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文献检索:
  • 肿瘤分子靶向治疗临床应用值得注意的几个问题
  • 近年来,肿瘤分子靶向治疗临床应用方兴未艾。与传统的化疗细胞毒药物不同,肿瘤分子靶向药物不直接杀伤细胞,而是作用于肿瘤细胞过表达或突变、且与肿瘤恶性生物学行为密切相关的分子(靶点),从而抑制肿瘤的过度增殖、新生血管生成、浸润和转移。然而,这类药物是不是就没有任何毒副作用,而可以放心大胆、不加选择地应用呢?临床应用应该注意些什么呢?现就我们临床应用此类药物的粗浅体会,提出对上述问题的若干思考,供同道们讨论、指正。
  • 颗粒状脱细胞真皮基质的形态学特征及理化性能体外研究
  • 目的研究颗粒状脱细胞真皮基质(particulate acellular dermal matrix,PADM)的体外形态学特征与理化性能。方法收集SD大鼠背部皮肤样本,采用本实验室的脱细胞方法制备片状脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)并分析其内胞核和DNA残留情况。将片状ADM切割成不同规格的PADM,并结合大体观察、组织学分析、电镜技术、激光粒度分析仪和傅里叶变换红外光谱仪检测其外观轮廓、形态学、粒径分布和胶原分子结构。并将其复合人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)体外培养24 h,观察PADM与HUVEC的黏附情况。结果脱细胞方法有效降低了ADM的DNA含量[(1.51±0.37)μg/mgvs(0.30±0.09)μg/mg]。制备的PADM为白色颗粒,外形近似于长方体或立方体,显微镜下HE染色观察显示颗粒内部胶原纤维束结构疏松。扫描电镜显示颗粒断面结构疏松,透射电镜显示胶原原纤维周期性横纹结构和均匀分布的胶原原纤维间隙。激光粒度分析仪检测显示其粒度分布集中,例如,规格为0.2 mm的PADM,其80%(d0.1~d0.9)的粒径分布于233~487μm。FTIR结果显示,PADM分别在1 659、1 549、1 239 cm-1处出现的特征吸收峰,表明其保留了胶原分子的α-helix、β-sheet和β-turn二级结构,且体外HUVEC较易黏附于PADM。结论室温条件下,切割法制备的新型PADM形态规则,粒径分布集中,胶原纤维束形态和胶原分子的二级结构保存良好。
  • 兔间充质干细胞在Vanco-AB-FG三维支架中的增殖和分化
  • 目的观察兔间充质干细胞(mesenchymal stem cells derived from bone marrow,BMSCs)在带有万古霉素藻酸盐微球的纤维蛋白凝胶(vancomycin alginate beads embedded in fibrin gel,Vanco-AB-FG)中增殖和成骨分化情况。方法选取健康成年家兔,通过梯度离心结合贴壁培养法分离、纯化BMSCs。实验组:将兔BMSCs溶解于纤维蛋白原溶液中,以注射的方式均匀接种于Vanco-AB-FG内部构建组织工程骨;对照组:将BMSCs直接接种于Vanco-AB-FG复合物表面。测定生长曲线比较两组细胞增殖能力;通过碱性磷酸酶和茜素红染色观察两组BMSCs成骨分化的情况。结果生长曲线结果显示,早期(前7 d)处于三维生长模式的实验组细胞的增殖速度慢于处于二维生长环境的对照组,在5 d和7 d时二者差异有统计学意义(P〈0.05);然而,后期(9 d后)二者之间差异无统计学意义(P〉0.05)。碱性磷酸酶检测显示实验组细胞的碱性磷酸酶活性在12 d达到峰值,为5.98 pg/(min.mg.cell),明显高于对照组(P〈0.05)。茜素红染色显示实验组Vanco-AB-FG复合物的内部和表面均有明显的钙化结节。结论 BMSCs可以在Vanco-AB-FG复合物内增殖和成骨分化。
  • 脆骨-蓝色巩膜综合征一家系报告
  • 脆骨-蓝色巩膜综合征也叫Van Der Hoeve综合征,是一组常染色体显性遗传病。1917年Van Der Hoeve首次将蓝色巩膜、骨质脆弱易折、传导性耳聋三大症状联系起来,确立为一个独立的综合征,故此得名。其发病机制可能与Ⅰ型胶原基因突变导致先天性间质组织和结缔组织发育不良有关。该病发病率极低,Byers等统计其患病率为1/30 000~1/10 000。我院收治一女性患者,其家族4代7人患病,现报告如下。
  • iASPP在p53缺失肿瘤细胞中影响细胞凋亡的机制
  • 目的阐明iASPP在p53缺失细胞中影响细胞凋亡的机制。方法将iASPP、干扰iASPP、p63、p73、Bax-Luc和Puma-Luc等转染进H1299细胞中,观察各种情况下对前凋亡基因转录能力的影响;用体外转录/翻译偶联系统、免疫沉淀和Western blot方法研究iASPP与p63和p73在体外的相互作用;用细胞转染、免疫沉淀和Western blot方法研究iASPP与p63和p73在细胞内的相互作用。结果①H1299细胞转入iASPP后前凋亡基因Bax和Puma的转录能力下降,分别只有对照组的0.14倍和0.13倍;②H1299细胞转入iASPP干扰质粒后前凋亡基因Bax和Puma的转录能力增强,分别为对照组的3.58倍和4.14倍;③p63和p73转染H1299细胞后,前凋亡基因Bax和Puma启动子的转录能力增强,分别增加4.67倍和3.03倍(转染p63后)和5.90倍和3.36倍(转染p73后);④iASPP与p63、p73在体外和细胞内存在着相互作用;⑤干扰iASPP后p63和p73的蛋白表达水平不变。结论在p53缺失的H1299细胞中,iASPP是通过抑制p63/p73的转录因子的功能,从而影响前凋亡基因Bax、Puma等的转录活力,进而导致细胞凋亡变化的。
  • 5-氟尿嘧啶筛选残存结肠癌细胞的生物学特点及其与CD133表达的关系
  • 目的研究5-氟尿嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)筛选残存结肠癌细胞(drug surviving cells,DSCs)是否具有癌症干细胞(cancer stem cells,CSCs)属性及其增殖过程中免疫表型的改变。方法应用5-FU对体外培养的结肠癌细胞株SW480进行处理,收集残存DSCs,检测其细胞周期、克隆形成率、CD133阳性率及在SCID小鼠体内的致瘤率;在无血清培养基(serum-free medium,SFM)中培养DSCs,观察干细胞球的形成及CD133表达改变;机械分离干细胞球所得第2代DSCs在含血清培养基(serum-supplied medium,SSM)中培养,利用免疫荧光及AB/PAS特染技术检测癌细胞CD133、Oct4、VEGF、CD34、CK8/18的表达改变及黏液分泌情况。结果 5-FU作用72 h后继续SSM中培养1周,SW480细胞大量死亡,少量残存的DSCs以G0~G1期细胞为主,克隆形成率及SCID小鼠体内致瘤率明显高于未经处理的SW480细胞(P〈0.05);DSCs中CD133+细胞数明显高于未经处理组(P〈0.05),VEGF+细胞数明显减少(P〈0.05);DSCs在SFM中经过3周连续培养能够形成干细胞球,细胞球内高表达CD133,VEGF表达也轻度增高(P〈0.05)。第2代DSCs在SSM内生长时CD133、Oct4表达逐渐降低,而VEGF、CD34、CK8/18表达逐渐增高,并开始分泌黏液。结论 5-FU处理能富集CD133+结肠癌细胞,富集的残存癌细胞具有癌症干细胞属性,其在SSM内增殖过程中逐渐出现了免疫表型改变。
  • 不同剂量硫芥对雄性小鼠生殖细胞的毒性作用
  • 硫芥(sulfur mustard,SM),又名芥子气,是重要的化学战剂,也可用于某些过度增生性疾病的治疗。硫芥中毒可造成全身多器官的损伤,生殖系统对硫芥较为敏感,但关于硫芥生殖毒性的研究较少。本实验以不同剂量的硫芥染毒实验动物,观察实验动物的精子形态,以检测硫芥对受试动物雄性生殖细胞的遗传毒性,为进一步阐明硫芥的遗传毒理学机制提供实验依据。
  • 人原代表皮干细胞及其传代细胞生物学特性的比较
  • 目的比较体外培养条件下人原代表皮干细胞与传代细胞的生物学差异。方法选择2009年5-12月在我科医学美容门诊行包皮环切术后的包皮标本共20例,从包皮标本获得人原代表皮干细胞,利用0.25%胰蛋白酶冷消化4 h获得传代细胞,利用CASY系统计数后计算细胞的黏附率,倒置相差显微镜下观察原代干细胞及传代细胞的形态学变化,观察干细胞表面标志物整合素β1、CK19,细胞分化的表面标志物CK10的表达,以及各代细胞基因组的表达差异。结果原代干细胞的黏附率为(55.44±2.42)%,随着传代次数的增加,2代、4代及6代细胞的黏附率分别为(44.30±2.76)%、(30.95±2.24)%、(20.64±1.37)%,与原代细胞相比,差异有统计学意义(P〈0.05)。细胞生长融合时间随着传代次数而增加。各代细胞均表达整合素β1;原代、2代及4代细胞表达CK19,但6代细胞不表达CK19;部分6代细胞表达CK10。原代及4代细胞基因组比较结果相近,但与6代细胞结果差异较大。结论与原代干细胞相比,体外培养的人表皮干细胞在4代以后生物学特性发生改变,体外实验宜选用4代以前的细胞。
  • 携带siANGPTL4重组腺病毒的构建及其对MG63增殖的抑制作用
  • 目的应用AdEasy腺病毒改良载体系统构建携带siANGPTL4基因的重组腺病毒,进一步研究ANGPTL4基因对骨肉瘤细胞株MG63增殖的影响。方法将设计的siRNA靶点寡聚核苷酸克隆到pSES-HUS载体构建重组质粒pSES-siANGPTL4,在B J5183大肠杆菌内与pAdEasy1骨架质粒完成同源重组;经脂质体介导转入HEK293细胞包装、扩增并经反复感染获得携带siANGPTL4基因的重组腺病毒Ad-siANGPTL4;有限稀释法检测病毒滴度;根据加入的重组腺病毒携带的基因不同将实验细胞分为阴性对照组、RFP组(加入Ad-RFP)、ANGPTL4组(加入Ad-ANGPTL4)及siANGPTL4组(加入Ad-siANGPTL4),利用腺病毒感染人骨肉瘤细胞株MG63,RT-PCR法检测细胞内ANGPTL4基因相对表达强度。结晶紫染色及细胞计数观察ANGPTL4基因对MG63细胞增殖的影响。结果成功构建携带siANGPTL4基因的重组腺病毒Ad-siANGPTL4,病毒滴度达1.2×1011~2.6×1011efu/m l;阴性对照组、RFP组、ANGPTL4组及siANGPTL4组细胞ANGPTL4基因表达的相对强度分别为(104.87±5.21)、(110.95±4.15)、(145.24±7.26)、(72.81±3.61);siANGPTL4组相对表达强度显著降低(P〈0.05)。结晶紫染色及细胞计数显示,ANGPTL4基因过度表达可促进MG63细胞增殖;该基因抑制后MG63细胞增殖明显减缓(P〈0.05)。结论成功构建了Ad-siANGPTL4重组腺病毒并感染MG63使其内源性表达的ANGPTL4基因沉默;该基因的表达沉默抑制MG63细胞体外增殖。
  • 上调基因-4在结肠癌中的表达及临床意义
  • 目的探讨上调基因-4(up-regulated gene-4,URG-4)在结肠癌及其癌旁组织中的表达及临床意义。方法收集2010年1-6月本院手术切除的82例结肠癌、癌旁组织样本及石蜡切片标本,用RT-PCR、免疫组化检测URG-4基因的转录和表达情况,分析其与临床病理参数的关系。结果结肠癌组织中的URG-4 mRNA阳性率为85.37%(70/82),显著高于癌旁组织中的36.59%(30/82)(P〈0.01)。URG-4蛋白在结肠癌中的表达率为70.73%(58/82),癌旁组织为24.39%(20/82),两组比较差异非常显著(P〈0.01);肿瘤组织中URG-4的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的分化程度、有无远处转移无明显相关性(P〉0.05),而与浸润深度及淋巴结转移显著相关(P〈0.01)。结论与癌旁组织相比URG-4在结肠癌中高表达,并且URG-4表达强度与肿瘤浸润深度和淋巴结转移呈正相关,提示其可能在结肠癌的发生、发展中起重要作用。
  • hVEGF_(121)基因真核表达载体的构建及其在神经干细胞中的表达
  • 目的构建真核表达载体pEGFP-N1/hVEGF121,并转染神经干细胞(neural stem cells,NSCs),以探究人血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,hVEGF121)基因导入NSCs的表达变化。方法分离培养胎鼠NSCs,并行nestin、GFAP免疫染色鉴定。采用PCR法,以hVEGF121质粒为模板,扩增hVEGF121全长编码序列,克隆入载体pMD18-T,随后又将其亚克隆入pEGFP-N1载体中,构建其真核表达载体pEGFP-N1/hVEGF121,并以Fugene 6介导转染,将hVEGF121导入NSCs。倒置显微镜检测转染后的NSCs生长变化及hVEGF121在其中的表达等情况。图像分析技术计算转染效率。RT-PCR法对hVEGF121转染的NSCs进行鉴定。结果成功分离培养到NSCs,并予以鉴定。构建了hVEGF121的真核表达载体pEGFP-N1/hVEGF121,成功地将hVEGF121转染NSCs,其转染效率约50%。被转NSCs生长良好。转染hVEGF121基因的NSCs被诱导分化后,神经球的轴突和轴丘表达神经元标志物NF-200。结论成功地将hVEGF121克隆到pEGFP-N1载体中,并实现了hVEGF121基因在NSCs的表达。
  • 氨基酸聚合物/硫酸钙生物工程骨的生物相容性研究
  • 目的评价氨基酸聚合物[poly(amino acid),PAA]/硫酸钙(calcium sulfate,CaSO4)生物工程骨的生物相容性。方法制备PAA/CaSO4。通过急性毒性实验、溶血实验、微核实验、热原实验、皮内刺激实验、细胞毒性实验研究该复合材料的生物相容性。结果急性毒性实验中各组小鼠活动正常,7 d内小鼠无死亡,各组动物未见中毒症状或不良反应,7 d后各组小鼠体质量日平均增加差异无统计学意义(P〉0.05)。材料浸提液的溶血率为2.01%,符合〈5%的国家标准。微核实验中3个实验组与阴性对照组微核率无明显差异(各组的微核率均介于0.4~0.6之间),材料无潜在致突变性。热原实验中3只动物中体温升高最高为0.4℃,体温升高的总数为1.1℃,符合热源实验国家标准。皮内刺激实验观察显示,注射材料生理盐水浸提液和生理盐水处无明显红斑、水肿和皮肤坏死,PII为0.01~0.02,属极轻微刺激。细胞毒性实验中A、B、C组的BMSC的相对增殖率均〉90%,细胞毒性为0~1级,材料无细胞毒性。结论 PAA/CaSO4具有良好的生物相容性。
  • 达芬奇机器人系统全胃切除术的围手术期护理
  • 胃癌是常见消化道恶性肿瘤之一,其死亡率达23.86/10万。腹腔镜胃癌根治手术逐步在临床广泛开展。近年来,达芬奇机器人手术系统开始投入临床使用,使困扰腹腔镜胃癌手术的诸多问题得到改善。我中心于2010年3月成功完成了国内第1例机器人根治性全胃切除术,效果良好,现将围手术期护理情况报告如下。
  • 蛋白酶体抑制剂MG-132对心肌梗死后心衰大鼠心功能及心肌肌钙蛋白Ⅰ的影响
  • 目的探讨泛素蛋白酶体系统对心肌梗死后心衰大鼠心功能及心肌肌钙蛋白Ⅰ的影响。方法将制作成功的心肌梗死后心衰大鼠模型纳入研究,45只大鼠随机分为:①MG-132组:结扎左冠状动脉前降支,腹腔内注射MG-1320.1 mg/(kg.d)(溶于2 ml生理盐水);②心肌梗死(MI)组:结扎左冠状动脉前降支,腹腔内注射2 ml/d生理盐水;③假手术(Sham)组:手术过程同心肌梗死组,但只穿线通过左冠状动脉前降支不打结,腹腔内注射2 ml/d生理盐水。所有腹腔内注射持续7周后,检测各组大鼠心脏血流动力学及血清脑钠肽水平,电镜检测心肌肌小节结构变化,Real-time PCR及Western blot方法检测心肌cTnI的mRNA水平和蛋白质表达。结果与MI组相比,MG-132组大鼠心衰所致死亡率有降低趋势(0vs20%),LVPS及+dp/dtmax升高(分别为[85.69±14.65)vs(71.22±7.89)mmHg,P〈0.05;(2 327.57±597.96)vs(1 047.20±168.65)mmHg/s,P〈0.01],LVEDP下降[(16.85±2.05)vs(23.40±6.08)mmHg,P〈0.01],NT-proBNP水平降低[(1 474.15±702.61)vs(3 920.56±1 919.04)pg/ml,P〈0.001];MG-132还改善了肌小节结构,上调cTnI的mRNA及蛋白质表达[分别为(2.4±1.1)vs(0.6±0.2),P〈0.01;(0.83±0.07)vs(0.63±0.10),P〈0.05]。结论 MG-132改善了肌小节结构,与上调cTnI的mRNA及蛋白质表达有关。
  • 氨甲酰化促红细胞生成素对慢性心力衰竭大鼠心脏的保护作用
  • 目的观察氨甲酰化促红细胞生成素(carbamylated erythropoietin,CEPO)对慢性心力衰竭(chronic heartfailure,CHF)大鼠的心脏保护作用并探讨其可能的作用机制。方法 90只Wistar大鼠采用随机抽签法选取10只作为对照组,剩余腹腔注射异丙肾上腺素(isoproterenol,ISO)建立大鼠CHF模型,喂养5周后,将造模成功的大鼠按随机数字表法再分为CEPO组及CHF组,CEPO组腹腔注射CEPO50μg/kg,2次/周,持续4周,CHF组及对照组同期腹腔注射等量生理盐水,4周后检测各组大鼠血流动力学指标、血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis-alpha,TNF-α)、白介素-6(interlerkin-6,IL-6)水平以及心肌细胞凋亡率的变化。结果与对照组比较,CHF组左室收缩压(LVSP)及左室内压上升/下降最大速率(±dp/dtmax)均显著降低(P〈0.05),而左室舒张末压(LVEDP)则显著升高(P〈0.05),心率(HR)也显著加快(P〈0.05);与CHF组比较,CEPO组LVSP及±dp/dtmax均显著升高(P〈0.05),而LVEDP则显著降低(P〈0.05),HR也显著减慢(P〈0.05)。与对照组比较,CHF组血清TNF-α、IL-6水平及心肌细胞凋亡率均显著升高[TNF-α:(4.01±0.20)vs(8.09±0.09)pg/ml,IL-6:(20.93±1.20)vs(30.26±0.94)pg/ml,心肌细胞凋亡率:(3.80±0.57)%vs(22.35±0.60)%,P〈0.05];与CHF组比较,CEPO组血清TNF-α、IL-6水平及心肌细胞凋亡率均显著降低[TNF-α:(8.09±0.09)vs(6.40±0.14)pg/ml,IL-6:(30.26±0.94)vs(25.66±0.74)pg/ml,心肌细胞凋亡率:(22.35±0.60)%vs(13.67±0.36)%,P〈0.05]。结论 CEPO可显著改善CHF大鼠的心功能,该作用可能与减轻局部炎症反应及抑制心肌细胞凋亡有关。
  • bcr-abl多肽诱导健康人外周血αβ~+T细胞克隆性增殖
  • 目的分析bcr-abl多肽诱导健康人外周血T细胞TCR Vα和TCR Vβ基因选用和克隆性增殖情况,了解bcr-abl多肽相关的αβ+T细胞克隆。方法利用T细胞液体培养法,应用bcr-abl多肽(KQSSKALQR)联合IL-2+抗CD3单抗+抗CD28单抗体外诱导T细胞(HLA-A0201限制性)扩增,同时设不含多肽诱导为对照组。收集诱导后第10、18天的细胞,RT-PCR-基因扫描分析其TCR Vα和Vβ基因谱系变化特点。结果①诱导前健康成年供者的PBMCs可检测到20个TCR Vα亚家族(其中Vα6、Vα14、Vα16亚家族呈寡克隆性)和22个TCR Vβ亚家族(其中Vβ21亚家族呈寡克隆性);②与诱导前相比,TCR Vα亚家族数目无明显变化,诱导第10、18天对照组中TCR Vα亚家族均表达21个亚家族,实验组中分别检测到22、18个TCR Vα亚家族;而TCR Vβ亚家族在诱导后则明显减少,诱导第10、18天对照组中分别检测到15、12个TCR Vβ亚家族,实验组中分别检测到13、11个TCR Vβ亚家族;③bcr-abl多肽诱导后,TCR Vα11呈克隆性增殖趋势,Vβ22和Vβ24亚家族T细胞由多克隆性演变为寡克隆性增殖趋势。结论获得bcr-abl多肽诱导的特定正常αβ+T细胞(HLA-A0201限制性)克隆性增殖,这些选择性增殖的T细胞可能是具有针对bcr-abl抗原特异的T细胞。
  • 茶多酚与葡萄柚提取物联合应用对变异链球菌生长、产酸的影响
  • 目的探讨茶多酚与葡萄柚提取物联合应用对变异链球菌生长、产酸的影响。方法采用棋盘稀释法测定茶多酚葡萄柚提取物混合液对变异链球菌的最低抑菌浓度(MIC)值,计算分级抑制浓度(FIC)指数来判定二者的联合效应;并测定低于MIC浓度的茶多酚葡萄柚提取物混合液对变异链球菌产酸的影响。结果茶多酚和GSE单独用药时,其MIC分别为2 mg/ml和46.88 mg/L,联用时可降低单组分的使用浓度,如茶多酚1 mg/ml联用GSE 37.5 mg/L即可达到联合应用的M IC,FIC=0.75。变异链球菌培养前后的△pH值随混合液浓度的降低而明显增加。结论茶多酚与葡萄柚提取物联合应用对变异链球菌的体外抗菌活性具有相加作用,较各自的单组分用药在更低浓度即可有效抑制变异链球菌的生长、产酸。
  • 厄多司坦预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤及心肌细胞凋亡的影响
  • 目的探讨厄多司坦预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)的保护作用及对心肌细胞凋亡的影响。方法雄性SD大鼠30只,完全随机设计法分成伪手术组、缺血再灌注组及厄多司坦预处理组,每组10只。采用结扎左冠状动脉前降支30 min、再灌注120 min的方法建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。再灌注末,测定血清丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性;心肌MDA含量,SOD、CAT、GSH-Px的活性;TUNEL染色检测心肌细胞凋亡。结果厄多司坦预处理减少再灌注末血清及心肌MDA含量(P〈0.05),降低血清CK、LDH活性(P〈0.05,P〈0.01),提高血清及心肌SOD、CAT及GSH-Px活性(P〈0.05,P〈0.01),降低心肌细胞凋亡率(P〈0.05)。结论厄多司坦预处理可减轻在体心脏缺血再灌注模型大鼠的氧化应激损伤,并可减轻氧自由基诱导的心肌细胞凋亡。
  • 颅内双源性原发性肿瘤1例
  • 颅内原发性肿瘤很多,临床常见颅内单发肿瘤;颅内多发肿瘤比较少见。颅内多发肿瘤有同源性和异源性两种。同源性多发肿瘤即一种质地的多个瘤体组织;异源性多发肿瘤指发生两种或两种以上质地的多个瘤体组织,异源性多发性颅内肿瘤实为少见。我科2008年10月收治1例颅内双源性原发性肿瘤患者,现报告如下。
  • 吡格列酮对高脂饮食SD大鼠心功能的影响
  • 目的探讨高脂饮食对SD大鼠心脏功能的影响以及吡格列酮干预的效果。方法 36只8周龄雄性SD大鼠随机分为3组:正常饲料组(NC组,12只),高脂饲料组(HF组,12只)及吡格列酮干预组(HP组,12只)。饲养28周后:①检测血游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)及心肌组织TG含量;②计算左心室质量指数;③正常血糖高胰岛素钳夹试验;④观察大鼠高频超声心动图;⑤采用多导生理记录仪活体检测大鼠左心室最大收缩速率(+dp/dtm ax)和左心室最大舒张速率(-dp/dtm ax)。结果①HF组大鼠血FFA、TG及心肌TG含量明显增高(P〈0.01),吡格列酮干预后,以上指标明显改善(P〈0.01);②HF组和HP组左心室质量指数明显增高(P〈0.01);③HF组G IR较NC组显著降低(P〈0.01),HP组G IR明显改善(P〈0.01);④HF和HP组左心室后壁收缩末期厚度(Ts)、左心室后壁舒张末期厚度(Td)均明显增加(P〈0.01);HF组射血分数(EF)、短轴缩短率(FS)和心指数(C I)降低(P〈0.01),吡格列酮干预后EF、FS和C I升高(P〈0.01);3组室壁收缩增厚率(△T%)、心率(HR)差别无统计学意义(P〉0.05);⑤HF组心脏+dp/dtm ax和-dp/dtm ax均明显下降(P〈0.01);吡格列酮干预后+dp/dtm ax和-dp/dtm ax均较HF组改善(P〈0.01)。结论高脂饲养可导致大鼠心脏功能受损,吡格列酮干预后可以明显改善大鼠心脏功能,其机制与改善外周胰岛素抵抗有关。
  • MRI平扫结合扩散加权成像对大鼠乳腺良恶性病变的诊断
  • 目的研究磁共振成像(magnetic resonance imaging,MRI)平扫结合扩散加权成像(diffusion weighted imaging,DWI)在大鼠诱发性乳腺良恶性病变中的诊断价值。方法 Wistar雌性大鼠50只,7,12-二甲基苯蒽(DMBA)灌胃诱发大鼠乳腺肿块,MRI常规T1WI、T2WI和压脂序列扫描,以及DWI成像,测量乳腺肿块的T1WI信号强度(SIT1)、T2WI信号强度(SIT2)和最大横截面积(Amax),DWI图像后处理得到乳腺肿块的表观扩散系数(apparent diffusion coefficient,ADC)和指数化表观扩散系数(exponential apparent diffusion coefficient,eADC)。取感兴趣区组织行HE染色,观察乳腺肿块的病理表现,将其分为乳腺良性增生和乳腺癌2组。采用判别分析法,得出MRI各参数值联合应用的线性判别公式。应用受试者工作特性(ROC)曲线确定各指标鉴别乳腺良恶性病变的最佳切点值。结果 43只大鼠诱发出乳腺肿块,其中乳腺良性增生18只,乳腺癌25只。除SIT1外(P〉0.05),乳腺良性病变与乳腺癌的SIT2、Amax、DWI ADC值和eADC值均有显著性差异(P〈0.01)。MR平扫结合DWI成像对乳腺良恶性病变诊断的线性判别得分值(Score)=-0.007×SIT1+0.008×SIT2+0.302×Amax-2.042×ADC-1.639。Score值的ROC曲线下面积为0.951,大于任一单个参数的ROC曲线下面积,其联合诊断作用大于单个参数的诊断作用。结论大鼠诱发性乳腺肿瘤是MR成像研究的适合模型,MRI平扫结合DWI成像有助于提高对乳腺良恶性病变的诊断价值。
  • X射线照射致皮质发育障碍模型大鼠致癫性的研究
  • 目的建立X射线照射诱导皮质发育障碍模型,运用快速杏仁核点燃等方法探讨其癫痫易感性等相关特性及测试癫痫易感性的方法。方法 6只SD孕鼠按需要完全随机分为实验组和正常对照组。实验组:在孕16 d采用直线加速器进行X射线照射制作皮质发育障碍模型;正常对照组:不做任何处理。选取P60 d仔鼠,观察一般行为学和大脑外形,HE、N issl染色观察大脑的病理变化;运用水迷宫法测试大鼠学习能力和空间记忆能力;并通过快速杏仁核点燃方法比较两组大鼠发生惊厥所需的刺激次数、后放电阈值。结果与正常对照组比较,实验组大鼠活动性增多,但无自发性癫痫形成;大脑形态发生改变,体积变小,可见明显畸形;HE、N issl染色显示皮层神经元排列紊乱,海马结构紊乱并有异常聚集;在水迷宫实验中,皮质发育障碍组大鼠寻找平台的潜伏期明显长于正常对照组(P〈0.05);皮质发育障碍组大鼠的空间探索能力明显低于正常对照组大鼠(P〈0.05);快速杏仁核点燃发生所需的刺激次数明显减少[(65.57±10.22)vs(38.57±7.44)次,P〈0.01],后放电阈值显著降低[(151.43±51.45)μAvs(74.29±22.25)μA,P〈0.05]。结论 X射线照射致皮质发育障碍模型具有癫痫易感性及认知功能障碍,是一种较为理想的皮质发育障碍模型。快速杏仁核点燃是一种较好的测试癫痫易感性的方法。
  • 复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂对人牙周膜细胞增殖的影响
  • 目的观察不同浓度复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLC)生长及ki-67表达的影响。方法组织块法培养原代HPDLC,MTT法检测HPDLC在复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂的不同浓度(0、1.25、2.5、5、10、20 g/L)下的光密度值,检测细胞的相对增殖率;采用流式细胞仪检测细胞周期;免疫荧光法检测ki-67的阳性表达率。结果在1.25、2.5 g/L的浓度下对HPDLC的生长和ki-67的表达与对照组比较差异均无统计学意义(P〉0.05);而5、10 g/L浓度组的光密度值有所增大,细胞增殖指数提高,ki-67的阳性表达率也有所增加,与对照组比较差异有统计学意义(P〈0.05);高浓度药物20 g/L对HPDLC的生长有一定的抑制作用。结论 5、10 g/L的复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂对体外培养的HPDLC的生长增殖有一定促进作用。
  • 咪唑安定微乳滴鼻液的制备及质量控制
  • 目的研究水包油(O/W)型咪唑安定微乳滴鼻液的制备工艺和质量检测方法。方法考察咪唑安定在不同油、表面活性剂、助表面活性剂中的平衡溶解度,选择平衡溶解度较大的试剂通过滴定法制备伪三元相图,根据相图优选处方,采用HPLC法测定咪唑安定在微乳中的含量。结果咪唑安定微乳的优选处方为油酸乙酯:吐温80:聚乙二醇-400:水体系,表面活性剂与助表面活性剂的比为Km=2∶1,粒径为(37.93±8.34)nm。咪唑安定在10~90μg/m l范围内线性关系良好(r=0.999 9),低、中、高3个浓度的回收率(n=3)分别为99.39%、99.46%和99.36%,RSD分别为0.57%、0.67%和0.85%。结论该处方制备的咪唑安定微乳粒径小,稳定性好,制备工艺简便,质量控制方法准确可靠。
  • 我刊2009年度被引频次和影响因子稳步上升
  • 据中国科学技术信息研究所《2010年版中国科技期刊引证报告(核心版)》的数据,《第三军医大学学报》总被引频次为2859次(2009年版2447次),影响因子为0.505(2009年版0.428),他引率为0.86,基金论文比为0.48。综合评价在全国医科大学学报类50种期刊中列第2位,在全国1946种期刊中列第190位。
  • 外科治疗主动脉瓣下狭窄的疗效分析
  • 目的探讨手术治疗主动脉瓣下狭窄的临床疗效。方法 1996年12月至2009年10月在我中心接受手术治疗的58例主动脉瓣下狭窄的患者,其中男性35例,女性23例;年龄1~49(15.9±5.7)岁。局限型主动脉瓣下狭窄56例(纤维隔膜型33例、纤维肌隔型21例),隧道型主动脉瓣下狭窄2例。局限型行狭窄隔膜切除术56例,加左室肌肉切除术12例;隧道型行左室流出道疏通术2例。合并畸形56例,同期行矫正手术。结果围手术期死亡3例(5.17%)。术后45例左室主动脉收缩压力差3.5~28.2(6.9±4.8)mmHg。术后1、3、5、8年各随访54、48、31、22例。症状均消失,无再狭窄需手术者。结论术前超声心动图检查及术中常规主动脉根部探查,对防止有合并畸形时主动脉瓣下狭窄的漏诊尤为重要;手术关键是彻底疏通左室流出道,术中防止二尖瓣、主动脉瓣及传导束损伤。
  • 氯苯那敏治疗上气道咳嗽综合征与其对慢性鼻炎/鼻窦炎的治疗作用的相关性研究
  • 目的探讨第1代抗组胺药氯苯那敏治疗上气道咳嗽综合征是否与其对慢性鼻炎/鼻窦炎的治疗作用相关。方法选择2009年5月至2010年6月在我院呼吸内科门诊就诊诊断为上气道咳嗽综合征患者,应用第1代抗组胺药氯苯那敏(4 mg/次,2~3次/d)治疗(10±3)d后,采用门诊或电话随访,以咳嗽好转1/2及以上为治疗有效,分析治疗有效率,有效组与无效组两组患者间合并患有鼻炎/鼻窦炎患者的比例,有效组存在鼻后滴流症状的患者与治疗无效组的患者的比例。结果共41例患者入选本试验,37例完成随访研究,治疗有效率为51.4%(19/37)。虽然治疗有效的患者伴随症状(包括清喉感,咽部不适、发痒、异物感,胸闷、气短等)改善情况明显优于治疗无效组,但差于相应的咳嗽好转情况。咳嗽完全好转的7例患者中,伴随症状完全消失的仅占57.1%(4/7),在好转2/3,好转1/2及治疗无效组伴随症状均未完全消失。治疗有效组与无效组两组患者间合并患有鼻炎/鼻窦炎患者的比例无统计学差异(P〉0.05),治疗有效组存在鼻后滴流症状的患者与治疗无效组的患者的比例也无统计学差异(P〉0.05)。治疗有效组的患者嗜睡"很明显"的情况(10.5%,2/19)多于治疗无效组(0%),而嗜睡"明显"的情况(10.5%,2/19)少于治疗无效组(23.5%,4/18)。结论氯苯那敏治疗上气道咳嗽综合征与其对鼻炎/鼻窦炎的治疗作用可能无关,对慢性咽炎样咳嗽患者也可能有一定的疗效。
  • 当归红芪超滤物对急性心肌梗死大鼠的保护作用及对热休克蛋白70表达的影响
  • 目的探讨当归红芪超滤物对急性心肌梗死大鼠乳酸脱氢酶(actate dehydrogenase,LDH)、乳酸脱氢酶同工酶(lactate dehydrogenase,LDH1)和热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70 mRNA)表达的影响,阐明当归红芪超滤物对梗死心肌的保护作用。方法结扎左前降支建立大鼠心梗模型。将80只雄性Wistar大鼠随机分成5组,每组16只,分别为造模组(myocardial infarction,MI)、假手术组(sham-operation,SH)、低剂量组(low-dose drug,LD)、中剂量组(middle dose group,MD)、大剂量组(high-dose drug HD),各组动物分别于治疗后(36 h、14 d)断头处死,分别检测外周血LDH、LDH1和采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测大鼠心肌组织HSP70 mRNA的表达。结果与MI相比,显著降低了ST段抬高、LDH、LDH1水平(P〈0.05,P〈0.01)和增强了HSP70的表达(P〈0.05,P〈0.01)。结论当归红芪超滤物可通过抗氧化作用、降低LDH、LDH1、增加HSP70的表达发挥抗心肌缺血损伤,对大鼠心肌有明显的保护作用。
  • 雌激素动员小鼠外周血内皮祖细胞修复损伤血管内皮
  • 目的观察雌二醇(estradiol,E2)对小鼠外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)动员及损伤颈动脉内皮修复的效果。方法 C57/BL6小鼠15只,分为卵巢切除组(n=6),假手术组(n=4)及卵巢切除联合雌激素注射组(n=5)。卵巢切除组去势后给予雌激素治疗,随后建立小鼠颈动脉损伤模型,分别于1 d及3 d后流式细胞分析小鼠外周血EPC数量变化,伊文氏蓝染色评价7 d后颈动脉再内皮化面积。结果颈动脉损伤前各组外周血EPC数量:卵巢切除+雌激素组为(0.06±0.02)%、卵巢切除组为(0.03±0.01)%,未切除卵巢组为(0.06±0.02)%。颈动脉损伤后1、3 d,各组外周血EPC数量:卵巢切除+雌激素组为(0.42±0.14)%、(1.47±0.39)%,卵巢切除组为(0.13±0.02)%、(0.25±0.02)%,未切除卵巢组为(0.38±0.08)%、(0.71±0.17)%。颈动脉损伤7 d后卵巢切除组再内皮化面积较未切除卵巢组及卵巢切除+雌激素组减少[(28.3±13.5)%vs(69.5±14.1)%、(83.1±7.9)%;P〈0.01]。结论雌二醇可动员小鼠外周血EPC,修复损伤血管内皮。
  • 6例组织胞浆菌病骨髓细胞形态学观察及临床分析
  • 目的探讨分析组织胞浆菌病(histoplasmosis,HP)的临床特征及骨髓涂片检查形态学的特点。方法回顾性分析并结合文献探讨6例组织胞浆菌病患者的临床表现、骨髓形态学特征及诊疗情况。结果组织胞浆菌病的临床表现主要有发热,肝、脾肿大,全血细胞减少等,骨髓涂片Wright染色及糖原染色下均有典型的形态特征。4例经骨髓涂片确诊,2例经培养确诊。确诊后给予抗真菌药物治疗,4例治愈,1例未治,1例死亡。结论通过骨髓涂片病原学检查是本病确诊的依据。两性霉素B等是治疗的有效方法。
  • 两种腓肠神经营养血管皮瓣修复足踝部软组织缺损
  • 目的探讨两种腓肠神经营养血管皮瓣修复足踝部皮肤软组织缺损的临床应用价值。方法观察2003年1月至2009年6月收治的12例行腓肠神经营养血管皮瓣修复足踝部皮肤软组织缺损患者的疗效,包括男性9例,女性3例;平均年龄32.4岁(6~56岁)。结果采用健侧顺行腓肠神经营养血管交腿皮瓣修复软组织缺损3例,逆行腓肠神经营养岛状皮瓣9例。皮瓣均完全成活,质地柔软,色泽正常。健侧顺行腓肠神经营养血管交腿皮瓣患者术后耐受良好。结论逆行腓肠神经营养岛状皮瓣是修复足踝部皮肤软组织缺损安全有效的方法,健侧顺行腓肠神经营养血管交腿皮瓣可作为安全的替代术式。
  • 实时荧光定量PCR技术检测iASPP基因在肝癌组织中的表达及其临床意义
  • 目的建立iASPP基因的实时荧光定量检测方法,并观察原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中iASPP mRNA的表达情况,分析临床病理学因素在肝癌iASPP基因和扩增中的作用。方法对46例病理学证实的HCC患者,利用荧光定量RT-PCR检测肝癌组织及癌旁组织iASPP mRNA表达,比较不同临床病理学类型肝癌中该基因表达差异。结果 46例肝癌组织中有33例的iASPP表达水平高于癌旁组织,占71.4%,表达差异有统计学意义[癌组织(16.00±10.31),癌旁组织(0.63±0.19),P〈0.01);在不同肿瘤大小、病理分级中有统计学差异(P〈0.05)],在患者的性别、年龄、癌栓形成、淋巴结转移分组中差异无统计学意义(P〉0.05)。结论肝癌组织中存在iASPP基因的高表达;iASPP基因表达与肿瘤大小、病理分级有关。
  • 索利那新治疗膀胱过度活动症4周疗效分析
  • 国际尿控协会将膀胱过度活动症(overactive bladder,OAB)定义为无感染及明显病理改变前提下,出现尿急,伴或不伴有急迫性尿失禁,通常有尿频和夜尿。治疗首选M受体阻滞剂,新上市的M3受体阻滞剂索利那新为目前热门药物。但目前报道多以服用索利那新8周或12周为研究期限。最近国外有报道患者服用索利那新4周,OAB痊愈。本研究对20例服用索利那新4周的OAB患者进行了服药前后分析,了解短期服药对OAB治疗的效果。
  • 《第三军医大学学报》稿约
  • 《第三军医大学学报》为综合性医药卫生类学术刊物。本刊为半月刊,国内外公开发行,主要登载国内外广大医疗、教学、科研工作者在医药科研领域中所取得的新理论、新成果、新经验、新技术、新方法。主要栏目设有:专家述评、研究述评、专题报道、论著(军事医学、基础医学、临床医学、药学、预防医学、检验医学、生物医学工程等)、技术方法、研究快报、短篇论著、经验交流、疑难病例、个案与短篇、学术之窗、读者.作者.编者等。
  • [专家述评]
    肿瘤分子靶向治疗临床应用值得注意的几个问题(陈正堂 孙建国)
    [论著]
    颗粒状脱细胞真皮基质的形态学特征及理化性能体外研究(左海斌 彭代智 郑必祥 何升东 周新 刘敬)
    兔间充质干细胞在Vanco-AB-FG三维支架中的增殖和分化(边巴罗布 侯天勇 吴雪晖 许建中)
    [个案与短篇]
    脆骨-蓝色巩膜综合征一家系报告(罗虎[1] 曾凡[1] 刘颖[2] 王富华[2])
    [论著]
    iASPP在p53缺失肿瘤细胞中影响细胞凋亡的机制(高兴[1] 邱实[1] 蔡云[1] 顾寿智[2] 刘泽军[1])
    5-氟尿嘧啶筛选残存结肠癌细胞的生物学特点及其与CD133表达的关系(张军荣[1] 穆继英[2] 杨爱军[3] 尚立娜[3] 牛茜[3])
    [个案与短篇]
    不同剂量硫芥对雄性小鼠生殖细胞的毒性作用(李奇慧[1] 董兆君[2] 孙华斌[1] 王修德[1] 唐木涛[1])
    [论著]
    人原代表皮干细胞及其传代细胞生物学特性的比较(王元元 杨桂红 杨涛 唐书谦 伍津津)
    携带siANGPTL4重组腺病毒的构建及其对MG63增殖的抑制作用(洪思琦[1,2] 毕杨[2] 郭振华[2] 陈镜宇[2] 李映良[2])
    上调基因-4在结肠癌中的表达及临床意义(崔浩 张超 刘涛 王攀 徐建华)
    hVEGF_(121)基因真核表达载体的构建及其在神经干细胞中的表达(张猛 邓娟 李静 王延江 周华东)
    氨基酸聚合物/硫酸钙生物工程骨的生物相容性研究(苏保[1] 蒋电明[1] 严永刚[2] 赵增辉[1] 李军[1])
    [个案与短篇]
    达芬奇机器人系统全胃切除术的围手术期护理(饶芸 骆群 李雪玲 徐萍 赵欣)
    [论著]
    蛋白酶体抑制剂MG-132对心肌梗死后心衰大鼠心功能及心肌肌钙蛋白Ⅰ的影响(戴翠莲 姜黔峰 张赟)
    氨甲酰化促红细胞生成素对慢性心力衰竭大鼠心脏的保护作用(张丽[1] 崔丽君[1] 谈丽丽[1] 王锋[1] 王志禄[2] 李万玲[1] 贾军正[1] 郭文芬[1])
    bcr-abl多肽诱导健康人外周血αβ~+T细胞克隆性增殖(李闯[1,2] 杨力建[2] 陈少华[2] 李扬秋[2])
    茶多酚与葡萄柚提取物联合应用对变异链球菌生长、产酸的影响(黄晓晶 卢国英 刘建党 江山 雷丽珊)
    厄多司坦预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤及心肌细胞凋亡的影响(王洪波 汪斌 向小勇)
    [个案与短篇]
    颅内双源性原发性肿瘤1例(陈杰 戴勤弼 毛德强)
    [论著]
    吡格列酮对高脂饮食SD大鼠心功能的影响(田亚强[1,2] 苏旭东[2] 赵家军[1] 李光伟[3])
    MRI平扫结合扩散加权成像对大鼠乳腺良恶性病变的诊断(张松 邹利光 逄鑫 廖翠薇 梁开运)
    X射线照射致皮质发育障碍模型大鼠致癫性的研究(张建刚[1] 宋延波[2] 张毅[1] 黄敏[1] 冯占辉[1] 贺兴[1] 晏勇[1])
    复方奥硝唑-甲磺酸培氟沙星缓释制剂对人牙周膜细胞增殖的影响(刘宁 刘鲁川 董正谋 刘娜 安建平)
    咪唑安定微乳滴鼻液的制备及质量控制(田睿[1] 甘勇军[1] 徐颖[2])

    我刊2009年度被引频次和影响因子稳步上升
    [论著]
    外科治疗主动脉瓣下狭窄的疗效分析(王咏 肖颖彬 王学锋 陈林 刘梅)
    氯苯那敏治疗上气道咳嗽综合征与其对慢性鼻炎/鼻窦炎的治疗作用的相关性研究(马千里 张巧 黄赞胜 吴颖 万敏 王长征)
    [短篇论著]
    当归红芪超滤物对急性心肌梗死大鼠的保护作用及对热休克蛋白70表达的影响(李应东[1] 赵信科[2] 李子佳[2] 刘凯[1])
    雌激素动员小鼠外周血内皮祖细胞修复损伤血管内皮(赵晓辉[1] 尹扬光[1] 方玉强[2] 陈剑飞[1] 崔斌[1] 黄岚[1])
    6例组织胞浆菌病骨髓细胞形态学观察及临床分析(杨再林[1] 马文军[2] 张勇[1] 白海燕[1] 黄兴琴[1] 蒋玲琳[1] 杨丽莎[1] 陈洁平[1])
    两种腓肠神经营养血管皮瓣修复足踝部软组织缺损(梁志军)
    实时荧光定量PCR技术检测iASPP基因在肝癌组织中的表达及其临床意义(方赞熙 张忠英 黄如欣 游攀)
    [经验交流]
    索利那新治疗膀胱过度活动症4周疗效分析(陈燕 李金升 孟庆军 王瑞 乔保平 魏金星 文建国)

    《第三军医大学学报》稿约
    《第三军医大学学报》封面
      2010年
    • 01

    主管单位:第三军医大学

    主办单位:第三军医大学

    主  编:王登高

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