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  • 乳酸菌源有机硒对肝损伤小鼠脾脏脂质过氧化和NK细胞活性的保护效应研究 免费阅读 收费下载
  • 本文通过研究乳酸茵源有机硒干预CCl4致肝损伤小鼠脾脏NK细胞活性和脂质过氧化反应的变化,探讨该有机硒在抗损伤保护过程中的效应及其机制。分别选用60只健康成年小鼠,雌雄对半,随机分成对照组(C组),有机硒组(Se组),CCl4组、CCl4-有机硒保护组(CCl4-Se组),每组15只。通过腹腔注射CCl4诱发肝损伤后,分别在第2、4周检测脾脏NK细胞活性及其组织匀浆GSH—Px、CAT、SOD活性和MDA含量变化。结果显示,在整个实验期内,C组、Se组和CCl4-Se组脾组织匀浆GSH—Px、CAT和SOD活性均高于或明显高于CCl4组,Se和CCl4-Se组与C组比较除SOD活性在第4周有明显升高外均差异不显著;CCl4组小鼠脾脏MDA含量均显著高于C组、Se组和CCl4-Se组,而CCl4-Se组与C组接近,Se组较CCl4-Se组和C组低;Se组NK细胞活性最高,第4周明显高于C组,CCl4组最低且低于或明显低于CCl4-Se、Se和C组,CCl4-Se组与C组无明显差异。结果提示,乳酸茵源有机硒能够提高正常机体抗氧化能力,在干预肝损伤过程中,可以通过改善和提高脾组织抗氧化酶活性及NK细胞活性发挥积极有效的作用。
  • 水稻胚乳发育中淀粉体和蛋白体ATPase活性的动态变化 免费阅读 收费下载
  • 利用ATPase定位技术,对水稻品种(Oryza sativa L.cv.Minghui 63)胚乳细胞发育中后期淀粉体和蛋白体的ATPase活性进行了超微细胞化学定位。结果表明,在淀粉体内外膜上、淀粉粒间的通道上和淀粉体四周的无定形物上呈现显著的ATPase活性。蛋白体Ⅰ和蛋白体Ⅱ的膜上和四周的囊泡、小泡上均出现ATPase活性产物。另外,胚乳细胞的胞壁和质膜,糊粉层和亚糊粉层细胞的胞壁、质膜、细胞核和胞间连丝上也有定位的ATPase活性产物分布。根据ATPase活性产物分布特点,推测淀粉体内的网状通道是便于养分进入淀粉体内部的转运通道。淀粉体膜和蛋白体膜上的ATPase主要是为养分进入内部提供跨膜动力。
  • 增强p53、p21及抑制c—myc表达对MCF-7细胞增殖的协同抑制作用 免费阅读 收费下载
  • 为了探讨增强p53、p21基因表达水平和降低c—myc基因表达水平对乳腺癌细胞MCF-7.增殖的协同抑制作用,以及这些基因对细胞产生效应时的相互关系,本研究中首先构建了正义的p53、p21和反义的c—myc 3种真核细胞表达载体,并根据析因实验设计三种载体不同剂量组合。按照组合用质粒转染细胞,然后对转染细胞的增殖抑制率进行检测,并采用金正均Q值法、单因素方差分析中的LSD法、聚类分析法等统计学方法对结果进行统计分析。结果显示,不同量的p53、p21反义c—myc对MCF-7细胞的增殖均有抑制作用,抑制的程度各基因间存在差异。在各基因组合中,p21与反义c—myc,p53与反义c—myc联用具有协同作用,对MCF-7细胞的增殖产生更强的抑制,而p53与p21之间未显示出协同作用。对三基因协同结果进行聚类分析后,发现第一类组合协同作用最明显,第九类组合的抑制率最高。由此推测,作为抑癌基因的p53或CDK抑制基因p21高表达,同时原癌基因c—myc表达受到抑制,可相互协同显著增强对MCF-7细胞增殖的抑制作用。
  • 杜氏盐藻随机MAR文库的构建 免费阅读 收费下载
  • 核基质附着区(Matrix attachment region,MAR)是一段与核基质结合的DNA序列。为分离杜氏盐藻核基质附着区,我们首次构建了杜氏盐藻MAR文库。首先用0.5% Triton X-100裂解细胞,经30%和70% Percoll不连续梯度离心分离盐藻细胞核,再用二碘水杨酸锂(lithium diiodosalicylate,LIS)去除组蛋白和限制酶消化除去结合松弛的DNA片段,最后通过蛋白酶K消化和乙醇沉淀提取盐藻核基质DNA。采用4种限制酶酶切,T4DNA连接酶连至用相应限制酶酶切的pUC18载体上,转化E.coli JM109感受态细胞,挑选阳性克隆,构建MAR文库。部分测序分析表明,克隆的DNA片段具有明显的MAR特征.为进一步研究MAR对基因表达的调控作用及其作用机制提供了基础。
  • Rubisco和RCA在青菜叶绿体中的分布及病毒侵染对其细胞定位的影响 免费阅读 收费下载
  • 运用免疫金标电镜术观察了青菜叶细胞中光合作用关键酶Rubisco和Rubisco活化酶(RCA)的细胞化学定位,结果显示Rubisco和RCA免疫金颗粒主要分布于薄壁组织叶绿体的间质中,在基粒片层上很少,表皮的气孔保卫细胞和维管束薄壁细胞叶绿体内也有分布,在细胞质及线粒体等细胞器中无特异性分布。同时比较观察了感染芜菁花叶病毒(TuMV)的青菜叶绿体Rubisco和RCA免疫金标记结果,发现病组织中结构尚完整的叶绿体Rubisco和RCA标记率略有下降,而结构严重破坏的叶绿体中两种酶标记率分别仅为正常叶绿体的58.44%和64.67%,表明病毒侵染可导致Rubisco和RCA含量下降,影响寄主植物的光合作用。
  • DMSO及RA对GPI-80分子表达的不同影响 免费阅读 收费下载
  • 以往的研究表明GPI-80的表达可能与髓系细胞的分化相关。DMSO及RA是两种不同的中性粒细胞的诱导分化剂,均可刺激HL-60白血病细胞向中性粒细胞分化。GPI-80是人糖基化磷脂酰肌醇锚糖蛋白,被认为是潜在的β2-黏合素分子依赖的白细胞黏附的调节剂,主要在人中性粒细胞上表达。本研究通过RT—PCR、流式细胞仪及Western—blot分析,检测分化细胞的GPI-80表达,并分析GPI-80的表达与CD11b及CD71表达之间的关系。结果表明GPI-80在RA诱导的类中性粒细胞上只有mRNA水平上的微弱表达,用流式细胞仪和Western—blot分析均检测不到,且RA可抑制GPI-80的表达;相反GPI-80在DMSO诱导的类中性粒细胞上有明显的表达,且随DMSO的浓度增加及诱导时间的延长而增强。GPI-80的表达出现在CD11b上调表达及CD71下调表达之后,提示GPI-80表达与DMSO诱导分化的类中性粒细胞的成熟密切相关。RA不能明确诱导GPI-80的表达,反而抑制GPI-80的表达,提示可能两者诱导HL-60细胞分化时所激活的信号传递通路不同。
  • 川芎嗪合并硫酸镁治疗妊高征大鼠的疗效及机制探讨 免费阅读 收费下载
  • 为探讨川芎嗪合并硫酸镁治疗妊高征模型大鼠的疗效及其机制,应用L—NAME 7mg/kg/天尾静脉注射,连续4天,建立大鼠妊高征模型,采用川芎嗪合并硫酸镁(川+硫)治疗,连续3天。通过套尾法血压测量和24h尿蛋白测定,观察妊高征孕鼠分组治疗后的各组孕鼠血压、尿蛋白变化。并作新生鼠身长、体重和胎盘重量测定,光镜和透射电镜观察肝、肾和胎盘组织病理学及超微结构变化。结果显示,妊娠晚期给予L—NAME,可导致孕鼠血压升高,尿蛋白增加,幼鼠死胎及畸形发生率增加;单用硫酸镁、川芎嗪或两药合用后孕鼠血压、尿蛋白均显著降低(p<0.01,p<0.001),而(川+硫)组较另两组降低更显著(p<0.01,p<0.001);川芎嗪及(川+硫)治疗后能增加新生鼠身长、提高胎仔体重及胎盘重量(p<0.01);且后者尚能减少胎仔后肢短缩畸形率(p<0.001)。妊高征孕鼠肝细胞有散在的坏死灶;肾小球基底膜广泛增厚、肾小球血管内皮肿胀,肾小管上皮广泛水肿;胎盘蜕膜带、基带均增厚,滋养细胞表面的微绒毛减少;川芎嗪尤其(川+硫)治疗后肝细胞未见坏死灶,肾小球基底膜增厚减少;而且后者肾小球血管内皮形态基本正常,肾小管上皮细胞胞浆水肿减轻;胎盘病变明显减轻。上述结果表明,(川+硫)治疗妊高征孕鼠,效果优于单用硫酸镁或川芎嗪。妊高征孕鼠胎盘存在缺血、缺氧的病理改变;川芎嗪治疗组尤其(川+硫)治疗后肝、肾和胎盘病变明显减轻。
  • 绞股蓝人参皂甙的组织化学定位及其含量的变化 免费阅读 收费下载
  • 应用光镜技术、组织化学定位及植物化学方法,研究了人参皂甙在绞股蓝营养器官中的积累分布状态以及不同生长期、不同器官、不同性别之间的绞股蓝总皂甙含量的动态变化。结果表明,绞股蓝人参皂甙主要分布在营养器官的同化组织及韧皮部薄壁细胞中,厚角组织、表皮及周皮的栓内层也有少量分布,木质部和髓薄壁组织中无皂甙分布;叶中皂甙积累最多,茎次之,根最少。绞股蓝在营养生长期→花果期→枯萎期的生长发育过程中,其地上部分的皂甙含量呈现出低→高→低的变化趋势;叶的含量高于茎,雄株的含量高于雌株。从而认为在9—10月的花果期采收绞股蓝的地上部分而保留地下茎和根,有利于药材品质和产量的提高,又有利于药用资源的可持续开发利用。
  • 用小鼠血液淋巴细胞构建核移植重构胚的研究 免费阅读 收费下载
  • 本实验用小鼠血液淋巴细胞为核供体进行了核移植研究。用淋巴细胞分离液(比重1.088)分离出小鼠血液中的淋巴细胞,直接用作核移植供体细胞,采用胞质内注射法成功构建的重构胚经常规培养2h后,SrCl2激活处理6h,然后添加mM16培养液和小鼠输卵管上皮细胞饲养层共培养。把发育至早期囊胚阶段的重构胚转移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,添加ES细胞培养液继续培养。对孵化出的内细胞团进行消化,然后接种培养。结果显示,小鼠血液淋巴细胞可以支持体细胞核移植重构胚的发育,核移植重构胚2-细胞率41.03%(128/312),桑葚胚和囊胚发育率分别为9.29%(29/312),1.92%(6/312)。重构囊胚在小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上分离出2个内细胞团,分离率为0.64%(2/312)。实验证实利用小鼠血液淋巴细胞进行体细胞核移植是可行的,可用于深入研究。
  • 菹草类胡萝卜素提取物对人肝癌细胞QGY-7703凋亡的影响 免费阅读 收费下载
  • 分别用含10、20、40、60μmol/L的菹草类胡萝卜素提取物(CEPC)培养液处理人肝癌细胞(QGY-7703)48h、96h和144h,在这三个处理时间各剂量组对肝癌细胞的抑制率平均值范围分别为0.14%-23.07%、39,59%-70.61%和71.65%-87.01%。经10、20和40μmol/L的CEPC培养液处理肝癌细胞24h、48h和72h,用激光扫描共聚焦显微术(LSCM)观察细胞形态,出现了肝癌细胞数量明显减少,细胞体积缩小、皱缩变形,细胞核呈现“新月状”、条状甚至碎片状,细胞核中呈黄色的DNA面积较明显地减小等典型的凋亡细胞形态特征。以流式细胞术分析用CEPC处理肝癌细胞后各时相细胞的百分比,与对照组比较,用10μmol/L和20μmol/L浓度的CEPC处理肝癌细胞48h后,使细胞周期中的G0/G1期的细胞比例极显著增加(P<0.01),分别增加了23,8%和35.6%,而在G/M期没有明显的变化,在S期则相应减少。用LSCM测定了肝癌细胞内的Ca^2+浓度,与对照组比较,经20μmol/LCEPC处理48h后能引起细胞内Ca^2+浓度极显著上升(P<0.01),剂量组细胞内Ca^2+荧光强度为对照组的1.5倍。以上结果表明CEPC对人肝癌细胞QGY-7703的增殖具有明显的抑制作用,且在一定程度上呈时间-效应和剂量-效应依赖关系。在较短的时间内及使用较小的CEPC剂量能有效地诱导肝癌细胞凋亡,CEPC使肝癌细胞阻滞于G0/G1期发生凋亡。CEPC能极显著提高肝癌细胞内的Ca^2+浓度,提示Ca^2+浓度升高可能是CEPC诱导肝癌细胞发生凋亡的重要原因。本项研究结果为进一步研究和开发菹草类胡萝卜素的功能和价值打下了重要基础。
  • 盐胁迫条件下γ-氨基丁酸对玉米幼苗SOD、POD及CAT活性的影响 免费阅读 收费下载
  • 逆境下植物体内积累氨基丁酸(GABA)。盐胁迫严重影响玉米种子的萌发,而加入外源GABA可明显提高玉米种子的萌发率。外源GABA能迅速提高SOD、POD、和CAT这三种酶的活性。鉴于超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶是植物抗氧化保护系统中重要的组成部分,推测,盐胁迫条件下,GABA可通过提高保护酶系统活性而缓解盐胁迫对植物的伤害。
  • 鲤鱼(Cyprinus carpio)体细胞系的建立及其生物学特性分析(简报) 免费阅读 收费下载
  • 动物细胞的培养技术是1907年哈里逊在淋巴块中对蛙的神经板培养成功开始的,其后近一个世纪以来,陆续成功地培养了哺乳动物、昆虫等各种动物细胞,并广泛用于生物科学的各个分支。鱼类的细胞培养的系统研究和建系实践大约起始于60年代,被公认的真骨鱼类的第一个永久性的细胞系——虹鳟性腺细胞系(RTG-2)是由Wolf建立的。随后各种鱼类细胞系相继建立,涉及的组织来源有吻端、肾脏、卵巢、尾鳍、性腺、肝脏、胚胎、囊胚、原肠胚、鳍条等,同时也进行了细胞体外培养条件、
  • c—fos蛋白在白蚁婚飞时脑中免疫组织化学定位观察(简报) 免费阅读 收费下载
  • 在原癌基因家族中有一类可以被第二信使诱导的原癌基因,它们能对神经递质、激素等刺激作出反应进行表达,这类基因称为即刻早基因(immediate—early gene,IEG)。c—fos就是其中重要的一种即刻早基因。目前已经证实哺乳动物的性行为与其脑中的c—fos表达有关,c—fos特异性表达被认为是研究性行为时脑部神经细胞活动的重要指征,Joppa等人用此方法已经在鼠、仓鼠脑中定位出与性行为有关的神经活动区域。c—fos在昆虫的脑中也有表达,
  • [研究论文]
    乳酸菌源有机硒对肝损伤小鼠脾脏脂质过氧化和NK细胞活性的保护效应研究(陈龙 朱善良 曹萌)
    水稻胚乳发育中淀粉体和蛋白体ATPase活性的动态变化(周竹青 兰盛银 徐珍秀 杨泽敏)
    增强p53、p21及抑制c—myc表达对MCF-7细胞增殖的协同抑制作用(张海江 王楠 朱晓宇 桑建利 何大澄)
    杜氏盐藻随机MAR文库的构建(王天云 侯卫红 袁保梅 柴玉荣 侯桂琴 王建民 薛乐勋)
    Rubisco和RCA在青菜叶绿体中的分布及病毒侵染对其细胞定位的影响(洪健 王卫兵 胡东维 蒋德安 付东亚 陈集双)
    DMSO及RA对GPI-80分子表达的不同影响(傅君芬 武田裕司 仙道富士郎 荒木慶彦)
    川芎嗪合并硫酸镁治疗妊高征大鼠的疗效及机制探讨(方马荣 李继承)
    绞股蓝人参皂甙的组织化学定位及其含量的变化(刘世彪 林如 胡正海)
    用小鼠血液淋巴细胞构建核移植重构胚的研究(曹鸿国 张涌)
    菹草类胡萝卜素提取物对人肝癌细胞QGY-7703凋亡的影响(王海滨 张民 黄进 任丹丹 刘良忠 石嘉怿 李忠 张声华)
    盐胁迫条件下γ-氨基丁酸对玉米幼苗SOD、POD及CAT活性的影响(田小磊 吴晓岚 李云 张蜀秋)
    [研究简报]
    鲤鱼(Cyprinus carpio)体细胞系的建立及其生物学特性分析(简报)(孟凡华 尹洪滨 孙中武 陈维多)
    c—fos蛋白在白蚁婚飞时脑中免疫组织化学定位观察(简报)(苏晓红 奚耕思 张敏)
    《实验生物学报》封面

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