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文献检索:
  • 社长的话 免费阅读 下载全文
  • 最给力的2011年“我托空气为邮差,把热气腾腾的问候装订成包裹,印上真情为邮戳,愿接受快件的人是你,祝2011年快乐”!给力吗?这是我看到的和我感觉到的2011年网络上飘着的无数个祝福短信中最给力的一条。因为她所充满的真挚的感情色彩,
  • 核转染对成体骨髓源性干细胞的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:成体骨髓源性干细胞是实施细胞治疗的重要细胞来源。对成体骨髓源性干细胞的示踪,是研究其移行、分化的规律与机制并进一步阐明再生潜能、疗效的关键。目的:探讨经转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,在细胞表型、增殖能力、心肌分化潜能是否存在的影响。方法:应用核转染技术利用U-23程序将编码maxGFP报告基因的载体对成体骨髓呈克隆样干细胞进行转染,应用MTT法对核转染前后的生长曲线进行测定,使用3μmol/L5-氮胞苷对核转染前后成体骨髓呈克隆样干细胞进行向心肌分化诱导,并利用RT-PCR对向心肌分化的特异性标记物GATA4与MLC-2v的表达进行测定。使用成年SD大鼠心肌梗死左前降支结扎模型,对使用经maxGFP转染的成体骨髓呈克隆样干细胞施心内注射并于注射后的第2天和第7天对经注射心脏行冰冻切片并观察maxGFP在体内的表达情况。结果与结论:经核转染24h后,第47代及第119代成体骨髓呈克隆样干细胞的转染率为49.4%和43.1%,转染后5h,开始出现呈绿色荧光阳性的细胞,经核转染后仍能保持小圆球形、可贴壁、呈克隆样生长。MTT检测结果显示:核转染前后第47代及第119代均具有相似的生长曲线。核转染前第47代及119代细胞平均群体倍增时间分别为8.57,10.28h;核转染后分别为9.42,10.42h,各代前后比较差异无显著性意义(P=0.551,P=0.774)。RT-PCR检测结果显示:核转染前5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强;核转染后5-氮胞苷处理前后均表达GATA4,处理后MLC-2v条带更强,上述2个向心肌分化指标于转染前后变化并不明显。体内实验结果:心内注射经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞,第2天及第7天可在经注射心肌中发现有少量绿色荧光阳性的细胞。提示,核转染可快速地将外源基因导入细胞,经核转染后的成体骨髓呈克隆样干细胞仍能保持其细胞形态、增殖能力及向心肌分化潜能,然而,经maxGFP基因核转染的成体骨髓呈克隆样干细胞,移植入心肌后只有少数细胞能表达经转染基因。
  • 损伤脊髓匀浆上清对骨髓间充质干细胞分泌髓鞘前脂蛋白、脑源性神经营养因子的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:损伤脊髓匀浆上清成分复杂,其中不仅存在多种化学物质,而且也存在着多种细胞因子,这些物质能否影响骨髓间充质干细胞的增殖分化和分泌功能还不清楚。目的:探讨损伤脊髓匀浆上清成分对骨髓间充质干细胞分泌的脑源性神经营养因子和髓鞘前脂蛋白的影响。方法:贴壁法分离纯化Wistar大鼠骨髓间充质干细胞,稳定传到第3代后,分别用正常和损伤的Wistar大鼠脊髓匀浆上清诱导培养20d。免疫荧光染色检测神经元特异性烯醇化酶阳性细胞,ELISA法检测培养液内髓鞘前脂蛋白、脑源性神经营养因子的含量,即时定量-PCR检测髓鞘前脂蛋白mRNA、脑源性神经营养因子mRNA水平。结果与结论:损伤脊髓匀浆上清液诱导培养骨髓间充质干细胞后,神经元特异性烯醇化酶阳性细胞率和培养液内脑源性神经营养因子、髓鞘前脂蛋白的含量在各个时间点均较正常脊髓匀浆上清液对骨髓间充质干细胞培养组高。提示,损伤的脊髓匀浆上清液能够诱导骨髓间充质干细胞分泌脑源性神经营养因子、髓鞘前脂蛋白,有利于向神经细胞方向分化。
  • 低渗结合自然沉降法分离兔骨髓间充质干细胞及其鉴定 免费阅读 下载全文
  • 背景:骨髓间充质干细胞数量极少,10万个骨髓有核细胞中才有1个骨髓间充质干细胞,如何成功分离并鉴定骨髓间充质干细胞是研究中的关键工作。目的:建立完善的骨髓间充质干细胞体外分离培养体系,从细胞的形态、表型和功能方面鉴定骨髓间充质干细胞。方法:低渗原理去除杂细胞,结合自然沉降分离骨髓间充质细胞,并对其形态学特征进行光镜观察。对骨髓间充质细胞的表型进行流式细胞仪检测。并将骨髓间充质细胞向成骨细胞和脂肪细胞进行诱导分化,行形态学观察和碱性磷酸酶、Vonkossa、Ⅰ型胶原、油红O染色检测。结果与结论:实验分离获取的骨髓间充质细胞经表型鉴定为:CD29(+),CD45(-);向成骨细胞诱导后,碱性磷酸酶、矿化结节染色及Ⅰ型胶原检测均为阳性;向脂肪细胞诱导后,油红O染色阳性。结果表明实验分离的骨髓间充质细胞为类成纤维细胞样非造血类干细胞,此类细胞具有向成骨细胞和脂肪细胞分化的功能。
  • 骨髓脂肪细胞向成骨细胞的转分化 免费阅读 下载全文
  • 背景:骨髓脂肪细胞、成骨细胞共同来源于骨髓基质细胞,二者存在基因同源性,在一定的条件下可以相互转分化。目的:观察骨髓细胞源性脂肪细胞在成骨诱导分化培养条件下转分化为成骨细胞的活性,探索股骨头坏死细胞水平治疗的新途径。方法:将前脂肪细胞3T3-L1分别进行成骨诱导培养和成脂诱导培养。培养后不同时间点观察细胞形态的变化;并于诱导培养后5,21d分别进行实时定量-聚合酶链反应检测成骨、成脂分化过程中,细胞中Runt相关基因转录因子2、氧化物增殖体激活物受体γ2、骨钙素和Ⅰ型胶原mRNA表达。并于成骨、成脂培养21d后采用Wertern-blot法检测相关蛋白的表达。培养细胞爬片,分别进行碱性磷酸酶、钙结节茜素红、油红O染色,观察3T3-L1成骨转分化情况以及成骨细胞活性表达。结果与结论:3T3-L1在成骨诱导培养5d后,细胞由圆形逐渐演变成纺锤形和梭形;实时定量-聚合酶链反应检测结果与对照组相比,氧化物增殖体激活物受体γ2mRNA表达减弱,而Runt相关基因转录因子2、骨钙素和Ⅰ型胶原mRNA表达微量增强。至21d时,这种表达改变更加明显;Western-blot显示,Runt相关基因转录因子2、骨钙素和Ⅰ型胶原蛋白量增加,而氧化物增殖体激活物受体γ2微量甚至无表达;碱性磷酸酶染色阳性表达较多,茜素红钙结节染色可见多个散在分布的钙结节;油红O染色微量脂滴。提示小鼠骨髓基质细胞源性前脂肪细胞3T3-L1在成骨诱导培养下,可在一定程度上转分化为有生物活性的成骨细胞;小鼠骨髓基质细胞的脂肪细胞和成骨细胞二者之间存在着可塑性。
  • 脂肪来源神经干细胞移植局灶性脑缺血模型大鼠的血管新生 免费阅读 下载全文
  • 背景:脂肪组织来源的神经干细胞移植可改善脑缺血大鼠神经功能,但其机制尚不明确。目的:观察人脂肪组织来源神经干细胞移植对大鼠局灶性脑缺血后血管新生的影响。方法:体外培养脂肪基质细胞,诱导分化为神经干细胞。60只健康雄性SD大鼠分为4组:正常组6只,假手术组6只,缺血对照组24只,移植治疗组24只。后两组线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血2h再灌注模型,又分为缺血2h再灌注7,14,21,28d组,每个时点各6只。假手术组不闭塞大脑中动脉。造模成功后24h,移植治疗组经尾静脉移植人脂肪组织来源神经干细胞悬液,细胞浓度为2×109L-1;缺血对照组经尾静脉注射生理盐水。免疫组织化学法进行微血管密度计数,观察脑缺血区血管增生情况。结果与结论:免疫组织化学结果显示,与缺血对照组比较,移植治疗组缺血2h再灌注7,14,21,28d的微血管密度值均显著高于缺血对照组,差异有显著性意义(P〈0.05~0.01)。提示脂肪组织来源的神经干细胞移植可促进脑缺血区新生血管的形成。
  • 如何向SCI收录的优秀期刊投稿:投稿前反复校对,细节决定一切 免费阅读 下载全文
  • CHECKLIST T0 USE BEFORE SUBMITTING A PAPER T0 A JOURNAL在文章提交前请检查自己对所投文章是否完成了以下工作。Have you---------?1 检查全文的拼写spell checked the whole paper?2 对文章至少改写3次rewritten your paper at least three times?
  • SD大鼠脂肪源间充质干细胞分离培养特性及影响因素 免费阅读 下载全文
  • 背景:脂肪源间充质干细胞因为容易大量获得、抽取后残留于供区的脂肪组织仍可扩增、供区的损伤小等优点,成为干细胞生物工程研究的理想种子细胞来源。但是,脂肪源间充质干细胞分离培养有较大困难。目的:探索脂肪源间充质干细胞的分离培养方法及其生长特性。方法:分别取4周龄和10月龄不同性别的SD大鼠腹股沟、肩部和腹腔脂肪组织,经细胞培养液洗涤、离心后接种于细胞培养瓶,放置体积分数5%CO2孵箱中培养,分别于24,48,72h后换液。待细胞密度达到约80%时,用0.25%胰酶-EDTA消化,传代培养。分析SD大鼠的年龄、性别、采集脂肪组织的部位、胶原酶Ⅰ的浓度和消化时间,以及原代细胞的首次换液时间等对脂肪源间充质干细胞培养的影响。结果与结论:原代脂肪源间充质干细胞呈梭形或多角形。随着传代和培养时间的延长,脂肪源间充质干细胞由多边形、成巢分布,逐渐连接成片,伸展为梭形或多角形。培养48h后,含脂滴的细胞数量逐渐增多,但仍有90%的脂肪源间充质干细胞始终不表现向脂肪细胞自发分化的趋势。4周龄雌性SD大鼠腹腔脂肪组织在一定条件下传代培养最佳。提示,从SD大鼠腹腔脂肪组织中分离的脂肪源间充质干细胞可在体外稳定传代,SD大鼠的年龄、性别、采集脂肪组织的部位、胶原酶Ⅰ的浓度和消化时间,以及原代细胞的首次换液时间等均影响脂肪源间充质干细胞的分离培养效果。
  • 人脐带间充质干细胞移植改善糖尿病兔下肢缺血 免费阅读 下载全文
  • 背景:将骨髓和自体外周血干细胞移植到糖尿病下肢缺血患者的下肢肌肉内后,可促进血管再生,改善和恢复糖尿病下肢缺血患者的患肢血流,但采集风险较大,对患者年龄、身体条件、心理接受程度要求较高。与骨髓和自体外周血干细胞相比,脐带资源丰富,细胞采集简单,免疫原性弱。目的:探讨人脐带间充质干细胞移植改善糖尿病兔下肢缺血的可行性。方法:建立糖尿病兔动物模型,结扎双后肢股动脉及分支制备下肢缺血动物模型。取经DIL染料标记的人脐带间充质干细胞悬液分15点(每点平均细胞数约为1.67×106)注射于左后肢缺血部位,右后肢缺血部位注射生理盐水,分别于第2,4周后取双侧后肢内收肌和腓肠肌标本,病理切片观察血管新生程度,CD31免疫组化检测毛细血管密度并进行皮温测定。结果与结论:病理切片显示移植组较对照组侧支血管明显增多,CD31免疫组化标记移植组较对照组毛细血管密度增加,移植组皮温比对照组明显增高,差异有显著性意义(P≤0.05)。实验结果表明人脐带间充质干细胞移植是改善糖尿病下肢缺血的一种有效手段。
  • 血管内皮细胞生长因子/骨形态发生蛋白2联合修饰骨髓间充质干细胞修复股骨头坏死 免费阅读 下载全文
  • 背景:将血管内皮细胞生长因子及骨形态发生蛋白二者联合修复坏死骨,有可能在保持种子细胞成骨表型的同时,又能持续高效地分泌血管内皮细胞生长因子及骨形态发生蛋白2,从而有效促进血管再生,促进组织工程化骨组织的形成和再血管化。目的:观察血管内皮细胞生长因子165/骨形态发生蛋白2体外修饰骨髓间充质干细胞移植治疗兔股骨头缺血性坏死效果。方法:建立兔右侧股骨头缺血性坏死模型,并以抽签法随机分为3组:单纯髓芯减压组、髓芯减压+骨髓间充质干细胞组、髓芯减压+血管内皮细胞生长因子165/骨形态发生蛋白2转染骨髓间充质干细胞组。关节镜监视下将坏死骨清除,组织学检查成骨及血管生成情况。结果与结论:通过关节镜观察显示各组坏死骨清除干净,有新鲜血流出。组织形态学检测发现,髓芯减压+血管内皮细胞生长因子165/骨形态发生蛋白2转染骨髓间充质干细胞组移植后不同时间点血管数量及修复区新骨面积比显著高于单纯髓芯减压组、髓芯减压+骨髓间充质干细胞组(P〈0.05)。提示血管内皮细胞生长因子165/骨形态发生蛋白2基因转染加强了骨髓间充质干细胞成骨作用,提高了新生骨的数量与质量,加快了股骨头缺血性坏死的修复。
  • 骨髓间充质干细胞对免疫介导再生障碍性贫血的治疗 免费阅读 下载全文
  • 背景:骨髓间充质干细胞具有免疫调节作用,可以影响淋巴细胞和其他免疫细胞的功能,同时其分泌的因子尚有支持造血的作用。而再生障碍性贫血的发生、发展与T细胞功能亢进引起的造血干、祖细胞凋亡密切相关。目的:比较骨髓间充质干细胞和全骨髓细胞治疗免疫介导再生障碍性贫血小鼠的疗效。方法:建立BALB/C小鼠免疫介导再生障碍性贫血模型。将BALB/C小鼠随机分成正常组、对照组、注射骨髓间充质干细胞和注射全骨髓细胞组。观察骨髓间充质干细胞和全骨髓细胞对实验动物的疗效及骨髓的造血组织容量、脂肪细胞和血窦结构。结果与结论:再生障碍性贫血模型小鼠至第20天,对照组全部死亡,骨髓间充质干细胞组4例死亡,全骨髓细胞组1例死亡。②骨髓间充质干细胞组和全骨髓细胞组存活小鼠,其体质量变化趋势、血细胞计数、骨髓造血功能恢复均无显著性差异。③检测骨髓间充质干细胞组和全骨髓细胞组脾脏CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+/CD8+的比值示无差异,与正常小鼠相比,骨髓间充质干细胞组外周血CD4+T细胞、CD8+T细胞水平有下降趋势。全骨髓细胞组CD8+T细胞水平明显下降。提示,单独使用骨髓间充质干细胞治疗能够使部分再生障碍性贫血模型小鼠症状改善、造血恢复。骨髓间充质干细胞治疗有效率不如全骨髓细胞,但两组无显著性差异。
  • 骨髓间充质干细胞预移植1周后构建心肌缺血再灌注损伤大鼠模型 免费阅读 下载全文
  • 背景:急性心肌梗死用溶栓或介入手段开通阻塞血管后,因心肌缺血再灌注损伤而很难达到满意的疗效。目的:观察骨髓间充质干细胞移植对大鼠心肌缺血再灌注损伤的修复作用。方法:取健康3周龄SD大鼠的骨髓细胞悬液,进行骨髓间充质干细胞体外扩增培养。受体SD大鼠接受骨髓间充质干细胞或无血清DMEM心肌注射1周后建立心肌缺血再灌注损伤模型,心肌缺血0.5h再灌注2h后测定血清乳酸脱氢酶水平、心肌组织总超氧化物歧化酶活力及丙二醛水平;采用缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡情况;免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达变化。结果与结论:分离培养的骨髓间充质干细胞增殖旺盛,纯度较高,且均质性和稳定性好;与缺血再灌注组相比,细胞移植组乳酸脱氢酶的漏出减少,总超氧化物歧化酶活性增加,丙二醛含量减少(P〈0.01);细胞移植组心肌细胞凋亡指数显著低于缺血再灌注组(P〈0.01);细胞移植组Bcl-2蛋白表达高于缺血再灌注组(P〈0.05),Bax/Bcl-2比值低于缺血再灌注组(P〈0.05)。结果表明骨髓间充质干细胞移植对大鼠心肌缺血再灌注损伤的修复可起促进作用。
  • 心肌声学造影评价自体骨髓单个核细胞移植急性心肌梗死后的心肌再灌注:与核素心肌灌注成像比较 免费阅读 下载全文
  • 背景:以往对干细胞移植治疗急性心肌梗死后心肌再灌注的评价主要采用核素显像、MRI显像等,但这类方法重复性较差,并具有放射性。目的:分析经静脉心肌声学造影对急性心肌梗死行自体骨髓单个核细胞移植后心肌再灌注的评价。方法:对24例急性心肌梗死患者于单个核细胞移植前后行经静脉心肌声学造影检查,测量平台期的心肌显像增大强度A、曲线上升平均斜率β及A与β之积在移植前后的变化,并与心肌核素显像随访结果相对照,判定心肌再灌注情况。结果与结论:经静脉心肌声学造影显示,患者移植后相关心肌节段的A、β及A?β之积均较移植前显著增加(P〈0.01),其中血管开通后β值的变化幅度最大,随访6个月后A值变化幅度增大,说明血管开通即刻先有灌注速度加快,移植后6个月心肌灌注缺损明显改善。移植后6个月梗死区即刻和延迟相心肌核素摄取均较移植前增强,SPECT心肌灌注图像评分较移植前显著下降(P〈0.05)。说明经静脉心肌声学造影结果与核素心肌灌注显像基本一致,可床旁无创评估移植心肌细胞微循环灌注情况。
  • 粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合动员异基因造血干细胞移植 免费阅读 下载全文
  • 背景:目前FDA已批准应用于临床外周血造血干细胞移植的动员剂只有粒细胞集落刺激因子和粒-巨噬细胞集落刺激因子,其中粒细胞集落刺激因子单药应用是目前最主要的动员方案,但可引起供者骨骼肌肉酸痛、发热等不良反应。目的:回顾性分析以粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合应用为动员方案的异基因造血干细胞移植临床效果。方法:选择2004-01/2009-10河南省人民医院血液科以粒细胞集落刺激因子与粒-巨噬细胞集落刺激因子联合应用为动员方案进行血缘全相合异基因造血干细胞移植51例,分析移植物成分、造血重建及移植物抗宿主病的发生率。结果与结论:动员96h后CD34+细胞占单个核细胞的比例为(0.97±0.13)%,CD34+CD38-细胞占CD34+细胞的比例为(37.49±4.03)%;移植后的快速造血重建与CD34+细胞、CD34+CD38-细胞输入量呈负相关。Ⅰ度、Ⅱ~Ⅳ度急性移植物抗宿主病的发生率分别为25.5%,15.7%;局限性、广泛性慢性移植物抗宿主病的发生率分别为39.2%,21.2%。提示在血缘全相合异基因造血干细胞移植中,粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合可有效实现干细胞动员,所获CD34+细胞完全可以满足快速造血重建的需要;输入较多的CD34+细胞、CD34+CD38-细胞可能利于快速造血重建。
  • 自体干细胞原位移植治疗青中年缺血性脑卒中 免费阅读 下载全文
  • 背景:如能提高患者内源性干细胞水平,使之归巢到损伤部位,从而增强损伤后自我修复能力,这样既符合机体自身损伤的反应性修复机制,又可以避免异基因移植引起的免疫排斥反应。目的:通过观察粒细胞集落刺激因子动员自体干细胞原位移植治疗青中年急性缺血性脑卒中患者功能恢复及梗死面积变化,探讨原位移植治疗青中年缺血性脑卒中的安全性和有效性。方法:40例青中年大脑中动脉区急性缺血性脑卒中患者,随机分为原位移植组20例和对照组20例。原位移植组在发病7~10d内开始给予粒细胞集落刺激因子15μg/kg皮下注射连用5d,动员自体干细胞原位移植,其他治疗同对照组;对照组予以常规治疗。取发病10d内及发病3个月后CT片进行阿尔伯特CT评分(ASPCTS)及国立卫生研究院卒中评分(NIHSS)。结果与结论:治疗过程中患者未出现严重不良反应。随访3个月,原位移植组ASPCTS评分明显增加,NIHSS评分减小明显,与对照组比较差异有显著性意义(P〈0.05)。结果表明粒细胞集落刺激因子动员自体干细胞原位移植治疗青中年急性脑梗死安全可行,能显著减小脑梗死体积和促进神经功能恢复。
  • 造血干细胞移植与非移植治疗重型再生障碍性贫血的比较 免费阅读 下载全文
  • 背景:造血干细胞移植是公认的重型再生障碍性贫血最好的治疗办法。国内外已经开始进行了多种造血干细胞来源的移植,包括亲缘单倍体移植、非血缘移植,而联合间充质干细胞移植提高疗效的报道多为单独个案报道。目的:回顾性对比分析造血干细胞移植与非移植治疗重型再生障碍性贫血的疗效。方法:2008-04/2010-04住院的17例重型再生障碍性贫血患者,年龄3~53岁,8例患者接受造血干细胞移植,9例患者接受了非移植治疗。移植组的8例患者分别接受了亲缘HLA半相合(4例)、HLA相合(2例),非血缘(2例)的造血干细胞移植,在所有移植的患者中有4例在造血干细胞输注的同时静脉输注体外培养扩增的间充质造血干细胞。非移植治疗组9例患者主要采用免疫抑制剂和促造血治疗。结果与结论:移植组除1例45岁患者接受过非移植方法治疗11个月无效,合并肾功能衰竭、肺部真菌感染时才行造血干细胞移植,死于移植合并症外,余7例患者移植后染色体及DNA指纹检测等说明造血干细胞移植完全供者植入,造血功能恢复快,中性粒细胞达到0.5×109L-1,血小板计数≥20×109L-1中位时间分别为12d和14d;其中接受间充质干细胞输注的4例患者平均中性粒细胞达到0.5×109L-1,血小板计数≥20×109L-1的中位时间均为11.6d。移植患者发生Ⅰ,Ⅱ度急性移植物抗宿主病4例,局限慢性移植物抗宿主病者4例,移植后生活质量良好,无需血制品输注,无严重感染和出血。而非移植组患者治疗后造血功能均未恢复正常,1例死于脑出血和感染,余患者生活质量低下,需要反复住院对症治疗,长期间断的血制品输注;治疗后出现多种严重的合并症。结果表明造血干细胞移植是高效的治疗重型再生障碍性贫血的方法,患者造血恢复快,移植物抗宿主病可以预防和控制,生活质量高,疗效明显优于非移植治疗。
  • 基质细胞衍生因子1α及受体CXCR4对颈总动脉球囊损伤血管平滑肌细胞和骨髓基质细胞的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:在细胞因子的作用下,骨髓基质细胞可以向内皮祖细胞分化,并迁移至损伤部位增殖,参与血管新生内膜的修复。目的:观察基质细胞衍生因子1α及其受体CXCR4在大鼠颈总动脉球囊损伤后对血管平滑肌细胞和骨髓基质细胞的影响。方法:体外培养大鼠颈总动脉球囊损伤后各时间点(即刻、1,4,7,14及1个月)的血管平滑肌细胞和骨髓基质细胞,检测损伤后平滑肌细胞中基质细胞衍生因子1α及骨髓基质细胞中CXCR4的表达情况,并应用基质细胞衍生因子1αsiRNA转染损伤后血管平滑肌细胞,同时应用transwell小室观察基质细胞衍生因子1α和损伤后血管平滑肌细胞对骨髓基质细胞的趋化作用。结果与结论:大鼠颈总动脉球囊损伤后,平滑肌细胞中基质细胞衍生因子1αmRNA表达开始增加,至损伤第7天后逐渐减弱;血管损伤后4d起,骨髓基质细胞中CXCR4mRNA开始出现,并持续表达;transwell小室显示损伤后的骨髓基质细胞对基质细胞衍生因子1α的趋化性增强;CXCR4受体拮抗剂AMD3100可以明显减弱基质细胞衍生因子1α对骨髓基质细胞的趋化作用;损伤后的血管平滑肌细胞对骨髓基质细胞的趋化作用强于基质细胞衍生因子1α(P〈0.05),应用AMD3100干预或细胞内转染基质细胞衍生因子1αsiRNA后,此趋化作用亦减弱(P〈0.05)。结果提示,基质细胞衍生因子1α/CXCR4轴在骨髓基质细胞向损伤血管迁移中起重要的作用。
  • 碱性成纤维生长因子和神经生长因子联合应用培养成年大鼠海马神经干细胞向神经元样细胞的分化 免费阅读 下载全文
  • 背景:影响神经干细胞向神经元分化的因素很多,各种营养因子可以不同程度地刺激神经干细胞向神经元分化,如何使神经干细胞大量分化为神经元是研究的热点问题。目的:观察联合应用碱性成纤维生长因子和神经生长因子对成年大鼠海马神经干细胞为神经元的影响。方法:无菌条件下分离大鼠脑海马组织,传至第4代克隆球直径约为200μm时,滴加DMEM/F12+2%B27+20μg/L表皮生长因子+20μg/L碱性成纤维细胞生长因子,进行单细胞克隆培养,传代的神经干细胞分成空白对照组、碱性成纤维细胞生长因子组、神经生长因子组、碱性成纤维细胞生长因子+神经生长因子组。观察传代后的克隆球进行神经干细胞免疫细胞化学染色鉴定,计数神经元特异性烯醇化酶阳性细胞率,检测神经干细胞向神经元的分化情况。结果与结论:①单细胞克隆培养后,克隆球细胞表达巢蛋白,诱导分化后神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白均呈阳性表达。②与空白对照组神经干细胞分化为神经元的比例比较,碱性成纤维细胞生长因子组、神经生长因子组、碱性成纤维细胞生长因子组+神经生长因子组均明显提高(P〈0.05),且碱性成纤维细胞生长因子组+神经生长因子组神经元的比例最高(P〈0.05)。提示,碱性成纤维细胞生长因子可以提高神经生长因子诱和神经生长因子均可促进神经干细胞向神经元分化,且二者联合应用效果更佳。
  • 外国专家修饰的医学英语句型:本刊英文部 免费阅读 下载全文
  • 胚胎干细胞核心转录因子靶基因集蛋白互作网络特征分析 免费阅读 下载全文
  • 背景:外源性核心转录因子导入终末分化细胞能产生具有与胚胎干细胞特性相似的诱导多潜能干细胞,其复杂机制目前尚未完全阐明。目的:分析核心转录因子靶基因集蛋白互作网络特征,获得其影响"干性"特征的调控机制。方法:去除BioGRID数据库中的冗余数据,获得非冗余蛋白互作数据库。perl程序搜索靶基因集组成的蛋白互作对,广度优先算法搜索非冗余蛋白互作数据库,获得靶基因集组成的最大连续蛋白互作网络,同时进行1000次随机抽样网络分析。通过Cytoscape软件对网络进行可视化分析。复杂无标度网络Barabasi-Albert模型分析网络特征。结果与结论:核心转录因子靶基因集形成更多的蛋白互作对,最大连续蛋白网络与随机蛋白网络相比具有明显的统计学差异,且核心转录因子靶基因集形成更大的互作网络。网络具有复杂网络无标度特性。该研究通过蛋白互作网络分析证明:靶基因集通过紧密相互作用,形成网络模块方式协调调控胚胎干细胞分子特性。
  • 小鼠移植物抗宿主病模型的建立 免费阅读 下载全文
  • 背景:小鼠移植物抗宿主病是异基因造血干细胞移植的主要并发症,表现为多系统损害(皮肤、食管、胃肠、肝脏等)的全身性疾病,是造成异基因造血干细胞移植后死亡的重要原因之一。目的:探讨建立小鼠移植物抗宿主病模型的方法,为实验性研究药物防治移植物抗宿主病提供有效的动物模型。方法:选择C57BL/6(H-2b)→BALB/C(H-2d)作为完全异基因移植供、受体。通过注射移植供鼠脾脏淋巴细胞及骨髓细胞数以建立移植物抗宿主病模型。根据临床表现、病理检查等判断移植物抗宿主病模型是否建立。结果与结论:给予5×106个以上的供鼠脾细胞的小鼠都发生了急性移植物抗宿主病,但小鼠移植物抗宿主病出现的时间、存活期不同。提示,输入5×106个供鼠脾细胞可有效建立移植物抗宿主病模型,小鼠异基因骨髓移植动物模型是可靠的,可用于移植物抗宿主病防治的实验性研究。
  • siRNA阻断B7H1在人胎盘间充质干细胞上表达对其黏附和迁移的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:人胎盘间充质干细胞表达的共刺激分子B7H1在其负性免疫调节作用中发挥着重要作用,但B7H1对人胎盘间充质干细胞生物学行为的影响尚未见报道。目的:观察阻断B7H1对人胎盘间充质干细胞黏附和迁移的影响。方法:采用消化法分离、培养人胎盘间充质干细胞,体外扩增培养3代后用于实验。用流式细胞仪及RT-PCR检测人胎盘间充质干细胞对B7H1的表达。用阳离子脂质体法将针对B7H1的siRNA转染入细胞,应用RT-PCR法检测B7H1基因在mRNA水平的变化。然后应用细胞计数法检测人胎盘间充质干细胞的黏附能力,Transwell法检测迁移能力。结果与结论:人胎盘间充质干细胞高表达B7H1,siRNA转染能有效阻断B7H1的表达;接种后0.5h阻断组人胎盘间充质干细胞的黏附率与对照组相比差异无显著性意义,但在接种后1,3h阻断组细胞黏附率均明显高于对照组(P〈0.05);Transwell检测结果显示,在SDF-1α单独存在条件下、DMEM-LG完全培养基或者人胎盘间充质干细胞培养上清条件下,阻断组细胞的迁移数量均比对照组显著减少(P〈0.01)。结果表明阻断B7H1的表达后,人胎盘间充质干细胞的黏附能力增强,而迁移能力受到抑制。提示B7H1在人胎盘间充质干细胞的黏附和迁移中发挥重要作用。
  • 悬滴三步法体外诱导小鼠胚胎干细胞向心肌样细胞的分化 免费阅读 下载全文
  • 背景:研究胚胎干细胞分化为心肌细胞的条件和技术,进一步提高诱导分化率、细胞纯度,具有重要的理论和临床应用意义。目的:建立体外诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞模型,为体外研究心肌细胞发育提供合适的实验方法。方法:采用悬滴-悬浮-贴壁三步法(悬滴三步法)对未分化的胚胎干细胞进行体外诱导分化培养,并按诱导剂的不同分为6组,Ⅰ组:丹参+5-氮杂胞苷;Ⅱ组:丹参+维甲酸;Ⅲ组:5-氮杂胞苷;Ⅳ组:丹参;Ⅴ组:维甲酸;Ⅵ组:阴性对照。诱导剂加入后9d,免疫细胞化学方法检测拟胚体α-actinin、myosin、α-actin的表达。结果与结论:诱导剂加入后第2天,倒置显微镜下见拟胚体自发性收缩,每个拟胚体可有1个或多个收缩中心。免疫细胞化学示心肌特异性结构蛋白α-actinin、myosin、α-actin均成阳性表达。Ⅰ组心肌细胞的分化率最高,与Ⅱ、Ⅵ组心肌细胞分化率比较差异有非常显著性意义(P〈0.01),与Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组比较差异有显著性意义(P〈0.05)。结果显示悬滴三步法联合中药丹参与5-氮杂胞苷为诱导剂,可提高体外胚胎干细胞分化为心肌细胞的分化率。
  • 糖尿病大鼠表皮干细胞的分离培养及特性 免费阅读 下载全文
  • 背景:表皮干细胞作为皮肤组织特异性干细胞,在创面修复中发挥关键作用。但有关糖尿病皮肤来源的表皮干细胞体外分离培养及生物特性研究较少。目的:探索糖尿病大鼠表皮干细胞体外分离培养的方法及其生物特性,为糖尿病难愈创面的防治及机制研究提供实验依据。方法:SD大鼠随机分成糖尿病组和正常对照组。糖尿病组采用一次性腹腔注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,正常对照组不作处理。分别取成模糖尿病和正常大鼠背部全层皮肤,采用酶消化联合Ⅳ型胶原黏附法分离培养大鼠表皮干细胞。倒置相差显微镜下观察细胞形态变化和细胞克隆形成,细胞计数绘制生长曲线,计算克隆形成率,免疫细胞化学染色和图像分析软件鉴定K19、β1-integrin阳性表达和测定阳性细胞的积分吸光度(IA)值。结果与结论:糖尿病组大鼠表皮干细胞原代贴壁数量较少,其克隆形成率明显低于正常对照组(P〈0.01)。表皮干细胞的K19、β1-integrin均呈阳性表达,糖尿病组阳性细胞的IA值均低于正常对照组(P〈0.01)。结果提示,运用酶消化联合Ⅳ型胶原黏附法可以实现糖尿病大鼠表皮干细胞的体外分离培养;糖尿病大鼠表皮干细胞体外增殖能力较正常皮肤增殖能力弱,这可能是导致糖尿病创面难愈合的重要因素之一。
  • 亚甲蓝/光化学法灭活病毒对血浆成分的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:对血液进行病毒灭活是保障安全输血的措施之一,亚甲蓝/光化学法灭活人血浆中病毒的效果已被证实,但其对血浆成分影响的报道很少。目的:观察亚甲蓝光化学法病毒灭活血浆对血液成分结构和功能的影响。方法:随机选择40份采血后6h内400mL全血制备的新鲜血浆称质量留样,然后与亚甲蓝病毒灭活过滤器无菌连接,亚甲蓝的终浓度在0.9~1.3μmol/L。将加入亚甲蓝的血浆置入4℃病毒灭活箱的搁架上,摆动频率60次/min,利用32000~38000Lx光照强度的可见光4℃照射35min,将光照后的血浆通过病毒灭活过滤器滤除亚甲蓝和残余白细胞,混匀后留样10mL,立即置于-80℃冰箱冻存。检测照射前后样品的血浆量、亚甲蓝浓度、FⅧ∶C、FⅤ∶C、VWF、Fib含量的变化。结果与结论:血浆病毒灭活后血浆容量、FⅧ∶C、FⅤ∶C、VWF、Fib的回收率分别为(96.39±1.73)%、(82.55±9.25)%、(81.03±15.27)%、(93.25±6.17)%、(81.61±14.25)%。亚甲蓝光化学法灭活血浆病毒对血浆中大多数成分的影响不明显,可以满足临床安全输血的需求。
  • 踏踏实实作文章:《中国组织工程研究与临床康复》杂志2011年稿约 免费阅读 下载全文
  • 《中国组织工程研究与临床康复》杂志(CRTER)属于同行评审期刊,1997年创刊,周刊出版,每年出版53期。宗旨为面向目际,立足本土,力争办成传播组织工程领域一流学术研究成果和受专业读者认可及喜欢的业界期刊。
  • 造血干细胞移植的国内外历史记录 免费阅读 下载全文
  • 造血干细胞移植是经大剂量的放化疗或其他免疫抑制剂预处理,清除患者体内的肿瘤细胞、异常克隆细胞或异常造血干细胞,然后移植正常的自体或异体来源的造血干细胞,重建正常的造血或免疫功能,从而达到临床效果的一种治疗手段。
  • 胚胎干细胞及在生殖医学中的应用 免费阅读 下载全文
  • 背景:有报道胚胎干细胞体外培养可分化为原始生殖细胞并进一步生成配子,受精后发育为胚泡,并产生成活的子代。目的:阐述近年胚胎干细胞在生殖医学中的研究进展。方法:应用计算机检索清华同方系列数据库2000/2009有关生殖细胞、中药的相关研究文章,检索词:生殖细胞、中药,并限定文章语言种类为中文;同时应用计算机检索Pubmed数据库1998/2009相关文章,检索词:embryonic stem cells,stem cells,germ cells,oocyte,sperm,differentiation,限定文章语言种类为"English"。结果与结论:胚胎干细胞在体外分化受到内、外源因素的影响,可以诱导分化为精子和卵母细胞,是研究哺乳动物早期胚胎发育的理想模型;目前研究体外培养原始生殖细胞和配子是可行的,但体外培养生殖细胞的特性和功能仍不确定,要应用于临床需进一步确定其安全性和有效性。
  • 肿瘤干细胞的耐药性与耐药机制 免费阅读 下载全文
  • 背景:肿瘤干细胞不仅与肿瘤的多药耐药性有密切的关系,而且有着复杂的多药耐药机制。目的:对肿瘤干细胞及其耐药性和耐药机制的关系进行总结,为肿瘤的临床治疗提供新的思路。方法:应用计算机检索FMJS和Pubmed西文数据库检索(2003/2010),以"cancer stem cell,multiple drug resistance,apoptosis,cell cycle"为检索词;用计算机检索万方数据库(2000/2010),CNKI数据库(2000-2010)以"肿瘤;肿瘤干细胞;多药耐药性"为关键词。共收集到中文文献56篇,外文文献372篇。排除发表时间早、重复及类似研究,纳入29篇符合标准的文献。结果与结论:对干细胞的研究帮助人们加深对肿瘤的发生、发展及转移的认识。肿瘤组织中可能存在一小部分肿瘤细胞,与正常干细胞一样具有自我更新和无限增殖的能力,但具有特殊的耐药机制。肿瘤干细胞与肿瘤的发生及治疗关系密切。但针对肿瘤干细胞复杂的多药耐药机制尚有待进一步研究。
  • 成体干细胞在非恶性疾病中的注册临床研究 免费阅读 下载全文
  • 背景:随着成体干细胞研究的深入,其在非恶性疾病中的临床适应证逐年增加;但是研究者对干细胞在非恶性疾病中临床适应证的选择上目前仍然处于探索阶段。目的:提供成体干细胞在非恶性疾病中的临床研究的方向及适应证的选择方面的参考信息。方法:2010-03-03通过互联网在美国NIH(the National Institute of Health)临床试验登记注册网站(http://www.clinicaltrials.gov),选择合适的检索式,检索成体干细胞为干预措施的在非恶性肿瘤疾病受试者中的临床研究项目。不限语言种类、研究所在地和研究人种。结果与结论:在初次检索时得到的1540个研究项目中,排除1206个恶性肿瘤相关研究项目和13个其他不符合检索目的的研究,共321个研究项目进入分析。其中约1/3(101)的研究与心、脑血管疾病相关,主要是缺血性心脑血管疾病。另外1/3(85)的研究项目与自身免疫性疾病或器官移植后的移植物抗宿主病(GVHD)相关。其余的1/3临床试验的适应证是下肢缺血性疾病(9%,31/321)、遗传性疾病(9%,31/321)和其他疾病(22%,73/321)。在其他疾病适应证分类中,主要病种是肝硬化/肝衰竭、骨关节融合术中用及Ⅰ,Ⅱ型糖尿病等。目前,成体干细胞在非恶性肿瘤疾病中的临床研究适应证集中在心脑血管疾病和外周血管疾病。此外,基于干细胞促进组织修复/再生的理论基础,目前的一部分研究着眼于肝硬化、骨关节融合术中应用等等;间充质干细胞的免疫调节机制在免疫性疾病中的应用仍然是注册临床研究中的一个重要研究方向。
  • 疾病特异诱导多能干细胞距离神经退行性疾病的临床治疗还有多远 免费阅读 下载全文
  • 背景:各种神经退行性疾病传统的内外科治疗只能缓解症状而不能阻止疾病的进一步发展,细胞替代治疗近年进展迅速,但是干细胞存在的伦理问题及免疫排斥等问题不容忽视,而诱导多能干细胞的产生为这些问题提供了新的解决途径。目的:综述神经退行性疾病的治疗现状以及诱导多能干细胞作为新的细胞来源治疗神经退行性疾病的可能性。方法:应用计算机检索1995/2010PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)及万方数据库(http://www.wanfangdata.com.cn),英文检索词为"induced pluripotent stem cell,PD,ALS,SMA,degenerative disease",中文检索词为"干细胞,帕金森病"。初检得到文献374篇,根据纳入标准选择29篇文章进行综述。结果与结论:疾病特异诱导多潜能干细胞可保持疾病特异的基因型,有利于疾病分子机制的进一步阐明,且其拥有与胚胎干细胞类似的多向分化能力;在体外动物模型中可分化为多巴胺能神经元,缓解帕金森病的临床症状,在神经退行性疾病的临床治疗方面具有广泛的应用前景。
  • 超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞 免费阅读 下载全文
  • 背景:目前,超顺磁性氧化铁纳米颗粒标记的骨髓间充质干细胞在治疗心、肝、肾及中枢神经系统疾病方面已经得到了快速的应用。目的:对国内外应用超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的现状及新进展作一综述。方法:应用计算机检索CNKI和Pubmed数据库中2001-12/2009-12关于超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的文章,在标题和摘要中以"超顺磁性氧化铁,干细胞,标记,磁共振成像"或"superparamagnetic iron oxide,stem cells,label,magnetic resonance imaging"为检索词进行检索。选择近5年内文章内容与超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到243篇文献,根据纳入标准选择关于超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞的40篇文献进行综述。结果与结论:以往通过光镜识别干细胞标记物的研究中,必须用传统的组织病理学检查,从体内取得组织才能进行细胞探测,这显然不适合进行动态观察,更不适用于临床研究。超顺磁性氧化铁可以有效地进行活细胞标记,而这种标记方法不会影响细胞的活力、生长、分裂、迁移、分化等生物学功能,对细胞没有毒性,具有良好的安全性,可以用MRI进行活体示踪研究。
  • 骨髓基质干细胞与骨缺损的修复 免费阅读 下载全文
  • 背景:骨髓基质干细胞来源广泛,分离方便,扩增迅速,具有多向分化潜能,适合自体移植的特点,同时是骨组织工程中合适的种子细胞。目的:总结分析采用骨髓基质干细胞作为种子细胞,并利用转基因或其复合支架修复骨缺损所具有的优势。方法:检索1990/2009西文生物医学期刊文献数据及CNKI数据库有关骨髓基质干细胞分离、培养,在骨缺损方面的应用,骨组织工程方面的文献,英文检索词为"Bone marrow stem cells,Repairing,Bone defect",中文检索词为"骨髓基质干细胞,修复,骨缺损"。排除重复性研究,保留28篇进一步归纳总结。结果与结论:文章从骨髓基质干细胞作为种子细胞的优势,骨髓基质干细胞的分离和培养,骨髓基质干细胞的成骨诱导及骨髓基质干细胞修复骨缺损等方面进行了总结。利用骨髓基质干细胞作为种子细胞,与适当的支架材料结合,或用骨髓基质干细胞作为靶细胞,导入外源目的基因诱导成骨的基因治疗来修复骨缺损的方法,给骨缺损的治疗带来光明的前景。但同时也存在骨髓基质干细胞存化,骨髓基质干细胞的增殖、分化合适的条件,哪些因子能有效促进新骨形成,载体材料及体内植入方式,以及如何将骨组织工程与基因治疗的方法结合起来等问题需要进一步的研究。
  • 体外诱导间充质干细胞向心肌样细胞分化的研究:药物、微环境及方法 免费阅读 下载全文
  • 背景:心肌细胞不能再生,损害的心肌细胞不能修复和分化,临床中药或西药治疗、介入治疗和手术治疗都不能代替坏死的心肌,所以如何修复坏死心肌细胞是心血管研究领域的重要课题。间充质干细胞体外诱导可向心肌样细胞分化使人们看到了修复和再生受损心肌细胞的希望。目的:综述近年来体外诱导间充质干细胞分化为心肌细胞研究进展,探索其未来发展方向。方法:应用计算机检索CNKI、Elsevier-Sdol数据库,检索2000-01/2010-08关于体外诱导间充质干细胞分化为心肌细胞方法,在标题中以"间充质干细胞;诱导;心肌样细胞"和"mesenchymal stem cells,cardiomyocyte-like cells,induce,the progress of study"为检索词进行检索,共收集185篇相关文献,中文103篇,英文82篇。排除发表时间较早、重复及类似研究,纳入32篇符合标准的文献。结果与结论:很多实验研究证实间充质干细胞在体外一定条件下可诱导分化为心肌细胞,其诱导方法主要包括诱导分化剂诱导法及模拟心肌微环境诱导法。诱导分化为心肌细胞的效率仍有待提高,间充质干细胞分化为心肌细胞过程中的最佳诱导药物以及最佳体外微环境也在不断探索中。
  • 干细胞应力学效应机制的研究与进展 免费阅读 下载全文
  • 背景:近年来多种细胞信号转导的分子基础与相关功能调控机制的研究已取得重要进展,但干细胞的生物学行为相对复杂,其增殖分化的相关信号转导途径和机制尚未明确。目的:复习相关文献,就干细胞力学影响下相关信号通路的研究现状与应用前景进行综述。方法:应用计算机检索CNKI和PubMed数据库中2005/2010关于"干细胞应力学效应机制"的文章,以"干细胞,信号转导"或"干细胞,应力"为检索词进行检索。选择文章内容与干细胞信号转导通路相关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到中英文共179篇文献,根据纳入标准选择33篇文章进行综述。结果与结论:调节干细胞应力下增殖与分化的多条信号通路,包括F-actin、Ca2+、MAPK、Wnt、Notch等,在干细胞的增殖分化中发挥着重要调控作用。应力作用下细胞内力学信号转导和基因表达调控的确切机制将是今后干细胞研究领域的重要内容。
  • 间充质干细胞生物学特性及其分化潜能 免费阅读 下载全文
  • 背景:随着再生医学的兴起,细胞疗法正得到不断发展,间充质干细胞因为来源广泛,分离培养容易,增殖和多向分化能力强,已成为细胞治疗领域的研究热点。目的:概述国内及国际上关于间充质干细胞生物学特性及多向分化能力的新进展。方法:应用计算机检索2000-01/2010-09PubMed数据库、Springer Link数据库及万方数据库有关间充质干细胞发现、命名、生物学特性及分化潜能等方面的文献,英文检索词为"mesenchymal stem cells,differentiation,transdifferentiation",中文检索词为"间充质干细胞,分化,转分化"。检索文献量总计132篇。结果与结论:间充质干细胞发现较久,命名较多,在体内分布广泛,增殖能力受多种因素影响,可分泌多种细胞因子,产生一系列细胞外基质分子,表达多种表面标志物,但不是单一性的,属免疫缺陷细胞,分离纯化方法主要有全骨髓贴壁分离筛选法和密度梯度离心法,其鉴定需综合几个方面内容。除向中胚层的各种成熟细胞分化外,间充质干细胞还可转分化为神经细胞、肝细胞、胰岛细胞、上皮细胞等,转分化机制主要有异质学说、核重编程学说和胚胎干细胞残留学说。
  • 神经干细胞修复脊髓损伤 免费阅读 下载全文
  • 背景:神经生物学和干细胞技术的发展.使通过细胞移植增加脊髓神经数量、减少胶质瘢痕和空洞的形成成为可能。目的:复习相关文献,就神经干细胞的鉴定及特性、神经干细胞修复脊髓损伤的可能机制、临床前研究及临床应用方面进行综述。方法:以"neural stem cells,transplant,spinal cord injury"为英文检索词,以"神经干细胞,移植,脊髓损伤"为中文检索词,由第一作者检索1997/2010PubMed数据库及万方数据库有关神经干细胞鉴定、特性、神经干细胞修复脊髓损伤的可能机制、临床前研究及临床应用方面等方面的文章。排除发表时间较早、重复及类似研究,对29篇符合标准的文献进行归纳总结。结果与结论:神经干细胞有产生神经元、少突胶质细胞、星形胶质细胞,并替代受损的神经细胞功能等。文章从神经干细胞的鉴定及特性,神经干细胞修复脊髓损伤的可能机制,神经干细胞治疗脊髓损伤的实验研究及临床应用等方面进行了讨论。关于干细胞来源的神经元或胶质细胞移植后的长期生存及表型稳定性,以及逃脱分化及选择性程序的很少部分胚胎干细胞,可能会自在移植后的移植位点扩增并形成肿瘤等问题有待进一步解决。
  • 早幼粒细胞白血病蛋白异构体的功能特点 免费阅读 下载全文
  • 背景:早幼粒细胞白血病蛋白的各异构体因C末端结构域序列不同而不同,但各异构体的作用尚不清楚。目的:回顾性分析早幼粒细胞白血病蛋白异构体在基因转录调控、细胞生长分化、细胞凋亡、免疫反应及其核体形成等方面的功能特点。方法:由第一作者检索1992/2010PubMed数据库和FMJS数据库有关野生型早幼粒细胞白血病蛋白、早幼粒细胞白血病蛋白核体结构、功能及早幼粒细胞白血病蛋白异构体的结构、命名、功能和3者之间联系等方面的文献。结果与结论:早幼粒细胞白血病基因是通过多种不同的mRNA剪接本来表达的,其中每一个剪接本都编码不同的蛋白即早幼粒细胞白血病蛋白异构体。由于各种蛋白异构体都拥有共同的N末端结构区域,从而决定其具有某些功能上的共性如细胞凋亡。而不同的C末端结构区域又决定它们具有各自功能上的特性如抗病毒、细胞生长分化作用。在未来的研究中需要进一步探索各种异构体功能作用的具体生物化学机制。
  • 嗅鞘细胞联合神经干细胞移植治疗小儿脑发育不全 免费阅读 下载全文
  • 背景:近年来,干细胞替代治疗为神经再生提供了新的方法,但干细胞移植治疗小儿脑发育不全的相关报道甚少。目的:验证嗅鞘细胞联合神经干细胞移植治疗小儿脑发育不全的有效性。方法:2009-10解放军第163医院收治了1例脑发育不全的患者,给予物理降温、神经营养、维持水电解质平衡、高压氧治疗的同时,以L3~4腰椎间隙为穿刺点,将配置好的神经干细胞约8×107个和嗅鞘细胞约4×107个缓慢注入蛛网膜下腔,每2周1次,2次为1个疗程,共治疗1个疗程。从体温恢复程度、双手精细动作、运动协调性、语言等方面来评价移植治疗效果。结果与结论:与移植前比较,嗅鞘细胞联合神经干细胞移植1个月后患儿体温恢复正常,四肢肌力明显下降,2个月后可以独自端坐,3个月后可以扶梯行走,有简单的语言表达。提示嗅鞘细胞联合神经干细胞移植治疗小儿脑发育不全是有效的,能恢复其中枢神经功能。
  • 自体骨髓间充质源神经干细胞移植应用于中枢神经系统疾病7例 免费阅读 下载全文
  • 背景:前期应用骨髓间充质源神经干细胞移植治疗模拟神经系统疾病动物实验模型取得较好效果。目的:观察应用自体骨髓间充质源神经干细胞移植治疗中枢神经系统疾病的临床疗效。方法:2008-10/2009-04应用自体骨髓间充质源神经干细胞移植治疗中枢神经系统疾病患者7例。骨髓穿刺术抽取自体骨髓血50~60mL,在体外经过分离培养后,制成骨髓间充质干细胞悬液,由患者自体脑脊液诱导定向分化为神经干细胞,通过腰椎穿刺术经蛛网膜下腔鞘内注射输注方式移植。观察患者移植前后神经功能缺损症状及移植后不良反应。结果与结论:经移植治疗后3例患者均未见不良反应。出院后随访6个月,7例患者神经功能缺损症状较移植前均有一定程度的改善。提示自体骨髓间充质源神经干细胞移植治疗中枢神经系统疾病所致的神经功能缺损疾病是一种安全、方便、有效的方法。
  • 脐带间充质干细胞移植治疗遗传性痉挛性截瘫2例 免费阅读 下载全文
  • 背景:遗传性痉挛性截瘫是一种具有临床及遗传异质性的神经系统遗传病,目前临床治疗无明显效果。目的:观察脐带间充质干细胞移植治疗遗传性痉挛性截瘫的效果及安全性。方法:将细胞总数为(2~6)×107个人胎儿脐带间充质干细胞通过静脉输注和腰穿鞘内注射途径移植到自愿接受干细胞移植的2例遗传性痉挛性截瘫患者体内。移植后定期随访观察患者临床症状及各项指标的变化并进行综合分析。结果与结论:2例患者经脐带间充质干细胞移植治疗后临床症状均明显好转,双下肢肌张力明显降低,不需借助拐杖或他人帮助可独立行走,并且步态平稳,移植后各项生化指标正常,未出现严重的并发症和明显的不良反应。随访1年余2例患者的症状持续缓解无复发。说明脐带间充质干细胞移植治疗遗传性痉挛性截瘫近期疗效明显,可以改善患者的临床症状,延缓病情的进展。
  • 当归补血汤载药血清干预后骨髓基质细胞中粒细胞集落刺激因子和白细胞介素3的分泌 免费阅读 下载全文
  • 背景:实验表明,当归补血汤的有效成分多糖对造血干细胞和造血祖细胞的增殖分化存在显著的促进作用,对造血微环境具有重要的调控作用。目的:观察当归补血汤载药血清干预后小鼠骨髓基质细胞中粒细胞集落刺激因子和白细胞介素3的分泌状况。方法:分离骨髓基质细胞,于96孔板培养,在相差显微镜下观察细胞形态和生长状况;将细胞分4组,加含有不同剂量的当归补血汤载药血清进行干预,采用MTT法检测各组细胞的增殖活性,ELISA法检测粒细胞集落刺激因子和白细胞介素3的表达情况。结果与结论:当归补血汤载药血清可明显促进骨髓基质细胞的增殖,促进骨髓基质细胞分泌粒细胞集落刺激因子和白细胞介素3,呈剂量依赖性,含等效剂量载药血清组促增殖作用和促分泌作用优于其他各组,浓度过高可减弱细胞的增殖分泌效应。
  • 兔角膜缘上皮干细胞体外扩增及生物学鉴定 免费阅读 下载全文
  • 背景:角膜缘干细胞体外培养的关键在于建立稳定的体外培养体系,包括角膜缘干细胞的定位、培养条件、载体选择和鉴别方法等。目的:探索兔角膜缘上皮干细胞体外扩增方法,并对其生物学特性进行鉴定。方法:采用兔角膜缘组织块培养法,以人羊膜为载体,在体外进行兔角膜缘上皮干细胞原代和传代培养。倒置显微镜观察其体外生长特征;苏木精-伊红染色以及扫描电镜观察其形态;AE5和P63单克隆抗体免疫组织化学染色鉴定其蛋白表达。结果与结论:采用组织块培养法可在体外获得角膜缘上皮干细胞,能成功传代培养且保持较高增殖潜能。培养于去上皮羊膜上的干细胞可融合成片,呈"拉网"现象。原代角膜缘上皮干细胞AE5单克隆抗体染色阳性率低于5%,P63染色阳性达90%;随传代次数增加AE5染色阳性率增高,P63染色阳性率降低。结果显示兔角膜缘组织块培养法可以在体外成功获得角膜缘上皮干细胞,原代和传代细胞均具有干细胞特性,以羊膜为载体培养可形成角膜移植片。
  • 草分支杆菌对人脐血树突状细胞体外扩增的影响 免费阅读 下载全文
  • 背景:树突状细胞因其强大的抗原提呈能力而在机体抗肿瘤作用的中心地位逐渐受到重视,但如何能有效获得足够数量有功能的树突状细胞成为目前研究的重点,尤其是有关低毒免疫调节剂的报道较少。目的:观察草分支杆菌F.U.36(乌体林斯,Utilins)对人脐血来源树突状细胞体外扩增的影响。方法:应用Ficoll-Hypaque法分离人脐血单个核细胞,分别用乌体林斯,细胞因子(重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子+重组人肿瘤坏死因子α+重组人白细胞介素4),细胞因子联合乌体林斯进行干预,并以RPMI-1640培养液诱导培养人脐血单个核细胞作为对照组,诱导培养树突状细胞,并于倒置显微镜下观察其生长情况及形态。培养第9天,采用流式细胞仪检测各组人树突状细胞特异性表型CD1a及MHC-Ⅱ分子HLA-DR的变化,并将细胞涂片行瑞氏-姬姆萨染液染色,油镜下观察摄片。结果与结论:除对照组外,实验各组均得到高表达CD1a及HLA-DR的典型树突状细胞。乌体林斯组CD1a及HLA-DR阳性细胞比例亦明显高于对照组而低于细胞因子组(P〈0.05),联合组HLA-DR阳性细胞比例高于细胞因子组(P〈0.05)。结果提示,草分支杆菌F.U.36(乌体林斯)不仅能促进脐血树突状细胞体外扩增,还能协同细胞因子促进树突状细胞成熟。
  • CpG寡脱氧核苷酸对外周血单个核细胞功能的影响:1型糖尿病患者与健康者对照 免费阅读 下载全文
  • 背景:有研究表明CpG寡脱氧核苷酸可增强外周血单个核细胞的功能,但对1型糖尿病患者的影响至今少有报道。目的:观察CpG寡脱氧核苷酸对1型糖尿患者患者与健康志愿者外周血单个核细胞γ干扰素、白细胞介素12,10表达的影响。方法:将1型糖尿病患者与健康志愿者的外周血单个核细胞根据刺激物不同分为空白对照组、CpG寡脱氧核苷酸组。用RT-PCR法检测外周血单个核细胞γ干扰素、白细胞介素12mRNA和白细胞介素10mRNA的表达。结果与结论:1型糖尿患者γ干扰素和白细胞介素12mRNA的表达明显低于健康志愿者(P〈0.01)。1型糖尿患者与健康志愿者外周血单个核细胞经CpG寡脱氧核苷酸组刺激后,γ干扰素和白细胞介素12mRNA的表达增高(P〈0.01),白细胞介素10mRNA的表达无差异(P〉0.05)。结果提示,CpG寡脱氧核苷酸可促进1型糖尿患者外周血单个核细胞表达γ干扰素和白细胞介素12。
  • 本期专题:间充质干细胞向肝样细胞的诱导与分化(本刊中文部) 免费阅读 下载全文
  • 1 体外诱导人骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化:肝细胞生长因子和表皮细胞生长因子的作用 2 三种因子联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞向肝细胞的分化 3 多种生长分化因子体外联合诱导人脐血间充质干细胞向肝样细胞的分化
  • 人脐带间充质干细胞冻存复苏后细胞表面标志物分子学变化 免费阅读 下载全文
  • 背景:间充质干细胞是具有自我更新能力且能够多向分化的干细胞。脐带属于胚胎外组织,是胎儿分娩后的废弃物,来源广泛,无伦理学限制,因此有望作为间充质干细胞来源的第一选择。目的:检测人脐带间充质干细胞冻存复苏前后细胞表面分子CD29、CD44、CD49e、CD73、CD90、CD34、CD45、CD271标志变化情况。方法:通过从人的脐带中分离培养间充质干细胞,分别观察原代细胞、P4、P8代细胞和冻存复苏后P2、P4、P8代细胞形态;通过流式细胞仪检测原代细胞、P4、P8代细胞和冻存复苏后P2、P4、P8代细胞表面分子标志CD29、CD44、CD49e、CD73、CD90、CD34、CD45、CD271。结果与结论:人脐带间充质干细胞冻存前与原代复苏后不同代数下细胞均表现出相同的表型,CD29、CD44、CD49e、CD73、CD90阳性,CD34、CD45、CD271阴性,提示人脐带间充质干细胞原代低温冻存复苏后细胞表面标志性分子无变化。
  • 社长的话(王莉莎)
    核转染对成体骨髓源性干细胞的影响(李震[1,2,3] 沈晓涛[1,2,3] 曹亮[1,2,3] 毛颖玉[1,2,3] 陈斯韵[1,2,3] 郑馨[1,2,3] 蔡冬青[1,2,3])
    损伤脊髓匀浆上清对骨髓间充质干细胞分泌髓鞘前脂蛋白、脑源性神经营养因子的影响(刘然[1,2] 范东艳[3] 金鹏[4] 范洪学[1] 王苹[4])
    低渗结合自然沉降法分离兔骨髓间充质干细胞及其鉴定(林春博[1] 杨渊[1] 陈维平[2])
    骨髓脂肪细胞向成骨细胞的转分化(康鹏德 裴福兴 杨静 沈彬 周宗科)
    脂肪来源神经干细胞移植局灶性脑缺血模型大鼠的血管新生(刘斌[1] 刘宁[1,2] 董静[1] 王瑞敏[3] 张晋霞[1])
    如何向SCI收录的优秀期刊投稿:投稿前反复校对,细节决定一切
    SD大鼠脂肪源间充质干细胞分离培养特性及影响因素(侯凯[1] 李梅[1] 杨逸昆[1] 李纯[1] 李金茹[1] 黄德清[2])
    人脐带间充质干细胞移植改善糖尿病兔下肢缺血(樊明世 杨晓风 吴雁翔 张轶斌 许忆峰 宋楠 黄胜男 张悦)
    血管内皮细胞生长因子/骨形态发生蛋白2联合修饰骨髓间充质干细胞修复股骨头坏死(崔大平[1] 赵德伟[1,2])
    骨髓间充质干细胞对免疫介导再生障碍性贫血的治疗(黄颖[1] 郑翠玲[2] 杨少光[3] 韩忠朝[3])
    骨髓间充质干细胞预移植1周后构建心肌缺血再灌注损伤大鼠模型(徐凤 王爱玲 陈峰 周美玲)
    心肌声学造影评价自体骨髓单个核细胞移植急性心肌梗死后的心肌再灌注:与核素心肌灌注成像比较(钱大钧 刘欢 周达琼 吴鹏西 羊镇宇 吴小庆 王强)
    粒细胞集落刺激因子/粒-巨噬细胞集落刺激因子联合动员异基因造血干细胞移植(刘忠文 郭建民 杨靖 张茵)
    自体干细胞原位移植治疗青中年缺血性脑卒中(陈育华 许力 陈奇鸣 陈守康 许文芳 屈洪党 钱伟东 韦道祥 刘晓林)
    造血干细胞移植与非移植治疗重型再生障碍性贫血的比较(闫洪敏 刘静 薛梅 于志东 朱玲 丁丽 王恒湘)
    基质细胞衍生因子1α及受体CXCR4对颈总动脉球囊损伤血管平滑肌细胞和骨髓基质细胞的影响(蔡文玮[1] 方宁远[2] 盛净[1] 马绍骏[1] 程智慧[1])
    碱性成纤维生长因子和神经生长因子联合应用培养成年大鼠海马神经干细胞向神经元样细胞的分化(佟雷 季丽莉 解大龙 高海 佟晓杰)
    外国专家修饰的医学英语句型:本刊英文部
    胚胎干细胞核心转录因子靶基因集蛋白互作网络特征分析(左长清[1] 汪宗桂[2] 吴铁[1] 崔燎[1])
    小鼠移植物抗宿主病模型的建立(朱婕琳[1] 张鹏[4] 陈福[2] 侯如荣[3])
    siRNA阻断B7H1在人胎盘间充质干细胞上表达对其黏附和迁移的影响(张思英[1] 王因艳[1] 部海波[2] 栾希英[1])
    悬滴三步法体外诱导小鼠胚胎干细胞向心肌样细胞的分化(刘官信 王芳洁)
    糖尿病大鼠表皮干细胞的分离培养及特性(朱飞滨[1,2] 刘德伍[1] 张红艳[1] 彭燕[1] 钟清玲[2] 李勇铁[1,2])
    亚甲蓝/光化学法灭活病毒对血浆成分的影响(焦红亮[1,2] 关方霞[3] 杨波[1] 李建斌[2] 单泓[2] 杜英[4] 胡祥[5])
    踏踏实实作文章:《中国组织工程研究与临床康复》杂志2011年稿约(王莉莎 张楠 王蕾)
    造血干细胞移植的国内外历史记录
    胚胎干细胞及在生殖医学中的应用(刘黎青[1] 李娟[2] 周盛年[3])
    肿瘤干细胞的耐药性与耐药机制(保秋萍 李惠民)
    成体干细胞在非恶性疾病中的注册临床研究(张忠骞[1] 张军[1] 孙辉[2] 姜舒[1] 郑意端[1] 胡祥[1])
    疾病特异诱导多能干细胞距离神经退行性疾病的临床治疗还有多远(罗虎[1] 刘渔凯[1] 李泽桂[2])
    超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞(胡彪[1,2] 邱伟[1,2] 孟增东[1,2])
    骨髓基质干细胞与骨缺损的修复(李偏 芮钢)
    体外诱导间充质干细胞向心肌样细胞分化的研究:药物、微环境及方法(秦佳佳 冼绍祥 黄习文 孙静和)
    干细胞应力学效应机制的研究与进展(包志强[1] 任明姬[1] 李建福[2])
    间充质干细胞生物学特性及其分化潜能(丁志 杨松林)
    神经干细胞修复脊髓损伤(李伟 江其生)
    早幼粒细胞白血病蛋白异构体的功能特点(赵亮 张学美)
    嗅鞘细胞联合神经干细胞移植治疗小儿脑发育不全(陶晓宁[1] 刘波[1] 滕晓华[1] 邓士杰[2] 谢庙均[3] 徐蓉[1] 卢明[1])
    自体骨髓间充质源神经干细胞移植应用于中枢神经系统疾病7例(曹志勇 刘涵 单君君 朱盂慧 王俊明 陈昊 程言博 樊红彬 董瑞国 耿德勤)
    脐带间充质干细胞移植治疗遗传性痉挛性截瘫2例(杨华强[1,2] 王云甫[3] 李东升[1] 杜玲[1] 袁雅红[1] 姜铧[2])
    当归补血汤载药血清干预后骨髓基质细胞中粒细胞集落刺激因子和白细胞介素3的分泌(汪涛 陈莉 王晓玲 冯莉 陈昱吴 田晨)
    兔角膜缘上皮干细胞体外扩增及生物学鉴定(莫链杰[1] 叶宇峰[2] 柯莉芹[1] 任王芳[1] 张春芳[1] 吴连宝[1] 张方骅[1] 刘小玲[3])
    草分支杆菌对人脐血树突状细胞体外扩增的影响(王玲珍[1] 王桂云[2] 庞秀英[1] 赵艳霞[1] 孙立荣[1])
    CpG寡脱氧核苷酸对外周血单个核细胞功能的影响:1型糖尿病患者与健康者对照(田德增 刘明哲 张永选 魏晓华 任保仙 王海敏)
    本期专题:间充质干细胞向肝样细胞的诱导与分化(本刊中文部)
    人脐带间充质干细胞冻存复苏后细胞表面标志物分子学变化(钱燕翔[1] 舒群[2] 蔡红霞[2] 郭娟[3] 陈亮[1] 高峰[1])
    《中国组织工程研究与临床康复》封面

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