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文献检索:
  • 高效转化法定向进化里氏木霉的纤维素酶 免费阅读 下载全文
  • 优化了根癌农杆菌介导的里氏木霉的转化方法,得出转化的最适条件:共培养pH 5.3、共培养温度24℃、乙酰丁香酮浓度200μmol/L、根癌农杆菌OD660值0.8、里氏木霉孢子预萌发时间3 h。此时转化率为13 000个转化子(以107个里氏木霉孢子计),是未优化条件下的27倍以上。利用此高效转化法,结合强化纤维二糖水解酶基因II表达的操作,从324个转化子中筛选到了1株优良的里氏木霉转化子C10,发酵5 d后,纤维二糖水解酶活力达(122.44±5.91)U/m L,是初始菌株的5.4倍;滤纸酶活力达(28.92±2.45)IU/m L,是初始菌株的4.3倍。与初始菌株所产纤维素酶相比,转化子C10所产纤维素酶降解玉米秸秆和稻草的能力有明显的提高。本研究为里氏木霉的基因工程改造及其纤维素酶的定向进化提供了有价值的实验数据。
  • 醇脱氢酶的纯化、酶学性质及其不对称催化 免费阅读 下载全文
  • 为了研究木兰假丝酵母(Candida magnolia)中的醇脱氢酶(alcohol dehydrogenase)3(ADH3)的突变酶(AIDI)的纯化、酶学性质以及不对称还原合成(3R,5S)-6-氯-3,5-二羟基己酸叔丁酯的能力。首先对AIDI进行(NH_4)_2SO_4沉淀、透析以及DEAE Sepharose离子交换层析。将纯化后的酶用于最适温度、pH、有机溶剂耐受等酶学性质的研究,同时考察底物浓度对催化效率的影响。结果发现:通过纯化获得了电泳纯的AIDI。酶的最适温度为40℃,最适pH为7.0。该醇脱氢酶的热稳定性较好,对环境pH的变化不敏感,在pH 4~8之间较为稳定。部分金属离子对该酶的活性具有抑制作用,特别是Fe2+对其具有显著抑制作用。在0.1 mol/L、pH 7.0的Na_3PO_4缓冲液中,底物质量浓度为50 g/L,30℃转化24 h,转化率能达到94%。
  • 大片段两步同源重组敲除节杆菌肌酐酸脱氢酶基因质粒的构建 免费阅读 下载全文
  • 构建一种新型的含有大片段同源臂的重组质粒用来对节杆菌进行代谢工程的改造。使用PCR扩增线性化载体片段,并通过酶切获取同源重组大片段,利用一步克隆技术将上述两片段连接起来;通过PCR-targeting将目标基因替换,并利用酶切自连将插入的片段删除,最后成功得到目标质粒p UK-d IMP。构建的质粒通过2次同源重组将目的基因肌酐酸脱氢酶(IMPDH)成功敲除,且最后菌株不含有任何抗性,开辟了一种针对节杆菌而言新型的基因改造方法。其中IMPDH基因缺失的菌株积累目标产物环磷酸腺苷的能力比对照菌株高49.7%,达到了(9.01±0.20)g/L。
  • 真空低温工艺技术在黑胡萝卜花青素提取中的应用 免费阅读 下载全文
  • 通过单因素和正交试验优化了真空低温工艺技术提取黑胡萝卜花青素的工艺参数,比较了真空低温提取法和常压提取法对花青素提取的影响,利用色差检测技术建立了黑胡萝卜花青素提取过程颜色控制标准。结果表明:最优提取条件为提取温度35℃、液料比(L/kg)8∶1、提取时间100 min、真空度-0.05 MPa,在此条件下,黑胡萝卜花青素提取率为96.3%;提取温度对花青素提取影响最为显著,真空度影响最小。
  • 苹果渣中原花青素的提取分离条件的优化 免费阅读 下载全文
  • 采用单因素和正交试验优化了溶剂直接提取及微波辅助提取苹果渣中原花青素的提取条件。结果表明:溶剂直接提取苹果渣中原花青素的最佳提取条件为乙醇体积分数30%,料液比(g/mL)1∶12,浸提温度90℃,提取时间0.5h;微波辅助提取法提取苹果渣中原花青素的最佳提取条件为乙醇体积分数50%,料液比(g/mL)1∶9,微波功率为700W,提取时间3min。与溶剂直接提取法相比,微波辅助提取法能更省时、高效地提取苹果渣中的原花青素。
  • 玻璃珠破碎毕赤酵母条件的优化 免费阅读 下载全文
  • 以毕赤酵母的醇氧化酶(AOX)为指标,以玻璃珠破碎法为对象,建立一种简单易行的毕赤酵母细胞的破碎工艺。考察玻璃珠用量、振荡时间、细胞液体积对毕赤酵母释放醇氧化酶的影响,进而利用Box-Behnken设计组合优化这3种因素,以响应面模型和一个2阶多项式方程拟合了这3种影响因素和醇氧化酶比酶活的关系。结果表明:玻璃珠破碎毕赤酵母的最佳条件为0.23 g玻璃珠、1.04 m L细胞液、103 s振荡时间。在最佳破碎条件下,醇氧化酶比酶活为8.86 U/mg。确定了玻璃珠破碎毕赤酵母细胞的条件,而且操作简便,可以同时处理多个样品,为重组毕赤酵母的筛选提供了有效方法。
  • 生物转化高浓度甘油生产1,3-二羟基丙酮及分批发酵动力学 免费阅读 下载全文
  • 以生物柴油生产的高浓度副产物甘油为唯一碳源筛选甘油高耐受性1,3-二羟基丙酮(DHA)高产菌株,运用响应面与正交试验优化菌株产DHA条件,提高DHA产量。分子生物学鉴定表明:筛选的高产DHA菌种G40为芽胞杆菌属(Bacillus)菌株,DHA产量为29.46g/L。响应面分析和正交试验优化后,在甘油224.22g/L、K_2HPO_41.60g/L、NaCl0.5g/L、KH_2PO_40.5g/L、(NH_4)_2SO_40.5g/L、酵母膏1.60g/L和pH7.2、35℃、200r/min的条件下,G40菌株发酵60h产生DHA86.84g/L,比优化前提高了194.8%。实验建立了一种利用高浓度甘油高效率发酵生产DHA的方法。
  • 星点设计效应面法优化红花黄色素缓释微丸的制备工艺 免费阅读 下载全文
  • 以乙基纤维素为原料,制备红花黄色素缓释微丸,提高药物的稳定性。采用液中干燥法,以包封率、载药量为指标,通过星点设计效应面法选择出制备红花黄色素微丸的最优工艺:搅拌速率600 r/min,液体石蜡用量27m L,乙基纤维素用量0.36 g。在此条件下所得微丸圆整度良好,体外释放平稳。此工艺简单易行,效应面优化法建立的数学模型预测结果可靠。
  • 利用沼液培养海洋微藻湛江等鞭金藻 免费阅读 下载全文
  • 在限氮培养模式下,以额外补加氮磷至f/2培养基水平的1.0%(V/V)沼液海水培养基(1.0%NP)和不补加氮磷的1.0%(V/V)沼液海水培养基(1.0%)作为实验组,用f/2海水培养基作为对照,研究沼液对湛江等鞭金藻生长、光合系统Ⅱ(PSII)活性、碳水化合物积累以及脂肪酸成分的影响。结果显示:1.0%NP与f/2培养基培养湛江等鞭金藻在生长上无显著差异,但1.0%NP会使PSII活性降低更快,中性脂含量和脂肪酸成分中C18∶1的比例上升,这表明沼液对微藻有一定的胁迫。1.0%NP培养基培养的藻碳水化合物含量(53.3%)和产量(245.2 mg/L)比在f/2培养基中分别提高了30.3%和7.1%,表明添加沼液更有利于湛江等鞭金藻碳水化合物的积累。
  • 电絮凝法收集湛江等鞭金藻 免费阅读 下载全文
  • 建立了海洋微藻湛江等鞭金藻(Isochrysis zhangjiangensis)的电场絮凝收集方法。考察不同电极对絮凝率的影响,通过正交试验进行条件优化,分析了收集藻体的油脂含量及脂肪酸组成。结果表明:Al电极具有较高的絮凝率,但Fe电极具有较好的经济性。电流密度对絮凝率影响最大,其次是通电时间,最小是极板间距。最优电絮凝条件为电流密度12 m A/cm2、通电30 min以及极板间距2.0 cm,在此条件下,湛江等鞭金藻的絮凝率为92.7%,电絮凝过程能耗为2.0 k W·h/kg(以电收获微藻的干质量计)。电场絮凝和直接离心收集的藻体在油脂含量和主要脂肪酸组成及含量上均无明显差异。
  • 饲用凝结芽孢杆菌高密度发酵及高纯度菌粉的制备 免费阅读 下载全文
  • 对凝结芽孢杆菌的发酵工艺进行了研究,150 L发酵罐发酵44 h,最终发酵液活菌数达到了2.01×1010cfu/m L,芽孢形成率达到96.82%。3 m3罐中试,发酵时间为44 h,发酵液中的活菌数达到2.10×1010cfu/m L,芽孢形成率达到91.70%。发酵液离心后,收集菌液进行喷雾干燥以收获菌粉(进风温度160℃,出风温度80℃),菌粉收率为2.50%,芽孢收率86.07%。
  • 一种无稳定剂褐色乳酸菌饮料的研究 免费阅读 下载全文
  • 常规乳酸菌饮料通常使用果胶、羧甲基纤维素钠等稳定剂维持产品的稳定性,否则产品在货架期内容易出现蛋白质沉淀、分层等不稳定现象。本文中,笔者通过单因素和正交试验,以粒径为指标,研究了蛋白质含量、发酵时间和葡萄糖含量对乳酸菌饮料稳定性的影响。研究结果表明:当蛋白质质量分数为0.9%、发酵时间为60 h、葡萄糖添加量为8%时,乳酸菌饮品稳定性最佳。
  • 大规模微藻光生物反应器的研究进展 免费阅读 下载全文
  • 微藻同时具备CO2固定和有机废水生物净化的双重效果,且微藻生物质在食品、饲(饵)料、生物能源开发等领域受到广泛关注,然而高效的微藻光生物反应器是微藻大规模养殖的重要瓶颈问题之一。本文中,笔者综述了封闭式微藻光生物反应器的类型、基本结构及其优缺点,对开放式微藻光合反应器陆续被改善、研发和试用进行了介绍,同时对开发复合型微藻光合反应器以及采用封闭型微藻光合反应器制种和开放式光合反应器快速生产的微藻养殖模式进行了简述,以期为微藻的大规模培养提供一定参考依据。
  • 竹黄菌发酵生产竹红菌素的研究进展 免费阅读 下载全文
  • 竹黄作为名贵中药,其主要成分竹红菌素是优良的天然光敏药物。由于天然竹黄资源有限,通过竹黄无性型菌株发酵生产竹红菌素因而受到广泛关注。通过介绍竹黄无性型菌株的固态、液态发酵,分析了竹红菌素发酵生产的各种影响因子,并对竹红菌素合成诱导物质及高产菌株诱变筛选等进行了综述,为竹红菌素合成调控和发酵生产提供了参考。
  • [研究与开发]
    高效转化法定向进化里氏木霉的纤维素酶(方浩[1,2,3];邓禹[1,2];毛银;夏黎明)
    醇脱氢酶的纯化、酶学性质及其不对称催化(程书兰;魏淼;许琳;严明)
    大片段两步同源重组敲除节杆菌肌酐酸脱氢酶基因质粒的构建(童鹏;李楠;牛欢青;柳东;郭亭;应汉杰)
    真空低温工艺技术在黑胡萝卜花青素提取中的应用(郭炳其;魏朝丹;周树勇)
    苹果渣中原花青素的提取分离条件的优化(谢鲲鹏;那娜;邵静;佟少明)
    玻璃珠破碎毕赤酵母条件的优化(卢俊文;傅梦月;张建国)
    生物转化高浓度甘油生产1,3-二羟基丙酮及分批发酵动力学(李英东;张川;吴迪;张怡;陈军)
    星点设计效应面法优化红花黄色素缓释微丸的制备工艺(吕大庆;张丹丹)
    利用沼液培养海洋微藻湛江等鞭金藻(迟磊[1,2];姚长洪;王茜;薛松)
    电絮凝法收集湛江等鞭金藻(章表明;王加友;王大志;胥维昌)
    饲用凝结芽孢杆菌高密度发酵及高纯度菌粉的制备(张梁;辛瑜;唐旭彪;石孔泉)
    一种无稳定剂褐色乳酸菌饮料的研究(廖文艳;徐致远;刘振民)
    [专论与综述]
    大规模微藻光生物反应器的研究进展(刘玉环[1,2];黄磊;王允圃[1,2];阮榕生[1,2];郑洪立;巫小丹;万益琴)
    竹黄菌发酵生产竹红菌素的研究进展(章明晔;马燕军;雷秀云;田浩[1,2];王剑文)
    《生物加工过程》封面

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