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  • 多房棘球蚴抗原蛋白TSP3抗原表位的生物信息学预测 免费阅读 下载全文
  • 目的预测多房棘球绦虫抗原蛋白TSP3的二级结构和优势抗原表位(T细胞和B细胞表位)。方法Genbank获取TSP3的氨基酸序列后通过生物信息学软件SOPMA预测二级结构特征,进一步通过在线软件IEDB、SYFPEITHI、Bcepred和ABCpred预测TSP3的T细胞和B细胞表位。同时对r11sP3的亲抽性、柔韧性、抗原性及蛋白表面暴露区域的特征进行预测。结果无规则卷曲和B转角分别占TSP3蛋白质的二级结构的25.68%和4.05%,说明潜在优势抗原性表位存在。通过多种生物信息学方法分析出TSP3潜在的T细胞表位为T33-42、T45-55、T53-63、T68-77、T80-90、T92-104、T110-122、T134-144;TSP3潜在的B细胞表位为T18-33、T45-55、T53-63、T64-75、T80-90、r1192-104、T110-122。结论TSP3的二级结构特征显示潜在优势抗原性表位存在,预测出8种T细胞抗原表位和7种B细胞抗原表位,为后续表位疫苗的设计奠定了理论基础。
  • 多房棘球蚴重组蛋白CTB-Emy162的原核表达及分离纯化 免费阅读 下载全文
  • 目的构建融合基因CTB-Emy162原核表达系统,纯化得到多房棘球蚴重组蛋白CTB-Emy162。方法根据多房棘球蚴抗原Emy162在GenBank中的序列,用生物信息学软件Optimum TM Codon优化密码子适应指数(CAI)、最优密码子频率(FOP)及GC含量从而获得适合大肠杆菌BL-21表达的Emy162基因序列。PCR扩增Emy162基因,定向在pET-28a-CTB的CTB基因5’端插入Emy162基因。构建CTB和Emy162双基因原核表达质粒pET28a-CTB-Emy162,将该质粒转化于E.coli BL-21(DE3)中,经IPTG诱导蛋白表达后,利用Ni-NTA柱亲和层析及离子交换色谱纯化后获得目的蛋白。结果OptimumTMCodon获得优化后的Emy162序列,经生物公司测序及酶切鉴定结果证明重组质粒pET28a-CTB-Emy162构建成功,进一步实验结果表明CTB-Emy162在原核表达系统pET-28a中主要以包涵体形式存在,在可溶部位少量表达。继而经Ni-NTA柱亲和纯化及离子交换色谱纯化获得CTB-Emy162纯蛋白。结论以大肠杆菌E.coli BL-21(DE3)及pET-28a构成的原核表达系统能够成功表达重组蛋白CTB-Emy162,Ni-NTA纯化柱能够纯化目的蛋白CTB-Emy162。
  • 青海牧区57份自制牦牛乳制品中产EPS乳酸菌的分离鉴定及特性研究 免费阅读 下载全文
  • 目的从青海牧区牧民家庭自制牦牛乳制品(酸奶、曲拉)中分离产EPS乳酸菌,得到青海地区产EPS乳酸菌种群系统发育树,并鉴定高产EPS乳酸菌,为后期产EPS乳酸菌在乳品工业中的开发及利用提供理论基础。方法随机采集样本,乳酸菌采用CaCO,的MRS平板法分离,以形态结合生化实验初筛,用分子生物学方法即16srDNA序列测定、NCBI数据库BLAsT比对,构建系统进化树,最终确定乳酸菌种属;用苯酚-硫酸法对乳酸菌进行多糖产量定量分析;用琼脂扩散法行抑菌试验。模拟体外胃肠道环境完成生长实验。结果从57份样品中分离出纯菌种86株,生化试验结合16srDNA分析确定乳酸菌菌株52株,归属于5个菌属,分别是嗜热乳酸链球菌(33株)、粪肠球菌(6株)、侧孢短芽孢杆菌(4株)、干酪乳杆菌(5株)、嗜酸乳杆菌(4株);产EPS菌株为31株,以嗜热链球菌为主,EPS浓度为(16.09±5.39)mg/L,最高浓度达28.83mg/L,产量最高的是嗜热链球菌,来自果洛州;抑菌试验中的52株乳酸菌菌株对四种致病菌均有抑制作用,排除强酸和H2O2干扰后,有部分菌株无抑菌圈,且所有菌株抑制病原菌生长的能力较弱。模拟胃肠道生存实验中,不同时间生存率有差异,X2=247.87(秩和检验值=卡方值),P〈0.01,存活率中位数(四分位数间距,%)为:模拟胃液3h为92.70(91.75,93.54)、肠液3h为88.54(87.99,89.18)、肠液6h为84.36(83.21,86.28)、肠液12h为76.02(74.42,77.21)、肠液24h为65.43(64.32,66.94),存活率随时间的延长而降低。结论青海传统牦牛发酵乳中主要的优势乳酸菌为嗜热链球菌,其次为粪肠球菌和干酪乳杆菌;青海牧区传统牦牛发酵乳中乳酸菌产EPS产量相对较低;乳酸菌对四种肠道病原菌的抑制作用较弱,其中对大肠杆菌抑制作用?
  • MSCTPV测量脾脏指数评价高海拔地区汉族肝硬化食道静脉曲张及出血程度 免费阅读 下载全文
  • 目的明确高海拔地区汉族肝硬化患者食道静脉曲张及出血的SI平均数值及最小数值。方法运用多层螺旋CT门静脉系统造影(MSCTPV)测量高海拔地区发生食道静脉曲张的肝硬化患者的脾脏指数(SI)范围,及有、无曲张静脉破裂出血肝硬化患者的SI数值范围,并与平原地区同类患者行对比分析。结果1)SI与食道静脉曲张两者间有显著性差异(t=5.3,P=0.000);2)随着SI数值的增大,曲张的食道静脉破裂出血概率明显增高(t=12.16,P=0.000);3)高海拔地区肝硬化患者食道静脉曲张及出血的SI平均数值及最小数值较平原地区大。结论MSCTPV测量脾脏指数对评价肝硬化食道静脉曲张程度及出血较其他影像检查方法客观、准确。高海拔地区肝硬化患者食道静脉曲张及出血的SI平均数值及最小数值与平原地区不同,具有地域性。
  • 青海地区回族、撒拉族胃癌患者雌激素受体基因多态性研究 免费阅读 下载全文
  • 目的通过研究青海地区回族、撒拉族人群中ERa基因PvuⅡ和XbaⅠ、ERB基因RsaⅠ及AluⅠ单核苷酸多态性(SNPs)分布情况,分析ERa基因和ERβ基因SNPs与青海地区回族、撒拉族胃癌患者的关系。方法收集青海地区原发胃腺癌回族、撒拉族患者及条件与之匹配的健康对照组各80例。采集观察对象空腹静脉血2~3mL提取DNA。应用PCR-RFLP法对ER仅基因PvuⅡ和XbaⅠ、ERB基因RsaⅠ及AluⅠ单核苷酸多态性(SNPs)进行鉴定,利用统计学方法分析ERa基因PvuⅡ和XbaⅠ、ERβ基因RsaI和AluⅠ基因多态性与罹患胃癌危险性的关系。结果回族胃癌组和对照组对比ERot-XbaⅠ基因XX、Xx、xx分布存在显著性差异,撒拉族胃癌组和对照组对比ERa-XbaⅠ基因XX、Xx、xx分布存在显著性差异;回族、撒拉族胃癌组和对照组ERa-PvuⅡ、ERβ-RsaⅠ、Erβ-AluⅠ基因型分布无差异;研究对象中胃癌组回族和撒拉族ERa-XbaⅠ、ERa-PvuⅡ、ERB-RsaⅠ、Erg-AluⅠ基因型分布无显著性差异。结论ERa基因XbaI位点多态性与青海地区胃癌的易感性存在相关性;ERa-XbaI基因分布可能增加了罹患胃癌的危险性。但在青海地区回族、撒拉族胃癌人群间该基因型分布无显著性差异。ERa基因PvulI、ERB基因AluⅠ和RsaⅠ位点多态性与青海地区胃癌的易感性不具有相关关系。
  • 青海地区回族胃癌患者PLCE1 rs3765524基因多态性研究 免费阅读 下载全文
  • 目的探讨青海地区回族胃癌患者PLCE1rs3765524基因多态性。方法采用1:1匹配病例对照研究。选取78例青海大学附属医院胃癌住院病例为病例组,按年龄、性别、民族匹配正常对照组。利用TanMan—NGB探针法对78例病例和78例对照进行PLCE1基因rs3765524位点基因型检测,比较、分析病例组和正常对照组间的该位点基因型频率的分布差异。结果PLCE1基因rs3765524位点基因型的分布频率在病例组和正常对照组之间的差异无统计学意义(P=0.207,P=0.075)。结论PLCE1基因rs3765524位点C〉T的多态性改变与青海地区回族人群胃癌患病易感性之间无关联。
  • 唐古特红景天舒张肺小动脉的有效部位及机制的初步研究 免费阅读 下载全文
  • 目的研究唐古特红景天舒张大鼠离体肺小动脉的有效部位及机制。方法制备唐古特红景天95%、70%醇提物及水提物,利用HPLC—DAD分析提取物的含量特征。测定不同提取物中总黄酮、总酚酸含量。采用大鼠肺小动脉血管环离体灌流技术,确定药物舒血管作用的有效部位。利用去甲肾上腺素(NE)及氯化钾(KCl)预收缩血管环,初步分析有效部位舒血管作用的机制。结果药物水提物中总黄酮及总酚酸的含量均为最高。水提物中具有末端吸收化合物的种类及含量较醇提物中的少,醇提物中仅化合物的含量差异较大。唐古特红景天舒张肺小动脉的有效部位主要富集于95%醇提物。药物有效部位可以浓度依赖性地舒张肺小动脉(0.76~7.6mg/mL),其舒血管作用与抑制细胞膜受体门控性钙通道的机制有关。结论唐古特红景天95%醇提物是其舒张肺小动脉的主要有效部位。有效部位可能通过抑制细胞膜受体门控性钙通道,减少Ca2+流入血管平滑肌细胞而发挥舒张血管的作用。
  • 青海道地药材麻花艽有效成分与生态因子相关性研究 免费阅读 下载全文
  • 目的考察青海道地药材麻花艽主产地生态因子对其主要有效成分含量的影响,探讨生态因子与麻花艽品质的相关性,确定影响麻花艽根茎中有效成分含量的主导生态因子。方法对青海境内野生麻花艽的野生资源、生态环境进行调查分析,利用高效液相色谱法检测麻花艽有效成分龙胆苦苷、獐牙菜苦苷的含量,采用相关分析、逐步多元回归分析法判断麻花艽有效成分与生态因子的相关性。结果野生麻花艽有效成分龙胆苦苷、獐牙菜苦苷的含量与产地海拔、日照时数、年降水量、相对湿度呈显著性正相关。结论一定范围内,海拔、日照时数、相对湿度、降雨量与麻花艽有效成分龙胆苦苷、獐牙菜苦苷的含量呈显著性正相关。日照时数、相对湿度是综合影响青海境内麻花艽有效成分龙胆苦苷、獐牙菜苦苷含量的主导因子。其他生态因子与麻花艽有效成分含量无显著关系。
  • 活血化浊方对心肌缺血再灌注大鼠心肌损伤的干预作用 免费阅读 下载全文
  • 目的探讨活血化浊方对缺血再灌注大鼠心肌损伤的干预作用及机理。方法48只Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参组、活血化浊方高剂量组、活血化浊方中剂量组、活血化浊方低剂量组(各8只)。丹参组大鼠予丹参混悬液[1.5g(药物含量)/kg(大鼠体重)],活血化浊方高、中、低剂量组大鼠分别予活血化浊方混悬液5.0、1.5、0.5g/kg,均用生理盐水稀释至2mL,假手术组及模型组予等量生理盐水。各组喂养4W后,麻醉开胸,假手术组不做结扎,其余各组大鼠丝线结扎冠状动脉左前降支,30min后,剪开丝线,再灌注60min,建立实验性心肌损伤(I/R)模型。测定血清心肌酶谱五项(CK、CK—MB、AST、HBDH、LDH)水平;取大鼠心尖组织测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量;观察各组大鼠心电图ST段变化情况。结杲造模后大鼠血清心肌酶谱五项,心肌组织SOD、MDA及ST段平均值均有不同程度变化;活血化浊方高、中、低组血清CK、CK-MB、LDH、AST、HBDH水平明显低于模型组,其高、中剂量组优于其他组;活血化浊高、中剂量组大鼠心肌组织SOD水平明显高于模型组及低剂量组和丹参组;MDA水平明显低于模型组及低剂量组和丹参组。各组大鼠冠状动脉结扎再灌注后ST段平均值:活血化浊方高、中剂量组低于模型组、低荆量组和丹参组,活血化浊低剂量组与丹参组比较无显著性。结论活血化浊方对心肌缺血再灌注大鼠的心肌损伤有一定的干预作用,其机理可能与活血化浊方能够改善急性心肌缺血状态下的心肌酶谱,增加SOD的活性,减少MDA的产生,以及抑制心电图中ST段病理性抬高,保护心肌细胞免受损害相关。
  • 益气合剂对免疫受抑大鼠免疫功能的影响 免费阅读 下载全文
  • 目的研究益气合剂对免疫受抑大鼠的免疫调节作用。方法腹腔注射环磷酰胺建立免疫受抑大鼠模型。测定模型大鼠血清IgG、IgA、IgM含量,IL-2生成能力,胸腺指数与脾脏指数等免疫指标,评价益气合剂免疫调节作用。结果益气合剂组大鼠血清IgG、IgM、IgA的含量,IL-2的生成能力及胸腺指数、脾脏指数与模型组比较明显升高(P〈0.05)。结论益气合剂能增强免疫受抑大鼠的免疫功能。
  • 低氧对间充质干细胞生物学功能的影响 免费阅读 下载全文
  • 间充质干细胞(MSC)具有自我更新、多向分化、免疫抑制的特性,MSC的这些生物学特性受氧浓度、温度等多种因素的影响。氧对于几乎所有的生命都是必需的,它维持细胞的能量代谢及功能。生理条件下各组织细胞生存环境的氧体积分数不同,人体血液中氧体积分数为10%~13%,
  • 新型诊断标志物循环miRNA的研究进展与应用 免费阅读 下载全文
  • 循环miRNA是一类在血清、血浆等体液中稳定存在的miRNA分子,具有差异表达明显、检测灵敏、取材方便等特点。循环miRNA可作为一种新型诊断标志物分子,在癌症预测、产前诊断、损伤及感染检测等多个方面有临床应用前景。本文即对循环miRNA的来源和功能、诊断标志物潜能及临床应用前景等方面的研究进展作一综述,并对目前应用中存在的相关问题进行探讨。
  • [高原医学基础研究]
    多房棘球蚴抗原蛋白TSP3抗原表位的生物信息学预测(庞明泉[1,3];汤锋[2,3,4];周虎[1,3];万陈飞[1,3];阳丹才让[1,3,4];樊海宁[1,3,4])
    多房棘球蚴重组蛋白CTB-Emy162的原核表达及分离纯化(周虎[1,2];汤锋[2,3,4];庞明泉[1,3];万陈飞[1,3];樊海宁[1,3,4];阳丹才让[1,3,4];邓勇[1,3,4])
    青海牧区57份自制牦牛乳制品中产EPS乳酸菌的分离鉴定及特性研究(唐超群;永胜;朱德锐;刘静;双杰)
    MSCTPV测量脾脏指数评价高海拔地区汉族肝硬化食道静脉曲张及出血程度(栗海龙;鲍海华;李伟霞;吴有森)
    [高原民族医学基础研究]
    青海地区回族、撒拉族胃癌患者雌激素受体基因多态性研究(王成;赵延芳;王虎;谢艳超)
    青海地区回族胃癌患者PLCE1 rs3765524基因多态性研究(沈国双;郑方超;赵久达)
    [高原药学基础研究]
    唐古特红景天舒张肺小动脉的有效部位及机制的初步研究(李更兄;盖祥云;李占强;常荣;祁玉娟;扎西东主;靳国恩;聂生斌;吴萍;芦殿香)
    青海道地药材麻花艽有效成分与生态因子相关性研究(李永平;王树林;李向阳;曹宁丽;洒玉萍;保善录)
    活血化浊方对心肌缺血再灌注大鼠心肌损伤的干预作用(潘霞;曹昌霞)
    益气合剂对免疫受抑大鼠免疫功能的影响(马锦;杨如意)
    [综述]
    低氧对间充质干细胞生物学功能的影响(朱雪玲;苏占海)
    新型诊断标志物循环miRNA的研究进展与应用(何顺伟;魏晓星[1,2])
    《青海医学院学报》封面
      2010年
    • 01

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