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文献检索:
  • 我爱她:小嘲叭样的牵牛花
  • 牵牛花,因其花儿开放似喇叭,所以别名叫喇叭花。又因其花儿朝开午谢,只在早上短暂的盛开,又被人们称其为朝颜,意为可以和早上朝霞的颜色相比美。一位花圃的老园丁曾经告诉过我:“秋赏菊,冬赏梅,春赏樱花,夏赏牵牛。”可见,在夏天那众多的花儿中,牵牛花也算是榜上有名的花主了。提起牵牛花,小时候就读过那来自于伏牛山下小村庄里一对善良的孪生姐妹和那只大金牛的故事,也听过孙敬修老爷爷绘声绘色的讲述着当太阳出来的时候,山眼里的那只银喇叭变成了一朵喇叭花,为了纪念姐妹二人,后人便称牵牛花为喇叭花的动人情节。
  • 《中国组织工程研究》杂志——审稿及出版流程
  • 《中国组织工程研究》杂志——采用稿件的基本标准
  • 1.本刊关注文章实验设计的合理性。 2.本刊关注文章及实验的科学性和严谨性,使小同行审稿人和阅读者较少或没有质疑。
  • 《中国组织工程研究》杂志——退稿原因
  • 1.文章未重点反映本刊宗旨组织工程的研究方向。 2.文章学术质量存在一些问题,未达到本刊发稿标准: ①文章论点不清晰。
  • 《中国组织工程研究》杂志作者首次修稿自查表
  • 请作者按下述标准首次修改稿件,修改后自认合格项(√) 0.文章内容质量 所投稿件主题是否在组织工程研究的范畴内。
  • 钠离子通道阻断剂抑制骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化
  • 背景:研究发现人和动物的多种间充质干细胞均存在河豚毒素敏感性钠离子通道,但钠离子通道是否会影响间充质干细胞向心肌细胞分化尚无共识。目的:观察钠离子通道特异性阻断剂河豚毒素对骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响。方法:利用Percoll’s密度梯度离心法结合差速贴壁法分离大鼠骨髓间充质干细胞,用主动脉逆行生物酶灌流法分离大鼠成体心肌细胞。将DAPI标记的大鼠骨髓间充质干细胞与成体心肌细胞混合培养,应用0,10,100pmol/L的河豚毒素进行干预,1周后观察骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化情况。结果与结论:免疫荧光细胞化学染色显示,大鼠骨髓间充质干细胞和成体心肌细胞混合培养1周后,骨髓间充质干细胞显著表达心肌特异性蛋白结蛋白和肌球蛋白,而10,100μmol/L的河豚毒素均可完全抑制结蛋白和肌球蛋白在骨髓间充质干细胞中的表达。提示钠离子通道是骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的必要条件。
  • 密度梯度离心法分离脐血干细胞:分离介质的筛选
  • 背景:应用脐血分离干细胞的目的是获得以干细胞为主要群体的单个核细胞群,密度梯度离心法是最简单有效的方法之一。密度梯度离心法使用的分离介质以聚蔗糖泛影葡胺最为常用,但哪种浓度获得干细胞最多,目前尚未深入研究。目的:探讨密度梯度离心法分离人脐血干细胞分离介质的最佳浓度,建立临床级干细胞分离应用方案。方法:采用两步法分离脐血流程,先用羟乙基淀粉沉淀脐血红细胞,再使用质量浓度分别为(1.073O±0.0001),(1.0750±0.0001),(1.077O±0.0001)g/mL的分离液,分离沉淀脐血红细胞后的上清液,得到单个核细胞,分别计数细胞获得率及细胞存活率。采用流式细胞仪测定单个核细胞表面标志物,将各亚组分绘制成直方图或散点图,分析所得脐血单个核细胞中所含单个核细胞亚组分的比例和绝对数量。结果与结论:应用质量浓度(1.0730+0.0001)g/mL的分离液可得到最大比例间充质干细胞群,是分离间充质干细胞的最佳质量浓度。使用质量浓度(1.0750±0.0001)g/mL的分离液可得到较高比例的造血干细胞群,是分离造血干细胞的最佳质量浓度。使用质量浓度(1.0770±0.0001)g/mL的分离液得到细胞总数最高,但获得的间充质干细胞、造血干细胞比例最低。采用两步法分离干细胞流程,建立严格的实验室条件和标准,可获得密度梯度离心法分离人脐血干细胞的最佳分离方案。
  • 共培养诱导人脐血间充质干细胞向软骨细胞分化
  • 背景:研究发现共培养可诱导人源干细胞向特定细胞分化,但如何控制两种细胞间比例以最大效率获得目的细胞是研究中的难题。目的:观察人脐血问充质干细胞与兔软骨细胞按不同比例共培养后向软骨细胞分化的情况。方法:复苏人脐血间充质干细胞并进行传代,将经流式细胞仪鉴定的人脐血间充质干细胞与体外分离的兔软骨细胞按照2:1或3:1的比例共培养,并用100pg/L的胰岛素样生长因子1进行诱导。在共培养14d,提取细胞RNA和蛋白质,实时定量PCR检测聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA的表达,Westernblot检测聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原蛋白的表达。结果与结论:人脐血间充质干细胞与兔软骨细胞共培养14d,共培养的细胞聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA及蛋白的表达高于单纯胰岛素样生长因子1诱导的细胞。在人脐血间充质干细胞与软骨细胞比例相同时,加入胰岛素样生长因子1可提高细胞聚集蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA及蛋白的表达。同时人脐血间充质干细胞与兔软骨细胞按3:1共培养更能促进细胞Ⅱ型胶原mRNA和蛋白及聚集蛋白多糖蛋白的表达;而按2:1共培养时,细胞聚集蛋白多糖mRNA表达更多。可见人脐血问充质干细胞与兔软骨细胞共培养后可诱导人脐血间充质干细胞向软骨细胞分化,且按3:1的比例共培养可获得更多的软骨细胞。
  • 地塞米松浓度与脐带间充质干细胞的成骨分化
  • 背景:在地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠的共同作用下,人脐带间充质干细胞可以向成骨细胞分化。作为糖皮质类激素的地塞米松,其浓度对人脐带间充质干细胞体外成骨分化存在着影响。目的:探寻人脐带间充质干细胞向成骨细胞诱导分化过程中地塞米松的优选浓度。方法:采用植块法从正常足月新生儿脐带中分离培养间充质干细胞。取第3代细胞进行日常细胞培养和诱导分化实验。流式细胞术检测所获细胞的表面标记表达情况,成脂、成骨诱导分化鉴定人脐带间充质干细胞。倒置相差显微镜观察成骨分化过程中细胞形态的变化。以含1×10^-8mol/L,5×10^-8mol/L,1×10^-7mol/L3种浓度地塞米松的成骨诱导液对人脐带间充质干细胞进行成骨诱导。盐酸四环素荧光及VonKossa染色法对比观察钙结节形成。反转录一聚合酶链反应法对比检测细胞骨桥蛋白基因表达。结果与结论:植块法分离的人脐带间充质干细胞形态均一,多为梭形,平行排列生长或旋涡状生长。流式细胞术检测CD29,CD73和CD90呈阳性表达,CD31,CD34和HLA-DR呈阴性表达。成脂诱导后可观察到细胞内有脂滴形成,油红O染色呈阳性。盐酸四环素荧光结果和VonKossa染色结果显示,所形成的钙结节大小及数量,均随着地塞米松浓度的增加而增强、增多。反转录一聚合酶链反应检测结果显示,3种浓度地塞米松组的骨桥蛋白基因均有表达,且表达强度随着地塞米松浓度的增加而增强。提示成骨诱导液中地塞米松浓度为1×10^-7mol/L时,能更有效地诱导人脐带间充质干细胞向成骨细胞分化。
  • 人脐带间充质干细胞经5-氮胞苷诱导后心肌特异性肌钙蛋白I的表达
  • 背景:人脐带间充质干细胞具有多向分化潜能,经诱导后是否可向心肌细胞分化?目前的报道尚不多。目的:观察人脐带间充质干细胞经5-氮胞苷诱导分化后肌钙蛋白I的表达情况。方法:取第2代人脐带间充质干细胞标本,经消化、离心、沉淀后,分为7份,制成细胞悬液,调整细胞浓度为2×10^7L^-1,分别加入浓度为80,40,20,10,5,2.5,0μmol/L5-氮胞苷于同样条件继续培养,作用24h后除去,继续培养4周。结果与结论:①人脐带间充质干细胞经5-氮胞苷处理24h之后,各组细胞都会出现部分死亡,失去典型的梭形形态,成为棍状或者柱状,40,80μmol/L组细胞形态变化明显。②免疫组化染色显示5,10,20,40,80μmol/L组诱导后2周心肌特异性肌钙蛋白I表达呈阳性,对照组与2.5μmol/L组心肌特异性肌钙蛋白I表达为阴性。选取5个高倍视野进行细胞计数,80,40,20,10μmol/L组间心肌样细胞的转化率差异无显著性意义,均明显高于5μmol/L组(P〈0.05)。⑨超微结构观察显示经5-氮胞苷诱导后4周时部分人脐带间充质干细胞内可见典型的肌小节及心房颗粒。而未经5-氮胞苷诱导的对照组无以上改变。结果提示经5-氮胞苷诱导后人脐带间充质干细胞能够向心肌样细胞转化。
  • 人胎盘间充质干细胞促进血管生成
  • 背景:构建组织工程化骨组织的同时,促进种子细胞与材料复合物内血液供应的重建成为研究的关键。胎盘间充质干细胞可以作为骨组织工程研究的种子细胞,研究其分化为血管内皮细胞以及促进血管生成有着重要意义。目的:观察胎盘间充质干细胞在体外分化为血管内皮细胞以及体内促血管生成作用。方法:分离培养人胎盘间充质干细胞,鉴定其表面抗原,经血管内皮生长因子和人碱性成纤维细胞生长因子联合体外诱导胎盘来源间充质干细胞向血管内皮细胞定向分化,诱导后细胞通过内皮细胞标志物KDR、v-WF染色鉴定。8只新西兰大白兔制成桡骨中段1.5cm长的骨缺损模型,分别植入人胎盘间充质干细胞,丝素蛋白/羟基磷灰石和丝素蛋白,羟基磷灰石进行对照。植入后4,12周分别行大体观察、组织学观察和X射线观察,比较骨缺损修复以及血管生成情况。结果与结论:胎盘间充质干细胞的诱导分化形态明显改变,胞体逐步回缩,立体感增强,内皮细胞标志物KDR、v-WF染色结果阳性。胎盘来源间充质干细胞与丝素蛋白,羟基磷灰石材料复合培养植入后,4周时新骨已开始形成,12周时有部分新生骨组织形成板层骨,骨小梁形成,内可见新生血管形成,而对照组支架材料降解较慢,未见新生血管。说明胎盘来源间充质干细胞体外可以分化为血管内皮细胞,与丝素蛋白,羟基磷灰石材料联合移植能够促进移植物内血管生成,较好的修复骨缺损。
  • 脂肪源干细胞向血管内皮细胞的分化
  • 背景:脂肪来源干细胞在体内储备丰富,体外增殖快速,具有多向分化潜能,是目前组织工程种子细胞的研究热点。近年来越来越多的研究表明脂肪干细胞在一定条件下可被诱导分化为内皮细胞,促进血管生成。t目的:观察兔脂肪干细胞体外分离培养及诱导分化为血管内皮细胞的生物学特性。方法:取兔附睾处脂肪,采用胶原酶消化分离获得脂肪干细胞,体外培养至第3代后加入血管内皮细胞生长因子与碱性成纤维细胞生长因子联合诱导分化,对诱导前后细胞进行形态学观察、生长曲线测定、免疫组织化学染色及流式细胞仪表型检测。结果与结论:兔脂肪干细胞生长旺盛,第3代兔脂肪干细胞呈成纤维细胞样,生长曲线呈“S”型,15代以内细胞形态未见明显变化。免疫荧光法检测Vimentin阳性,流式细胞仪检测CD44表达阳性,CD31表达阴性;诱导后细胞CD31表达阳性,CD44表达阴性。第3代兔脂肪干细胞向血管内皮细胞诱导分化21d显微镜下呈铺路石样形态,血管内皮细胞第Ⅷ因子相关抗原染色细胞阳性,透射电镜下可见W-P小体。提示脂肪干细胞在体外可诱导分化为血管内皮细胞,可为组织工程血管提供理想的种子细胞。
  • 大鼠腹腔脂肪干细胞的分离培养及诱导成骨
  • 背景:脂肪干细胞取材方便、增殖旺盛、具有多向分化潜能,有望取代骨髓间充质干细胞而成为新一代组织工程的种子细胞。然而,脂肪干细胞的分离培养仍存在诸多困难与不足。目的:优化脂肪干细胞的分离培养方法,并鉴定其成骨分化潜能。方法:选取200g成年雌性大鼠1只,无菌环境下切取大鼠肾脏、子宫周围及腹后外侧白色脂肪组织,多次胶原酶消化法分离消化,低糖培养基培养脂肪干细胞,倒置显微镜下观察脂肪干细胞的形态变化及增殖能力。采用成骨诱导培养液对第3代细胞进行成骨诱导,并采用碱性磷酸酶、茜素红染色方法进行鉴定。结果与结论:脂肪干细胞形态以长梭形为主,增殖活跃呈旋涡状生长。经成骨诱导10d后,碱性磷酸酶染色为阳性;成骨诱导28d后,茜素红染色阳性。提示采用多次酶消化法得到的大鼠腹腔源性脂肪干细胞在体外易于分离培养,可以稳定传代。在一定条件诱导下,可以向成骨细胞分化。采用以上方法进行脂肪干细胞的分离培养可以为组织工程提供大量、优质的种子细胞。
  • 活体生物发光成像追踪大鼠跟腱内移植干细胞
  • 背景:移植脂肪源干细胞在活体内的归巢、迁移、增殖和分化的机制仍未得到充分阐明。活体生物发光活体成像技术是近来发展起来的一种可以直接检测活细胞在动物体内生物学行为的新的技术方法。目的:探讨用活体生物发光成像技术检测大鼠跟腱内移植的经荧光基因修饰的脂肪源干细胞可行性。方法:分离培养大鼠腹腔来源的脂肪源干细胞,用浓度为3×10^10L^-1携带虫荧光素酶的腺病毒载体对其进行转染,观察转染对脂肪源干细胞的影响;将转染的脂肪源干细胞移植到大鼠跟腱缺损处,移植后1,4,7,14d用活体生物发光成像技术检测移植脂肪源干细胞荧光素酶的表达,移植后28d跟腱标本冰冻切片在荧光显微镜下观察。结果与结论:在体外,腺病毒转染对脂肪源干细胞的生长和增殖无明显影响(P〉0.05)。细胞移植后1,4,7,14d,活体生物发光成像技术在实验侧修复段跟腱检测到的荧光表达强度分别为(1.22±0.43)×10^6、(1.81±0.76)×10^6、(1.88±0.69)×10^6和(0.89±0.26)×10^5光子/s(n=6)。而对照侧跟腱修复段未检测到荧光表达;移植后28d,实验侧跟腱冰冻切片在荧光显微镜下见到大量表达荧光的细胞。表明活体生物发光成像技术可成功追踪大鼠跟腱内移植的经荧光基因修饰的脂肪源干细胞。脂肪源干细胞有望成为肌腱组织工程的种子细胞。
  • 人羊膜间充质干细胞移植骨髓抑制小鼠的造血功能
  • 背景:大剂量化疗药物可造成严重的骨髓损伤,除药物治疗外,干细胞移植已越来越多的用于骨髓损伤的治疗。目的:观察人羊膜间充质干细胞移植对顺铂所致骨髓抑制小鼠造血功能恢复的影响。方法:体外培养人羊膜间充质干细胞,雌性ICR小鼠被随机分为3组,除空白组外,其余小鼠腹腔注射顺铂诱导ICR小鼠制备骨髓抑制模型,建模后人羊膜间充质干细胞移植组小鼠尾静脉注射人羊膜间充质干细胞3.0×10^5/g,空白组和模型组注射等量PBS。结果与结论:连续给予顺铂7d后,ICR小鼠体质量明显降低,但模型组与人羊膜间充质干细胞移植组之间差异无显著性意义。模型组小鼠外周血白细胞、淋巴细胞、单个核细胞、红细胞、血红蛋白、红细胞压积和血小板等水平明显低于空白组(P〈0.01),于首次给顺铂后第21天开始恢复。人羊膜间充质干细胞移植组外周血的上述指标较模型组提前7d开始恢复,第21天时,已接近或达到空白组水平;与空白组相比,人羊膜间充质干细胞移植后的一两天及移植后的2周出现了一过性的白细胞增高和血小板数增加。第24天,人羊膜间充质干细胞移植组小鼠股骨髓腔冲洗液有核细胞数明显高于模型组(P〈0.05),骨髓组织病理学检查结果也显示,人羊膜间充质干细胞移植组小鼠股骨骨髓组织结构明显改善,与空白组相似,骨髓细胞数明显增多,可见较多的巨核细胞,且人羊膜间充质干细胞移植组后2周,骨髓组织可见分布较广的小鼠抗人核单克隆抗体-FITC阳性的移植细胞定植。以上结果表明,人羊膜间充质干细胞移植治疗较早地改善顺铂所致骨髓抑制小鼠的造血功能。
  • 骨髓间充质干细胞诱导成神经元样细胞移植治疗脊髓损伤
  • 背景:骨髓间充质干细胞诱导成为神经元样细胞移植治疗脊髓损伤已被证实有效,但不同诱导方法之间的差别尚无报道。目的:通过对脊髓损伤模型大鼠的行为对比及生化指标的检测,观察采用不同诱导方法将骨髓间充质干细胞诱导分化为神经元样细胞后移植对脊髓损伤疗效的差别。方法:取4周龄雄性Wistar大鼠骨髓分离培养骨髓间充质干细胞,对第3代骨髓间充质干细胞分别进行化学诱导和生物因子诱导后,收集备用。8周龄雄性Wistar大鼠48只,采用脊髓半横切法建立大鼠的脊髓损伤模型,随机分为4组:1周后骨髓间充质干细胞组损伤部位局部注射第3代骨髓间充质干细胞,化学诱导组局部注射化学诱导成的神经元样细胞,生物诱导组局部注射生物诱导成的神经元样细胞,DMEM培养液组局部注射细胞培养液。对48只大鼠脊髓损伤模型分别于伤后1,2,3,4,6,8,10,12周进行BBB评分,并于第12周末对损伤部位进行取材做组织切片,观察脊髓损伤的修复情况。结果与结论:模型建立后12周,骨髓间充质干细胞组、化学诱导组和生物诱导组大鼠后肢功能恢复明显优于DMEM培养液组(P〈0.05),骨髓间充质干细胞组和化学诱导组功能恢复无明显差别(P=0.4363),生物诱导组恢复效果好于前2组(P〈0.05)。生物诱导组大鼠运动功能持续恢复显著好于其他3组。脊髓组织切片苏木精一伊红染色显示骨髓间充质干细胞组和化学诱导组近似,脊髓胶质细胞增生,神经元样细胞崩解、空洞形成少于DMEM培养液组,生物诱导组神经损伤修复效果最佳。提示化学诱导后的骨髓间充质干细胞与未经过诱导的骨髓间充质干细胞在修复神经损伤的效果上没有明显差别:而经过生物诱导的骨髓间充质干细胞分化为神经元样细胞后移植治疗脊髓损伤的疗效明显优于未经诱导和化学诱导的骨髓间充质干细胞移植的疗效。
  • 人皮肤真皮组织中角朊干细胞样细胞的分离与培养
  • 背景:皮肤真皮组织是皮肤损伤修复时除表皮基底层以外可形成表皮层结构的重要干细胞来源。目的:探索从人皮肤真皮组织中分离培养角朊干细胞样细胞的新方法。方法:将一定大小的成人腹部全层皮肤组织用Dispase过夜消化后去除表皮层结构,然后用0.1%I型胶原酶过夜消化,离心分离以获取真皮来源总细胞。将分离的细胞用含有体积分数1%N2,2%B27,20μg/L表皮生长因子和40pg/L碱性成纤维细胞生长因子的DMEM/F12(1:1)无血清培养液悬浮后以低密度接种于培养皿进行培养。采用RT-PCR和免疫细胞荧光染色法对其进行分析。结果与结论:RT-PCR分析结果显示所分离的真皮细胞中含有表达Lgr5和Lirgl等特异基因的毛囊来源干细胞;免疫细胞荧光分析结果显示其表达细胞角蛋白8和细胞角蛋白14。在无血清条件下培养6d时,可观察到表达细胞角蛋白14和整合素α6的“铺路石”样细胞克隆。进行传代培养后P1细胞表达角朊干细胞标志物CD29、细胞角蛋白14和P63。传代培养至P3,4时大部分细胞分化,不能继续传代。结果证实,以无血清培养液结合低密度培养法可直接从人真皮组织中有效地培养增殖活跃、细胞角蛋白14和P63阳性的角朊干细胞样细胞。
  • 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞
  • 背景:以间充质干细胞为载体的基因治疗新方法具有广阔的应用价值。目的:利用慢病毒感染方法将肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体导入人羊水来源的间充质干细胞,以期获得稳定表达肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的人羊水间充质干细胞。方法:首先利用多位点Gateway技术构建慢病毒表达载体pLVpuro/EFlet.肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体,将该表达载体与慢病毒包装质粒同时转染293FT细胞,从而获得携带肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体基因的慢病毒颗粒。利用重组慢病毒颗粒感染人羊水间充质干细胞,并通过抗生素筛选的方法获得稳定表达目的基因一肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的羊水间充质干细胞,并对其稳定性进行鉴定。结果与结论:酶联免疫吸附法和Westernblot检测结果表明,肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体蛋白在感染的人羊水间充质干细胞内呈高表达,其表达量可达到72μg/L。说明实验成功制备了肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞。
  • 不同胎龄小鼠胎肝干细胞的性状比较
  • 背景:胎肝干细胞具有比骨髓干细胞更强的增殖分化能力和更低的免疫原性和免疫活性,逐渐受到关注,目前多数研究集中在成体肝干细胞,对小鼠胚胎肝干细胞的研究较少。目的:比较不同胎龄小鼠胎肝干细胞的生物学性状,探讨胎肝发育过程中干细胞的变化。方法:采用机械分离结合酶消化法及差速贴壁法分离培养不同胎龄(13.5d,16.5d,19.5d)的小鼠胎肝干细胞,对原代细胞形态,生长状态及表面标记物进行观察比较。结果与结论:胎龄13.5d组胎肝干细胞形态均一,生长状态良好,干细胞特性明显,白蛋白和细胞角蛋白19基本无表达,提示胎肝干细胞处于相对原始的未分化阶段。随胎龄增加,胎龄16.5d,19.5d组胎肝干细胞形态差异渐大,生长状态渐次,白蛋白和细胞角蛋白19阳性表达率增加。提示胎肝干细胞逐渐向具有肝细胞和胆管细胞标志的双显型干细胞方向转化。
  • SCI数据库收录的外科杂志对临床试验注册的要求
  • ·HPB(《肝胰胆杂志》),SCI收录杂志,ISSN:1365-182X,2012年影响因子1.604。主要发表研究原著,综述,meta分析,系统综述等类型文章。对临床试验注册的要求:根据国际医学编辑委员会(ICMJE)要求,《肝胰胆杂志》要求所有作者在公开的,合适的,电子的注册平台进行临床试验注册(如:www.clinicaltrials.gov;www.controlled-trials.com)。临床试睑是指任何前瞻性分配人类受试者进行干预或研究医疗干预和健康结果之间的因果关系的研究项目。临床试验注册登记号码标记于文章摘要末尾处。
  • 丹红注射液联合骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑梗死
  • 背景:单纯骨髓间充质干细胞移植修复受损脑组织的作用并不十分理想。目的:观察丹红注射液联合骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑梗死的效果。方法:用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,随机分为3组,模型组尾静脉注射PBS、丹红注射液组尾静脉注射2mL/kg丹红注射液、联合治疗组联合注射2mL/kg丹红注射液+2.0×10^9L^-1的骨髓间充质干细胞悬液,连续5d,1次/d。结果与结论:在骨髓间充质干细胞移植后2周,联合治疗组神经功能评分明显优于模型组及丹红注射液组(P〈0.05);移植后3周联合治疗组大鼠脑梗死体积明显小于模型组和丹红注射液组(P〈0.05);病理组织学观察也可见联合治疗组的组织损伤减轻程度大于丹红注射液组和模型组。结果可见丹红注射液联合骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑梗死疗效显著,可以对脑细胞起到保护作用。
  • 非小细胞肺癌组织中CD133表达及临床意义的Meta分析
  • 背景:肿瘤干细胞标志物CD133在非小细胞肺癌发生、发展过程中的作用存在争议。目的:系统评价有关非小细胞肺癌组织中CD133表达及临床意义的病例对照研究。方法:计算机检索PubMed、EMBASE、Web of Science、中国生物医学文献数据库(CBM)、中文科技期刊全文数据库(VIP)、中国期刊全文数据库(CNK1)及万方数据库,并辅以文献追溯的方法,收集国内外发表的相关病例对照研究,检索时间均从建库至2012年9月。两位研究者按纳入排除标准筛选文献并评价纳入研究质量,应用RevMan5.1软件进行Meta分析。结果与结论:共纳入10个病例对照研究,包含非小细胞肺癌组织808例。Meta分析结果显示:在CD133表达方面,非小细胞肺癌组织比癌旁组织或正常组织高[OR=8.15,95%C1(4.61,14.41),P〈0.00001],有淋巴结转移的非小细胞肺癌组织比无淋巴结转移的高[OR=1.83,95%C1(1.06,3.17),P=0.03],中低分化的非小细胞肺癌组织比高分化的高[OR=2.09,95%C1(1.42.3.08),P=0.0002];非小细胞肺癌组织病理分级Ⅰ级和临床Ⅱ-Ⅲ级CD133表达的差异无显著性意义[OR=I.06,95%CI(0.66,1.70),P=0.81]。现有研究表明,CD133在非小细胞肺癌发生、发展过程中可能起重要作用,但其能否作为非小细胞肺癌诊断及预后的可靠指标尚不确定,需要进行更多设计严谨、细致的高质量流行病学研究来进一步证实。
  • 不同因子影响骨髓间充质干细胞的多向分化
  • 背景:在组织工程领域,关于骨髓间充质干细胞定向诱导分化的研究越来越多,但是细胞培养基中不同成分会对骨髓间充质干细胞的体外增殖分化产生影响。目的:针对培养基中不同因子对骨髓间充质干细胞定向诱导分化的作用加以综述。方法:第一作者应用计算机检索1998年1月至2012年4月Pubmed数据库及万方数据库。检索英文关键词为“bone marrow mesenchymal stromal cells, cell culture medium, differentiation”,中文关键词为“骨髓间充质干细胞,细胞培养,定向诱导分化”,纳入有关不同因子对骨髓间充质干细胞向成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞定向诱导分化作用的文献,排除重复研究。结果与结论:计算机初检共得到184篇文献,根据纳入排除标准,对其中30篇文献进行综述。大体说来,骨髓间充质干细胞向成骨分化的主要因子有地塞米松、转化生长因子、维生素C、维生素D3、β-甘油磷酸钠及乙烯雌酚等;向软骨分化的主要因子有地塞米松、转化生长因子、维生素C、胰岛素样生长因子及成纤维细胞生长因子等;向脂肪细胞转化的主要因子有地塞米松、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、胰岛素和消炎痛等,但是其中一些因子的作用机制及不良反应还不明确,需要进一步的研究与验证。同时,骨髓间充质干细胞在骨髓中的含量较低,不同的分离方法会导致不同的分离率,因此如何选取一种分离率高的分离方法仍有待研究。
  • 干细胞治疗神经系统疾病现状的思考:是希望还是炒作?
  • 背景:干细胞研究已50年,干细胞体外分离、培养、纯化和鉴定技术已经相对成熟,干细胞替代治疗神经系统疾病已在临床开展,但在缺少统一应用规范的情况下不免出现一些负面报道和夸大宣传,面对这些很多医生、患者出现了迷惘。目的:探讨干细胞治疗神经系统疾病到底是希望?还是炒作?方法:通过①对人民日报近期发表的两篇影响较大的干细胞临床应用相关报道的思考。②结合作者自身多年开展干细胞治疗神经系统疾病的一些经验。③参考国内外一些研究文献等多条线索进行剖析。以“干细胞”、“动物模型”、“神经”等检索词变换组合检索万方数据库和Pubmed全文数据库1999年1月至2012年4月相关资料,获得文献阅读后进一步剔除。结果与结论:在动物实验方面,神经干细胞对于神经系统损伤及退行性变有一定治疗作用。在干细胞的临床应用研究方面,受到很多限制。面对阻力,一些国家已经从国家层面展开具有一定规模的临床试验,大多己进入临床Ⅱ、Ⅲ期。美国代表性产品Prochymal成为全球首个获准用于临床治疗人体疾病的干细胞药物。产业化的干细胞成品具有巨大的研究价值和应用前景。但在疗效不确切的情况下,暂不主张在临床上大规模推广应用,更不主张以盈利为目的、夸大其词的商业化宣传。
  • 牙源和非牙源性干细胞在组织工程再生牙研究中的作用
  • 背景:牙齿缺失是人类最为常见的器官缺失,近年组织工程学器官的研究日渐成熟,各类成体干细胞被用在再生牙的研究中。目的:对各类成体干细胞的特性进行阐述,探讨各类成体干细胞在再生牙研究过程中的作用及新进展。方法:由作者应用计算机检索1979至2012年PubMed数据库及CNKI数据库的文献,在英文标题和摘要中以“stemcell”和“toothmgenemtion”检索,中文文献检索以“干细胞,牙再生,组织工程学牙,种子细胞”为关键词,选择内容与成体干细胞、再生牙与牙组织工程相关的文章,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章,共纳入53篇文献。结果与结论:牙齿生长发育条件特殊,易缺失且自体难以再生,再生组织工程牙的研究为牙缺失的治疗提供了一个新的治疗手段,在大量的实验研究中发现,不同的成体干细胞无论在体内诱导还是体外重建再生牙的过程中都可起到不同的作用,且各有优缺点,相比之下,脐血干细胞的优势就较为突出,在今后的再生牙研究中可能将发挥重要的作用。
  • 沃顿胶体间充质干细胞生物学特性及在心血管领域的应用
  • 背景:沃顿胶体间充质干细胞是一类具有高度自我更新能力和多向分化潜能的围产期干细胞,具有增殖能力强,免疫原性低,来源丰富,易于采集和制备,无伦理争议等诸多优点。目的:综述沃顿胶体间充质干细胞的生物学特性及在心血管领域的研究进展。方法:以“沃顿胶体,脐带,间充质干细胞,Wharton's jelly, umbilical cord, mesenchymal stem cell”为关键词应用计算机检索维普数据库和PubMed数据库的文章。所有选用的69篇文献均为相关性较强,并具有代表性和权威性,能及时准确反映和报道人脐带沃顿胶体间充质干细胞的生物学特性及在心血管领域研究的新进展。·结果与结论:沃顿胶体间充质干细胞不仅有与胚胎干细胞的相似性,而且还保持着骨髓间充质干细胞的特性,其细胞形态与其强大的增殖、迁移、分化功能相适应。沃顿胶体间充质干细胞表达更多的与血管生成和生长相关的基因,更适于治疗缺血性病变及减轻纤维化和瘢痕形成。沃顿胶体间充质干细胞在细胞治疗上具有巨大的潜能,它们既不诱发肿瘤也不在移植时发生排斥反应。但是,目前在沃顿胶体间充质干细胞的分离、体外培养、体内生长和分化以及临床应用等方面仍存在许多亟待进一步解决的问题。
  • 肌源干细胞在组织工程和再生医学的应用
  • 背景:肌卫星细胞是肌组织损伤后修复的主要细胞来源,在肌组织再生研究领域受到广泛关注。目的:综述肌源干细胞生物学特点及在组织工程和再生医学领域的应用,探讨肌源干细胞的临床应用价值和前景。方法:应用计算机检索维普数据库和Pubrned数据库中2000年1月至2011年4月关于肌源干细胞研究应用的文章,在标题和摘要中以“肌源干细胞,肌卫星细胞,组织工程,再生医学,成体干细胞”或“MDSCs, MSCs, ASCs, regenerative medicine; tissue engineering”为检索词进行检索。选择文章内容与肌源干细胞研究应用相关文献,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到189篇文献,根据纳入标准选择25篇文献进行综述分析。结果与结论:已有的动物实验和成功的临床试验表明,结合基因工程技术和组织工程的基本原则,以肌源干细胞为基础的组织工程化组织和细胞学治疗可以通过安全的措施应用于各种骨骼肌疾病、心肌疾病、泌尿系统和神经系统,为临床医生及相关疾病领域患者提供良好治愈前景。但肌源干细胞研究仍面临着许多问题。
  • 肿瘤干细胞标记物CD133在肺癌组织中的表达
  • 背景:随着肿瘤干细胞研究的深入,肺癌干细胞成为目前研究的热点之一。目的:评价肿瘤干细胞标记物CD133在肺癌组织中的表达,以及与肺癌临床病理特征的关系。方法:应用免疫组化染色检测CD133在不同类型、不同分化程度肺癌组织中的阳性表达率,并分析CD133阳性表达与肺癌患者年龄、性别、肿瘤大小、组织学类型、分期及分级、分化程度、淋巴转移和预后等临床病理特征的相关性。结果与结论:CD133在各种类型肺癌组织中均有较高的表达率,但是其阳性表达与肺癌患者的年龄、性别等患者临床特征无相关性,与肺癌的组织学分型、分期及分级、分化程度也无相关性,而与肺癌组织的淋巴转移及预后密切相关,伴有淋巴转移的肺癌组织中CD133的阳性表达率更高,且5年生存率明显降低,预后差。
  • 诱导多能干细胞的研究现状及展望
  • 背景:同胚胎干细胞一样,诱导多能干细胞可以自我更新并可分化成各种类型的体细胞。诱导多能干细胞不仅在替代疗法上有重要价值,还可用于体外疾病模型的建立,以方便疾病机制的研究、药物的监测以及新治疗方法的检验。目的:综合分析诱导多能干细胞的方法。方法:应用计算机检索PubMed及中国期刊全文数据库2006年1月至2011年12月与诱导多能干细胞有关的文章,英文检索词为“induced pluripotent stem cells”;中文检索词为“诱导多能干细胞”,并限定文章语言种类为中文。共收集到330篇相关文献,排除内容陈旧或重复的文献,选用其中的31篇作为参考文献。结果与结论:文章从基因导入诱导多能干细胞、蛋白诱导多能干细胞、小分子诱导多能干细胞、诱导多能干细胞株间的特性和差异、提高诱导多能干细胞的转化率、诱导多能干细胞在动物疾病模型治疗中的应用等方面进行了阐述。研究发现具有适当匹配转录因子的体细胞是生成诱导多能干细胞的一个潜在实用的起始点。基因诱导多能干细胞还存在未被解决的问题,而蛋白诱导多潜能干细胞的方法不会影响细胞的遗传物质。将诱导多能干细胞诱导技术和转基因动物技术相结合,可进行定向变异和育种,提高动物的遗传本质,加快动物群体遗传变异程度。诱导多能干细胞不仅在替代疗法上有重要价值,还可用于体外疾病模型的建立,以方便疾病机制的研究、药物的监测以及新治疗方法的检验。
  • 干细胞抗衰老的理论研究与进展
  • 背景:衰老是生物体必然的发展趋势,是一种复杂多变的过程。在整个生命过程中,机体会受到外界环境中各种物质、能量、信息的影响和作用,且组织和器官也会不可避免的发生损伤和功能衰退。随着医疗技术和生活水平提高,老龄化人1:3数量增加,俐随衰老,人体器官生理功能发生病变,如高血压、冠状动脉粥样硬化等疾病增加。延缓衰老可能减少这些疾病的发生,从整体上提高机体功能状态,从而提高机体的生命质量。研究抗衰老是当今社会的热点课题。目的:以衰老的学说研究、评定为引子,对目前千细胞与抗衰老的关系进行综述。方法:应用计算机检索PubMed 1865年1月至2012年4月期间的相关文章,检索词为“stem cells,Progenitor cells, totipotent stem cell, muitipotent stem cell, anti-aging”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索万方数据库2012年4月期间的相关文章78篇,检索词为“干细胞,抗衰老”,并限定文章语言种类为中文。此外还手工查阅相关专著数部。共检索到文献152篇,最终纳入53篇。结果与结论:干细胞具有自我更新的能力,可以提高机体抗自由基能力,能分泌一些细胞因子,如胰岛素生长因子1、超氧化物歧化酶等提升衰老机体各组织功能,骨髓间充质干细胞、胚胎干细胞、脐血干细胞、生殖干细胞已经在动物实验中被证实有抗衰老作用,脂肪来源干细胞已经在临床抗衰老中应用。
  • 关节腔内注射间充质干细胞治疗半月板损伤的研究进展
  • 背景:半月板损伤治疗效果的欠佳严重影响人们的生活质量,对于运动员而言可能意味着职业生涯的终止。目的:探讨关节腔内注射间充质干细胞治疗半月板缺损的有效性。方法:由第一作者应用计算机检索PubMed、中国期刊全文数据库(CNKI)、维普数据库和万方数据库1980年5月至2012年8月相关文献。在标题、摘要、关键词中以“meniscus, mesenchymal stem cells (MSCs),intra-articular injection, regeneration”或“半月板,间充质干细胞,关节腔内注射,再生”为检索词进行检索。选择文章内容与关节腔内注射有关者,同一领域文献则选择近期发表在权威杂志文章。初检得到181篇文献,根据纳入标准选择关于半月板损伤的间充质干细胞治疗的62篇文献进行综述。结果与结论:间充质干细胞行关节腔内注射后黏附于半月板损伤部位,并定向分化为半月板纤维软骨细胞,有效促进半月板损伤的修复和半月板的再生。关节腔内注射间充质干细胞治疗半月板损伤具有重要的临床应用价值。
  • 自体髂骨植骨联合干细胞移植治疗早期股骨头坏死
  • 背景:目前对股骨头缺血性坏死的治疗方法有多种,提倡早期治疗是临床研究的热点之一。目的:观察头颈开窗减压自体髂骨联合外周血造血干细胞移植治疗早期股骨头缺血性坏死的效果。方法:自2009年2月至2012年3月采用头颈开窗减压自体髂骨联合外周血造血干细胞移植治疗股骨头缺血性坏死患者21例(36髋),单髋6例,双髋15例;年龄22-50岁,平均33:6岁;病史8个月-3年,平均1.4年;按ARCO分期标准,Ⅰ期7髋,Ⅱ期29髋。根据治疗前后症状、髋关节功能Harris评分、X射线及CT结果进行评价,分析其治疗效果。结果与结论:股骨头缺血性坏死患者21例(36髋)全部获得随访,随访时间12-48个月。其中29髋疼痛消失,活动自如,X射线、CT显示股骨头密度、骨小梁结构、髋关节间隙比治疗前明显改善,疗效为优;6髋病情缓解,疗效为良;1髋病情加重,疗效为差,治疗总优良率为97%(35/36)。患者髋关节Harris评分由治疗前平均(60.9+5.6)分增至治疗后平均(90.5±5.1)分,差异有显著性意义(P〈0.05)。提示头颈开窗减压病灶清除自体髂骨联合外周血造血干细胞移植是治疗早期股骨头缺血性坏死的一种有效方法,若要取得完美的治疗效果有待于进一步临床观察。
  • 我爱她:小嘲叭样的牵牛花
    《中国组织工程研究》杂志——审稿及出版流程
    《中国组织工程研究》杂志——采用稿件的基本标准
    《中国组织工程研究》杂志——退稿原因
    《中国组织工程研究》杂志作者首次修稿自查表
    [骨髓干细胞]
    钠离子通道阻断剂抑制骨髓间充质干细胞向心肌样细胞的分化(郝春嫒[1] 马爱群[2] 王亭忠[2] 刘瑞[3])
    [脐带脐血干细胞]
    密度梯度离心法分离脐血干细胞:分离介质的筛选(郭继强 刘爱兵 王东平 王黎明)
    共培养诱导人脐血间充质干细胞向软骨细胞分化(郑朋飞 陈雷 董展 蒋立 鞠黎 王儒法 楼跃)
    地塞米松浓度与脐带间充质干细胞的成骨分化(洪敬欣[1] 刘剑[1] 李琳芳[2] 韩俊领[1,3])
    人脐带间充质干细胞经5-氮胞苷诱导后心肌特异性肌钙蛋白I的表达(唐欣[1] 王妮妮[1] 易海波[2] 王岩[3] 庞天舒[1])
    [干细胞培养与分化]
    人胎盘间充质干细胞促进血管生成(赵基栋 苗宗宁 钱寒光 彭玮 司志平)
    [脂肪干细胞]
    脂肪源干细胞向血管内皮细胞的分化(刘琳 张亚 周云 翟景梅 曹戌)
    大鼠腹腔脂肪干细胞的分离培养及诱导成骨(李玲慧[1] 丁道芳[1] 龚浩[2] 杜国庆[1] 宋奕[1] 邓真[1] 詹红生[1])
    [干细胞移植]
    活体生物发光成像追踪大鼠跟腱内移植干细胞(黄德清[1] Gary Balian[2])
    人羊膜间充质干细胞移植骨髓抑制小鼠的造血功能(姚观平[1,2] 余丽梅[1,2] 范振海[1] 方宁[1] 任飞[1,2] 罗娇[1,2] 张小雨[1,2] 王钰莹[1] 刘金伟[1])
    骨髓间充质干细胞诱导成神经元样细胞移植治疗脊髓损伤(高平[1,2] 孙占胜[1] 王伯珉[1] 李连欣[1] 王甫[1] 牟乐明[1])
    [干细胞培养与分化]
    人皮肤真皮组织中角朊干细胞样细胞的分离与培养(池光范 李美英 赵贵芳 邓继鸿 刘晋宇 李玉林)
    肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体修饰的人羊水间充质干细胞(杜晶春[1] 朱蕊[2] 范婷婷[1] 王鹏鲲[1] 林勇平[1] 徐霞[1])
    不同胎龄小鼠胎肝干细胞的性状比较(吴必刚[1] 常静[2] 张晓刚[2])
    [信息]
    SCI数据库收录的外科杂志对临床试验注册的要求
    [干细胞移植]
    丹红注射液联合骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠脑梗死(张鹏[1] 周国庆[1] 孙晶晶[2])
    [循证医学]
    非小细胞肺癌组织中CD133表达及临床意义的Meta分析(苟云久[1] 何晓东[2] 谢定雄[3] 杨克虎[4] 刘雅莉[4] 张建华[1])
    [学术探讨]
    不同因子影响骨髓间充质干细胞的多向分化(栗扬阳 赵庆华)
    干细胞治疗神经系统疾病现状的思考:是希望还是炒作?(任超[1] 耿德勤[2] 葛巍[2] 李金梅[2])
    牙源和非牙源性干细胞在组织工程再生牙研究中的作用(胥航 农晓琳)
    沃顿胶体间充质干细胞生物学特性及在心血管领域的应用(张嵬 刘晓程)
    肌源干细胞在组织工程和再生医学的应用(丁维进[1,2,3] 苏志达[2] 江华[1,2])
    肿瘤干细胞标记物CD133在肺癌组织中的表达(秦勇[1] 韩宏光[2])
    诱导多能干细胞的研究现状及展望(褚海涛[1,2] 李晓蕾[1,2] 贾心善[1,2])
    干细胞抗衰老的理论研究与进展(单莎瑞 黄国志)
    关节腔内注射间充质干细胞治疗半月板损伤的研究进展(黄淑梅 田京)
    [临床实践]
    自体髂骨植骨联合干细胞移植治疗早期股骨头坏死(郑越, 杨祥雷 王辉 李会杰)
    《中国组织工程研究》封面

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