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  • 肿瘤坏死因子α在肢体缺血再灌注损伤软骨中的表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:肢体缺血再灌注损伤的研究起步相对较晚,且主要集中在对肢体骨骼肌、神经等软组织的研究,对肢体缺血再灌注后关节软骨的损伤目前国内外却较少报道。目的:观察肿瘤坏死因子α在肢体缺血再灌注损伤时不同时间段内软骨中的表达变化。方法:将SD大鼠随机分为假手术组、缺血6h组、缺血6h再灌注1,3,7,14,30,60d组。建立大鼠肢体缺血再灌注损伤模型。分别于缺血再灌注后相应时间点处死动物,切取左胫骨平台内侧软骨组织做苏木精-伊红染色观察软骨的组织形态学变化,免疫组织化学检测软骨中肿瘤坏死因子α表达水平的变化。结果与结论:早期(7d内)软骨组织学光镜下改变不明显;后期损伤加重,可见软骨变薄,排列紊乱,表面不完整,偶见软骨缺损。假手术组肿瘤坏死因子α阳性表达较弱,缺血6h组阳性表达开始增强,再灌3,7d组达到高峰,随后阳性表达下降;再灌60d组与假手术组相比差异仍有显著意义(P〈0.05)。结果表明,肢体缺血再灌注可导致关节软骨的损伤。肢体缺血再灌注损伤时,关节软骨中肿瘤坏死因子α增加在软骨损伤中发挥重要作用。
  • 脉冲磁场与前软骨干细胞向成熟软骨细胞的增殖与分化:与Ihh/PTHrP信号通路活性有关吗? 免费阅读 下载全文
  • 背景:前期研究证实脉冲电磁场对前软骨干细胞增殖具有促进作用,但其作用机制不明确。目的:进一步探讨脉冲电磁场对前软骨干细胞增殖分化的影响,并观察其对前软骨干细胞Ihh/PTHrP信号通路活性的影响。方法:采用免疫磁珠分选法获取并纯化SD大鼠前软骨干细胞,使用频率为50MHz,电场强度为1mT的脉冲电磁场进行干预,0.5h/次,2次/d,干预2,4,6d后收集细胞,以不给予磁场刺激的为空白对照。通过RT-PCR法检测细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的基因表达水平,再通过Western-blot法测定各组细胞印度刺猬蛋白、甲状旁腺激素相关肽蛋白的表达水平。结果与结论:RT-PCR结果显示,Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达随磁场刺激时间延长而增高,且经磁场刺激前软骨干细胞的聚集蛋白聚糖明显高于空白对照组(P〈0.05,P〈0.01)。Western-blot结果显示,印度豪猪蛋白及甲状旁腺激素相关肽蛋白表达均随磁场刺激时间的延长增加,不同时间磁场刺激组印度刺猬蛋白表达高于空白对照组(P〈0.01);甲状旁腺激素相关肽的表达量也随之上升,但当磁场刺激4,6d后的甲状旁腺激素相关肽蛋白表达与空白对照组差异有显著性意义(P〈0.05,P〈0.01)。提示强度为1mT,频率为50MHz的脉冲电磁场能促进前软骨干细胞向成熟软骨细胞增殖分化,其作用机制可能与改变Ihh/PTHrP信号通路活性有关。
  • 雪腐镰刀菌烯醇对培养软骨细胞蛋白聚糖合成的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:雪腐镰刀菌烯醇是真菌毒素之一,它可能与大骨节病的发生具有一定的相关性。目的:验证雪腐镰刀菌烯醇对软骨细胞蛋白聚糖合成的影响。方法:在体外单层培养的人胚软骨细胞中加入不同质量浓度(0.025,0.05,0.1,0.2,0.4,0.8,1.6mg/L)的雪腐镰刀菌烯醇毒素,作用1~5d后收集软骨细胞,用MTT法检测软骨细胞存活率;用紫外分光光度法检测细胞DNA含量,RT-PCR方法检测蛋白聚糖mRNA表达;用Westernblot法检测人软骨细胞蛋白聚糖表达。结果与结论:0.025mg/L雪腐镰刀菌烯醇毒素可刺激软骨细胞生长,其刺激作用呈先升高后降低的趋势。0.05~0.1mg/L毒素作用早期的细胞存活率增加,随后细胞生长被毒素抑制。当毒素质量浓度升高至0.2mg/L以上时,随着雪腐镰刀菌烯醇毒素质量浓度的增加及作用时间延长,细胞存活率明显下降。0.1~0.5mg/L雪腐镰刀菌烯醇毒素可以抑制软骨细胞蛋白聚糖的合成及其mRNA表达。结果表明雪腐镰刀菌烯醇毒素对软骨细胞蛋白聚糖合成有明显的抑制作用,并以剂量和时间依赖性方式影响细胞的增殖。
  • 自体骨膜包绕肌腱复合碱性成纤维细胞生长因子作月骨替代物 免费阅读 下载全文
  • 背景:月骨切除后以往用硅胶假体和豆状骨移位等替代,短期有一定疗效,但可发生硅胶性骨膜炎、移植骨吸收和腕骨塌陷等并发症。目的:通过动物实验研究探讨以自体骨膜包裹肌腱复合碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)植入物替代月骨观察其治疗月骨无菌性坏死的可行性。方法:四五月龄健康新西兰白兔45只,以数字表法随机分为3组,骨膜包绕肌腱组、骨膜包绕肌腱与bFGF复合体组和单纯肌腱球组。于兔双膝关节内侧切取部分股四头肌腱,于胫骨近端切取骨膜备用。造模后,骨膜包绕肌腱组以骨膜生发层朝外包绕肌腱团,7-0无创尼龙线缝合成植入物后置入兔髌上囊;骨膜包绕肌腱与bFGF复合体组,骨膜生发层朝外包绕肌腱团,将1mg碱性成纤维细胞生长因子与切取的游离肌腱混合制成植入物后置入兔髌上囊;单纯肌腱球组制作单纯游离肌腱团块,置入兔髌上囊。术后1,3,6,12,16周组织学观察骨形成,以CT机测定植入物骨密度值。结果与结论:骨膜包绕肌腱与bFGF复合体组骨形成早于骨膜包绕肌腱组,术后3周即有新生骨细胞和软骨细胞形成,12周时已接近正常骨硬度,形成外层较厚的类似正常关节软骨层,其具有良好的几何形态、硬度和支撑作用,但骨膜包绕肌腱组同时伴有软骨化骨现象,其外层光滑呈梨白色,有类似正常的关节软骨;单纯肌腱球组无骨化现象,最终呈片状胶原,无支撑作用。骨膜包绕肌腱与bFGF复合体组骨密度值高于其他两组(P〈0.01)。提示骨膜包绕肌腱与bFGF复合体骨化作用和生物学性能明显,骨形成较强,在较短时间内形成较多骨和软骨组织,可用作月骨替代物。
  • 雌激素与辛伐他汀序贯法干预对去势大鼠骨质疏松的治疗作用 免费阅读 下载全文
  • 背景:Frost根据骨重建的概念创建了骨重建干预理论——序贯疗法,即在骨吸收抑制剂之后可给予刺激骨形成的药物。目的:基于骨重建干预理论,序贯应用雌激素与辛伐他汀干预骨重建吸收期和形成期,观察其对去势大鼠骨质疏松的治疗作用。方法:3月龄雄性SD大鼠40只,以随机数字表法分为去势组与正常对照组。去势组切除双侧卵巢,正常对照组只进行下腹部皮肤单纯切开术。大鼠去势后1个月,将去势组随机分为3组:序贯组、雌激素组、去势对照组,并开始药物干预:序贯组,皮下注射苯甲酸雌二醇0.1mg/kg,3d给药1次,2周后,灌胃给予辛伐他汀5mg/(kg·d)2周,停药5周,再应用辛伐他汀5mg/(kg·d)灌胃2周;雌激素组,皮下注射苯甲酸雌二醇0.1mg/kg,每3d给药1次,连续用药11周;去势对照组,单纯的饲料喂养,无药物干预。11周后,双能X射线骨密度仪测定股骨骨密度,放射免疫法检测血清白细胞介素6、骨钙素水平。结果与结论:各治疗组大鼠股骨骨密度、骨钙素水平高于去势对照组(P〈0.05),并且序贯组明显高于雌激素组(P〈0.05)。各治疗组白细胞介素6水平低于去势对照组(P〈0.05),并且序贯组低于雌激素组(P〈0.05)。说明雌激素和辛伐他汀序贯疗法可以通过抑制骨吸收,促进骨形成有效地治疗骨质疏松。
  • Smad7在兔下颌骨牵张成骨过程中的表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:有研究表明Smad7可结合并抑制骨形成蛋白受体的下游信号,而骨形成蛋白可促进牵张成骨过程中的骨愈合,并且Smad7对软骨形成起到抑制作用,但Smad7在牵张成骨中的作用机制尚不清楚。目的:利用种植型牵张器增高兔下颌牙槽嵴,观察下颌骨牵张成骨过程中Smad7的表达规律。方法:将雄性日本大耳白兔24只随机分为对照组4只,牵张成骨组20只,其中牵张成骨组再按牵张时间点不同再随机分为牵张成骨1d,1,2,4和6周组,4只/组。选取牵张成骨组兔左侧下颌骨行牵张成骨,其间歇4d,开始种植型牵张器垂直增高兔下颌牙槽嵴。各组分别于牵张成骨后1d,1,2,4,6周取材,在牵张成骨侧下颌骨行骨密度测量,用免疫组织化学法观察兔下颌骨牵张过程中不同时期Smad7的表达和分布。结果与结论:Smad7在正常下颌骨组织中有少量表达,在牵张后1d下颌骨中的Smad7表达高于对照组(P〈0.05)。牵张成骨后1,2和4周组的Smad7表达比牵张成骨后1d组有所减少,但仍高于对照组,牵张成骨后6周时与对照组差异无显著性意义(P〉0.05)。牵张区下颌骨骨密度值在牵张成骨后1d最低,1,2和4周组骨密度值相比对照组逐渐增高(P〈0.01)。提示Smad7在牵张成骨过程的不同时期表达不同,Smad7可能对牵张成骨早期的新骨形成起一定的促进调节作用。
  • 人骨形成蛋白4基因腺相关病毒及绿色荧光蛋白基因腺相关病毒体外诱导成骨的比较 免费阅读 下载全文
  • 背景:由于骨形成蛋白的释放速度与新骨生长速度不匹配,单纯应用骨形成蛋白的效果尚不理想,因此,应有合适的载体来调节骨形成蛋白的释放速度。目的:观察重组人骨形成蛋白4基因腺相关病毒及绿色荧光蛋白基因腺相关病毒诱导兔骨髓间充质干细胞向成骨方向分化的作用。方法:全骨髓法培养兔骨髓间充质干细胞,分别应用人骨形态形成蛋白4基因腺相关病毒载体及绿色荧光蛋白基因腺相关病毒转染兔骨髓间充质干细胞,设定感染复数值为5×104,观察两组细胞形态改变,分别行碱性磷酸酶染色、Von Kossa染色、茜素红染色及碱性磷酸酶含量测定,比较两组成骨活性差异。结果与结论:人骨形态形成蛋白4基因腺相关病毒组转染骨髓间充质干细胞后,细胞形态呈现典型的成骨改变,碱性磷酸酶染色及Von Kossa染色、茜素红染色均出现成骨的特征性改变。绿色荧光蛋白基因腺相关病毒组未观察到上述改变。人骨形态形成蛋白4基因腺相关病毒组碱性磷酸酶含量高于绿色荧光蛋白基因腺相关病毒组(P〈0.01)。提示人骨形态形成蛋白4基因腺相关病毒转染骨髓间充质干细胞后,骨髓间充质干细胞表现出更加明显的成骨活性改变。
  • 即刻种植同期行软组织处理对种植体周围软组织形态的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:即刻牙种植关闭创口时,由于顶端附着龈的缺损,常用唇侧黏骨膜瓣滑行、自体游离龈组织移植、异种脱细胞真皮基质移植和二段式种植体一次手术法等对种植体周围软组织进行处理。但目前的研究仅限于临床病例报道,缺少相关动物实验的研究证据。目的:建立即刻种植动物模型,分析唇侧黏骨膜瓣滑行、异种脱细胞真皮基质移植、自体游离龈组织移植和二段式种植体一次手术法对种植体周围软组织形态的影响。方法:健康成年杂种犬全麻后拔除下颌双侧第二、四前磨牙,即刻植入BLB种植体。根据手术方式分为4组,唇侧黏骨膜瓣滑行组、自体游离龈瓣移植组、异种脱细胞真皮基质移植组和二段式种植体一次手术组。3个月后,唇侧黏骨膜瓣滑行组、自体游离龈瓣移植组、异种脱细胞真皮基质移植组行二期手术;2周后烤瓷冠修复,负荷1个月后处死动物,制作带牙周组织的硬组织磨片并进行组织形态学分析。手术前、后均测量各组的龈沟探诊深度、牙龈指数、附着龈宽度等指标进行统计学分析。结果与结论:所有种植体周围软组织均愈合良好。种植体-软组织界面可以形成和天然牙周类似的结合上皮结构。唇侧黏骨膜瓣滑行组由于破坏了种植体周围软组织解剖结构,修复效果较差;自体游离龈瓣移植、异种脱细胞真皮基质移植和二段式种植体一次手术法可有效关闭软组织创口,不影响周围软组织形态;所有组龈沟探诊深度术前后无明显变化,所有组负荷1个月后的牙龈指数均高于术前(P〈0.05),唇侧黏骨膜瓣滑行组负荷1月后附着龈宽度较术前明显降低(P〈0.001)。结果表明即刻种植同期进行适当的软组织处理方法可以取得较好的种植美学修复效果。
  • 骨桥蛋白反义核苷酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:骨桥蛋白在血管损伤后新生内膜中的表达明显上调,而且能促进血管平滑肌细胞和外膜细胞的增殖、迁移。目的:探索骨桥蛋白反义核苷酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响。方法:培养大鼠A10主动脉血管平滑肌细胞,通过MTT比色法测定骨桥蛋白反义核苷酸对平滑肌细胞增殖的影响,流式细胞仪测定骨桥蛋白反义核苷酸对平滑肌细胞周期分布的影响;通过RT-PCR方法检测血管平滑肌细胞转染骨桥蛋白反义核苷酸对增殖细胞核抗原表达的影响。结果与结论:骨桥蛋白反义核苷酸对血管平滑肌细胞的增殖有明显的抑制作用,随时间延长对细胞增殖抑制率下降。骨桥蛋白反义核苷酸主要作用于G1/S限制点,能阻止血管平滑肌细胞由G0/G1期向S期推进,从而将血管平滑肌细胞阻滞于G0/G1期,抑制血管平滑肌细胞的增殖。血管平滑肌细胞转染骨桥蛋白反义核苷酸后,增殖细胞核抗原的表达水平均较对照组降低(P〈0.05)?因此,得出骨桥蛋白反义核苷酸通过阻止血管平滑肌细胞由G0/G1期向S期推进,从而抑制血管平滑肌细胞的增殖,进而抑制血管内膜增生。
  • 罗格列酮降低氧化应激的作用:促进和动员内皮祖细胞参与了吗? 免费阅读 下载全文
  • 背景:过氧化物酶增殖物激活受体γ激动剂可动员骨髓内内皮祖细胞至外周血中。然而,其动员内皮祖细胞的确切机制还不是很清楚。有实验证明,过氧化物酶增殖物激活受体γ受体激动剂可降低糖尿病小鼠的氧化应激反应。目的:明确过氧化物酶增殖物激活受体γ激动剂罗格列酮在体内是否通过降低氧化应激动员内皮祖细胞。方法:将24只雄性新西兰大白兔以数字表法随机分为3组:正常组、对照组和罗格列酮组,每组8只。对照组和罗格列酮组予高脂饮食2周后行颈动脉球囊损伤术,罗格列酮组术后第1天灌胃给予罗格列酮1mg/(kg?d),4周;对照组灌胃给予生理盐水。正常组仅切开颈部皮肤,给予正常饲料。术后4周以流式细胞仪测定CD34和KDR双阳性内皮祖细胞数量,Greiss法测定一氧化氮浓度,比色法检测超氧阴离子,RT-PCR法测量一氧化氮合酶及NADPH p22phox mRNA表达。结果与结论:24只兔均进入结果分析。与对照组比较,罗格列酮组兔内皮祖细胞数量、血清一氧化氮水平、清除超氧阴离子能力、一氧化氮合酶mRNA表达均明显升高(P〈0.05),但仍低于正常组(P〈0.05)。罗格列酮组兔NADPH p22phox mRNA表达明显低于对照组(P〈0.05),与正常组接近(P〉0.05)。3组血糖及血脂差异无显著性意义。在不依赖于降脂和降糖作用下,罗格列酮可能通过在转录水平降低NADPH氧化酶和增加一氧化氮合酶表达,从而降低氧化应激在体内动员内皮祖细胞。
  • TrkB-shiRNA质粒转染心脏微血管内皮细胞 免费阅读 下载全文
  • 背景:脑源性神经营养因子与其受体TrkB在心脏与骨骼肌内皮细胞存在表达,在心脏血管系统的发育中及骨骼肌缺血时能有效促进血管新生,但其促血管新生的细胞与分子机制尚不清楚。目的:应用针对脑源性神经营养因子受体TrkB的shiRNA质粒对心脏微血管内皮细胞进行转染,观察TrkB 3种亚型的表达及心脏微血管内皮细胞的生长状况和形态,初步探讨脑源性神经营养因子-TrkB通路在心脏微血管内皮细胞中的调控作用。方法:使用TrkB-shiRNA质粒转染大鼠心脏微血管内皮细胞,应用荧光实时定量PCR检测TrkB的3个亚型,TrkB-FL、TrkB-T1及TrkB-T2 mRNA的表达,并观察经转染的心脏微血管内皮细胞的增殖情况。结果与结论:应用TrkB-shiRNA质粒转染心脏微血管内皮细胞后,TrkB 3种亚型在转染后的4d内mRNA表达均下降(P〈0.05或P〈0.01),且经转染的心脏微血管内皮细胞的生长变慢。说明TrkB-shiRNA质粒可沉默心脏微血管内皮细胞的TrkB-FL、TrkB-T1及TrkB-T2的表达,且TrkB表达被抑制可能会影响心脏微血管内皮细胞的增殖。
  • 人日光性角化病角质形成细胞的体外培养 免费阅读 下载全文
  • 背景:国内外相关研究已建立和发展了多种疾病状态下角质形成细胞的培养方法,但目前关于人日光性角化病角质形成细胞体外培养的研究未见报道。目的:体外分离培养人日光性角化病角质形成细胞并鉴定其生物学特性。方法:皮肤标本由昆明医学院第一附属医院皮肤科和整形外科提供。两步消化法体外分离培养日光性角化病组和正常老年人面部皮肤对照组的角质形成细胞,无血清培养技术进行人体角质形成细胞的培养,待细胞生长至70%~80%融合时消化传代。在倒置相差显微镜和激光共聚焦显微镜下观察细胞形态及超微结构,应用免疫荧光检测角蛋白在细胞内的表达,划痕实验和双层软琼脂集落形成率实验观察细胞的迁移和成瘤能力。结果与结论:原代培养的细胞显示典型的表皮细胞特征:倒置显微镜下培养的细胞呈典型的"铺路石"状,经免疫荧光检测为角蛋白阳性,电镜下可见细胞内有大量的张力纤维。体外成功分离培养出老年人病变条件下的角质形成细胞。日光性角化病组与对照组相比:细胞的核仁增大,异染色质及线粒体数量增多,内质网数量少特点,细胞较为幼稚。生长曲线、划痕实验和双层软琼脂集落形成率实验表明,日光性角化病患者的角质形成细胞较同龄老年人具有更强的增殖、迁移和成瘤的能力。实验证实体外培养的日光性角化病角质形成细胞仍具有一定的非典型增生细胞的特性。
  • CRTER杂志“循证医学”栏目稿件体例要求 免费阅读 下载全文
  • 摘要 总体要求:4段结构式,中文400-500字,英文200-300单词。 细节要求:△背景:语言应避免单一化,应紧扣文章目的进行铺垫。△目的:阐明进行荟萃分析的设想和目的,不应与文题用语一致。
  • 近期关于组织工程研究有价值的学科新闻回顾:本刊学术部 免费阅读 下载全文
  • 2010年与组织工程相关的学术会议:本刊学术部 免费阅读 下载全文
  • 2010年本刊“组织工程”栏目组稿重点 免费阅读 下载全文
  • 关于组织工程临床研究与应用的学术争鸣 免费阅读 下载全文
  • 来自本文课题的更多信息 免费阅读 下载全文
  • 基金资助:课题受黑龙江省卫生厅课题(2007-442)资助。 利益冲突:无利益冲突。 课题的创新点:基于对周围神经损伤后病理演变过程的分析,探讨有利于神经再生的最佳时机,对提高临床的疗效有一定的参考价值,具有一定的创新性。
  • 如何向SCI收录的优秀期刊投稿:投稿后还应该做什么?(本刊发展部) 免费阅读 下载全文
  • 你在遵循了所有关于论文撰写的建议并将文章投给选择的期刊后,就应该做下面这些事情了:
  • 医学英文句型正误辨析:本刊英文部 免费阅读 下载全文
  • 母亲和母亲节 免费阅读 下载全文
  • 这一天,溪水清澈, 这一天,小草翠绿, 这一天,风儿温柔, 这一天,阳光和煦, 这一天,是个懒散的可以一直睡到正午才起床的星期日.
  • 沙利度胺与胶原诱导型关节炎大鼠炎症因子的表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:研究表明,多种细胞因子与炎症递质参与类风湿关节炎的致病过程,沙利度胺作为一种免疫调节剂应用于风湿性疾病的治疗。目的:观察沙利度胺对胶原诱导型关节炎大鼠的关节炎症及血浆肿瘤坏死因子α表达的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为4组。除正常对照组外,其余3组多点皮内注射Ⅱ型胶原与完全弗氏佐剂的乳化剂诱导出关节炎模型。从免疫后第10天开始,正常对照组和单纯造模组大鼠给予蒸馏水灌胃;沙利度胺组给予沙利度胺灌胃;甲氨蝶呤组给予甲氨蝶呤灌胃。实验前及实验7,14,21,28,35,42,60d测定各组的大鼠不同时间点的足爪厚度、血浆肿瘤坏死因子α浓度,进行踝关节病理评分和放射学检查。结果与结论:沙利度胺可以有效减轻胶原诱导型性关节炎大鼠足爪肿胀程度,造模后第28天单纯造模组足爪厚度值大于沙利度胺组(P〈0.05)。与造模组比较,沙利度胺组肿瘤坏死因子α浓度在造模后14d降低(P〈0.05)。沙利度胺组14~60d病理积分均显著低于造模组;沙利度胺组出现骨骼改变的平均时间明显晚于单纯造模组(P〈0.01),且关节破坏程度较轻。沙利度胺组和甲氨蝶呤组各指标差异无显著性意义。结果证实,沙利度胺可以通过影响肿瘤坏死因子α的表达,抑制滑膜炎症及周围组织破坏,有效减轻胶原诱导型性关节炎大鼠关节的炎症程度。
  • 静脉应用血小板源性生长因子质粒减小梗死心肌面积的可行性 免费阅读 下载全文
  • 背景:过往研究已证实:心肌缺血前或缺血时心肌内注射血小板源性生长因子及其基因载体均可以明显减小缺血心肌的梗死面积,但心肌梗死后才经静脉使用血小板源性生长因子的基因载体是否具有相同的疗效,所知甚少。目的:进一步验证对心肌缺血后,经静脉注射血小板源性生长因子质粒phPDGF-B对缺血心肌梗死面积的作用。方法:20只SD大鼠随机分为4组,经结扎左冠状动脉前降支,建立心肌梗死模型。于结扎后30min,雌、雄实验组静脉注射phPDGF-B质粒;雌、雄对照组静脉注射等体积PBS。2周后,进行常规的Masson,s Trichrome染色,对缺血心肌梗死区面积、纤维化及心室几何参数进行分析。结果与结论:大鼠静脉使用phPDGF-B质粒2周后,雌、雄实验组的心肌梗死的面积均明显小于雌、雄对照组(P〈0.05);实验组梗死区存活的心肌细胞明显多于对照组;雌、雄实验组梗死区纤维化面积的比值均低于对照组,但差异没有显著性意义;实验组梗死区胶原沉积的密度明显小于对照组;实验组梗死边缘区的室壁厚度大于对照组(P〈0.05)。实验组梗死区室壁厚度大于对照组。结果证实,在心肌缺血30min,经静脉使用phPDGF-B质粒对梗死区心肌细胞存活有保护作用,能有效减小缺血心肌的坏死面积,同时能有限度地改善存在心肌梗死的左心室重构,以及减小梗死区的纤维化程度,且上述作用没有性别差异。
  • 重组外源性人热休克蛋白70基因真核表达载体的构建及鉴定 免费阅读 下载全文
  • 背景:热休克蛋白70的肿瘤免疫作用近年来受到国内外学者的广泛关注,然而目前常用的诱导内源性热休克蛋白70表达的方法,如热应激、缺血预处理等均存在一些弊端。目的:拟构建携带并正确表达外源性人热休克蛋白70基因的重组真核表达载体。方法:外源性热休克蛋白70基因连接入真核表达载体pDC315-EGFP中,转化大肠杆菌感受态细胞,重组真核表达载体外源基因测序及PCR检测鉴定阳性克隆后转染人胚肾293细胞,荧光显微镜及western blot鉴定外源基因在细胞中的表达。结果与结论:经PCR和测序证实外源性人热休克蛋白70基因正确重组入真核表达载体pDC315-EGFP,转染293细胞后荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白GFP的表达,Western blot检测到热休克蛋白70在293细胞中有效表达。
  • 壮筋续骨汤促进大鼠胫骨骨折愈合:RT-PCR法检测核心结合子α1基因表达的验证 免费阅读 下载全文
  • 背景:以往研究从病理切片、生物力学、生化检测等宏观角度证实中药具有促进骨折愈合的作用。目的:从分子生物学角度观察壮筋续骨汤对大鼠胫骨骨折愈合中核心结合子α1基因表达的影响。方法:选取3月龄雄性SD大鼠100只,建立闭合骨折髓内固定动物模型,造模后以抽签法随机分壮筋续骨汤中药组和对照组。壮筋续骨中药组在造模当天灌胃给予壮筋续骨汤,每次2mL,2次/d;对照组灌胃给予等量生理盐水,处死前1h各灌胃1d量。术后1,2,4,8,12周取骨折区组织,通过RT-PCR方法进行半定量分析核心结合子α1基因表达。结果与结论:两组核心结合子α1基因在骨折2周后开始表达并逐渐增强,且壮筋续骨汤组表达较对照组显著增强(P〈0.05)。提示壮筋续骨汤能促进大鼠胫骨骨折愈合中的核心结合子α1基因表达增强。
  • 海桐皮汤熏洗治疗膝骨性关节炎:与扶他林乳剂的比较 免费阅读 下载全文
  • 背景:膝骨性关节炎是由于风寒湿邪痹阻关节、经络所致,而海桐皮汤具有使气血通畅,经络舒展,肿胀消退之功效。目的:观察海桐皮汤熏洗治疗膝骨性关节炎的临床疗效。方法:将符合纳入标准的110例膝骨性关节炎患者按就诊先后顺序随机分为熏洗组与对照组,其中熏洗组55例,对照组55例。根据设计好的症状体征评分标准,计算治疗前患者的症状体征积分;分别予以海桐皮汤熏洗及扶他林乳剂外用治疗,1个月后比较治疗前后患者的临床症状、体征、疼痛积分的变化及两治疗组在不良反应、失访率和复发率等的差异。结果与结论:两种药物在改善患者症状体征方面均具有良好疗效,海桐皮汤熏洗疗效[(控显率57.45%,总有效率95.74%)]优于外用扶他林乳剂[(控显率37.0%,总有效率78.3%)]。两组治疗后疼痛积分较治疗前减少(P〈0.01或0.05);熏洗组明显优于对照组(P〈0.01)。熏洗组有3例患者出现皮疹、红斑等过敏现象,对照组中2例患者也出现上述过敏现象,均在休息一两天后缓解,两组不良反应差异无显著性意义;熏洗组复发率低于对照组。结果证实,海桐皮汤熏洗对治疗早、中期膝骨性关节炎疗效确切,疗效优于外用扶他林乳剂,且复发率低于对照组。
  • 电针干预自发性高血压大鼠主动脉丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1及磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白的表达 免费阅读 下载全文
  • 背景:近年来大量临床研究表明针刺风池、太冲、曲池等穴位能有效降低血压,可用于高血压,但对其治疗的分子机制尚未阐明。目的:观察针刺大鼠风池、太冲、曲池等穴位对丝裂原活化蛋白激酶信号转导调控系统的影响,从而探讨针刺治疗高血压的分子机制。方法:选取8月龄自发性高血压雄性Wistar大鼠14只,随机分为针刺组和模型组,每组7只;另选取同月龄正常血压雄性Wistar-Kyoto大鼠7只作为对照组。对针刺组大鼠采用电针针刺双侧风池、曲池和三阴交穴,毫针刺太溪和太冲穴。3周后采用RT-PCR方法检测各组大鼠主动脉组织丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1mRAN的表达,Western blot方法检测丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达。结果与结论:与对照组比较,模型组主动脉组织磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达水平升高,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1mRNA及其蛋白表达水平降低(P〈0.01);与模型组比较,针刺组主动脉组织磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达水平降低,丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1mRNA及其蛋白表达水平升高(P〈0.05)。提示针刺治疗自发性高血压大鼠可能是通过调控丝裂原活化蛋白激酶信号转导途径,增强磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白表达,降低丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1蛋白表达,从而改善血管重塑,降低血压。
  • 超选左前降支微血栓微球混悬液分次灌注构建小型猪急性心肌梗死后缺血性心力衰竭组织工程学模型 免费阅读 下载全文
  • 背景:既往心力衰竭模型制作方法主要通过开胸结扎不同部位冠状动脉建立急性心肌梗死模型,该方法创伤大、开胸手术复杂,动物死亡率高、术后恢复较慢。目的:应用选择性冠状动脉前降支微血栓微球混悬液灌注方法造成心肌缺血坏死,探索建立稳定存活的小型猪急性心肌梗死后心力衰竭动物模型。方法:对小型猪行冠状动脉造影监测心电图及应用漂浮导管监测有创血流动力学参数,并行pigtail导管测量左室舒张末压的变化,以4F导管超选左前降支行微血栓微球混悬液分次注入,心肌梗死溶栓实验心肌灌注分级〈2级和左室舒张末压力〉15mmHg(1mmHg=0.133kPa)时停止注射,间隔10min重复注射,待左室舒张末压稳定在15~18mmHg后结扎血管,并加压包扎。监测心肌坏死标志物心肌肌钙蛋白Ⅰ和肌酸激酶同工酶变化。造模后1,7,14,30d行心脏超声检查,造模30d复查有创血流动力学检查,并行心脏病理检查,认定和评价模型的成功率、稳定性和可重复性。结果与结论:造模30d后共有14头小型猪成活,心电图、心肌坏死标记物、病理检查均符合急性心肌梗死病生理过程。其中13头小型猪达到动物模型标准,肺毛细血管楔压明显升高(P〈0.01),心输出量和左室射血分数明显降低(P〈0.01),模型成功率为76.47%;病理检查显示心肌梗死面积占左心室面积的(33.85±4.43)%。微血栓微球混悬液灌注构建小型猪急性心肌梗死后心力衰竭模型更接近急性心肌梗死-心力衰竭临床病理生理学特点。
  • 建立荷人结肠癌裸鼠移植瘤模型及MRI成像检查 免费阅读 下载全文
  • 背景:肿瘤移植瘤动物模型是探索和模拟肿瘤在人体内生物学行为的一种较为理想的方法,但应用MRI对模型进行评价的研究较少。目的:应用人结肠癌LoVo细胞接种裸鼠,鼠间移植传代,建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型,并应用MRI进行初步评价。方法:采用细胞移植和瘤块移植两种方法建立裸鼠移植瘤模型,观察移植瘤大体形态和组织病理学改变,测定宿主血液中的癌胚抗原值,应用免疫组化法观察肿瘤细胞中癌胚抗原的的分布,对6只裸鼠移植瘤模型进行MRI成像检查,并测量肿瘤、肝脏、肌肉组织的T1WI和T2WI的信噪比和三者的T1,T2值。结果与结论:移植瘤的形态和功能特性与原发肿瘤基本相似,移植瘤的移植成功率为100%;6只裸鼠模型的MRI测量结果显示,其肿瘤、肝脏、肌肉的T1WI平均信噪比分别为26.19,22.71,26.62;T2WI平均信噪比分别为9.42,7.66,8.59;平均T1值分别为1039.22,907.63,1611.51ms;平均T2值分别为109.95,37.31,64.35ms。结果证实荷人结肠癌裸鼠模型的MRI成像图像清楚,组织分辨率高,测定组织的T1值和T2值可作为定量指标进行分析。
  • 早期激素性股骨头缺血性坏死模型的建立及半胱天冬酶3活性测定 免费阅读 下载全文
  • 背景:有研究表明骨细胞凋亡与激素性股骨头缺血性坏死的发病机制密切相关,而活化的半胱天冬酶3可作用于其他半胱天冬酶家族成员,使蛋白酶级联反应放大,最终导致细胞凋亡。但半胱天冬酶3参与的骨细胞凋亡与早期激素性股骨头缺血性坏死的相关研究则罕见报道。目的:采用大剂量激素联合强迫兔直立负重的方法建立早期激素性股骨头缺血性坏死模型并测定骨细胞半胱天冬酶3活性。方法:将4月龄新西兰大白兔随机分成模型组和对照组。模型组每周3次臀肌注射地塞米松,每日强迫兔直立1h,对照组注射等量生理盐水。分别于3,6,9和12周处死动物,取其双侧股骨头,光镜及电镜下观察组织病理学改变,应用对-硝基酰苯胺比色法测定骨细胞半胱天冬酶3活性。结果与结论:给药3周后,模型组光镜下可见脂肪细胞肥大和增多,骨髓间充质干细胞及造血干细胞数量相对减少;给药6周后,模型组空骨陷凹率均大于对照组(P〈0.05);给药9周后,模型组出现骨小梁变细、断裂,电镜下见模型组部分骨细胞体积缩小,染色质浓集,核固缩和碎裂等凋亡特征。给药6周后,模型组骨细胞半胱天冬酶3活性高于对照组(P〈0.05)。实验以此推论采用大剂量激素联合强迫兔直立负重可以诱导建立早期激素性股骨头缺血性坏死模型,半胱天冬酶3参与的骨细胞凋亡可能与早期激素性股骨头缺血性坏死发病过程有关。
  • 反流性食管炎大鼠模型的制备:不同管径内支架支撑幽门及前胃结扎 免费阅读 下载全文
  • 背景:部分幽门结扎法是制备反流性食管炎动物模型的常用方法之一。幽门结扎口径大小关系到能否有效建立反流性食管炎模型。目的:比较运用不同管径内支架并部分幽门加前胃结扎制备大鼠反流性食管炎模型的差异,以寻求合理的制备模型方法。方法:将40只雌性Wistar大鼠随机分为2组。分别采用外径2.9mm内支架和外径3.7mm内支架支撑结扎幽门,并加前胃结扎减少胃容量建立动物模型。观察大鼠体质量及7d存活率。7d后处死大鼠,取食管下段组织标本观察食管炎发生率。结果与结论:2.9mm内支架组和3.7mm内支架组7d存活率分别为35%(7/20)和68%(13/19),差异有显著性意义(P=0.038);两组食管炎发生率分别为86%(6/7)和77%(10/13),以及两组存活大鼠结扎后每天体质量差异均无显著性意义(P〉0.05)。结果表明,采用部分幽门加前胃结扎可成功建立反流性食管炎大鼠模型,幽门结扎后管径与大鼠存活率密切相关。
  • 应用Cyclin D1和bcl-2为靶标的siRNA慢病毒载体构建和鉴定 免费阅读 下载全文
  • 背景:近年来,与骨肉瘤耐药相关的基因研究大多局限于单个基因或单个通路。而进行细胞凋亡和细胞周期调控双通道同时阻断有可能逆转药物耐受机制。目的:构建bcl-2和cyclin D1特异性siRNA慢病毒载体,拟将其转入骨肉瘤耐药细胞株,探讨对骨肉瘤耐药性的逆转作用。方法:采用限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接等方法,将bcl-2和cyclin D1基因分别插入慢病毒载体pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector中,构建bcl-2和cyclinD1与pSIH1-H1-copGFP共表达的慢病毒载体(pSIH1-H1-copGFP-bcl-2-siRNA和pSIH1-H1-copGFP-cyclin D1-siRNA)。构建成功后的慢病毒质粒系统和pPACK包装质粒共转染293T细胞,过滤,浓缩病毒,利用荧光蛋白作为报告基因,对病毒滴度和感染效率进行检测。结果与结论:4对bcl-2和cyclin D1特异性siRNA与双酶切慢病毒载体pSIH1-H1-copGFP shRNA Vector连接成功。共转染293T细胞包装病毒并浓缩后滴度达1.14×104ifu/μL,适合感染目的细胞。实时荧光定量PCR检测结果显示对bcl-2和cyclinD1基因的干扰效率最高分别达88%和87%。证实将siRNA技术应用于bcl-2和cyclin D1,能够构建出有效的bcl-2和cyclin D1特异性siRNA慢病毒载体。
  • 酵母双杂交系统3筛选人源核不均一核糖核蛋白E1的功能伙伴 免费阅读 下载全文
  • 背景:酵母双杂交系统3是目前最常用的筛选相互作用蛋白质的技术平台。目的:运用酵母双杂交系统3筛选人源核不均一核糖核蛋白E1的相互作用子。方法:构建酵母细胞表达载体hnRNPE1-pGBKT7/c-myc,转化酵母菌AH109,Western blot证实蛋白表达,进行毒性和自激活检验,与转化了cDNA文库的酵母菌Y187接合,经过营养删除、滤膜反应以及回交试验筛选酵母文库中与hnRNP E1相互作用的蛋白。结果与结论:hnRNP E1蛋白能在酵母中正常表达,对酵母细胞无毒性,不存在自激活现象。经缺陷培养基3次传代及滤膜反应初步筛选出了16个候选基因,再经NCBI基因比对(BLASTN和BLASTP)及酵母细胞中的免疫沉淀反应最终获得了8个候选蛋白。提示hnRNP E1可能参与特定细胞内的复制,转录,mRNA运输、细胞周期、细胞自噬及免疫应答的过程,并且可能参与某些遗传病的发病过程。
  • 局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠与促红细胞生成素的神经保护作用 免费阅读 下载全文
  • 背景:近年来动物实验和体外细胞培养研究证实促红细胞生成素对脑缺血具有神经保护作用,有关促红细胞生成素脑保护的作用机制目前尚未阐明。目的:通过观察缺血损伤区域脑组织细胞学形态,检测脑组织超氧化物歧化酶、丙二醛浓度,探讨促红细胞生成素对脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:采用线栓法建立Wistar大鼠局灶性缺血再灌注损伤模型,分别于缺血后2h腹腔注射生理盐水3000U/kg、促红细胞生成素3000,1000U/kg,并设假手术组。缺血再灌注损伤24h后,应用苏木精-伊红染色法检测大鼠脑组织病理学变化,应用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别测定超氧化物歧化酶活性和丙二醛浓度。结果与结论:形态学结果显示促红细胞生成素高剂量组较生理盐水组皮质神经细胞存活数量增多,损伤程度减轻;促红细胞生成素高、低剂量组超氧化物歧化酶活性均明显高于假手术组和生理盐水组(P〈0.05),丙二醛浓度明显低于假手术组和生理盐水组(P〈0.05);促红细胞生成素高剂量组超氧化物歧化酶活性明显高于促红细胞生成素低剂量组,丙二醛含量明显低于促红细胞生成素低剂量组(P〈0.05)。提示经腹腔注射促红细胞生成素,可使大鼠脑缺血再灌注损伤区神经细胞存活数量明显增加,可显著改善组织的病理学改变,其保护作用可能是通过促红细胞生成素清除自由基,拮抗过氧化损伤实现的。
  • 心肌桥壁冠状动脉内皮细胞超微结构及血流动力学变化 免费阅读 下载全文
  • 背景:国内外已有较多研究从组织学角度观察心肌桥对心肌血流灌注和动脉硬化的影响,但较少见有关心肌桥作用下壁冠状动脉及其近段、远段血管内皮细胞的超微结构特征的研究。目的:观察心肌桥壁冠状动脉及其近段内皮细胞超微结构特征以及心肌桥导致的血流动力学变化。方法:用肝素-生理盐水和4%戊二醛溶液常规处理10例心肌桥冠脉搭桥术患者切除的左冠状动脉,取壁冠状动脉近段、壁冠状动脉段、壁冠状动脉远段,扫描电镜观察其血管内皮细胞和基膜特征。结果与结论:10例标本心肌桥存在位于前降支中段和近段行程中,长度为2.4~3.6mm。壁冠状动脉近段内皮细胞多呈卵圆形,长轴和血流方向一致,细胞表面可见到许多"虫啄样"缺损。壁冠状动脉段内皮细胞细长,呈梭形,长轴和血流方向一致,细胞较少脱落,2例标本在内皮细胞表面见到微绒毛,并可见有特殊的桥样结构,该结构常始于细胞的一端,在管腔内游离一段后再与相邻的细胞形成连接。壁冠状动脉远段内皮细胞形态较不规则,表面有少量"虫啄样"破坏,边缘境界清楚,很少脱落。壁冠状动脉段内皮细胞与近段、远段内皮细胞相比,面积基本相同,但周长明显增加,形态指数显著较低(P〈0.05)。提示壁冠状动脉内皮细胞受到心肌桥压迫导致血流切变力增高产生适应性反应,对内皮细胞有保护作用,而其近段内皮细胞由于切变力较低容易被损伤,成为动脉粥样硬化发生的基础。
  • 周围神经损伤后最佳修复时间时机的选择 免费阅读 下载全文
  • 背景:关于周围神经损伤的修复机制研究报道较多,但对周围神经损伤修复时间的选择的研究较少。目的:通过观察大白兔周围神经损伤后不同时间修复的效果,以选择周围神经损伤后进行修复的最佳时机。方法:随机将大白兔分为4组。剪下长约1cm的坐骨神经制作周围神经损伤动物模型。即时修复组即时进行神经修复组;2,4周和3个月修复组神经两断端分别固定于肌膜上,缝合伤口,分别在2,4周后和3个月后修复坐骨神经。术后3个月于缝合神经处的取材,检测运动神经传导速度,苏木精-伊红染色行病理学观察,电镜观察移植神经段结构,并进行神经移植体轴突计数。结果与结论:2周修复组大白兔运动神经传导速度明显快于4周和3个月修复组(P〈0.01),与即时修复组比较差异无显著性意义(P〉0.05)。2周修复组神经移植处组织形态、结构明显好于4周和3个月修复组。2周修复组神经移植体轴突计数明显多于4周修复和3个月修复组(P〈0.01)。结果提示在2周后修复神经损伤优于其他时间点,是周围神经损伤后进行修复的最佳时机。
  • 实验动物臂丛神经的拉伸力学特性 免费阅读 下载全文
  • 背景:臂丛神经损伤缝合吻接术有必要了解臂丛神经拉伸力学特性。目的:对大鼠臂丛神经进行拉伸实验,观察其臂丛神经的拉伸力学特性,为临床提供拉伸力学特性参数。方法:取SD大鼠C6~7臂丛神经40个,随机分为正常对照组20个,模拟臂丛神经损伤吻接组20个,对模拟臂丛神经损伤吻接组以手术刀在标本中间切开再缝合吻接离断标本。在电子万能试验机上以5mm/min的实验速度对2组标本进行拉伸实验,以多项式用最小二乘法处理实验数据。拉伸实验速度为5mm/min。观察大鼠臂丛神经拉伸最大载荷、最大位移、最大应变、最大应力和应力-应变曲线。结果与结论:模拟臂丛神经损伤吻接组大鼠臂丛神经拉伸最大载荷为(1.050±0.135)N、最大位移为(3.090±0.356)mm、最大应变为(61.860±7.252)%、最大应力为(5.095±0.647)GPa,正常对照组最大载荷、最大应力大于模拟丛神经损伤吻接组(P〈0.05)。模拟臂丛神经损伤吻接组最大位移和最大应变大于正常对照组(P〈0.05)。拉伸应力-应变曲线是以指数关系变化的。结果显示2组臂丛神经标本具有不同的拉伸力学特性。
  • 转染碱性成纤维细胞生长因子基因在成肌细胞中表达及调控系统的建立(英文) 免费阅读 下载全文
  • 背景:作者前期研究已经成功将碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast grouth factor,bFGF)基因转入鼠眼外肌的肌卫星细胞中,证明其能够在眼外肌的成肌细胞中表达并促进细胞增殖,促进其分化能力。目的:进一步探讨转染后碱性成纤维细胞生长因子基因在成肌细胞中表达的调控方法。方法:将目的基因碱性成纤维细胞生长因子与诱导表达载体pcDNA4/TO/myc-HisTMA连接,通过经菌落PCR和酶切鉴定的阳性克隆测序和EcoRⅠandHindⅢ双酶切处理和XhoⅠ单酶切处理验证。筛选并确定C2C12成肌细胞的抗生素的敏感性。通过脂质体转染技术,建立C2C12稳定表达pcDNA6/TR细胞系,经Western blot(蛋白印迹法)鉴定。将pcDNA4/TO/myc-孙HisTMA-bFGF转染到pcDNA6/TR-C2C12细胞系,免疫荧光法及Western blot法检测碱性成纤维细胞生长因子在四环素诱导的转染了pcDNA4/TO/myc-HisTMA-bFGF的C2C12细胞内的表达及其分泌情况,并设对照。结果与结论:①经测序对照,双酶及单酶切处理均证实碱性成纤维细胞生长因子与诱导表达载体pcDNA4/TO/myc-HisTMA成功连接。②blasticidin对C2C12细胞的最小致死浓度为10mg/L,zeocin对C2C12细胞的最小致死质量浓度为750mg/L。③建立的pcDNA6/TR-C2C12细胞系正确。④经四环素处理的转染了pcDNA4/TO/myc-HisTMA-bFGF的成肌细胞基因表达阳性,未经处理的则为阴性;经四环素处理的转染了pcDNA4/TO/myc-HisTMA-bFGF的成肌细胞产生碱性成纤维细胞生长因子蛋白,24h达高峰,未处理的则不能产生碱性成纤维细胞生长因子蛋白。结果提示应用四环素抑制调节系统,可以调节碱性成纤维细胞生长因子基因在成肌细胞中的表达。
  • 常氧条件下同时表达突变型低氧诱导因子1α目的蛋白和人源化绿色荧光蛋白报告分子腺病毒真核表达载体的构建(英文) 免费阅读 下载全文
  • 背景:低氧诱导因子1能够调控多种基因共同表达,在骨缺损部位可诱导生理功能完整的新血管生成。目的:构建能够同时表达突变型低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1 alpha,HIF-1α)目的蛋白和人源化绿色荧光蛋白(human renilla reniformis green fluorescent protein,hrGFP)报告分子的新型腺病毒真核细胞表达载体。方法:对目的基因供体质粒pCMV6-XL5-HIF1α携带的人低氧诱导因子1α基因进行测序和对其序列内部限制性内酶识别位点进行分析,利用PCR(poly-merase chain reaction,PCR)技术定点突变低氧诱导因子1α基因编码区的第402位、564位和803位氨基酸,酶切、测序检测突变情况,将正确突变后的低氧诱导因子1α基因(突变mutagenesis,突变后的HIF-1α基因写作HIF-1αmu)定向连入腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV-IRES-hrGFP-1中。携带HIF-1αmu基因的重组腺病毒穿梭载体经测序鉴定、PmeⅠ酶切线性化后转化BJ5183-AD-1电感受态细胞,利用细菌内同源重组机制将HIF-1αmu和人源化绿色荧光蛋白基因连同其顺势表达元件重组入腺病毒基因组质粒,通过PacⅠ酶切及测序鉴定获得重组体。结果与结论:经基因测序证实,HIF-1α基因编码区的第402位、564位和803位氨基酸均定点突变成丙氨酸。经酶切鉴定及测序证实,重组腺病毒表达载体构建成功。结果表明,成功构建了新型重组腺病毒突变型真核细胞表达载体pAd-HIF1αmu-IRES-hrGFP-1。
  • 组织工程心脏瓣膜:选择及发展 免费阅读 下载全文
  • 文章导语:○心脏瓣膜病的发病率为何日益增多?○微创心脏瓣膜的发展如何?○心脏瓣膜置换的手术适应症?○人工瓣膜与生物瓣膜的优缺点?○人工瓣膜与生物瓣膜的治疗效果比较?○构建组织工程心脏瓣膜的研究热点?○组织工程心脏瓣膜需要解决哪些问题?○近年来组织工程心脏瓣膜研究发表文章的趋势?
  • 组织构建中的基质金属蛋白酶及其抑制剂:本刊中文部 免费阅读 下载全文
  • 1缝线诱导大鼠角膜血管新生过程中环氧化酶2和基质金属蛋白酶2的表达 张静(南方医科大学珠江医院眼科,广东省广州市515282) 推荐理由:基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一族能降解细胞外基质成分和基底膜的含锌蛋白酶,通常以酶原的形式存在,激活后能酶解蛋白,破坏局部组织结构、诱导新生血管形成,其中MMP-2被认为与角膜新生血管的形成有密切关系。
  • 椎间盘源性腰痛的病理生理学机制及组织工程学技术 免费阅读 下载全文
  • 背景:椎间盘源性腰痛的发病机制存在争议,认识其病理生理学机制,可为临床诊断和治疗提供重要的理论基础。目的:综述国内外关于椎间盘源性腰痛的病理生理学机制及组织工程学技术在其应用中的研究概况。方法:应用计算机检索PubMed1980-01/2009-08期间的相关文章,检索词为"椎间盘源性腰痛,下腰痛,Discogenic low back pain,low back pain,tissue engineering",并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国期刊全文数据库2000-01/2009-08期间的相关文章,检索词为"椎间盘源性腰痛",并限定文章语言种类为中文。此外还手工查阅相关专著数部。纳入椎间盘退变的病理生理机制、椎间盘突出致疼痛的病理生理学机制研究。结果与结论:慢性下腰痛部分是椎间盘本身内部结构病变导致的。自然退变和机械压力改变导致髓核和纤维环的破裂,神经纤维通过破裂的纤维环长入到椎间盘的内部,椎间盘内的髓核等组织破裂后能够刺激周围产生炎症因子,这些炎症因子刺激神经产生疼痛;腰部机械压力的改变,炎症因子进一步刺激神经导致疼痛加重。治疗盘源性下腰痛,传统手术治疗如椎间盘切除、腰椎融合、椎间盘内射频消融等会牺牲正常脊柱的高度和脊柱节段的活动,促进椎间盘的再生和椎间盘置换有可能解决这个问题,故组织工程方面治疗盘源性腰痛成为新的热门。
  • 机械生长因子对骨骼肌卫星细胞的调控 免费阅读 下载全文
  • 背景:机械生长因子作为胰岛素样生长因子1的一个亚型,有促进肌卫星细胞增殖,抑制分化的功能,因此利用外源性机械生长因子类物质对卫星细胞进行干预,并对其调控的分子机制进行研究,可以为骨骼肌疾病的临床治疗及组织工程学的研究提供新的思路。目的:综合分析机械生长因子对骨骼肌卫星细胞的调控及其治疗作用。方法:采用计算机检索中国期刊全文数据库及PubMed数据库1995/2009相关文献,中文检索词为"机械生长因子,骨骼肌卫星细胞";英文检索词为"MGF"。纳入标准:具有原创性的研究论文,其研究目的或方法具有代表性。排除标准:重复性研究及与课题相关性较弱的文献。结果与结论:机械生长因子有激活肌卫星细胞,促进细胞增殖,抑制肌管融合及促进卫星细胞迁移的功能。机械生长因子对骨骼肌损伤修复、神经损伤修复及心肌梗死治疗等方面有积极的临床意义。外源性机械生长因子类物质对肌组织修复、再生方面的作用,有可能为运动损伤的康复治疗开辟新的途径,并且对细胞移植具有一定的临床意义。
  • 骨骼肌细胞中热休克蛋白72表达与运动及肌肉损伤 免费阅读 下载全文
  • 背景:运动应激诱导的骨骼肌细胞中热休克蛋白72的表达与肌肉损伤程度大小有关。目的:综述骨骼肌细胞中热休克蛋白72在运动中的表达及其与运动的相互关系,并对其在运动医学领域中潜在的研究价值进行了探讨。方法:应用计算机检索国家科技文献图书中心1990-01/2009-10的相关文献,检索词"heat shock protein 72,skeletal muscle",限定文章语言种类为"English";同时计算机检索万方数据库1994-01/2009-10的相关文献,检索词"热休克蛋白72,骨骼肌",限定文章语言种类为中文。并通过手工检索相关文献。纳入具有原创性,论点论据可靠,观点明确,分析全面,文献主题内容与此论文联系密切的文章。排除实验设计不合理的文章及观点模糊的综述。结果与结论:热休克蛋白广泛存在于生物界,对机体具有保护作用。运动应激诱导骨骼肌细胞中热休克蛋白72mRNA的表达及热休克蛋白72的合成与运动负荷量、运动强度和持续时间密切相关,尤其是运动强度。热休克蛋白72在骨骼肌细胞受到过强应激时,其合成量非但没有减弱相反明显增加。作为肌肉应激指标,热休克蛋白72提供了运动引起的骨骼肌细胞功能变化的重要信息,对预防过度训练和确定随后的训练计划可能是一个很好的量化指标。
  • 运动对骨骼肌丝裂原活化蛋白激酶信号系统的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:丝裂原活化蛋白激酶是生物体内重要的信号转导系统之一,参与介导生长、发育、分裂、分化、死亡以及细胞间的功能同步等多种细胞过程。目的:总结丝裂原活化蛋白激酶对运动后骨骼肌适应性变化的重要作用。方法:采用计算机检索中国期刊全文数据及PubMed数据库1990-01/2009-06期间的相关文章,检索词为"运动;丝裂原活化蛋白激酶信号系统;骨骼肌;适应,Exercise;Mitogen-activated protein kinases; skeletal muscle;adaption"。纳入与运动和丝裂原活化蛋白激酶信号系统研究现状与发展密切相关的文章,排除重复性研究。结果与结论:运动能够激活骨骼肌中丝裂原活化蛋白激酶信号传导系统,不同运动方式、不同类型的肌肉以及训练的时间长短都可以影响到丝裂原活化蛋白激酶的激活,而且激活后丝裂原活化蛋白激酶具有不同的时相性,丝裂原活化蛋白激酶对运动后骨骼肌的适应性变化具有重要作用。通过研究探索丝裂原活化蛋白激酶对运动后骨骼肌的适应性变化,有利于以运动相关的丝裂原活化蛋白激酶为靶点,研制和开发运动功能性食品或抗疲劳药物。
  • 增生性瘢痕的防治现状与展望 免费阅读 下载全文
  • 背景:增生性瘢痕是创伤愈合的异常结局,严重影响体表美观并导致功能障碍。目的:综述国内外关于增生性瘢痕的防治现状与研究概况。方法:应用计算机检索PubMed数据库、EMbase数据库1960-01/2009-01期间相关文章,检索词为"hypertrophic scars,Prevention,treatment",并限定文章语言种类为English。同时计算机检索中国生物医学文献数据库、中文科技期刊全文数据库、中文学术期刊全文数据库1999-01/2009-01期间相关文章,检索词为"增生性瘢痕",并限定文章语言种类为中文。此外还手工查阅相关专著数部。纳入增生性瘢痕的生物学特性、增生性瘢痕的形成原因、增生性瘢痕的临床防治研究类文献。结果与结论:增生性瘢痕的成因来源于成纤维细胞的生物学特性异常,成纤维细胞数量增多,合成并分泌大量的胶原纤维,是瘢痕组织形成的关键环节。对于增生性瘢痕应防治结合,在创伤愈合早期采取预防措施,抑制瘢痕形成,包括硅凝胶防治、药物治疗、激光治疗、放射疗法、冷冻疗法。治疗应采取几种方法联合的综合疗法,比单一疗法效果显著。另外,近几年中药在瘢痕的作用机制、动物实验及剂型改造方面研究层出不穷,加强中医药在防治增生性瘢痕方面的研究很重要。提示增生性瘢痕的防治应从源头上避免或减轻异常瘢痕的发生发展,寻找瘢痕基因缺陷并从基因水平加以修正,中医药在防治增生性瘢痕方面前景广阔有待进一步突破。
  • 陈旧性脊髓损伤的修复与神经功能重建 免费阅读 下载全文
  • 背景:脊髓损伤尤其是陈旧性脊髓损伤所致的瘫痪是一种较为严重的伤残,如何对脊髓损伤患者采取有效的修复治疗方法进行功能重建一直是临床上的难点。目的:探讨陈旧性脊髓损伤的修复与神经功能重建的有效方法,总结陈旧性脊髓损伤修复治疗与神经功能重建的临床经验。方法:应用计算机检索CNKI期刊全文数据库(1996-10/2009-12)和PubMed数据库(1999-10/2009-10)与陈旧性脊髓损伤的治疗和神经功能重建有关的文章,检索词分别为"陈旧性脊髓损伤;神经功能重建;细胞移植;手术治疗;痉挛疼痛"和"obsolete spinal cord injury;surgery;transplants;spasmpain;nerve functional reconstruction"。纳入所述内容与陈旧性脊髓损伤、细胞移植或神经功能重建等方式修复脊髓损伤相关的文章。排除重复研究或Meta分析类文章。结果与结论:收集到107篇相关文献,排除61篇不符合标准的文献,共纳入46篇符合标准的文献。经分析得出以下结论:对于陈旧性非完全性损伤患者,采取细胞移植治疗和显微外科手术治疗可刺激神经细胞再生和解除脊髓、神经根压迫,从而促进神经功能的恢复或再生;对完全性脊髓损伤患者采用截瘫平面以上的正常周围神经旁路转位于平面以下的神经相嫁接,可重建膈肌呼吸功能、部分上肢和手功能、迈步、尿便和足底感觉等关键神经功能,是一种可行的治疗策略。
  • 组织工程化静脉瓣的研究现状与发展趋势(英文) 免费阅读 下载全文
  • 目的:综述国内外组织工程静脉瓣的研究现状,分析组织工程化静脉瓣在临床应用的发展趋势。方法:应用计算机检索2000-01/2009-08PubMed、ProQuest Health& Medical Complete数据库、Springer英文期刊全文数据库、Elsevier全文数据库相关文章,检索词为"tissue engineering venousvalve",并限定文章语言种类为English。同时计算机检索2000-01/2009-08重庆维普科技期刊数据库、清华同方学术期刊数据库、中国生物医学文献数据库相关文章,检索词为"组织工程静脉瓣",并限定文章语言种类为中文。此外还手工查阅相关专著数部。结果:综合分析,可归纳总结出一种比较理想的组织工程化静脉瓣构建方法是将内皮祖细胞和多能成体祖细胞联合应用,分批种植在同种异体来源的脱细胞静脉支架上,在三维立体培养系统上不断加压灌注,最大程度模拟体内环境,使种子细胞能很好的在支架材料上生长成有功能的组织工程化静脉瓣。为组织工程化静脉瓣的临床应用提供实验基础。结论:目前组织工程化静脉瓣的研究取得了相当大的进展和令人鼓舞的成绩,为深静脉功能不全患者带来了曙光,在深静脉功能不全治疗领域有广泛的应用前景。
  • 维汉两民族原发性高血压伴颈动脉粥样病变与对氧磷酶2基因多态性的相关性:同一机构3年430例报告 免费阅读 下载全文
  • 背景:近年的研究发现对氧磷酶2(PON2)可降低低密度脂蛋白的过度氧化从而保护组织免受氧化破坏。目的:分析对氧磷酶2基因多态性(PON2C311S)与原发性高血压伴颈动脉粥样病变的关系。方法:选择2006-01/2009-01新疆医科大学附属第一医院收治的高血压患者共430例,其中294例伴颈动脉粥样病变者为病变组,136例颈动脉内膜正常者为对照组。病变组中汉族214例,维族80例;对照组中汉族103例,维族33例。采用多聚酶链反应-限制性内切酶片断长度多态性技术分析对氧磷酶2基因多态性基因多态性。结果与结论:汉族病变组的CC+CS基因型及C等位基因频率明显高于对照组;舒张压在对氧磷酶2基因多态性位点3种基因型(SS、CS、CC)之间差异有显著性意义(P=0.003),CC基因型舒张压最高。Logistic回归分析表明PON2C311等位基因、年龄、舒张压、脂蛋白(a)是高血压伴发颈动脉粥样病变的危险因素(P〈0.05)。维族病变组的CC+CS基因型及C等位基因频率高于对照组;低密度脂蛋白胆固醇在对氧磷酶2基因多态性位点3种基因型之间差异有显著性意义(P=0.005),CC基因型低密度脂蛋白胆固醇最高。结果提示,新疆地区汉族高血压人群对氧磷酶2基因多态性基因多态性与颈动脉粥样病变有关,C等位基因是高血压伴发颈动脉粥样病变的危险因素之一。
  • 青岛高校218名在校大学生Heath-Carter法体型调查 免费阅读 下载全文
  • 背景:Heath-Carter体型法自20世纪60年代创立,现已成为国际上广泛使用的体型研究方法。近20年来,中国有多位学者应用此法分别对中国多个地区成年人和中小学生的体型进行了研究,然而对大学生体型研究的报道仍然较少。目的:运用Heath-Carter体型测量法对青岛高校在校大学生进行体型测量,并分析其体型特征,补充体质人类学的相关资料。方法:采用Heath-Carter体型法对218名在校大学生进行肱骨内外上髁、股骨内外侧髁间径及肱三头肌位、肩胛下位、髂前上棘位、腓肠肌位皮褶厚度,身高、体质量、臂最大收缩围和小腿围测量。10项指标均由专人负责,每项指标测量3次,取其平均值作为测量结果,并与其他地区大学生体型进行比较。结果与结论:218名学生均进入结果分析。青岛高校男性大学生平均体型值为6.4-2.7-3.0,属于均衡的内胚层体型;女性平均体型值为4.8-2.3-3.0,属于偏外胚层的内胚层体型。内因子和中因子平均值偏高反映出青岛高校男性大学生在肥胖程度、肌肉和骨骼发达程度上较女性偏大,而外因子平均值和HWR值的比较显示出男女大学生身体线性度相近;男生内因子平均离散度和HWR离散度较女生偏高,SAD为1.65±0.51,表明男女大学生体型具有一定的差异。相比较其他群体,青岛高校大学生的脂肪含量较多,肌肉、骨骼发达程度不足,身体线性度偏高。说明青岛高校在校大学生体脂含量高,肌肉、骨骼发达程度不足,体型修长。
  • 骨质疏松女性1455名运动行为分析 免费阅读 下载全文
  • 背景:早在1989年,世界卫生组织就提出预防骨质疏松的3大原则:补钙、运动疗法和饮食。然而,更多的人却把眼光放在补钙和饮食上,忽略了运动疗法在预防骨质疏松上的重要作用。目的:分析女性骨质疏松患者运动与腰椎骨密度相关性,进一步明确运动对人体腰椎骨密度的影响。方法:对2003-08/2005-12在四川大学华西医院康复科门诊及住院女性患者4383人,用双能X光机测定腰椎骨密度,根据骨密度T值评分,其中1455例为骨质疏松患者;并对运动时间进行问卷分级,分为经常运动385例、偶尔运动115例、不运动955例,用SPSS12.0统计软件比较不同运动时间与腰椎骨密度关系。结果与结论:3组骨质疏松患者L2、L3、L4骨密度、平均骨密度及T值均为经常运动组〉不运动组〉偶尔运动组,T值、平均骨密度组间比较差异有显著性意义(P〈0.05),但骨密度组间比较差异无显著性意义(P〉0.05),L2、L3、L4骨容量及骨总容量均为经常运动组〉偶尔运动组〉不运动组,但组间比较差异无显著性意义(P〉0.05)。结果提示,女性骨质疏松患者其运动量增加可提高腰椎骨密度,但要明显提高腰椎骨密度需达到一定运动量。
  • 广州地区中老年人症状性颈椎骨关节炎流行病学调查 免费阅读 下载全文
  • 背景:颈椎骨关节炎是使颈椎发生障碍的疾病,严重影响中老年人的生活质量,目前国内研究相对较少。目的:了解广州地区中老年人症状性颈椎骨关节炎患病率。方法:抽取广州地区具有当地正式户口的40岁及以上居民进行颈椎骨关节炎的流行病学问卷调查。对有症状者进行X射线投照,摄取颈椎正侧位片。颈椎骨关节炎的最终诊断为最严重节段有颈椎骨关节炎临床症状合并影像学Kellgren & Lawrence分级Ⅱ级及以上者。结果与结论:共分析1342名40岁以上人群资料,症状性颈椎骨关节炎总患病率为23.2%,女性多于男性(30.2%vs.15.5%,P〈0.001)。颈椎骨关节炎患病率随年龄增长而升高(P〈0.001);颈5~6节段骨关节炎患病率为21.0%,明显高于周围节段;城市地区患病率明显高于农村地区(P〈0.001)。调查结果说明广州地区症状性颈椎骨关节炎患病率较高,应当引起重视。
  • 跟腱断裂修复后早期应用等速训练仪的康复测评(英文) 免费阅读 下载全文
  • 背景:传统跟腱断裂修复术后石膏固定时间长,效果不佳,存在较多的术后并发症。目的:探讨跟腱断裂修复后早期应用等速训练仪进行康复训练的安全性和有效性。方法:纳入2007-09/2009-09于青岛市立医院东区就诊的跟腱断裂患者11例,其中9例在跟腱修复4周后应用Isomed-2000等速训练仪进行康复训练,时间共8周。评价指标包括Arner-Lindholm评分、踝关节活动范围、屈伸肌峰力矩值等。结果与结论:随访3~12个月,平均6个月。患者Arner-Lindholm评分优良率为88.9%,踝关节活动范围、屈伸肌峰力矩值等指标均较等速训练前显著改善(P〈0.05),无感染和再断裂病例。结果提示跟腱断裂修复后4周应用等速训练仪行等速康复训练是安全和有效的,可为跟腱断裂后早期活动提供参考数据。
  • [研究与报告]
    肿瘤坏死因子α在肢体缺血再灌注损伤软骨中的表达
    脉冲磁场与前软骨干细胞向成熟软骨细胞的增殖与分化:与Ihh/PTHrP信号通路活性有关吗?(丁然 游洪波 李锋 孙凯)
    雪腐镰刀菌烯醇对培养软骨细胞蛋白聚糖合成的影响
    自体骨膜包绕肌腱复合碱性成纤维细胞生长因子作月骨替代物
    雌激素与辛伐他汀序贯法干预对去势大鼠骨质疏松的治疗作用
    Smad7在兔下颌骨牵张成骨过程中的表达
    人骨形成蛋白4基因腺相关病毒及绿色荧光蛋白基因腺相关病毒体外诱导成骨的比较
    即刻种植同期行软组织处理对种植体周围软组织形态的影响
    骨桥蛋白反义核苷酸对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响(李辉 刘奇峰 刘闺男)
    罗格列酮降低氧化应激的作用:促进和动员内皮祖细胞参与了吗?
    TrkB-shiRNA质粒转染心脏微血管内皮细胞
    人日光性角化病角质形成细胞的体外培养

    CRTER杂志“循证医学”栏目稿件体例要求
    近期关于组织工程研究有价值的学科新闻回顾:本刊学术部
    2010年与组织工程相关的学术会议:本刊学术部
    2010年本刊“组织工程”栏目组稿重点
    关于组织工程临床研究与应用的学术争鸣
    来自本文课题的更多信息
    如何向SCI收录的优秀期刊投稿:投稿后还应该做什么?(本刊发展部)
    医学英文句型正误辨析:本刊英文部
    母亲和母亲节
    [技术与方法]
    沙利度胺与胶原诱导型关节炎大鼠炎症因子的表达
    静脉应用血小板源性生长因子质粒减小梗死心肌面积的可行性
    重组外源性人热休克蛋白70基因真核表达载体的构建及鉴定
    壮筋续骨汤促进大鼠胫骨骨折愈合:RT-PCR法检测核心结合子α1基因表达的验证
    海桐皮汤熏洗治疗膝骨性关节炎:与扶他林乳剂的比较
    电针干预自发性高血压大鼠主动脉丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶1及磷酸化细胞外信号调节激酶1/2蛋白的表达
    超选左前降支微血栓微球混悬液分次灌注构建小型猪急性心肌梗死后缺血性心力衰竭组织工程学模型(张晶 傅向华 贾辛未 马宁 谷新顺 刘晓坤 樊欣娜 姜云发 范卫泽)
    建立荷人结肠癌裸鼠移植瘤模型及MRI成像检查
    早期激素性股骨头缺血性坏死模型的建立及半胱天冬酶3活性测定(胡峰 赵劲民 李晓峰 梁晓南 陆荣斌)
    反流性食管炎大鼠模型的制备:不同管径内支架支撑幽门及前胃结扎
    应用Cyclin D1和bcl-2为靶标的siRNA慢病毒载体构建和鉴定
    酵母双杂交系统3筛选人源核不均一核糖核蛋白E1的功能伙伴
    局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠与促红细胞生成素的神经保护作用(刘锋 龙慧 梁江红)
    心肌桥壁冠状动脉内皮细胞超微结构及血流动力学变化
    周围神经损伤后最佳修复时间时机的选择
    实验动物臂丛神经的拉伸力学特性
    转染碱性成纤维细胞生长因子基因在成肌细胞中表达及调控系统的建立(英文)
    常氧条件下同时表达突变型低氧诱导因子1α目的蛋白和人源化绿色荧光蛋白报告分子腺病毒真核表达载体的构建(英文)(刘丹平 王国贤 胡亮 李谌)
    [本刊特稿]
    组织工程心脏瓣膜:选择及发展
    组织构建中的基质金属蛋白酶及其抑制剂:本刊中文部
    [学术探讨]
    椎间盘源性腰痛的病理生理学机制及组织工程学技术(江正 尹宗生)
    机械生长因子对骨骼肌卫星细胞的调控(孙婧瑜 陆耀飞)
    骨骼肌细胞中热休克蛋白72表达与运动及肌肉损伤(卢文彪)
    运动对骨骼肌丝裂原活化蛋白激酶信号系统的影响
    增生性瘢痕的防治现状与展望
    陈旧性脊髓损伤的修复与神经功能重建(朱红伟 张少成)
    组织工程化静脉瓣的研究现状与发展趋势(英文)(袁建明 党瑞山 沈曼茹 张传森)
    [调查分析]
    维汉两民族原发性高血压伴颈动脉粥样病变与对氧磷酶2基因多态性的相关性:同一机构3年430例报告
    青岛高校218名在校大学生Heath-Carter法体型调查(邱桐 赵丹 梁欢 和政 金利新)
    骨质疏松女性1455名运动行为分析
    广州地区中老年人症状性颈椎骨关节炎流行病学调查
    跟腱断裂修复后早期应用等速训练仪的康复测评(英文)
    《中国组织工程研究与临床康复》封面

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