介素1的激活而发挥其预防关节纤维性粘连的作用。目的:验证兔膝关节术后腔内注射A型肉毒毒素预防关节纤维性粘连的效果。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-07/10在山东潍坊医学院及潍坊市人民医院完成。材料:A型肉毒毒素为兰州生物制品研究所产品。4月龄健康雄性新西兰大白兔20只,体质量2.8~3.2kg,随机分为实验组和对照组,每组10只。方法:所有实验动物行右后肢膝关节前交叉韧带横断术诱导关节纤维性粘连形成。术后1周实验组与对照组膝关节腔内分别穿刺注射A型肉毒毒素0.6mL(50U)、生理盐水0.6mL,注射1次/周,共3次。主要观察指标:术后6周对所有实验动物右后肢膝关节行生物力学测定、大体观察、粘连程度半定量评分以及组织学观察。结果:生物力学测定结果表明,实验组屈曲挛缩角度明显小于对照组(P〈0.01),实验组粘连发生率及半定量评分明显低于对照组(P=0.005,P〈0.01)。光镜下组织学观察,实验组仅有薄而松散的胶原纤维存在,成纤维细胞稀少,对照组有大量厚而致密的胶原纤维堆积,伴大量成纤维细胞。实验组成纤维细胞计数明显少于对照组,差异有显著性意义(P〈0.01)。结论:A型肉毒毒素组膝关节纤维性粘连的程度明显低于对照组,说明A型肉毒毒素可以有效预防术后膝关节纤维性粘连。
  • 失神经固定制动不同时间大鼠降钙素基因相关肽水平变化对骨密度的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:大量研究认为降钙素基因相关肽具有刺激成骨、增加骨量,促进神经再生等诸多功能,然而不同制动后降钙素基因相关肽的变化规律及对骨质疏松形成过程中的作用和机制至今仍不十分清楚。目的:观察失神经固定后神经肽物质对大鼠骨密度的影响及其可能机制。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2006-09/11在湘南学院附属医院完成。材料:10周龄SD雄性大鼠96只,体质量220~250g,用于制备失神经支配模型。方法:96只SD大鼠按数字表法随机分为3批,每批4组,每组8只。失神经支配组:大鼠麻醉后,先于俯卧位行两侧后肢股外侧切口,于股骨转子水平切断双侧坐骨神经;再置大鼠于仰卧位,行两侧股正中纵切口,于腹股沟韧带水平切断大鼠两侧股神经,远端游离5mm,缝合切口。固定组:大鼠固定与失神经支配手术同时进行,麻醉后应用管型石膏分别固定1,10,30,60d。对照组行假手术,即在造模过程中仅暴露神经,然后缝合伤口。主要观察指标:实验期间大鼠的一般情况;造模后1,10,30,60d各组大鼠胫骨骨密度和降钙素基因相关肽的变化及降钙素基因相关肽水平与骨密度水平相关性。结果:96只SD大鼠均进入结果分析。①大鼠失神经造模后两后肢无主动屈伸功能,前进时以臀部肌群帮助行走,后退时靠腰腹部肌群收缩代偿,活动量显著减少。固定组大鼠精神好,活动时后肢拖地。对照组大鼠无明显异常。②造模后10,30,60d失神经支配组大鼠胫骨降钙素基因相关肽的表达低于对照组(P〈0.05~0.01);而固定组仅造模后30d时与对照组之间存在显著性差异(P〈0.05)。造模后10,60d固定组高于失神经支配组(P〈0.05~0.01)。③与对照组相比,失神经支配组、固定组造模后30,60d骨密度降低(P〈0.05~0.01);失神经支配组和固定组造模30d时骨密度开始下降,60d后下降明显,组内比较差异有显著性意义(P〈0.05~0.01)。④失神经后降钙素基因相关肽与骨密度水平变化高度相关(P〈0.05);而固定后降钙素基因相关肽与骨密度水平变化相关程度不高。结论:神经的完整性是降钙素基因相关肽水平维持正常的关键,动态观察降钙素基因相关肽水平变化,可在一定程度上预测失神经性骨质疏松形成、发展。
  • Wnt7b重组反转录病毒载体的构建及其在C3H10T1/2中的表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:诱导骨髓基质干细胞成骨条件的优化与探讨是再生医学研究的热点。前期实验发现Wnt7b在骨发育中的作用,此次实验是前期工作的延续。目的:构建Wnt7b重组反转录病毒载体,观察其在C3H10T1/2中的表达。设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2005-01/2008-08在华盛顿大学医学院和同济大学附属第十人民医院中心实验室完成。材料:pXy-Wnt7b购于ATCC公司,载体pCIG-IRES-EGFP,pLef-Luciferase,pCMV-Rennilla,反转录病毒载体pSFG和包装细胞GP293由华盛顿大学医学院提供。方法:用多步亚克隆技术构建目的基因Wnt7b和标记基因加强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)双表达重组反转录病毒载体pSFG-Wnt7b-IRES-EGFP,在条件培养液中经GP293包装,并在常规培养液中释放出假病毒并将其转染C3H10T1/2细胞,检测成骨活性诱导中的作用和荧光素酶报告基因检测信号转导通路。主要观察指标:①Wnt7b重组反转录病毒转染C3H10T1/2细胞的表达。②Wnt7b诱导C3H10T1/2碱性磷酸酶生成分析。③Wnt7b信号转导分析。结果:构建目的基因的Wnt7b和标记基因EGFP双表达重组反转录病毒载体能够高效地表达,转染C3H10T1/2细胞后能诱导碱性磷酸酶的生成。Wnt7b信号转导分析可见Wnt7b成骨作用通过Noncanonical途径。结论:Wnt7b在C3H10T1/2中能高效表达,能显著诱导骨发育的重要标志--碱性磷酸酶的生成,Noncanonical途径在其中起重要作用。
  • 重组人骨形态发生蛋白2腺病毒载体的构建与鉴定 免费阅读 下载全文
  • 背景:目前报道的重组腺病毒构建方法较复杂,构建周期长,导致重组腺病毒构建的成功率较低。GatewayTM技术是基于λ噬菌体的位点特异性高效重组系统,其构建重组病毒载体具有快捷高效的特点。目的:构建含人骨形态发生蛋白2基因的重组腺病毒载体,为应用骨形态发生蛋白2基因治疗的研究奠定基础。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2008-02/06在深圳市第二人民医院中心实验室完成。材料:pOTB7-BMP-2质粒、HEK293为ATTC产品;BLOCK-iTTM Adenovirus Expression System为Invitrogen产品;大肠杆菌DH5α为Biontex产品。方法:用聚合酶链反应方法扩增骨形态发生蛋白2目的基因,并插入载体pMD19-T Simple Vector中进行测序分析。将骨形态发生蛋白2基因亚克隆到穿梭载体pEC3.1(+)中,构建pEC3.1-BMP-2穿梭质粒,再将其中的表达盒通过重组克隆到pAd/BLOCK-iT?-DEST腺病毒载体中,线性化后转293细胞进行包装获得重组腺病毒rAd-BMP2。主要观察指标:①目的基因骨形态发生蛋白2的聚合酶链反应扩增。②重组质粒TS-BMP2的构建。③重组pEC3.1-BMP2的构建。④重组pAd-BMP2的构建。⑤重组腺病毒的制备与鉴定。结果:正确扩增长约1.2kb的骨形态发生蛋白2cDNA,并成功地构建其腺病毒载体,经线性化的pAd-BMP2DNA转染HEK293细胞,包装、扩增后得到人骨形态发生蛋白2重组腺病毒(rAd-BMP2),其滴度约为1×10^10PFU/mL,该滴度可满足进一步的骨形态发生蛋白2成骨作用的研究。结论:成功地构建重组人骨形态发生蛋白2腺病毒载体。
  • 重组腺病毒载体Ad5-hBDNF-EGFP的构建与鉴定 免费阅读 下载全文
  • 背景:基因治疗是目前脊髓损伤治疗的方向,目的基因和载体是基因治疗的关键。目的:构建携带增强型绿色荧光蛋白基因(Enhanced green fluorescence protein,EGFP)标志人脑源性神经营养因子(humanbrain-derived neurotrophic factor,hBDNF)基因重组腺病毒载体。设计、时间及地点:单一样本观察,实验于2007-09/2008-06在福建医科大学附属第一医院完成。材料:感受态大肠杆菌DH-5α购自美国Stratagene公司;pDC316-hBDNF、载体质粒pDC316-mCMV-EGFP、腺病毒骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre、腺病毒包装系统AdMax和包装细胞株293购自加拿大Mixcrobix-Biosystems公司。方法:以pDC316-hBDNF为模板,聚合酶链反应扩增酶切获得hBDNF基因片段,连接到带有EGFP标记基因的载体质粒pDC316-mCMV-EGFP上,构建穿梭质粒pDC316-hBDNF-mCMV-EGFP。利用AdMax包装系统,穿梭质粒与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染293包装细胞,同源重组产生复制缺陷型重组腺病毒载体Ad5-hBDNF-EGFP,反复感染293细胞扩增病毒后,离子交换法纯化病毒,并测定病毒颗粒数及滴度。主要观察指标:①hBDNF基因原始质粒聚合酶链反应鉴定。②穿梭质粒pDC316-hBDNF-mCMV-EGFP的构建及鉴定。③重组腺病毒Ad5-hBDNF-EGFP的包装、扩增及纯化。④毒种目的基因的聚合酶链反应鉴定。⑤纯化病毒的滴度测定结果。结果:经聚合酶链反应鉴定、限制性酶切分析及序列测定,证明已正确构建重组穿梭质粒pDC316-hBDNF-mCMV-EGFP和重组腺病毒载体Ad5-hBDNF-EGFP;扩增纯化后,测得重组腺病毒颗粒数为2.4×10^11VP/mL,A260/A280值约为2.0,滴度为0.8×10^10CCID50/mL。结论:已成功构建重组腺病毒载体Ad5-hBDNF-EGFP,为hBDNF基因功能及基因治疗的进一步研究奠定实验基础。
  • 自动体外除颤器与人工除颤器对幼猪室颤模型的除颤效果 免费阅读 下载全文
  • 背景:目前对8岁以下儿童电除颤的有效剂量及安全范围尚无统一的规定。目的:使用自动体外除颤器及人工除颤器与儿童用电极对幼猪室颤模型除颤,进行有效性及安全性评价。设计、时间及地点:实验猪电除颤体外实验,于2006-10/2007-05在苏州大学实验动物中心动物手术室完成。材料:2月龄太湖猪30只,体质量7.0~25.0kg,由常熟畜禽良种有限公司提供。方法:30只幼年太湖猪,按体质量随机分为自动体外除颤器组和人工除颤组,每组15只。诱发室颤2min后分别以自动体外除颤器及人工除颤器50J除颤,一次电击后立即进行心肺复苏,不复律的动物以70J电击后联用心肺复苏。除颤后不同时间做血气分析、电解质及心肌酶谱检查、超声波心功能测定和神经学打分,72h后处死作大体解剖。主要观察指标:动态监测整个实验过程动物心电图、血压、呼吸、体温等,检查除颤前后动物的超声心动图、血气、电解质、神经行为学打分以及大体解剖。结果:两组动物50J一次电击后立即给与心肺复苏,复苏成功率达86.7%;部分猪放电除颤后心电图ST段压低或抬高,并在几分钟内回到基线;两组动物除颤成功后心脏射血分数、左心室面积变化分数3.0~4.0h内均显著降低(P〈0.05),72h恢复正常;血液分析各项指标与试验前差别无统计学意义(P〉0.05);复苏后神经行为和大体解剖未见异常。结论:应用成人双相波自动体外除颤器联用具备能量衰减配件的儿童专用电极,对7~25kg的幼猪室颤模型取得了较满意的复苏效果。
  • 胰岛素样生长因子结合蛋白3增强子元件(IEE)的生物学特征 免费阅读 下载全文
  • 背景:在细胞水平,胰岛素样生长因子结合蛋白3竞争性地与胰岛素样生长因子结合阻止了胰岛素样生长因子与其受体结合,从而抑制了胰岛素样生长因子的活性。目的:观察衰老细胞中调节性蛋白质胰岛素样生长因子结合蛋白3的生物学特征。设计、时间及地点:单一样本观察,于2006-09/2007-09在西安交通大学生物医学信息工程教育部重点实验室完成。材料:人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)购于中国生物制品研究所。方法:用Northern的方法显示胰岛素样生长因子结合蛋白3基因的表达在年轻和衰老的2BS细胞中存在差异;聚合酶链反应扩增出人类胰岛素样生长因子结合蛋白3上游包括5'-UTR区的2kb的序列,并用酶切得到4组不同长短的胰岛素样生长因子结合蛋白3启动子片段并确定可调控转录活性的区域;通过重叠寡核苷酸凝胶阻滞实验确定在该活性区域中的增强子元件-IEE(IGFBP-3enhancer element)及其与蛋白结合的碱基序列等;用DNase I Footprinting法确定了IEE中与蛋白结合的核心序列。主要观察指标:①胰岛素样生长因子结合蛋白3基因在年轻和衰老细胞中的表达差异。②通过重叠寡核苷酸确定增强子元件。③通过凝胶阻滞试验证实该复合物结合活性与衰老相关的。④通过凝胶阻滞试验确定IEE与蛋白结合的碱基序列。⑤用DNase I Footprinting法确定IEE中与蛋白结合的核心序列。⑥判断与IEE结合蛋白的相对分子质量。结果:与年轻的2BS细胞相比,衰老的2BS细胞中胰岛素样生长因子结合蛋白3基因的表达升高;5'-cca gcc tgc caa gca gcg tgc ccc ggt tgc-3'是胰岛素样生长因子结合蛋白3的增强子元件;该元件与蛋白结合的核心序列是CTG CCA和GCG TGC CCC G,而且这种结合是与衰老相关的;结合蛋白的相对分子质量大约在27000。结论:在2BS细胞中发现了一个新的转录增强子,它与蛋白结合的核心序列是CTG CCA和GCG TGC CCC G,可与一个大约27000的蛋白结合;在衰老细胞中可选择性地促进胰岛素样生长因子结合蛋白3的表达。
  • 溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:白细胞介素13受体α2与白细胞介素13结合后,不介导白细胞介素13功能,对白细胞介素13起负调控作用。有研究表明,溶血磷脂酸能增加人支气管上皮细胞白细胞介素13受体α2的表达,从而抑制白细胞介素13的作用。目的:验证溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的诱导作用。设计、时间及地点:mRNA水平的观察对照实验,于2007-07/2008-11在南昌大学医学院和江西省医学生物高技术重点实验室完成。材料:人肺成纤维细胞HFL-1购于中科院上海生化和细胞生物研究所。方法:培养HFL-1细胞,行时间依赖和剂量依赖实验。时间依赖实验采用1μmol/L溶血磷脂酸刺激细胞,分别于0,6,12,24h收集细胞。剂量依赖实验分别用0,0.1,1,10μmol/L的溶血磷脂酸刺激细胞,12h收集细胞。主要观察指标:显微镜下观察溶血磷脂酸对HFL-1细胞生长的影响,提取HFL-1细胞总RNA,用反转录-聚合酶链反应及图像分析法检测溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响。结果:溶血磷脂酸不影响HFL-1细胞生长。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达增高,并呈时间依赖性。随着溶血磷脂酸浓度的增加,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达明显增加。1μmol/L溶血磷脂酸刺激HFL-1细胞,白细胞介素13受体α2 mRNA的表达可达高峰。溶血磷脂酸对HFL-1细胞白细胞介素13受体α1的表达无影响。结论:溶血磷脂酸能促进人肺成纤维细胞HFL-1白细胞介素13受体α2 mRNA的表达。
  • CRTER为国际投稿作者服务 免费阅读 下载全文
  • 医学界的很多研究人员经历了艰辛的努力与劳动,观察和得到了很多首发或验证性的有意义的实验结果,这些结果如果能够抢先发表在国际相关的学科杂志上,不仅会得到学科界的认可,而且有利于扩大和提升作者科研成果的价值,确定作者进一步深入开展此项实验的意义。
  • CRTER杂志发稿要求、编辑目标及投稿作者群体 免费阅读 下载全文
  • 面向国际,立足本土,发表中国组织工程研究领域一流水平的学术、技术类研究文章。 文章应提出具体的科学问题和/或具体合理的科学假说。 文章要有创新的学术思想和科学的逻辑思维模式。 文章要有合理的技术路线,客观的参数指标,合理的统计学处理方法。
  • SCI收录的NRR杂志2008年出版参数及被SCI数据库和引文库以及CA、EM收录情况 免费阅读 下载全文
  • CRTER杂志“绿色特快通道”栏目申请发稿条件 免费阅读 下载全文
  • 国家及省部级各项基金资助项目论文; 国家及省部级重点科研课题论文; 院士及首席科学家项目课题论文; 国家及省部级重点科研项目中心及其实验室课题论文; 国家及省部级专利技术项目论文;
  • 口腔组织工程相关问题临床问答 免费阅读 下载全文
  • 1 髁突运动中参考点和参考平面的确定方法? 前参考点用特制的定位尺确定,该点位于中切牙或侧切牙切缘上方43mm处,前牙缺失患者位于上唇下缘上方43mm处,记录前参考点距内眦点的距离。
  • 浙江大学医学院青年博士欧阳宏伟教授研究肌腱细胞植入修复髌肌腱断裂 免费阅读 下载全文
  • 欧阳宏伟教授是浙江大学医学院较早引进的教授之一。4年前放弃国外优厚待遇回国,经过几年的努力,目前欧阳教授已经获得包括国家自然科学基金在内的纵向科研经费395万元,横向经费225万元;发表SCI论文10篇,
  • 让昨天告诉今天:口腔组织工程研究的学术与技术进展 免费阅读 下载全文
  • 口腔组织工程研究成果按时间年限的导读:1838年,美国巴尔的摩牙医学院成立,是世界上第一所牙学院,标志着西方开始兴办牙医教育学,并开始从事牙齿治疗与修复的研究。
  • 中国科学院遗传发育所戴建武教授与郑州大学第一附属医院杨波教授合作进行脊髓损伤的修复与再生实验 免费阅读 下载全文
  • 脊髓损伤是严重影响人类健康的常见疾病。脊髓损伤后的神经再生与功能恢复是现代医学面临的重大科学难题。专门从事再生医学研究的中国科学院遗传发育所戴建武实验室与郑州大学第一附属医院神经外科杨波教授合作,在脊髓损伤后神经再生研究中取得了重要进展。脊髓损伤后死亡的细胞造成了一个抑制神经再生的环境。脊髓损伤修复的要点是要提供一个促进神经再生的环境同时还要营造一个引导神经正确延伸空间导向。
  • 医学英文句型正误辨析 免费阅读 下载全文
  • 中文 对动物行神经行为学评分后,各组取一半大鼠脑组织,行四氮唑红染色,计算梗死体积。
  • 组织工程医学专业词汇中英文对照 免费阅读 下载全文
  • 口腔组织工程相关问题临床问答 免费阅读 下载全文
  • 3 如何对重度磨耗患者髁位重建正中关系的可重复性进行评价? 正中关系是指髁突与关节盘最薄区域相吻合,在前上位置正对关节结节后斜面时盘突复合体的位置,属于功能性的可复位。
  • 组织工程技术和细胞疗法治疗营养不良性大疱性表皮松解症 免费阅读 下载全文
  • 营养不良性大疱性表皮松解症是一种由于人体Ⅶ型胶原基因突变或缺失所引起的遗传性疾病,临床特征为创伤诱发的水疱和瘢痕,并发症以恶性鳞状细胞癌多见,是导致患者死亡的主要因素,目前仍无有效的治疗方法。近年来随着对该病分子发病机制及Ⅶ型胶原的结构、功能等方面的深入研究,许多学者提出了组织工程化皮肤替代物治疗、细胞治疗以及基因治疗和重组人类Ⅶ型胶原蛋白治疗等方法,已成为营养不良性大疱性表皮松解症治疗研究的热点。
  • 心血管循环系统建模(英文) 免费阅读 下载全文
  • 人体血液循环系统是一个非常复杂的有机体,仍有许多问题无法解决,但是借助于现代的科学技术将会逐渐揭开心血管循环系统的神秘面纱。心血管循环系统是人体生理系统的核心,建立其数学模型,模拟其血液循环,可为心脏病医疗设备的设计提供辅助工具,对研究心脏疾病的成因和治疗具有指导意义。文章描述了心血管循环系统建模的历史、种类及其各种建模方法,并以Harvard-MIT(哈佛-麻省理工)建立的心血管仿真模型——RCVSIM模型为例,阐述了模型建立的思路。
  • 强化力量练习运动处方对男性老年人身体功能的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:力量练习在体育锻炼过程中一直是老年人回避的问题,但是也有专家认为长期力量练习能有效减少胆固醇,降低血压,减少冠状动脉粥样硬化性心脏病的发病率,使老年人的平衡能力增强,从而保持活力。目的:验证老年人是否适宜进行力量练习,强化力量练习对男性老年人身体功能是否有良性刺激。设计、时间及地点:随机对照试验,于2006-06/2007-01在广州体育学院完成。对象:选择健康老年男性120名,均自愿参加试验。按随机数字表法分成对照组、一般组和力量组,每组40名。方法:对照组原来的生活习惯不发生改变;一般组按照有氧和无氧交替进行的方式运动;力量组在一般组的基础上,加入力量练习。主要观察指标:分别在试验前、试验1,7个月对相关功能指标进行测试。结果:实施运动处方后一般组和力量组安静脉搏适度下降,收缩压、舒张压下降(P〈0.05),肺活量差异无显著性意义(P〉0.05)。力量组试验后时间肺活量明显升高(P〈0.01),试验1个月运动负荷试验指数明显下降(P〈0.05),试验7个月对照组基本恢复到原来水平,力量组继续显著下降(P〈0.05)。结论:男性老年人强化力量练习后心脏收缩能力提高,血管的弹性略为增大,可有效改善呼吸系统的循环状态,降低肺残量,提高呼吸过程中对氧的利用率,运动负荷后恢复能力增强。
  • 肥胖测量指标与亚临床动脉粥样硬化的相关性 免费阅读 下载全文
  • 目的:亚临床动脉粥样硬化可以预测心血管事件的发生。评价脂肪测量指标体质量指数、腰臀比和体脂量在既往无心血管疾病的人群中对亚临床动脉粥样硬化的预测作用。方法:调查于2005-03/2006-11在法国巴黎心血管疾病预防中心完成。纳入进行冠心病一级预防的649例调查对象,年龄22~79岁,既往无心血管疾病史,绝大多数为白种人。应用高分辨率超声测量亚临床动脉粥样硬化指标,包括颈动脉内膜中层厚度以及冠状动脉外斑块数。肥胖测量指标包括体质量指数、腰臀比及体脂量,体脂量通过生理电阻抗分析的方法测定。分析肥胖测量指标与亚临床动脉粥样硬化、高冠心病危险和轻度炎症的关系。结果:肥胖测量指标体质量指数、腰臀比及体脂量与亚临床动脉粥样硬化的发生、高冠心病危险和轻度炎症均呈正相关(P〈0.01)。在与亚临床动脉粥样硬化的发生与高冠心病危险的相关性中,体脂量的关系最强;在与轻度炎症的相关性中,腰臀比的作用最强。结论:体脂量与亚临床动脉粥样硬化最为紧密,调查结果提示体脂量可以作为预测成人心血管事件的参考指标。
  • 广西边远少数民族学生体型及体质量指数3年追踪(英文) 免费阅读 下载全文
  • 背景:前期研究表明广西18~22岁少数民族学生体质量偏轻。目的:拟进一步了解广西2645名少数民族学生体型及体质健康状况,寻找影响的关联因子。设计、时间及地点:追踪调查,于2004-12/2007-12在广西民族大学完成。对象:广西民族大学2003/2005三次体质健康测试的全体学生2645人。男1337人,女1308人,年龄为18~20岁,共15个民族。方法:根据2003年教育部、体育总局《学生体质健康标准(试行方案)》和实施方法分为形态指标、技能指标和身体素质指标3大类。对2645名少数民族身体机能与体质量指数变化的跟踪调查。主要观察指标:身高、体质量、肺活量、立定跳远、坐位体前屈、体质量指数。结果:①广西民族大学2003级学生大学3年期间男生身高、体质量增长率比全国同期多2.45%,身体形态发育正处于高峰期,女生成偏瘦型体型,身体形态发育情况总体欠佳。②男女学生在刚入校时肺活量机能较差,远远低于同期全国平均水平。3年后男生肺活量增长率为11.55%、女生肺活量增长率为27.72%,分别高于全国同期肺活量增长率。③坐位体前屈机能高于同期全国平均水平,男生呈逐年上升趋势,同期全国男性呈下降趋势;同期全国乡村女生均呈逐年上升趋势。④立定跳远机能提高较大,3年后增长率为18.15%,明显高于全国同期立定跳远增长率水平的2.61%。女生立定跳远机能总体不如全国同期水平。⑤体质量指数总体与同期全国乡村男女学生体质量指数比较稍低一些(P〈0.01)。结论:2645名少数民族学生发育正处于高峰期;肺活量机能不及全国同期平均水平。男女体质量指数分布有所不同,体质量偏轻者女生多于男生,表明学生营养状况总体欠佳。
  • 全麻下手法关节授动治疗髋关节僵硬患儿193例(英文) 免费阅读 下载全文
  • 目的:观察全麻下行手法授动术治疗髋关节僵硬患儿的效果。方法:回顾性分析1978-01/2005-12中国医科大学附属盛京医院小儿骨科收治的术后关节僵硬患儿193例(226髋),男53例,女140例,年龄1~14岁;其中进行发育性髋脱位采用切开复位的患儿155例(188髋),由于化脓性髋关节炎和髋关节结核的髋关节而行囊切开引流术的患儿38例(38髋)。所有患者均全麻后仰卧位于手术床上,助手用手掌固定住骨盆,术者分3步对髋关节进行授动:缓慢轻柔的屈曲髋关节至110°~120°;内收同时外旋髋关节;外展同时内旋髋关节。重复上述步骤至少1次。在患者于全麻状态彻底清醒过来之前,及时应用持续性被动训练机持续活动髋关节,之后每天增大髋关节活动范围,持续一二周。所有患者在治疗后6~24个月进行随访,测量随访时患者髋关节屈曲后伸和内收外展的活动范围。结果:全部226个髋关节中186髋授动后恢复良好,成功率为82.3%,34髋关节授动失败,失败率为15%,6个髋关节发生股骨颈骨折(2.7%)。在首次授动手术年龄≤6岁、授动开始时间≤术后12个月组中,授动手术成功率明显高于首次授动手术年龄〉6岁、授动开始时间大〉术后12个月组,而组间股骨颈骨折发生率则明显降低。结论:全身麻醉下髋关节主动授动术是一种安全,无创伤和有效的髋关节僵硬的治疗方法。并且在儿童≤6岁和首次授动时间≤12个月时效果更好。
  • 镇江市第一人民医院(江苏大学附属人民医院)范钰主任 免费阅读 下载全文
  • 2002年初在复旦大学获得医学博士学位,同年在美国德州大学作为期半年的访问学者。2003年在著名肿瘤学家郑树教授和浙江大学特聘教授美籍华人丁佳逸博士指导下完成了为期2年的博士后研究工作。现为江苏大学附属人民医院肿瘤中心主任,化疗科主任。
  • 口腔组织工程的基础研究现状 免费阅读 下载全文
  • 口腔组织工程研究已经经过二十余年的探索,在口腔颌面部骨、软骨、牙齿、皮肤、黏膜、血管等相关领域的研究进展进行了不同程度的研究。在牙周组织工程、颌骨、颞下颌关节软骨的组织工程等领域取得了显著进展,部分组织工程医疗产品如生物产品、生物材料、生物分子、装置等开始进入临床应用研究阶段。
  • 女人·老虎·书 免费阅读 下载全文
  • 女人:在上帝创造的伊甸园里,聪明的亚当取自体的一根肋骨雕刻出了美丽的夏娃与之为伴,于是乎,便有了亚当对伴侣夏娃的描述。
  • [研究与报告]
    胶原酶消化时间及质量浓度对大鼠胰岛细胞分离的影响(范宇 石炳毅 钱叶勇 杜源)
    富血小板血浆对体外培养骨骼肌干细胞增殖及成骨活性的作用(单连成 王刚 张长青 曾炳芳)
    全身与桡骨骨折局部应用伊班膦酸钠对骨折愈合影响的比较(张磊 王宸 张学军)
    复方甘草酸苷对兔骨骼肌缺血再灌注损伤的影响
    胰岛素样生长因子1基因转染骨髓基质干细胞治疗裸鼠骨缺损(周海斌 董启榕 周晓中 郑祖根)
    糖尿病骨折大鼠骨痂组织中成骨细胞增殖和骨钙素表达与骨形态发生蛋白2干预的关系
    心脏瓣膜组织工程中理想种植细胞的来源比较(徐方杰 郑悦 高尚志 沙慧芳 谭强 陈岗 陈佩莉 周睿)
    不同来源成骨细胞构建组织工程骨膜的特异性基因表达(祁洁 凌鸣 刘宗智 弓立群)
    体外培养下可持续分泌人血管抑素和内皮抑素基因工程细胞对血管生成的抑制效应
    组织工程牙周膜的体外构建
    实时定量RT-PCR法检测健侧C7神经移位前后神经生长相关蛋白43的变化
    自制旋转持续静脉输液装置在大鼠同种异体小肠移植排斥模型构建中的应用
    成骨生长肽对骨髓基质细胞增殖和向成骨方向分化的影响(英文)
    [技术与方法]
    结缔组织生长因子对体外培养的兔关节软骨细胞增殖和表型的影响(欧阳冰 林绵辉 左文建 史玉朋 何幕舜 李铁锋 叶俊强 曾月东 代宇 曲志强)
    反义基质金属蛋白酶2基因影响人增殖期血管瘤的体内实验(英文)
    X射线电离辐射对成年小鼠睾丸组织的损伤(王艳梅)
    RAC1活化介导缺氧的人脐静脉内皮细胞凋亡
    氨基胍干预对第三腰椎横突综合征模型大鼠骨骼肌诱导型一氧化氮合酶及一氧化氮的影响
    兔前交叉韧带断裂后外侧半月板的组织学退变(李国军 李康华 朱勇 李思鸿 张俊)
    氧化应激对大鼠髓核细胞凋亡的影响(李洪涛 王德春 魏见伟)
    关节镜下自体、异体骨-髌腱-骨与半腱肌腱3种重建前交叉韧带方法的疗效比较(郑小飞 黄华扬 张余 李凭跃 尹庆水)
    转化生长因子β1对长波紫外线照射皮肤成纤维细胞胰岛素样生长因子1、角质形成细胞生长因子、血管内皮细胞生长因子表达的影响
    碱性成纤维细胞生长因子促进猫角膜内皮细胞的增殖作用(罗文娟 林静 王传富)
    针刺2型糖尿病大鼠脂肪细胞因子的变化
    人瘢痕疙瘩成纤维细胞IKKβ特异性siRNA的筛选和载体构建
    新鲜与防腐股骨近段标本的生物力学差异(陈伟义 李奇 林荔军 赵亮 韦葛堇)
    A型肉毒毒素预防膝关节纤维性粘连
    失神经固定制动不同时间大鼠降钙素基因相关肽水平变化对骨密度的影响
    Wnt7b重组反转录病毒载体的构建及其在C3H10T1/2中的表达
    重组人骨形态发生蛋白2腺病毒载体的构建与鉴定(彭亮权 王大平 周可 黄俊锋 任凯 徐小平 陆伟 熊建义 欧阳侃 朱伟民)
    重组腺病毒载体Ad5-hBDNF-EGFP的构建与鉴定(王长昇 林建华 吴朝阳)
    自动体外除颤器与人工除颤器对幼猪室颤模型的除颤效果(周正宇 王禹斌 周慧英 黄猛 谢承泰 薛智谋)
    胰岛素样生长因子结合蛋白3增强子元件(IEE)的生物学特征
    溶血磷脂酸对人肺成纤维细胞白细胞介素13受体α2 mRNA表达的影响
    [信息导读]
    CRTER为国际投稿作者服务
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    SCI收录的NRR杂志2008年出版参数及被SCI数据库和引文库以及CA、EM收录情况
    CRTER杂志“绿色特快通道”栏目申请发稿条件
    [本刊特稿]
    口腔组织工程相关问题临床问答(康宏)
    浙江大学医学院青年博士欧阳宏伟教授研究肌腱细胞植入修复髌肌腱断裂
    让昨天告诉今天:口腔组织工程研究的学术与技术进展
    中国科学院遗传发育所戴建武教授与郑州大学第一附属医院杨波教授合作进行脊髓损伤的修复与再生实验
    医学英文句型正误辨析
    组织工程医学专业词汇中英文对照
    口腔组织工程相关问题临床问答(康宏)
    [综述与专论]
    组织工程技术和细胞疗法治疗营养不良性大疱性表皮松解症(侯英萍)
    心血管循环系统建模(英文)
    [调查分析]
    强化力量练习运动处方对男性老年人身体功能的影响(李志敢)
    肥胖测量指标与亚临床动脉粥样硬化的相关性
    广西边远少数民族学生体型及体质量指数3年追踪(英文)(覃明路 何江川 杨放)
    全麻下手法关节授动治疗髋关节僵硬患儿193例(英文)(刘莹 王恩波 史立伟 赵群)

    镇江市第一人民医院(江苏大学附属人民医院)范钰主任
    口腔组织工程的基础研究现状
    女人·老虎·书(王莉莎)
    《中国组织工程研究与临床康复》封面

    主管单位:中华人民共和国卫生部

    主办单位:中国康复医学会 《中国组织工程与临床康复》杂志社

    社  长:王莉莎

    主  编:刘昆

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