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文献检索:
  • 《中国组织工程研究》杂志2013年出版重点
  • 最美之冰凌花 世间有许多美丽的花儿令人欣赏,令人陶醉,这其中是否包含来自严寒世界的霜花雪花冰花和冰凌花呐?我喜欢她们,缘于我青春时代的很多岁月和很多可以记忆的故事都与她们相关。
  • 《中国组织工程研究》杂志作者首次修稿自查表
  • 请作者按下述标准首次修改稿件,修改后自认合格项(√)1.文章类型:研究原著(研究与报告、技术与方法)()研究快报()学术探讨()综述()述评特邀专家撰写,不收自然来稿。一般情况下不收病例报告类文章。
  • 跳跃探针式离子电导显微镜动态观察大鼠海马神经元坏死
  • 背景:目前关于神经元坏死的分子机制研究已取得一定进展,然而由于技术水平的限制,对神经元坏死过程细胞的动态变化研究较少。应用跳跃探针式离子电导显微镜可对体外培养神经元进行实时、非接触式的连续观察。目的:采用跳跃探针式离子电导显微镜动态观察大鼠海马神经元坏死过程中细胞表面形态随时间的动态变化。方法:体外原代培养大鼠海马神经元,用1mmol/L过氧化氢溶液处理30min致神经元坏死。采用跳跃探针式离子电导显微镜连续扫描,观察神经元坏死过程中其胞体与突起的形态变化,并测量其细胞高度与体积变化。结果与结论:跳跃探针式离子电导显微镜连续扫描9h结果显示,过氧化氢组大鼠海马神经元由正常的三角形或梭形逐渐肿胀变成球形,轴突与树突出现串珠样改变,最终神经突断裂并溶解消失。同时测量细胞高度与体积后结果显示,过氧化氢组神经元细胞高度比及体积比于扫描后2-7h之间持续增加(P〈0.05),扫描后7-9h之间维持于相对稳定水平,最终高度与体积值约为初始值的2倍。线性回归分析结果示在扫描后1-7h之间过氧化氢组神经元高度与体积增加量与时间呈线性相关(b=0.15,P〈0.05;b=O.17,P〈O.05)。结果证实,利用跳跃式离子电导显微镜技术观察大鼠海马神经元坏死,可以得到了高质量的细胞图像,更准确的细胞高度与体积的信息。
  • 龟鹿胶、淫羊藿及红景天对骨质疏松大鼠骨密度及破骨细胞的影响
  • 背景:中药研究骨质疏松症目前缺乏系统的药效学研究,中药组方尚欠精简,机制研究与中医理论指导不够紧密。目的:观察中药复方龟鹿胶、淫羊藿、红景天对去卵巢大鼠血清各指标、骨密度及破骨细胞的的调控作用。方法:建立去卵巢大鼠模型,分别用自拟中药组方龟鹿胶组、淫羊藿组、红景天组进行灌胃,以假手术组和模型组进行对比。造模后第4周开始称体质量,每周1次。造模后12周后测定大鼠骨密度、血清中钙、磷含量、血碱性磷酸酶活性等指标比较治疗效果,应用体外培养破骨细胞观察各组中药对破骨细胞抑制率的影响。结果与结论:龟鹿胶能显著减少去卵巢大鼠体质量的增加幅度(P〈0.05)。相比模型组3种中药治疗组大鼠血清中钙含量明显升高(P〈O.05),血磷与碱性磷酸酶活性明显降低(P〈0.01或P〈0.05)。龟鹿胶组和淫羊藿组大鼠骨密度显著高于模型组(P〈0.05)。3种中药治疗组与假手术组相比吸收陷窝数明显减少(P〈0.05),其中红景天组吸收陷窝数减少较显著(P〈0.01),红景天组对破骨细胞吸收功能具有抑制作用,抑制率为86.85%(P〈0.01)。结果证实,中药组方龟鹿胶、淫羊藿、红景天对去卵巢骨质疏松均具有显著疗效,其中龟鹿胶组和淫羊藿组主要以增加骨密度为主,红景天组具体表现在对破骨细胞吸收功能具有抑制作用。
  • 健骨颗粒促进成骨细胞增殖的分子机制
  • 背景:ERK是依赖于Ras途径激活的一个蛋白激酶,在成骨细胞增殖和分化过程中发挥重要作用。而PD98059是MEK特异性抑制剂,它可通过抑制MEK的活性来抑制ERK的磷酸化,从而起到阻断ERK信号通路的作用。目前有关ERK在大鼠成骨细胞增殖和分化过程中的作用研究甚少。ERK在健骨颗粒促进大鼠成骨细胞增殖和分化过程中调控的作用更未被阐明。目的:观察ERK信号转导通路在健骨颗粒促成骨细胞增殖和分化过程中的作用。方法:取第3代SD大鼠头盖骨成骨细胞,空白组加入生理盐水血清;中药组加入最佳浓度的健骨颗粒含药血清;阻滞剂组添加PD98059阻断剂,中药加阻断剂组添加PD98059阻断剂与健骨颗粒含药血清。用MTT法测定细胞的增殖能力,比色法测碱性磷酸酶、羟脯氨酸水平。收集细胞实时荧光定量PCR-SYBRGREEN法检测Cbfal、Ⅰ型胶原、OSXmRNA的表达,Westren blot法检测成骨细胞ERK的表达情况。结果与结论:添加PD98059阻断剂后,阻滞剂组和中药加阻滞剂组中ERK的表达显著低于空白组和中药组。阻断剂组的成骨细胞内碱性磷酸酶、羟脯氨酸的表达以及Cbfal、I型胶原、OSX mRNA表达显著低于空白组和中药组。ERK在健骨颗粒促进大鼠成骨细胞增殖和分化过程中发挥重要作用,ERK信号通路可能是健骨颗粒促进成骨细胞增殖和分化的主要途径。
  • 四种血清生物标志物联合检测早期诊断和评价骨关节炎的价值
  • 文献报道显示生物标志物在诊断早期骨关节炎方面有其独特优势,但到目前为止,人们对这些生物标志物诊断人类早期骨关节炎方面的应用价值尚不清楚。目的:定量检测新西兰大白兔血清中Ⅱ型胶原C-端肽、基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1水平的变化,探讨其作为骨关节炎早期诊断及病情评估指标的价值和意义。方法:新西兰大白兔35只,实验组(28只)切除韧带和半月板进行造模,分别在造模1,2,3,4周后分批进行血清生物标志物Ⅱ型胶原C-端肽、基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1水平的检测,以及膝关节MRI检查,关节样本大体观察,组织病理学观察。对照组(7只)不做韧带和半月板的切除,同样在上述4个时间点检测4种生物标志物水平;术后4周行膝关节MRI检查、关节样本大体观察、组织病理学观察。结果与结论:实验组术后各时间点4种生物标志物水平均高于对照组,差异有显著性意义(P〈0.05);术后1周,组织病理学变化及膝关节MRI信号改变不明显;术后2周,出现骨关节炎特征性病理变化和膝关节MRl信号改变;术后3,4周,骨关节炎特征性病理变化和膝关节MRI信号改变更加明显;而4种生物标志物在膝关节未出现明显病理学变化和明显MRI改变时即已增高。结果可见血清Ⅱ型胶原C-端肽、基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α、白细胞介素1的联合检测,可作为骨关节炎早期诊断和病情评估的参考指标。
  • 建立小鼠成骨与破骨细胞相互作用的共育新体系
  • 背景:众所周知,骨重建是骨组织中重要的生物学反应过程,其中成骨细胞与破骨细胞发挥了关键作用。但目前,关于骨重建中成骨与破骨细胞间信号传递的深层机制还不清楚。目的:利用transwell技术,在体外建立一种成骨与破骨细胞的新型共育体系,为深入研究骨重建中成骨与破骨细胞的相互作用提供成熟的实验模型。方法:采用MC3T3-E1成骨样细胞株与RAW264.7破骨前体细胞株,进行体外成骨与破骨细胞的诱导分化,并利用Transwell共培养板(0.4μm聚酯膜)建立成骨与破骨细胞的共育体系。共培养6d后,通过测定细胞活性和碱性磷酸酶(ALP)活力分析成骨细胞的增殖和分化活性,利用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、甲苯胺蓝fTB)染色、TRAP活性测定及扫描电镜技术观察破骨细胞的分化及骨吸收功能。结果与结论:共培养体系中成骨样细胞的无限增殖能力减弱,而分化活性明显增强,同时破骨前体细胞被诱导分化为成熟的破骨细胞,并具有一定的骨吸收功能。因此,该共培养体系可用于骨重建中成骨与破骨细胞问信号通路的深层研究。
  • 骨挤压对种植体初期稳定性的影响
  • 种植体的初期稳定性是影响种植体成败的关键因素,提高种植体在骨质不佳的植入床中的初期稳定性可以提高种植体的成功率。目的:通过建立体外松质骨的骨块模型,模拟临床牙种植体植入,采用骨挤压术和传统备洞术在新鲜离体骨块上植入种植体,观察不同种植方法对种植体初期稳定性的影响。方法:从新鲜的猪肩胛嵴处截取骨段,制成10mm×l0mm×l0mm的新鲜立方形骨块(12块),固定后用骨挤压术和传统备洞术植入相同规格相同型号的BEGO种植体,分别记录种植体初期稳定性,并对观察结果进行t检验分析。’结果与结论:与传统备洞技术相比,在种植手术中采用骨挤压方法获得的种植体初期稳定性较高(P〈005)。提示骨挤压技术可以为种植体提供更好的初期稳定性。
  • 不同剂量比淫羊藿苷与辛伐他汀对家兔桡骨骨折愈合的影响
  • 背景:淫羊藿苷与辛伐他汀单独或联合应用均可以促进骨折愈合,联合应用的最佳剂量比缺乏实验依据。目的:观察不同剂量比淫羊藿苷与辛伐他汀对家兔骨折愈合的影响。方法:将45只健康家兔建立双侧桡骨骨折模型,随机等分为模型组、骨形态发生蛋白2组和淫羊藿苷:辛伐他汀3:1,1:1,1:3组。模型组、骨形态发生蛋白2组给予生理盐水灌胃,淫羊藿苷:辛伐他汀3:1,1:1,1:3组给予淫羊藿苷溶液15mL/(kg·d)和辛伐他汀溶液5mL/(kg·d),淫羊藿苷溶液10mL/(kg·d)和辛伐他汀溶液10mL/(kg·d),淫羊藿苷溶液5mL/(kg·d)和辛伐他汀溶液15mL/(kg·d)灌胃。模型组和淫羊藿苷:辛伐他汀3:1,1:1,1:3组骨折局部注射生理盐水,骨形态发生蛋白2组骨折局部注射骨形态发生蛋白2溶液。灌胃连续6周,骨折局部注射连续2周。结果与结论:在骨痂生长、改建和髓腔再通、骨密度和骨折部位组织形态方面,骨形态发生蛋白2、淫羊藿苷:辛伐他汀1:1组最好,淫羊藿苷:辛伐他汀3:1,1:3组居中,模型组最差。提示不同剂量比淫羊藿苷和辛伐他汀联合应用均可促进家兔桡骨骨折愈合,当剂量比为1:1时,促进作用更显著。
  • 成人牙根唇舌侧牙槽骨的厚度
  • 背景:牙根在牙槽骨的位置及周围骨板厚度影响着口腔治疗,治疗过程中如果对牙齿控制不当可造成医源性并发症。以往对颌骨的研究主要针对解剖学、骨厚度或骨密度,对于牙根在牙槽骨内的空间位置及其与周围骨骼的关系,研究关注较少。目的:建立颌骨的数字化计算机三维模型,测量牙根的唇舌侧牙槽骨厚度。方法:选择牙列完整无明显骨骼吸收的年轻成人70例,采用牙科专用锥形束CT机进行颌面部扫描,将扫描中采集的容积信息传入计算机工作站,以及冠状位或矢状位多平面重建,获得高质量的重建图像,原始数据以DlCOM格式导入计算机,并输出到整合的3D设计软件Inviv05软件进行测量。结果与结论:重建的颌骨数字化模型可从多平面进行观察及测量,实验测得70例患者各个牙根唇舌侧牙槽骨厚度的均值:上下前牙舌侧牙槽骨厚度大于唇侧(P〈0.05);除上前磨牙的牙颈部唇侧牙槽骨较厚外,其他前磨牙舌侧牙槽骨厚度大于唇侧(P〈0.05);上磨牙和下颌第一磨牙唇舌侧牙槽骨厚度接近,下第二磨牙唇侧牙槽骨厚度大于舌侧(P〈0.01)。结果证实,成人不同牙位的唇舌侧牙槽骨厚度差异较大。
  • 规律运动增加内皮祖细胞数量和功能改善衰老血管弹性
  • 背景:近来研究发现运动可以增加内皮祖细胞数量和功能,有助于改善内皮功能。但是,运动对是否能通过上调循环内戍讯细胞数量和功能改善衰老血管弹性尚不清楚。目的:观察规律运动是否通过影响循环内皮祖细胞数量和功能改善衰老所致血管弹性下降。方法:对10例男性健康青年志愿者和10例健康老年志愿者予以规律运动锻炼3个月,流式细胞仪测定运动前后CD34和KDR双标阳性循环内皮祖细胞水平,乙酰化低密度脂蛋白及凝集素荧光标记方法评估体外培养内皮祖细数量,检测内皮祖细胞的迁移和增殖能力,并测定运动前后脉搏波传导速度的变化。结果与结论:与健康青年志愿者比较,老年志愿者循环内皮祖细胞数量和功能明显下降,脉搏波传导速度减退。健康志愿者规律运动后循环内皮祖细胞水平较运动前增加,乙酰化低密度脂蛋白及凝集素双阳性内皮祖细胞数量较运动前增加,内皮祖细胞迁移和增殖能力明显增强,脉搏波传导速度下降,老年志愿者变化更为明显。循环内皮祖细胞数量及功能的增加倍数和脉搏波传导速度下降倍数呈明显正相关,多元回归分析显示乙酰化低密度脂蛋白及凝集素双阳性内皮祖细胞及增殖功能的增加倍数是脉搏波传导速度下降倍数的独立预测因素。说明规律运动可通过增加循环内皮祖细胞数量和功能改善衰老所致的血管弹性下降,提示运动调节内皮祖细胞可能是其保护衰老血管损伤的作用机制之一。
  • 衰老血管内皮细胞线粒体膜电位与活性氧的变化
  • 背景:血管内皮细胞衰老、凋亡与再生的平衡对正常血管的功能维持具有极其重要的作用。而线粒体是机体细胞内的重要细胞器,除了合成ATP为细胞提供能量外,还控制细胞程序性死亡、以及衰老等多种病理生理的代谢过程。目的:通过检测脐静脉内皮细胞传代过程中线粒体膜电位与活性氧的改变及其相互关系,从而探讨细胞衰老过程中所产生的功能障碍。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,选取传代过程中的第2,4,6,8代细胞,采用流式细胞术检测细胞线粒体膜电位及活性氧变化。选取第2,8代细胞行透射电镜检查,观察正常及衰老细胞超微结构的改变。结果与结论:传代衰老过程中,血管内皮细胞线粒体膜电位逐代降低,而胞内活性氧则出现由增加转而降低的过程。传代后期血管内皮细胞同早期内皮细胞相比,线粒体及内质网明显减少。说明内皮细胞在传代导致的复制性衰老过程中,线粒体膜电位降低,线粒体受损。而在早期传代过程中线粒体轻度受损,而活性氧产生增加,但在线粒体严重受损、功能严重退化过程中,活性氧产生降低。
  • 颈动脉分叉部的三维CT血管成像解剖测量
  • 背景:解剖测量是临床医学的基础,可为临床影像学诊断与外科手术提供依据与参考。利用三维CT血管成像技术进行相关解剖测量具有明显的技术优势与很好的应用前景。目的:应用64排螺旋CT血管成像对颈动脉分叉部的形态结构进行测量,为相关研究提供解剖基础。方法:查阅2008年6月至2010年6月于厦门大学附属中山医院影像科行头颈部64排螺旋CT血管成像受检者的扫描图像,随机选取颈动脉分叉部无明显病变者92例。其中男45例,女47例;≤40岁者40例,〉40岁者52例。利用其断面图像进行三维成像处理,获得满意的三维图像后,对颈动脉分叉部相关结构进行解剖学测量。结果与结论:三维图像可清晰显示颈动脉分叉部结构,实现其结构的单独和多结构、多方向观察及测量。测量结果显示受试者颈动脉分叉角为(43,5±12,3)°,颈总动脉远端内径(6.83±0.65)mm,颈内动脉膨大区近端内径(7.25±1.04)mm,颈内动脉膨大区最大内径(8.15+1.35)mm,颈内动脉膨大区远端内径(5.03±0.55)mm,颈外动脉内径(4.22±0.60)mm。与≤40岁组比较,〉40岁组颈动脉分叉角度、颈内动脉膨大区近端内径、颈内动脉膨大区最大内径、颈内动脉膨大区远端内径均明显粗大,颈外动脉内径明显细小(p〈0.05),而颈总动脉内径差异无显著性意义(P〉0.05)。与男性组比较,女性组颈动脉分叉部各测量指标均显著细小(P〈0.05)。左、右侧组测量值比较,除颈动脉分叉角左侧明显大于右侧外,其他测量指标差异均无显著性意义(P〉0.05)。三维CT可客观、准确测量颈动脉分叉部相关解剖值,具有个体化特征,可为相关应用解剖、疾病诊断及介入或手术治疗提供客观依据。
  • 附子理中汤及拆方干预脾阳虚模型大鼠
  • 背景:中药复方多具有“双向调节”、“纠正偏性”从而恢复机体平衡的药效特点,实验拟采用附子理中汤及其拆方为干预药物,验证附子理中汤对脾阳虚证具有最佳的“温阳健脾”效果,为进一步了解附子理中汤多节点起效的机制提供基础资料。目的:以转化医学思维为指导观察附子理中汤及拆方对脾阳虚模型大鼠的药效。方法:采用肩胛间棕色脂肪切除术+高脂饲料喂养+隔日寒冷环境刺激的复合因素造模法制备脾阳虚Wistar大鼠模型,造模后第70天分别灌胃附子理中汤、理中汤和附子干姜汤;对照组不造模,喂饲普通饲料,测量各组大鼠体质量、肛温和肛温温度曲线下面积。结果与结论:模型组大鼠体质量增长最慢,其余给药3组体质量增长较快,又以附子组增长最明显,与模型组比较,差异有显著性意义(P〈0.05)。模型组大鼠肛温均低于其余4组,与对照组比较,差异有显著性意义(P〈0.05)。附子组大鼠肛温升高明显,与模型组比较差异有显著性意义(P〈0.05)。模型组大鼠的肛温温度曲线下面积低于对照组,差异有显著性意义(P〈O.05)。附子组、理中组、附姜组大鼠的肛温温度曲线下面积高于模型组,差异有显著性意义(P〈0.05或P〈O.01)。结果可见附子理中汤以及拆方理中汤和附子干姜汤均能纠正脾阳虚大鼠脾失健运导致体质量减少或增长缓慢和脾失温煦导致体温低的病理状态,以附子理中汤的效果较好。
  • 建立裸鼠皮下荧光子宫内膜异位症模型
  • 背景:将绿色荧光蛋白标记的裸鼠子宫内膜注射于裸鼠皮下,构建子宫内膜异位症动物模型,操作简便,同时可在一定时间内体外动态观察异位病灶的生长,有利于子宫内膜异位症的深入研究。目的:探讨构建裸鼠皮下子宫内膜异位症荧光模型的方法。方法:取裸鼠子宫内膜,采用增强型绿色荧光蛋白腺病毒转染后,注射入6只裸鼠皮下(转染荧光组),将未接受增强型绿色荧光蛋白腺病毒转染的子宫内膜组织块注射到另6只裸鼠腹部皮下(对照组)。于注射后第5,10,15,20,25,30天在体视荧光显微镜下观察皮下绿色荧光强度,记录荧光标记病灶的持续时间,同时行组织学检测两组异位病灶的情况。结果与结论:成功构建5个内膜异位症活体荧光裸鼠模型及5个内膜异位症活体非荧光裸鼠模型,平均每只裸鼠形成二三个病灶。利用体视荧光显微镜可通过活体动物的皮肤直接观察到体内病灶生长和发展,荧光面积和强度随时间延长逐渐减弱,可持续观察4周左右。对照组未检测到绿色荧光病灶。获取病灶组织经苏木精伊红染色,可观察到典型的子宫内膜腺体和基质结构。结果可见这种改良的裸鼠荧光模型可以动态无损伤量化观察病灶生长和发展情况,有助于内膜异位症新药的开发及其发病机制的研究。
  • 五谷虫抗金黄色葡萄球菌物质的纯化及抗菌机制
  • 背景:五谷虫抗菌物质提纯方法存在争议,抗菌作用机制不清。目的:分离纯化五谷虫抗菌物质,并明确其抗菌机制。方法:应用超滤法对五谷虫粗提物进行纯化,用酶标浊度法及K-B纸片琼脂扩散法筛选出具有明显抗菌活性的滤出液;MTT法检测滤出液对金黄色葡萄球菌增殖的影响及测定最低抑菌浓度(MIC);应用电镜技术观察抗菌物质作用后金黄色葡萄球菌的形态变化。结果与结论:酶标浊度法及K-B纸片琼脂扩散法均显示与五谷虫粗提物及截留液相比较,滤出液(Mr〈10000)的抗菌活性最强(P〈0.05),能明显抑制金葡萄菌增殖,且对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)为1g/L。五谷虫滤出液抗菌物质能使金黄色葡萄球菌细胞膜的通透性增加,使细菌细胞膜破裂,细胞内容物渗出。五谷虫抗菌物质相对分子质量小于10000,其可能通过作用于金黄色葡萄球菌细胞膜而形成孔洞,增加细胞膜通透性,而发挥抗菌作用。
  • 酸性成纤维细胞因子基因体外转染肌卫星细胞
  • 背景:研究报道外源性酸性成纤维细胞生长因子既可调节肌卫星细胞增殖和分化,又具有预防运动终板退变及肌萎缩的作用。目的:通过酸性成纤维细胞因子基因转染大鼠骨骼肌卫星细胞,检测目的基因转染肌卫星细胞效果及基因表达情况,探讨建立有效预防运动终板退变及肌萎缩种子细胞可行性。方法:取Wistar成年大鼠后肢肌肉,差速贴壁培养法分离纯化肌卫星细胞,观察细胞生长特性并做免疫组织化学鉴定;取第2代细胞,Lipofectamine^TM 2000 Reagent转染试剂介导,将重组真核表达质粒pEGFP-N1-aFGF转染肌卫星细胞为实验组;阴性对照组转染空载质粒pEGFP-N1;空白对照组仅加入转染试剂。转染后24-72h和传代后分别用倒置荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白表达情况,计算转染效率。转染细胞行Western Blot检测酸性成纤维细胞因子表达。提取转染后72h细胞总RNA,实时荧光定量PCR检测酸性成纤维细胞因子基因mRNA表达。结果与结论:分离纯化细胞经免疫组织化学鉴定为肌卫星细胞。荧光显微镜观察到细胞转染6h后即有绿色荧光发出,荧光强度和表达细胞总数在72h达到高峰,传代后仍可观察到绿色荧光蛋白表达。实时荧光定量PCR证实目的基因mRNA表达水平远远高于对照组,Western Blot检测实验组有大量酸性成纤维细胞因子产生。提示酸性成纤维细胞基因转染肌卫星细胞可表达基因产物,有望作为基因工程种子细胞预防失神经支配后运动终板退变及肌萎缩。
  • 原代人宫颈癌细胞的培养方法
  • 背景:在体外分离、培养宫颈癌上皮细胞,从细胞水平及分子水平研究肿瘤病因及治疗的基础,是宫颈癌组织工程研究的最基本环节。目的:探讨适用于组织工程宫颈癌研究的人宫颈癌原代细胞培养方法以及传代后细胞形态变化、增殖的特性。方法:0.25%胰蛋白酶和2%Ⅰ型胶原酶联合消化法体外培养宫颈癌原代细胞,荧光倒置显微镜下观察肿瘤细胞形态、体外生长情况,免疫组化法检测体外培养宫颈癌细胞表面标记物CKl7和肿瘤细胞增殖抗原Ki67表达。结果与结论:采用胰蛋白酶与Ⅰ型胶原酶联合消化法体外分离培养人宫颈癌细胞,该法相对简单且重复性较好,所得到的原代细胞纯度较高。经体外传代培养的宫颈癌细胞仍可保持稳定的细胞表型。宫颈癌细胞表面标记物CKl7阳性表达,证实细胞为卜皮源性,肿瘤细胞增殖抗原Ki67表达阳性提示所培养细胞具有肿瘤细胞恶性增殖的特性。
  • 鱼藤素可影响斑马鱼胚胎Wnt信号通路相关基因的表达
  • 背景:前期研究发现,在斑马鱼早期发育的不同时期,经过一定浓度鱼藤素处理的胚胎表现出不同程度的发育延缓和表型异常。目的:观察斑马鱼早期胚胎发育过程中鱼藤素对writ信号通路相关基因表达的影响。方法:收集孵育至shield期的斑马鱼胚胎于6孔板中,加入0.6μmol/L浓度的鱼藤素溶液,避光处理,28℃培养箱中孵养。用0.1%二甲基亚砜溶液作为对照组,相同条件培养。在受精后6,8,10,12,14,24h时用正置荧光显微镜拍照观察鱼藤素处理后斑马鱼胚胎发育表型。实时荧光定量核酸扩增检测鱼藤素作用前后目的基因表达水平的变化。结果与结论:shield期处理的斑马鱼胚胎在bud期停止生长;wnt信号通路上的wnt9a,wntl0b和axin2以及与writ信号具有密切联系的snaillb,Jnk2表达发生显著变化,其中wnt9a,wntlOb,axin2,snaillb表达上调,Jnk2表达上调。结果提示鱼藤素对斑马鱼体内wnt信号具有负调节作用。
  • 基于MATLAB视网膜视锥细胞的图像处理
  • 背景:视网膜自适应光学成像系统所获取的视锥细胞图像具有灰度分布相对集中、亮点边缘比较模糊、存住伪轮廓及边缘相粘连的特点,寻找一种适合视锥细胞图像的处理算法来获取视网膜视锥细胞清晰轮廓成为今后工作的重点内容。目的:采用MATLAB图像处理工具箱对视锥细胞图像进行边缘提取,获取其清晰的边缘轮廓。方法:对30例正常受试者不同部位视锥细胞图像进行预处理、边缘提取和形态学处理,获取视锥细胞图像清晰的边缘轮廓;对处理后的图像进行细胞计数,并分析视锥细胞密度分布特性,进而来验证图像处理算法应用于视锥细胞分布特性研究的可行性。结果与结论:获取了清晰的视网膜视锥细胞图像轮廓;从结果来看,随着远离黄斑中心凹,细胞密度呈现出降低的趋势,从黄斑中心凹偏O.5°到1°范围内,视网膜视锥细胞密度下降最快。结果提示:实验所设计的图像处理算法在研究视网膜视锥细胞分布特性方面是可行的。
  • 组织工程骨的血管化策略
  • 背景:如何在构建组织工程骨的同时重建其血液供应,已成为骨组织工程从基础研究向临床应用过渡的关键性问题。目的:对组织工程骨构建过程中一系列促进血管化的方法进行综述。方法:由第一作者检索PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)及万方数据库(http://www.wanfangdata.com.cn)1974至2008年有关组织工程骨构建过程中促进血管化方法的文献,检索词为“组织工程骨,血管化,骨缺损,血供”。阅读文献标题和摘要进行初筛,排除与本文研究目的无关及内容重复的研究,共保留61篇文献归纳总结。结果与结论:组织工程骨构建过程中促进血管化的方法主要包括体内及体外两方面。体外方案例如血管内皮细胞、生长因子,体内方案例如血管束、带血管蒂筋膜瓣、带血管蒂肌瓣、带血管蒂骨膜瓣等均对组织工程骨构建过程中的血管化进程具有促进作用。虽然血管化组织工程骨的研究取得了很大的发展,但仍然存在诸多不足。相信随着血管形成机制基础研究的深入,控释生长因子及其协同作用能力的提高,优化选择使用种子细胞,改进材料的结构性能,血管化组织工程骨将具有日益广阔的前景。
  • 失用性骨质疏松症的发病机制及预防治疗进展
  • 背景:失用性骨质疏松较为常见,因其特殊的病因,预防治疗缺乏有效手段,给社会和家庭带来了巨大的负担。目的:分析失用性骨质疏松的病因、发病机制及预防治疗方法,为失用性骨质疏松的有效预防提供参考。方法:检索CNKI和PUBMED数据库,2002年1月至2012年9月收录的失用性骨质疏松症的相关文献,中文检索词为“废用性骨质疏松或失用性骨质疏松”,共检索到中文67篇;英文检索词为“disuseosteoporosis AND English”检索到111篇相关文献,对文章进行初审,纳入文献主题与此文联系密切,原创、论点论据可靠的文章,观点明确,分析全面的文章;排除内容陈旧或重复文献及试验设计不是随机对照试验的文章。结果与结论:共纳入符合标准的文献50篇(中文25篇,英文25篇)。目前对失用性骨质疏松症的病因大致归为3大类,即机械负重的减少、微重力状态、脊髓及神经损伤。失用性骨质疏松的预防和治疗主要有:药物预防治疗,包括降钙素、中草药、双膦酸盐、维生素、钙、锶盐及神经生长因子等;物理治疗:脉冲电磁场、超声波、共振波、被动运动及电针治疗。目前临床上对失用性骨质疏松症没有理想的预防治疗措施,近年来研究者们开始试图从遗传学角度探讨其发病机制,在一些信号通道蛋白、特异性基因位点的研究中取得了一定进展。
  • SCl数据库收录的外科杂志对临床试验注册的要求②
  • ●Arthroscopy-The Journal of Arthroscopic and Related Surgery(《关节镜-关节镜及相关外科杂志》),SCI收录杂志,ISSN:0749-8063,2012年影响因子3.024。主要发表研究原著,系统综述,Meta分析,病例报告,给编辑的信/回复等类型稿件。
  • 骨合成促进剂治疗骨质疏松症的优势:
  • 背景:骨质疏松引发的骨折及其并发症严重影响老年人及绝经妇女生活质量。目的:旨在探究主要骨合成促进剂的研究新进展,以促进其临床应用。方法:由第一作者应用计算机检索PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI)、维普数据库和万方数据库1997年1月至2012年8月相关文献。在标题、摘要、关键词中以“bone formation,osteoporosis,osteoblast,osteoclast,bonemetabolism,PTH,Wntsignaling,medicine,target,inhibitor”或“骨合成,骨质疏松,成骨细胞,破骨细胞,骨代谢,甲状旁腺激素,Wnt信号,药物,靶目标,抑制剂”为检索词进行检索。初检得到398篇文献,最终选择40篇文献进行综述。结果与结论:骨合成促进剂不同于传统单纯抗骨吸收骨质疏松药物,能进一步增加骨量,对骨折风险的降低亦有一定作用。骨合成促进剂治疗骨质疏松有重要的临床价值。甲状旁腺激素及甲状旁腺激素相关肽,Wnt信号通路相关分泌型糖蛋白分子抑制剂如抗硬化蛋I~(Selerostin)抗体、Dkkl抑制剂、sFRP抑制剂、GSK3β抑制剂等是骨质疏松相关骨合成促进剂中的研究热点,但临床应用于同样存在一些局限性。
  • 脉冲电磁场与软骨代谢
  • 背景:目前研究已证实外周脉冲电磁场可以促进软骨代谢,但其分子水平机制仍不甚清楚。目的:探讨脉冲电磁场的物理特性及其在软骨形成方面的作用与机制。方法:由第一作者应用计算机检索PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI)、维普数据库和万方数据库1997年5月至2012年8月有关脉冲电磁场对软骨代谢影响的文献。在标题、摘要、关键词中以“pulsedelectromagnetic field(PEMFs),cartilage,bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs)”或“脉冲电磁场,软骨代谢,软骨细胞,骨基质,骨髓间充质干细胞”为检索词进行检索。排除重复研究或内容较陈旧的文献。结果与结论:初检得到145篇文献,排除99篇重复研究或内容较陈旧的文献,保留46篇文献进一步分析。结果显示,脉冲电磁场通过诱导骨髓间充质干细胞分化为软骨细胞,促进软骨特异性基质如Ⅱ型胶原及蛋白多糖的合成,从而发挥软骨诱导作用;脉冲电磁场通过促进转化生长因子B2与其他因子的表达,调节软骨细胞生长分化,使临床上永久性修复软骨组织缺损变为可能。
  • 环境、材料、安全、可控:组织工程技术修复关节软骨的症结
  • 背景:传统的软骨缺损的修复方法都有其局限性,组织工程技术的出现从根本上改变了“以创伤修复创伤”的传统治疗模式。目的:总结分析目前组织工程技术修复关节软骨的研究进展。方法:由第一作者检索1990年至2011年PubMed数据及中国知网数据库有关应用组织工程技术修复关节软骨方面的文献。共检索中文187篇,英文211篇,最终保留49篇进入结果分析。结果与结论:软骨组织工程的主要方法就是应用工程学和生命科学原理,在体外分离、培养、扩增所需要的种子细胞,然后将之种植于合适的生物支架材料上,将细胞支架复合体植入体内组织缺损部位,并加入一定的诱导条件,逐渐形成新的有功能的软骨组织。文章在种子细胞的选择方面重点叙述了自体软骨细胞、异体软骨细胞、胚胎干细胞、骨髓问充质干细胞的研究进展;在细胞诱导及条件培养方面重点叙述了细胞因子、细胞条件培养、转基因技术的研究进展;并对生物支架材料的选择和研究进行了相关叙述。找到最理想的种子细胞,合理联合应用细胞因子,更加真实的模拟细胞生存的微环境,基因工程安全、高效、可控转染,构建理想的支架材料,将是今后组织工程研究的重点和热点。
  • 转化生长因子β1对软骨组织代谢影响的研究进展
  • 背景:转化生长因子β1可以介导软骨合成、抑制胶原和蛋白多糖分解,在诱导软骨分化和维持软骨表型上起着重要作用,实现软骨缺损的功能性修复。目的:从生物学特性、在生物工程中的应用、基因多态性、信号通路及微小RNA等方面综述转化生长因子β1对软骨组织代谢影响的研究进展。方法:以“transforming growth factor-β1,Cartilage Differentiation,cartilage matrix”为英文检索词,以“转化生长因子β1,软骨分化,软骨基质”为中文检索词。经第一作者检索2007/2012CNKI数据库及SPRINGERLINK数据库有关转化生长因子β1对软骨组织代谢影响的研究进展方面的文献130篇,根据纳入排除标准保留54篇进行总结。结果与结论:转化生长因子β1可诱导间充质细胞向软骨细胞分化,促进软骨特异性基质的合成,保护软骨基质不被各种蛋白酶水解破坏,能够增强软骨组织自身再生能力,实现使软骨的损伤逆转,在软骨修复领域展现了巨大的潜在应用价值。
  • 衰老骨骼肌蛋白质的合成与抵抗
  • 背景:老年人随增龄出现的骨骼肌丢失现象称为骨骼肌衰老,通常表现为骨骼肌质量的丢失和力量的下降。其主要原因是衰老骨骼肌对骨骼肌蛋白合成刺激(补充蛋白质和运动)的敏感性下降,也即衰老出现了“蛋白质合成抵抗”现象。目的:从概念、可能机制和干预手段等方面对衰老骨骼肌蛋白质合成抵抗进行综述,为探究营养和运动等干预手段来预防和延缓骨骼肌衰老提供理论依据。方法:应用计算机检索Pubmed数据库和中国期刊网2000年1月至2011年12月相关文献。英文检索词为“skeletal muscle.aging,resistance training,protein”;中文检索词为“骨骼肌衰老,抗阻运动,蛋白质”。纳入标准:①观点明确,论点论据可靠的实验性文章。②与骨骼肌衰老以及相关内容的文章。排除标准:①与文章目的无关的内容。②重复性研究。结果与结论:随着年龄的增长,老年人骨骼肌对较低浓度的氨基酸敏感性下降,蛋白质合成速率减弱,即出现“蛋白质合成抵抗”。研究表明蛋白质补充及抗阻运动可促进老年人骨骼肌蛋白质合成。而抗阻运动并结合蛋白质补充对老年人骨骼肌蛋白质合成的影响更加明显。但是老年人补充蛋白质的量,抗阻运动的强度以及何时补充蛋白质仍需做进一步的研究。
  • 中国内地减肥手术治疗非肥胖型2型糖尿病的Meta分析
  • 背景:目前中国内地采用减肥手术治疗肥胖型2型糖尿病患者的疗效较好,但对非肥胖型2型糖尿病患者的疗效尚无明确报道。目的:以胃转流术为主,系统评价中国内地采用减肥手术治疗非肥胖型2型糖尿病的疗效。方法:计算机检索Cochrane图书馆临床对照试验资料库(2012年第2期)、MEDLINE(1990年至2012年2月)、EMbase(1990年至2012年2月)、CBMdisc(1990年至2012年2月)、CNKl(1990年至2012年2月),手工检索相关文献,选择中国内地采用减肥手术治疗非肥胖型2型糖尿病的报道。评估文献质量,提取相应信息后,采用RevMan5.1.O软件进行Meta分析。结果与结论:初检出30篇文献,经筛选最终纳入7篇文献,包括307例患者。文献总体质量不高,均为C级。各资料间存在异质性,采用随机效应模型进行合并计算。结果表明,行减肥手术非肥胖型2型糖尿病患者术后3,6个月空腹血糖水平[MD=-2.84,95%C/(-3.60,-2.08),P〈0.00001;MD=-3.79,95%c/(-4.56,-3.02),P〈0.00001]、术后3,6个月糖化血红蛋白水平[MD=-1.52,95%C/(-2.14,-O.89),P〈0.00001;MD=-1.90,95%c/(-2.46,-1.34),P〈0.00001]、术后6个月胰岛素抵抗指数[MD=-1.80,95%C1(-2.68,-0.91),P〈0.0001]均明显低于术前,敏感性分析显示合并性结果稳定可靠,倒漏斗图分析提示纳入的文献可能存在发表偏倚。提示中国内地采用减肥手术治疗非肥胖型2型糖尿病疗效较好,但由于文献质量不高,尚需高质量大样本长期随访研究进一步验证。
  • [倌声]
    《中国组织工程研究》杂志2013年出版重点
    《中国组织工程研究》杂志作者首次修稿自查表
    [神经组织构建]
    跳跃探针式离子电导显微镜动态观察大鼠海马神经元坏死(杨国巍 朱晖 周子伟 李瑛 张彦军 张建宁)
    [骨组织构建]
    龟鹿胶、淫羊藿及红景天对骨质疏松大鼠骨密度及破骨细胞的影响(杨澔侠[1] 杨洋[2] 薛鹏[2] 周福贻[2] 王胜军[1])
    健骨颗粒促进成骨细胞增殖的分子机制(林煜[1] 卢天祥[2] 吴银生[3] 黄云梅[3] 林燕萍[3])
    四种血清生物标志物联合检测早期诊断和评价骨关节炎的价值(于伟光 张新潮 朱行飞 刘志勇)
    建立小鼠成骨与破骨细胞相互作用的共育新体系(李建宇[1,2] 刘璐[1,2] 万宗明[1,2] 郝庆新[1] 李瑞欣[1] 郭勇[1] 张西正[1])
    [神经组织构建]
    骨挤压对种植体初期稳定性的影响(孙嵩[1] 赵峰[2] 孙勇[1])
    [骨组织构建]
    不同剂量比淫羊藿苷与辛伐他汀对家兔桡骨骨折愈合的影响(王惠平[1] 何爱咏[2] 常晓飞[3])
    [神经组织构建]
    成人牙根唇舌侧牙槽骨的厚度(丁继群[1] 方建强[2] 袁昌青[1] 陈杰[1])
    [血管组织构成]
    规律运动增加内皮祖细胞数量和功能改善衰老血管弹性(杨震[1] 张媛媛[1] 夏文豪[1] 罗初凡[2] 陈龙[1] 靳亚飞[1] 欧志君[1] 廖新学[1] 陶军[1])
    衰老血管内皮细胞线粒体膜电位与活性氧的变化(赵海梅[1] 杨斌[2] 成蓓[2])
    颈动脉分叉部的三维CT血管成像解剖测量(段少银[1,2] 林长华[1] 荆晶[1] 杨烈[1] 林清池[1,2])
    [组织构建实验造模]
    附子理中汤及拆方干预脾阳虚模型大鼠(唐汉庆 黄岑汉 黄赞松 黄秀峰)
    建立裸鼠皮下荧光子宫内膜异位症模型(袁华[1] 龚健[1] 王嘉圆[1] 黄伟[2])
    [组织构建细胞学实验]
    五谷虫抗金黄色葡萄球菌物质的纯化及抗菌机制(张振 洪亮 王寿宇 吕德成)
    [组织构建与生物活性因子]
    酸性成纤维细胞因子基因体外转染肌卫星细胞(杨绍安[1] 蔡进奎[1] 周初松[1] 肖晓桃[1,2] 肖莎[1] 邹晓英[1])
    [组织构建细胞学实验]
    原代人宫颈癌细胞的培养方法(程静新[1,2] 马秀萍[3] 周萍[1] 袁敏[1] 黄坤[1] 张怡[2])
    鱼藤素可影响斑马鱼胚胎Wnt信号通路相关基因的表达(刘瑞瑾 吴新荣)
    基于MATLAB视网膜视锥细胞的图像处理(赵超阳[1] 姚军平[2] 刘勇[2] 戴云[3] 谷昕[1] 阴正勤[1])
    [综述与专题]
    组织工程骨的血管化策略(郑晓晖[1] 陈振光[2])
    失用性骨质疏松症的发病机制及预防治疗进展(袁伟[1] 赵金柱[2])
    [倌声]
    SCl数据库收录的外科杂志对临床试验注册的要求②
    [综述与专题]
    骨合成促进剂治疗骨质疏松症的优势:(刘印[1] 田京[2])
    脉冲电磁场与软骨代谢(阮佳莉 田京)
    环境、材料、安全、可控:组织工程技术修复关节软骨的症结(寇建强[1] 王倩倩[2] 王昌耀[3] 王英振[3])
    [学术探究]
    转化生长因子β1对软骨组织代谢影响的研究进展(郭铁峰[1] 周明旺[2] 李盛华[2] 孙凤岐[1] 穆欢喜[1])
    衰老骨骼肌蛋白质的合成与抵抗(王顺利 史仍飞)
    [循证医]
    中国内地减肥手术治疗非肥胖型2型糖尿病的Meta分析(徐锦华[1] 潘雯[2] 宫建[3] 陆锁兴[4] 管书慧[5] 王东侠[1] 朴哲[6] 李宁[7] 李景姝[8])
    《中国组织工程研究》封面

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