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  • 猴免疫缺陷病毒衣壳蛋白p27在大肠杆菌中的表达及纯化 免费阅读 收费下载
  • 目的获得用于SIV检测的衣壳蛋白p27重组抗原。方法利用生物信息学软件选择衣壳蛋白p27抗原表位集中的区域,合成SIV p27基因;将该基因与pMAL-p5x载体连接构建pMAL-p5x-p27重组质粒,并转化大肠杆菌BL21中,诱导表达;用Amylose Resin亲和层析柱对表达产物进行纯化。结果 SDS-PAGE分析显示,pMAL-p5x-p27重组质粒可在大肠杆菌中高效表达,表达产物分子量约为70×103;经纯化获得目的蛋白p27纯度可达90%。结论本研究利用原核表达系统成功表达了SIV p27蛋白,为SIV检测方法的建立奠定了基础。
  • 绿色荧光转基因大鼠模型的建立 免费阅读 收费下载
  • 目的随着干细胞研究的推进,大鼠干细胞的研究日趋迫切。本研究旨在为活体荧光影像系统、干细胞归巢、细胞移植体内示踪研究,提供绿色荧光蛋白EGFP转基因大鼠模型。方法通过显微注射方式获得EGFP转基因大鼠,采用活体荧光影像系统、激光共聚焦显微镜,对EGFP转基因大鼠各个组织的荧光表达水平进行比较;采用流式细胞术检测转基因大鼠血液和骨髓细胞、骨髓干细胞的荧光标记率,筛选骨髓干细胞高效标记绿色荧光的转基因大鼠。结果建立了心脏、肝脏、肌肉、肺、胰腺、脑、膀胱、胃、肾脏、肠和脾脏组织中,系统性表达EGFP的SD-TgN(ACT-EGFP-1)ZLFILAS转基因大鼠;流式细胞术检测表明,该品系血液细胞绿色荧光标记率为94.4%,骨髓干细胞绿色荧光标记率为97.8%。结论建立了多组织系统性高表达绿色荧光,骨髓干细胞荧光标记率高达95%以上的转基因大鼠,为影像分析,造血干细胞的归巢等研究提供了大鼠模型。
  • 《中国医药科学》杂志征订启事 免费阅读 免费下载
  • 《中国医药科学》杂志是中华人民共和国卫生部主管,海峡两岸医药卫生交流协会和二十一世纪联合创新(北京)医药科学研究院主办的国家级综合性医药科技期刊,国内统一刊号:CN11—6006/R,国际标准刊号:ISSN2095—0616,邮发代号:82—519。现已被中国知网、中国学术期刊网络出版总库、《中国学术期刊(光盘版)》全文检索系统、万方数据数字化期刊群、中国核心期刊(遴选)数据库、中文科技期刊数据库、解放军医学图书馆CMCC和CMCI全文收录,系中国学术期刊综合评价数据库统计源期刊。
  • 缺血性眩晕大鼠模型的建立 免费阅读 收费下载
  • 目的建立缺血性眩晕大鼠模型,为研究相关治疗药物奠定基础。方法采用手术结扎右侧颈总动脉(common carotid artery,CCA)和右侧锁骨下动脉(subclavian artery,SCA)致大鼠右侧半脑不完全脑缺血建立缺血性眩晕大鼠模型。记录逃避电刺激所需的时间(潜伏期)作为衡量眩晕严重程度的指标,测量造模前后右侧前庭神经核组织血流量,计算血流量变化率,评价脑供血状况。结果 1.与假手术组相比,模型组大鼠潜伏期明显延长(P〈0.01),造模成功;与模型组比较,盐酸地芬尼多和天保宁能够明显缩短大鼠潜伏期(分别缩短61.9%、52.0%,P〈0.01)。2.结扎右侧CCA及SCA后,与对照组相比,模型组大鼠前庭神经核组织血流量明显减少(P〈0.01),造模成功;与模型组相比,天保宁能明显增加结扎动脉后组织血流量,在结扎后5、10、15、20、25、30 min血流量分别增加92.8%、83.8%、77.3%、77.9%、65.7%、55.8%(P〈0.01)。结论该模型持久稳定,动物脑部缺血明显,并且能够很好地反映动物眩晕时间及眩晕程度,可有效应用于抗缺血性眩晕药物的实验研究。
  • 袖状胃切除术Wistar大鼠模型建立及初步观察 免费阅读 收费下载
  • 目的探讨袖带胃切除术对Wistar大鼠体质量、大鼠前胃黏膜及黏膜肌层厚度的影响,为进一步研究袖状胃切除术的减重机制提供形态学依据。方法 20只雄性Wistar大鼠被随机分为2组,12只行袖状胃切除术做为手术组;8只行胃干预组做为假手术组,术前、术后第1天及术后1月内每周,而后每两周进行体重测量,术后12周处死大鼠后制作前胃石蜡切片,组织学方法观察其形态变化。结果手术组大鼠存活10只,成活率83%。假手术组大鼠在术后增重明显,手术组大鼠体重在术后2周恢复术前水平,体重增长明显但较假手术组慢(P〈0.05)。手术组大鼠术后前胃有代偿性扩张,光镜下可见黏膜及黏膜肌层厚度变薄,黏膜皱襞变浅。结论袖状胃切除术大鼠模型中对前胃的形态学观察可能有利于进一步阐明该术式大鼠模型的减重和体重反弹机制。
  • PPARα转基因小鼠在药物评价中的应用研究 免费阅读 收费下载
  • 目的研究过氧化物酶体增殖激活受体α激动剂药物在PPARα转基因小鼠体内对肝肾功能、血脂指标的影响,以评价该模型能否能应用于药效学研究中。方法选择27只6周龄的PPARα小鼠给予高脂饲料喂养一个月,随机分成3组,9只/组,分别为对照组1,高剂量组(非诺贝特60 mg/kg)和低剂量组(30 mg/kg)。同时选择9只C57BL/6小鼠作为对照组2。连续灌胃一个月,在动物给药前后分别检测肝功能指标、肾功能指标和血脂指标,并观察动物的一般生长情况。结果①给药后各组比较:与对照组1比较,非诺贝特各剂量组在PPARα转基因小鼠体内均能明显升高血脂中CHO和HDL-C(P〈0.05),明显降低TG(P〈0.05)。各组之间的体重没有明显的差异(P〉0.05)。②给药前后比较:与给药前比较,给药后高剂量组能明显降低ALT、AST、ALP、BUN、TG(P〈0.05);能明显升高CHO、HDL-C(P〈0.01)。而低剂量组能明显降低ALP(P〈0.05);能明显升高CHO、HDL-C(P〈0.05)。结论 PPARα转基因小鼠评价PPARα激动剂药物比常规C57BL/6小鼠更敏感,是一个新的动物模型。
  • 大鼠仙台病毒ELISA、间接免疫荧光和免疫印迹三种检测方法比较 免费阅读 收费下载
  • 目的比较ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay)、IFA(immuno-fluorescence assay)和WB(Western blot)三种方法在大鼠仙台病毒血清学检测中的差异。方法仙台病毒蛋白抗原经凝胶电泳分离转移后用于血清学检测的WB方法;使用IFA、ELISA方法对20份无菌大鼠、227份SPF大鼠以及63份清洁级大鼠送检血清样品进行检测,阳性及可疑样品用WB方法进行了验证。结果 20份无菌大鼠血清样品被3种方法检测为仙台病毒抗体阴性;SPF级大鼠样品被IFA方法判定为阴性,1.32%(3/227)被ELISA方法判定为阳性,其中有2/3被WB确认为阳性;ELISA、IFA和WB在清洁级大鼠样品中检出仙台病毒的阳性率分别为为18.12%、11.34%和15.87%。结论三种检测方法灵敏度从高到低依次为ELISA、WB和IFA。WB方法可作为IFA和ELISA难以确定结果的替代方法。
  • 隔离器饲育SPF鸡微生物质量控制方法的建立 免费阅读 收费下载
  • 目的建立隔离器饲育SPF鸡生产管理方式,探讨并建立其微生物质量控制方法。方法对引进的SPF鸡种蛋进行孵化后,将种鸡置于隔离器中进行饲养,在种鸡10、20、40周龄时采取鸡血清进行微生物质量监测,检验当前SPF鸡生产管理和微生物质量控制方法的有效性。结果隔离器饲育SPF鸡初期由于对孵化环节控制不严出现了微生物污染现象。在对孵化环节操作管理改进后,隔离器饲育SPF鸡的微生物状况得到控制。结论通过加强各个环节消毒,隔离器饲育环境能够保证SPF鸡的微生物质量。适当控制隔离器内SPF鸡的密度不仅有利于SPF鸡的繁育和种蛋回收,而且有利于环境微生物的控制。
  • 激光打孔技术在小鼠卵子冷冻保存上的运用 免费阅读 收费下载
  • 目的比较卵子冷冻复苏后、以及复苏卵子经过激光打孔后,与新鲜精子、冷冻复苏精子体外受精,受精率的变化。方法 (1)通过免疫荧光染色技术,判断卵子冷冻前后透明带糖蛋白-2、微丝以及细胞核的变化;(2)冷冻C57BL/6J小鼠卵子,复苏后一部分卵子打孔,一部分不打孔,然后与9个品系的新鲜精子和冷冻精子体外受精,比较各组受精率的变化。结果 (1)新鲜卵子组透明带糖蛋白-2、微丝及细胞核结构清晰,而冷冻组以及冷冻剂处理组,微丝结构略有变化,透明带糖蛋白-2受到不同程度的损伤,而细胞核在冷冻前后无明显变化;(2)9个品系的新鲜精子与C57BL/6J复苏卵子受精率为17.6%~42.9%,平均为29.6%;新鲜精子与复苏打孔卵子受精率为29.1%~72.3%,平均为49.7%,差异显著(P〈0.05);9个品系复苏精子与复苏卵子体外受精率为5.4%~23%,平均为15.5%;复苏精子与复苏打孔卵子受精率为16.7%~48.6%,平均为28.8%,差异显著(P〈0.05)。结论 (1)冷冻对卵子的透明带糖蛋白-2有较大的损伤,对微丝有一定的影响,但是对染色体没有影响;(2)冷冻卵子复苏后,体外受精率下降明显,但是复苏卵子经过激光打孔后,可以显著提高体外受精率。
  • 《中国现代医生》杂志征订启事 免费阅读 免费下载
  • 《中国现代医生》杂志是卫生部主管、中国医学科学院主办的国家级医疗卫生期刊,中国核心期刊(遴选)数据库、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库全文收录期刊,解放军医学图书馆CMCC/CMCI,国内统一刊号:CN11-5603/R,国际刊号:ISSN1673-9701,邮发代号:80-611,全国各地邮局均可订阅,脱订者可直接通过发行部订阅。
  • 不同剂量阿霉素致大鼠局灶节段硬化肾病模型的建立比较 免费阅读 收费下载
  • 目的探讨不同剂量阿霉素对大鼠局灶节段硬化肾病模型的影响。方法左侧肾切除加尾静脉注射不同剂量阿霉素致大鼠肾脏局灶节段性硬化,观察不同剂量阿霉素对模型大鼠成活率、24 h尿蛋白定量、血清肌酐、尿素氮、肾脏病理的影响。结果不同阿霉素注射剂量组大鼠4周、8周成活率随着注射剂量的升高呈逐渐下降趋势,且4周、8周时阿霉素注射剂量4.5~6 mg/kg组模型大鼠成活率均低于50%;8周时成活率与注射剂量呈高度显著性负相关(r=0.9045,P〈0.01)。各阿霉素注射剂量组于1周出现尿蛋白明显升高(P〈0.01)、2周出现血清肌酐明显升高(P〈0.01)、4周出现血清尿素氮明显升高(P〈0.01),并均呈进行性增高,2周时除3 mg/kg组外,其余各组血清尿素氮较正常组高(P〈0.01,P〈0.05);8周时各注射剂量组大鼠24 h尿蛋白定量、血清肌酐、血清尿素氮与阿霉素注射剂量呈高度显著性正相关(r=0.942 9,P〈0.01;r=0.938 4,P〈0.01;r=0.956 8,P〈0.01)。各组大鼠肾脏病理均提示肾小球出现局灶节段硬化表现,且硬化程度随注射剂量的增加而呈加重趋势。结论阿霉素尾静脉注射剂量3 mg/kg模型组大鼠死亡率低,同时大鼠肾脏病理又能表现出符合人类肾小球局灶节段硬化的改变,是较为理想的造模剂量。
  • 家兔经皮枕大池穿刺方法及常见问题 免费阅读 收费下载
  • 目的探讨提高经皮穿刺兔枕大池成功率的方法及常见问题的处理。方法采用2 mL无菌注射器针头对30只2~2.5 kg新西兰兔行枕大池穿刺,确定穿刺的最佳深度、角度,解决常见问题。结果 25只家兔穿刺成功,其穿刺深度在1.2~1.6 cm之间,平均1.432 cm,5只失败。结论兔枕大池穿刺不要局限于固定深度、角度,应根据动物大小,体位适时作出调整;另外合适的穿刺针可以提高穿刺成功率。
  • 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒感染实验动物的情况概述 免费阅读 收费下载
  • 淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(lymphocytic chorimeningtis virus,LCMV)能广泛感染啮齿类动物和人,是一种重要的人畜共患病病原。近些年LCMV感染人的检测得到加强,在实验动物中的感染率一直控制在较低水平。我国的实验动物国家标准要求豚鼠、地鼠必需检测LCMV,小鼠只在必要时检测,而国外普遍要求对大鼠等动物也作为常规检测项目。为了提高对实验动物感染LCMV的检测意识,本文对不同国家和地区LCMV感染实验动物的情况做一综述。
  • Refining scientific procedures involving animals to reduce suffering and improve scientific validity 免费阅读 收费下载
  • The development of laboratory animal legislation in the UK 免费阅读 收费下载
  • Laboratory animal welfare:status and resources 免费阅读 收费下载
  • Xenobiotic effects in cancer related pathways-high throughput screening and proof of concept in animal models 免费阅读 收费下载
  • 东莞松山湖明珠实验动物科技有限公司 免费阅读 免费下载
  • 东莞松山湖明珠实验动物科技有限公司(南方医科大学实验动物科技园)致力于建设覆盖整个实验动物领域、凸显非人灵长类、比格犬和小型猪资源优势与特色的实验动物繁育和动物实验研究一站式服务体系,已具备实验动物资源标准化建设、人类重大疾病模型研制、药物筛选及安全性评价、医疗器械安全和效能检测等领域的综合研究服务能力。
  • [研究报告]
    猴免疫缺陷病毒衣壳蛋白p27在大肠杆菌中的表达及纯化(李敏[1] 马兰芝[1] 白杰英[1] 刘一[1] 赵彦斌[1] 王洪宝[1] 丁璐静[1] 武文卿[2] 孙兆增[1] 曾林[1])
    绿色荧光转基因大鼠模型的建立(王贵利 白琳 陈炜 关霏霏 高珊 马元武 张连峰)

    《中国医药科学》杂志征订启事
    [研究报告]
    缺血性眩晕大鼠模型的建立(刘阳 孙建宁 王堃 李俊青 董世芬 张硕峰 张胜威 武汀)
    袖状胃切除术Wistar大鼠模型建立及初步观察(张建军[1,2] 汪文娟[1] 吴毅平[1])
    PPARα转基因小鼠在药物评价中的应用研究(尉明晓 秦超 陈威 高洁 赵显莉 高虹)
    [技术方法]
    大鼠仙台病毒ELISA、间接免疫荧光和免疫印迹三种检测方法比较(向志光 佟巍 李雨函 刘先菊 张丽芳 王艳蓉 魏强)
    隔离器饲育SPF鸡微生物质量控制方法的建立(吴韬奋[1] 张瑞忠[1,2] 孙凤萍[3] 王佳乐[1])
    激光打孔技术在小鼠卵子冷冻保存上的运用(刘丽均[1] 郁丽丽[1] 王俊凤[1] 张艺宝[2] 李淼[3] 施美莲[3] 廖侃[3] 徐平[3])

    《中国现代医生》杂志征订启事
    [技术方法]
    不同剂量阿霉素致大鼠局灶节段硬化肾病模型的建立比较(马晓红[1,2] 何立群[1,2])
    家兔经皮枕大池穿刺方法及常见问题(梁少帅[1] 栾秀珍[1] 孟祥靖[2])
    [综述与专论]
    淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒感染实验动物的情况概述(李雨函 魏强)
    [专家论坛]
    Refining scientific procedures involving animals to reduce suffering and improve scientific validity(Elliot Lilley[1] Penny Hawkins[1] Maggy Jennings[1] Paul Littlefair[2] Nikki Osborne[1] Barney Reed[1])
    The development of laboratory animal legislation in the UK(Paul Littlefair[1] Maggy Jennings[2] Barney Reed[2])
    Laboratory animal welfare:status and resources(Kathryn Bayne)
    Xenobiotic effects in cancer related pathways-high throughput screening and proof of concept in animal models(Ursula E. Schumacher)

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