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您现在的位置是：首页 > 农业科学 > 农学（农艺学） > 《分子植物育种》 > 2009年第03期
  • 大豆MIKC型MADS—box基因家族分析 免费阅读 收费下载
  • 根据拟南芥的MIKC型MADS—box蛋白序列构建HMM（hidden markov model）模型，在大豆基因组中确定了57个MIKC型MADS-box同源基因。分子进化树分析表明，57个大豆MIKC型MADS-box基因分为14个亚类，而MIKC^＋型基因又分为两个进化支。控制花形态建成的ABCDE同源异型基因（如AP1，AG，AP3和PI等）和重要的控制开花时间的基因（如SVP和SOCl）在大豆基因组中表现出多拷贝的特征。MEME和SMART分析表明，大豆和拟南芥MIKC型MADS—box基因具有保守的MADS和K-box基序，还有一些亚类具有特异的基序。MIKC型MADS—box基因结构较为保守，多数基因具有7～8个外显子。本研究得到的MIKC型MADS—box基因为下一步研究大豆花形态建成和开花时间调控的分子机制提供了重要参考依据。
  • ^60Coγ射线辐射诱变提高长春花生物碱含量 免费阅读 收费下载
  • 本实验采用长春花种子为材料，用^60Coγ射线不同剂量处理，统计处理萌发率和成株率，并观察当代表型变异率和进行回归模型分析。结果分析^60Coγ射线辐照长春花种子的半致死剂量平均为174Gy，照射长春花种子的较适宜剂量为200Gy。我们观察到长春花M1代生长初期有明显的叶形不对称、叶缘卷曲等致变现象，各种畸形叶出现频率与辐照剂量大小有关。通过辐照，我们得到长春花高杆变异、矮杆变异等变异植株，并利用HPLC检测发现高杆变异株型长春花生物碱含量比未照射的CK多出24％。
  • 基于形态性状的青海蚕豆核心种质的初步构建 免费阅读 收费下载
  • 通过对153份供试蚕豆资源的开花天数和株高等18项形态性状进行统计和分级整理，利用NTSYSpc软件对其表型性状的数据进行聚类分析，并在聚类过程中结合育种需要，优先选择花色、开花习性、粒色和脐色等性状特异性较大的种质，次要选择荚粒数和百粒重等优质性状的种质，初步构建21份核心种质，占总体资源的13．73％。结果显示，这21份核心种质的遗传多样性指数与总体资源差异不显著，表明初步构建的蚕豆核心种质能代表总体资源的遗传多样性，在一定程度上为青海省蚕豆种质资源的有效利用奠定了基础。
  • 杉木亲本自交系及其杂交种DNA甲基化和表观遗传变异 免费阅读 收费下载
  • 表观遗传调控包括DNA甲基化、染色质结构修饰和小分子RNA调控等机制可能在杂种优势形成过程中起重要作用。为了了解DNA甲基化对杉木杂交后代杂种优势的影响，本研究利用甲基化敏感随机扩增PCR技术（methylation-sensitive AP—PCR，MS—AP—PCR），选取40对引物组合对杉木亲本自交及其亲本的杂交组合后代群体的基因组DNA进行了扩增和分析。结果表明：杉木基因组的DNA甲基化模式主要以内侧胞嘧啶的甲基化为主；6个正反交组合总的甲基化百分率相对于亲本的自交系而言，甲基化率呈减少的趋势；同一组合正反交组合后代之间在CCGG位点胞嘧啶的甲基化水平上无明显差异；6个杂交组合在CCGG的位点上的甲基化位点数明显低于它们的亲本自交子代。对3种甲基化的表达类型与性状表型值、杂种优势值、配合力进行的相关分析结果表明，检测位点外侧胞嘧啶半甲基化、内侧胞嘧啶甲基化位点变化与杉木树高，胸径和材积性状的杂种优势均成显著负相关，即杉木基因组外侧胞嘧啶半甲基化程度越低、内侧胞嘧啶甲基化位点越少，3个生长性状的杂种优势愈明显；而其他甲基化程度的指标与杂种优势之间的相关均没有达到统计学的显著水平。
  • 转PPase基因对马铃薯无机焦磷酸酶活性和无机磷含量的影响 免费阅读 收费下载
  • 对转正义和反义无机焦磷酸酶（PPase）基因马铃薯PPase活性及其测定最适条件和无机磷（Pi）含量进行了研究，结果表明，PPase活性测定最适pH值是8．0，最适温度是42℃，二价阳离子以Mg^2＋最好。叶片中PPase活性和Pi含量较高，茎和生长期微型薯中PPase活性和Pi含量较低，贮存3个月的微型薯中PPase活性和Pi含量比生长期块茎更低。另外，与未转基因的对照相比，转正义PPase基因提高了转基因马铃薯中PPase活性和Pi含量，转反义PPase基因降低了转基因马铃薯中PPase活性和Pi含量。
  • 低钾胁迫下烟草根系差异表达基因的cDNA-AFLP分析 免费阅读 收费下载
  • 烟叶含钾量是评价优质烟叶重要品质指标，大量研究认为钾元素的吸收和积累是由植物基因型所控制，而在烟草转录水平上的低钾胁迫的应答机制方面，尚未见报道。本实验为鉴定烟草低钾胁迫响应基因，应用.cDNA-AFLP技术，对低钾胁迫下烟草NC89根系基因表达进行了mRNA指纹分析，通过240对引物组合的筛选，共得到324个差异表达转录衍生片段。对其中9个TDF进行了克隆、测序和序列分析。结果表明：其中7个TDF涉及逆境响应，氨基酸的转运与代谢，转录调控及钾吸收，2个TDF为功能未知。
  • 农杆菌介导蔗糖：蔗糖果糖基转移酶基因转化甘蔗 免费阅读 收费下载
  • 甘蔗是高产高蔗糖型植物的代表，把蔗糖：蔗糖果糖基转移酶基因（1-SST）转入甘蔗并使其得到有效的表达，可将甘蔗中的蔗糖转化成果聚糖。本研究以甘蔗为受体，首先接种甘蔗愈伤，培养20d后即为胚性愈伤组织，用农杆菌菌液浸染转化。研究结果表明，出芽时PPT的最佳筛选浓度为2．0mg／L，生根时PPT的最佳筛选浓度为5．0mg／L。共获得42株抗性植株，对抗性植株进行PCR鉴定，其中26株呈阳性，随机选取3株阳性片段进行测序，与目的基因片段一致，初步证明1-SST基因已经转入甘蔗。
  • 大白菜紫色性状的SRAP连锁标记的筛选 免费阅读 收费下载
  • 以紫色大白菜BC1回交群体的120个单株为材料，采用混合集群分析法构建大白菜的紫色与非紫色池，应用SRAP分子标记技术筛选两池间的多态性，并对与紫色性状相关的OTL和对应的连锁关系进行了初步分析。结果表明，在144对SRAP引物组合中，仅有8对引物组合可以在两池间扩增出较稳定的多态性产物。应用获得的8对引物组合对120个单株的DNA进行SRAP分析，初步获得3个与紫色性状相关的QTL：qp-cl-1、qp-cl-2和qp—cl-3，同时获得6个与这3个QTL连锁的标记，其中m7el1-490、m6e8—210、m7e11-900n和m6e8-100n4个标记与其最近QTL位点的连锁距离分别为0．1cM、0．1cM、0．2cM和2．2cM。这为紫色白菜的分子辅助育种提供了科学依据。
  • 辣椒抗黄瓜花叶病毒（CMV）基因的ISSR标记 免费阅读 收费下载
  • 辣椒（Capicum annuum L．）抗黄瓜花叶病毒（CMV）一直是辣椒育种的主攻目标之一。本研究以辣椒抗CMV品种VC16a和感CMV品种SS69杂交的F2群体60个单株材料，通过人工接种鉴定，采用高抗单株和高感单株分别构建抗、感基因池，利用BSA法筛选了40条ISSR引物，其中引物I-34在抗感病池中扩增出450bp多态性片段，通过F2单株验证后证明I-34450与抗CMV基因紧密连锁，其遗传距离为27.3cM，为辣椒抗CMV分子标记辅助育种奠定了基础。
  • 荔枝种质遗传多样性的SRAP分析 免费阅读 收费下载
  • 为评价荔枝种质的遗传多样性，从88对SRAP引物中筛选出22对多态性高、稳定性好的引物，用于研究46个荔枝品种。每对引物组合产生6～19条谱带，其中多态性条带284条，占总带数的97．93％。46个种质的相似系数在0．469～0．838之间，平均相似系数为0．644。其中，秤砣与红荔的相似性系数最大，亲缘关系最近；小丁香与三月红、三月红与A13两对相似系数最小，亲缘关系最远。UPGMA聚类分析显示，在相似系数为0．644处46份荔枝供试品种被划分为4个类群，并且来源地相同的品种间亲缘关系较密切。22对多态性引物中，引物me7-em2在海垦18中扩增出1条特征谱带，引物me3-em7在水东中也扩增出1条特征谱带，而仅凭这1条特征带就可以将荔枝品种海垦18或水东与其它材料区别开来。这说明SRAP标记可用于荔枝的品种鉴定和群体遗传结构的研究。
  • 青海省马铃薯主要栽培品种的SSR遗传多样性 免费阅读 收费下载
  • 利用SSR标记分析了12份马铃薯栽培品种的遗传多样性及其亲缘关系，结果表明：（1）30对SSR引物共扩增出388条带，其中多态性条带为359条。（2）12份材料的遗传距离介于0．2385-0．4801cM之间，平均值为0．3976cM。（3）利用由非加权类平均法聚类分析表明，在遗传相似系数0．63处将12份材料被划分为五类：两类为晚熟（其中从国际马铃薯中心引进的青薯9号品种为一类；青薯168，2号，3号，4号品种为另一类），两类为早熟（其中青薯5号品种为一类；青薯8号品种和02—1—1品系为另一类），一类为中熟（因育成的地域不同而分为两个亚类）。结果表明，青海省现有主要栽培的马铃薯品种遗传多样性水平较低。为拓宽育成品种的遗传基础，应充分发掘野生二倍体的遗传潜力。
  • 与黄瓜抗黑星病相关基因紧密连锁的SSR标记 免费阅读 收费下载
  • 本研究以黄瓜抗黑星病母本Q6和感黑星病父本F51及其F2代分离群体为试材，采用BSA法和SSR技术建立了对黑星病的抗病组和感病组，SSR引物CSWCTT02D在抗感组间表现多态性，且呈共显性。经162个F2单株验证，在高抗单株和高感单株中分别仅扩增出246bp和256bp的特异片段，而在中间类型个体中同时扩增出了两个特异片段。连锁分析结果表明，该标记与黄瓜黑星病抗病相关基因紧密连锁，距离为3．1cM。测序结果显示，两个片段的差异在于10个碱基的插入或缺失。
  • 马铃薯可溶性淀粉合成酶SSⅢ基因克隆及生物信息学分析 免费阅读 收费下载
  • 用RT—PCR方法从马铃薯中克隆了可溶性淀粉合成酶SSⅢ基因的cDNA片段，序列分析表明该cDNA片段全长为3967bp，开放阅读框为3693bp，编码1230个氨基酸。核酸序列同源性分析表明，该cDNA与已发表的马铃薯SSⅢ基因（X94400）具有99％同源性，氨基酸序列同源性达98％。应用生物信息学软件对SSⅢ基因分析表明：其编码的蛋白质具有多个磷酸化位点；蛋白质二级结构预测显示，有369个氨基酸可能形成α-螺旋结构，249个氨基酸可能形成β折叠，102个氨基酸可能形成β转角，510个氨基酸可能形成无规则卷曲；通过亚细胞定位可知，它是一种含有75个氨基酸的叶绿体转运肽蛋白。
  • 甘薯肌醇-1-磷酸合酶基因的表达分析 免费阅读 收费下载
  • 采用RT—PCR技术克隆了甘薯肌醇-1-磷酸合酶基因的cDNA编码区，命名为IbMIPS-1。该基因由1530个碱基组成，编码510个氨基酸，与蓖麻、烟草、芝麻、大豆肌醇-1-磷酸合酶的氨基酸序列比对表明，其同源性很高。将克隆的IbMIPS—1基因连接到pQE30载体，构建原核表达载体。实时定量RT-PCR分析结果表明，在茎线虫侵染甘薯块根后，IbMIPS—1基因被诱导表达，并且在侵染后的第4天表达量最高。推测该基因可能参与甘薯抗茎线虫病信号传导，以诱发甘薯茎线虫病抗性反应。
  • 巴西橡胶树HbbHLH1启动子的克隆与序列分析 免费阅读 收费下载
  • bHLH转录因子在高等植物生长发育、激素应答和次生代谢调节中具有重要的功能。根据巴西橡胶树Hevea brasiliensis）HbbHLH1基因设计了2个特异性反向引物，利用Genome Walking方法从巴西橡胶树叶片基因组DNA中克隆获得了HbbHLH1基因起始密码子上游819bp的调控片段。序列分析表明，该片段除了含有一个典型的真核生物核心启动子区域（-60～-10bp）外，还含有多个TATA—box、CAAT—box等启动子元件以及多种与激素和胁迫诱导相关的顺式调控元件，其中在－290bp和－309bp位点分别有一个应答MeJA信号反应的调控元件，但没有发现典型的乙烯响应元件。这暗示了HbbHLH1转录因子可能在橡胶树乳管分化和胶乳生物合成中具有调控作用。
  • 贵州马铃薯Y病毒外壳蛋白基因的克隆与遗传分析 免费阅读 收费下载
  • 本研究从中国贵州不同海拔地区采集感染马铃薯Y病毒（PVY）病害叶片，利用试管捕捉RT-PCR（TC—RT—PCR）方法克隆到长度为804bp的8个目的片段，序列分析表明为pVY外壳蛋白（PVY—CP）基因。通过与已经发表的PVY—CP基因序列进行比较和遗传分析，并根据PVY的CP基因全长和5’端序列构建系统发育树，结果表明，本研究分离的PVY，7株为O株系，1株为NTN株系。
  • 转il-4基因番茄的分子检测及田间分析 免费阅读 收费下载
  • 通过花粉管通道介导扩4基因转化番茄L402、中疏4号、强力米寿和大黄4个品种。利用PPT抗性筛选、PCR扩增、PCR-Southern杂交和Western技术，对il-4基因转化番茄的后代进行检测，并对il-4基因在T3代番茄中的传递规律、T3代植株的田间表现进行调查。研究结果表明，T3代植株中iZ4基因的分离情况不符合阳性植株数：阴性植株数=3：1的孟德尔分离规律，转il-4基因阳性植株数偏低。与非转基因植株（对照）相比，转il-4基因阳性植株的开花期延迟、田间抗病性下降、植株高度变矮、结实数／株减少、单株结果数减少，生长势和结实能力等综合农艺性状明显降低。而转基因阴性植株的综合农艺性状与非转基因植株（对照）相比，则差异不显著。花粉管通道法可以介导il-4基因转化番茄，il-4基因可以在转化后代中遗传。
  • 杨树SRK2C基因的克隆及其遗传转化 免费阅读 收费下载
  • 在杨树全基因组序列信息的基础上，根据拟南芥渗透胁迫诱导基因SRK2C的全长cDNA序列，在杨树基因组上定位并克隆获得了3个SRK2C同源基因全长cDNA序列。运用Gateway定向克隆技术构建了杨树SRK2C基因的过量表达载体，并进行了T89杨遗传转化研究，获得了一批转SRK2C基因T89杨植株，PCR检测表明目的基因已经整合到了杨树基因组中，实时定量荧光RT—PCR结果也进一步证实，目的基因在T89杨转基因植株中有较高水平的表达丰度。为进一步分析杨树PtSRK2C基因功能奠定了基础，也为进一步开展林木的抗逆机制和林木抗逆遗传改良研究提供了依据。
  • 甘蔗常用亲本及优良组合双亲间遗传相似性分析 免费阅读 收费下载
  • 采用18对SSR引物和15对AFLP引物对我国196份甘蔗常用亲本的遗传相似性进行分析，分别获得438和1192个标记，多态性位点比例分别是87．60％，80．80％，平均为84．2％；亲本遗传相似系数变幅介于0．4761-0．9099之间，总平均值为0．6673，遗传差异处于中等水平的亲本占了大多数，而差异较小和较大的都只是少数；45个甘蔗品种亲系的遗传相似系数分布在0．5687-0．6723，平均值为0．6723，91．11％甘蔗品种亲系的遗传相似系数集中在0．6100-0．7300之间，较理想的甘蔗杂交组合亲本间的遗传相似系数应为0．6723±0．0600：聚类分析表明，以遗传相似系数阈值约为0．700划分，育出45个品种所使用的30个亲本可分为9大类，在不同类型间选择亲本搭配的组合更容易选育出优良品种。
  • 柑桔线虫抗性主基因座Tyr1的特异标记开发与遗传作图改进 免费阅读 收费下载
  • 本文利用先期从BAC文库获得的NBS-LRR类候选抗病基因克隆序列Pt8a和Pt9a，进一步开发与柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1连锁的分子标记。以Pt8a和Pt9a序列作探针，通过高密度克隆印迹杂交，从BAC文库筛选出200个以上的阳性克隆，以阳性克隆插入序列设计引物，对柑桔抗线虫材料和感线虫材料开展以PCR扩增为基础的集群分离分析，发现一部分克隆序列与柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr1紧密连锁；再通过染色体步行测序，分别从3个克隆（7A4，4L17和29F20）获得3个完整的NBS-LRR类候选抗病基因序列。从此类序列开发更高特异性的分子标记，并在利用原有分子标记的基础上，对柑桔线虫抗性杂交后代群体（9145 family）构建较高密度的遗传图谱；同时，将新开发的分子标记应用于柑桔衰退病抗性杂交后代群体（9401 family），以初步估算柑桔线虫抗性主效基因位点Tyr]与柑桔衰退病抗性基因Ctv的遗传距离。
  • 小麦质核互作型雄性不育系线粒体DNA变异性的RAPD分析 免费阅读 收费下载
  • 在杂交小麦选育中，为了更好地利用细胞质雄性不育性，研究与不断挖掘新的不育细胞质类型及其对应育性恢复基因以改良现有不育资源至关重要。基于这一目的，本文对具有山羊草属细胞质的四类不育系线粒体DNA（mtDNA）进行了RAPD分析，分别比较了具有同一细胞质背景的山羊草、雄性不育系，以及该类不育系与恢复系组配的可育杂种F1的mtDNA的变异性。结果显示，供试山羊草与其对应细胞质雄性不育系在mtDNA上存在明显多态性，表明不育系在质核互作的影响下很可能已导致mtDNA发生变异；而不育系与对应的可育杂种F1在mtDNA上也存在多态性，同样表明育性恢复核基因对不育系进行育性恢复的过程中亦可能引起mtDNA发生相应变异；mtDNA变异很可能涉及到不育系育性本质的改变。
  • 矮孟牛及其后代育成品种的多态性分析与指纹鉴定 免费阅读 收费下载
  • 为深入了解矮孟牛及其衍生品种（系）的遗传特性，为育种工作中合理利用小麦育种骨干亲本提供理论依据，本研究利用22对SSR引物分析了矮孟牛及其衍生品种（系）共25份材料的遗传多样性。在25份材料中共检测到128个等位变异，等位变异数目为3～9个，每个位点上平均等位变异数为5．82个。25份材料间的遗传相似性系数（GS）在0．43～0．90，平均为0．63，表明品种间遗传差异较小。用非加权配对算术平均法UPGMA将25份材料分为五类，聚类结果较好地反映了品种（系）间的亲缘关系。利用其中3对多态性较好的引物可以对供试材料的DNA指纹进行鉴定，为我国小麦品种的指纹图谱构建及品种权保护提供参考。
  • 陕西省地方小麦品种多酚氧化酶基因等位变异检测及分布 免费阅读 收费下载
  • 小麦籽粒中多酚氧化酶（polyphenol oxidase，PPO）基因活性与面条等面制品颜色褐变密切相关，降低籽粒PPO活性是小麦品质改良的重要目标。利用PPO基因的功能标记PP018和PP029，对115份陕西省地方冬小麦品种（系）进行2A和2D染色体上PPO等位基因Ppo-A1α,Ppo-A1b和Ppo—D1b检测，并分析了品种等位变异的分布特点。结果显示：PP018在等位基因Ppo-A1α（高PPO）和Ppo-A1b（低PPO）中分别扩增685bp和876bp的片段，PP029在Ppo-D1b（高PPO）等位基因中扩增490bp的片段。115份品种（系）中Ppo-A1α,Ppo-A1b和Ppo—D1b等位基因的频率分别为37．39％、60．00％和45．22％。在陕西省所培育和引进的冬小麦品种f系）中，地方当家品种中最低PPO活性基因分布较多，而引进的冬小麦品种中高PPO活性基因分布较多。
  • 利用DH群体定位白叶枯病抗性QTL 免费阅读 收费下载
  • 以珍汕97和武育粳2号构建的籼粳杂交DH群体及其双亲为材料，通过接种8种白叶枯病菌株（菲律宾菌系的PX071、PX099、PX061，中国菌系的GX325、Zhe173、LN44、KS－1—21和日本本菌系的T7133），考察了该DH群体对白叶枯病抗性，并进行数量性状位点（QTL）分析。共检测到了26个QTL，分别位于除第7、第11染色体外其它10条染色体上，其中检测到有2个位点分别对4种不同的菌株有抗性，有2个位点对3种不同的菌株有抗性，3个位点对2种菌株有抗性。表明这些QTL对水稻白叶枯病均具有广谱抗性，通过分子标记辅助选择利用并聚合这些广谱抗性的QTL可以较好地改良水稻对白叶枯病的抗性。
  • 分子标记辅助培育双抗稻瘟病和白叶枯病杂交稻恢复系 免费阅读 收费下载
  • 本研究利用常规回交育种结合分子标记辅助选择技术，将来自C750的抗白叶枯病基因Xa23和抗稻瘟病基因pi9聚合到感病杂交稻恢复系闽恢3139中。最后在回交后代中获得了4个双抗稻瘟病和白叶枯病改良系ZR21-sk1、ZR21-sk2,ZR21—sk3和ZR21-sk4，且其遗传背景恢复率达96％以上。用来自福建省具有代表性的24个稻瘟病菌株和白叶枯病广致病型菌系P6对改良株系进行人工接菌鉴定，结果表明，聚合了Xa23和pi9基因的改良系同时抗稻瘟病和白叶枯病，且抗性与抗谱与供体亲本C750相似。农艺性状分析显示，改良株系所配组合基本保持闽恢3139的农艺性状和配合力，可直接应用于生产或作抗性育种亲本。
  • Rf-1位点CAPS标记对水稻不同胞质雄性不育育性恢复系的关系分析 免费阅读 收费下载
  • 水稻育性恢复基因Rf-1是目前水稻上克隆的唯一恢复基因。通过位于Rf-1位点的两个特异性CAPS（cleavable amplifiedpolymorphic sequences）标记对滇I型、野败型、红莲型及BT型恢复系基因型分析，发现这四种不同胞质的恢复系在Rf-1位点具有相同的带型，滇I型的两个保持系具有不同的带型。结果表明这四种不同胞质系统的恢复系均具有Rf-1基因。该结论与从恢复系选育的系谱分析的结果相一致的。
  • 籼粳稻细胞质背景下Rf-1位点PCR标记的遗传分离 免费阅读 收费下载
  • 本文在籼、粳稻细胞质背景下研究了Rf-1位点上PCR标记M45461的遗传分离比例，结果显示M45461的遗传分离与提供雄配子的杂合体的细胞质背景有关。粳稻细胞质不影响M45461的遗传分离比例，而籼稻细胞质会导致M45461极显著偏向籼稻或具有籼稻遗传成分较重的亲本。在籼、粳稻细胞质背景下，杂合体的花粉育性分别为半不育和正常可育，而小穗育性均正常。说明M45461的偏分离与雄配子选择有关，而与雌配子关系不大。该结果还揭示粳稻细胞质可以与籼稻细胞核和谐共存，籼稻细胞质则与粳稻细胞核存在不谐和的遗传互作。这一结论可以为籼粳分化的研究提供一些参考，也可为籼粳杂交父母本选择提供参考。
  • AtTPS03基因RNA干扰载体的构建及拟南芥转化 免费阅读 收费下载
  • 本研究以拟南芥DNA为模板，将罗勒烯合成酶AtTPS03基因的一个目的片段克隆到T-载体上。对克隆片段测序后，进行Blast比对，结果目的片段的序列与GenBank上报道的序列同源性达到100％。根据RNA干扰的基本原理，将目的片段正反向连到干扰载体pFGC5941查尔酮内含子的两侧，经限制性酶切和PCR扩增检测，证明已成功构建了干扰载体P-2AT03。利用农杆菌介导的浸花法转化拟南芥。收获的种子在含草丁膦的培养基上筛选抗性苗，通过对抗性苗的PCR检测，已成功获得了12株转基因苗。这些转基因苗为进一步研究罗勒烯和罗勒烯合成酶的功能奠定了良好基础。
  • 农杆菌介导热激转录因子8基因转化大豆 免费阅读 收费下载
  • 环境胁迫严重影响作物的生长和发育，热激转录因子（heat shock factor8，HSF）是一类在热应激反应中起重要作用的蛋白质，主要功能是在热休克基因的表达过程中与相应热激元件结合，启动基因的转录过程，最终促进热休克蛋白（HSP）基因的表达。本文将热激转录因子8（hsf8）基因构建在植物表达载体pCAMBIA3300中，以大豆子叶节作为受体，通过农杆菌介导法将hsf8基因导入品质性状优良的两个高产大豆新品系哈交5337和哈交5489中，最后获得转基因植株。在开展大豆遗传转化过程中，探讨了农杆菌介导大豆子叶节转化体系的影响因素，优化了转化条件。在共培养后，采用延迟筛选的方法来提高选择效率。并确定草胺磷筛选浓度为3．5mg／L。获得转化质粒pCAMBIA3300-HSF8的转基因植株，其中T1代PCR阳性植株17株。采用Real—timePCR的方法对T1代抗性植株进行hC8基因的转录水平的相对定量分析，确定9株较非转基因植株哈交5337表达量明显提高。有1株明显低于哈交5489的凤届基因表达量。
  • DREB1B基因在转基因小麦后代的稳定表达 免费阅读 收费下载
  • 本研究对基因枪导入了pBAC128F／R质粒（含有玉米Adh1内含子1的CaMV35S启动子驱动的bar基因作为选择标记，以来自拟南芥菜逆境诱导表达类型——亲水蛋白rd29b基因的启动子驱动脱水应答转录因子DREB1B基因的逆境诱导表达类型质粒）的T4代转基因小麦进行了稳定表达研究。PCR、PCR—Southern和Southern杂交分析表明，外源转录因子DREB1B基因已稳定整合到转基因株系的基因组中。半定量RT—PCR结果表明，部分转基因株系的DREB1B基因的相对表达量有所增强。叶片除草剂抗性检测结果显示有8个转基因株系可抗到150mg／L。叶片脯氨酸含量测定结果表明，有4个株系（编号为1，18，30和76）的脯氨酸含量提高幅度较大，同一株系，干旱与未干旱处理相比，脯氨酸含量提高了3～5倍。干旱处理后的转基因植株与非转基因植株相比，脯氨酸含量高2～3倍。在干旱条件下，T4代田间小区产量统计数据分析结果表明，有4个转基因株系（编号为30，51，70和76）的产量与非转基因植株相比有显著增加。研究表明，利用逆境诱导型rd29b基因的启动子来增强外源DREB1B基因的表达，能显著改良小麦的抗旱性。
  • 科学家培育出含多种维生素的转基因玉米 免费阅读 免费下载
  • 据2009年4月27日《美国国家科学院学报》报道，科学家们培育出一种加强了多种维生素表达的转基因玉米，这种作物将为数百万发展中国家贫困人民提供他们日常食谱所缺乏的维生素。
  • 植物组织移植处细胞间发生遗传物质交换 免费阅读 免费下载
  • 据《科学》5月1日的报道，德国科学家Stegemann S．和BockR．的最新研究成果表明，在植物组织移植的交界处，细胞遗传物质可以频繁进行交换。组织移植技术应用非常广泛，从植物育种到动物器官移植，都包含在这个概念之内。传统的观点认为，组织移植的供体和受体各自有自己的遗传物质，移植的组织供体和受体虽然融合在一起，但是它们的遗传物质不会混合。
  • CIMMYT和IITA合作研究非洲耐旱性玉米 免费阅读 免费下载
  • 为改善撒哈拉以南非洲最重要的谷物——玉米，在国际农业研究咨询委员会（CGIAR）的支持下国际玉米和小麦改良中心（CIMMYT）和国际热带农业研究所（IITA）等两个研究中心将合作寻找合适的办法。
  • 德国批准露天试验种植转基因马铃薯 免费阅读 免费下载
  • 柏林4月27日（路透）：2009年4月27日，德国农业部长Ilse Aigner表示，将允许转基因马铃薯的露天试验种植。同时，德国化工集团BASF（BASF．DE）也表示，转基因马铃薯Amflora的露天试验，并没有对公众健康或环境造成威胁。Aigner表示，本月将针对2008年试验种植的150hm^2转基因马铃薯Amflora，开展一项露天种植申请的评估，4月初德国农业部长禁止种植和销售由美国种子代理公司——孟山都生产的转基因玉米MON810，尽管官己获欧盟批准。
  • 表型组学／Phenomics 免费阅读 免费下载
  • 表型组学，是将生物体的表现型特征视为一个整体（表型组）进行研究的领域，生物体的表型特征大都是由基因组与环境相互作用产生的。1996年，衰老研究中心主任Steven A．Garan在滑铁卢大学的一次应邀演讲上首先提出了Phenomics概念。
  • 功能标记及在品种鉴定和辅助育种中的应用前景 免费阅读 收费下载
  • 功能标记是根据功能基因内部引起表型性状变异的多态性基序开发出来的一种新型分子标记。由于来自基因内的功能性基序，此类标记不需要进一步验证就可以在不同的遗传背景下确定目标等位基因的有无。本文详细描述了功能标记的概念及与其它几种类型遗传标记相比存在的优势；提出了功能标记开发的基本条件和发展策略。利用关联分析方法和近等基因系途径可以获得直接或间接的功能标记。结合本单位的研究方向，探讨了功能标记在分子标记辅助育种和品种鉴定中的应用潜力和开展相关工作的一些设想。
  • 目标起始密码子多态性（SCoT）：一种基于翻译起始位点的目的基因标记新技术 免费阅读 收费下载
  • 随着功能基因组学的发展，分子标记领域已开始从传统的随机或匿名性分子标记转向目的基因标记和功能性标记。目标起始密码子多态性（startcodon targeted polymorphism，SCOT）标记是一种基于翻译起始位点的目的基因标记新技术，具有操作简单、重复性好等特点，根据ATG翻译起始位点侧翼保守序列来设计单引物，扩增产生偏向候选功能基因区显性多态性标记，适合不同层次实验室的不同领域的广泛应用，SCoT标记已开始在水稻和花生上得到运用。本文旨在介绍给研究者一种可以作为传统的RAPD、ISSR标记有效补充的目的基因标记新技术，希望其广泛的应用于生物多样性分析、遗传图谱构建、重要性状标记等方面。
  • 落叶松多倍体体细胞胚的高效诱导途径 免费阅读 收费下载
  • 以日本落叶松X华北落叶松杂种无性系胚性细胞系Y68为材料，通过含有不同浓度的秋水仙素和氨磺灵水溶液、固体培养基和液体培养基进行处理，以体细胞胚分化能力和多倍体体细胞胚获得率为参数进行了对比研究。结果表明：秋水仙素水溶液浸泡法处理对落叶松多倍体体细胞胚诱导效果最显著；先对细胞系处理再进行体细胞胚分化较适合落叶松多倍体体细胞胚的发生。在500mg／L的秋水仙素水溶液中浸泡36h情况下多倍体诱导率最高，达79．8％，体细胞胚分化率为217．1个／g。
  • 外源DNA导入冬瓜条件的优化及其运用 免费阅读 收费下载
  • 针对冬瓜（Benincasa hispida（Thunb．）Cogn．）缺乏抗性种质资源的现状，本文开展了冬瓜抗枯萎病种质资源创新研究。采用花粉管通道法将高抗枯萎病的黑籽南瓜DNA导入优质冬瓜材料，以外源DNA剂量、pH值、注入时间、注入方法以及冬瓜品种为因素，通过正交设计，设计处理组合，筛选和优化外源DNA导入冬瓜条件。结果表明：以子房注射法、授粉后24h、导入浓度为1．2mg／mLDNA溶液（pH7．5）的处理，对冬瓜坐果率的影响最小。利用此方法将高抗冬瓜枯萎病的黑籽南瓜总DNA导入冬瓜，经病圃田间筛选和6代自交纯化已获得2份稳定的冬瓜新材料。经苗期人工接种和病圃田间自然抗病鉴定，其抗病性明显提高。所获抗病材料的品质与受体无明显差异。其中1份抗枯萎病材料已运用于育种实践，培育出了抗病、优质粉皮冬瓜“广利1号”，目前该品种每年推广面积700hm^2以上。
  • 转基因玉米目标基因纯合体快速准确的PCR鉴定方法 免费阅读 收费下载
  • 本文以转基因玉米NK603为例，介绍了一种检测目标基因纯和体的PCR方法。该方法利用4个引物的多重PCR反应，这4个PCR引物分别来自于目标基因的5’端（5’TP）和3’端（3’TP）DNA序列，目标基因5’端一侧的玉米基因组DNA序列（5’GP），以及目标基因3’端一侧的玉米基因组DNA序列（3’GP）。视玉米个体有无目标基因以及目标基因的杂合／纯和状态，PCR扩增可得到三种不同的结果：如果被检测个体无目标基因，5＇GP与YGP间的玉米基因组DNA将被扩增，PCR只产生一条条带；如果被检测个体是目标基因的纯合体，5＇GP与5＇TP及3’TP与3＇GP间的DNA将被扩增，PCR则产生两条条带；如果被检测个体是目标基因的杂合体，5＇GP与3＇GP、5＇GP与5＇TP以及3＇TP与YGP间的DNA将都被扩增，PCR则产生三条条带。三条不同长短的PCR产物条带在琼脂糖凝胶上清晰可分，易于辨别。和费时昂贵的定量PCR相比，该方法简单、快速、结果准确，在目标基因位点玉米基因组DNA序列已知的前提下，该方法可扩展到诸如Bt11、Event176、GA21、MON810、MON863和TC1507等任何转基因玉米的回交转育程序中。

    • 《分子植物育种》2009年第03期

    [研究论文]
    大豆MIKC型MADS—box基因家族分析(胡瑞波 范成明 李宏宇 林辰涛 傅永福)
    [研究报告]
    ^60Coγ射线辐射诱变提高长春花生物碱含量(赵剑 李建国)
    基于形态性状的青海蚕豆核心种质的初步构建(杨菁 迟德钊 刘玉皎 马晓岗)
    杉木亲本自交系及其杂交种DNA甲基化和表观遗传变异(洪舟 施季森 郑仁华 杨立伟 陈孝丑 翁玉榛 黄金华)
    转PPase基因对马铃薯无机焦磷酸酶活性和无机磷含量的影响(张春凤 张宁 王丽 姜寒玉 司怀军 王蒂)
    低钾胁迫下烟草根系差异表达基因的cDNA-AFLP分析(刘磊 郭兆奎 万秀清 颜培强 乔婵 刘丹)
    农杆菌介导蔗糖：蔗糖果糖基转移酶基因转化甘蔗(唐建平 蔡文伟 王俊刚 罗遵喜 张树珍 林海妹)
    大白菜紫色性状的SRAP连锁标记的筛选(郁有健 张耀伟 张德双)
    辣椒抗黄瓜花叶病毒（CMV）基因的ISSR标记(王述彬 吴小丽 刘金兵 潘宝贵)
    荔枝种质遗传多样性的SRAP分析(昝逢刚 吴转娣 曾淇 张惠云 李明芳 郑学勤)
    青海省马铃薯主要栽培品种的SSR遗传多样性(滕长才 张永成 张凤军)
    与黄瓜抗黑星病相关基因紧密连锁的SSR标记(王惠哲 李淑菊 管炜)
    马铃薯可溶性淀粉合成酶SSⅢ基因克隆及生物信息学分析(杨涛 张宁 栗亮 刘海英 司怀军 王蒂)
    甘薯肌醇-1-磷酸合酶基因的表达分析(翟红 刘庆昌)
    巴西橡胶树HbbHLH1启动子的克隆与序列分析(张全琪 朱家红 蔡元保 张治礼)
    贵州马铃薯Y病毒外壳蛋白基因的克隆与遗传分析(邱又彬 陶刚 李奇科 刘作易 郑世玲 朱英)
    转il-4基因番茄的分子检测及田间分析(及晓宇 于丽杰 汪春蕾 彭洪雨)
    杨树SRK2C基因的克隆及其遗传转化(毕毓芳 秦明艳 王婧婧 史晓露 诸葛强)
    甘蔗常用亲本及优良组合双亲间遗传相似性分析(劳方业 刘睿 何慧怡 邓海华 李奇伟 陈仲华 陈健文 符成 齐永文 张垂明)
    柑桔线虫抗性主基因座Tyr1的特异标记开发与遗传作图改进(向旭 邓占鳌 郑启发 陈存贤 Frederick G. Gmitter Jr.)
    小麦质核互作型雄性不育系线粒体DNA变异性的RAPD分析(李文强 张改生 牛娜 位芳 汪奎潘 栋梁)
    矮孟牛及其后代育成品种的多态性分析与指纹鉴定(肖静 王珊珊 李秀全 刘金良 田纪春)
    陕西省地方小麦品种多酚氧化酶基因等位变异检测及分布(邓彪 屈国胜 王茹 张晓科 孙道杰 杨松杰)
    利用DH群体定位白叶枯病抗性QTL(张剑霞 杨子贤 姜恭好 高冠军 何予卿)
    分子标记辅助培育双抗稻瘟病和白叶枯病杂交稻恢复系(陈建民 付志英 权宝权 田大刚 李刚 王锋)
    Rf-1位点CAPS标记对水稻不同胞质雄性不育育性恢复系的关系分析(谭亚玲 王石华 洪汝科 文建成 郭艾 寇淑燕 金寿林 谭学林)
    籼粳稻细胞质背景下Rf-1位点PCR标记的遗传分离(王石华 谭亚玲 谭学林 文建成 寇姝燕 金寿林 洪汝科)
    AtTPS03基因RNA干扰载体的构建及拟南芥转化(杜培粉 伍林涛 姚远颋 尹峰 阮颖 刘春林)
    农杆菌介导热激转录因子8基因转化大豆(唐晓飞 刘丽君 高明杰 杨喆 蒲国峰 张雷 魏崃)
    DREB1B基因在转基因小麦后代的稳定表达(荣红颖 张立全 杨凤萍 陈绪清 张晓东 郭新梅)

    科学家培育出含多种维生素的转基因玉米
    植物组织移植处细胞间发生遗传物质交换
    CIMMYT和IITA合作研究非洲耐旱性玉米
    德国批准露天试验种植转基因马铃薯
    表型组学／Phenomics
    [专题介绍]
    功能标记及在品种鉴定和辅助育种中的应用前景(宋伟 王风格 易红梅 李翔 赵久然)
    [新思路、新技术、新方法]
    目标起始密码子多态性（SCoT）：一种基于翻译起始位点的目的基因标记新技术(熊发前 唐荣华 陈忠良 潘玲华 庄伟建)
    落叶松多倍体体细胞胚的高效诱导途径(张清国 齐力旺 韩素英 梁国鲁)
    外源DNA导入冬瓜条件的优化及其运用(谢大森 何晓明 彭庆务 李华平)
    转基因玉米目标基因纯合体快速准确的PCR鉴定方法(刘楠 陈化榜)
    《分子植物育种》封面

    《分子植物育种》往刊汇总

    《分子植物育种》期刊简介

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