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文献检索:
  • 环介导恒温扩增技术快速检测溶藻弧菌 免费阅读 收费下载
  • 溶藻弧菌是中国南部水产养殖业中弧菌病的最主要病原菌、其快速检测具有重要意义。根据溶藻弧菌外膜蛋白OmpK基因序列,设计一套引物.通过条件优化,成功建立了针对致病性溶藻弧菌的环介导恒温扩增检测技术(100p—mediated isothermal amplification,LAMP)。应用LAMP技术,在65℃温育1h的条件下扩增溶藻弧茵基因组DNA.琼脂糖凝胶电泳得到特异性梯度条带。该研究建立的LAMP法特异性检出致病性溶藻孤菌.其检测下限比PCR法低一个数量级.相当于n(cell)=38/mL的菌液浓度。灵敏度更高。综合分析表明,LAMP技术是快速、简易、实地诊断溶藻弧菌的理想工具。
  • 卵叶远志营养器官的结构及远志皂苷的组织化学定位和含量测定 免费阅读 收费下载
  • 应用植物解剖学、组织化学定位和高效液相色谱法,研究了卵叶远志各营养器官的结构、远志皂苷积累分布状态及含量变化。结果表明.卵叶远志的根包括周皮和次生维管组织两部分.周皮发达,次生韧皮部较厚,韧皮薄壁细胞为其主要成分。次生木质部中导管和纤维发达,导管分布密度较大。茎包括表皮、皮层、维管柱三部分,在皮层与韧皮部之间具有一圈排列紧密的厚壁细胞.推测这圈厚壁细胞具有质外体屏障作用.可保护茎组织免受干旱的伤害。叶为异面叶。根茎的结构表现为旱生特点。组织化学显示远志皂苷在根中分布在次生韧皮部和栓内层:在茎中分布在表皮、皮层和次生韧皮部细胞中:在叶中则分布在叶肉组织和表皮中。根的次生韧皮部为皂苷积累储存的主要场所。高效液相测定结果显示营养器官中都有远志皂苷元的积累.根中的含量高.茎叶中含量较低.说明卵叶远志地上部分也有药用价值。根据不同发育时期根和茎叶中皂苷元的动态变化趋势.建议在5月份(花果期)进行卵叶远志的采收。
  • 水溞基因组P450基因家族的分析 免费阅读 收费下载
  • 利用水溞基因组mRNA和氨基酸数据库对P450基因进行搜索和分析.结果显示:在水溞基因组中发现71个P450基因,它们分别属于15个P450家族和17个亚家族.是一个典型的多基因家族。以氨基酸相似度大于60%为标准对水溞P450基因进行分组.则71个P450基因中.16个为孤儿基因,不能被归入任何一组:其余55个可归入12个组,其中8个组,包含47条序列适合于正选择和基因转换分析。结果表明:有3个组,含22个基因显著受到正选择压力作用.其中的2个组.含18个基因有正选择概率大于95%的氨基酸位点228E或277T.228E和277T分别位于底物识别位点SRS2和SRS5;有5个组,包含19个基因显示显著的基因转换事件;既显著受到正选择压力作用,又参与基因转换的基因共12个:相反.检测出既没有受到显著的正选择压力作用.又没有基因转换的基因18个。可见.发生基因转换的基因与受到显著正选择的基因有高度的相关性:发生过基因转换的基因中63.2%都受到显著的正选择压力作用,同时,受正选择压力作用的基因中有54.5%发生了基因转换。此外.鉴定出20个不同的基序.其中有5条基序在90%以上的基因中出现。
  • 多核酶表达系统在HEK293细胞中对多药耐药相关蛋白(MRP1)的表达抑制作用 免费阅读 收费下载
  • 为了研究多核酶表达系统在HEK293细胞中对多药耐药相关蛋白表达抑制的作用.我们构建了含有20个可以自身切割的顺式作用核酶和10个靶向MRP1基因特定位点的反式作用核酶的多核酶表达系统。利用RT—PCR、Westem blot和MTT分析了多核酶系统分别与MRP1靶基因质粒和MRP1 全长基因质粒共转染的HEK293细胞。结果显示.多核酶表达系统能够明显降低荧光融合蛋白在HEK293细胞中的表达。RT—PCR分析表明.懈用靶mRNA降低程度与多核酶表达系统所含的反式作用核酶数目有关。Westernblot分析显示了与RT—PCR相似的结果。Mrrr分析表明,多核酶表达系统能够逆转由MRP1基因转染HEK293细胞产生的多药耐药性。结果提示.含有多个核酶的表达系统对MRP1基因的抑制效应优于单核酶的表达系统。因此.该策略可能用于基因治疗肿瘤或其他疾病.
  • EoRab43参与游仆虫细胞内大核周围的物质运输 免费阅读 收费下载
  • Rab家族蛋白是真核细胞内膜泡运输途径中重要的调节因子。EoRab43是八肋游仆虫中一种编码非典型Rab蛋白的基因。本研究依据已获得的EoRab43基因序列设计引物.从八肋游仆虫大核DNA中扩增了EoRab43基因的3’端153bp片段,即EoRab43 153bp(对应于EoRab43蛋白的C末端50个氨基酸,EoRab43C),构建重组表达质粒pGEX—EoRab43,53bp转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达.纯化后的融合蛋白GST—EoRab43C免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体。经检测,制备的抗体具有较高的效价及良好的特异性。利用制备的抗体对EoRab43在游仆虫细胞内进行免疫荧光定位.结果显示该蛋白主要定位于该生物细胞内大核染色体的周围。
  • 生长素介导OsRGP1和0sSuS参与水稻地上部基部向重性弯曲生长 免费阅读 收费下载
  • 在水稻幼苗被放平后,地上部重力响应部位(地上部基部)的上半部生长比下半部生长慢,从而导致地上部基部发生向上弯曲.发生不对称生长的向重性反应。通过抑制差减杂交(SSH)实验发现.水稻地上部基部向重性弯曲生长过程中,反复糖基化多肽OsRGP1和蔗糖合成酶OsSuS在基部上下部有不对称表达。我们还采用Realtime PCR开展进一步研究。实验结果显示OsRGP1和0sSMS的表达受到IAA的调控。通过生物信息学分析也发现OsRGPl和OsSuS的启动子上存在着生长素的调控元件.生长素极性运输抑制剂TIBA处理能够消除OsRGP1和OsSuS在向重性过程中的不对称表达.这进一步说明向重性过程中不对称分布的生长素介导了OsRGP1和OsSuS基因的不对称表达。另外.向重性反应过程中,检测到基部下半部的己糖浓度增加。因此,OsRGP1的不对称表达可能有助于下半部细胞壁多糖的积累,进而促进了下半部细胞壁的扩张。OsSuS不对称表达也有可能会引起己糖在上下半部的不对称分布。己糖和细胞壁多糖在下半部的积累可能在下部细胞扩张从而导致向重性弯曲生长中起一定的作用。
  • 抑郁症模型大鼠学习记忆能力变化研究 免费阅读 收费下载
  • 为探讨抑郁症发生发展过程中学习记忆能力的变化模式及其可能机制.分别采用21天慢性非预见性刺激法和嗅球切除法建立的抑郁症模型大鼠.运用旷场行为实验(open—field behavior)检测大鼠主动性活动能力,用Morris水迷宫法检测大鼠空间学习记忆能力,HPLC—UV法测定大鼠血清皮质醇含量。电生理法记录海马CA1区LTP与LTD,观察海马神经元的突触可塑性。结果显示:与对照组相比,两种模型的自主活动性、空间探索兴趣和学习能力都明显降低,而记忆的反馈功能没有明显的变化。同时.两种模型大鼠海马神经细胞的突触可塑性显著下降,血清皮质醇的含量则明显上升。提示两种建模方法均导致大鼠产生抑郁症状和学习能力障碍.但对记忆反馈功能无明显影响。
  • 偏凸-柱穗山羊草双二倍体SDAU18的细胞分子遗传学鉴定 免费阅读 收费下载
  • 综合利用细胞学、种子贮藏蛋白电泳、基因组原位杂交(GISH)和抗性接种鉴定相结合的方法.对偏凸-柱穗山羊草双二倍体SDAU18进行了鉴定。结果表明,SDAU18的根尖细胞染色体数目变异范围为52—56.在绝大多数根尖细胞染色体数目为56的SDAU18减数分裂中期I花粉母细胞fPMCMI)内可观察到28个二价体,在部分细胞中可观察到一定频率的单价体、三价体和四价体,平均染色体构型为2n=56=3.21I+19.78IIRing+6.50IIRod+0.01III+0.04IVRing+0.01IVRod;在SDAU18种子贮藏蛋白电泳图谱中,亲本偏凸山羊草和柱穗山羊草的多数特异带能够出现,SDAU18高分子量麦谷蛋白亚基图谱中既出现双亲的亚基谱带.也观察到新型亚基谱带:分别利用偏凸山羊草和柱穗山羊草基因组总DNA作探针.另一个亲本基因组总DNA作封阻。对SDAU18根尖细胞制片进行染色体原位杂交.在SDAU18的56条染色体中分别有14条出现绿色杂交信号:SDAU18是偏凸山羊草和柱穗山羊草的双二倍体,对小麦白粉病和条锈病均表现免疫,是一个在小麦品种遗传改良中具有重要利用价值的新型种质材料。
  • 栽培太子参块根中皂苷的组织化学定位及其含量变化 免费阅读 收费下载
  • 应用植物解剖学、组织化学定位及植物化学技术,研究了栽培太子参块根不同发育时期的结构特征与皂苷积累的关系。结果表明:太子参不定根的初生结构和次生结构类似一般草本双子叶植物根的特征。在成熟的块根中次生木质部约占80%,其中以木薄壁组织细胞为主,导管很少.次生韧皮部中也以薄壁组织细胞居多,从而形成纺锤状块根。组织化学定位显示,在根的初生结构中.皂苷分布在中柱鞘和初生韧皮部的薄壁组织细胞中。在次生结构与成熟块根中,皂苷分布在除木栓层及导管外的周皮及次生维管组织其它细胞中,其中次生韧皮部显色较深。植物化学检测结果表明,2月与7月块根的皮部中皂苷的含量高于木部,与组织化学结果一致;根头部的皂苷含量〉根尾部〉根中部。在块根的发育过程中,皂苷的含量存在高一低一高的动态特点,此种变化规律与其根系的发育特点相关。
  • 过氧化氢参与烟草叶片衰老调节的研究(简报) 免费阅读 收费下载
  • 叶片衰老是一个复杂的过程.多年来人们对叶片衰老的机制开展了大量的研究。许多研究证明叶片中H2O2的迅速积累与叶片的衰老密切相关^[1-3],然而,H2O2的积累是衰老的结果还是作为信号启动衰老?H2O2作为植物细胞的信号分子,调控一系列重要的生理生化过程,如系统获得抗性(SAR)、细胞衰老与程序化死亡(PCD)、气孔关闭、根的生长、细胞壁的发育等^[4]。H2O2参与脱落酸(A—BA)、甲基茉莉酸(MJ)诱导的水稻叶片衰老,且H2O2产生早于叶片衰老^[2,5]。
  • 康氏木霉REMI突变株的差异表达蛋白分析(简报) 免费阅读 收费下载
  • 纤维素占植物干重的35%-50%,是地球上分布最广、含量最丰富的碳水化合物,它的利用与转化对于解决目前世界能源危机、粮食短缺、环境污染等问题具有十分重要的意义。因此,产纤维素酶微生物的基因工程改造技术受到很大关注,成为当前研究热点之一。
  • 分子细胞生物学报编委会 免费阅读 免费下载
  • 《分子细胞生物学报》收取版面费的实施办法 免费阅读 免费下载
  • [研究论文]
    环介导恒温扩增技术快速检测溶藻弧菌(丁文超 胡健饶 史雨红 李明云 陈炯)
    卵叶远志营养器官的结构及远志皂苷的组织化学定位和含量测定(滕红梅 房敏峰 胡正海)
    水溞基因组P450基因家族的分析(张云华 王强 张鹏飞 刘静 陈建群)
    多核酶表达系统在HEK293细胞中对多药耐药相关蛋白(MRP1)的表达抑制作用(田生礼 刘桂云 郑硕 梁惠卿 刘士德 张建华)
    EoRab43参与游仆虫细胞内大核周围的物质运输(李江姣 聂宇 梁爱华 党旭红 王伟)
    生长素介导OsRGP1和0sSuS参与水稻地上部基部向重性弯曲生长(胡利伟 崔大勇 臧爱萍 Neill Steven 蔡伟明)
    抑郁症模型大鼠学习记忆能力变化研究(高良才 王玉婷 劳勋 王聪 王丰毅 袁崇刚)
    偏凸-柱穗山羊草双二倍体SDAU18的细胞分子遗传学鉴定(王玉海 鲍印广 郝元峰 袁园园 赵春华 王庆专 王洪刚)
    栽培太子参块根中皂苷的组织化学定位及其含量变化(彭华胜 刘文哲 胡正海 张玲)
    [研究简报]
    过氧化氢参与烟草叶片衰老调节的研究(简报)(江力 孔小卫 曹树青 张荣铣)
    康氏木霉REMI突变株的差异表达蛋白分析(简报)(胡仕凤 朱木兰 刘力行 唐俊 高必达 陈捷)

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