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文献检索:
  • 重铬酸钾-DNS比色法测定发酵液中乙醇含量
  • 发酵液中往往含有一些还原性物质,如葡萄糖等,用经典的重铬酸钾氧化比色法来测定发酵液中乙醇含量时,往往出现结果偏大的现象.为了测定发酵液中乙醇含量,在经典重铬酸钾氧化比色法基础上,使用DNS氧化比色法测定葡萄糖含量,修正乙醇含量的测定结果.统计分析发现,经改良的重铬酸钾-DNS比色法测定含葡萄糖的乙醇标准溶液时相对误差均值为0.95%,远小于传统的重铬酸钾氧化比色法的相对误差均值18.07%,在精密度相似情况下提高了准确度,更适宜用于测定含葡萄糖等还原性成分的发酵液中乙醇含量.
  • 电穿孔转染重组杆状病毒到昆虫细胞的研究
  • 目前转染细胞时常用阳离子脂质体如Cellfectin,这种方法成本高,效果不稳定,而用电穿孔转染外源基因到昆虫细胞的文献报道极为少见.构建重组杆状病毒基因组GFP/BAC,用电穿孔法和脂质体法转染到昆虫细胞Sf9中,比较两种方法的转染效率.研究发现,两者转染效率分别为86.14%和86.53%.两种转染方法的子代重组杆状病毒能够继续转染Sf9细胞,荧光强度无明显差异.电穿孔转染效率与脂质体转染接近,但电穿孔法操作简便,周期较短,成本很低.
  • ERK1/2在三倍体湘云鲫组织及胚胎中的表达分析
  • 在细胞信号网络中丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号传递途径起着极为重要的作用,控制着细胞多种生理过程,如细胞生长、发育、分裂、死亡等.ERK是MAPK家族重要的成员,通过检测三倍体湘云鲫胚胎和成体组织中ERK1/2的表达情况,初步研究ERK在鱼类发育中的作用.蛋白免疫杂交结果显示ERK1/2在三倍体湘云鲫的胚胎发育各个时期和组织中均有较高的表达,该结果表明ERK在鱼类发育的过程中发挥重要的作用.
  • Euprosthenops australis牵引丝蛋白的原核表达
  • 参照GenBank收录的牵引丝蛋白编码序列,经过密码子优化,人工合成3段cDNA序列:NT、CT和4Rep,由Ⅰ型限制性内切酶BsaⅠ和BspMⅠ介导无缝拼接,分别构建4RepCT、NT4RepCT、NT8RepCT和NT12RepCT重组模块.通过改造表达载体和优化培养温度,成功提高了4RepCT的表达量(30 mg/L).另外还首次成功表达NT4RepCT和NT8RepCT重组蛋白模块,表达量分别为21 mg/L和8.5 mg/L.4RepCT表达量的提高及NT4RepCT和NT8RepCT的成功表达证实了融合标签TRX有利于提高蛛丝蛋白的表达水平,为E.australis全长牵引丝蛋白的表达奠定了基础.
  • 香蕉钙调蛋白基因MaCAM在非生物胁迫下的表达分析
  • 为研究香蕉钙调蛋白基因MaCAM的功能,对香蕉幼苗进行盐、低温和干旱胁迫处理,利用荧光定量PCR技术分析香蕉根中钙调蛋白基因MaCAM在上述不同非生物胁迫条件下的表达特性.盐胁迫处理后MaCAM表达随时间延长为先增加后降低趋势,在处理4 h时表达量最高;低温胁迫处理后,MaCAM的表达量随温度降低呈梯度增加,在温度降至5℃时表达量在处理范围内达最大值;干旱胁迫处理后,MaCAM的表达量随胁迫程度增加也是呈梯度增加,重度干旱胁迫时在处理范围内表达量最高.说明香蕉中的钙调蛋白基因具有响应非生物胁迫的能力,可能在香蕉适应盐、低温和干旱等胁迫逆境中发挥重要作用,参与了香蕉幼苗抗逆性调控.
  • 红梨PybHLH基因过表达提高烟草NaCl抗性的研究
  • 为探究过表达云南红梨bHLH转录因子对烟草抗盐性的影响,从红梨红色果皮中分离了bHLH转录因子基因PybHLH.亚细胞定位表明PybHLH蛋白定位于细胞核.以转基因PybHLH烟草和野生型烟草为材料,进行了NaCl胁迫对转基因PybHLH烟草生理生化影响研究及其相关酶基因的表达分析.表明PybHLH转基因烟草具有一定的耐盐性,一方面表现为随着盐胁迫时间延长,PybHLH转基因烟草中总可溶性糖、可溶性总蛋白和游离脯氨酸含量的增加,H2O2含量降低;另一方面表现为脯氨酸生物合成关键酶基因P5CS、抗氧化相关基因MnSOD、CuZn-SOD和POD、胁迫相关基因HSP和HSP cherpron和ABA抗盐信号途径基因NAC等均呈上调表达趋势.PybHLH的过表达提高了烟草的耐盐性,这将为进一步研究植物的耐盐机制及耐盐植物新品种的开发奠定基础.
  • 外源基因转染山羊体细胞的整合效率研究
  • 为了探讨影响山羊体细胞中外源基因整合效率的因素,采集胎羊和小羊皮肤并制备成纤维细胞,采用"Lipofectamine LTX"脂质体转染试剂包埋外源基因,分别导入上述细胞中,比较同一种外源基因载体(人凝血因子Ⅸ)转染至不同个体和类型的羊细胞,以及不同载体(人凝血因子Ⅸ、人转铁蛋白和牛催乳素)转染至同一个体羊细胞的整合效率的差异.通过药物筛选得到单细胞簇,经定量PCR计算外源基因的整合效率.同一种外源目的基因载体转染小羊成纤维细胞的整合效率显著高于胎羊成纤维细胞(P〈0.05);而不同目的基因载体转染同一个体羊细胞,其细胞的整合效率与转染载体的片段大小有关.由此可知,小羊成纤维细胞外源基因整合频率优于胎羊细胞,且载体片段的大小影响外源基因转染的整合频率.
  • 利用氨基酸结构倾向性预测固有不规则蛋白质
  • 为了降低固有不规则蛋白质预测模型中特征矩阵的稀疏性,提高预测模型的性能,提出一种利用氨基酸结构倾向性预测固有不规则蛋白质的方法.利用氨基酸结构倾向性将20种氨基酸进行分类,构建氨基酸简化集合,从间接角度提取氨基酸序列中蕴含的不规则结构特征,利用新的简化集合重新描述氨基酸序列,构建固有不规则蛋白质预测模型.预测结果表明,基于氨基酸结构倾向性的预测模型能够有效地挖掘氨基酸结构倾向性中隐藏的不规则结构特征信息,提高固有不规则蛋白质预测模型的预测精度.
  • 多裂碎米荠内生真菌隐孢丛赤壳菌C2代谢产物研究
  • 从多裂碎米荠(Cardamine multijuga)内生真菌隐孢丛赤壳菌Cryphonectria radicalis C2的代谢产物中分离得到两个化合物,经NMR、MS等现代谱学方法分别鉴定为蒽茜素(skyrin)(1)和大黄素(emodin)(2).活性测定结果表明,两个化合物对秀丽隐杆线虫没有杀虫活性.但蒽茜素对小麦根腐病菌禾旋孢腔菌和稻恶苗藤仓赤霉菌具有良好的抗真菌活性,而大黄素对禾旋孢腔菌、藤仓赤霉菌和魔芋镰刀菌等7株植物病原菌均具有良好的抗菌效果.
  • 乌鲁木齐雅玛里克山土壤动物群落结构及其多样性研究
  • 为了查明不同海拔高度对土壤动物群落多样性及其时空动态的影响,对乌鲁木齐雅玛里克山6种不同海拔高度样带土壤动物群落进行了调查分析,以探讨雅玛里克山土壤动物群落结构与不同海拔高度之间的关系.结果表明,共获得大、中小型土壤动物7 375只,隶属于6门16纲35目,其中真螨目(52.28%)和弹尾目(15.61%)为优势类群,共占总捕获量的67.89%,而寄螨目(8.37%)、三肠目(7.78%)、膜翅目(2.74%)、茅线目(1.53%)、双翅目幼虫(1.48%)、垫刃目(1.27%)、鞘翅目(1.11%)及半翅目(1.07%)等8类为常见类群,占总捕获量的25.35%,其余的25类为稀有类群,占总捕获量的6.76%.在6种不同海拔样带土壤动物个体数和类群数之间存在显著差异(P〈0.05),个体数顺序为:样带A〉样带B〉样带C〉样带E〉样带D〉样带F,而类群数顺序为:样带A〉样带B〉样带C〉样带D〉样带E〉样带F.3个不同季节有明显的差异(P〈0.01),其个体数依次为秋〉春〉夏.在6种不同高度样带和不同生境土壤动物群落多样性指标之间存在差异(P〈0.05).组间聚类和排序结果表明,将6种不同海拔高度生境分为山底生境型、山中生境型及山顶生境型等三大类型.
  • 我国楯螺科一新记录——平边笠贝(Ferrissia parallelus Haldeman,1841)
  • 我国对楯螺科种类的研究很少.在湖北保安湖,以及江西省南昌市艾溪湖、前湖,德安县共青城和庐山等地湖泊、池塘、溪流生境发现该科在我国的一新记录种平边笠贝Ferrissia parallelus,并对其贝壳形态、齿舌和栖息生境作了详细描述.目前,我国大陆已记录该科物种4种.
  • 干扰livin基因对胃癌细胞SGC7901增殖的影响
  • 根据我国西北部胃癌发病率高的特点,通过RNA干扰技术,抑制胃癌细胞SGC7901的livin基因表达后,采用RT-PCR和细胞生长曲线法,分析胃癌细胞SGC7901的恶性生长、增殖特性.发现成功沉默livin基因后,SGC7901的生长速度明显减慢、恶性表型减轻.抑制livin基因的表达可以作为治疗胃癌的潜在靶点.
  • NIRF可抑制乙型肝炎病毒在水动力法转染HBV小鼠模型中的复制及表达
  • 目前对NIRF(Np95/ICBP-90 like RING finger protein)的研究正朝着细胞癌变进程以及表观遗传学的方向发展,但在体内NIRF对乙型肝炎病毒(HBV)的复制及表达的影响,目前尚不明确.通过高压水动力法转染HBV小鼠模型,不同时间点收集血液和肝组织标本,荧光定量PCR检测血清及肝组织中病毒载量,WesternBlot检测肝组织HBc(hepatitis B virus core protein)表达,ELISA检测血清HBeAg表达,并通过免疫组化染色检测HBsAg、HBcAg在肝组织中的定位及表达.小鼠转染pAAV-HBV1.3和NIRF以后,血清及肝组织病毒载量降低(n=3,P〈0.05),HBc蛋白及HBV相关抗原的表达受到抑制,说明在水动力法转染HBV小鼠模型中NIRF对HBV的复制及表达起到抑制作用,期待能为后续的HBV致病机理及治疗药物的研究与开发提供支持与帮助.
  • 流感病毒NS1蛋白稳定表达的A549细胞系建立
  • A型流感病毒的NS1(Nonstructurol 1 protein,NS1)蛋白是病毒复制、毒力等的重要调节蛋白.运用RT-PCR方法扩增A/Beijing/501/2009(H1N1)流感病毒NS1基因,克隆至真核表达载体pCMV-HA,用Lipofectamine2000将线性化pCMV-HA-NS1与neo基因共同转染A549细胞,通过G418筛选获得阳性重组细胞,并采用PCR、RT-PCR、Western blot技术检测重组细胞中NS1蛋白的表达,通过免疫荧光技术观察NS1蛋白在细胞中的定位.PCR、RT-PCR检测显示NS1基因成功整合进入细胞基因组,并转录为mRNA;Western blot检测显示重组细胞系稳定表达NS1蛋白,免疫荧光显示NS1蛋白定位于细胞核内.表明通过G418筛选,成功构建稳定表达NS1蛋白的重组A549-HA-NS1细胞系,且NS1蛋白定位于细胞核内,为进一步研究NS1蛋白的生物学功能奠定基础.
  • ATF-2的致癌与抑癌双重功能
  • 激活转录因子-2(activating transcription factor-2,ATF-2)是碱性亮氨酸拉链(basic leucine zipper,bZIP)蛋白家族中与特定序列相结合的DNA结合蛋白,在调控正常细胞的生长发育、应激反应、DNA损伤应答中发挥作用.ATF-2需形成同二聚体或与其他bZIP蛋白如c-Jun形成异二聚体而发挥转录活性.ATF-2具有致癌与抑癌双重功能,它的亚细胞定位与之具有相关性,PKCε可影响ATF-2的亚细胞定位,从而决定其功能.ATF-2的致癌作用与其核内定位相关,而ATF-2胞浆定位则发挥肿瘤抑制功能.此外,ATF-2表达的改变以及亚细胞定位与肿瘤的分期和预后也密切相关.
  • 登革病毒感染的检测技术研究进展
  • 登革病毒(dengue virus,DENV)是引起登革热(dengue fever,DF)的病原体,经蚊叮咬而传播疾病.DF主要流行于热带和亚热带地区.目前,DF已经发展成一个日益严重的全球性公共卫生问题.2012年,DF被列为全球最重要的蚊虫传播性疾病.快速而准确的针对DENV感染的检测技术能够有效地控制DF的爆发及减少死亡病例.目前DENV感染的检测技术主要有病毒分离培养、分子生物学诊断及血清学诊断三类,三类检测技术各有优缺点,应该根据具体情况选用适当的检测手段.
  • BCL9与肿瘤及肿瘤靶点治疗研究
  • Wnt信号传导通路与肿瘤的关系是近年来肿瘤研究的热点,该通路包含许多信号成员,其中BCL9是近年来该通路上发现的新的癌基因,其在多种Wnt信号通路失调肿瘤中的异常表达表明其与肿瘤的发生、发展有密切关系.而针对Wnt信号通路不同基因靶点的高特异性基因药物开发以及肿瘤的分子诊断也相继出现,尤其是针对BCL9与β-catenin作用界面的小分子抑制剂基因药物的开发更是引起广泛的注意.现就BCL9及其与肿瘤的关系和BCL9基因为靶点的肿瘤基因治疗等三方面做一综述.
  • 靶向微管抗肿瘤药物研究进展
  • 微管由微管蛋白组成,在细胞分裂、细胞内物质运输、信号传递、维持细胞形态等过程中起着重要作用.一些干扰微管功能的化合物可使细胞停滞在有丝分裂期而抑制细胞增殖.相对于正常细胞,肿瘤细胞有丝分裂异常频繁,以微管作为抗肿瘤的靶点已成为研究热点.作用于微管的微管蛋白抑制剂通过抑制微管蛋白的聚合促进微管解聚或者抑制微管解聚促进微管蛋白聚合来破坏微管动态平衡、干扰肿瘤细胞纺锤体形成、阻断细胞分裂、抑制肿瘤增殖,现就微管蛋白抑制剂的研究进展作一综述.
  • 《生命科学研究》征稿简则(2013年1月修订)
  • 1总则 《生命科学研究》是由中华人民共和国新闻出版署、科技部批准创办的,国内外公开发行的反映生命科学领域中最新研究成果的中文核心期刊.本刊为双月刊,大16开本,6印张,国内定价18元,国内标准刊号:CN43—1266Q,国际标准刊号:ISSN1007—7847,CODEN:SKYAFL,国内邮发代号:42—172,国外发行代号:DK43008.本刊已经进入包括北大《中文核心期刊要目总览》(2011版)、中国科学引文数据库(CSCO)、中国科技论文统计源期刊数据库、中国核心期刊(遴选)数据库、中国期刊网、美国《化学文摘》、俄罗斯《文摘杂志》等国内外15家重要检索数据库.
  • [研究论文]
    重铬酸钾-DNS比色法测定发酵液中乙醇含量(何川 章登政 张俊 杨肖 苏颖 周蓬蓬 余龙江)
    电穿孔转染重组杆状病毒到昆虫细胞的研究(陈卫东 杨靖佳 井申荣 曾韦锟 黄芬)
    ERK1/2在三倍体湘云鲫组织及胚胎中的表达分析(罗仲文 蒋明贵 周勇华 文胜 汪妹 刘少军 肖亚梅)
    Euprosthenops australis牵引丝蛋白的原核表达(张秀丽 陈格飞 林瑛 李佳 孟清)
    香蕉钙调蛋白基因MaCAM在非生物胁迫下的表达分析(程晓培[1,2] 徐碧玉[2] 刘菊华[2] 贾彩红[2] 张建斌[2] 苗红霞[2] 金志强[2,3])
    红梨PybHLH基因过表达提高烟草NaCl抗性的研究(崔道雷[1] 张晓东[1] 徐慧妮[1] 陈丽梅[1] 舒群[2] 李昆志[1])
    外源基因转染山羊体细胞的整合效率研究(蔡琳琳[1,2] 蔡勤[1,2] 许淼[1,2] 黄英[1,2])
    利用氨基酸结构倾向性预测固有不规则蛋白质(陈若雷 董彦生 贺波 冯伟兴)
    多裂碎米荠内生真菌隐孢丛赤壳菌C2代谢产物研究(张昌飞[1] 任晓光[1] 赵春安[1] 刘亚君[2] 李海燕[1] 魏大巧[1])
    乌鲁木齐雅玛里克山土壤动物群落结构及其多样性研究(吾玛尔·阿布力孜 阿布都如苏力·吐孙 吴松林)
    我国楯螺科一新记录——平边笠贝(Ferrissia parallelus Haldeman,1841)(甘武[1] 谢广龙[1] 欧阳珊[1] 梁彦龄[3] 吴小平[1,2])
    干扰livin基因对胃癌细胞SGC7901增殖的影响(刘敏丽[1] 魏晓丽[1] 崔轶霞[2] 成延萍[1] 杜雨柔[2] 韩振奎[1])
    NIRF可抑制乙型肝炎病毒在水动力法转染HBV小鼠模型中的复制及表达(胡斌[1] 周丹琳[1] 宣艳艳[1] 段昌柱[1,2])
    流感病毒NS1蛋白稳定表达的A549细胞系建立(李志辉[1] 曾琳姣[2] 王慧煜[1] 梅琳[1] 刘永飞[2] 韩雪清[1])
    [研究进展与综述]
    ATF-2的致癌与抑癌双重功能(高妍 周雪宏 高文君 李淑艳)
    登革病毒感染的检测技术研究进展(王艳红[1] 宝福凯[1] 柳爱华[2])
    BCL9与肿瘤及肿瘤靶点治疗研究(吴帅 简斌)
    靶向微管抗肿瘤药物研究进展(谭小宁 金芳 李志超 罗志勇)

    《生命科学研究》征稿简则(2013年1月修订)
    《生命科学研究》封面

    主管单位:湖南师范大学

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