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  • 目标,向前冲 免费阅读 收费下载
  • 看过韩剧《我的名字叫金三顺》吗?讲述的是一个来自平民家庭即不漂亮又不苗条更没有可炫耀的学历和事业的“没女”的故事,让人感动着她的顽强与坚持,吃苦耐劳,堂堂正正,为了实现自己的目标,不管水深火热勇往直前的精神。
  • 成人骨髓间充质干细胞向甲状腺细胞的诱导分化 免费阅读 收费下载
  • 背景:促甲状腺素、胰岛素或类胰岛素生长因子等对甲状腺细胞的发育分化、特异基因的表达及功能的产生等起着重要作用,故实验模拟甲状腺的体内胚胎发生过程逐步加入以上刺激因子对骨髓间充质干细胞进一步诱导。目的:探讨在特定环境下体外定向诱导成人骨髓间充质干细胞分化为甲状腺细胞的可行性。方法:采用密度梯度法分离培养骨髓间充质干细胞,应用促甲状腺素、胰岛素等试剂进行诱导。利用倒置光学显微镜、透射电镜观察细胞分化过程的形态学变化,免疫荧光等检测方法研究成人骨髓间充质干细胞的分化情况。结果与结论:诱导组培养第3天可见骨髓间充质干细胞由长梭形变为圆形、椭圆形或三角形,不规则形生长,边界欠清晰。从第8天开始可见贴壁的胚胎体逐渐呈扁平状。诱导培养第7天可见分化细胞中有甲状腺细胞的特有基因如TSHr的表达;第9天检测到分化细胞中甲状腺细胞标记物TTF-1的表达。结果初步表明骨髓间充质干细胞可以在体外诱导分化为甲状腺细胞,是研究甲状腺疾病组织工程治疗的理想种子细胞。
  • 低氧增强骨髓间充质干细胞对缺氧诱导心肌细胞凋亡的可能性 免费阅读 收费下载
  • 背景:骨髓间充质干细胞移植入缺血心肌后存活率低,而低氧有可能增强骨髓间充质干细胞的增殖,促进其存活。目的:体外模拟心肌细胞缺血微环境,探索低氧预处理后,骨髓间充质干细胞对持续缺氧诱导的心肌细胞凋亡的保护作用。方法:取第4代SD大鼠骨髓间充质干细胞用于制备条件培养液。取胚胎大鼠心肌细胞株,随机分成4组:对照组:心肌细胞正常培养组;模型组:心肌细胞单纯缺氧;骨髓间充质干细胞组:心肌细胞与骨髓间充质干细胞条件培养液共缺氧;低氧组:心肌细胞与骨髓间充质干细胞低氧条件培养液共缺氧。MTT检测各组细胞活力变化,AnnexinV-FITC双染标记心肌细胞凋亡,免疫组化检测各组Bax和Bcl-2蛋白的表达。结果与结论:免疫组化显示,低氧组的Bcl-2表达较其他各组增强,而Bax的表达比模型组和骨髓间充质干细胞组减弱,Bcl-2/Bax比值最大。与对照组和骨髓间充质干细胞组相比,低氧组的细胞活力高(P〈0.05),凋亡率降低(P〈0.05)。提示低氧可能是通过增强旁分泌机制,从而对Bax和Bcl-2进行调节,对心肌细胞凋亡有保护效应。
  • 绿色荧光蛋白标记成人骨髓间充质干细胞的超微结构特征 免费阅读 收费下载
  • 背景:研究表明,绿色荧光蛋白标记的骨髓间充质干细胞免疫学表型、细胞周期、分化潜能等均未发生明显改变。目的:进一步观察绿色荧光蛋白标记对骨髓间充质干细胞超微结构的影响。方法:分离培养成人骨髓间充质干细胞,抗CD34、抗CD105免疫细胞化学染色鉴定,选第3代细胞进行绿色荧光蛋白标记,超薄切片后用透射电镜观察细胞超微结构,以未经绿色荧光蛋白标记骨髓间充质干细胞为对照。结果与结论:骨髓间充质干细胞表达CD105,不表达CD34。绿色荧光蛋白标记后,骨髓间充质干细胞细胞质发出绿色荧光,绿色荧光主要集中于细胞核周围的胞浆内,远离细胞核的胞浆内荧光强度逐渐减弱。相对于未标记的骨髓间充质细胞,经绿色荧光蛋白标记后细胞粗面内质网、高尔基体等细胞器较多,而线粒体相对较少;另外,脂滴和"空泡"样结构也多一些。结果证实绿色荧光蛋白对骨髓间充质干细胞性状的影响较为局限,是一种较为理想的细胞标记示踪剂。
  • 兔骨髓间充质干细胞培养及向成软骨细胞的诱导分化 免费阅读 收费下载
  • 背景:骨髓间充质干细胞没有理想的特异性表面标志物,对其鉴定尚无统一标准,大多数鉴定依赖于其形态水平、功能特征及培养过程中出现的分化表型来协助鉴定。目的:体外培养扩增、鉴定兔骨髓间充质干细胞,观察其诱导分化为成软骨细胞的可行性。方法:密度梯度离心法提取兔骨髓间充质干细胞,采用倒置显微镜进行形态学观察;用含体积分数为10%胎牛血清的α-MEM培养液培养细胞,每日定时进行细胞计数,观察细胞生长速度;采用流式细胞学方法分别检测原代及第3代细胞CD44、CD45、CD29的表达情况;取第3代生长良好的兔骨髓间充质干细胞,以特定培养液诱导(含体积分数为10%胎牛血清、转化生长因子110μg/L、胰岛素样生长因子Ⅰ110μg/L、转铁蛋白6.25mg/L、地塞米松10mmol/L、维生素C0.05mmol/L),倒置显微镜下观察形态变化,免疫组织化学检测软骨特异性Ⅱ型胶原的表达。结果与结论:培养的细胞长梭形,呈成纤维细胞样生长,传代细胞生长迅速。流式结果表明,原代细胞有62.4%的细胞表达CD29,有60.3%的细胞表达CD44,有2.79%的细胞表达CD45,第3代有99.9%的细胞表达CD29,有99.6%的细胞表达CD44,有2.62%的细胞表达CD45。骨髓间充质干细胞诱导后体外扩增能力明显降低,诱导21d后形态变化比较显著,Ⅱ型胶原阳性细胞较多。结果显示应用密度梯度离心法可成功分离并扩增骨髓间充质干细胞,第3代细胞纯度较高,在适当的条件下,具有分化为成软骨细胞的潜能。
  • 层粘连蛋白促脐带间充质干细胞向成骨细胞分化与黏着斑激酶表达 免费阅读 收费下载
  • 背景:目前对脐带间充质干细胞的研究集中在分离纯化及药物作用下诱导分化。分化过程中细胞外基质成分的作用及信号通路的关系的研究报道很少。目的:研究层粘连蛋白在脐带间充质干细胞向成骨细胞分化过程中的作用与黏着斑激酶表达之间的关系。方法:取对数生长脐带间充质干细胞分为4组:层粘连蛋白诱导组:层粘连蛋白质量浓度分别为50,25,5,1mg/L;成骨诱导组:用成骨诱导液处理;复合诱导组:用层粘连蛋白和成骨诱导液处理。对照组:未用层粘连蛋白和成骨诱导液处理。连续培养4周。观察细胞形态、茜素红染色分析钙盐沉积,检测碱性磷酸酶活性,组织化学组化与Westenblot检测ERK1/2、P-ERK、黏着斑激酶的表达。结果与结论:①倒置显微镜下对照组比诱导组细胞胞体呈矮柱状、有短突起彼此相连,核圆形。②茜素红染色细胞形成红色,表现为阳性。复合诱导组比其他组要高、不同时间点比21d钙盐沉积明显增多(P〈0.05)。③层粘连蛋白组碱性磷酸酶活性比对照组高、其诱导第7天后作用显著(P〈0.05)。层粘连蛋白不同质量浓度组之间碱性磷酸酶活性,差异无显著性意义(P〉0.05)。④组织化学组化鉴定ERK、P-ERK、黏着斑激酶表达均与对照比层粘连蛋白组表达增强(P〈0.05)。⑤WestenBlot检测成骨诱导组与复合诱导组有ERK、P-ERK、黏着斑激酶蛋白表达,层粘连蛋白组与对照组无表达。结果提示,脐带间充质干细胞向成骨细胞分化过程中层粘连蛋白有促分化作用,层粘连蛋白上调信号转导蛋白黏着斑激酶、ERK、P-ERK表达。
  • 全反式视黄酸诱导兔骨髓间充质干细胞向神经细胞的分化 免费阅读 收费下载
  • 背景:目前,在骨髓间充质干细胞体外向神经细胞分化的实验中,较多采用抗氧化剂法和细胞因子法,但诱导效率低。目的:探讨全反式视黄酸在兔骨髓间充质干细胞向神经细胞分化中的作用。方法:体外分离培养兔骨髓间充质干细胞,取第4代骨髓间充质干细胞观察细胞形态,实验组用0.4μmol/L全反式视黄酸预诱导24h后,改用神经细胞培养基继续培养。神经细胞培养基培养4,8,16及24h,免疫组织化学检测巢蛋白、神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白的表达情况,采用RT-PCR的方法检测巢蛋白和神经元特异性烯醇化酶的表达水平。结果与结论:骨髓间充质干细胞经培养、传代后,细胞贴壁生长,呈长梭形。免疫组织化学检测结果显示:全反式视黄酸诱导组巢蛋白及神经元特异性烯醇化酶呈阳性,诱导后细胞的活力良好。RT-PCR结果显示全反式视黄酸诱导组巢蛋白在诱导前后均有表达,神经元特异性烯醇化酶在诱导后16h可见明显的扩增条带,24h后更加明显。提示全反式视黄酸能够在体外促进兔骨髓间充质干细胞向神经细胞分化。
  • 激素对兔骨髓间充质干细胞神经递质表达的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:激素性股骨头坏死的确切发病机制仍未清楚,研究发现神经系统可通过多种途径调控骨髓间充质干细胞的分化,激素可能通过影响其调控机制而引起骨坏死。目的:观察在激素作用下,骨髓间充质干细胞中神经递质或其受体mRNA表达的变化。方法:密度梯度离心和贴壁培养获得兔骨髓间充质干细胞。将传代培养的第3代细胞随机分为两组,实验组加入浓度为10-7mol/L的地塞米松,对照组正常培养。分别于诱导后第4,7,11,15天,测定细胞中神经生长因子、成纤维细胞生长因子、降钙素相关基因肽受体、血管活性肠肽受体、P物质受体及过氧化物酶体增殖子活化受体γ的mRNA表达。结果与结论:实验组神经生长因子、成纤维细胞生长因子、降钙素相关基因肽受体、血管活性肠肽受体和P物质受体的mRNA表达较对照组明显降低,而过氧化物酶体增殖子活化受体γmRNA表达较对照组明显增高,差异均具有显著性意义(P〈0.01),实验组各因子在不同时间点间进行比较却无明显差异(P〉0.05)。结果表明大剂量激素可使骨髓间充质干细胞中具有成骨或成血管作用的神经递质或其受体表达下降,这可能与激素性股骨头坏死发生的机制有关。
  • 不同来源人羊膜间充质干细胞的混合培养 免费阅读 收费下载
  • 背景:人羊膜间充质干细胞可诱导分化为神经样细胞,但在培养过程中发现干细胞增殖的数量不足。目的:为了获得足够数量的人羊膜间充质干细胞,观察人羊膜间充质干细胞混合培养的生长情况及经碱性成纤维细胞生长因子诱导人羊膜间充质干细胞向神经样细胞的分化情况。方法:将两个不同胎盘来源的羊膜分离培养、混合,采用细胞分离和培养技术获取人羊膜间充质干细胞,分离人羊膜间充质干细胞后传代培养,加入碱性成纤维细胞生长因子诱导分化。当细胞传至第3代时,随机取培养的6份人羊膜间充质干细胞(半量)为A组,6份人羊膜间充质干细胞(半量)为B组,将A、B组各剩余的半量人羊膜间充质干细胞混合为C组。3组细胞浓度均为1.0×107L-1。以活细胞计数和MTT比色法比较3组细胞扩增数量,以免疫组织化学法检测羊膜间充质干细胞神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白的表达。结果与结论:混合人羊膜间充质干细胞之间有互相促增殖的作用。人羊膜间充质干细胞具有较强的可朔性,经碱性成纤维细胞生长因子诱导的人羊膜间充质干细胞可表达神经胶质细胞标志物、神经元特异性烯醇化酶和巢蛋白。
  • 海马神经干细胞不同传代方法的比较 免费阅读 收费下载
  • 背景:体外培养神经干细胞,在悬浮培养时由于自身增殖特性会形成球,传代时将会面临如何将细胞球分离成单细胞的问题。目的:寻求理想的大鼠海马神经干细胞传代方法,以获得大量可增生的神经干细胞以供研究。方法:分离新生1dSD大鼠海马神经干细胞,原代培养至五六天时,分别用机械吹打法、胰蛋白酶、TrypLE和Accutase消化法分离神经干细胞球。之后每7d传代1次,连续传代3次。分别于每次传代后第1天和传代后第4天计数活细胞比例和细胞球数目,实验重复3次。结果与结论:神经干细胞球经3种酶消化后获得的均是单细胞;经机械吹打后既有单个细胞,也有小细胞球分布于培养液中。在酶消化法中,Accutase消化法传代后神经干细胞的活细胞比例明显高于胰蛋白酶消化(P〈0.01)和TrypLE消化法(P〈0.05)。同时,Accutase消化法传代后新形成的细胞球数目也较其余各组多(P〈0.01)。提示在实验条件下,Accutase消化法能够较好地将神经干细胞球分离成存活率较高、能快速形成新的克隆球的单个细胞,是较为理想的神经干细胞分离传代方法。
  • 大鼠成骨细胞的原代培养和鉴定 免费阅读 收费下载
  • 背景:组织工程需要大量的种子细胞,成骨细胞已成为骨组织工程构建的重要种子细胞之一。但成骨细胞取材困难,获得的成骨细胞的纯度不一。目的:建立大鼠新生乳鼠颅骨来源成骨细胞的分离培养纯化方法,观察颅骨来源成骨细胞生物学特点。方法:采用二次酶消化法对SD大鼠乳鼠成骨细胞进行原代培养,扩增。通过差速贴壁法进行成骨细胞纯化。通过形态学、细胞碱性磷酸酶检测、茜素红染色、钙结节Vonkossa法染色、超微结构以及细胞增殖曲线,确定其增殖与成骨活性。结果与结论:二次酶消化法培养颅骨来源成骨细胞可获得原代细胞增殖,传代扩增细胞具有典型成骨细胞形态学和生物学活性。碱性磷酸酶、茜素红染色、钙结节Vonkossa法染色均呈阳性结果。超微结构显示为高分化功能活跃成骨细胞,细胞增殖曲线显示细胞生长活跃。提示,新生SD大鼠颅骨来源成骨细胞具有良好的增殖与成骨活性,能连续传代增殖,纯度高,细胞生物学特征稳定,适用于做体外实验研究。
  • 脐血浆神经营养活性蛋白成分对CD34+细胞增殖分化的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:迄今为止,人们对于脐血浆中是否存在活性成分及其对于神经发育及神经损伤修复的作用认识尚不足,有待深入研究。目的:检测脐血浆生物活性成分,观察其在神经发育及神经损伤修复中的作用。方法:采用抗体芯片技术对脐血浆和健康青年女性静脉血浆活性成分进行对比分析,采用免疫磁珠从脐血中分选出CD34+细胞,经体外培养计数观察CD34+细胞增殖能力,通过免疫组化法观察细胞分化情况。结果与结论:脐血浆中有31种蛋白分子的含量显著高于静脉血浆,其中具有促进神经再生和神经修复潜能的活性蛋白10种,包括FGF4、Frizzled-3、IL-3、RAGE、CRIM-1、Neuritin、Neuropilin-2、Neurturin、SFRP-3、Tomoregulin-1;在CD34+细胞培养液中加入脐血浆能显著促进细胞增殖,促进细胞向神经细胞分化。
  • 人脐带血内皮祖细胞与血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子共培养及其增殖和迁移能力 免费阅读 收费下载
  • 背景:目前组织工程心脏瓣膜再内皮化种子细胞主要来源于成熟内皮细胞,内皮祖细胞作为内皮细胞的前体细胞越来越受到人们的关注。目的:分离和扩增人脐带血内皮祖细胞,观测其体外生物学特性。方法:密度梯度离心法分离新鲜的脐血中单个核细胞,在含血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的培养液中培养扩增,通过形态学、免疫荧光和流式细胞仪等对贴壁细胞进行鉴定;并与脐静脉内皮细胞进行增殖和迁移能力比较。结果与结论:随着培养和诱导时间延长,贴壁细胞形态发生明显的改变,从小圆形变成梭形,逐渐分化成典型成熟内皮细胞的鹅卵石样形态,并可形成特征性的克隆;体外诱导7d后90%以上贴壁细胞呈Dil-ac-LDL和FITC-UEA-I双阳性;贴壁细胞流式细胞仪分析显示:培养7d的细胞VEGFR-2、CD34和CD133表达分别占(77.4±4.9)%、(52.4±6.6)%和(19.4±2.1)%,培养28d的细胞VEGFR-2和CD34表达分别占(81.1±7.4)%和(7.6±3.1)%,而未检测到CD133表达;人内皮祖细胞增殖和迁移能力明显高于人脐静脉内皮细胞(P〈0.05),并且细胞数量可扩增达109L-1。结果显示用密度梯度离心法和贴壁筛选法,可从人脐带血分离、纯化内皮祖细胞;内皮祖细胞可诱导分化为内皮细胞,增殖和迁移能力都很强。
  • 人胎盘间充质干细胞生物学特性和抗凋亡细胞因子的分泌 免费阅读 收费下载
  • 背景:由于骨髓源性间充质干细胞的提取造成患者的二次损伤,也存在病毒、细菌污染的可能,扩增、分化能力不高,为此,实验从胎盘中提取间充质干细胞进行研究,了解其分泌抗凋亡细胞因子的情况,探讨其代替骨髓间充质干细胞的可能性。目的:体外分离培养、扩增人胎盘源性间充质干细胞,研究其基本生物学特性和抗凋亡细胞因子的分泌水平。方法:提取人胎盘间充质干细胞,显微镜下观察细胞形态;采用流式细胞仪测定细胞周期、凋亡情况及表面标记的表达,研究其增殖和生长特性。ELISA检测血管内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子1、肝细胞生长因子的分泌水平。结果与结论:在体外培养条件下,人胎盘间充质干细胞为贴壁生长,为成纤维细胞样,核浆比大,细胞增殖活跃,凋亡率低,可分泌能抑制细胞凋亡的细胞因子如血管内皮细胞生长因子、胰岛素样生长因子1、肝细胞生长因子。
  • 碱性成纤维细胞生长因子-慢病毒真核表达载体的构建及转染 免费阅读 收费下载
  • 背景:以往研究多采用质粒载体,由于其转染效率不高,且转染时需借助脂质体转染剂进行转染,转染具有细胞毒性,操作复杂等难以应用于临床。目的:构建携带人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)基因的慢病毒载体,转染成骨方向诱导的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),鉴定bFGF基因表达。方法:实验组:设计人bFGF基因引物,用Trizol法提取胎盘组织RNA,用RT-PCR的方法扩增出bFGF基因,连接至pLenti6/V5-D-TOPO表达质粒,经Xho-Ⅰ、BamH-Ⅰ双酶切和DNA测序证实质粒正确构建。在脂质体转染剂Lipofectamine2000的介导下,将bFGF-pLenti6/V5-D-TOPO表达质粒同包装质粒pLP1、pLP2、包膜质粒pLP/VSVG共转染293FT细胞株,收集bFGF-慢病毒上清转染诱导后第2代的兔BMSCs。对照组:设计GFP基因引物,以GFP-PMSLV-Plazmid为模板,PCR的方法扩增出GFP基因,连接至pLenti6/V5-D-TOPO表达质粒,构建GFP-慢病毒载体,并转染BMSCs。RT-PCR和Wetern-blot方法检测bFGF、GFP基因的表达。结果与结论:转染48h后,对照组BMSCs可见绿色荧光蛋白表达;实验组BMSCs在转染15d后,RT-PCR方法扩增出bFGF基因,Western-blot检测出目的蛋白表达。提示成功构建携带人bFGF和GFP基因的真核表达载体,建立转染兔BMSCs的方法。
  • 干细胞相关因子在大肠癌组织及SW620细胞株的表达 免费阅读 收费下载
  • 背景:肿瘤细胞有多种干细胞标记的表达,深入研究其表达规律有助于揭示肿瘤发病机制、完善肿瘤干细胞理论。目的:检测大肠癌实体组织中干细胞相关分子标记CD133、CD166、Oct4、Sox2、C-myc、Klf4、Bmi-1与癌旁组织的表达差异,以及CD133免疫磁珠分选阳性与阴性SW620细胞中上述基因的表达差异。方法:选临床病理诊断清楚的29例大肠癌组织标本提取RNA,RT-PCR检测CD133、CD166、Oct4、Sox2、C-myc、Klf4、Bmi-1在大肠癌组织与癌旁对照组织中的表达。CD133免疫磁珠分选SW620,提取CD133细胞与CD133阴性细胞RNA,RT-PCR检测分选后上述基因的表达差异。结果与结论:29例标本均诊断为低、中分化腺癌或黏液腺癌,干细胞相关分子标记癌组织与癌旁组织表达灰度相对值癌组织表达均高于癌旁组织(P〈0.05)。RT-PCR检测分选后CD133+细胞CD133,CD166,Oct4,Sox2,C-myc,Klf4,Bmi-1表达,结果均高于CD133-细胞。提示,CD133、CD166、Oct4、Sox2、C-myc、Klf4、Bmi-1相关干细胞标记可作为大肠癌肿瘤干细胞标记并有望用于诊断检测。
  • 自体外周血干细胞动员和采集并联合化疗方案治疗儿童神经母细胞瘤及原始神经外胚层肿瘤35例 免费阅读 收费下载
  • 背景:自体外周血干细胞移植是目前治疗恶性实体瘤的重要方法之一,干细胞动员与采集是决定造血重建的重要因素。目的:主要评价环磷酰胺,吡柔比星,长春新碱动员方案对儿童神经母细胞瘤及原始神经外胚层肿瘤自体外周血造血干细胞移植动员采集的临床效果。方法:对35例患儿,确诊神经母细胞瘤30例,原始神经外胚层肿瘤5例,采用CDV化疗方案动员,观察采集干细胞效果。结果与结论:所有病例化疗后第4~9天(平均6.5d)白细胞〈2×109L-1,给予粒细胞刺激因子5~10mg/kg刺激造血,化疗后13~19d(平均15.5d)至白细胞〉5×109L-1后开始采集。所有病例均采集到足够的单个核细胞数和CD34+细胞,总采集次数1~4次,平均2.1次,单个核细胞:(6.1±1.2)×108/kg,CD34+细胞为(5.3±0.8)×106,锥虫蓝拒染率:99.5%(99%~100%),动员并发症少,患儿均能耐受。其中25例进行自体外周血干细胞移植后均获快速造血功能重建,白细胞开始回升(中性粒细胞绝对值〉0.5×109L-1)时间为移植后10~20d(平均14d)血红蛋白恢复(〉80g/L)的时间为移植后10~30d(平均18d),血小板恢复(〉20×109L-1)时间为移植后12~35d(平均20d)。结果提示CDV方案可以安全有效地完成神经母细胞瘤及原始神经外胚层肿瘤患儿自体外周血干细胞动员和采集。
  • 骨髓间充质干细胞移植膝类风湿关节炎兔:关节滑膜体积和软骨厚度的MRI评价 免费阅读 收费下载
  • 背景:骨髓间充质干细胞具有显著的免疫调节功能和多向分化潜能,可抑制类风湿关节炎的炎症反应,促进软骨损伤的修复。目的:用骨髓间充质干细胞治疗兔早期类风湿关节炎,运用MRI观察软骨厚度及滑膜体积的改变,评价治疗效果。方法:选取42只新西兰大白兔,用卵蛋白制造类风湿关节炎模型,造模第4周(治疗前)取6只兔行MRI和病理检查以对照,余36只兔随机分模型组和骨髓间充质干细胞治疗组,两组于治疗后1,2,3个月分别选取6只兔行MRI和病理检查。对病变膝关节的滑膜体积和软骨厚度进行MRI测量及病理学评分。结果与结论:治疗1,2,3个月,类风湿关节炎组滑膜进行性增厚,软骨厚度变薄,病理学评分增加;骨髓间充质干细胞治疗组滑膜增厚程度减轻,关节软骨厚度恢复,病理学评分减低。MRI测量数据和病理学评分有相关性。提示MRI可用于评价骨髓间充质干细胞对早期类风湿关节炎的疗效。
  • 骨髓间充质干细胞对慢性哮喘小鼠血清白细胞介素12和白细胞介素4水平的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:研究显示,骨髓间充质干细胞移植通过减轻炎症程度来改善急性肺损伤的病情,而骨髓间充质干细胞移植对哮喘疾病的研究甚少。目的:观察慢性哮喘小鼠移植同种异体骨髓间充质干细胞后,其血清白细胞介素12和白细胞介素4水平的变化。方法:取40只雌性BALB/c小鼠,随机分为4组,正常对照组和骨髓间充质干细胞对照组以PBS致敏及激发小鼠,于第21天激发前气管内注射PBS或骨髓间充质干细胞30μL。哮喘模型组和骨髓间充质干细胞治疗组用鸡卵白蛋白制备慢性哮喘模型,于第21天激发前气管内注射PBS或骨髓间充质干细胞30μL。采用ELISA法检测各组小鼠血清炎症因子水平。结果与结论:病理提示哮喘模型组支气管上皮黏膜脱落,同时上皮黏膜有杯状细胞增生,部分管腔内大量黏液栓塞;气道、血管旁有大量炎性细胞浸润以及气道平滑肌细胞增生和肥大。正常对照组及骨髓间充质干细胞对照组无气道炎症及气道重塑的表现,而骨髓间充质干细胞治疗组气道炎症及气道重塑明显减轻。对比骨髓间充质干细胞对照组及正常对照组,哮喘模型组白细胞介素12明显减低,白细胞介素13和白细胞介素4明显增高;而骨髓间充质干细胞治疗组较哮喘模型组白细胞介素12明显升高,白细胞介素4明显降低。结果表明骨髓间充质干细胞治疗哮喘可能通过降低白细胞介素4水平,提高体内白细胞介素12水平,从而改善气道炎症及气道重塑的程度。
  • 骨髓间充质干细胞移植急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠星形胶质细胞及髓鞘的变化 免费阅读 收费下载
  • 背景:国内有关一氧化碳中毒迟发性脑病治疗的报道,多采用药物治疗和高压氧治疗,但存在治疗疗程长,见效慢,花费较高等问题。目的:首次观察骨髓间充质干细胞移植治疗一氧化碳中毒迟发性脑病前后星形胶质细胞及神经髓鞘的变化。方法:以随机抽签方法将SD大鼠分为3组:对照组、假手术组及干细胞移植组。采用腹腔注入一氧化碳方法制作一氧化碳中毒迟发性脑病模型,干细胞移植组在注射后第0,3,6,12,24,72小时及1周时将同种异体骨髓间充质干细胞经左侧颈动脉植入到大鼠脑内;假手术组扎闭颈外动脉,用PBS代替细胞悬液;对照组不进行细胞移植。移植后1,2,3,4周采用免疫组织化学的方法检测胶质纤维酸性蛋白和固绿-FCF染色法观察髓鞘着色情况。结果与结论:造模后6,12,24h干细胞移植组大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白表达明显高于对照组及假手术组(P〈0.05),干细胞移植组移植后1~4周大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白表达差异无显著性意义(P〉0.05)。造模后6,12,24h干细胞移植组大鼠脑内髓鞘平均吸光度明显高于对照组及假手术组(P〈0.05),且细胞移植后第2周明显高于第1,3,4周(P〈0.05)。提示经左侧颈动脉在一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠体内移植骨髓间充质干细胞可以增加星形胶质细胞反应性,促进髓鞘再生,移植的最佳时机为发病后6~24h,细胞移植后的积极作用在一两周最明显。
  • 嗅鞘细胞移植联合督脉电针治疗大鼠前脊髓综合征 免费阅读 收费下载
  • 背景:电针在脊髓损伤的康复过程中有其一定的临床作用,同时以嗅鞘细胞为代表的细胞治疗在部分患者的康复过程中亦起到了一定的作用,两者是否具有协同应用尚不清楚。目的:观察督脉电针联合嗅鞘细胞移植对前脊髓综合征大鼠神经营养因子3水平及P75NTR表达的影响。方法:将40只成年大鼠随机分为对照组、督脉电针组、嗅鞘细胞移植组、督脉电针+嗅鞘细胞移植组,经嗅鞘细胞移植和督脉电针治疗2周后ELISA法检测脊髓组织神经营养因子3水平,免疫组化检测P75NTR的表达。结果与结论:督脉电针+嗅鞘细胞移植组神经营养因子3水平较对照组及其他实验组高(P〈0.05);嗅鞘细胞移植组和督脉电针+嗅鞘细胞移植组的脊髓损伤部位以及相邻的组织内均有P75NTR表达,且督脉电针+嗅鞘细胞移植组阳性表达明显较嗅鞘细胞移植组多。实验证实督脉电针联合嗅鞘细胞移植能够明显增高大鼠前脊髓综合征邻近组织的神经营养因子3水平;督脉电针可以有效促进移植的嗅鞘细胞在宿主内存活。
  • 补阳还五汤对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:现代医学研究表明,内皮祖细胞和补阳还五汤在治疗缺血性疾病上具有相似的功能,两者之间是否存在着一定的联系?目的:观察补阳还五汤对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响。方法:采用密度梯度离心法分离培养兔外周血内皮祖细胞,经Dil-ac-LDL和FITC-UEA-I双染色和表面抗原的免疫组织化学检测鉴定后,将贴壁细胞随机分为4组,分别用基础培养基以及含有20,50,100g/L补阳还五汤的EBM-2培养基进行细胞培养72h。检测细胞形态及计数,再采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法、Transwell小室、黏附功能检测、一氧化氮检测及血管内皮生长因子免疫细胞化学分析来评定其增殖、迁移、黏附、分泌一氧化氮和表达血管内皮生长因子的能力。结果与结论:不同质量浓度补阳还五汤均能增加内皮祖细胞的数量,提高内皮祖细胞增殖、黏附、迁移和分泌一氧化氮的能力(P〈0.05),药物质量浓度在50g/L时影响最为显著(P〈0.01),而对血管内皮生长因子表达的影响较微弱。提示补阳还五汤能增加内皮祖细胞的数量,提高内皮祖细胞的增殖、迁移和黏附能力,并可能诱导晚期内皮祖细胞的分化。
  • 白杨素对人肝癌BEL-7402细胞表面超微结构和蛋白质磷酸化及相关通路的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:白杨素是保健食品和中草药中常见的具有防癌抗癌活性的食源黄酮类天然产物。白杨素是否有助于防治肝癌?其作用机制为何?是否促进肝癌干细胞的分化?对此尚缺乏系统研究。目的:以人肝癌细胞为对象,揭示白杨素的亚细胞和分子作用机制。方法:应用酸性磷酸酶实验、扫描电镜、免疫印迹技术探讨白杨素对BEL-7402细胞的作用及其机制。结果与结论:白杨素显著抑制BEL-7402细胞的体外增殖,半数抑制浓度IC50为24.9mol/L或6.3mg/L。白杨素与PI3K-AKT途径特异性抑制剂LY294002联用具有显著的协同抗癌效应。但白杨素本身并不改变AKT、磷酸化pAKT、AKT下游分子GSK-3和磷酸化pGSK-3的表达水平,虽然高剂量下β-catenin略有下调。白杨素导致细胞表面微绒毛样突起密度明显增加并形成纳米膜粒;细胞回缩,间隙加宽;出现形态上不同于凋亡的死亡细胞。白杨素显著改变多种蛋白质的丝/苏氨酸磷酸化水平;对酪氨酸磷酸化亦有广谱下调作用,接近于表柔比星对照。白杨素对CDK1、磷酸化pCDK1和pCDK2、CDC25A、CDC25B和CD133均无明显影响,但可剂量依赖性诱导PARP-1降解。总之,白杨素对BEL-7402细胞的抑制作用并非起因于PI3K-AKT和Wnt/β-catenin通路阻断或细胞周期核心调控因子阻断,而更可能起因于生物膜功能障碍所致细胞表面超微结构和蛋白质磷酸化的大范围改变,并以非经典方式诱导肝癌细胞死亡。
  • 如何向SCI收录的优秀期刊投稿:生物信息学领域文章向SCI杂志投稿的经验 免费阅读 免费下载
  • 在过去的4年里,本人在生物信息学领域一共发表了3篇第一作者的SCI收录文章(期刊影响因子分别为4.2,6.2,6.9),和2篇第二作者的SCI收录文章(期刊影响因子分别为4.0,1.7),
  • 脂肪基质细胞构建组织工程骨修复下颌骨缺损的实验研究 免费阅读 收费下载
  • 背景:以往实验认为,只有经过成骨诱导后的脂肪基质细胞才能作为骨组织工程的种子细胞。然而成骨诱导周期过程复杂,延长了细胞体外培养时间和花费。目的:探讨未经过成骨诱导的犬脂肪基质细胞作为种子细胞,利用组织工程技术修复犬下颌骨缺损的可行性。方法:取12个月龄犬背部皮下脂肪,经胶原酶消化法获得单个核细胞,将培养的第3代细胞与双相磷酸钙陶瓷形成支架复合物。在犬下颌骨两侧制备长20mm、高10mm的箱状缺损,拔除缺损区牙齿,分别植入细胞支架复合物和单纯双相磷酸钙陶瓷支架,不进行干预的区域作为空白对照。植入后4周及8周经组织学检测骨缺损修复情况。结果与结论:支架植入后4周,部分支架材料降解,缺损区形成新生骨,双相磷酸钙陶瓷组成骨量明显少于细胞支架复合物组,形成少量新骨及部分新生血管。8周时,两组形成更多的新骨,广泛分布于骨缺损区域,但双相磷酸钙陶瓷组仍明显少于细胞支架复合物组,差异有显著性意义(P〈0.01)。提示脂肪基质细胞复合双相磷酸钙陶瓷可在体内成骨,不经过体外成骨诱导的脂肪基质细胞作为种子细胞,利用组织工程技术可修复下颌骨缺损。
  • 中性粒细胞极性化过程中定向和侧足形成的方法学模式 免费阅读 收费下载
  • 背景:中性粒细胞极性是其趋化和产生防御功能的基础,而极性化过程中定向能力和侧足形成是重要的环节,目前相关研究的报道还很少。目的:观察均匀浓度、陡峭浓度梯度、平缓浓度梯度3种实验模式下细胞极性过程中片足的方向和侧足的形成情况,试图找出研究中性粒细胞极性的方法学模式。方法:①采用密度梯度离心法,成功急性分离人中性粒细胞。②均匀浓度、陡峭浓度梯度和平缓浓度梯度甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸对细胞进行趋化刺激。③倒置显微镜下观察细胞极性变化情况,判断细胞移动方向。④对细胞进行荧光双标,激光共聚焦显微镜下观察F-actin聚合情况。结果与结论:①均匀浓度下,中性粒细胞极性化方向和移动轨迹随机分布。②陡峭梯度浓度下,41%的细胞呈现电极向心性分布。③平缓梯度下,68%的细胞表现为沿着甲酰甲硫氨酰-亮氨酰-苯丙氨酸浓度的分布,χ2检验提示平缓浓度梯度实验模式存在较好的定向性。④三者均有明显的侧足形成,以均匀浓度为高,这与定向性呈现为相反的结果。结果显示平缓浓度梯度实验模式在研究细胞定向机制方面相对较好,另一方面对细胞定向的干扰可能来源于细胞侧足的形成。
  • 自体骨髓间充质干细胞动脉灌注联合局部注射治疗股骨头坏死 免费阅读 收费下载
  • 背景:细胞水平研究发现,股骨头缺血坏死患者股骨近端成骨细胞增殖能力降低,股骨头内间充质干细胞的数量减少。因此,对股骨头缺血坏死的治疗应在改善血供的同时,还应在坏死区局部补充具有成骨能力的种子细胞。目的:观察自体骨髓间充质干细胞动脉灌注联合局部穿刺注射介入治疗股骨头缺血性坏死的临床疗效。方法:研究组32例股骨头缺血死患者,采用seldinger技术经皮-股动脉穿刺将导管选至股骨头供养动脉,灌注脲激酶30×104U,罂粟硷30mg;然后经旋股内动脉灌注骨髓间充质干细胞悬液10mL,经皮穿刺股骨头坏死区多点注射骨髓间充质干细胞悬液10mL,骨髓间充质干细胞数量为2×107~2×108个。同期对照组34例股骨头缺血死患者,单纯采用动脉溶栓介入治疗进行比较。两组间隔2,4周再进行第2,3次介入治疗,3次为1个疗程。结果与结论:研究组32例患者,股骨头、颈区域狭窄闭塞血管再通,股骨头血管染色区域明显增大,坏死区域逐渐缩小29例;治疗后研究组关节活动度改善程度优于对照组;研究组疼痛缓解有效率为93.8%、临床治愈率为84.4%,均高于对照组。结果显示经动脉溶栓后灌注自体骨髓间充质干细胞,联合经皮穿刺局部多点注射介入治疗股骨头缺血性坏死可以提高疗效、缓解疼痛、改善关节功能。
  • 人淋巴瘤Raji细胞系中的边缘细胞:淋巴瘤干细胞存在之可能 免费阅读 收费下载
  • 背景:已有研究提示急性白血病、多发性骨髓瘤中肿瘤干细胞富集于SP细胞中,且免疫表型及生物学特性相比于主群细胞存在明显的异质性。而关于淋巴瘤淋巴瘤干细胞的研究报道甚少。目的:检测人淋巴瘤Raji细胞系中是否存在SP细胞,分选该群细胞后观察其与非SP细胞在分化抗原和P-糖蛋白表达以及细胞周期方面的差异,探讨淋巴瘤干细胞存在的可能性。方法:Hoechst-33342染色细胞后运用带紫外激发光的流式细胞仪进行Raji细胞系SP细胞的检测及分选。观察不同质量浓度维拉帕米对SP细胞抑制的程度,选择最佳抑制浓度。分选后分别检测SP和非SP细胞P-糖蛋白、分化抗原CD34,CD19,CD20,CD5表达以及细胞周期,并进行对比。结果与结论:Raji细胞系中存在SP细胞,比例在2%左右,当维拉帕米质量浓度为50mg/L时能被完全抑制。SP和非SP细胞CD20阳性表达率分别为18.2%和93.6%,CD5阳性表达率分别为78.0%和22.2%;P-糖蛋白表达差异无显著性意义,但SP中阳性细胞的平均荧光强度强于非SP细胞。提示Raji细胞系中SP与非SP细胞在分化程度、多药耐药性方面具有明显的差异,SP细胞是具有明显"异质性"的细胞亚群。据此可初步推测,Raji细胞系的构成也类似肿瘤干细胞分级组成模式,而淋巴瘤干细胞则有可能富集于SP亚群中。
  • 急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达 免费阅读 收费下载
  • 背景:据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见。目的:观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义。方法:50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18例急性T淋巴细胞白血病。同期选择27例非恶性血液病患者作为对照。取肝素抗凝的骨髓液2~4mL,用Ficoll液分离骨髓单个核细胞,半定量反转录聚合酶链反应法检测TAp63的表达。结果与结论:50例急性淋巴细胞白血病患者有49例表达TAp63,急性淋巴细胞白血病组明显高于非恶性血液病组(P〈0.05),急性B淋巴细胞白血病表达水平显著高于急性T淋巴细胞白血病(P〈0.05)。动态观察了5例初治急性淋巴细胞白血病化疗后不同阶段TAp63的表达变化,发现初治时TAp63表达,缓解后低表达或不表达,复发后又表达。结果表明TAp63在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的表达明显高于非恶性血液病患者,尤其在急性B淋巴细胞白血病患者中高表达。
  • 超声联合微泡作用下即时产生非酶化一氧化氮的实验 免费阅读 收费下载
  • 背景:一氧化氮是体内重要的气体信号分子,近年来研究发现一氧化氮可以在无一氧化氮合成酶存在的条件下合成,即非酶化一氧化氮合成,而非酶化途径合成一氧化氮,可能是许多生物学效应的机制之一。目的:观察超声联合微泡是否可以实现或者增效一氧化氮非酶途径的产生。方法:将L-精氨酸和H2O2按照1︰1,10︰1,10︰0.1,1︰10的比例混合,应用频率为1MHz,输出功率为0.5,1.0,1.5W/cm2的超声分别持续辐射60s,论证最优的L-精氨酸和H2O2的浓度比例以及最适的超声输出功率。确定最适浓度比和超声输出功率后,实验设立4组,分别进行超声联合微泡、单纯超声、微泡进行干预,空白对照组不进行干预,比较各组一氧化氮生成量。结果与结论:体外试验中,L-精氨酸和H2O2的浓度比例以10︰1为最佳,选择1.5W/cm2声强作为超声最优值。以此最适浓度比和超声输出功率干预,超声联合微泡组的一氧化氮生成量多于超声组(P〈0.01);超声组一氧化氮生成量优于空白对照组(P〈0.01);而微泡组的一氧化氮生成量与空白对照组没有差异。结果表明超声联合微泡可以增效一氧化氮的非酶合成。
  • 本期专题:造血干细胞移植的临床应用 免费阅读 免费下载
  • 1健康供者外周血造血干细胞动员后采集的最佳时机,见2010年14卷6期1068页 2自体外周血造血干细胞移植联合硼替佐米及大剂量美法仑治疗多发性骨髓瘤3例,见2010年14卷10期1882页
  • 外周血内皮祖细胞数量变化与颅内动脉瘤的生成 免费阅读 收费下载
  • 背景:动脉内膜损伤是动脉瘤发生的始动因素,内皮祖细胞能修复受损的动脉内膜。目的:建立大鼠颅内动脉瘤模型,探讨动脉瘤大鼠内皮祖细胞数量变化及意义。方法:40只SD大鼠随机分为两组,正常组作为正常对照,不给予任何干预。模型组大鼠手术结扎双侧肾动脉后支以及左侧颈总动脉,术后喂食含8%氯化钠鼠粮。于2周,1,2,3个月末测量大鼠内皮祖细胞变化,并与3个月末测量各组大鼠血压及动脉瘤大小,RT-PCR检测willis环相关基因表达。结果与结论:模型组大鼠内皮祖细胞数目于2周后就开始下降,与正常组比较差异有显著性意义(P〈0.05),一直持续到3个月末(P〈0.01)。模型组大鼠动脉瘤壁基质金属蛋白酶9表达明显高于正常组正常大鼠(P〈0.01),而内皮型一氧化氮合酶明显低于正常(P〈0.05)。结果提示循环内皮祖细胞数量降低可能是动脉瘤生成的一个重要因素。
  • 本期专题:造血干细胞移植的临床应用(本刊中文部) 免费阅读 免费下载
  • 6人类白细胞抗原配型不合造血千细胞移植治疗骨髓增生异常综合征15例 张媛(解放军北京军区总医院血液科,北京市100700) 推荐理由:异基因造血干细胞移植是目前惟一可以治愈骨髓增生异常综合征的方法,HLA相合供者是其最佳选择。为解决供者来源不足的问题,近年来开始使用HLA配型不合的亲属作为造血干细胞移植的供者。然而,
  • 2007年至2009年4月中国干细胞研究的国际领先成果 免费阅读 收费下载
  • 干细胞研究是当今生物医学研究最热门的领域,20世纪初就有科学家提出了"干细胞"这个概念,直到今日,干细胞可以自我更新,通过细胞分裂产生的两个子细胞中至少有一个仍是干细胞,同时在特定的条件下可以分化成不同类型的功能细胞,与之相关的一个衡量标准是可以形成有功能的器官或整个个体,在这公认的定义中,尚没有揭开的谜底还有很多很多。
  • 肝癌干细胞的研究热点及其临床意义 免费阅读 收费下载
  • 背景:肝癌是否存在肿瘤干细胞目前还没有明确答案。已发现一些具有特异性的细胞标志物,但需进一步验证筛选。信号传导调控在肝癌的发生发展和转移复发过程中究竟起到何种作用,是目前研究的重要课题。而针对肝癌对放化疗抵抗特性,也有许多研究分析值得关注。目的:复习相关文献,就肝癌干细胞起源、干细胞标志物、信号传导调控、对治疗抵抗原理及相应治疗策略等方面进行综述。方法:以"cancer stem cells,hepatocellular carcinoma,markers,therapy"为检索词,应用计算机检索Pubmed数据库1996-01/2010-01关于肝癌干细胞标识、分子调控及治疗的文献;以"肿瘤干细胞,肝细胞癌,标志物,治疗"为检索词,机检索重庆维普数据库、清华同方数据库1996-01/2010-01相关文献。纳入30篇符合标准的文献进行分析讨论。结果与结论:研究表明肝癌组织中存在肿瘤干细胞特性的细胞亚群,其来源可能是多源的,并与肿瘤转移特性密切相关。目前已发现的肝癌干细胞标志物如OV6、AFP、c-kit、EpCAM和CD90等,对干细胞识别筛选起到重要作用。研究表明Wnt,Shh,Notch和PI3K/AKT/mTOR等信号传导途径对肝癌干细胞发挥重要的调控作用。针对干细胞抗药特性,采取分子靶向治疗、分化治疗和抗体治疗,对肝癌治疗取得了初步疗效,需要进一步深入研究。
  • 间充质干细胞在再生障碍性贫血治疗中的应用 免费阅读 收费下载
  • 背景:造血干细胞移植现在仍然是儿童和青年重型再生障碍性贫血的一线治疗选择,但供者来源有限,费用高,且5%~15%的患者因为慢性移植物抗宿主病影响疗效和生活质量。因此尚需探索能提高疗效,减轻不良反应的治疗途径。间充质干细胞易于分离并且增殖力稳定,可以满足临床需求。目的:总结间充质干细胞的研究进展、免疫学特性以及在再生障碍性贫血治疗中的应用情况。方法:由第一作者在2010-06检索PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)及中国期刊全文数据库(http://www.cnki.net)1995/2010有关间充质干细胞的研究进展、免疫学特性以及在再生障碍性贫血治疗中应用的文献。英文检索词为"mesenchymal stem cells,aplastic anemia,anemia",中文检索词为"间充质干细胞,再生障碍性贫血,贫血"。结果与结论:共收集119篇关于间充质干细胞及再生障碍性贫血的文献,中文85篇,英文34篇,排除因研究目的与课题无关、发表较早、重复及类似研究,纳入30篇符合标准的文献。目前普遍认为再生障碍性贫血是一种获得性骨髓造血功能衰竭症,再生障碍性贫血的发生、发展与T细胞功能亢进引起的造血组织损伤密切相关。间充质干细胞具有免疫负调节及支持造血双重作用,且具有可移植性和来源广泛的特点。再生障碍性贫血患者和正常人的间充质干细胞在生物学特性上具有差异性,间充质干细胞将会为研究再生障碍性贫血的发病机制和治疗提供新的思路和方法。
  • 骨髓基质干细胞向肌细胞分化及移植的治疗作用 免费阅读 收费下载
  • 背景:骨髓基质干细胞属多能干细胞,在适当的条件下可转分化为各种肌肉细胞,在移植后可改善心脏或骨骼肌的整体功能。如何优化诱导分化方法,改善移植途径以及移植后改善组织功能的机制成为现今研究的热点。目的:就近年来骨髓基质干细胞诱导分化为肌细胞,以及其用作细胞移植治疗心肌梗死、肌肉萎缩等肌细胞坏死性疾病的研究进行综述。方法:应用计算机以bone marrow cell,muscle cell检索词,检索Pubmed数据库(2005/2010);以"骨髓基质干细胞、肌细胞"为检索词,检索中国期刊网全文数据库(2007/2010);以"骨髓基质干细胞、肌细胞、分化、心脏"为检索词,检索万方数据库(2007/2010)。共收集220篇关于外周血干细胞方面的文献,中文61篇,英文159篇,排除发表时间较早、重复及类似研究,纳入21篇符合标准的文献。结果与结论:骨髓基质干细胞可以在体外扩增,但其表面特异性标记尚无定论,因此要分离得到完全纯化的骨髓基质干细胞还有一定的困难,当前只有STRO-1抗原是较为肯定的间质干细胞表面抗原,可用于鉴定分离骨髓中的间质干细胞。大量研究表明,通过体外诱导剂或体内移植可促使骨髓基质干细胞转化成各种组织细胞,包括心肌细胞和骨骼肌细胞,并且在移植后可观察到肌组织功能得到明显改善,但其机制目前尚无充分了解。此外,尽管各种诱导方法诱导骨髓基质干细胞分化的结果是肯定的,以及体内移植也表现出改善坏死肌组织功能的潜能,但目前体外诱导程度仍然较低,且体内功能改善也有局限性,因此,如何改善诱导方法,提高移植效率及功能改善有待进一步研究。
  • 基于乳腺癌干细胞的临床治疗进展 免费阅读 收费下载
  • 背景:肿瘤干细胞在肿瘤的发生、发展、转移和复发等方面发挥着重要的作用。由于常规疗法无法消灭乳腺癌干细胞,故乳腺癌干细胞已被假定为乳腺癌治疗失败的根源。目的:阐明乳腺癌干细胞的生物学特性及一些乳腺癌靶向治疗药物的疗效,为制定提高乳腺癌患者生存率的治疗方案提供一些建议。方法:应用计算机检索PubMed数据库2000-01/2010-08有关乳腺癌干细胞的标志物与鉴定、新型药物针对乳腺癌干细胞靶向治疗方面的相关文献,检索词为"breast cancer,cancer stem cells,therapy",限定文章语言种类为English。检索文献包括临床研究、基础研究及综述类文章,初检得到文献总计203篇,排除重复性研究,保留33篇文献进一步分析。结果与结论:乳腺癌干细胞是第一个在实体瘤中被鉴定的肿瘤干细胞,人们采用多种策略成功分离出乳腺癌干细胞,对其生物学行为的认识正逐渐深入。乳腺癌干细胞的自我更新、分化等特性受到微环境和许多信号转导通路的调控。如何靶向治疗乳腺癌干细胞,最终根治乳腺癌,正逐渐成为肿瘤靶向治疗研究的一个热点。
  • 干细胞移植治疗慢性肾脏疾病的可行性 免费阅读 收费下载
  • 背景:慢性肾脏疾病的发病率呈逐年递增趋势,传统血液透析和同种异体肾移植仍是目前仅有的治疗选择。随着以干细胞为基础的再生医学研究的进展,有可能从干细胞的角度找到慢性肾病治疗的理想治疗措施。目的:就不同来源干细胞治疗慢性肾脏的作用机制及临床应用的可能性等进行综述。方法:应用计算机检索CNKI和PubMed数据库中2006-01/2009-12关于干细胞治疗慢性肾病的文章,在标题和摘要中以"胚胎干细胞;骨髓干细胞;诱导性多少能干细胞;慢性肾脏疾病"或"Embryonic stem cells;Bone marrow stem cells;induced pluripotent stem cells;chronic kidney disease"为检索词进行检索。选择文章内容与干细胞治疗慢性肾病相关,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到128篇文献,根据纳入标准选择30篇文章进行综述。结果与结论:多种来源的干细胞具有向肾组织细胞分化的潜能,大量实验研究表明干细胞移植对急性肾损伤修复有积极作用,同时对于肾脏纤维化疾病、终末期肾病的治疗等也有相关研究报道。通过对干细胞相关特性的描述及干细胞治疗肾病的相关机制的研究,希望能通过新的方法治疗慢性肾病。
  • 诱导多潜能干细胞在再生医学中的应用 免费阅读 收费下载
  • 背景:传统的器官或者细胞移植存在严重的供体来源不足和免疫排斥问题以及伦理学障碍。诱导多潜能干细胞有着近乎胚胎干细胞的自我更新能力和分化潜能,而且还拥有与患者一致的遗传物质,避免了免疫排斥反应,其应用前景十分广阔。目的:综述诱导多潜能干细胞在再生医学领域应用研究的现状。方法:应用计算机检索PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)相关文章,检索时间为1997/2010,检索词为"induced pluripotent stem cell,diabetes,Parkinson’s disease,cardiovascular",并限定文章语言种类为English。初检得到文献322篇,最终入选30篇文章进行综述。结果与结论:疾病特异的诱导多潜能干细胞来源于患者本身,拥有与患者一致的遗传物质,既降低了移植后的免疫排斥,也避免了伦理学的问题。因此个体特异的诱导多潜能干细胞在再生医学领域有潜在的应用前景。
  • 医学英语单词例句 免费阅读 免费下载
  • spin: v(使)旋转,疾驰,纺织,结网,眩晕 n.纺织,旋转,眩晕,疾驰
  • 他汀类药物对内皮祖细胞的相关作用 免费阅读 收费下载
  • 背景:他汀类药物作为临床上广泛应用的降脂类药物,其不同剂量与疗程对于内皮祖细胞有着不同的近期及远期作用。目的:综述国内外他汀类药物对内皮祖细胞作用的现状和进展。方法:应用计算机检索CNKI和Pubmed数据库中1995-01/2009-11关于内皮祖细胞和他汀类药物的文章,在标题中以"内皮祖细胞,他汀类药物"或"endothelial progenitor cells,statins"为检索词进行检索。选择文章内容与内皮祖细胞及他汀类药物有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到843篇文献,根据纳入标准选择关于内皮祖细胞及他汀类药物的19篇文献进行综述。结果与结论:他汀类药物对于内皮祖细胞有多重的作用。在短期治疗和低剂量的情况下,对心血管疾病有保护作用,增强内皮祖细胞各方面功能;在长期、大剂量应用他汀类药物后,造成其数量减少,抑制了血管生成,这对于抑制肿瘤血管发生有一定的研究价值。
  • 外国专家修饰的医学英语句型 免费阅读 免费下载
  • 内皮祖细胞与氧化应激研究进展 免费阅读 收费下载
  • 背景:内皮祖细胞是外周血中存在的一种干/祖细胞,是成熟内皮细胞的前体细胞,其与氧化应激的关系越来越受到人们的关注,而且国内外研究正日趋增多。目的:对国内外内皮祖细胞与氧化应激关系的现状及新进展作一综述。方法:应用计算机检索CNKI和Pubmed数据库中1997-01/2010-05关于内皮祖细胞与氧化应激的文章,在标题和摘要中以"内皮祖细胞,氧化应激"或"endothelial progenitor cells,oxidative stress"为检索词进行检索。选择文章内容与内皮祖细胞与氧化应激有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到212篇文献,最终选择有代表性的34篇文献进行综述。结果与结论:内皮祖细胞与氧化应激关系密切,虽然内皮祖细胞具有比成熟内皮细胞更强的抗氧化能力,但在长期氧化应激存在的情况下,氧化应激通过减弱其抗氧化酶的表达,增加氧化酶的表达而促进内皮祖细胞的凋亡而影响其功能及数量,故氧化应激是导致内皮祖细胞数量改变及功能受损的影响因素之一,而通过他汀类药物、血管紧张素转换酶抑制剂/受体拮抗剂及过氧化物酶体激动剂的干预可改善内皮祖细胞的氧化应激状态,保护其功能。
  • 干细胞微环境的体外模拟 免费阅读 收费下载
  • 背景:细胞外基质是组织微环境的重要组分,为维持细胞功能提供了关键的生化和物理信号。目的:对体外模拟骨髓干细胞微环境的研究进展进行综述,着重于介绍体外再造细胞外基质。方法:应用计算机检索Pubmed(1999-01/2010-10)、Embase(1999-01/2010-10)数据库中关于干细胞微环境的文章,以"mesenchymal stem cells;extracellular matrix;niche;growth factor modulation;culture in vitro"为检索词进行检索。初检得到321篇文献,根据纳入标准选择关于干细胞微环境的23篇文献进行综述。结果与结论:骨髓源性的细胞外基质培养体系能保持间充质干细胞的特性,对纯化这些细胞和形成更多数量的同质间充质干细胞提供了便利。使用3D合成材料建立一个独特的骨架,包被组织特异性的间充质干细胞蛋白,并添加正确的生长因子组合,有利于调控间充质干细胞的分化方向。
  • 脑内神经网络修复关键点的临床验证 免费阅读 收费下载
  • 背景:细胞移植的安全有效靶点选择,是临床研究的重要方向。对脑内是否存在能发挥重要治疗作用的点或区域,以最大限度对神经网络发挥良性影响进而修复,是研究先行者必须优先考虑的课题之一。目的:通过临床资料分析,证实细胞移植脑内神经网络修复关键点(KPNNR)理论的客观性、真实性和实用性。方法:2003-05/2009-01共有631例各类中枢神经系统疾病患者接受神经网络修复关键点嗅鞘细胞移植,其中609例资料齐全,男392例,女217例;年龄1.2~84(42.87±19.64)岁,病程0.4~35(5.11±5.46)年。疾病分布:肌萎缩侧索硬化432例次、脑性瘫痪110例次、多发性硬化25例次、共济失调12例次、多系统萎缩7例次、遗传性痉挛性截瘫6例次、持续性植物状态6例次、痴呆2例次、脑缺氧后遗症2例次、帕金森叠加综合征2例次、非特异性脑炎后遗症2例次、肾上腺脑白质营养不良1例、核黄疸后遗症1例、皮质基底核变性1例。患者来自75个国家或地区。结果与结论:细胞移植后随访2~8周,平均4周,609例次中526例次神经功能获不同程度改善,近期总改善率为86.37%,其中肌萎缩侧索硬化改善率为87.96%。脑性瘫痪改善率为82.7%,特别是4例伴有癫痫者,术后发作明显减少。共济失调改善率为83.3%。遗传性痉挛性截瘫改善率为83.3%。围手术期出现不良事件共33例次,发生率为5.4%,主要为术后头痛、发热等,多经对症治疗后痊愈。结果提示,大脑内神经网络修复关键点(KPNNR)客观存在,在该点进行嗅鞘细胞移植安全可行,能改善多种中枢神经系统疾病患者的神经功能和(或)延缓病情的进行性恶化。
  • 自体造血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤后大剂量白细胞介素2过继免疫对长期生存的影响 免费阅读 收费下载
  • 背景:过继免疫治疗是目前肿瘤免疫治疗的热点,白细胞介素2是一种具有多种生物学活性的细胞因子,在机体的抗肿瘤免疫中起到重要作用。目的:评价比较淋巴瘤自体造血干细胞移植治疗后应用与不应用大剂量白介素2行免疫治疗的临床疗效。方法:回顾分析30例恶性淋巴瘤患者(治疗组)自体造血干细胞移植后行大剂量白细胞介素2治疗,与随机挑选30例患者(对照组)自体造血干细胞移植后未行白细胞介素2治疗进行对比,检测两组患者外周血T淋巴细胞亚群,观察两组免疫功能的变化,并对所有患者进行随访观察。结果与结论:自体造血干细胞移植后白细胞介素2治疗组外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平明显提升。随访结束时统计复发率:治疗组13.3%,对照组26.7%;中位生存期:治疗组14~98(42±2)个月,对照组8~78(28±2)个月。提示恶性淋巴瘤自体造血干细胞移植后行大剂量白细胞介素2治疗能提高患者的免疫功能,减少移植后复发率,并有望延长生存期。
  • 脐血间充质干细胞移植治疗低血糖昏迷1例 免费阅读 收费下载
  • 背景:成体干细胞可以跨系跨胚层分化为所有的组织细胞类型,在特定的条件下,可分化为骨、软骨、脂肪、肌肉和神经细胞等,替代、修复已受损的组织、细胞,达到功能修复的目的。目的:观察脐血间充质干细胞治疗低血糖昏迷并发缺氧缺血性脑病的疗效。方法:对收治的1例低血糖昏迷并发缺氧缺血性脑病及肺部感染的患者,给予抗自由基、营养神经、促醒、抗感染、康复理疗等综合治疗的同时,从静脉滴注进行脐血间充质干细胞治疗。观察住院期间意识恢复情况、脑电图、日常生活能力评分及随访结果。结果与结论:治疗近1个月后患者运动、认知功能明显恢复,复查脑电图可及a波,日常生活活动能力评分50分,70d后随访,患者未出现不良反应,表明干细胞治疗近期疗效安全。提示脐血间充质干细胞治疗低血糖昏迷并发缺氧缺血性脑病安全有效。
  • 《中国神经再生研究(英文版)》(NRR)杂志国际主编讲座:“临床科研与写作”及小型科研对接研讨并辽宁省细胞生物学学会青年科学家论坛 免费阅读 免费下载
  • 为了推动细胞生物学研究的发展及其与世界顶级专家间的交流与合作,《中国神经再生研究(英文版)》杂志社联手辽宁省细胞生物学学会拟在2011年5月5日在沈阳举办“临床科研与写作”大会讲座,小型科研对接研讨会和青年科学家论坛。
  • 目标,向前冲(王莉莎)
    [研究与报告]
    成人骨髓间充质干细胞向甲状腺细胞的诱导分化(张勤 刘东源)
    低氧增强骨髓间充质干细胞对缺氧诱导心肌细胞凋亡的可能性(周美玲 王爱玲 徐风 陈峰)
    绿色荧光蛋白标记成人骨髓间充质干细胞的超微结构特征(马丽花 赵熠 蔡学敏 邓永丽 潘兴华)
    兔骨髓间充质干细胞培养及向成软骨细胞的诱导分化(郭璇 霍然 吕仁荣 林莉)
    层粘连蛋白促脐带间充质干细胞向成骨细胞分化与黏着斑激酶表达(扎拉嘎胡[1] 徐忠伟[1] 兰晓霞[2] 陈晓[3] 陈小义[1])
    全反式视黄酸诱导兔骨髓间充质干细胞向神经细胞的分化(周文逊[1,2] 张雁儒[1])
    激素对兔骨髓间充质干细胞神经递质表达的影响(王义生[1] 张鑫[1] 张振[1] 赵国强[2] 李月白[3])
    不同来源人羊膜间充质干细胞的混合培养(王兆福[1] 焦红亮[1,2,3] 李建斌[1] 单泓[1] 郑文迪[4] 谷晨熙[4] 杜英[5] 关方霞[6] 杨波[2,3])
    海马神经干细胞不同传代方法的比较(李梅 王湘臻 徐铁军)
    大鼠成骨细胞的原代培养和鉴定(李晓峰 赵劲民 苏伟 范锲 罗世兴 马爱国)
    脐血浆神经营养活性蛋白成分对CD34+细胞增殖分化的影响(张丽[1,2] 李倩如[2] 杜英[2] 杨波[3] 李国喜[4] 胡祥[4])
    [技术与方法]
    人脐带血内皮祖细胞与血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子共培养及其增殖和迁移能力(周建良 邹明晖 陈义初 周诚 史嘉玮 董念国)
    人胎盘间充质干细胞生物学特性和抗凋亡细胞因子的分泌(朱少芳[1] 何援利[1] 卢国辉[2] 付霞菲[1])
    碱性成纤维细胞生长因子-慢病毒真核表达载体的构建及转染(胡杨[1] 盛磊[2] 马莹[1] 何惠宇[1] 阿布力孜·阿布杜拉[2] 阿尔孜古丽[1])
    干细胞相关因子在大肠癌组织及SW620细胞株的表达(李秋娴[1] 黄颖峰[2] 魏亚明[3] 王晓华[1] 罗宏图[3] 杨邵宇[3] 许艳丽[3] 黄于艺[1] 叶亨[1])
    自体外周血干细胞动员和采集并联合化疗方案治疗儿童神经母细胞瘤及原始神经外胚层肿瘤35例(张伟令[1] 张谊[1] 黄东生[1] 杨怡平[1] 刘晓超[2] 吴怡平[2])
    骨髓间充质干细胞移植膝类风湿关节炎兔:关节滑膜体积和软骨厚度的MRI评价(崔延安[1] 刘钊[1] 刘红霞[1] 黄海青[1] 张全彬[2])
    骨髓间充质干细胞对慢性哮喘小鼠血清白细胞介素12和白细胞介素4水平的影响(戈霞晖[1] 白冲[1] 陈若华[2] 胡珍丽[1] 朱天怡[1] 李强[1])
    骨髓间充质干细胞移植急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠星形胶质细胞及髓鞘的变化(邢红霞[1] 殷闯[2] 王玉梅[1] 刘胜[3] 史莉瑾[1] 李杰[1])
    嗅鞘细胞移植联合督脉电针治疗大鼠前脊髓综合征(张淑莲 闫金玉 李剑锋)
    补阳还五汤对外周血内皮祖细胞数量和功能的影响(刘锟[1,2] 李坤[3] 董国华[2] 申翼[2] 王常田[2] 吴海卫[2] 景华[2])
    白杨素对人肝癌BEL-7402细胞表面超微结构和蛋白质磷酸化及相关通路的影响(赵翔[1] 陈希[2] 李常虹[1] 张丽君[3] 张页[1])
    [观点]
    如何向SCI收录的优秀期刊投稿:生物信息学领域文章向SCI杂志投稿的经验
    [技术与方法]
    脂肪基质细胞构建组织工程骨修复下颌骨缺损的实验研究(李晓宇[1] 姚金凤[2] 刘政华[1] 蔡剑波[1])
    中性粒细胞极性化过程中定向和侧足形成的方法学模式(陈海洋[1] 蔡春青[1] 谢翠华[2] 罗琼[1] 孟晓静[1])
    [临床实践]
    自体骨髓间充质干细胞动脉灌注联合局部注射治疗股骨头坏死(史跃[1] 尹文洲[2] 陈启忠[3] 王安明[1] 刘军权[4] 刘宏宾[5] 高从敬[1])
    [技术与方法]
    人淋巴瘤Raji细胞系中的边缘细胞:淋巴瘤干细胞存在之可能(谢健[1] 李晓进[2] 金从国[3] 喻美佳[2] 李惠民[1])
    急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达(潘阳琼[1] 刘延方[1,2] 孙慧[1] 王桂叶[1])
    超声联合微泡作用下即时产生非酶化一氧化氮的实验(李鹏[1] 童嘉毅[1] 冯毅[1] 杨芳[2] 马根山[1] 陈龙[1] 宋佳贤[1])
    [本刊特稿]
    本期专题:造血干细胞移植的临床应用
    [技术与方法]
    外周血内皮祖细胞数量变化与颅内动脉瘤的生成(徐勇 张建宁)
    [观点]
    本期专题:造血干细胞移植的临床应用(本刊中文部)
    [本刊特稿]
    2007年至2009年4月中国干细胞研究的国际领先成果
    [学术探讨]
    肝癌干细胞的研究热点及其临床意义(滕大洪 郑虹)
    间充质干细胞在再生障碍性贫血治疗中的应用(李强 李维佳 黄颖)
    骨髓基质干细胞向肌细胞分化及移植的治疗作用(王洋[1] 沈慧娟[2] 周敏芬[1] 朱群娥[3] 叶先才[3] 曾宪智[3])
    基于乳腺癌干细胞的临床治疗进展(任远[1] 李泽桂[2])
    干细胞移植治疗慢性肾脏疾病的可行性(周敬[1,2] 潘兴华[1] 庞荣清[1] 蔡学敏[1])
    诱导多潜能干细胞在再生医学中的应用(刘渔凯[1] 罗虎[1] 李泽桂[2])
    [观点]
    医学英语单词例句
    [学术探讨]
    他汀类药物对内皮祖细胞的相关作用(马骏 姜萌 何奔)
    [观点]
    外国专家修饰的医学英语句型
    [学术探讨]
    内皮祖细胞与氧化应激研究进展(陈树春 宋光耀)
    干细胞微环境的体外模拟(邱云 郑青 萧树东 汪铮)
    [临床实践]
    脑内神经网络修复关键点的临床验证(陈琳 郗海涛 黄红云 张峰 刘彦铖 陈娣 江昭 王庆苗 任玉水)
    自体造血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤后大剂量白细胞介素2过继免疫对长期生存的影响(刘昊[1,2] 郭智[1])
    [病例报告]
    脐血间充质干细胞移植治疗低血糖昏迷1例(李平 周瑞 晏小琼 余勇飞 阮清源)

    《中国神经再生研究(英文版)》(NRR)杂志国际主编讲座:“临床科研与写作”及小型科研对接研讨并辽宁省细胞生物学学会青年科学家论坛
    《中国组织工程研究与临床康复》封面

    主管单位:中华人民共和国卫生部

    主办单位:中国康复医学会 《中国组织工程与临床康复》杂志社

    社  长:王莉莎

    主  编:刘昆

    地  址:沈阳市和平区南京南街121号

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