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文献检索:
  • 淡淡雏菊花香
  • 雏菊也是我喜欢的鲜花之一。雏菊花开不豪华,却很鲜艳,白的粉的红的,在我办公室和家里的许多地方,都有仿生的雏菊花在自然的、生态的、娇娆的盛开着。
  • 《中国组织工程研究》杂志作者首次修稿自查表
  • 0.文章内容质量所投稿件主题是否在组织工程研究的范畴内。所投稿件主题是否为目前组织工程研究的热点内容。所投稿件主题是否有创新性理论创新性技术方法或创新性假设。所投稿件主题是否能为组织工程领域的研究者或阅读者带来指导意义。
  • 胰岛素样生长因子1对骨髓间充质干细胞软骨分化及基质金属蛋白酶表达的影响术
  • 背景:以往促进骨髓间充质干细胞软骨分化的研究,多将胰岛素样生长因子1作为辅助因子与其他细胞因子联合应用,而胰岛素样生长因子1单独应用能否促进骨髓间充质干细胞分泌软骨特异性胶原仍存在争议,其对骨髓间充质干细胞软骨分化及软骨胶原纤维稳定性的影响尚不清楚.目的:观察胰岛素样生长因子1对骨髓间充质干细胞软骨分化以及基质金属蛋白酶表达的影响.方法:构建含有胰岛素样生长因子1基因完整编码区的表达载体,稳定转染至大鼠骨髓间充质干细胞,设为胰岛素样生长因子1稳定转染组,同时设未转染组作对照.结果与结论:MTT 检测结果显示,实验成功筛选得到胰岛素样生长因子1稳定过表达的骨髓间充质干细胞,转染后4 d,细胞增殖能力显著增强(P〈0.05).RT-PCR,Western blot法及免疫细胞化学检测结果显示,与未转染组相比,胰岛素样生长因子1稳定转染组细胞胰岛素样生长因子1,Ⅱ型胶原 mRNA和蛋白的表达水平均显著升高(P〈0.01),基质金属蛋白酶1,2,3 mRNA表达显著降低(P〈0.01).结果证实,单独应用胰岛素样生长因子1能够有效促进骨髓间充质干细胞的增殖以及软骨分化,并维持软骨胶原纤维的稳定性.
  • 快速诱导大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的培养体系
  • 背景:目前常用的成脂刺激剂主要由胰岛素、地塞米松、IBMX 和吲哚美辛组成,该体系涉及处理因素多、诱导周期长且对细胞毒性大,不利于脂肪形成抑制效应的研究.目的:建立快速诱导大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的培养体系.方法:大鼠全骨髓细胞原代培养,胰酶消化传代,富集形态均质的间充质干细胞,利用过氧化物酶体增殖物活化受体γ激动剂噻唑烷二酮类药物罗格列酮和吡咯列酮体外单独诱导大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化,设立无糖、低糖和高糖 DMEM 三种基础培养体系,以经典的成脂刺激剂作为阳性对照,在诱导的不同时间点对分化细胞进行形态学观察和油红O染色.结果与结论:与经典成脂刺激剂相比,罗格列酮或吡咯列酮单独均能诱导大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化,吡咯列酮诱导48 h和罗格列酮诱导72 h均可观察到富含脂滴或脂泡以及油红O染色的阳性细胞,吡咯列酮与罗格列酮的最佳诱导浓度分别为0.125 mmol/L和10μmol/L,而高糖环境利于大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化.说明基于高糖培养环境的以吡咯列酮或罗格列酮做为成脂刺激剂的培养体系可快速诱导大鼠骨髓间充质干细胞向脂肪细胞分化.
  • 体外培养骨髓干细胞及趋化因子受体CXCR4的表达
  • 背景:有实验证明骨髓间充质干细胞表面CXCR4的表达水平决定了细胞向靶组织归巢及随后血管生成的效率.目的:分析骨髓间充质干细胞的分离、培养、鉴定及多向分化潜能,探讨细胞表面CXCR4的表达在促血管再生作用领域的意义.方法:无菌条件下骨穿针垂直穿刺髂后上棘处抽取猪骨髓,并行分离及培养,得到传代的骨髓间充质干细胞,并行体外细胞凋亡检测,骨髓间充质干细胞表面蛋白CXCR4的检测:并行骨髓间充质干细胞的凋亡周期检测.结果与结论:实验分离骨髓间充质干细胞的细胞形态比较均一.传代培养后,细胞不再以集落方式生长,而呈分布均匀的纺锤形.细胞在4 d左右开始快速增长,1周后细胞生长进入稳定期.流式细胞仪检测发现细胞表面CXCR4的表达较多.证明实验成功分离骨髓干细胞,CXCR4蛋白在细胞体外培养中明显高表达,提高CXCR4的表达将为骨髓间充质干细胞移植促进血管再生、治疗下肢缺血性疾病提供临床治疗依据.
  • 骨髓间充质干细胞干预再生障碍性贫血患者树突状细胞的成熟分化
  • 背景:骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者T细胞增殖的影响国内仅见少量报道,而骨髓间充质干细胞是否通过调节树突状细胞来影响再生障碍性贫血患者T细胞的增殖,国内未见报道,其机制值得深入研究.目的:观察骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者树突状细胞的免疫调节作用.方法:将培养第5天的再生障碍性贫血患者外周血单个核细胞来源的树突状细胞与第3代健康人骨髓间充质干细胞混合培养,加入脂多糖、肿瘤坏死因子促树突状细胞成熟,应用流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞与未成熟、成熟树突状细胞共培养前后树突状细胞表面标志表达.结果与结论:未成熟的树突状细胞在脂多糖的刺激诱导下与骨髓间充质干细胞共培养前后,树突状细胞表面标志CD14,CD1a,CD83,CD80表达无变化(P〉0.05);成熟树突状细胞与骨髓间充质干细胞共培养前后,树突状细胞表面标志CD14,CD1a,CD83,CD80表达降低(P〈0.05).结果说明骨髓间充质干细胞可抑制再生障碍性贫血患者单核细胞来源的树突状细胞的发育和成熟,进而发挥调节再生障碍性贫血患者的免疫作用.
  • 不同培养基培养人脐血间充质干细胞的差异
  • 背景:脐血间充质干细胞为干细胞领域的研究热点,但目前传代及扩增此类细胞尚无简单、有效、完美培养方法.目的:采用不同的培养基分离培养融合状态的间充质干细胞,以筛选一种较好的体外培养人脐血间充质干细胞的方法.方法:无菌条件下取正常足月剖宫产新生儿的脐血,随机分为5组:低糖DMEM(Dulbecco改良的Eagle培养基)组、高糖DMEM组、α-DMEM组、低糖DMEM+干细胞因子组、低糖DMEM+骨髓间充质干细胞培养上清组.用淋巴细胞分离液分离脐血的单个核细胞.将脐血单个核细胞接种于含体积分数为10%胎牛血清的上述培养基中,放置于37℃、体积分数为5%的CO2培养箱内培养,倒置显微镜观察细胞数量和形态的变化并用流式细胞技术分析细胞的表面抗原.结果与结论:①各组间充质干细胞培养48 h后贴壁细胞数和细胞存活率的比较:低糖DMEM+干细胞因子组、低糖DMEM+骨髓间充质干细胞培养上清组的贴壁细胞数明显多于低糖DMEM组、高糖DMEM组、α-DMEM组(P〈0.05),细胞存活率亦明显高于低糖DMEM组、高糖DMEM组、α-DMEM组(P〈0.05).②各组间充质干细胞在不同培养时间下生长状态的比较:培养第3,6,9,12,15,18,21天低糖 DMEM+干细胞因子组、低糖 DMEM+骨髓间充质干细胞培养上清组细胞增殖的速度均快于低糖DMEM组、高糖DMEM组、α-DMEM组(P 〈0.05).低糖DMEM+干细胞因子组与低糖DMEM +骨髓间充质干细胞培养上清组比较差异无显著性意义.结果可见人脐血间充质干细胞与骨髓间充质干细胞培养上清或干细胞因子共孵育,对脐血间充质干细胞体外分离培养及扩增有支持作用.
  • 脑胶质瘤中肿瘤干细胞的体外傲射敏感性
  • 背景:目前放疗治疗脑胶质瘤效果不理想,可能因素有很多.目的:探讨脑胶质瘤中肿瘤干细胞的体外放射敏感性.方法:取脑胶质瘤细胞,接种于含生长因子的无血清培养基中培养,取细胞活力最强的位点扩增3-5代的肿瘤球细胞,给予不同X射线剂量照射,检测其细胞活力,以确定最适的放疗剂量.结果与结论:胶质瘤中不同部位的肿瘤细胞增殖活力有差异;8 Gy以上X射线剂量对脑肿瘤干细胞具有显著的杀伤作用.说明脑胶质瘤具有异质性,部位不同,脑肿瘤干细胞增殖活力不同;不同的放疗剂量对脑肿瘤干细胞有不同的影响.
  • 人脐血间充质干细胞移植治疗大鼠肝硬化模型
  • 背景:研究表明,脐血间充质干细胞可在特定环境下诱导为肝样细胞,移植入体内能行使正常肝细胞的功能.目的:应用四氯化碳诱导制作大鼠肝硬化模型,观察脐血间充质干细胞移植对肝硬化模型大鼠的治疗作用.方法:经四氯化碳诱导制作大鼠肝硬化模型,将20只肝硬化SD大鼠随机分为2组,对照组经尾静脉注射0.5 mL生理盐水,治疗组经尾静脉注射氯甲基苯甲酰胺标记的脐血间充质干细胞混悬液,干细胞量为1×106个.2周后处死所有大鼠,取大鼠静脉血检测肝功能指标,并行肝脏组织切片观察.结果与结论:肝硬化模型大鼠肝细胞疏松、浊肿,部分细胞变性、坏死,肝小叶结构模糊不清,有多个大小不等的假小叶形成,符合肝硬化诊断标准.与对照组相比,治疗组大鼠血清白蛋白质量浓度显著增高(P〈0.05),胆红素浓度显著降低(P〈0.05),转氨酶活性显著降低(P〈0.05).治疗组大鼠肝脏内有大量氯甲基苯甲酰胺标记的红色脐血间充质干细胞.提示脐血间充质干细胞可通过肝硬化模型大鼠尾静脉有效改善肝组织的生理功能.
  • 骨髓间充质干细胞移植联合依达拉奉治疗大鼠脑梗死
  • 背景:依达拉奉具有清除自由基和抑制脂质过氧化反应的作用,能够改善中枢神经系统损伤区的微环境.目的:观察骨髓间充质干细胞移植联合依达拉奉治疗大鼠脑梗死的效果.方法:采用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞模型,随机分为3组,对照组经尾静脉注射细胞培养液,骨髓间充质干细胞组经尾静脉注射2.0×10^9 L^-1的骨髓间充质干细胞悬液,依达拉奉+骨髓间充质干细胞组经尾静脉注射2.0×10^9 L^-1骨髓间充质干细胞悬液同时经腹腔注射依达拉奉3 mg/(kg·d),连续5 d.移植后行神经功能缺损评分,应用RT-PCR测定脑梗死组织水通道蛋白9及水通道蛋白4 mRNA的表达,并经全脑冷冻切片苏木精-伊红染色及荧光显微镜观察细胞自然存活及分布情况.结果与结论:移植后24 h,3 d各组间神经功能缺损评分差异无显著性意义(P〉0.05),移植后2周,依达拉奉+骨髓间充质干细胞组大鼠神经功能缺损评分低于骨髓间充质干细胞组及对照组(P〈0.05-0.01).骨髓间充质干细胞组大鼠脑梗死周围组织水通道蛋白9及水通道蛋白4 mRNA的表达高于依达拉奉+骨髓间充质干细胞组,却低于对照组(P 〈0.05).依达拉奉+骨髓间充质干细胞组CM-Dil阳性细胞和神经元数量多于骨髓间充质干细胞组及对照组(P〈0.05).提示移植的骨髓间充质干细胞可移行至大鼠脑梗死灶周围并存活,分化为神经元样细胞.联合注射用依达拉奉治疗可明显改善脑梗死大鼠的神经学功能.
  • 人脐带间充质干细胞移植治疗初发1型糖尿病鼠
  • 背景:间充质干细胞具有自我复制、诱导免疫耐受和组织修复的特性,而1型糖尿病是以胰岛β细胞受损为主的自身免疫性疾病.鉴于此,考虑间充质干细胞可预防治疗1型糖尿病.目的:观察脐带间充质干细胞对初发1型糖尿病鼠(NOD鼠)的治疗作用.方法:选用1型糖尿病模型鼠(NOD 小鼠),分为3组,正常对照组为未发病鼠,尾静脉注射生理盐水1 mL;发病后脐带间充质干细胞干预组尾静脉注射脐带间充质干细胞1 mL,1.0×10^6/只;发病后未用干细胞干预组尾静脉注射生理盐水1 mL.观察3个月,检测NOD鼠血糖、每天胰岛素使用剂量;流式细胞仪检测反应性CD4^+、CD8^+T细胞、CD4^+CD25^+调节性T细胞的数量及比例;ELISA法检测白细胞介素2、白细胞介素10、肿瘤坏死因子α水平;酶联免疫双抗体夹心法测定空腹和餐后2 h C肽水平;病理切片观察胰岛的形态,淋巴细胞浸润情况;免疫组化观察胰岛α和β细胞的数量和体积.结果与结论:①与未用干细胞干预组比较,脐带间充质干细胞干预组免疫组化证实淋巴细胞浸润明显减少,胰岛α、β细胞结构更完整,α和β细胞数量明显上升且一致.②脐带间充质干细胞干预组CD4+T细胞数量、CD4^+/CD8^+T 细胞比值均低于未用干细胞干预组(P 〈0.05),而脐带间充质干细胞干预组CD4^+CD25^+调节性T细胞数量明显高于未用干细胞干预组(P〈0.01).③脐带间充质干细胞干预组肿瘤坏死因子α水平明显低于未用干细胞干预组,而白细胞介素10水平较未用干细胞干预组明显上升(P 〈0.01).④脐带间充质干细胞干预组血糖水平及胰岛素用量明显小于未用干细胞干预组,C肽水平较未用干细胞干预组升高(P 〈0.05).结果可见脐带间充质干细胞可降低初发1型糖尿病的血糖及胰岛素的用量,治疗1型糖尿病效果比较明显.
  • 人脐血单个核细胞静脉移植联合培哚普利对急性心肌梗死炎症反应的影响
  • 背景:近期报道骨髓间充质干细胞心肌内直接移植联合培哚普利治疗急性心肌梗死大鼠,可改善心肌组织内环境,并增强急性心肌梗死疗效.目的:观察人脐血单个核细胞静脉移植联合血管紧张素转化酶抑制剂培哚普利对家兔急性心肌梗死心肌组织炎症反应与促炎因子白细胞介素6表达及心功能影响,并探讨联合治疗对急性心肌梗死可能的保护机制.方法:人脐血单个核细胞取自健康足月分娩产妇脐血.60只健康家兔制备急性心肌梗死模型,建模成功后随机数字表法均分对照组、培哚普利组、单纯移植组和联合治疗组.每组随机选5只家兔分别于移植后1,2,4周超声心动图检测家兔心功能指标左室射血分数及左室短轴缩短率;苏木精-伊红染色光镜观察心肌病理变化和白细胞计数;免疫组化检测心肌组织白细胞介素6蛋白表达量;荧光显微镜观测绿色荧光蛋白阳性细胞.结果与结论:①与对照组比较,培哚普利组、单纯移植组、联合治疗组治疗后1,2,4周心功能指标左室短轴缩短率及左室射血分数改善(P〈0.05),单纯移植组高于培哚普利组(P〈0.05),联合治疗组改善最显著(P〈0.05).②与对照组比较,培哚普利组、单纯移植组、联合治疗组治疗后1,2,4周心肌组织白细胞计数及白细胞介素6的表达均显著减低(P〈0.05),且单纯移植组低于培哚普利组(P〈0.05),联合治疗组最低(P〈0.05).③联合治疗组、单纯移植组治疗后1,2,4周均可见绿色荧光蛋白阳性细胞散在分布于梗死周边区域,且联合治疗组细胞计数多于单纯移植组(P〈0.05).说明培哚普利联合人脐血单个核细胞静脉移植治疗急性心肌梗死实验动物,能提高移植细胞在心肌组织内存活率,并进一步改善心功能.其机制可能与联合治疗抑制心肌局部炎症反应及促炎因子白细胞介素6水平表达作用增强有关.
  • 骨髓间充质干细胞移植治疗颞下颌关节骨关节病
  • 背景:随着干细胞技术的发展,利用组织工程技术修复软骨损伤成为一种可能,而骨髓间充质干细胞由于其优良的特性成为研究重点.目的:通过体外培养骨髓间充质干细胞,注入兔颞下颌关节紊乱病动物模型,观察干细胞对兔颞下颌关节紊乱病的治疗效果.方法:通过体外全血贴壁法培养骨髓间充质干细胞并进行鉴定;细胞在体外扩增,诱导成软骨细胞后待用.以Ⅱ型胶原酶进行颞下颌关节腔内注射,建立颞下颌关节紊乱病动物模型,关节腔内注射诱导后成软骨细胞设为实验组,对照组注射未进行诱导的细胞进行比较,通过观察动物咀嚼和组织切片观察治疗效果.结果与结论:实验分离的细胞7-14 d可见少量集落形成,20 d时观察见细胞基本铺满瓶底.经stro-1+、CD44+流式细胞及免疫组化测定细胞表达间充质干细胞特性;细胞在诱导成软骨细胞后Ⅱ型胶原免疫组化染色强阳性.兔颞下颌关节注射胶原酶可在2周时出现偏侧咀嚼症状,骨髓间充质干细胞诱导的成软骨细胞关节腔注入动物模型后,实验组明显弱于对照组.组织切片显示诱导的成软骨细胞可促进关节损伤的修复,软骨及胶原生成多于对照组.说明骨髓间充质诱导的成软骨细胞关节腔注入后可促进兔颞下颌关节骨关节病愈合.
  • 人牙髓干细胞增殖与瞬时受体电位M7通道的作用
  • 背景:瞬时受体电位M7通道广泛存在于机体组织和细胞,对细胞存活、增殖和维持细胞镁离子平衡是必须的.目的:探讨瞬时受体电位M7通道对人牙髓干细胞增殖的作用.方法:酶消化法分离培养人牙髓干细胞,运用不同浓度(50,100μmol/L)瞬时受体电位M7通道抑制剂2-氨基乙基二苯硼酸酯作用于人牙髓干细胞72 h后,Western-blot 检测2-氨基乙基二苯硼酸酯对瞬时受体电位M7通道蛋白水平的影响,MTT法观察其对人牙髓干细胞增殖的影响;构建特异抑制瞬时受体电位M7通道表达慢病毒载体,运用慢病毒感染人牙髓干细胞.进行RT-PCR和Western-blot沉默效果分析,在1,3,5,7 d进行MTT法检测特异沉默瞬时受体电位M7通道后对细胞增殖的影响.结果与结论:50,100μmol/L 2-氨基乙基二苯硼酸酯均能抑制瞬时受体电位M7通道蛋白水平的表达并且能明显抑制人牙髓干细胞增殖(P 〈0.01),特异性沉默瞬时受体电位M7通道表达后,在不同时间段人牙髓干细胞增殖能力均明显降低(P 〈0.01).提示瞬时受体电位M7通道对维持人牙髓干细胞增殖能力有重要作用.
  • 大鼠羊膜上皮细胞体外诱导可分化为类神经干细胞
  • 背景:以往研究发现修复神经损伤的细胞来源主要有许旺细胞、嗅鞘细胞、神经干细胞、激活的巨噬细胞等,但这些细胞存在着来源困难、有成瘤性、异体排斥等缺点.而羊膜上皮细胞不存在以上缺陷,且具有多向分化潜能,经诱导后可向心肌样细胞、神经干细胞、肝细胞、成骨和软骨细胞等分化.目的:体外培养大鼠羊膜上皮细胞,并诱导其向类神经干细胞方向分化.方法:取妊娠晚期大鼠,采用胰酶消化法获得羊膜上皮细胞,用无血清的神经干细胞条件培养基对细胞进行诱导分化,并用免疫细胞化学法和RT-PCR对诱导前后的细胞相关标志物进行鉴定.结果与结论:形态学观察结果显示,条件培养基诱导后的羊膜上皮细胞胞体回缩,胞核部分折光性增强,出现类似于树突及轴突样结构,这些突起可交织成网状,细胞贴壁牢靠.免疫细胞化学检测结果显示,与诱导前相比,条件培养基诱导后的羊膜上皮细胞中巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白荧光强度较强,而特异性胚胎抗原4、波形蛋白荧光强度较弱.RT-PCR检测显示,与诱导前相比,条件培养基诱导后的羊膜上皮细胞的巢蛋白、胶质纤维酸性蛋白、微管相关蛋白 mRNA 的表达增强,而平滑肌22α、Sox-2及Nanog mRNA的表达减弱.说明体外诱导的大鼠羊膜上皮细胞可成功分化为类神经干细胞.
  • 神经干细胞移植治疗大鼠恢复期脊髓损伤
  • 背景:研究发现,脊髓损伤后细胞外信号调节激酶在反应性胶质细胞中存在上调现象,且磷酸化的细胞外信号调节激酶急剧增多.目的:验证神经干细胞移植对恢复期脊髓损伤大鼠的功能影响及其在病灶局部的分化及机制.方法:90只SD大鼠被随机分为3组,每组30只.对照组大鼠造模但不进行神经干细胞移植;静脉移植组及局部移植组造模后分别进行神经干细胞移植,分别于移植后的1,2,4,12,24周对各组随机抽取的6只动物后肢功能进行BBB评分及免疫组织化学染色.结果与结论:神经干细胞移植后,静脉移植组和局部移植组病灶局部可见 Brdu 阳性细胞;大鼠 BBB评分逐渐提高,移植4周后静脉移植组和局部移植组BBB评分明显高于同期对照组;大鼠脊髓胶质纤维酸性蛋白、细胞外信号调节激酶1/2逐渐提高,4周达最大值,移植12周后胶质纤维酸性蛋白、细胞外信号调节激酶1/2较同期减少(P〈0.05);微管相关蛋白2逐渐提高,4周达最大值,4周以后呈下降趋势,12周后不再有明显变化,但微管相关蛋白2较同期对照组增多(P〈0.01).结果提示,神经干细胞移植后可在病灶局部增殖分化为神经元和神经胶质细胞;两种移植方式的作用没有明显区别;神经胶质细胞再生的过程和细胞外信号调节激酶通路密切相关.
  • 自体骨髓细胞移植联合高压氧治疗四肢骨不连
  • 背景:骨折后由于多种原因所致骨不连是骨科常见的并发症,现有的治疗方法不能获得满意的疗效,寻找一种微创、安全有效的治疗方法成为国内外骨科学者研究的热点.目的:观察自体骨髓细胞移植联合高压氧治疗四肢骨不连的临床疗效.方法:常规消毒局部麻醉无菌操作下,抽取患者骨髓10-20 mL分离浓缩制备成骨髓细胞悬液2-4 mL;在C型X射线透视定位引导下,向骨不连处进行多点穿刺注射自体骨髓细胞浓缩液,局部压迫3-5 min后无菌包扎;骨髓细胞植入后即行高压氧治疗,10次为1个疗程,2个疗程之间间隔5 d,共治疗3个疗程.结果与结论:37例骨不连患者愈合36例,疗效评定为优25例、良8例、可3例、差1例;骨痂出现时间平均为(7.22±1.96)周,骨折愈合时间平均为(7.91±1.79)个月;骨髓细胞植入后,无严重的并发症发生.说明采用自体骨髓细胞移植联合高压氧治疗骨不连,能够促进骨不连的愈合,是一种行之有效的治疗方法.
  • 糖皮质激素对成体海马神经祖细胞的影响
  • 背景:体内研究显示,高浓度糖皮质激素可抑制大鼠内源性神经前体细胞增殖.而神经胶质抗原2蛋白聚糖阳性神经祖细胞(NG2细胞)是成熟中枢神经系统中最大的增殖细胞群体,具有多分化潜能.目的:观察糖皮质激素对体外培养的成熟大鼠海马由来的NG2细胞生存和增殖的影响.方法:原代及传代培养成年大鼠海马NG2细胞,以0,0.1,1,10,100μmol浓度糖皮质激素类药物地塞米松干预48 h后,采用乳酸脱氢酶分析法测定细胞活性,原位缺口末端标记技术(即TUNEL法)观察细胞凋亡情况,5’-溴脱氧尿嘧啶核苷掺入法鉴定细胞增殖状况.结果与结论:1,10,100μmol浓度地塞米松干预明显减少NG2细胞数,并显著增加TUNEL阳性细胞率,明显减少 BrdU 阳性细胞率.结果可见高浓度糖皮质激素能抑制 NG2细胞分裂增殖,并诱导细胞凋亡,从而明显减少NG2细胞数.
  • 肌萎缩侧索硬化小鼠内源性神经干细胞膜突触蛋白表达
  • 背景:成纤维细胞生长因子2是神经系统主要的神经营养因子之一,目前已经被证明有促进内源性神经干细胞分化的作用.目的:观察成纤维细胞生长因子2干预下,肌萎缩侧索硬化SOD1G93A G1H转基因小鼠运动功能的改变,内源性神经干细胞的增殖情况,突触蛋白的水平改变及内源性神经干细胞增殖数目与突触蛋白水平改变的相关性.方法:取新出生 SOD1G93A G1H转基因小鼠(肌萎缩侧索硬化模型小鼠)60只分为肌萎缩侧索硬化组及成纤维细胞生长因子2组各30只,取新出生野生B6SJL小鼠30只作为正常对照组,成纤维细胞生长因子2组腹腔注入成纤维细胞生长因子2;肌萎缩侧索硬化组和正常对照组腹腔注入安慰剂生理盐水.分别于出生后60,90,120 d采用Rotarod方法评估小鼠运动功能的改变,采用免疫组织化学方法标记内源性神经干细胞和突触蛋白并计数,用spearman方法评估内源性神经干细胞增殖数目与突触蛋白水平的相关性.结果与结论:与肌萎缩侧索硬化组相比,成纤维细胞生长因子2组小鼠运动功能明显改善,内源性神经干细胞增殖和突触蛋白水平显著增高.小鼠内源性神经干细胞的增加与突触蛋白水平的增呈正相关.提示成纤维细胞生长因子2神经保护机制可能与其促进内源性神经干细胞增殖和提升突触蛋白水平相关.
  • 补阳还五汤生物碱有效部位对人脐血干细胞体外增殖的影响
  • 背景:研究表明补阳还五汤对各种细胞均有保护作用,但机制尚不清楚,有研究推测是它的生物碱有效部位起作用.目的:观察补阳还五汤生物碱有效部位对人脐血干细胞体外增殖的影响.方法:获取临床健康产妇的新鲜脐血,制备人脐血干细胞悬液,将纯化的人脐血干细胞接种于40个培养皿中进行传代.分组:川芎嗪组给予100 g/L川芎嗪,阿魏酸组给予50 g/L阿魏酸,生物碱有效部位组(川芎嗪+阿魏酸组)给予100 g/L川芎嗪+50 g/L阿魏酸;对照组:继续用含体积分数为20%小牛血清的DMEM培养液培养.培养2,4,6,8,10 d观察人脐血干细胞增殖情况;24,72 h后流式细胞仪测定S期细胞的比例,培养10 d后电流钳模式记录细胞静息膜电位变化.结果与结论:川芎嗪组和阿魏酸组人脐血干细胞的增殖作用不明显,培养10 d时生物碱有效部位组细胞增殖情况明显高于川芎嗪组、阿魏酸组和对照组(P〈0.01).生物碱有效部位组在培养24,72 h后处于S期的人脐血干细胞明显增多;川芎嗪+阿魏酸组细胞静息膜电位高于川芎嗪组、阿魏酸组和对照组(P〈0.01).提示补阳还五汤生物碱有效部位能促进人脐血干细胞的体外增殖.
  • 成体神经干细胞与微环境
  • 背景:成体神经干细胞广泛分布于中枢神经系统,它存在于特殊的微环境中,有自我更新和分化能力,可作为内源性干细胞来源来修复受损的神经组织.目的:归纳总结神经干细胞与微环境的研究与进展.方法:由第一作者检索PubMed(1989至2012年)数据库与中国期刊全文数据库(CNKI:2001至2012年),检索词分别为“神经干细胞;微环境;调控”和“neural stem cel s;microenviroment;regulation”.结果与结论:阅读文题和进行筛选,选择具有原创性,论点论据可靠且分析全面、密切相关的文章,排除重复性研究与以及质量较差文章,共检索到379篇英文文章,131篇中文文章,按纳入及排除标准筛选后,共纳入64篇文章.微环境中的各种组成成分如血管及内皮细胞、星形胶质细胞、室管膜细胞、细胞外基质与神经干细胞关系密切,在成体神经干细胞的生存、增殖、分化调控中均发挥重要作用.同时,成体神经干细胞的分化受基因调控.成体神经干细胞与微环境两者之间的研究将为神经组织的修复带来新的方向.
  • 三种来源于不同围产期组织间充质干细胞的比较
  • 背景:围产期组织作为间充质干细胞的良好来源已经受到广泛关注.目的:比较3种来源于不同围产期组织的间充质干细胞的特性.方法:以“mesenchymal stem cel s, fetal blood, umbilical cord, placenta”为检索词,检索PudMed数据库中2002年1月至2012年4月的文献,纳入与脐血、脐带、胎盘来源的间充质干细胞相关的权威性且具有代表性的文献.结果与结论:计算机初检得到248篇文献,对其中16篇文献进行综述.主要阐述3种来源于不同围产期组织的间充质干细胞的分离培养方法以及生物学特性等方面内容,相对于脐血、胎盘来源的间充质干细胞,来源于脐带华通胶质的间充质干细胞由于其分离方法简单,分离成功率高,扩增潜能较高,分化潜能较高以及致瘤性低而成为相对优越的间充质干细胞来源.
  • 调控癌干细胞凋亡的外来因素
  • 背景:目前收集的证据表明癌干细胞或肿瘤原始细胞是肿瘤形成和进展的关键驱动程序,这些细胞的高抵抗特性使常规治疗模式被阻碍.迄今为止,只有少量的研究发表癌干细胞死亡定向凋亡疗法的潜能.目的:综述癌干细胞调节其凋亡的外来因素.方法:由第一作者采用电子检索的方式在PubMed数据及万方数据库中检索1990年1月至2011年12月有关肿瘤干细胞和干细胞凋亡的研究.英文检索词为“cancer stem cel s,apoptosis,extrinsic factors”,中文关键词为“癌干细胞,凋亡,外来因素”.计算机初检得到120篇文献,阅读标题和进行初筛,排除与研究目的相关性差及内容陈旧、重复的文献70篇,纳入50篇符合标准的文献进行综述.结果与结论:癌干细胞理论在癌症的研究中有重要意义.它不仅在理解恶性肿瘤行为上有重要突破,而且有能力发展新的治疗方法.调节癌干细胞凋亡的外在因素包括微环境提供的外源性因子如分泌存活因子,黏附介导的凋亡抵抗和缺氧条件.潜在调节癌干细胞肿瘤微环境是非常关键的研究领域,并且这领域仍然进一步研究.通过各种已成型的各种机制解释癌干细胞的调控将一定会成为未来的研究趋势.
  • 骨组织工程中干细胞的研究与应用
  • 背景:是否可以通过改进对已知的可以分化成骨的干细胞的培养方式或者寻找到新的干细胞,为骨组织工程找到更为合适的种子细胞.目的:从干细胞的分离培养、生物学特性及标志物等方面对各类干细胞的在骨组织工程中的应用进行综述.方法:以英文检索词为“bone tissue engineering,seed cel s,stem cel ,osteoblast differentiation”及中文检索词为“骨组织工程,种子细胞,干细胞,成骨分化”,由第一作者检索1995年至2012年PubMed 数据库及中国知网中文科技数据库,查阅近年种子细胞相关文献,最终保留50篇文献,从分离培养方法、基本特性及在骨组织工程中的应用3方面进行综述.结果与结论:文章分别对各类干细胞(包括:胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞、滑膜间充质干细胞、脐带间充质干细胞和脐带血间充质干细胞、外周血来源的多潜能间充质干细胞、脂肪干细胞、子宫内膜基质干细胞、人羊膜基质细胞、牙髓干细胞)的分离方法、生物学特性、标志物等相关实验研究进行了探讨.目前用于分离纯化骨髓间充质干细胞的方法主要有4种:密度梯度离心法、全骨髓贴壁培养法、流式细胞仪分离法和免疫磁珠法.研究证实各类干细胞在特定条件下均有分化成骨的能力.
  • 阿尔茨海默病现Wnt信号通路及神经干细胞的关系
  • 背景:阿尔茨海默病的病因涉及遗传、环境、免疫等多种因素和机制,大量研究表明Wnt信号通路与之密切相关,也有研究表明,Wnt信号通路对神经干细胞的增殖发挥着决定性作用.目的:对阿尔茨海默病的病理过程与Wnt 信号通路的关系以及 Wnt 信号通路与神经干细胞增殖分化进行综述,为阿尔茨海默病的治疗提供理论依据.方法:通过Pubmed数据库检索有关阿尔茨海默病病理过程与Wnt信号通路及Wnt信号通路与神经干细胞关联的相关文献,检索词为“Alzheimer’s disease、Wnt signaling pathway、NSCs、stem cel differentiation、amyloid-βprotein、Protein Tau”.纳入与阿尔茨海默病和Wnt信号通路相关的文献,排除重复性研究,保留50篇文献进行综述.结果与结论:目前通过神经干细胞移植来治疗以神经元的缺失为特征的神经退行性疾病已成为研究的热点,而如何调控神经干细胞向特定神经元分化成为了研究的难点,信号转导在神经干细胞的分化中起重要的作用,其中Wnt信号通路是调节神经干细胞增殖及分化的细胞外的重要因素.Wnt信号通路的失活可以促进阿尔茨海默病的病理过程,相反激活Wnt信号通路可以保护海马神经元,同时促进神经干细胞的分化,为阿尔茨海默病的治疗提供新的思路.
  • 干细胞治疗神经退行性疾病的前景与问题
  • 背景:虽然各种神经退行性疾病的人群发病率居高不下且有上升趋势,但至今仍无有效治疗方法,因此,寻求有效的治疗神经退行性疾病的途径是科学界面临的挑战.目的:文章分析和综述了对干细胞治疗神经退行性疾病的近年研究进展及热点问题.方法:文章对干细胞移植治疗神经退行性疾病,如阿尔茨海默病、帕金森病、脑卒中、亨廷顿病、视网膜色素变性疾病、肌萎缩性侧索硬化症、癫痫等疾病的基础与临床研究进展进行概述,探讨干细胞治疗神经退行性疾病的可行性、优势及问题.结果与结论:干细胞治疗神经退行性疾病大部分研究还是集中在实验动物模型阶段,还没有支持干细胞临床治疗的有效证据,其安全性和有效性还没有确切临床保证和标准,临床治疗效果及不良反应都有待大宗及长期临床试验研究进一步验证.
  • 嗅鞘细胞移植治疗慢性脊髓损伤的临床研究进展
  • 背景:虽然迄今为止大量的体外和动物实验都证实了嗅鞘细胞对脊髓损伤的修复作用,但是利用嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床试验尚处于起步阶段.目的:观察嗅鞘细胞移植治疗慢性脊髓损伤的临床安全性、有效性及实用性.方法:由第一作者检索至2012年5月为止 PubMed数据及CNKI中国期刊全文数据库有关嗅鞘细胞移植治疗慢性脊髓损伤的临床试验研究及安全性、疗效方面相关的报道,以“olfactory ensheathing cel s, spinal cord injury, clinical research”为英文检索词,“嗅鞘细胞移植,脊髓损伤”为中文检索词.结果与结论:计算机初检得到133篇文献,阅读标题和进行初筛,排除重复性研究,共34篇文献符合纳入标准.结果显示,利用嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤,在体外试验和动物模型中获得了良好的效果.在临床试验方面,到目前为止,嗅鞘细胞病灶直接移植治疗慢性脊髓损伤按嗅鞘细胞来源分主要集中在以下几个方面:①胚胎嗅鞘细胞移植.②嗅黏膜移植.③嗅黏膜源性嗅鞘细胞移植.3种嗅鞘细胞移植方法的总体安全性(96.4%)和有效性(23.4%)较高,但是其移植方法均存在明显的不足.提示嗅鞘细胞移植治疗慢性脊髓损伤的安全性和有效性还需要进一步验证,转化为临床应用还有很长的路要走.
  • 自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病的进展
  • 背景:药物、介入或外科治疗均不能从根本上解决心脏缺血梗死后心肌细胞丧失问题.大量研究结果显示自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病安全可行,可减少梗死瘢痕面积、改善心室重构、提高心脏功能.目前自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病已进入临床试验阶段.目的:综述近年国内外自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病的研究进展.方法:第一作者应用计算机检索1998年1月至2012年4月PubMed数据库、中国期刊全文数据库相关文章,英文检索词“autologous, cardiac stem cel s, ischemic cardiomyopathy, transplantation, treatment”;中文检索词“自体,心脏干细胞,缺血性心肌病,移植,治疗”.共检索到82篇相关文献,57篇文献符合纳入标准.结果与结论:经过大量小动物实验和大型动物的前临床实验准备阶段,目前自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病已经进入临床试验阶段,初步临床试验结果显示自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病安全、可行、有效.从心脏中分离的心脏干细胞移植到自体缺血梗死的心脏,可以分化生成心肌细胞、内皮细胞、平滑肌细胞,抑制心室重构,改善心脏收缩、舒张功能.相对于其他来源的干细胞移植治疗,自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病无免疫源性,不存在免疫排斥反应;不存在伦理问题;其趋向分化成心脏细胞系,成瘤率低,相对安全.自体心脏干细胞移植为缺血性心肌病的治疗提供了一条新的途径,有更高的临床应用价值.但目前开展的临床试验较少,观测时间不够长,缺少多中心大样本量的临床试验等,这些都需要进一步研究探索.
  • 牙髓干细胞在组织工程研究中的应用
  • 背景:牙髓干细胞是来源于牙髓组织中的一种成体干细胞,该种细胞具有高度增殖、自我更新的能力和多向分化潜能.通过对牙髓干细胞的深入研究,有助于人类为组织工程研究提供可能的细胞来源,进而指导临床相关治疗与预防.目的:就牙髓干细胞的研究现状及其在组织工程中的应用作一综述.方法:应用计算机检索CNKI和Pubmed数据库中2000年1月至2012年5月关于牙髓干细胞的文章,在标题和中以“牙髓干细胞,诱导,培养,分化”或“dental pulp stem cel s,culture,induced, differentiation”为检索词进行检索.选择文章内容与牙髓干细胞有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章.初检得到205篇文献,根据纳入标准选择关于牙周局部缓释剂的44篇文献进行综述.结果与结论:相比较其他成体干细胞,牙髓干细胞的研究尚面临许多问题.但随着科学技术的日益进步,随着这些问题的深入探讨和逐步解决,牙髓干细胞的研究将日趋完善.牙髓干细胞有望成为牙组织工程、骨组织工程和神经组织工程的种子细胞,在牙髓再生、牙体的修复等方面有着广阔的应用前景.
  • 骨髓造血干/祖细胞自身抗体与免疫相关性全血细胞减少
  • 背景:免疫相关性全血细胞减少涉及多个临床学科,近年来受到高度重视.骨髓造血早期细胞自身抗体及免疫调节功能可能是其症结所在.目的:分析骨髓造血早期(干/祖)细胞自身抗体在免疫相关性全血细胞减少症发病机制中的作用及其进展.方法:由作者电子检索1992年3月至2012年3月PubMed、万方医学网以及CHKD数据库中关于骨髓造血细胞相关抗体的文章,中文检索词为“免疫相关性全血细胞减少症、骨髓造血细胞、自身抗体、辅助性T细胞17”,英文检索词为“Immunorelated pancytopenia,Bone marrow hematopoietic cel s, Autoantibody,Th17 cel s”.排除重复性研究共保留30篇进行总结分析.结果与结论:骨髓造血细胞自身抗体是由于T淋巴细胞调控失衡,导致B淋巴细胞及其亚群数量和功能异常而产生的一类抗体.它破坏或抑制骨髓早期造血细胞成熟分化,最终引起外周血细胞减少而致病.T 辅助细胞17细胞数量增多、功能亢进可能与免疫相关性全血细胞减少症患者自身抗体产生呈一定相关性,是免疫相关性全血细胞减少症发病的重要因素.
  • SCI数据库收录的外科杂志对临床试验注册的要求
  • Journal of Trauma-Injury Infection and Critical Care (《创伤一损伤感染与急救杂志》),SCI收录杂志,ISSN:0022.5282,2012年影响因子2478。主要发表研究原著,综述,会议记录,当代观点,外科步骤及技术,简短报告,给编辑的信,专题,社论,书评等类型稿件。
  • 淡淡雏菊花香(王莉莎)
    《中国组织工程研究》杂志作者首次修稿自查表
    [研究与报告]
    胰岛素样生长因子1对骨髓间充质干细胞软骨分化及基质金属蛋白酶表达的影响术(邬波 马旭 朱大木 刘素嫒 王景续 张毅 付爱民 潘梁)
    快速诱导大鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的培养体系(石小青 华先良 温冠媚)
    体外培养骨髓干细胞及趋化因子受体CXCR4的表达(虞桂平[1,2] 沈振亚[2] 陈国强[2] 余云生[2] 郭士强[2])
    骨髓间充质干细胞干预再生障碍性贫血患者树突状细胞的成熟分化(张乐琴 肖扬 蒋祖军 肖浩文 李力 庞妍)
    不同培养基培养人脐血间充质干细胞的差异(赵霞 路希敬 刘国强 徐敏 邢健 王椋 丁慧芳)
    脑胶质瘤中肿瘤干细胞的体外傲射敏感性(赵中甫[1,2] 樊锐太[3] 杨永[4] 孙剑瑞[2] 胡祥[5] Eileen Sher[6] 杨波[2,7])
    [技术与方法]
    人脐血间充质干细胞移植治疗大鼠肝硬化模型(詹三华[1] 张鲁峰[1] 姚卫民[1] 杨明辉[1] 宋晓玲[1] 焦红亮[2])

    骨髓间充质干细胞移植联合依达拉奉治疗大鼠脑梗死(孙晶晶[1] 张鹏[2] 周国庆[2])
    [技术与方法]
    人脐带间充质干细胞移植治疗初发1型糖尿病鼠(于文龙[1] 徐薇[1] 于江苏[1] 王丽[2] 高宏[2] 王颜刚[1,2])
    人脐血单个核细胞静脉移植联合培哚普利对急性心肌梗死炎症反应的影响(邓柳霞[1,2] 余国龙[1] 艾旗[1] 袁春菊[1])
    骨髓间充质干细胞移植治疗颞下颌关节骨关节病(杨兴华[1] 彭琳[2] 刘云生[3] 邢再臣[1] 李海峰[2] 李玉庆[1] 刘敏[1])
    人牙髓干细胞增殖与瞬时受体电位M7通道的作用(崔力[1,2] 徐帅妹[1,2] 吴补领[1,2])
    大鼠羊膜上皮细胞体外诱导可分化为类神经干细胞(郭兵 许家军)
    神经干细胞移植治疗大鼠恢复期脊髓损伤(李哲 申利坊 王国胜 郭钢花)
    自体骨髓细胞移植联合高压氧治疗四肢骨不连(张传开[1] 史跃[2] 孙阳[1] 冯晖[1] 刘英[1] 韩冰[1] 刘军权[3])
    糖皮质激素对成体海马神经祖细胞的影响(于秀军 李奕 台立稳 陈相)
    肌萎缩侧索硬化小鼠内源性神经干细胞膜突触蛋白表达(叶雪[1,2] 马春潮[2] 姚扬[2] 臧大维[2])
    补阳还五汤生物碱有效部位对人脐血干细胞体外增殖的影响(蔡咏[1] 林金丽[2] 布林白乙拉[3])
    [学术探讨]
    成体神经干细胞与微环境(吴凌峰 吴晓牧)
    三种来源于不同围产期组织间充质干细胞的比较(巨亚萍 赵庆华)
    调控癌干细胞凋亡的外来因素(蒋雪梅[1] 李华[2])
    骨组织工程中干细胞的研究与应用(王晓锋 吴岩)
    阿尔茨海默病现Wnt信号通路及神经干细胞的关系(王薇 张海廷 王淑辉 张拥波)
    干细胞治疗神经退行性疾病的前景与问题(熊杰[1] 宁丽娜[1] 王再领[1] 石学敏[2])
    嗅鞘细胞移植治疗慢性脊髓损伤的临床研究进展(温俭[1] 王岩松[1] 魏利[2] 李杰[3])
    自体心脏干细胞移植治疗缺血性心肌病的进展(侯红 吕安林 侯婧 刘博武 达晶 侯兆蕾 杨娜)
    牙髓干细胞在组织工程研究中的应用(商丽娟[1,2] 吴岩[1])
    骨髓造血干/祖细胞自身抗体与免疫相关性全血细胞减少(董婷[1] 李正发[2] 欧阳红梅[2] 沈晓梅[2])

    SCI数据库收录的外科杂志对临床试验注册的要求
    《中国组织工程研究》封面

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