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  • microRNA-21转染的心肌细胞移植对低温条件下心力衰竭大鼠的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨microRNA-21对低温条件下心力衰竭大鼠的影响。方法:利用阿霉素及气候箱建立常/低温条件下心力衰竭大鼠模型,以心功能、心肌组织凋亡率及病理改变作为建模成功的观察指标。采用定量荧光PCR(qRT-PCR)检测各组心肌组织microRNA-21的表达。体外培养新生大鼠心肌细胞,标记Brdu,构建过表达microRNA-21的重组慢病毒表达载体并转染人心肌细胞。建模成功后将低温条件下心力衰竭的大鼠随机分为3组,分别注射转染了过表达microRNA-21的重组慢病毒表达载体的心肌细胞(I组)、单纯心肌细胞(II组)和DMEM培养基(III组)。超声心动图检测各组心功能。处死大鼠,留取心脏标本进行HE病理染色及免疫组化检测。结果:低温条件下心力衰竭大鼠(d组)的心功能低于常温条件下心力衰竭大鼠(C组);C组明显低于常温条件下正常大鼠(a组)。a组的心功能与低温条件下正常大鼠(b组)无明显差异。d组的心肌组织凋亡率高于C组;C组明显高于a组。a组的心肌组织凋亡率与b组无明显差异。microRNA-21在C组心肌组织中的表达低于a组;microRNA-21在d组心肌组织中的表达低于C组;microRNA-21在b组心肌组织中的表达低于a组;Ⅰ组microR-NA-21的表达高于Ⅱ组(P〈0.05);超声检测心功能提示Ⅰ组和Ⅱ组的心功能障碍轻于Ⅲ组(P〈0.05),尤以I组更显著(P〈0.05);免疫组化检测显示,移植的心肌细胞在移植区存活;HE染色显示Ⅰ组和Ⅱ组的心力衰竭病理变化比Ⅲ组明显减轻(P〈0.05),尤以Ⅰ组更显著(P〈0.05)。结论:心肌细胞移植于低温条件下心力衰竭大鼠能改善心功能,减轻心肌组织的心衰病理变化,其中microRNA-21转染人心肌细胞后移植效果更显著,为microRNA-21未来诊断及治疗低温条件下心力衰竭提供了新思路。
  • 短链酰基辅酶A脱氢酶在大鼠心脏发育中的表达及其与心肌肥厚的关系 免费阅读 收费下载
  • 目的:研究大鼠心脏发育过程中短链酰基辅酶A脱氢酶(short-chain acyl-CoA dehydrogenase,SCAD)的表达变化规律,并探讨其与高血压大鼠心肌肥厚的关系。方法:观察不同时期Wistar大鼠和不同周龄自发性高血压大鼠心肌组织的SCAD蛋白表达及酶活性变化,检测大鼠的血清和心肌游离脂肪酸含量。结果:与胚胎期19dWistar大鼠组比较,出生后1d、2周、6周及16周龄Wistar大鼠组心肌的SCAD蛋白表达及酶活性增加,血清和心肌游离脂肪酸含量明显减少,二者之间呈负相关,其中,从2周龄Wistar大鼠组开始差异有统计学意义。与周龄匹配的WKY大鼠组比较,2周龄自发性高血压大鼠组收缩压尚未升高,6周龄及16周龄自发性高血压大鼠组收缩压显著增高;各时点自发性高血压大鼠组的左室重量指数均明显增高,提示自发性高血压大鼠在血压升高之前,已经发生了明显的心肌肥厚。与周龄匹配的WKY大鼠组比较,2周、6周及16周龄自发性高血压大鼠组心肌的SCAD蛋白表达及酶活性明显下降,血清和心肌游离脂肪酸含量明显增加,呈显著负相关。结论:(1)SCAD蛋白表达随大鼠心脏的生长发育逐渐上调,可能与心脏对脂肪酸的利用增加密切相关。(2)SCAD的蛋白表达及其酶活性显著下降,可能是导致自发性高血压大鼠肥厚心肌能量代谢“胚胎型再演”的分子基础。
  • 软脉降脂合剂干预动脉搭桥术内皮细胞损伤的研究 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察软脉降脂合剂对兔动脉搭桥术后内皮细胞功能的影响,探讨软脉降脂合剂在动脉搭桥术后再狭窄发生过程中的防治作用,以及中药治疗冠状动脉搭桥术(CABG)后再狭窄的可能作用机制。方法:新西兰大白兔随机分为4组:模型组、阿司匹林对照组、软脉降脂中剂量组和软脉降脂高剂量组,行右侧颈动脉搭桥术。术后给药灌胃8周后,取抗凝血用流式细胞仪检测循环内皮细胞(CECs),取血清用ELISA检测P-选择素和细胞间黏附分子1(ICAM-1)水平。结果:各给药组和模型组比较,CECs相对比例、P-选择素和ICAM-1明显降低,差异有统计学意义(P〈0.05)。软脉降脂合剂2组与阿司匹林对照组比较差异也有统计学意义(P〈0.05)。结论:中药软脉降脂合剂能够降低动脉搭桥术后的CECs、P-选择素和ICAM-1水平,有助于改善CABG术后内皮细胞的功能。
  • 《中国病理生理杂志》第六届编辑委员会第一次常务编委会在广东韶关召开 免费阅读 免费下载
  • 借中国病理生理学会第九届三次常务理事会召开之际,《中国病理生理杂志》第六届编辑委员会第一次常务编委会于2012年11月25日在广东韶关召开。在韶关参加中国病理生理学会常务理事会、中国病理生理学会炎症发热感染低温专业委员会和中医专业委员会第13届联合学术交流会的常务编委们出席了这次会议。主编陆大祥教授就近年来杂志的工作发表总结报告,他首先对中国病理生理学会、编委会的全体专家、特邀审稿专家及长期支持和关心杂志的社会各界人士表示衷心的感谢,同时对杂志取得的成绩和存在的问题作了介绍;随后编辑部主任胡巢凤教授汇报了编辑部的工作、管理和网站建设情况。与会专家对杂志的现状和发展进行了热烈讨论,专家们充分肯定了杂志近年来取得的显著成绩,并对如何进一步提高杂志的质量和影响力提出了宝贵的建议。这对《中国病理生理杂志》今后的发展将起到有益的促进作用,推动杂志迈向新的台阶。
  • 西洋参茎叶总皂苷通过抑制过度内质网应激减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察西洋参茎叶总皂苷(PQS)对大鼠心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的保护作用,并从内质网应激(ERS)的角度探讨其可能的分子机制。方法:采用SD大鼠心肌I/R模型,随机分为正常对照组、模型组与药物预处理组,检测血流动力学及血清心肌肌钙蛋白T(cTnT)含量,以氯化三苯基四氮唑(TYC)和伊文思蓝双染法检测心梗面积,采用HE染色和TUNEL法分别评估心肌病理损伤和心肌细胞凋亡程度,Westernblotting法检测心肌组织凋亡调节因子以及内质网应激相关蛋白的表达。结果:与I/R组相比,PQS+I/R组平均动脉压降低32.O%(P〈0.05),左室4-dp/dt。。分别升高64.0%和35.0%(P〈0.05),血清cTnT含量降低53.3%(P〈0.05),坏死面积/缺血面积(AN/AAR)百分比降低65.5%(P〈0.05),心肌细胞凋亡率降低54.9%(P〈0.05);心肌组织病理损伤程度减轻;抗凋亡蛋白Bcl-2表达升高110.0%(P〈0.05),促凋亡蛋白Bax表达降低47.8%(P〈0.05),钙网蛋白(CRT)表达降低43.4%(P〈0.05),C/EBP同源蛋白(CHOP)和剪切后的caspase-12蛋白表达分别降低38.6%和23.7%(P〈0.05)。结论:PQS可显著减轻大鼠心肌I/R损伤,其机制与降低I/R诱导的CRT过表达,抑制CHOP、caspase-12等内质网凋亡通路激活,从而抑制过度ERS介导的细胞凋亡有关。
  • Ghrelin对糖尿病大鼠下丘脑弓状核胃牵张敏感神经元放电活动及胃运动的调控 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察链脲佐菌素(STZ)所致糖尿病(DM)大鼠下丘脑弓状核(Arc)胃牵张(GD)敏感神经元放电活动及胃运动改变,探讨ghrelin对DM大鼠下丘脑ArcGD敏感神经元放电活动和胃运动的影响。方法:采用STZ腹腔注射诱导DM大鼠模型;通过细胞外记录神经元单位放电和在体胃运动方法,观察ghrelin及其受体阻断剂[D-Lys^3]-GHRP-6对DM大鼠下丘脑ArcGD敏感神经元自发放电活动和胃运动的影响;应用real-timePCR和荧光免疫组化方法,探讨DM大鼠Arc内ghrelin受体(GHS-Rla)mRNA及其免疫阳性物的表达。结果:在正常大鼠Arc记录到的98个GD敏感神经元中,64.3%为GD兴奋性(GD-E)神经元,35.7%为GD抑制性(GD-I)神经元。在63个GD-E神经元中,Arc微量注射ghrelin可使其中73.0%神经元兴奋,其放电频率与生理盐水组比较显著增加(P〈0.05);而在35个GD-I神经元中,Arc微量注射ghrelin可抑制其中60.0%神经元,放电频率显著降低(P〈0.01);ghrelin改变GD神经元放电效应可被ghrelin受体阻断剂[D-Lys^3]-GHRP-6阻断(P〈0.05);在DM大鼠,Arc记录到的66个GD敏感神经元中有56.1%为GD-E神经元,43.9%为GD-I神经元。Arc注射ghrelin可兴奋其中35.1%GD-E神经元,放电频率与生理盐水比较显著增加(P〈0.05);而在29个GD-I神经元中,ghrelin可抑制其中21个神经元(72.4%),放电频率显著降低(P〈0.01)。与正常大鼠比较,DM大鼠ArcGD敏感神经元中的GD-E和GD-I比例无显著改变(P〉0.05),但ghrelin使GD-E神经元兴奋的比率明显降低(P〈0.05),放电频率平均增加率也显著下降(P〈0.05);但ghrelin使GD-I神经元抑制比率和放电频率平均减少率均无显著改变(P〉0.05)。在体胃运动研究结果显示,Arc微量注射ghrelin,可显著促进正常和DM大鼠胃运动,且呈显著量效关系(P〈0.05,P〈0.01),但ghrelin对正常大鼠的促胃运动作用显著强于其对DM大鼠的作用(P〈0.05),[D-Lys^3]-GHRP-6可完全阻断ghrelin该作用。Real-timePCR研究结果显示,DM大鼠下丘脑ArcGHS-RIamRNA表达较正常大鼠明显减少(P〈0.05);免疫荧光研究进一步证实DM大鼠下丘脑ArcGHS—R1a免疫阳性物表达较正常大鼠明显减少(P〈0.05)。结论:下丘脑Arcghrelin参与DM大鼠GD敏感神经元自发放电活动,并参与胃运动的调控,该效应可能是通过作用于ghrelin受体而实现的。
  • 转录因子“足迹"编码一部庞大的人类调控“辞典” 免费阅读 免费下载
  • 调控因子与基因组DNA的结合能够保护相关的基因序列不被胰脱氧核糖核酸酶(DNaseI)剪切,并留下具有核苷酸解析度的“足迹(footprint)”。Neph等用基因组DNaseI足迹法处理41种不同的细胞和组织,检测了4500万个位于调控区的转录因子占位事件(代表840万个不同短序列元件的差异结合)。他们发现这些小的基因组序列区间(粗略估计两倍于外显子的长度)编码了一系列DNA结合蛋白识别的保守序列,使人类顺式调控“辞典(1exicon)”的容量几乎增加一倍。他们还发现影响等位染色质状态的遗传性变异体集中在这些“足迹”中,并优先被遮蔽而免于DNA甲基化。高分辨率的DNaseI剪切模式反映了进化在核苷酸水平上的保守,并烙下了DNA和蛋白质界面的结晶拓扑学印记,提示在进化过程中转录因子结构已经在基因组DNA序列中留下了印记。他们据此发现了一个50bp的“足迹”序列,该序列能在数以千计的人类启动子中精确地定位转录起始点。最后,他们还揭示了一个宏大的调节因子识别基序的集合,这些识别基序无论是在序列上还是在功能上都高度保守,并且表现出细胞选择性的占位模式,类似于大部分与发育、分化和多能性相关的调控因子。
  • p-p38MAPK在A2AR敲除新生小鼠缺氧缺血脑区的表达及意义 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨p-p38MAPK在腺苷A24受体敲除(A24R^-/-)新生小鼠缺氧缺血脑区的表达及意义。方法:采用改良Rice法建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型。A24R^-/-(KO)及同期野生型(A24R^-/-,WT)C57/BL6新生小鼠(7日龄)分别按照完全随机分组方法分成假手术组及模型组,模型组按HIBD后取标本时间不同又分为造模后1d组、3d组和7d组,共8个实验动物组,每组取小鼠8只,共64只。采用TUNEL结合尼氏染色检测神经细胞凋亡,采用免疫组织化学法检测活化caspase-3及p-p38MAPK表达。同时,KO及同期WT小鼠分别取假手术组(SKO和SWT,n=10)及模型组(MKO和MWT,n=30)于HIBD后1d同时进行新生鼠短期神经行为学评定。结果:(1)缺氧缺血后皮层及海马CAl区神经细胞凋亡、活化caspase-3及p-p38MAPK表达均增加,造模后1d为高峰;(2)A24R敲除导致神经细胞凋亡及活化caspase-3表达增加,与同一时点的WT小鼠相比均有显著差异(P〈0.01);p-p38MAPK表达增加,其中,1d及3d后2种基因型小鼠间均有显著差异(P〈0.01);(3)Pea-son相关分析显示,活化easpase-3表达与p-p38MAPK表达呈显著正相关(皮层:r=0.957,P〈0.01;海马CA1区:r=0.939,P〈0.01)。结论:p-p38MAPK可能参与了A24R敲除增加新生小鼠脑缺氧缺血后神经细胞凋亡、加重脑损害的过程。
  • 胰岛素控制血糖对糖尿病大鼠肾组织Smad7表达及纤维化病变的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察胰岛素控制糖尿病大鼠血糖后是否能上调肾组织Smad7的表达,减轻或延缓糖尿病肾病(DN)肾纤维化病变的发生发展。方法:链脲菌素复制大鼠糖尿病模型,随机分为糖尿病组(DM组)和胰岛素治疗组(INS组)(n=8);INS组于成模13周起用胰岛素将血糖控制在4-7mmol/L;同时设正常对照组(NC组)(n=8)。17周处死大鼠,检测相应生化指标,观察胰腺和肾组织病理学改变,免疫组化和Western blotting检测各组大鼠肾组织组织转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、Smad泛素化调节因子2(Smadubiq uitinregulatory factor2,Smurf2)、Smad7、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白((It-smooth muscle actin,α-SMA)、层连蛋白(fibronectin,FN)和胶原蛋白I(collagenI)的蛋白表达。结果:与NC组比较,DM组大鼠体重显著减轻,24h尿蛋白、血糖和甘油三酯显著升高(P〈0.05),病理检查显示胰岛被破坏,肾组织TGF-β1、Smurf2、β-SMA、FN和collagenI蛋白的表达均显著增加(P〈0.05),并伴有肾小管Smad7和E-cadherin的表达减少(P〈0.05);而经胰岛素控制血糖后,INS组大鼠较DM组体重逐渐增加,24h尿蛋白和血糖均显著降低(P〈0.05),肾纤维化病变明显改善,TGF-β1、Smurf2、α-SMA、FN和collagen I蛋白的表达均显著减少(P〈0.05),Smad7和E-cadherin的表达显著上调(P〈0.05)。结论:控制血糖能恢复糖尿病大鼠肾组织Smad7蛋白表达水平,减少细胞外基质的沉积,延缓DN的纤维化进展,其机制可能与肾组织中TGF-β,和Smurf2表达降低、Smad7蛋白的泛素化降解减少有关。
  • LOX-1在2型糖尿病大鼠肾小管间质中的表达及其意义 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)在糖尿病肾病(DN)中的作用及其机制。方法:SD大鼠随机分为正常对照组和糖尿病模型组。以高脂高糖饮食加低剂量注射链脲佐菌素复制2型糖尿病大鼠模型。动态观察:生化指标和24h尿白蛋白排泄率(UAER);苏木素伊红(HE)和过碘酸-雪夫反应(PAS)染色观察肾脏病理,免疫组化检测LOX-1和转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白表达,荧光定量聚合酶链反应检测LOX-1和TGF-β1mRNA表达,ELISA检测血清单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、细胞间黏附分子(ICAM)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度。结果:随着造模时间的延长,血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)含量和UAER逐渐升高,高密度脂蛋白(HDL)在成模时升高,但随着病变进展含量减少;LOX-1和TGF-β1在肾小管中蛋白表达增加;与正常组比较,模型各组LOX-1和TGF-β1蛋白和mRNA表达逐渐增加;与正常组比较,模型各组血清MCP-1、ICAM和TNF-α水平均增高;LOX-1mRNA表达与UAER、TNF-仪和TGF-β1mRNA表达量之间呈正相关(r值分别为0.509、0.649和0.800)(P〈0.05)。结论:LOX-1在2型糖尿病肾小管中表达增加,使肾小管损伤,其作用可能通过炎症因子释放和炎症细胞浸润而实现,提示其在DN发生和发展过程中起重要作用。
  • 鼻腔滴入胰岛素改善2型糖尿病大鼠海马阿尔茨海默病样改变 免费阅读 收费下载
  • 目的:2型糖尿病(type 2 diabetes,T20)时大脑出现胰岛素水平下降及胰岛素信号通路下调,使大脑海马tau蛋白出现过度磷酸化的阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)样改变。本研究选取2型糖尿病大鼠,皮下注射及鼻腔滴入胰岛素,观察大脑AD样病变的改变,并探讨其机制。方法:高糖、高脂、高蛋白喂饲3个月后链脲佐菌素腹腔注射制备T2D大鼠模型。运用2种方法干预:鼻腔滴入胰岛素(T2D+I-I)及皮下注射胰岛素(T2D+S-I)。检测血浆葡萄糖、血浆胰岛素和脑脊液胰岛素水平,免疫印记方法检测大脑海马总tau蛋白和tau蛋白部分位点磷酸化状态、胰岛素信号转导途径中关键酶磷脂酰肌醇3-激酶( phosphatidylinositol 3-kinase, PI3 K) /Akt及糖原合成激酶3β( glycogen synthase kinase 3β, GSK-3β)活性。结果:T2D组大鼠血浆葡萄糖及胰岛素水平显著升高,脑脊液胰岛素水平显著降低,大脑海马组织中tau蛋白呈过度磷酸化状态,P13K/Akt活性下降,GSK-3B磷酸化水平升高;T2D+I-I组大鼠血浆胰岛素及葡萄糖水平无显著改变,但大脑海马tau蛋白过度磷酸化状态显著好转,P13K/Akt活性显著升高,GSK-313活性显著下降;T2D+S-I组大鼠血糖显著下降,但血浆及脑脊液胰岛素水平无显著改变,大脑海马tau蛋白磷酸化水平有轻度改善,但变化不显著。结论:运用鼻腔滴入胰岛素可减轻T2D时大脑海马组织的AD样病变;外周皮下胰岛素注射对T2D时AD样病变无明显作用。
  • 国际休克·脓毒症高峰论坛暨第九届中国病理生理学会休克专业委员会学术大会通知 免费阅读 免费下载
  • 由中国病理生理学会休克专业委员会主办,广东省病理生理学会、全军重症医学专业委员会、全军热区创伤救治与组织修复重点实验室、广州军区广州总医院重症医学科、广东省休克微循环重点实验室和东莞南方医大转化医学研究院承办,国际休克学会联盟、中国病理生理学会危重病专业委员会、中国微生物学会微生物毒素分会、中华医学会重症医学分会、《SHOCK》杂志编辑部、《中国病理生理学杂志》编辑部和《中华危重病急救医学》编辑部协办的“国际休克·脓毒症高峰论坛暨第九届中国病理生理学会休克专业委员会学术大会”将于2013年3月1-3日在美丽的花城——广州召开。
  • 骨髓间充质干细胞通过上调EPO表达减轻缺氧损伤引起的PCI2细胞凋亡 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)对氯化钴(CoCl2)诱导的PCI2细胞缺氧损伤及凋亡的影响并探讨其作用机制。方法:将PCI2细胞分为以下几组:空白对照组、CoCl2处理组、BM-MSCs-siCTL+CoCl2处理组和BM-MSCs-siEPO+CoCl2处理组。应用MTY、流式细胞术(FCM)及Hoechst33258染色法检测BM-MSCs对CoCl2诱导的细胞活性下降及凋亡的影响。采用逆转录PCR(RT-PCR)和Westernblotting检测BM-MSCs的促红细胞生成素(EPO)表达情况。同时通过RT-PCR法检测PCI2细胞的Bcl-2与Bax表达情况。此外应用分光光度法检测caspase-9和-3活性。结果:MTr结果显示BM-MSCs共培养能够提高PCI2细胞活力,0.6mmol/LCoCl2单独处理组24h和48h细胞存活率仅为(43.0±6.4)%和(33.8±5.7)%,1:15细胞比BM-MSCs共培养24h和48h后细胞存活率明显上升,分别为(77.9±3.8)%和(75.2±9.7)%(P〈0.01)。RT-PCR和Westernblotting显示0.6mmol/LCoCl2处理24h和48h明显诱导BM.MSCs的EPO表达上调,而EPOsiRNA可完全抑制BM-MSCs的EPO表达(P〈0.01)。FCM及Hoechst33258结果表明CoCl2处理能诱导PCI2细胞损伤及凋亡,BM-MSCs-siCTL与PCI2细胞共培养可有效抑制CoCl2的细胞毒性作用,减少细胞缺氧性损伤及凋亡,而EPOsiRNA可明显阻断BM-MSCs的抗细胞凋亡作用(P〈0.01)。RT-PCR结果显示BM-MSCs共培养组PCI2细胞的Bel-2表达较CoCl2处理组明显升高,而Bax表达较CoCl2处理组明显降低;EPOsiRNA明显抑制BM-MSCs介导的Bcl-2表达升高和Bax表达降低(P〈0.01)。分光光度法结果显示BM-MSCs-siCTL共培养组的easpase-9和-3活性较CoCl2处理组明显降低,而BM-MSCs-siEPO共培养组的caspase-9和-3活性较BM-MSCs-siCTL共培养组明显增加(P〈0.01)。结论:BM-MSCs共培养能抑制CoCl2诱导的PCI2细胞凋亡,其细胞保护作用的机制可能与其上调EPO的表达有关。
  • 跨种属研究Smad3在肝癌组织中的表达及意义 免费阅读 收费下载
  • 目的:研究Smad3在人、大鼠、树嗣等不同种属的肝癌、癌旁及正常肝组织中的表达和意义,进一步验证跨种属筛选肝癌关键蛋白研究策略的可行性。方法:采用实时荧光定量PCR和Westernblotting技术分别检测人、大鼠和树嗣的肝癌及其相应癌旁组织以及正常肝组织中Smad3mRNA和蛋白表达水平。结果:Smad3mRNA在人、大鼠和树嗣的肝癌中表达水平均低于其相应的癌旁组织(均P〈0.05);在大鼠肝癌组织中的表达低于正常肝组织(P〈0.05);在树嗣癌旁组织中的表达高于正常肝组织(P〈0.05);其余各组织间mRNA表达水平的差别无统计学意义(均P〉0.05)。Smad3蛋白在人和大鼠的肝癌组织中的表达水平均低于其相应的癌旁组织及正常肝组织(均P〈0.05);在树嗣肝癌组织中的表达水平也低于相应的癌旁组织和正常肝组织,但差别无统计学意义(均P〉0.05);3个种属的癌旁组织与正常肝组织比较,差别无统计学意义(均P〉0.05)。结论:Smad3在人、大鼠和树嗣3个种属的肝癌组织中的mRNA和蛋白表达水平均下调,提示该蛋白表达水平的改变可能在肝癌发生发展中起重要作用,有可能成为防治肝癌的靶分子。
  • SMYD3过表达对人肝内胆管癌细胞miR-124表达及细胞增殖的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨肝内胆管癌细胞HCCC-9810中SET和MYND结构域含有蛋白3(SETandMYNDdo,main-containing protein3,SMYD3)过表达对miR-124表达及细胞增殖能力的影响。方法:瞬时转染SMYD3真核表达质粒后,Westernblotting检测细胞中SMYD3蛋白水平的变化;qRT-PCR检测细胞中SMYD3 mRNA和miR-124表达;甲基化特异性PCR检测m/R-124-I、miR-124-2和miR-124-3基因启动子甲基化水平;CCK-8和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力。结果:以空白组为对照,肝内胆管癌细胞HCCC-9810在转染pEGFP-SMYD3质粒后,SMYD3蛋白及mRNA表达均显著上升(P〈0.05),miR-124-I、miR-124-2和miR-124-3基因启动子甲基化显著增加(P〈0.05),miR-124表达明显下降(P〈0.05),细胞增殖能力显著提高(P〈0.05)。结论:过表达SMYD3可引起miR-124基因启动子甲基化增加,导致胆管癌细胞中miR-124的表达下降,同时过表达SMYD3可增强细胞增殖能力。
  • HGF基因转染对裸鼠人淋巴瘤移植瘤的促进作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨肝细胞生长因子(UGF)基因转染对裸鼠人淋巴瘤移植瘤的促进作用及其机制。方法:采用HGF基因重组质粒pVITRO2-HGF转染的Raji细胞建立裸鼠皮下人淋巴瘤移植瘤模型,动态监测裸鼠体重和肿瘤大小;8周后获取瘤组织,分别采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术(TUNEL)和免疫组化检测移植瘤组织的细胞凋亡和微血管密度(MVD),并进行相关分析。结果:造模成功率为96.7%。HGF转染组的瘤体积明显大于HGF转染+VP-16组(P〈0.01)、未转染组与空载体组(P〈0.01),HGF转染+VP-16组也大于对照组(P〈0.01),未转染组与空载体组间无显著差异(P〉0.05)。pVITR02-HGF转染组凋亡指数显著低于对照组(P〈0.01),经VP-16诱导后凋亡增加(P〈0.01),但仍低于对照组(P〈0.01)。pVITR02-HGF转染组的MVD显著高于对照组(P〈0.01),但经VP-16诱导后血管增生降低(P〈0.01),但仍高于对照组(P〈0.05),对照组间无显著差异(P〉0.05)。结论:HGF基因转染可显著促进裸鼠人淋巴瘤移植瘤的生长,明显抑制凋亡的发生,这一效应可能与其促进肿瘤血管新生和抑制肿瘤细胞凋亡有关。
  • 喉癌组织中的microRNA差异表达谱及miR-125a-5p抑制喉癌细胞增殖的初步研究 免费阅读 收费下载
  • 目的:筛选并分析喉癌组织与周围正常喉黏膜的微小RNA(microRNAs,miRNAs)之间的表达谱差异,为进一步研究miRNA与喉癌发生、发展的关系提供线索。方法:收集喉癌组织和癌旁正常喉黏膜标本共42对,随机选取10对标本进行miRNA微阵列基因芯片分析,另选取32对标本进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证,获得喉癌组织中的miRNA差异表达谱。应用MTT法和克隆形成实验检测miR-125a-5p对喉癌Hep2细胞增殖的影响。结果:喉癌组织中的let-7f-5p、miR-10a-5p、miR-125a-5p、miR-144-3p、miR-195-5p、miR-203等6个miRNA在基因芯片以及qRT-PCR中表达均显著下调。与对照组相比,转染miR-125a-mimics组的喉癌Hep2细胞增殖能力受到抑制,而转染miR-125a-inhibitor组Hep2细胞增殖能力增强。结论:基因芯片与qRT-PCR结果一致;喉癌与正常喉黏膜之间存在明显的miRNA差异表达,这些miRNA的差异性表达可能与喉癌的发病、侵袭等相关。miR-125a可以抑制喉癌Hep2细胞的增殖,可能作为喉癌生物治疗的新靶点。
  • 人脐带间充质干细胞向Raji细胞迁移并促进其增殖的研究 免费阅读 收费下载
  • 目的:体外研究人Burkitt淋巴瘤细胞系Raji细胞和人脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem ceils, hUC-MSC)间的相互作用,探讨MSC在恶性肿瘤治疗中的潜在应用前景。方法:将Raji细胞和hUC.MSC进行直接接触和非接触共培养,观察MSC对Raji细胞的作用,采用CCK-8法观察Raji细胞的增殖情况,流式细胞术检测Raji细胞周期的变化,同时应用siRNA干扰技术分析血管内皮生长因子(VEGF)在MSC向Raji细胞迁移过程中的作用(即用siRNA阻断Raji细胞VEGF的表达),ELISA法检测Rwi细胞培养上清VEGF的分泌量,qRT-PCR法检测Raji细胞VEGFmRNA表达的变化。结果:MSC及其条件培养基(MSC-conditionedmedi.um,MSC-CM)均促进Raji细胞的增殖,72hMSC-CM培养的Raji细胞增殖活性为0.99±0.05,而对照组为0.71±0.07(P〈0.01)。无论是直接接触还是条件培养基均促使Raji细胞从G0/G1期向s期的转化,MSC-CM的作用尤其明显,S期的细胞数目由16.33±1.37增加到28.50±1.41,而G0/G1期细胞数目则由77.70±1.57下降到54.40±1.57(P〈0.01)。siRNA干扰Raii细胞后,VEGF无论是在蛋白水平还是mRNA水平都明显下降,且MSC向Raji细胞的趋化能力也显著降低(96.00±5.28 vs 143.00±7.20,P〈0.01)。结论:MSC具有向Raji细胞趋化的作用,其机制与Raji细胞分泌VEGF呈正相关;MSC可促进Raji细胞从G0/G1期向s期转化,从而促进Raji细胞的增殖。
  • LPS诱导的EGFR活化促进肠上皮细胞中COX-2的表达 免费阅读 免费下载
  • 坏死性小肠结肠炎( necrotizing enterocolitis, NEC)是一种由于对菌群的过度炎症反应而导致肠坏死的新生儿疾病,是导致早产儿死亡的主要肠道疾病。细菌脂多糖(1ipopolysaccharide,LPS)通过Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)调节炎症反应,是NEC发病机制的关键分子。
  • 槲皮素对人卵巢癌SKoV-3细胞增殖的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨槲皮素对人卵巢癌SKOV-3细胞增殖抑制和凋亡的影响,为卵巢癌临床治疗提供依据。方法:不同浓度槲皮素处理卵巢癌SKOV-3细胞后,采用MTr实验检测细胞增殖抑制作用并计算抑制率,细胞免疫化学染色法鉴定细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡。结果:槲皮素能够抑制SKOV-3细胞的增殖,且呈时间和剂量依赖性,免疫荧光显示槲皮素对SKOV-3细胞具有诱导凋亡作用,流式细胞术显示SKOV-3细胞被阻滞在S期,G2/M期细胞比例降低,凋亡率上升。结论:槲皮素在体外能够抑制卵巢癌SKOV-3细胞的增殖,阻止细胞由S期向G2期移行,促进其凋亡。
  • P162对食管癌细胞株Ecal09的放射增敏作用及其对p75NTR表达的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:研究靶向Ras-GTP酶激活蛋白SH3功能区结合蛋白(G3BP)的新药P162对人食管癌细胞株Ecal09的放射增敏作用及其对p75神经营养因子受体(p75^NTR)表达的影响。方法:CCK-8法检测P162对食管癌细胞株Ecal09增殖抑制的影响;集落形成实验检测P162对Ecal09细胞的放射增敏效应,单击多靶模型拟合细胞存活曲线并计算放射增敏比;倒置显微镜观察细胞形态学改变;流式细胞术检测p75^NTR的表达。结果:P162对食管癌细胞株Ecal09有增殖抑制作用,且呈时间和剂量依赖性,2.5、5.0、10μmol/LP162对Ecal09细胞的放射增敏比分别为1.54、2.35和2.33。随着照射剂量的增加,食管癌细胞中p75^NTR的表达增加,经5μmol/LP162处理的实验组中p75^NTR的表达明显低于未经处理的对照组。结论:P162对Ecal09细胞有放射增敏作用,并且能抑制食管癌干细胞p75^NTR的表达。P162的增敏作用可能与抑制食管癌干细胞有关。
  • MicroRNA-100对肝癌细胞增殖活力和细胞周期的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨microRNA-100(miR-100)对肝癌细胞增殖活力和细胞周期的影响及其可能机制。方法:通过脂质体介导将人工合成的miR-100模拟物及其阴性对照转染人肝癌HepG2细胞,用细胞计数试剂盒8(CCK-8)方法检测转染后HepG2细胞的增殖活力,用流式细胞术判定细胞周期分布,并进一步用实时荧光定量RT-PCR和Western blotting分析Polo样激酶1(Plkl)的表达水平。结果:荧光显微镜下观察到经阳离子脂质体介导的细胞转染效率大于85%。转染miR-100模拟物的实验组细胞的增殖抑制率在24、48和72h分别为(43.5±12.2)%、(46.5±3.7)%和(52.1±0.2)%,均显著高于对照组细胞(P〈0.01),并且在72h实验组细胞增殖指数(35.8±1.4)低于阴性对照组(39.2±1.0)和单纯脂质体组(40.7±2.0)(P〈0.05)。同时与对照组相比,实验组细胞PlklmRNA和蛋白表达水平在转染miR-100后72h明显降低(P〈0.05)。结论:miR-100可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能与其下调Plkl的表达有关。
  • 丹参酮ⅡA磺酸钠对胰腺癌BX-PC-3细胞系增殖与细胞周期调控因子表达的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察丹参酮ⅡA磺酸钠对胰腺癌细胞系BX-PC-3细胞增殖和细胞周期调控因子cyclinA、cyclinD2蛋白表达的影响。方法:分别用不同剂量的丹参酮ⅡA磺酸钠作用于胰腺癌细胞系BX-PC-3,应用MTT比色法检测培养48h的细胞存活率,应用流式细胞术测定培养48h细胞周期的变化,Western blotting检测周期蛋白cyclinA和cyclin1)2的表达情况。结果:丹参酮ⅡA磺酸钠能明显抑制BX-PC-3细胞增殖,且具有明显的剂量依赖性;流式细胞术显示一定浓度药物作用细胞,可将细胞周期阻滞于G0/G1期;Western blotting检测发现药物能显著下调周期蛋白cyclinA和cyclin D2的表达水平。结论:丹参酮ⅡA磺酸钠能显著抑制人胰腺癌BX-PC-3细胞增殖,下调周期相关因子cyclinA和cyclin D2蛋白表达水平,这可能是丹参酮ⅡA磺酸钠抑制胰腺癌细胞生长增殖的作用机制。
  • 液体复苏联合氢气吸入对脓毒性休克大鼠肺脏的作用 免费阅读 收费下载
  • 目的:研究早期液体复苏联合氢气吸入对脓毒性休克大鼠肺脏凋亡蛋白和炎症介质表达的影响。方法:60只Wistar大鼠随机分成4组:正常对照组(A组)、休克对照组(B组)、液体复苏组(c组)和液体复苏联合氢气吸人组(D组),每组15只大鼠。所有大鼠给予经口气管插管机械通气,呼吸机模式及参数相同。LPS静脉注射建立脓毒性休克模型,A、B和C组吸入气体为空气,D组吸人气体为2%氢空混合气。C和D组给予相同的液体复苏方案。2h后处死大鼠,HE染色观察肺组织形态学变化,ELISA检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症介质的表达,免疫组化和Westenblotting检测肺组织中Fas及Bcl-2的表达。结果:D组与C组比较,BALF中促炎介质水平明显降低(P〈0.05),Fas表达明显减弱(P〈0.05),Bcl-2表达明显增强(P〈0.01)。结论:联合氢气吸入的液体复苏方案与单纯液体复苏比较,可通过降低炎症介质水平及减少肺脏细胞凋亡而保护肺功能。
  • 搏动心脏中白细胞运输的活体双光子成像 免费阅读 免费下载
  • 双光子活体显微术大大开阔了我们对于炎症反应调控过程中组织和器官特异性差异的理解。然而,我们对发炎心肌组织中自细胞募集的动态调节过程仍然知之甚少,很大程度上是由于运动组织成像这一技术难关。最近,Li等报道了一种使用双光子显微术为小鼠活体搏动心脏成像的方法。通过这种技术可以直接观察中性粒细胞在基础状态和炎症过程中的运输情况。器官移植或短暂结扎冠状动脉诱发的缺血再灌注损伤可导致中性粒细胞向心脏中募集,从冠状静脉渗出,浸润心肌,进而形成较大的集落。
  • NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白 免费阅读 收费下载
  • 目的:寻找与NALP3富含亮氨酸重复序列(1eucine-rich repeat,LRR)结构域相互作用的蛋白质分子。方法:克隆NALP3富含亮氨酸重复序列(NALP3-LRR)结构域的DNA序列并经测序检验。应用酵母双杂交技术,构建以NALP3-LRR结构域为诱饵基因的酵母双杂交载体,对人胚肺cDNA文库进行杂交筛选,经酵母回交实验验证蛋白质在酵母细胞内的相互作用并对阳性克隆的DNA进行序列测定和生物信息学分析。将筛选到的阳性克隆进一步用免疫共沉淀实验验证NALP3-LRR结构域与阳性蛋白之间相互作用的可靠性。结果:成功克隆NALP3-LRR结构域的DNA序列并经测序检验正确。用酵母双杂交技术对人胚肺cDNA文库进行酵母杂交筛选共获得4个阳性克隆。免疫共沉淀实验证实能与NALP3-LRR结构域发生相互作用的阳性蛋白是人细胞周期蛋白H和禽传染性支气管炎病毒株Cal99的ORFla。结论:NALP3的富含亮氨酸重复序列结构域能与人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白发生相互作用。
  • 慢性华支睾吸虫感染对脂多糖刺激巨噬细胞反应的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:了解慢性华支睾吸虫(Cs)感染的免疫状态及其对巨噬细胞表型和炎症反应的影响。方法:选择Sprague-Dawley雄性大鼠,按随机数字表法分组进行2部分实验。(1)经口华支睾吸虫虫卵灌胃感染70d建立慢性Cs感染模型,分为正常对照组和慢性Cs感染组,每组10只,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素4(IL-4)、IL-10、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素1(IFN-γ)水平,腹腔灌洗获取巨噬细胞,流式细胞术检测腹腔巨噬细胞亚型;(2)腹腔灌洗获取巨噬细胞,按照腹腔巨噬细胞的来源,分为空白对照组、正常组和慢性Cs感染组,以脂多糖(LPS,10μg/L)刺激孵育,用ELISA法动态监测LPS刺激后0、2、12和24h细胞培养上清液的TNF-α和IL-10的变化。结果:(1)慢性Cs感染组大鼠血清促炎因子TNF-α[(77.64±3.25)ng/L]和IFN-α[(212.69±12.60)ng/L]水平较正常组TNF-α[(55.13±3.25)ng/L]和IFN-γ[(108.15±10.49)μg/L]升高(均P〈0.05),而抗炎因子IL-4[(248.24±8.99)ng/L]和IL-10[(223.56±5.60)ng/L]水平较正常组血清IL-4[(52.40±3.97)ng/L]和IL-10[(60.18±5.36)ng/L]也显著升高(均P〈0.01),并可使腹腔巨噬细胞向替代活化型(M2型)巨噬细胞分化;(2)2组腹腔巨噬细胞培养上清液TNF-α水平在LPS刺激后2h即开始上升,至24h达到高峰,慢性Cs感染组巨噬细胞在LPS刺激后2、12和24h上清液的TNF-α水平均显著低于正常大鼠组[2h:(88.20±1.91)ng/LUS(123.45±2.98)ng/L;12h:(123.66±4.31)ng/L0s(161.11±7.38)ng/L;24h:(154.52±4.83)ng/L vs(227.85±10.67)ng/L,均P〈0.05],而IL-10的水平较正常组升高[2h:(105.46±12.28)ng/L vs(80.86±2.28)ng/L;12h:(194.19±8.62)ng/L vs(117.56±8.02)ng/L;24h:(280.02±11.31)ng/L vs(168.14±8.97)ng/L,均P〈0.05]。结论:慢性Cs感染时宿主血清的促炎因子升高,而抗炎因子升高得更明显,使巨噬细胞向M2型极化;体外实验表明慢性Cs感染宿主的巨噬细胞对LPS刺激产生耐受。
  • 积雪草提取物对小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:分离纯化积雪草活性成份,并观察其对小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响。方法:采用乙醇浸提、极性萃取、硅胶柱层析和SephadexLH-20凝胶柱层析分离纯化积雪草活性成份,通过评价不同阶段积雪草提取物清除1,1-二苯基-2-苦基苯肼自由基(DPPH·)和抑制羟自由基(OH·)能力,筛选积雪草活性成份。采用流式细胞术观察积雪草提取物对小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响。结果:(1)积雪草分离纯化后得到提取物B1、B2、B3和B4,其中提取物B4清除DPPH·及抑制OH·的能力最显著。经HPLC分析,积雪草提取物B4主要成分为槲皮素。(2)与对照组相比,积雪草提取物B4作用组小鼠脾淋巴细胞凋亡率显著增加。结论:积雪草提取物B4能诱导小鼠脾淋巴细胞凋亡,其主要成份可能为槲皮素。
  • 马桑提取物促进大鼠烧伤创面愈合的作用和机制 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨马桑提取物(CSME)对大鼠烧伤创面愈合的影响及机制。方法:随机将40只SD雄性大鼠分成生理盐水(NS)组、白凡士林(WPJ)组、磺胺嘧啶银(SSD)组和CSME组,每组10只。将大鼠麻醉后,制备背部深Ⅱ度皮肤烧伤创面。而后分别用NS敷料、WPJ敷料、SSD敷料和CSME敷料覆盖治疗21d。在第1d,3d.7d、14d和21d,观察动物的临床症状和创面状况(上皮化速率、结痂及被毛等)后,分别取出创面组织,用于组织学观察,检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,检测表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞因子(bFGF)蛋白水平及胶原mRNA表达。结果:CSME组新生上皮生长高度活跃,有大量新生被毛生长,创面上皮化速率明显高于其它各组(P〈0.05)。SSD组创面中央新生被毛稀疏而细小,而CSME组创面中央被毛密集,大部分被毛接近正常。CSME组镜下可见全部被多层上皮细胞覆盖,新生胶原纤维充分分化,排列整齐,组织结构明朗,皮脂腺和毛囊增生极其活跃等,显著优于其它各组。本研究显示,烧伤后从第1d到21d,CSME组早期EGF和bF-GF水平显著高于其它各组,后期迅速下降,低于其它组(P〈0.05或P〈0.01)。SSD组Ⅰ型与Ⅲ型胶原mRNA表达的比值显著高于其它各组和正常组织,CSME治疗组显著低于其它各组和正常组织(P〈0.05)。结论:本研究表明,CSME可诱导烧伤创面无瘢痕愈合。CSME的这种作用与其早期增强EGF和bFGF蛋白水平,后期抑制两者的水平有关,也可能与其抑制烧伤创面Ⅰ型胶原而增强Ⅲ型胶原mRNA表达密切相关。
  • 全麻/控制性降压手术对海马神经元凋亡的影 免费阅读 收费下载
  • 目的:观察全麻/控制性降压手术对海马神经元损伤的影响及其可能的机制。方法:选用12只6-8月龄雄性健康比格犬,随机分为全麻组(A组,n=6)和控压组(C组,n=6)。全麻组采用丙泊酚注射及异氟醚吸入麻醉,控压组在麻醉基础上联合硝普钠行控制性降压,达到目的血压(基础平均动脉压的40%)后维持60min(2组动物均在相应期间行剖腹探查术),术毕使血压回升至基础水平72h后取脑。采用免疫组织化学法检测海马CAl和CA3区白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax和活化型caspase-3)的表达;TUNEL法检测海马神经元凋亡情况。结果:(1)控压组动物海马CAl和CA3区IL-1β和TNF-α阳性细胞率均较全麻组升高(P〈0.01);(2)控压组CAl和CA3区Bcl-2/Bax阳性细胞比值均较全麻组降低(P〈0.05);与此相应,控压组海马各区caspase-3阳性细胞率均显著高于全麻组(P〈0.01);(3)全麻组与控压组CAl和CA3区存在凋亡细胞,但控压组各区细胞凋亡指数均较全麻组显著升高(P〈0.01)。结论:全麻/控制性降压下的手术可诱导海马不同区域促炎细胞因子表达,降低Bcl-2/Bax比值,促进caspase-3的表达,进而导致海马神经元的凋亡。这种术后海马神经元损伤可能与全麻/控压手术诱导的海马炎症反应有关。
  • 皖南地区眼镜蛇毒活性组分镇痛效应的初步研究 免费阅读 收费下载
  • 目的:从皖南地区眼镜蛇毒粗毒中分离纯化出活性组分眼镜蛇毒镇痛因子(cobra venom analgesicfactor, CVAF),并研究其镇痛效应。方法:采用阳离子交换色谱( cation-exchange chromatography, CEC)和分子排阻层析( size-exclusion chromatography, SEC)从眼镜蛇粗毒中分离纯化出镇痛活性组分CVAF,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和毛细管区带电泳法进行纯度及相对分子量的鉴定;将小鼠随机分为生理盐水正常对照组和盐酸吗啡阳性对照组、CVAF实验组,采用小鼠热板法和醋酸扭体法评估活性组分CVAF的镇痛效应。结果:纯化后得到活性产物为单一组分,相对分子量为6500D;热板法显示吗啡组在给药0.5h后达高峰,6h镇痛作用消失;活性组分CVAF的镇痛作用自用药后0.5h开始,且持续8h仍存在。扭体法中0.03ms/kg、0.1ms/kg和0.3ms/kg的活性组分在给药后小鼠扭体抑制率分别为27%、50%和70%;0.3ms/kg实验组与吗啡组相比无明显差异(P〉0.05)。结论:从皖南地区眼镜蛇粗毒中分离纯化出的活性组分CVAF具有剂量依赖性镇痛效应。
  • 大鼠心肌解剖无复流现象中中性粒细胞的浸润和GDF-15的动态表达 免费阅读 收费下载
  • 目的:研究大鼠心肌解剖无复流现象中中性粒细胞的浸润和生长分化因子15(growth differentia-tion factor15,GDF.15)的动态表达。方法:雄性Wistar大鼠144只,随机分为手术组(I/R组)和假手术组(sham组)。手术组用Y形线结扎冠状动脉左前降支,缺血60min,再灌注分别2h,4h.6h、12h、24h和7d。假手术组只穿线不结扎。分别用硫磺素s、酞菁蓝和氯化三苯基四氮唑(TTC)染色评估大鼠心肌解剖无复流面积及梗死面面积;real-timePCR法测定GDF-15mRNA表达水平;免疫组化法测定GDF-15蛋白表达;通过检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性间接检测中性粒细胞浸润量,ELISA酶联免疫法检测心肌组织匀浆中MPO活性;HE染色观察镜下心肌损伤及中性粒细胞浸润情况。结果:I/R组无复流面积在再灌注2-6h期间内延展最快,sham组无缺血及无复流现象发生;I/R组各时点心肌组织中GDF-15表达量和MPO活性均较sham组明显增高,且呈规律性变化。在再灌注2-24h之间,MPO活性随GDF-15表达增高而降低,二者呈负相关(r=-0.9895)。结论:无复流现象中同时存在中性粒细胞的浸润和GDF-15的表达,且二者变化呈负相关,推测GDF-15可能通过抑制中性粒细胞的浸润而抑制无复流的延展。
  • 索拉非尼对敏感人肝癌细胞株MAPK信号通路基因表达的影响 免费阅读 收费下载
  • 目的:筛选对索拉非尼敏感的人肝癌细胞株,检测索拉非尼作用于敏感细胞株后MAPK信号通路基因表达谱的变化。方法:索拉非尼作用于人肝癌细胞株Huh7、MHCC97H、HepG2、SMCC7721、HepG2.2.15和PLC,流式细胞术检测肝癌细胞凋亡,CCK-8测定细胞增殖的抑制率,筛选敏感肝癌细胞株;采用实时定量PCR基因芯片,观察索拉非尼作用于敏感细胞株前后MAPK信号通路基因的表达。结果:索拉非尼作用后,流式细胞术的结果显示,凋亡较明显的细胞株为PLC和HepG2.2.15,相对不明显的细胞株为SMCC7721和MHCC97H;CCK-8测定索拉非尼对PLC、HepG2.2.15、Huh7、HepG2、MHCC97H和SMCC7721细胞的IC50值分别为5.25μmol/L、5.30μmoL/L、6.80μmol/L、7.01μmol/L、11.7μmol/L和15.0μmol/L。对索拉非尼相对敏感细胞株和不敏感细胞株分别为PLC和SMCC7721。索拉非尼作用敏感细胞株PLC后,MAPK信号通路表达〉2.0倍的有2个,≤0.5倍的有6个。结论:PLC为对索拉非尼相对敏感的人肝癌细胞株;索拉非尼主要导致MAPK信号通路中与调控细胞周期和活化转录因子相关的基因表达发生变化。
  • 阻塞性黄疸术后胰岛素抵抗与肠黏膜屏障破坏间的相关性 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨阻塞性黄疸(阻黄)术后胰岛素抵抗与肠黏膜屏障破坏间的相关性。方法:建立阻黄大鼠模型,术后给予胰高血糖素样肽2(GLP-2)和强化胰岛素治疗,分别于手术前1d及手术后2、24、48h和3、7d采血,计算胰岛素抵抗指数,检测乳果糖/甘露醇(L/M)比值,ELISA法检测血清抵抗素样分子B(RELMβ)浓度,RT-PCR检测回肠组织内RELMMβ mRNA相对含量。结果:阻黄组术后3d的胰岛素抵抗指数(10.1±1.8)和L/M比值(0.66±0.08)远高于其它时点(均P〈0.05),两者呈明显正相关(r=0.86,P〈0.05)。GLP-2组术后7d的胰岛素抵抗指数降幅达37.0%,胰岛素组术后3d的L/M降幅最大达46.7%(P〈0.05)。阻黄组术后3d血清RELMβ含量[(0.69±0.05)μg/L]和末端回肠上皮细胞内RELMβ mRNA相对水平达到最高(1.40±0.06)。GLP-2组和胰岛素组的RELMβ浓度较阻黄组明显降低(P〈0.05)。结论:阻黄术后胰岛素抵抗与肠黏膜屏障破坏间具有相关性,改善肠黏膜屏障和术后强化胰岛素治疗可以提升血清和组织内RELMβ含量。
  • 高血压病患者基质金属蛋白酶3基因多态性与左室重构的关系 免费阅读 收费下载
  • 目的:探讨高血压病患者基质金属蛋白酶3(MMP-3)基因多态性与左室重构的关系。方法:入选190名高血压病患者,彩色多普勒检测心脏相关指标,酶联免疫吸附法检测血清MMP-3水平,采用多聚酶链反应(PCR)和测序方法检测MMP-3基因启动子-1512位点5A和6A等位基因。结果:高血压伴左室肥厚108人,不伴左室肥厚82人;MMP-3基因型测序结果6A纯合子128人,5A纯合子9人,5A/6A杂合子53人;携带5A基因者血清MMP-3水平比携带6A基因者高,但差异无显著性;血清MMP-3水平与左室肥厚指标正相关;携带5A基因高血压患者发生左室肥厚的机率是携带6A基因者的2倍。结论:MMP-3基因多态性影响血清MMP-3水平的表达,从而对高血压病患者左室重构的发生、发展产生一定的作用。
  • 内源性一氧化氮在急性高原病中的研究进展 免费阅读 收费下载
  • 1一氧化氮(nitric oxide,NO)与内源性一氧化氮(endogenousNO,eNO) NO是具有调节血管张力、血流等众多生物学作用的脂溶性气体信号分子,eNO是由L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)经过体内一氧化氮合酶[nitricoxide synthase,NOS;主要有神经源型(neuronalNOS,nNOS)、诱导型(inducibleNOS,iNOS)和内皮源型(endothelial NOS,eNOS)3种]催化合成的,广泛存在于全身组织。
  • 血管疾病治疗新靶标:STIM1和Orail 免费阅读 收费下载
  • 钙离子(Ca^2+)是常见的第二信使,不同于其它第二信使,其主要位于细胞外或存储于内质网(endoplasmicreticulum,ER)等细胞器内。静息状态下细胞内游离Ca^2+浓度(intracellular Ca^2+ concentra.tion,[Ca^2+]i)约为细胞外的1/20000,受体激活或生物信号刺激可通过改变[Ca^2+]i进一步发挥生物放大效应。[Ca^2+];
  • 成年大鼠骨骼肌干细胞的制备与新型培养方法 免费阅读 收费下载
  • 目的:建立高效分离和扩增成年大鼠骨骼肌干细胞的实验方法。方法:通过混合酶消化法从少量成年大鼠骨骼肌样品中分离出骨骼肌干细胞;采用悬浮培养法培养获得骨骼肌干细胞团,批量扩增骨骼肌干细胞;用qRT-PCR和免疫细胞化学染色检测干细胞标志物Nanog、Oct4和骨骼肌干细胞标志物肌源性因子5(myogenic factor 5,Myf5)、配对盒蛋白7(paired box protein7,Pax7)的表达;成脂或成骨分化诱导培养基诱导检测骨骼肌干细胞的多功能性。结果:采用混合酶消化法可获得骨骼肌干细胞单细胞,在悬浮的培养条件下能快速克隆成骨骼肌细胞团,贴壁培养后能看到骨骼肌干细胞从细胞团中爬出来,和传统的差速贴壁方法相比悬浮培养法获得的骨骼肌干细胞纯度更高,细胞状态更好,干性因子Nanog、Oct4和骨骼肌干细胞标志物Myf5、Pax7的表达更高(P〈0.05);在不同培养基的诱导下能向骨骼肌、成骨和脂肪细胞系分化。结论:悬浮培养法能获得大批量干性好、纯度高、具有多向分化潜能的骨骼肌干细胞,从而为肌肉相关疾病的细胞治疗提供优良的种子细胞。
  • PCR法检测结核分枝杆菌DNA在鉴别克罗恩病与肠结核中的价值 免费阅读 收费下载
  • 目的:评估聚合酶链反应(PCR)技术检测通过活检或手术获取的肠道组织石蜡标本中结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB ) DNA在鉴别克罗恩病(Crohndisease,CD)和肠结核(intestinal tuberculosis,ITB)中的可行性及价值。方法:根据来自MTB的重复插入序列IS6110设计引物,用PCR技术检测CD与ITB肠道组织蜡块标本中MTBDNA,利用基因直接测序法验证结果,分析PCR检测结果与病理特征间的关系。结果:ITB组MTBDNA检出率为32%,CD组MTBDNA检出率为0%,MTBDNAPCR法在ITB和CD鉴别诊断中的灵敏度为32%,显著高于抗酸染色(8%)和干酪样坏死(t2%)(P〈0.05)。MTBDNAPCR法在ITB和CD鉴别诊断中的特异度为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为59.5%。MTBDNAPCR阳性率在肉芽肿或多核巨细胞病理特征的标本中存在升高趋势,但差异无统计学意义。测序结果与PCR判读的结果相符。结论:PCR法用于MTBDNA检测,有助于ITB确诊,在ITB和CD的鉴别诊断中不失为一种方便快捷的病原学诊断方法。
  • 《中国病理生理杂志》投稿须知 免费阅读 收费下载
  • 1本刊为中国科学技术协会主管,中国病理生理学会主办、暨南大学出版、国内外公开发行的综合性病理生理学高级学术刊物,主要刊登有关病理生理学方面的论著(包括实验研究和临床研究)、专题综述、学术动态、临床生理专题讲座、教学经验、研究技术和实验方法(包括疾病模型和实验动物)创新、书刊评论、教学科研仪器和药品的评价等。欢迎国内外科研工作者投稿。2文稿应选题新颖,论点鲜明,论据(数据)可靠,结论明确,具有创新性和较强的科学性和逻辑性。文句要求严谨、明确、通顺达意、重点突出。用字应规范,标点符号使用准确。文稿可用中文或英文撰写,英文请附上相应的中译文。论著篇幅原则上不超过6000字,综述一般不超过7000字,短篇论著、研究技术、实验方法创新一般不超过3000字(均包括图表及参考文献)。学术讨论、书刊评论、会议纪要等视具体情况而定。3所有稿件均采用网上投稿形式。请先登录本刊网站进人“作者投稿/查稿”,按照网页上的提示先进行用户注册,然后进行网上投稿。网上投稿完成后,编辑部会用电子邮件的方式将稿件编号和收稿回执发送给第1作者和通讯作者。收到论文回执后,请填写“论文版权转让协议书”(请到我刊网站下载),经所有作者签名后,连同单位推荐信,尽快邮寄给本刊编辑部。4撰稿格式
  • [论著]
    microRNA-21转染的心肌细胞移植对低温条件下心力衰竭大鼠的影响(唐艳[1,2] 王梦洪[1])
    短链酰基辅酶A脱氢酶在大鼠心脏发育中的表达及其与心肌肥厚的关系(周四桂[1] 王平[3] 路遥[4] 袁茜[4] 臧林泉[1] 杨智承[1] 徐立朋[2])

    软脉降脂合剂干预动脉搭桥术内皮细胞损伤的研究(许平[1,2] 彭辉[3,4] 朱莹[3,4] 贺嵩敏[3,4] 冯兵[3,4] 李秀丽[5] 黄小千[5] 陈婷[6] 张小宁[7] 郑广娟[3,4])
    《中国病理生理杂志》第六届编辑委员会第一次常务编委会在广东韶关召开
    [论著]
    西洋参茎叶总皂苷通过抑制过度内质网应激减轻大鼠心肌缺血/再灌注损伤(王琛[1,2] 刘蜜[2] 孙胜[3] 宋丹丹[3] 刘秀华[3] 史大卓[2])
    Ghrelin对糖尿病大鼠下丘脑弓状核胃牵张敏感神经元放电活动及胃运动的调控(徐珞 郭菲菲 孙向荣 高胜利 公衍玲 邱贝贝)

    转录因子“足迹"编码一部庞大的人类调控“辞典”
    [论著]
    p-p38MAPK在A2AR敲除新生小鼠缺氧缺血脑区的表达及意义(任素伟[1] 崔志慧[1] 黄托夫[1] 范海玲[1] 陈江帆[2] 王小同[1] 陈翔[1])
    胰岛素控制血糖对糖尿病大鼠肾组织Smad7表达及纤维化病变的影响(王圆圆 李霜 刘丽荣 苏博 石磊 石明隽 肖瑛 张国忠 郭兵)
    LOX-1在2型糖尿病大鼠肾小管间质中的表达及其意义(杜月光[1] 钱俊文[2] 宋光明[2] 柴可夫[2])
    鼻腔滴入胰岛素改善2型糖尿病大鼠海马阿尔茨海默病样改变(杨雁 马德琳 王玉萍 姜腾 胡蜀红 余学锋)

    国际休克·脓毒症高峰论坛暨第九届中国病理生理学会休克专业委员会学术大会通知(姜勇 苏磊)
    [论著]
    骨髓间充质干细胞通过上调EPO表达减轻缺氧损伤引起的PCI2细胞凋亡(莫世静[1] 童秀珍[2] 钟茜[3] 邓宇斌[1,4])
    跨种属研究Smad3在肝癌组织中的表达及意义(朱伶群[1,2] 曹骥[1] 卢晓旭[1,2] 李瑗[1] 欧超[1] 苏建家[1] 杨春[1])
    SMYD3过表达对人肝内胆管癌细胞miR-124表达及细胞增殖的影响(郑礼平[1] 李志花[1] 陈汝福[2] 曾兵[2] 周嘉嘉[2] 龚远锋[2] 宋亚东[1])
    HGF基因转染对裸鼠人淋巴瘤移植瘤的促进作用(赵行[1,2] 郑筱娇[1] 高洲[1] 沈蓉蓉[1] 岑东[1,3] 裴仁治[3] 罗建平[4] 吕建新[1])
    喉癌组织中的microRNA差异表达谱及miR-125a-5p抑制喉癌细胞增殖的初步研究(张思毅[1,2] 卢仲明[1,2] 宋新汉[2] 张鸿彬[2] 陈良嗣[2] 罗小宁[2] 陈少华[2] 吴一龙[3])
    人脐带间充质干细胞向Raji细胞迁移并促进其增殖的研究(刘革修[2] 祝爱珍[1] 陈盛亭[1])

    LPS诱导的EGFR活化促进肠上皮细胞中COX-2的表达
    [论著]
    槲皮素对人卵巢癌SKoV-3细胞增殖的影响(邓晓慧 宋海岩 孙春莉)
    P162对食管癌细胞株Ecal09的放射增敏作用及其对p75NTR表达的影响(郑娇娇[1] 吴清明[2] 陈建华[3] 陈彩虹[3] 龙辉[2])
    MicroRNA-100对肝癌细胞增殖活力和细胞周期的影响(嵇晓辉 范秉琳 张红鸽 蔡新华 朱武凌)
    丹参酮ⅡA磺酸钠对胰腺癌BX-PC-3细胞系增殖与细胞周期调控因子表达的影响(陈景 黄曙方 肖定璋 麦丽萍 彭琪 赖沛龙 陈少贤 余细勇)
    液体复苏联合氢气吸入对脓毒性休克大鼠肺脏的作用(刘伟 孙裕强 孙宁 刘志)

    搏动心脏中白细胞运输的活体双光子成像
    [论著]
    NALP3富含亮氨酸重复序列结构域识别人细胞周期蛋白H和禽冠状病毒蛋白(颜亮[1] 罗滔[1,2] 蔡军伟[2] 毕志斐[3] 胡巢凤[1])
    慢性华支睾吸虫感染对脂多糖刺激巨噬细胞反应的影响(徐嘉[1] 徐雪[2] 王中华[1] 胡旭初[3] 詹蔚[1] 叶子[1] 詹红[1] 熊艳[1])
    积雪草提取物对小鼠脾淋巴细胞凋亡的影响(王娟[1,4] 李菁[1] 朱伟杰[2] 李盼[1] 潘永勤[3])
    马桑提取物促进大鼠烧伤创面愈合的作用和机制(黄德彬 胡泽华 余昭芬 刘可云)
    [短篇论著]
    全麻/控制性降压手术对海马神经元凋亡的影(王改梅 刘喆 沈颖洁 方剑乔)
    皖南地区眼镜蛇毒活性组分镇痛效应的初步研究(闵志雪[1] 黄璐[1] 孙瑶[1] 包鹏举[1,2] 王海华[1,2] 张根葆[1])
    大鼠心肌解剖无复流现象中中性粒细胞的浸润和GDF-15的动态表达(潘坤颖[1,2] 刘千萍[2] 周欣[2] 姜铁民[2] 李玉明[2] 张梅[1,2])
    索拉非尼对敏感人肝癌细胞株MAPK信号通路基因表达的影响(陈东[1] 赵鹏[2] 殷晓煜[1] 陈伟[1] 肖伟锴[1] 梁力建[1])
    阻塞性黄疸术后胰岛素抵抗与肠黏膜屏障破坏间的相关性(陈振勇 代红梅 涂志刚 杨鹏 蒋春舫 冯贤松)
    高血压病患者基质金属蛋白酶3基因多态性与左室重构的关系(邵也常 邓木兰 符永恒 许燕 石美玲)
    [综述]
    内源性一氧化氮在急性高原病中的研究进展(卞士柱 黄岚)
    血管疾病治疗新靶标:STIM1和Orail(赵慧 何芳)
    [实验技术]
    成年大鼠骨骼肌干细胞的制备与新型培养方法(黄郁凯 李晓红 潘宇 林秋雄 朱杰宁 江雪燕 叶力通 余细勇)
    PCR法检测结核分枝杆菌DNA在鉴别克罗恩病与肠结核中的价值(陈瑜君 何瑶 陈白莉 毛仁 晁康 徐萍萍 曾志荣 陈昊湖 胡品津)

    《中国病理生理杂志》投稿须知
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