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文献检索:
  • 过表达HMGB1蛋白的K562稳定细胞株的建立
  • 本研究目的建立过表达HMGB1蛋白的K562稳定细胞株(K562-HMGB1)及不表达该蛋白的对照细胞株(K562-pcDNA3.1),为研究hm gb1基因在白血病发生及进展中的作用与机制建立基础。从U937白血病细胞提取总RNA,逆转录合成cDNA。以cDNA为模板应用PCR技术扩增hm gb1编码基因,将其连接入PMD18-T vector(PMD18-T-HM BG1vector),并转化至大肠杆菌DH5a中。对氨苄青霉素筛选的阳性克隆进行扩增、质粒抽提,应用限制性内切酶KpnI/XhoI酶切鉴定,最终应用DNA测序得到序列正确的阳性克隆;然后将PMD18-T-HM BG1vector克隆中的hm gb1基因应用限制性内切酶KpnI/XhoI切出,并连接入真核表达载体pcDNA3.1(+),得到重组质粒pcDNA3.1-HM BG1。将pcDNA3.1-HM BG1、pcDNA3.1质粒分别电转染至K562细胞,电转染后48小时后加入终浓度800μg/m l的G418进行药物加压筛选,2周后得到有效转染pcDNA3.1-HM BG1及pcDNA3.1载体的K562细胞株(K562-HM BG1,K562-pcDNA3.1)。通过RT-PCR和W estern b lot技术分别在转录及蛋白表达水平检测K562稳定细胞株中HMGB1蛋白过表达情况,验证建立的K562稳定株的功能。结果表明,成功构建pcDNA3.1-HM BG1表达载体,并转染至K562细胞中,建立了过表达HMGB1蛋白的K562稳定细胞株(K562-HM BG1)。在转录及蛋白水平上验证了该稳定细胞株过表达HMGB1蛋白。结论:已成功建立了过表达HMGB1蛋白的K562稳定细胞株及对照细胞株即K562-HM BG1细胞及K562-pcDNA3.1细胞,为研究hm gb1基因在白血病发生及进展中的作用及机制建立了基础。
  • 397例急性白血病细胞遗传学与FAB分型相关性研究
  • 本研究探讨急性白血病的细胞遗传学改变,了解染色体核型异常与急性白血病FAB分型的关系及其对预后因素的影响。397例急性白血病患者于治疗前抽取骨髓标本,采用短期细胞培养法制备染色体标本,应用G显带技术进行染色体核型分析。结果显示,397例急性白血病中78例无分裂相,319例可供染色体核型分析的患者中染色体核型异常175例(占54.9%)。在急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性髓系白血病(AML)和急性混合细胞白血病(AMLL)3种类型的白血病患者中,染色体核型异常分别为33/120例(占27.5%)、129/252例(占51.2%)和13/25例(占52.0%)。超二倍体41例(占23.4%),亚二倍体22例(占12.5%),正常二倍体112例(占64.0%)。AML染色体核型异常中与FAB分型相关的特异性染色体重排74/129例(占57.4%)。结论:大约55%左右的急性白血病存在克隆性染色体异常,一些特异性染色体异常改变是急性白血病的细胞遗传学特征,与急性白血病的FAB分型有明显相关性,染色体检查和分子遗传学方法相结合,对于白血病的诊断、分型、治疗和预后都具有重要意义。
  • 白血病K562、K562/A02细胞中mthfr、dpyd基因单核苷酸多态性的检测
  • 本研究旨在检测白血病细胞株及其耐药株中两种药物代谢相关基因的单核苷酸多态性。培养白血病细胞株K562及其耐药株K562/A02,采用QIAamp DNA Blood Minikit试剂盒提取基因组DNA,设计引物,应用PCR技术扩增相应目的片段;采用基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术检测mthfr基因rs1801131、rs1801133、rs2274976及dpyd基因rs1801159、rs1801160、rs17376848的单核苷酸多态性。结果表明,在K562和K562/A02两种细胞中,mthfr基因rs1801131基因型均为CA、rs1801133均为CC、rs2274976均为GG;dpyd基因rs1801159基因型均为GG、rs1801160均为GG、rs17376848均为AA。结论:mthfr、dpyd基因上述位点在K562和K562/A02两种细胞中基因表达无差别。
  • EPOR在急性白血病细胞的表达及其临床意义
  • 本研究旨在探讨红细胞生成素受体(EPOR)在急性白血病(AL)细胞上的表达及其临床意义。收集我院门诊及住院40例急性白血病患者骨髓,并选择24例骨髓正常患者的骨髓作为对照。应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测白血病细胞EPOR mRNA的表达。结果显示,急性白血病细胞有EPOR的表达,表达率为57.5%,平均表达量(灰度值)为0.3549±0.2800,均低于正常对照(p〈0.05)。急性髓系白血病(AML)与急性淋巴系白血病(ALL)表达率差别无统计学意义(p〉0.05),表达量灰度值AML高于ALL(p〈0.05)。结论:急性白血病细胞表达EPOR,表达率和平均表达量均低于正常对照(p〈0.05)。AML与ALL表达率无显著差异(p〉0.05),表达量AML高于ALL(p〈0.05)。
  • 第十三届全国实验血液学学术会议通知
  • 第十三届全国实验血液学学术会议将于2011年11月在湖北省武汉市召开,会议由中国病理生理学会实验血液学专业委员会主办,华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病学研究所承办。会议将邀请国内外著名的血液学专家就目前血液学研究的前沿问题作专题讲座,就血液学基础、临床及相关领域的研究结果和经验进行广泛交流。
  • 急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562/A02细胞株耐药的影响
  • 本研究探讨急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)对K562/A02细胞耐药性的影响及其机制。从白血病患儿骨髓中分离、培养并鉴定MSC;建立K562/A02细胞株与MSC共培养的体系,应用AnnexinV-FITC检测一定浓度的阿霉素(ADM)对不同培养条件下K562/A02细胞凋亡的影响;RT-PCR检测K562/A02细胞中的凋亡基因家族中bcl-2和bax基因;荧光定量PCR检测多药耐药基因mdr1浓度。结果表明,单独培养组白血病细胞早期凋亡率为(8.38±0.29)%,而黏附培养组为(1.97±0.11)%,差异具有统计学意义(p〈0.05)。相对于单独悬浮培养的K562/A02细胞,黏附共培养的K562/A02细胞bcl-2基因表达明显增强,bcl-2/bax比值显著增高;K562/A02单独悬浮培养组、黏附共培养组细胞中mdr1的水平比较无统计学差异(p〉0.05)。结论:白血病患儿MSC能够使白血病细胞逃避药物的促凋亡作用,K562/A02对阿霉素产生耐药性可能与黏附共培养后bcl-2基因表达增强有关,而与其本身含有的mdr1基因无关。
  • 5-溴汉防己甲素和柔红霉素对K562/A02细胞凋亡和survivin基因表达的影响
  • 本研究探讨5-溴汉防己甲素(BrTet)联合柔红霉素(DNR)治疗耐药慢性髓系白血病的潜在可能性及其相关机制。采用流式细胞术检测DNR,BrTet或DNR和BrTet联合作用K562/A02细胞48小时后凋亡率情况;采用RT-PCR法检测对照组K562细胞、耐药K562/A02细胞及DNR或(和)BrTet作用于K562/A02细胞48小时后存活蛋白(survivin)mRNA表达水平;采用Western blot法检测各组细胞survivin蛋白表达水平。结果表明:BrTet与DNR联合作用对K562/A02细胞的诱导凋亡率较其余各组显著升高,同时联合用药组K562/A02细胞survivin mRNA和蛋白的表达较空白对照组和单药组下调,K562/A02细胞survivin表达较K562细胞升高。结论:BrTet联合DNR能有效逆转耐药,促进K562/A02细胞凋亡,其机制可能与survivin表达下调有关。
  • 联合应用尼洛替尼和汉防己甲素逆转K562/A02细胞耐药与诱导凋亡的研究
  • 本研究旨在探讨联合应用尼洛替尼(nilotinib)和汉防己甲素(tetrandrine,Tet)逆转K562/A02细胞耐药与诱导凋亡的相关性及其机制。应用MTT法检测细胞敏感性,计算尼洛替尼和Tet干预后的柔红霉素(DNR)的半数抑制浓度(IC50),用流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡率,RT-PCR检测bax、survivin mRNA的表达及Western blot分析BAX、SURVIVIN蛋白的表达情况。结果表明:5 nmol/L尼洛替尼或1.0μml/L Tet单独作用48小时后,DNR对K562/A02细胞的IC50分别为(5.71±0.72)mg/L和(6.52±0.43)mg/L,两药联合应用时DNR对K562/A02细胞的IC50降为(3.12±0.13)mg/L。单用尼洛替尼或Tet均能增加经DNR作用的K562/A02细胞的凋亡率,两药联合作用时凋亡率增高更明显。单用5 nmol/L尼洛替尼或1.0μml/L Tet 48小时后可上调bax mRNA及其蛋白的表达,且两药联合作用时上调幅度明显。单用5 nmol/L尼洛替尼或1.0μml/LTet48小时后可下调survivin mRNA及其蛋白表达水平,且两药联合作用时下调幅度明显。结论:K562/A02细胞对DNR耐药,单独应用尼洛替尼和Tet均可部分逆转K562/A02细胞对DNR的耐药,并可增加K562/A02细胞的凋亡率,两药联用具有明显的协同作用,其机制可能与上调bax mRNA及其蛋白的表达和下调survivin mRNA及其蛋白的表达有关。
  • vegf shRNA对耐药白血病细胞化疗敏感性的增强作用
  • 本研究采用RNA干扰技术探讨血管内皮生长因子(VEGF)对耐药白血病细胞K562/A02药物敏感性的影响及其机制。针对人vegf基因合成3个特异性shRNA干扰片段,采用脂质体介导的方法将其导入K562/A02细胞,用RT-PCR检测vegf及mrp1的mRNA表达水平,用Western blot检测VEGF、MRP1、AKT及P-AKT的蛋白表达情况,用MTT法检测阿霉素对各组细胞的半数抑制浓度(IC50),用流式细胞术检测细胞凋亡、胞内罗丹明123(Rho123)积聚情况。结果表明:转染vegf shRNA后,K562/A02细胞vegf的mRNA表达下调,其中vegf shRNA2组和vegf shRNA3组与HK组比较有显著差异(p〈0.05),以vegf shRNA3组最显著,VEGF蛋白表达也出现下调,与mRNA的表达基本一致;MTT检测结果显示阳性转染组对阿霉素的敏感性增加,其中vegf shRNA2组和vegfshRNA3组的半数抑制浓度(IC50)与HK组比较具有显著的统计学差异(p〈0.05);阳性转染组胞内Rho123积聚增多,与HK组比较均有统计学差异(p〈0.05);阳性转染组细胞凋亡增加,其中vegf shRNA2组和vegf shRNA3组与HK组比较有统计学意义(p〈0.05);阳性转染组MRP1mRNA蛋白及表达均下调,以vegf shRNA3组下调最显著;阳性转染组P-AKT的表达水平低于对照组,以vegf shRNA3组最明显,而总的AKT无明显变化。结论:vegf shR-NA可以抑制vegf的基因的转录及翻译,从而增加耐药白血病细胞对阿霉素的敏感性,其机制可能是vegf shRNA通过抑制PI3K/AKT信号转导通路的活化而促进细胞凋亡及下调MRP1的表达。
  • 实时定量RT-PCR检测K562/A02细胞株bcr-abl融合基因mRNA水平
  • 本研究定量分析慢性髓系白血病耐阿霉素细胞株K562/A02细胞中bcr-abl融合基因的mRNA水平。收集对数生长期的K562/A02细胞,用TRIzoL提取RNA,用实时定量RT-PCR(RQ-RT-PCR)技术检测bcr-abl融合基因及内参基因abl mRNA表达水平。结果表明:RQ-RT-PCR技术分析103-107拷贝数的重复性良好,灵敏度达10-5;K562/A02细胞中bcr-abl融合基因为高表达,bcr-abl mRNA表达量大于100%。结论:实时定量PCR检测K562/A02细胞bcr/abl融合基因mRNA水平,敏感可靠,重复性好,有助于临床辅助监测慢性髓系白血病。
  • 美国血液学年会中国巡讲会议通知——首届Highlights of ASH中国行
  • 为了提升我国血液学研究的国际地位和影响,加强我国血液学研究人员与国际同行间的学术交流和合作,由中华医学会、中华医学会血液学分会(CSH)和美国血液学会(ASH)共同主办的美国血液学年会中国巡讲会——首届High lights of ASH中国行定于2011年4月2—3日在北京首都大酒店召开。
  • 痰热清注射液对急性T淋巴细胞白血病Molt4细胞系生物学活性的抑制作用及其机制
  • 本研究探讨痰热清注射液体外对人急性T淋巴细胞白血病Molt4细胞系生物学活性的影响及其作用机制。将痰热清注射液倍比稀释成1:2、1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256、1:512,共9个浓度组,处理增殖期Molt4细胞,镜下观察不同时间点各浓度组细胞生长情况;应用CCK-8法检测细胞增殖能力,绘制生长曲线,计算抑制率和半数抑制浓度(IC50);分别采用PI染色法和PI/Annexin V双染法,通过流式细胞术检测Molt4细胞周期及凋亡的变化;采用实时定量PCR方法分析痰热清注射液处理Molt4细胞后凋亡相关基因caspase-3和bcl-2的表达量变化。结果表明:痰热清注射液对Molt4细胞增殖具有抑制作用,1:2至1:16稀释浓度的细胞毒性大,细胞基本死亡;抑制作用呈剂量依赖性,IC50为1:142稀释浓度。痰热清注射液1:32浓度处理72小时Molt4细胞处于S期的数量明显减少(p〈0.05),凋亡细胞比例明显增加(p〈0.05);同时,caspase3表达升高和bcl-2表达明显减低(p〈0.05)。结论:痰热清注射液可抑制Molt4细胞系增殖、促进其凋亡,其机制可能是通过减少S期细胞,下调bcl-2基因和上调caspase3基因而实现。
  • Wt1反义寡核苷酸阻断白血病微小残留病wt1基因表达的体外研究
  • 本研究通过wt1反义寡核苷酸(ASO)抑制wt1基因的表达,观察微小残留病模型及患者基因表达的变化。取56例复诊急性白血病完全缓解(CR)患者骨髓,用RT-PCR方法筛选出wt1基因表达阳性的骨髓标本。白血病细胞系微小残留病(MRD)模型及筛选出的wt1阳性急性白血病CR患者骨髓标本进行了细胞培养并用wt1ASO处理细胞,观察wt1基因表达的变化。结果表明:wt1基因的敏感性是10-3-10-4;56例急性白血病CR患者骨髓wt1基因的表达阳性率为16%。用wt1ASO处理wt1表达阳性的K562、HL-60细胞系MRD模型以及9例存在MRD的急性白血病CR患者骨髓,发现wt1ASO组有效的阻断了wt1基因的表达,而正义寡核苷酸组和对照组wt1基因的表达仍为阳性。结论:wt1ASO体外能够阻断白血病MRD中残留白血病细胞wt1基因的表达。
  • 免疫磁珠分选对荧光原位杂交检测多发性骨髓瘤细胞遗传学异常的影响
  • 本研究旨在明确免疫磁珠浆细胞分选对使用荧光原位杂交(FISH)技术检测多发性骨髓瘤(MM)细胞分子遗传学异常的影响,探索适合我国国情的检测方法。对同一MM患者的标本进行2种方法检测:1种为不经分选,直接进行FISH;另1种为经过CD138免疫磁珠分选(MACS)富集浆细胞后进行FISH检测;比较2种FISH技术对MM遗传学异常检出率并分析其影响因素。探针类型为13q14(RB-1)和14q32(IGH)。结果表明:①利用13q14(RB-1)探针对42例患者同时进行了分选和不分选的的FISH检测显示,经过CD138磁珠分选后25例(56.8%)检测到13q14缺失;不经分选直接进行FISH检测仅9例(21.4%)患者检出13q14缺失,2种标本处理方法的检出率具有统计学差异(p=0.01);②利用14q32(IGH)探针对22例患者同时进行了分选和不分选的FISH检测显示,经过CD138磁珠分选后14例(63.6%)可以检测到14q32重排,不经分选直接进行FISH检测仅7例(31.8%)患者检出14q32重排,2种标本处理方法的检出率具有统计学差异(p=0.035);③不分选FISH的阳性细胞检出率与骨髓涂片和流式细胞仪所检测的浆细胞比例呈明显的正相关。当骨髓涂片细胞中浆细胞比例超过50%,或者流式细胞仪检测浆细胞比例超过10%时,不分选FISH与磁珠分选FISH结果之间没有统计学差异。结论:MACS-FISH显著提高了MM遗传学异常的检出率,避免了假阴性的发生;直接进行FISH检测的检出率低的主要原因是检测标本中浆细胞比例较低;未经分选直接进行13q14(RB-1)和14q32(IGH)探针FISH检测,其阳性细胞率与骨髓涂片、流式细胞仪所检测出的浆细胞比例呈显著正相关,说明随着所检验标本中浆细胞比例的升高,不进行分选直接进行FISH检测的缺点得到一定弥补。当骨髓涂片细胞中浆细胞比例超过50%,或者流式细胞仪检测浆细胞比例超过10%时,2种检测方法之间没有差异。
  • 多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞趋化相关因子基因表达异常
  • 本研究探讨多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓间充质干细胞(MSC)趋化相关因子HGF、SDF-1、MCP-1和IL-8的基因表达水平及临床意义。应用实时定量RT-PCR方法检测20例初发多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞HGF、SDF-1、MCP-1和IL-8的表达水平。结果显示,HGF mRNA在MMMSC的表达明显高于对照组,具有统计学意义(p〈0.01),SDF-1 mRNA的表达较对照组低(p〈0.05),MCP-1和IL-8 mRNA的表达在两组间无统计学差异(p〉0.05)。结论:MM患者骨髓MSC均表达HGF、SDF-1、MCP-1和IL-8,MM患者骨髓微环境中MSC趋化相关因子表达存在异常。
  • 多发性骨髓瘤患者骨髓CD19阳性细胞数值与疗效的相关性
  • 本研究分析多发性骨髓瘤(MM)骨髓中CD19(+)细胞与骨髓瘤细胞数目及疗效的关系,探讨MM骨髓CD19(+)细胞变化特点。采用流式细胞术检测63例初诊MM患者骨髓中CD19(+)细胞、CD38(++)CD45(-)细胞、CD38(++)CD45(-)CD56(+)细胞的比值,分析不同分期、不同分型上述细胞比值的差异,以及它们之间的相互关系;分析43例初治时骨髓中CD19(+)细胞、CD38(++)CD45(-)细胞、CD38(++)CD45(-)CD56(+)细胞的比值变化与经过VADM、VD方案治疗4个疗程后疗效的关系。结果表明,63例初治患者骨髓中CD19(+)细胞比值Ⅱ期高于Ⅲ期,CD38(++)CD45(-)CD56(+)细胞比值Ⅲ期高于Ⅱ期;IgA组CD19(+)细胞比值明显高于IgD组且有高于其他组的趋势,IgA组CD38(++)CD45(-)、CD38(++)CD45(-)CD56(+)明显低于其它组;63例初治患者骨髓中CD19(+)细胞与CD38(++)CD45(-)、CD38(++)CD45(-)CD56(+)细胞的比值均呈负相关关系(分别为r=-0.3304,p=0.0052;r=-0.2414,p=0.0441)。分析43例患者(总治疗组)及VD方案治疗组(VD组)中的有效组CD19(+)细胞比值均分别高于无效组,VD组中有效组CD38(++)CD45(-)比值明显低于无效组,CD38(++)CD45(-)CD56(+)有低于无效组的趋势;总治疗组中有效组CD38(++)CD45(-)、CD38(++)CD45(-)CD56(+)均有低于无效组的趋势。结论:MM患者骨髓中CD19阳性细胞的比值与病情、分期有关,对于判断MM预后可能有一定价值。
  • 53例多发性骨髓瘤细胞遗传学研究
  • 为了探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)常规细胞遗传学(conventional cytogenetics,CC)及部分分子细胞遗传学特点,应用常规R显带方法,对53例MM患者进行染色体核型分析,并对其中20例患者采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术进行分子细胞遗传学分析。结果显示:53例MM患者染色体异常检出率为32.1%,其中涉及3种及3种以上染色体异常的占82.4%,染色体众数从44到90条不等。染色体核型异常涉及所有24条染色体,其中涉及1q21扩增、13q14缺失,17p13缺失及14q32易位中至少1种染色体异常的占70.6%,同时发现t(11;16)(p11;p13)等一些不常见的结构异常;还有一些在急慢性白血病中经常见到的异常。FISH检测结果显示:12例染色体核型正常的MM患者中有3例FISH检测阳性;8例染色体核型异常的患者中有5例FISH检测阳性。结论:大部分MM患者染色体异常核型比较复杂,具有明显的异质性;FISH分析可提高异常的检出率,但有局限性;常规细胞遗传学检测与FISH技术相结合可提高染色体异常的识别能力,有助于进一步认识和掌握MM细胞遗传学的特点,为临床诊断及治疗MM提供帮助。
  • 趋化因子受体与多发性骨髓瘤疗效关系的研究
  • 为了探讨趋化因子受体CXCR4、CCR1、CCR2与多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)疗效的关系,采用流式细胞术检测48例初发MM病人骨髓中MM细胞表面CXCR4、CCR1、CCR2的表达情况。患者分为2组,表达至少1个趋化因子受体的归为趋化因子受体表达阳性组(Ⅰ组),不表达趋化因子受体的归为趋化因子受体表达阴性组(Ⅱ组)。经过化疗3、6个月后分别评价和比较各组的疗效。结果显示:经过化疗3个月后,Ⅰ组患者(34例,中途失访3例)化疗有效率80.6%(25/31),Ⅱ组患者(14例)化疗有效率50%(7/14);经过化疗6个月后,Ⅰ组患者化疗有效率83.9%(26/31),Ⅱ组患者化疗有效率50%(7/14),无论经过化疗3个月还是经过化疗6个月,2组患者的有效率的差异均有统计学意义(p〈0.05)。结论:CXCR4、CCR1、CCR2可以作为预测MM疗效的指标。
  • zo-1基因甲基化状态分析在骨髓增生异常综合征鉴别诊断中的意义
  • 为探讨zo-1基因甲基化状态改变在骨髓增生异常综合征(Myelodysplastic Syndrome MDS)与血液系统非恶性疾病鉴别诊断中的意义,采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specific PCR,MS-PCR)及逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-PCR,RT-PCR)检测MDS细胞系MUTZ1、1例再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)患者及正常供者的骨髓(normal bone marrow,NBM)。通过甲基化特异性聚合酶链反应(methylation specificPCR,MS-PCR),对37例MDS-RA患者、20例疑诊MDS患者及55例血液系统非恶性疾病患者骨髓标本进行检测。结果显示:①zo-1基因在MDS细胞系MUTZ1中呈完全甲基化且不表达,在1例AA患者骨髓及NBM中呈完全非甲基化且有表达;②zo-1基因在55例血液系统非恶性疾病患者骨髓标本中呈完全非甲基化状态,在MDS-RA患者骨髓中甲基化阳性率48.6%(18/37),二者差异有统计学意义(p〈0.05);③20例疑似MDS患者中zo-1基因甲基化阳性率为35%(7/20)。随访甲基化阳性患者中的2例,均在1年内诊断为MDS。结论:MDS患者骨髓zo-1基因启动子区发生了高甲基化状态的改变,而血液系统良性疾病患者骨髓呈非甲基化状态。zo-1基因启动子区高甲基化在MDS患者骨髓标本中较特异,推测zo-1基因异常甲基化状态可能成为基因标志,它有助于MDS与AA等血液系统良性疾病的鉴别诊断,可应用于临床。
  • 骨髓增生异常综合症骨髓细胞结构异常与贫血和粒细胞减少相关性研究
  • 本研究旨在探索骨髓增生异常综合症患者贫血和外周血中性粒细胞减少与骨髓幼红细胞和中性幼粒细胞超微结构异常的相关性。采用全自动血细胞分析仪检测74例MDS患者贫血指标和中性粒细胞数,根据贫血程度和外周血中性粒细胞减少程度将MDS患者分别分为正常范围、轻度、中度和重度4组,用透射电子显微镜分析所有患者骨髓中性幼粒细胞和幼红细胞病态及凋亡细胞百分率。结果表明,74例MDS患者中68例贫血(92%),68例患者中51例外周血中性粒细胞减少(75%);电子显微镜下所有MDS患者骨髓幼红细胞和中性幼粒细胞不同程度结构异常;血红蛋白正常组和轻度、中度及重度贫血4组患者骨髓幼红细胞病态率分别为(37±14.7)%、(24±9)%、(32±16)%和(34±21)%,凋亡率分别为(2.25±1.03)%、(4.43±2.60)%、(8.78±4.04)%和(11.67±4.57)%,病态和凋亡率分别与血红蛋白及红细胞比容呈负相关(p〈0.05);外周血中性粒细胞正常、轻度、中度和重度减少4组患者骨髓中性幼粒细胞凋亡率分别为(6.00±2.67)%、(9.50±4.42)%、(13.00±3.54)%和(17.00±2.39)%,与外周血中性粒细胞呈负相关(p〈0.01);骨髓中性幼粒细胞病态率分别为(12.25±16.31)%、(13.5±10.01)%、(23±8.59)%和(51.67±19.67)%,病态率与凋亡率呈正相关(p〈0.01)。结论:MDS患者骨髓幼红细胞和中性幼粒细胞的凋亡和病态发育与贫血、外周血中性粒细胞减少相关,二者可能是MDS无效造血重要成因。
  • 连续动态观察乳酸脱氢酶对MDS预后判定的意义
  • 本研究旨在动态观察MDS患者的乳酰脱氢酶(LDH)的表达水平,初步探讨LDH对MDS患者预后判定的意义。回顾分析我院2001-2009年确诊的163例MDS患者,诊断时的LDH的表达水平,随访患者的LDH的变化情况及其与MDS的预后、生存期和疾病进展的关系;监测血细胞、骨髓原始细胞比例和核型,并分析其与LDH水平的关系。结果表明:163例患者在诊断时LDH表达值为214U/L(102-865U/L),LDH升高组MDS患者的中位生存期为25.6月,LDH正常组MDS患者的中位生存期为56.8月,两组比较差异显著(p〈0.05)。按照IPSS预后积分系统分类,LDH升高多在中危-2和高危组,与低危和中危-1比较差异显著(p〈0.05)。有疾病进展的MDS患者的LDH值比诊断初期和进展前明显升高,而无疾病进展的MDS患者的LDH水平基本保持稳定范围,无明显升高,两组比较差异显著(p〈0.05)。与其他预后指标比较,LDH是一个独立的预后指标。结论:LDH值可作为MDS患者的预后判断指标,有助于早期识别MDS进展和白血病的发生,从而选择合理的治疗方案。
  • 骨髓增生异常综合征患者c/ebpα基因表达水平及其临床意义
  • 本研究探讨骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者CCAAT/增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer binding protein alpha,C/EBPα)基因的表达及其在MDS发病、病情进展中的意义。应用Taqman探针的实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RQ-PCR)方法检测33例MDS患者和14例正常对照者的骨髓单个核细胞中的c/ebpα mRNA的表达,分析其在MDS中的表达水平变化。结果表明,MDS低危组和高危组c/ebpα mRNA的表达水平均显著低于对照组(分别为t=3.310,p〈0.01,t=6.260,p〈0.001),且c/ebpαmRNA在MDS高危组中的表达水平较低危组降低(t=2.709,p〈0.05)。MDS患者中c/ebpα mRNA表达水平与患者性别、年龄及血象无明显相关性,但MDS患者c/ebpαmRNA低表达组的骨髓中原始细胞比例明显高于c/ebpα mRNA高表达组(p〈0.01)。结论:c/ebpα基因表达的下调与MDS的发病密切相关,c/ebpα基因可能是诱导MDS发病的重要分子生物学标志;c/ebpα表达下调的程度与MDS的病情进展有密切关系。
  • 磷酸二酯酶7B在套细胞淋巴瘤患者中的表达及临床意义
  • 为了研究磷酸二酯酶(PDE)7B在套细胞淋巴瘤(MCL)患者中的表达及临床意义,应用实时定量PCR(QPCR)技术检测20例初治的有骨髓侵犯MCL患者骨髓和20例正常人外周血单个核细胞中pde7b的表达水平,并分析其与MCL临床预后指标的关系。结果表明:20例MCL患者pde7b表达水平中位数为8.7×10-4(4×10-5-6.9×10-3),明显高于正常人群0.5×10-4(0.18×10-4-1.7×10-4)(p=0.001);pde7b与性别、年龄、白细胞计数、乳酸脱氢酶水平、CD38表达和免疫球蛋白重链基因突变均无明显相关,而与细胞遗传学、β2微球蛋白、ZAP-70表达有明显相关。结论:pde7b基因在MCL中表达明显高于正常人群,并与细胞遗传学关系密切,可能成为MCL新的预后指标,具有重要的临床意义。
  • 组成性JNK活化促进B淋巴瘤细胞增殖
  • 本研究以人B淋巴瘤细胞系Daudi和Raji为研究对象,探讨组成性JNK活化对B淋巴瘤细胞增殖的影响。用Western blot检测Daudi、Raji B淋巴瘤细胞中组成性JNK的变化;用免疫荧光方法检测Daudi、raji B淋巴瘤细胞中JNK的亚细胞定位;用JNK抑制因子(SP600125)处理Daudi和raji B淋巴瘤细胞,用流式细胞术检测其细胞周期;用ATPLite法检测SP600125对Daudi、Raji B淋巴瘤细胞生长的影响。结果显示:Daudi和raji B淋巴瘤细胞有组成性JNK活化;Daudi和raji B淋巴瘤细胞JNK亚细胞定位异常,存在不同程度的入核;JNK特异性抑制因子SP600125诱导B淋巴瘤细胞Daudi、Raji G2/M期细胞比例升高,并具有时间依赖性,且G0/G1峰前出现亚二倍体峰,证实SP600125在B淋巴瘤细胞中诱导G2/M阻滞和凋亡。ATPLite检测结果显示,SP600125显著抑制Daudi和Raji B淋巴瘤细胞的生长,并随着抑制因子浓度的升高,抑制作用更加明显,呈现剂量依赖性。结论:组成性JNK活化促进Daudi和Raji B淋巴瘤细胞增殖。JNK活性的升高通过促进JNK从胞浆进入胞核来促进B淋巴瘤细胞的增殖。SP600125通过多种机制阻抑JNK的活性抑制B淋巴瘤细胞的恶性生长。JNK可作为临床治疗B淋巴瘤的潜在靶点。
  • PHI对Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株组蛋白甲基化和乙酰化调控的实验研究
  • 本研究观察异硫氰酸苯己酯(PHI)在体外对Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株的作用及对淋巴瘤细胞表观遗传学调控的影响,初步探讨其可能的机制。用流式细胞术检测PHI处理后的细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法检测PHI处理后的细胞的组蛋白H3、H4乙酰化和H3K4、H3K9甲基化状态改变。结果表明,PHI诱导细胞凋亡并提高组蛋白H3、H4乙酰化水平,组蛋白H3K4甲基化增强,而H3K9甲基化减弱。结论:PHI能上调与转录激活相关的组蛋白H3乙酰化水平及甲基化H3K4,下调转录抑制相关的组蛋白甲基化H3K9,促进肿瘤细胞凋亡,PHI可作为淋巴瘤的靶向治疗药物。
  • 11β-羟类固醇脱氢酶2在恶性淋巴细胞中的表达及与其对糖皮质激素敏感性关系
  • 本研究讨论11β-羟类固醇脱氢酶2(11β-HSD2)在3种来源淋巴的细胞系中的表达及其与恶性淋巴细胞对糖皮质激素敏感性的关系。利用实时定量PCR及Western blot方法检测急性淋巴细胞白血病Jurkat细胞系、淋巴瘤Daudi和Raji细胞系、以及健康志愿者外周血T淋巴细胞中11β-HSD2的表达;用流式细胞术检测糖皮质激素(GC)对3种淋巴肿瘤细胞的诱导凋亡情况;应用台盼蓝拒染法观察不同浓度GC对Jurkat细胞的生长抑制作用;流式细胞术检测GC联合11β-HSD2抑制剂18β甘草次酸(18β-GA)对Jurkat细胞凋亡影响。结果显示,11β-HSD2在Jurkat细胞中高度表达,而在Daudi、Raji细胞以及健康志愿者外周血T淋巴细胞中不表达。Jurkat对GC诱导的凋亡耐受,而Daudi和Raji对GC诱导的凋亡敏感。18β-GA能增加Jurkat细胞对GC诱导凋亡的敏感性。结论:11β-HSD2与Jurkat细胞对GC耐药有关,干预11β-HSD2可作为改善GC耐药的潜在靶点。
  • 伴大颗粒淋巴细胞增多的血管免疫幼细胞性T细胞淋巴瘤
  • 为了提高对血管免疫幼细胞性T细胞淋巴瘤(AITL)的认识,减少临床误诊,本文报告1例伴大颗粒淋巴细胞(LGL)增多的AITL并结合文献进行讨论。对患者进行了一系列临床检查,病理和组织化学检测,T细胞受体基因重排的多重PCR测定及淋巴细胞免疫表型的检查。结果查明:患者有发热、皮疹、全身淋巴结肿大、脾肿大,伴胸水和腹水,贫血和血小板减少,外周血LGL明显增多,免疫表型主要表达CD3-CD16+CD56+,TCRγ基因重排阳性,腹水中LGL易见,有异常核分裂象,淋巴结病理及免疫组织化学检测结果符合AITL,同时伴有CD56阳性表达。结论:AITL多段表现为侵袭性进展,临床预后差,LGL细胞增多可能是机体对肿瘤细胞的免疫反应或来源于肿瘤干细胞。
  • 47例结外NK/T细胞淋巴瘤治疗和预后分析
  • 本研究探讨结外NK/T细胞淋巴瘤的临床特征、治疗和预后情况。对中国人民解放军总医院血液科自1995年10月到2008年12月收治的47例结外NK/T细胞淋巴瘤患者进行回顾性分析。运用Kaplan-Meier方法行生存分析,COX回归分析模型对预后进行多变量分析。采用的临床参数分别为CD56、Ann Arbor分期、国际预后指标和B组症状。结果表明,全组2年、5年总生存(OS)率分别为91%和71%。单纯放疗患者的累积生存率较单纯化疗患者明显提高,二者相比有统计学差异;而放疗与放化疗结合治疗之间无统计学差异。COX回归分析模型多变量分析显示,CD56、Ann Arbor分期是独立的预后因素;单纯化疗中使用CHOP方案治疗的患者以分期为单因素分析显示,分期≥ⅢE期为预后的因素之一;以B症状为单因素分析3种疗法的生存曲线显示,B症状亦为预后因素之一。结论:单纯放疗的近期疗效明显优于单纯化疗,放化疗结合对近期生存率没有显著提高;CD56阴性和Ann Arbor分期较早是患者预后良好的指标,改善病人的一般状况可以使患者的预后更佳。
  • 自身免疫病合并非霍奇金淋巴瘤的临床和病理特点
  • 本研究旨在探讨自身免疫病合并非霍奇金淋巴瘤(NHL)的临床和病理特点。回顾性分析6例自身免疫病合并NHL患者的临床和病理特点,并观察其治疗结果。结果表明,6例患者中自身免疫病为干燥综合征(Sjogren′s syndrome,SS)2例、类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)2例、克隆氏病(Crohn′s disease,CD)和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)各1例。结性和结外部位NHL各3例,在病理类型方面弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)3例、结外NK/T细胞淋巴瘤(ENKL)2例和非特指型外周T细胞淋巴瘤1例。CD10、Bcl-6和MUM1的免疫组织化学检测显示,3例DLBCL均为非生发中心型。2例ENKL的EBER均阳性。应用CHOP方案化疗或加用累及野放疗后,5例病人获完全缓解,1例(例4)为原发耐药。NHL诊断后中位生存时间为3年。在针对NHL治疗后,1例SS病人病情好转,2例(UC和CD)病人病情稳定无变化,3例病人(2例RA和1例SS)仍需继续应用泼尼松等治疗以控制原发病症状。结论:NHL是自身免疫病的严重并发症之一,在病理类型中非生发中心型DLBCL发生率增高。CHOP或加用累及野放疗对自身免疫病合并的NHL有效,但对自身免疫病本身的疗效有限。
  • cdx2基因在儿童白血病的表达及临床意义研究
  • 本研究旨在探讨cdx2基因在儿童急性白血病骨髓及外周血单个核细胞中的表达及临床意义。采取33例初发儿童白血病患儿骨髓及外周血,运用RT-PCR方法检测cdx2基因在各型白血病及正常对照组中的表达,随访25例并观察其与疗效的关系。结果发现,病例组中30例急性白血病(AL)患儿cdx2表达阳性25例(83.3%),30例中21例急性淋巴细胞白血病(ALL)和9例急性髓细胞白血病(AML)cdx2表达阳性分别为20例(95.2%)和5例(55.6%),两组相比有统计学意义(p〈0.05);3例慢性粒细胞白血病(CML)中1例cdx2表达阳性。对照组20例健康体检者外周血cdx2表达阴性,与病例组比较差异有统计学意义(p〈0.01)。25例AL患儿cdx2阳性21例(ALL17例,AML4例)与阴性者4例(ALL1例,AML3例)经治疗后均达到完全缓解(CR)。cdx2是否阳性表达可能与CR率无相关关系。对8例cdx2表达阳性AL患儿治疗后动态观察,结果初诊cdx2阳性表达在CR时仍阳性,但随着CR延长cdx2表达逐渐转为阴性,而初诊时cdx2阴性表达在骨髓CR时仍为阴性。结论:cdx2在儿童AL患者中广泛高表达,ALL者该基因表达阳性率高于AML患儿。CML患儿中也有cdx2表达;cdx2基因表达与AL患者CR率无明显相关。
  • IL-24体外诱导儿童急性白血病骨髓单个核细胞凋亡研究
  • 本研究探讨IL-24对儿童急性白血病骨髓单个核细胞(BMMNC)凋亡的影响,为临床应用提供理论依据。纳入本研究的确诊未治的儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)、儿童急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者各20例。取患者骨髓分离单个核细胞;用琼脂糖电泳方法检测BMMNC DNA;采用碘化丙锭染色流式细胞术和细胞核形态观察同时检测体外培养的急性白血病BMMNC增殖、分化过程中的凋亡状况;观察IL-24对它们的影响,并进行了定量分析。采用RT-PCR检测bcl-2及caspase-3 mRNA表达水平,观察IL-24对它们的影响。结果发现:IL-24可诱导体外培养的急性白血病BMMNC凋亡。在培养的48小时,可见到DNA出现梯形条带;IL-24 50 ng/ml用药组细胞凋亡程度较没加IL-24的对照组明显增加。IL-24可下调体外培养的急性白血病BMMNC bcl-2基因mRNA的表达,上调caspase-3 mRNA的表达。结论:IL-24可诱导白血病BMMNC凋亡,其机制之一可能是下调bcl-2 mRNA的表达,上调caspase-3 mRNA的表达。
  • 80岁以上老年急性白血病12例临床分析
  • 本研究探讨80岁以上老年急性白血病的临床特点。对我院2000-2010年收治的12例80岁以上急性白血病患者进行回顾性分析,其中9例急性髓系白血病,3例急性淋巴细胞白血病,均合并有多种基础疾病,大部分患者一般情况较差,接受了个体化治疗方案的患者共10例。结果表明,2例患者获得完全缓解,其余患者未获得缓解。平均生存时间20±16周。AML患者平均生存时间为27±14周,明显长于国外报道。生存期最短的3例均为ALL患者。结论:本组高龄AML患者采取个体化治疗,生存期得到明显延长。而高龄老年ALL患者则预后很差,缺乏相对有效的治疗措施。
  • HLA-A/B/C/DRB1/DQB1对非血缘造血干细胞移植影响的分析
  • 本研究探讨供受者HLA-A/B/C/DRB1/DQB1等位基因不合的数目和位点对非血缘造血干细胞移植的影响。选取北京市道培医院101例非血缘造血干细胞移植病例,分别根据供受者HLA-A/B/C/DRB1/DQB1位点0-3个等位基因不合和HLA-C位点的不同,分组统计移植后1年以上总生存率、急性GVHD发生率和复发率。结果表明:①按供受者HLA等位基因水平10/10全相合组(30例)与9/10相合组(32例),8/10相合组(31例)以及7/10相合组(8例)分组比较,10/10和9/10组的1年以上总活存率(OS)较8/10组(78%and 82%vs50%,p=0.39)增多;10/10组、9/10组和8/10组复发率为16%和18%vs20%;10/10组没有Ⅱ度以上GVHD发生,9/10和8/10组10%左右。7/10组虽然病例数少,缺乏统计学意义,但结果证实安全有效。②)对比HLA-C位点等位基因不合组与HLA-10/10全合组,HLA-C不合组有延长1年以上总生存率(77%vs85%,p=0.30),降低复发率的趋势(8%vs17%,p=0.47),其Ⅱ度以上GVHD发生率明显增高,统计学有明显差异(0%vs25%,p=0.006)。③按抑制性KIR的配体HLA-C1/C2将HLA-10/10组与HLA-C一个等位基因不合组按供受者HLA-C1/C2 match和mismatch分为两组(37例和5例),发现1年以上总生存率、复发率,GVHD发生率无明显差异(78%vs80%,14%vs20%,和5%vs20%)。结论:供受者HLA-A/B/C/DRB1/DQB1等位基因不相合数目0-2个情况下,数目越少,1年以上生存率越高,复发率和急性GVHD无明显差异。7/10组是安全的。HLA-C不相合组GVHD发生率明显增高,有减少复发和延长生存率的趋势,但其原因是否与抑制性KIR与其配体HLA-C1/C2有关,尚待研究。
  • 异基因造血干细胞移植治疗进展期慢性髓系白血病疗效及预后的初步分析
  • 加速期和急变期慢性髓系白血病(CML)患者预后较差,异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)是这一类患者唯一具有治愈可能的治疗方法。本研究探讨allo-HSCT治疗进展期CML的疗效及预后。对1998年9月至2008年1月28例接受allo-HSCT的患者从疗效、移植前基础特点与预后、移植前治疗策略与预后、移植后事件与预后等方面进行了回顾性分析。结果表明:28例患者中10例活存并持续缓解,3年总活存率和无病活存率分别34.9%和35.7%;18例死亡。单因素分析发现,克隆演进和原始细胞比例是预后不良的基线危险因素,二者结合可以预测预后。移植前应用伊马替尼并取得完全血液学缓解并不能改善预后。对移植后事件的预后分析发现,并发重度移植物抗宿主病是预后不良的危险因素。结论:对于接受allo-HSCT治疗的进展期CML病例,克隆演进和原始细胞比例是具有预后意义,移植前应用伊马替尼并不能改善预后。
  • 含氟达拉滨的清髓性预处理造血干细胞移植对高危白血病疗效的初步观察
  • 本研究探讨含氟达拉滨的清髓性预处理造血干细胞移植对高危的白血病的疗效。用氟达拉滨,马利兰和环磷酰胺组成新的预处理方案的异基因造血干细胞移植治疗25例难治、复发的急性白血病,其中非血缘供者10例,血缘供者15例,供受者HLA配型相合者15例,配型不全相合10例。GVHD防治采用环孢素A+甲氨蝶呤联合方案,非血缘供者移植和HLA不相合移植时加用吗替麦考酚酯和抗胸腺T淋巴细胞球蛋白(ATG)。结果显示,10例非血缘供者移植全部成功植活,植入成功率100%,15例亲缘移植14例植活,1例HLA4/6相合者植入失败死亡,植入成功率93.3%。造血重建时间:外周血中性粒细胞计数大于0.5×109/L的中位时间是13(11-19)天,血小板计数大于20×109/L的时间为14(12-20)天。3例发生Ⅱ-Ⅳ度急性GVHD(12.5%),9例发生慢性GVHD(47.4%)。移植后原发病复发死亡率42.1%,随访6到84个月,3年无病生存47.1%。结论:含氟达拉滨的清髓性预处理方案用于高危白血病的异基因移植是安全、有效的,它减少了移植后GVHD发生率和预处理相关的毒副作用,但是移植后恶性疾病复发较高,需要进一步改进。
  • FLAG联合改良BUCY预处理方案的异基因造血干细胞移植治疗难治复发恶性血液病疗效分析
  • 本研究旨在观察应用FLAG联合改良的BUCY预处理方案行异基因造血干细胞移植治疗难治复发或高危恶性血液病的疗效。对10例难治复发或高危恶性血液病患者自愿接受FLAG联合改良的BUCY预处理的异基因造血干细胞移植的疗效进行分析。10例中复发2例(早期复发1例,淋巴瘤进展1例),难治7例(2例CR2,1例CR3,2例PR,2例NR),1例CR1但为高危病例。10例患者中包括急性髓性白血病8例(M11例,M25例,M61例,恶性骨髓增生异常综合征伴骨髓纤维化1例),前T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病1例,脾边缘带淋巴瘤IVB1例。结果表明,10例全部顺利植入,10例患者除2例死亡(1例死于肺部感染,1例死于真菌肺炎、渗漏综合征、多脏器功能衰竭),其余8例无复发,中位生存时间为164天(57-442天)。结论:应用FLAG联合改良的BUCY预处理方案(清肿瘤性方案)的异基因造血干细胞移植治疗难治复发或高危的恶性血液病可取得良好的疗效。
  • 青霉素、链霉素体外对人脐带组织源间充质干细胞胞外分泌物基因表达的影响
  • 本研究探讨青霉素和链霉素对人脐带组织源间充质干细胞增殖、凋亡和胞外分泌物基因表达的影响。首先分离培养人脐带间充质干细胞,然后检测其免疫表型以及向成骨细胞和脂肪细胞分化的能力,并用MTT法检测细胞增殖,定量RT-PCR法检测胞外分泌物(ECS)和凋亡相关基因(bcl-2,bax)的cDNA表达。结果表明:培养得到的贴壁细胞表型符合间充质干细胞特征,低浓度的青霉素和链霉素可以有效促进脐带间充质干细胞的增殖,其最佳作用浓度为100 U/ml;同时青霉素和链霉素能降低其细胞外分泌物(extracellular secretion,ECS)成分的表达,抗生素浓度越高,ECS表达降低越多;而且低浓度的青链霉素还能提高bcl-2/bax的cDNA表达比值。结论:在脐带MSC的体外培养中,低浓度的青霉素、链霉素可增加细胞增殖,降低凋亡比率,但大剂量使用会降低脐带MSC胞外分泌物的基因表达。
  • 人脐带组织源间充质干细胞中SDF-1受体CXCR4的表达特征
  • 本研究探讨健康人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hucMSC)中SDF-1受体CXCR4的表达特征。运用组织块贴壁法从健康人脐带中培养出hucMSC;采用流式细胞术检测hucMSC表面特异性标记;应用油红O染色及茜素红染色对hucMSC成脂和成骨情况进行检测;运用流式细胞术检测第2-第5代hucMSC中CXCR4受体的表达情况,同时采用实时荧光定量PCR法检测第2-第5代hucMSC中cxcr4mRNA的表达。结果表明,hucMSC表现出CD44、CD13、CD71阳性,CD38、CD117、HLA-DR阴性。hucMSC经成脂、成骨诱导后出现脂滴及钙结节,经油红O及茜素红染色均呈阳性。流式细胞术检测显示在第2-第5代hucMSC中均有CXCR4蛋白表达,分别为(89.82±0.62)%、(86.87±1.32)%、(80.50±4.46)%、(70.10±0.68)%。第2-第5代hucMSC中cxcr4mRNA均有表达,且第3-第5代cxcr4mRNA表达量分别为第2代的0.5585±0.0875倍、0.6205±0.1377倍、0.4634±0.0447倍。结论:从健康人脐带中培养的第2-第5代hucMSC均表达cxcr4mRNA,且其表达量随传代数增加而呈降低趋势;与第2代相比,第3-第5代hucMSC cxcr4mRNA表达均有所降低,但第3-第5各代间表达相对稳定。
  • 急性T细胞白血病细胞变异型sil-tal1融合转录本和基因组DNA断裂点
  • 本研究探究1例儿童急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)的变异型sil-tal1融合转录本的序列。将PCR扩增产物克隆入质粒载体并测序,针对变异部分序列设计引物,对基因组DNA进行PCR扩增及序列比对。结果表明,在cDNA水平发现4种不同的融合转录本,分别保留了sil基因的部分外显子或内含子序列,并存在插入和删除现象。经分析白血病细胞的基因组DNA序列,发现了一种新的sil-tal1重组,其sil基因的断裂点在DNA水平上与文献报道不同。结论:此例患儿白血病细胞的tal1基因发生了新型重组,并表达经典型的和至少3种变异型的融合转录本,此现象可能是由于白血病细胞转录剪接机制异常所致。
  • 父源HLA单倍型染色体A位点基因重组一家系
  • 本研究探讨父源HLA单倍型染色体A位点基因座间的重组。采集患者及其父母和两个姐姐静脉血标本,用PCR-SSP进行HLA-Ⅰ、Ⅱ类低分辨基因分型,PCR-SSBT进行HLA-A、B、DR位点高分辨基因分型。结果表明,HLA高分辨基因分型证实患者的2条单倍型分别为A*3001-B*1302-DRB1*0701和A*3001-B*5601-DRB1*1454;其父亲的2条单倍型为A*3001-B*1302-DRB1*0701和A*1101-B*5601-DRB1*1454。遗传家系分析显示患者所携有的A*3001-B*1302-DRB1*0701单倍体是源自母亲的一条染色单体,而A*3001-B*5601-DRB1*1454则源自父亲的另一条染色单体,可患者的A位点为3001,而B、DR位点一致。这表明,父亲的2条染色单体在减数分裂时A基因座间发生了交换,重组后的单倍型又完整地遗传给了患者。该家系HLA低分辩和高分辨分型结果和遗传分析表明,子1是亲生;亲子鉴定也证明,子1和父亲、母亲具有亲缘关系;进一步遗传分析证实,子1HLA-A位点发生父源染色体基因重组。结论:本家系为国内首次发现父源HLA单倍型染色体A位点发生重组的家系,这为更深入研究HLA重组机制提供了依据。
  • 为过继性免疫治疗培养淋巴细胞时的细胞因子作用和基因表达特征
  • 在过继免疫性细胞培养时需要加入不同的细胞因子。本研究旨在比较不同细胞因子及EBV抗原肽联合细胞因子刺激淋巴细胞后淋巴细胞分化方向和相关的基因表达变化特征。分别用不同细胞因子及EBV抗原肽联合细胞因子刺激淋巴细胞,在培养的当天和第1、3、7、10天,用流式细胞术检测各组细胞中CD3+(总T细胞)、CD3+CD4+(辅助T细胞)、CD3+CD8+(细胞毒性T细胞)、CD3+CD8+CD45RO+(记忆型T细胞)、CD3+CD8+CD45RA+(初始型T细胞)、CD3+CD30+(Th2辅助细胞)、CD19+(B细胞)、CD56+(NK细胞)、CD4+CD25+(初始调节T细胞)、CD4+CD25+FOXP3+(精确调节T细胞)在培养前后总细胞中的百分比变化;用RT-PCR技术检测管家基因mad1、pten和辅助T细胞转录调控基因t-bet(Th1)、gata3(Th2)、细胞因子ifn-γ(Th1)、il-4(Th2)基因表达量。结果表明:EBV多肽组CTL细胞成为优势细胞,临床治疗有确切疗效;比较加入EBV多肽组和不同细胞因子培养组结果显示,EBV抗原肽可以更有效刺激CTL生成,ifn-γ基因表达量明显增加;辅助淋巴细胞分化相关的基因t-bet、gata3都有明显的升高;管家基因mad1、pten基因变化不大;在不同细胞因子培养环境下加入抗原肽可以更有效刺激CTL生成。结论:用EBV多肽联合细胞因子共同培养淋巴细胞可以获得特异性CTL细胞,不同细胞因子对细胞分化发挥不同作用。
  • BclⅠ和HindⅢ位点在家系性血友病A基因诊断的意义
  • 本研究旨在探讨FⅧ基因内含子18的BclⅠ及内含子19的HindⅢ多态性位点在血友病A(haemophiliaA,HA)患者及家系成员的基因诊断与携带者检出中的应用价值。对8个HA患者及其家系成员45人运用聚合酶链反应-限制性片断多态性(polymerase chain reaction restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)方法对X染色体FⅧ基因内含子18的BclⅠ及内含子19的HindⅢ位点进行多态性分析。应用中国遗传咨询网在线家系图绘制工具PediDraw软件绘制家系图。结果表明,联合检测BclⅠ及HindⅢ位点可对8个HA家系中的5个作出诊断,诊断率约为62.57%,且有2个家系同时伴有2个位点的突变。该8个家系11名可疑携带者中6名可作出携带者诊断,携带者的检出率为54.5%。结论:联合运用BclⅠ及HindⅢ位点进行HA患者家系分析可提高HA患者及携带者的诊断率。
  • 复方曲肽注射液对血小板聚集和血栓形成影响的实验研究
  • 本研究探讨受试药物复方曲肽注射液的体外抗血小板聚集及体内抑制血栓形成的作用。采用血小板凝聚仪测定不同浓度复方曲肽注射液对血小板聚集的抑制率,并确定量效关系。采用动脉短路血栓模型测定复方曲肽注射液的抑制血栓形成作用。结果表明,复方曲肽注射液具有抑制血栓形成作用和剂量依赖性的抗血小板聚集功能。当复方曲肽溶液总氮终浓度为5μg/m l时,血小板聚集抑制率达到(28.61±22.07)%,其最大活性为100μg/m l的阿司匹林溶液抗血小板聚集活性的2.5倍。复方曲肽注射液的血栓形成抑制率为(33.90±17.56)%。结论:复方曲肽注射液具有抗血小板聚集和抑制血栓形成的作用。
  • 糖皮质激素对ITP初治患者T辅助细胞相关细胞因子基因表达的影响
  • 本研究旨在探讨免疫性血小板减少性紫癜(ITP)患者中T辅助细胞(helper T cell,Th)细胞免疫状态以及其与治疗反应的关系。应用实时荧光定量RT-PCR方法检测20例初发ITP患者(男性8例,女性12例,中位年龄41.0岁)接受糖皮质激素治疗[泼尼松1mg/(kg.d)]前后以及20例正常对照者外周血单个核细胞中Th细胞相关基因(T-bet、IFN-γ、GATA-3、TGF-β、Foxp3、IL-2、IL-4)表达水平的变化。结果表明:治疗前ITP患者外周血单个核细胞中T-bet、IFN-γ、IL-2表达较正常对照明显升高,差异有显著统计学意义(p〈0.01),治疗后患者T-bet、IFN-γ、IL-2表达较治疗前降低(p〈0.05);治疗前Foxp3表达较正常无明显变化,治疗后Foxp3表达较治疗前升高(p〈0.05)。治疗前患者TGF-β的表达与正常对照相比无明显差别,治疗后老年患者与年轻患者中呈现不同的变化模式,年龄〈60岁患者治疗后TGF-β表达水平较治疗前降低(p〈0.05),而年龄≥60岁患者TGF-β较治疗前升高。结论:ITP患者存在Th细胞亚群失衡,常规糖皮质激素治疗仍是针对初治ITP患者的有效治疗手段,其作用机制可能与改善Th细胞亚群失衡有关。
  • 115例特发性血小板减少性紫癜骨髓活检巨核细胞计数与临床疗效关系的研究
  • 本研究首次评价特发性血小板减少性紫癜骨髓涂片及活检巨核细胞计数与临床疗效关系。按临床类型、血小板计数、骨髓涂片及活检巨核细胞计数115例成人ITP患者疗效。结果表明:①急性ITP患者疗效优于慢性ITP患者,2组近期治疗有效率分别为86.6%及60.4%(p〈0.01),而远期治疗有效率分别为82.5%及68.9%(p〈0.05)。②发病时不同血小板计数的ITP患者,他们的近期及远期疗效无显著差异(p〉0.05)。③按发病时骨髓涂片巨核细胞计数进行分组,即涂片巨核细胞计数小于7个/4.5cm2组、7-35个/4.5cm2组、大于35个/4.5cm2组,这3组的近期治疗有效分别率为53.3%、73.8%及86.2%,这3组间相比较有显著差异(p〈0.01),其远期治疗有效率分别为42.8%、84.6%及85.5%,而后2组治疗有效率相比较无显著差异(p〉0.05),但后2组分别同第1组比较均有显著差异(p〈0.01)。④按发病时骨髓组织切片巨核细胞计数进行分组:即切片巨核细胞计数小于8个/mm2组、8-15个/mm2组和大于15个/mm2组,这3组近期治疗有效率分别为53.8%、85.0%及90.3%,后2组治疗有效率比较无显著差异(p〉0.05),但2组分别同第1组比较均有显著差异(p〈0.01)。这3组的远期治疗有效率分别为33.3%、63.1%及87.9%,3个组间相比较有显著差异(p〈0.01)。⑤ITP患者发病时外周血小板计数同骨髓涂片及组织活检切片巨核细胞计数均无相关性(r=0.31,p〉0.05;r=0.41,p〉0.05)。骨髓涂片同组织切片巨核细胞计数存在正相关(r=0.52,p〈0.01)。单因素logistic回归分析结果表明,骨髓涂片及活检巨核细胞计数对远期疗效影响显著。结论:骨髓活检巨核细胞计数可以作为骨髓涂片巨核细胞计数有效补充,可预测特发性血小板减少性紫癜患者的治疗效果。
  • 调控组织因子基因表达的药物筛选研究
  • 本研究建立TF启动子转录活性的荧光素酶基因稳定细胞株,应用该细胞模型筛选调控TF基因表达的药物,并为深入研究其分子机制打下基础。构建TF启动子的一系列5′端截短型的荧光素酶报告基因质粒(包括-2174 bp~+128 bp,-684 bp~+128 bp,-247 bp~+128 bp,-201 bp~+128 bp),将质粒电转染至U937细胞中,建立表达荧光素酶报告基因的稳定细胞株。应用ATRA验证该细胞株的功能;应用bortezomib、尿多酸肽(CDA-II)等药物处理该细胞株24小时,分析荧光素酶基因活性,筛选出能够调控TF基因表达的药物。结果发现,5 nmol/L bortezomib能激活其转录活性,上调TF转录本表达水平;1 mg/ml CDA-Ⅱ抑制TF启动子的转录活性,下调TF转录本的表达水平。TF启动子逐步截短功能分析发现,bortezomib及CDA-ⅡII调控TF启动子转录活性的区域位于-201 bp—0 bp之间。结论:本研究建立了表达TF启动子荧光素酶活性的U937稳定细胞株,并筛选出能够调控TF基因转录的药物CDA-II及bortezomib,为将来筛选新药物及深入研究其分子机制打下了基础。
  • 复方天葡片抑制H_2O_2诱导小鼠淋巴细胞
  • 本研究旨在探讨复方天葡片(tianpupian,TPP)抑制过氧化氢(H2O2)诱导淋巴细胞凋亡的作用机制。采用MTT法观察TPP对H2O2导致的淋巴细胞死亡率的影响;应用流式细胞仪AnnexinV/PI双染法、JC-I线粒体膜电位及caspase3酶活性的荧光化学发光法检测TPP对H2O2诱导淋巴细胞凋亡的抑制作用。结果表明:TPP通过拮抗H2O2导致的线粒体膜电位下降,抑制caspase3酶活性而降低H2O2诱导的淋巴细胞凋亡率。结论TPP对H2O2诱导的淋巴细胞凋亡具有显著的抑制作用,其机制与线粒体膜电位下降及caspase3酶活性抑制有关。
  • 复方天葡片对红细胞氧化损伤的拮抗作用
  • 本研究旨在探究复方天葡片(compound tianpupian,TPP)及其组分对小鼠红细胞氧化损伤的保护作用。采用小鼠红细胞自氧化及过氧化氢氧化损伤模型,通过扫描电镜和分光光度计法观察TPP及其组分对红细胞氧化损伤的保护作用。结果表明,TPP明显抑制过氧化氢导致的红细胞氧化损伤,其4种组分红景天、葡萄籽提取物原花青素、刺五加提取物和茶多酚均显示了对红细胞氧化损伤的拮抗作用,其中葡萄籽原花青素的作用最强。结论:TPP对红细胞氧化损伤具有很好的拮抗作用,是一种有价值的中药复方。
  • 噬血细胞综合征患者血清sHLA-G表达及其临床意义
  • 本研究旨在探讨血清可溶性人类白细胞抗原G(sHLA-G)在噬血细胞综合征(HPS)患者中的表达水平及临床意义。收集2008年9月至2010年7月经首都医科大学附属北京友谊医院确诊的HPS患者23例,根据不同病因分为感染相关性HPS、肿瘤相关性HPS和风湿免疫病相关性HPS,同时收集25例健康人血清,分别采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测患者及健康人血清sHLA-G水平,并与各实验室检查指标进行相关性分析。结果表明,HPS患者组血清sHLA-G水平高于健康对照者,差异有显著统计学意义(p=0.003),对HPS患者组中不同病因人群进行单因素方差分析,差异无统计学意义(p=0.233)。检测HPS患者血清sHLA-G水平与采血当日WBC、Hb、Plt、ALT、AST、LDH、ALB、TBil、DBil、IBil、Cr、BUN、TG、纤维蛋白原、铁蛋白的相关性发现,其与血小板水平呈正相关关系,与其他各项实验室指标均无相关性。结论:血清sHLA-G水平在HPS患者中升高可能有多种原因,包括感染、肿瘤、T淋巴细胞过度活化以及一些细胞因子的刺激等,sHLA-G还可以抑制NK细胞活性,导致异常免疫风暴形成,在HPS的发病机制中可能起到一定作用。
  • 双碱基缺失型等位基因复合杂合导致的类孟买型个体1例
  • 本研究探索1例类孟买型血型的分子机制,为稀有血型的筛选和鉴定提供理论基础。以血型血清学方法鉴定该个体红细胞的ABO和H表型,利用聚合酶链反应扩增类孟买表型个体的abo基因第6、7外显子和α1,2岩藻糖基转移酶基因(fut1)编码区,并对PCR产物直接测序分析。对纯化的fut1扩增产物进行TOPO克隆和测序,对2处变异位点进行单倍体序列分析。结果表明:血清学分析确认该个体为罕见的类孟买表型;直接测序发现先证者fut1基因第547位和880位附近存在碱基缺失或插入变异;TOPO克隆测序法证实,fut1基因1条单倍体存在第547-552位两碱基AG缺失,另1条单倍体存在880-882位两碱基TT缺失。这2种变异均导致移码突变,并提前形成终止密码。结论:在献血人群中发现1例罕见的类孟买表型,其分子机制为双碱基缺失型fut1等位基因复合杂合所致的α1,2岩藻糖基转移酶活性减弱。
  • 利用动物模型评价核黄素光化学法灭活红细胞病毒的效果
  • 本研究旨在评估核黄素光化学法(核黄素终浓度为150μmol/L,光照时间为20分钟,光照强度为40 000Lux)灭活红细胞中病毒的有效性。将HCMV作为指示病毒加入红细胞中。30只BALA/c小鼠设为实验组(n=10)、病毒对照组(n=10)、可见光对照组(n=5)和红细胞对照组(n=5);实验组小鼠注射经核黄素光化学法灭活处理的红细胞;病毒对照组小鼠注射未经灭活处理的红细胞;可见光对照组小鼠注射经可见光照射的红细胞;红细胞对照组小鼠注射正常红细胞。取各组小鼠进行体外病毒分离,PCR检测HCMV UL83基因,间接免疫荧光鉴定PP65抗原。结果表明:病毒对照组和可见光对照组病毒分离、PCR及间接免疫荧光检测均为阳性,而实验组和红细胞对照组所有结果均为阴性。结论:核黄素光化学法灭活红细胞病毒是有效的。
  • 中国南京地区十个红细胞血型系统稀有抗原的大规模调查
  • 本研究调查南京地区人群中稀有血型抗原的类型及分布情况,为稀有血型病人的临床用血和献血招募提供基础性资料。采用4M尿素对红细胞进行Kidd血型系统的Jk(a-b-)表型筛选;利用抗血清对H系统的H-、MNS系统的GPA-、Gerbich系统的GPC-、Ii系统的i+、Lutheran系统的Lub-表型进行筛选;对Kell系统的k-和Jsb-、Duffy系统的Fya-、Ok系统的Ok-、MNS系统的s-和Digeo系统的Dib-表型采用多重PCR的方法进行筛选。结果表明:在40337例标本中,筛选出2例Jk(a-b-)表型;在1 782例标本中,筛出Fy(a-b+)表型3例,尚未发现Fy(a-b-)的表型,也未发现Ok-、s-和Dib-表型。在2 002、2 003、2 084、10 189和10 004例标本中,未发现相应的GPA-、GPC-、Lub-、H-和i+稀有表型者。在2017例标本中,也未发现k-和Jsb-的表型存在。结论:南京地区人群中Jk(a-b-)表型频率为0.0049%,Fy(a-b+)表型频率为0.168%,在现有筛查人数中尚未发现所查其它血型系统稀有抗原的存在。
  • 中国汉族人群MN血型相关基因gypa分子多态性的研究
  • 本研究探讨中国汉族人群MN血型相关基因gypa的多态性。随机选取中国汉族人群中无血缘关系的无偿献血者202人份,以血清学方法鉴定样本的MN血型表现型。根据GenBank的NG-007470基因参照序列设计gypa第2外显子引物,对202人份的DNA进行PCR扩增,同时对扩增产物进行直接测序。结果表明:所有样本的gypa第2外显子第1、56位碱基均发生了变异,其中MN表现型杂合子主要以1A〉C、22T/C、34A/G、35T/G、56T〉C的形式存在;MM表现型纯合子主要以1A〉C、22C、34G、35T、56T〉C的形式存在;NN表现型纯合子主要以1A〉C、22T、34A、35G、56T〉C的形式存在。结论:中国汉族人群MN血型相关基因的多态性主要由gypa第2外显子的第1、22、34、35、56共5个位点的多态性所决定,其中第1、56位为非功能性SNP位点。
  • 骨髓增殖性肿瘤发病分子机制研究进展
  • 经典的BCR/ABL阴性的骨髓增殖性肿瘤(MPN),包括真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、原发性骨髓纤维化(PMF),是一组起源于多能造血干细胞的恶性骨髓增殖性疾病。单一的JAK2基因V617F突变并不能解释3种疾病临床表现的差异。最近的研究表明,JAK2V617F突变负荷、其他MPN相关基因突变,如TET2、ASXL1等,以及遗传易感性可能参与了MPN复杂的发病机制。本文就这3方面研究进展作一综述。
  • 微小RNA与多发性骨髓瘤
  • 微小RNA(microRNA,miRNA)是一类对基因具有调控功能的内源性非编码小分子RNA,通过与靶mRNA完全或不完全互补配对,引起mRNA降解或翻译抑制,从而对基因转录后水平进行调控。研究表明,miRNA对细胞增殖、代谢、凋亡、分化等细胞发育的生理和病理过程有重要调控作用,其失调有助于肿瘤的形成。本文就miRNA的生物学特征、功能作用及与多发性骨髓瘤的发生发展、染色体核型异常及药物耐药等方面的研究进展作一综述。
  • 适合造血干细胞移植多发性骨髓瘤患者的治疗
  • 多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是浆细胞来源的恶性克隆性疾病,难于治愈。虽然近年来新药的出现明显改善MM患者的疗效,但研究证实适合于造血干细胞移植的患者仍需进行移植以进一步提高患者的治疗反应,延长生存期。本文就适合于造血干细胞移植的患者,如何根据患者情况制定个体化的整体治疗策略进行综述,重点阐述移植前合适的诱导治疗方案的选择、最佳移植时机的确定、造血干细胞移植方式的抉择和移植后合理的维持治疗。
  • MDS转化为AML机制的研究进展
  • 骨髓增生异常综合症(MDS)是造血干细胞克隆性疾病,以无效造血和可转变为急性白血病为特征,大约有30%的病例可转变成急性白血病。这种转变则在高危的MDS患者中更为常见,故又称为继发性急性髓系白血病(sAML或MDS/AML)。化疗对这类疾病一般很难奏效,唯一治愈的方法就是异基因造血干细胞移植,但是只有很少的病人适合移植。所以,对MDS发生和发展的机制研究和为临床开发其有效药物显得特别重要。本文将从染色体异常、DNA异常甲基化和AML1/RUNX1,FLT3,PI-PLCβ1基因突变这三个方面进行介绍。
  • CD4^+CD25^+调节性T细胞体外扩增的研究进展
  • CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的研究已有30多年的历史,主要在体内发挥免疫抑制功能,很多自身免疫疾病的发生都与Treg的数量减少或功能失调有关,如多发性硬化、非肥胖性糖尿病(NOD)及红斑狼疮等,而在移植免疫领域内也有着十分重要的意义。这些特性使得应用Treg防治自身免疫性疾病和器官移植的排斥备受关注,然而体内有限的数量使得它们的应用和研究受到影响。目前,许多体外扩增技术已被建立起来,从而可以克服体内细胞数量不足的问题。最近的研究表明,树突状细胞(dentritic cells,DC)扩增的抗原特异性Treg比用抗CD3/CD28抗体扩增的多克隆Treg显示更有效的免疫抑制作用,是当前研究的热点。本文主要对调节T细胞的扩有关增手段和相关的作用机制等进行回顾与比较。
  • 胰岛素对人白血病细胞增殖的影响
  • 胰岛素(INS)作为一种具有多项生物学效应的激素,除了经典的代谢调节作用外,还具有调控细胞增殖、分化,保证胚胎及未成年个体的生长发育等方面的作用。胰岛素在体外能刺激细胞的增殖及分化,越来越多的研究证明其在体内也是一种重要的生长调节因子。胰岛素在细胞水平的作用是由胰岛素与细胞表面的胰岛素受体的结合所启动,但在较高的胰岛素浓度下也可以通过胰岛素样生长因子-1(IGF-1)受体途径而发挥作用,在不同细胞体系中可能会有所不同。人急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)细胞膜上广泛表达胰岛素受体(INSR)和胰岛素样生长因子受体-1(IGF-1R)。最近,高胰岛素血症与肿瘤关系的研究屡见报告。本文就胰岛素促人白血病细胞增殖的作用及其可能机制、抑制肿瘤细胞增殖的作用及其可能机制、胰岛素类似物潜在的应用前景等方面作一综述。
  • 血小板疾病中原癌基因c-myc、c-myb的研究进展
  • 原癌基因c-myc和c-myb对造血系统有重要的调节作用。c-myc基因表达的变化与细胞增殖、分化状态有关,其表达产物在调节细胞生长、分化或恶性转化中发挥作用。c-myb参与转录,影响细胞增殖、分化、凋亡。近年来,随着分子生物学、分子免疫学、细胞生物学等相关技术的日趋成熟,原癌基因c-myc、c-myb在造血调控中的研究逐渐增多。研究发现,巨核-红系祖细胞的定向分化及血小板的异常与其表达水平有关。常见的血小板疾病见于血小板减少症、血小板增多症等,此类疾病的病因和发病机制尚未明了。本文就c-myc和c-myb基因的结构、功能及其在血小板疾病中的表达水平与意义作一综述。
  • 《中国实验血液学杂志》荣获美国EBSCO大型文献库全文收录
  • 2010年4月,《中国实验血液学杂志》接到美国EBSCO文献库信函通知,谓《中国实验血液学杂志》已通过EBSCO业务部门的遴选和评审,获全文收录资格;2010年8月,《中国实验血液学杂志》社与美国EBSCO互签了协议,同年12月《中国实验血液学杂志》编辑部,在软件专家的具体指导下,完成了期刊全文数据传送的技术问题,并传送了2010年全年6期各篇论文的PDF数据,至此《中国实验血液学杂志》正式进入了美国EBSCO大型文献库系统,并通过这一系统发行至全世界。
  • 过表达HMGB1蛋白的K562稳定细胞株的建立(闫凡芝 闫金松 赵佳 李伟平 陈雪瑜 杨岩 饶淑梅 金晶)
    397例急性白血病细胞遗传学与FAB分型相关性研究(霍菲菲[1] 刘欣[1] 孙自敏[1] 朱薇波[1] 郑昌成[1] 汪健[2] 邬志伟[3])
    白血病K562、K562/A02细胞中mthfr、dpyd基因单核苷酸多态性的检测(张文静 陈宝安 程坚 鲍文 仲悦娇 高峰 夏国华 张孝平 许佩佩 彭苗新)
    EPOR在急性白血病细胞的表达及其临床意义(程国丽 王伟 汪洪毅 崔中光)
    第十三届全国实验血液学学术会议通知(无[1,2])
    急性淋巴细胞白血病患儿骨髓间充质干细胞对K562/A02细胞株耐药的影响(王昭霞[1] 杨志敏[1] 邹亚伟[2] 李敏敏[2] 陈福雄[2] 钟帼钰[2] 关镜明[2] 卫凤桂[2] 吴上志[2] 何振涛[2] 吴梓梁[2])
    5-溴汉防己甲素和柔红霉素对K562/A02细胞凋亡和survivin基因表达的影响(蔡晓辉[1] 陈宝安[1] 程坚[1] 王筠[1] 丁家华[1] 鲍文[1] 仲悦娇[1] 高峰[1] 许文林[2] 沈慧玲[2] 魏虎来[3] 陈静[3])
    联合应用尼洛替尼和汉防己甲素逆转K562/A02细胞耐药与诱导凋亡的研究(崔婷允[1] 陈宝安[1] 丁家华[1] 高冲[1] 程坚[1] 鲍文[1] 仲悦娇[1] 单学赟[1] 高峰[1] 夏国华[1] Anita Schmitt[2] Michael Schmitt[2])
    vegf shRNA对耐药白血病细胞化疗敏感性的增强作用(沈慧玲 方莉莉 陈琛 房新建 陈巧云 李娟 许文林)
    实时定量RT-PCR检测K562/A02细胞株bcr-abl融合基因mRNA水平(陈宝安[1] 周桂娜[1] 程坚[1] 乔纯[2] 吴雨洁[2] 李建勇[2] 丁家华[1] 高冲[1] 赵刚[1] 王骏[1] 鲍文[1] 宋慧慧[1])
    美国血液学年会中国巡讲会议通知——首届Highlights of ASH中国行
    痰热清注射液对急性T淋巴细胞白血病Molt4细胞系生物学活性的抑制作用及其机制(杨波[1] 卢学春[1] 张峰[2] 范辉[1] 李素霞[1] 朱宏丽[1])
    Wt1反义寡核苷酸阻断白血病微小残留病wt1基因表达的体外研究(杨璐 曹悦鞍 彭朝胜 夏菁 张文洛 田力)
    免疫磁珠分选对荧光原位杂交检测多发性骨髓瘤细胞遗传学异常的影响(安刚[1] 李承文[1] 李倩[2] 易树华[1] 刘旭平[1] 徐燕[1] 李增军[1] 齐军元[1] 邹德慧[1] 邱录贵[1])
    多发性骨髓瘤患者骨髓间充质干细胞趋化相关因子基因表达异常(胡慧瑾[1] 陆化[1] 费小明[2] 李俊霞[1] 李建勇[1])
    多发性骨髓瘤患者骨髓CD19阳性细胞数值与疗效的相关性(张玲[1] 周振海[1] 李小银[1] 欧阳涓[2] 苏畅[1] 李娟[1] 罗绍凯[1])
    53例多发性骨髓瘤细胞遗传学研究(荆源 方美云 姜凤 林樉 王芳婷)
    趋化因子受体与多发性骨髓瘤疗效关系的研究(裴仁治 唐善浩 马俊霞 张丕胜 刘旭辉 杜小红 陈哲 陈冬 沙科娅 曹俊杰 李双月)
    zo-1基因甲基化状态分析在骨髓增生异常综合征鉴别诊断中的意义(康慧媛[1] 王新荣[1] 王莉莉[1] 王畅[1,3] 岑坚[1,4] 高丽[1] 刘洋[1,2] 李永辉[1] 于力[1])
    骨髓增生异常综合症骨髓细胞结构异常与贫血和粒细胞减少相关性研究(张华梅 刘津华 赵轼轩 董舒旭 竺晓凡 茹永新 肖志坚)
    连续动态观察乳酸脱氢酶对MDS预后判定的意义(张延清 戴海滨 王京华 李晓云 戴思明 姚丹丹 马丽丽)
    骨髓增生异常综合征患者c/ebpα基因表达水平及其临床意义(姬文灿 丁凯阳 朱薇波 汪健 张磊 吴竞生)
    磷酸二酯酶7B在套细胞淋巴瘤患者中的表达及临床意义(董华洁 范磊 王冬梅 方成 朱丹霞 王银花 洪鸣 朱雨 乔纯 庄芸 徐卫 李建勇)
    组成性JNK活化促进B淋巴瘤细胞增殖(郭媛媛[1,2] 崔健[1] 侯春梅[1] 王庆阳[1] 王晶[1] 马远方[2] 张纪岩[1])
    PHI对Burkitt淋巴瘤Daudi细胞株组蛋白甲基化和乙酰化调控的实验研究(洪苓苓[1] 马旭东[2] 黄轶群[2])
    11β-羟类固醇脱氢酶2在恶性淋巴细胞中的表达及与其对糖皮质激素敏感性关系(陶怡[1] 施菊妹[1] 张燕香[1] 高路[2] 湛凤凰[3])
    伴大颗粒淋巴细胞增多的血管免疫幼细胞性T细胞淋巴瘤(王建宁[1] 张平[2] 张柳波[1] 侯艳秋[1] 包红雨[1] 宋敏[1] 孟庆奇[1] 傅行财[1])
    47例结外NK/T细胞淋巴瘤治疗和预后分析(张松松 魏敏 李红华 靖彧 李菲 黄文荣 陆晓林 刘占祥 周颖 于力)
    自身免疫病合并非霍奇金淋巴瘤的临床和病理特点(于亚平 刘海宁 翟勇平 史平 宋萍 李峰 周晓刚 唐玉梅)
    cdx2基因在儿童白血病的表达及临床意义研究(李迎侠 潘凯丽 范芳 钱新宏 杨晓蕾 邓跃林 刘雨东)
    IL-24体外诱导儿童急性白血病骨髓单个核细胞凋亡研究(程涵蓉 文飞球 李博 陈丽 温爱惠)
    80岁以上老年急性白血病12例临床分析(林洁 朱宏丽 卢学春 范辉 李素霞 翟冰 刘洋 冉海红 杨波)
    HLA-A/B/C/DRB1/DQB1对非血缘造血干细胞移植影响的分析(张弦 张艳玲 王建玲 童春容 蔡鹏 刘红星 王静波 曹星玉 殷宇明 赵艳丽 卢岳 孙媛 周葭蕤 高艳群 吴彤)
    异基因造血干细胞移植治疗进展期慢性髓系白血病疗效及预后的初步分析(宋阿霞[1,2] 杨栋林[1] 魏嘉璘[1] 闫嶂松[1] 王玫[1] 姜尔烈[1] 黄勇[1] 马巧玲[1] 何祎[1] 翟卫华[1] 张荣莉[1] 冯四洲[1] 韩明哲[1])
    含氟达拉滨的清髓性预处理造血干细胞移植对高危白血病疗效的初步观察(鹿全意 赵江宁 牛小青 王昭 蔡玉贤)
    FLAG联合改良BUCY预处理方案的异基因造血干细胞移植治疗难治复发恶性血液病疗效分析(王志红[1] 吴晓雄[1] 刘周阳[1] 马健[1] 曹永彬[1] 徐丽昕[1] 吴亚妹[1] 刘蓓[1] 闫蓓[1] 达万明[2])
    青霉素、链霉素体外对人脐带组织源间充质干细胞胞外分泌物基因表达的影响(李艳萍[1] 时庆[2] 邢晓[2] 汪大琨[2] 庄泳[2] 李栋[2])
    人脐带组织源间充质干细胞中SDF-1受体CXCR4的表达特征(艾昊 白海 王存邦 欧剑锋 赵强 韩夏 陈哲 胡小燕)
    急性T细胞白血病细胞变异型sil-tal1融合转录本和基因组DNA断裂点(赵晓曦[1] 梁丽姬[2] 丁卫[2] 李志刚[1])
    父源HLA单倍型染色体A位点基因重组一家系(韩晓苹 孙敬芬 金红实 王红艳 王莉莉 高春记 于力)
    为过继性免疫治疗培养淋巴细胞时的细胞因子作用和基因表达特征(张改玲[1] 陶秀艳[2] 刘兆丽[2] 刘岩[2] 王筝[2] 刘红星[2] 蔡鹏[2] 卜定方[1] 郭晓玲[3] 朱平[1])
    BclⅠ和HindⅢ位点在家系性血友病A基因诊断的意义(乔秀强[1] 李燕平[1] 曾蕾[1] 陈燕[2] 韩夏[3])
    复方曲肽注射液对血小板聚集和血栓形成影响的实验研究(陈秋晨 于兆进 孙海刚 于涧坤 魏敏杰)
    糖皮质激素对ITP初治患者T辅助细胞相关细胞因子基因表达的影响(李锋[1] 吴擘颋[2] 王伟光[1] 詹延霞[1] 邹善华[1] 程韵枫[1])
    115例特发性血小板减少性紫癜骨髓活检巨核细胞计数与临床疗效关系的研究(周立宇 张征 陶英 刘薏芝 常春康 浦权 李晓)
    调控组织因子基因表达的药物筛选研究(杨岩 闫凡芝 闫金松 赵佳 李伟平 陈雪瑜 金晶 饶淑梅)
    复方天葡片抑制H_2O_2诱导小鼠淋巴细胞(魏日胞[1] 王永新[2] 曹丽[2] 卓莉[1] 傅博[1] 李平[1])
    复方天葡片对红细胞氧化损伤的拮抗作用(王永新[1] 魏日胞[2] 冯哲[2] 崔少远[2])
    噬血细胞综合征患者血清sHLA-G表达及其临床意义(王晓琳 王昭 林榕榕 张嘉 吴道香 刘暖)
    双碱基缺失型等位基因复合杂合导致的类孟买型个体1例(马开荣 陶苏丹 蓝小飞 洪小珍 许先国 朱发明 吕杭军 严力行)
    利用动物模型评价核黄素光化学法灭活红细胞病毒的效果(杨鹏[1] 张循善[1] 程越[1] 赵俊[2] 王明丽[2])
    中国南京地区十个红细胞血型系统稀有抗原的大规模调查(马玲 刘衍春 薛敏 魏鹏 唐荣才)
    中国汉族人群MN血型相关基因gypa分子多态性的研究(梁延连 张艳艳 庄乃保)
    骨髓增殖性肿瘤发病分子机制研究进展(刘柳[1] 肖志坚[2])
    微小RNA与多发性骨髓瘤(李春溟 陈丽娟 李建勇)
    适合造血干细胞移植多发性骨髓瘤患者的治疗(黄文荣 于力)
    MDS转化为AML机制的研究进展(王淋淋 高冲 陈宝安)
    CD4^+CD25^+调节性T细胞体外扩增的研究进展(周海涛 杨志刚)
    胰岛素对人白血病细胞增殖的影响(庄伟煌 潘敬新)
    血小板疾病中原癌基因c-myc、c-myb的研究进展(张莹 陈蕊 赵丽)
    《中国实验血液学杂志》荣获美国EBSCO大型文献库全文收录
    《中国实验血液学杂志》封面
      2009年
    • 06

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