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  • 中国神经修复细胞治疗临床应用指南(2015年版) 免费阅读 下载全文
  • 一、前言神经修复学是一门重要的临床医学和神经科学学科,其目的是修复或促进和维持神经功能和结构的完整性[1]。国际神经修复学会北京宣言(2015年修定德黑兰版)宣布,"中枢神经系统损伤和神经退化后功能是可以恢复的";并指出细胞治疗将可能成为神经修复学治疗策略的核心技术[1];其基础研究已证实30余种细胞具有神经修复作用[2-58]。
  • 骨髓间充质干细胞移植对急性肝功能衰竭大鼠高迁移率族蛋白B1表达的影响 免费阅读 下载全文
  • 目的探讨采用骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对急性肝功能衰竭(ALF)大鼠模型的血清和肝脏组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达的影响。方法将90只健康雌性SD实验大鼠按照随机表法分为空白对照组、ALF组以及BMSC移植组,其中ALF组和BMSC移植组的ALF大鼠模型采用900 mg/kg D-Gal N+10μg/kg脂多糖腹腔注射建立;BMSC移植组在900 mg/kg D-Gal N+10μg/kg脂多糖腹腔注射后2 h,予以尾静脉注射BMSC悬液1 ml(1.0×10^7/ml)。三组大鼠均在12、24、72 h时间点取血液及肝组织标本,检测大鼠血清ALT和AST,ELISA法检测血清HMGB1表达量,采用苏木素-伊红染色法观察肝组织病理变化,对肝组织HMGB1的表达水平应用免疫组化法进行检测,RTPCR法检测肝组织HMGB1 m RNA。三组大鼠血清生化指标、血清HMGB1浓度以及肝组织HMGB1 m RNA、HMGB1蛋白相对表达量的不同组别之间的比较采用随机区组设计的方差分析,不同组别的大鼠24 h存活率采用秩转换后的方差分析。结果采用900 mg/kg D-Gal N+10μg/kg脂多糖腹腔注射的方法可成功诱导ALF模型。ALF组大鼠血清ALT、AST水平随病程逐渐升高,在移植后72 h,BMSCs移植组的血清ALT水平明显低于ALF组[(163.5±31.6)vs(639.0±69.8)U/L,P〈0.01],血清AST水平与ALF组相比差别也有统计学意义[(172.8±55.7)vs(724.3±48.8)U/L,P〈0.01]。空白对照组血清HMGB1浓度、肝组织HMGB1 m RNA表达以及肝组织HMGB1蛋白表达在各时间点均较低,ALF组及BMSC移植组上述指标造模成功后均在较高水平,ALF组随时间延长而升高,移植组在BMSC移植后随时间延长逐渐下降。BMSC移植组在移植后24、72 h与ALF组相比血清HMGB1浓度差异具有统计学意义[(146.8±35.2)vs(290.4±30.9),(90.6±17.4)vs(486.5±57.2)ng/ml,P均〈0.01];肝组织HMGB1 m RNA表达差异具有统计学意义[(0.8±0.2)vs(1.2±0.3),(0.6±0.2)vs(1.4±0.1),P均〈0.01];肝组织HMGB1蛋白
  • 自体造血干细胞移植对B细胞非霍奇金淋巴瘤的预后因素分析 免费阅读 下载全文
  • 目的探讨与B细胞非霍奇金淋巴瘤(NHL)自体造血干细胞移植(ASCT)相关的预后因素。方法回顾性分析21例在青岛市中心医院接受ASCT的复发难治性B细胞NHL患者的临床资料。将无进展生存时间(PFS)及总生存时间(OS)作为观测指标。OS、PFS采用Kaplan-Meier曲线法计算。采用Cox比例风险回归模型对可能影响预后的因素进行单因素及多因素分析。结果 21例患者ASCT前完全缓解(CR)率为52﹪,移植后上升至67﹪。所有患者的中位生存时间为25个月,2年总生存率为52﹪,2年无进展生存率为48﹪。2年累计的无复发死亡率为5﹪,复发死亡率为43﹪。单因素风险分析的结果显示,与OS和PFS相关的有利因素包括:PET/CT CR、初治时使用利妥昔单抗;多因素分析显示,移植前PET/CT CR是影响OS和PFS的独立危险因素。结论 ASCT治疗复发难治性B细胞NHL疗效良好,移植前PET/CT扫描达CR状态是ASCT的有利预后因素。
  • 干细胞移植对兔后肢动脉血管成形术后血清血管内皮生长因子及转化生长因子β1水平的影响及意义 免费阅读 下载全文
  • 目的探讨干细胞移植防治血管成形术后再狭窄的可能机制。方法 2014年12月至2015年2月,新西兰大白兔18只随机分入对照组(A组,n=6)、球囊损伤组(B组,n=6)及球囊损伤+人脐血干细胞移植(HUCBSC)组(C组,n=6)。采用Ficoll密度梯度离心法分离制备人脐血单个核细胞悬液。A组只分离左侧后肢动脉标记后闭合伤口;C组行动脉分离后夹闭动脉两端,穿刺成功以3 mm×40 mm球囊进行局部扩张并间断牵拉球囊,每次30 s,共3次,成功制备动脉缺血损伤模型后,经导管注入脐血干细胞悬液0.5 ml于后肢动脉损伤局部,缓慢撤出球囊,恢复血供;B组经同样方法介入操作后,注入等体积的磷酸盐缓冲液(PBS缓冲液);术毕均予逐层缝合关闭伤口。分别于术前、术后7 d及术后14 d经耳中央动脉各采血3 ml,分离血清,采用ELISA法分别测定3组血管内皮生长因子(VEGF)及转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;实验结束时留取局部血管组织进行HE染色,观察移植前后血管病理变化表现。组内比较采用配对样本t检验,组间比较采用均数方差分析及双变量回归与相关分析进行统计学处理。结果 (1)术前A组、B组及C组VEGF水平比较差异无统计学意义(F=0.000,P=0.978);术后7 d B组较A组明显增高(t=2.286,P=0.045),C组较A组及B组均明显增高(t=6.196,P=0.000;t=2.336,P=0.042);术后14 d B组与A组比较无明显差异(t=1.294,P=0.225),C组较A组及B组仍显著增高(t=6.738,P=0.000;t=2.641,P=0.038)。(2)术前A组、B组及C组TGF-β1水平比较组间差异无统计学意义(F=0.003,P=0.997);术后7 d B组较A组明显增高(t=9.052,P=0.000),C组较A组增高,但与B组比较明显减低,差异均有统计学意义(t=2.675,P=0.023;t=3.104,P=0.011);术后14 d B组与A组比较仍增高(t=3.443,P=0.006),而C组与B组比较显著降低(t=2.932,P=0.020),较A组增高,但差异无统计学意义(t=1.262,P=0.236);(3?
  • miR-30a-5p对人肝癌干细胞增殖和凋亡的影响 免费阅读 下载全文
  • 目的采用mi R-30a-5p模拟物转染CD133+MHCC97L肝癌干细胞,观察增殖和凋亡能力的变化,明确mi R-30a-5p对肝癌干细胞的基因治疗效果。方法采用免疫磁珠分选法分选CD133^+MHCC97L肝癌干细胞并采用流式细胞术检测分选效果。分别采用mi R-30a-5p模拟物或抑制物转染肝癌干细胞设为30 a M组或30 a I组,并设立空白对照NC组。采用RT-PCR法检测细胞mi R-30a-5p表达水平。采用CCK-8法检测细胞增殖能力。采用琼脂克隆形成实验检测细胞克隆形成能力。采用流式细胞术检测细胞凋亡率。肝癌干细胞分选效率、mi R-30a-5p表达水平、CCK-8实验测得A值、克隆形成数量和细胞凋亡率实验数据的比较采用单因素方差分析和t检验。结果未进行磁珠分选的MHCC97L肝癌细胞CD133阳性率为(1.42±0.26)﹪,低于分选后的MHCC97L细胞中CD133的阳性率(94.48±2.32)﹪,差异具有统计学意义(t=-6.78,P=0.04)。RT-PCR实验结果显示,30a M组CD133+MHCC97L肝癌干细胞中mi R-30a-5p的相对表达水平(20.21±1.92)较NC组(1.03±0.02)明显上调;30 a I组的相对表达水平(0.13±0.01)较NC组明显下调,差异均具有统计学意义(t=20.96,-6.22;P=0.01,0.03)。CCK-8实验结果显示,30 a M组细胞于24 h、48 h和72 h测得的A值分别为(0.40±0.00,0.68±0.03,0.75±0.02),明显低于NC组的(0.83±0.01,1.34±0.03,2.47±0.12),差异具有统计学意义(t=-12.15,-15.66,-6.42;P=0.01,0.02,0.01);30a I组细胞测得的A值分别为(0.95±0.05,1.64±0.03,3.28±0.07),明显高于NC组,差异具有统计学意义(t=9.45,18.97,7.58;P=0.00,0.01,0.03)。软琼脂克隆形成实验结果显示,30 a M组细胞的克隆形成数量为(61.81±1.76)个/孔,低于NC组的(131.96±8.15)个/孔,差异具有统计学意义(t=-8.31,P=0.00);30 a I组的克隆形成数量为(195.75±6.16)个/孔,高于与NC组,差异具有统计学意义(t=15.61,P=0.01)。流式细胞术结果显示,30 a M组的细?
  • 脐带间充质干细胞不同模式干预对2型糖尿病大鼠胰岛细胞凋亡的作用比较 免费阅读 下载全文
  • 目的对比脐带间充质干细胞(UCMSC)不同模式干预对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛细胞凋亡的作用及其与TLR4/NF-κB炎症通路的关系。方法将SD大鼠分为正常对照组(NC组)、T2DM组、UCMSC A组和UCMSC B组,每组8只,予相应干预8周:UCMSC以尾静脉输注方式干预,其中UCMSC A组采用单次大量模式(细胞数20×106个);UCMSC B组采用多次足量序贯模式(每次细胞数5×106个,每两周干预1次共4次)。定期检测各组大鼠空腹血糖(FBG)、胰岛素(INS)、C肽(C-P);观察胰腺组织形态变化;TUNEL法检测胰岛细胞凋亡;Western blot法检测胰腺组织TLR4、NF-κB及IL-6蛋白表达水平。组间比较采用单因素方差分析。结果治疗8周末,与T2DM组比较,UCMSC A组和UCMSC B组大鼠FBG均呈明显下降,其中UCMSC B组明显低于UCMSC A组[(20.0±3.5)比(13.1±1.7)、(7.2±2.2)],P〈0.05;与T2DM组比较,两个治疗组大鼠INS和C-P水平呈不同程度增高;T2DM组大鼠胰腺组织形态紊乱,仅见少量胰岛细胞团存在,而两个治疗组大鼠胰腺组织形态呈不同程度改善;与T2DM组比较,两个治疗组大鼠胰岛细胞凋亡指数明显降低,以UCMSC B组为甚;与T2DM组比较,两个治疗组大鼠胰腺组织TLR4、NF-κB及IL-6蛋白表达降低,以UCMSC B组为甚,分别为(1.58±0.43)比(1.15±0.27)、(0.96±0.20),(1.06±0.22)比(0.80±0.15)、(0.62±0.10),(0.91±0.10)比(0.77±0.09)、(0.60±0.16),均P〈0.05。结论多次足量序贯输注干预模式对2型糖尿病大鼠糖代谢和胰岛分泌功能具有较好的改善作用,其机制可能与其下调TLR4/NF-κB炎症通路抑制胰岛β细胞凋亡相关。
  • 携带缺氧诱导因子-1α-siRNA的叶酸靶向化的磁性纳米复合物抑制肝癌干细胞增殖的实验研究 免费阅读 下载全文
  • 目的本研究采用叶酸靶向化的聚乙烯亚胺包被的磁性纳米复合物(Fa-PEISPIO)携带HIF-1α-si RNA真核表达质粒转染CDl33+Hep3B肝癌干细胞,观察其对肝癌干细胞增殖能力的抑制效果并探讨其起效机制。方法采用CD133-PE荧光抗体流式分选Hep3B细胞中的CD133阳性细胞。采用流式细胞术检测分选前后细胞CDl33表达量。将Fa-PEI-SPIO纳米复合物与含HIF-1α小干扰RNA(HIF-1α-si RNA)、阴性对照(NC)-si RNA的真核表达质粒复合,分别形成Fa-PEI-SPIO/HIF-1α-si RNA和Fa-PEI-SPIO/NCsi RNA两种靶向化纳米复合物。分别应用两种纳米复合物转染CDl33+Hep3B肝癌干细胞,建立Fa-PEI-SPIO/HIF-1α-si RNA(FH)组和Fa-PEI-SPIO/NC-si RNA(FN)组,另设立未转染对照(CT)组。Western-blot法检测各组细胞的HIF-1α和Cyclin D1蛋白表达。平板克隆形成实验检测各组细胞的克隆形成能力。流式细胞术检测各组细胞的细胞周期。CD133阳性细胞比例、蛋白平均相对表达量、有效克隆形成数量和细胞周期等实验数据以x±s表示,3组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。结果分选前Hep3B肝癌细胞检测CD133阳性率为(2.95±0.04)﹪,分选后CDl33阳性率增加到(92.59±0.05)﹪,差异有统计学意义(t=34.88,P=0.00)。FH组CDl33+Hep3B肝癌干细胞HIF-1α、cyclin D1蛋白平均相对表达量分别为0.11±0.02、0.38±0.03,CT组分别为0.38±0.07、0.59±0.05,差异具有统计学意义(LSD-t=15.88,23.75;P=0.01,0.00)。FH组和CT组CDl33+Hep3B肝癌干细胞的有效克隆数量为分别为(25.92±5.22)个/孔和(364.00±13.93)个/孔,FH组的有效克隆数量明显低于CT组(LSD-t=-37.67,P=0.00)。与CT组相比,FH组细胞G0/G1期的细胞数量明显增大,出现了明显的G0/G1期阻滞,S期和G2/M期细胞数量明显降低,分裂活跃性较CT组降低。结论纳米复合物Fa-PEI-SPIO可高效负载HIF-1α-si RNA真核表达质粒抑制细胞内HIF-1α
  • 基于文献计量学的中国干细胞治疗临床应用现状研究 免费阅读 下载全文
  • 目的通过文献分析了解中国干细胞治疗技术临床应用概况。方法利用文献计量方法和社会网络分析等方法,对万方数据库、中国知网(CNKI)数据库、维普数据库和中国生物医学文献(Sino Med)数据库收录的干细胞治疗病例报告进行分析,并利用TDA和Ucinet等软件展现了分析结果。结果我国1998年就有干细胞移植治疗翼状胬肉的报道,自2000年以后,每年都有干细胞治疗相关的病例报告,迄今为止,有近500家机构发表了相关论文;治疗病例涉及眼病、心血管疾病及周围血管疾病、内分泌病与代谢病、神经系统疾病和消化系统疾病等多种类型的疾病,主要利用自体骨髓干细胞、间充质干细胞、脐带血干细胞和神经干细胞等。结论中国的干细胞治疗技术和市场未成熟,也未得到国家的正式审批,符合临床试验基本标准的前瞻性对照试验并未见相应数量的报告,但是通过文献报道可以看出,已经有大量医疗机构开展相关治疗业务,迫切需要严格区分研究与应用,弥补监管空白。
  • 白内障超声乳化手术后结膜细胞和泪膜稳定性的观察 免费阅读 下载全文
  • 目的观察白内障超声乳化手术后结膜细胞和泪膜的稳定性。方法 2015年7月至2015年8月于福建省立医院眼科行白内障超声乳化和人工晶状体植入手术的患者23例(29眼)。观察和分析患者手术前及手术后1 d、1周、1个月和2个月的干眼症状评估OSDI量表、泪液分泌试验、泪膜破裂时间、萤光素染色和结膜印迹细胞学检查。采用单因素重复测量方差分析,进行统计学分析。结果手术前,手术后1 d、1周、1个月和2个月的泪液分泌试验结果间比较差异无统计学意义;OSDI量表评分分别是(1.00±0.58)分、(1.61±0.75)分、(2.07±1.31)分、(1.63±1.04)分和(1.60±0.95)分,P〈0.05;结膜上皮细胞Nelson分级(0-3级)分别是(0.41±0.50)级、(1.89±0.77)级、(2.03±0.78)级、(1.82±0.76)级和(1.72±0.84)级,P〈0.05;杯状细胞密度分别是(387.00±64.28)个/mm2、(299.32±72.50)个/mm2、(239.64±83.29)个/mm2、(337.01±71.48)个/mm2和(343.82±78.69)个/mm2,P〈0.05。泪膜破裂时间结果显示患者术后1 d和1周泪膜稳定性下降,P〈0.05。手术后1周与手术后1 d、1个月和2个月比较,OSDI量表评分、泪膜破裂时间和杯状细胞密度的变化更为显著。结论白内障超声乳化手术后患者的干眼症状、泪膜稳定性和结膜印迹细胞学从手术后第1天开始变化,手术后1周眼表破坏更为严重。手术后1个月逐渐改善,但至手术后2个月仍无法完全恢复至手术前的状态。
  • 通过不同途径注射可生物发光肿瘤细胞构建膀胱癌全身多器官转移模型 免费阅读 下载全文
  • 目的探讨通过不同途径注射可生物发光肿瘤细胞构建裸鼠膀胱癌全身多器官转移模型。方法以慢病毒感染膀胱癌细胞株5637获得可稳定表达萤火虫荧光素酶的5637-Luc。分别通过左心室及尾静脉注射构建膀胱癌全身多器官转移模型,并以小动物活体生物发光成像技术观测5637-Luc在裸鼠体内各主要器官的分布,于7天后处死小动物,取出裸鼠内脏观测转移病灶数量并进行对照分析。结果成功构建可生物发光膀胱癌细胞系5637-Luc,生物发光活性与细胞数高度线性相关(R2=0.995)。经小动物活体生物发光成像观测,通过左心室及尾静脉注射5637-Luc后均可构建膀胱癌全身多器官转移模型,经左心室注射组失败2例,经尾静脉注射组10例全部成功。7天后经左心室注射组平均转移病灶数(11.9±0.83),经尾静脉注射组转移病灶数为(11.8±0.79),注射途径对于肿瘤细胞在裸鼠体内主要器官的分布数量差别无统计学意义(P〉0.05)。结论通过不同途径注射可生物发光肿瘤细胞均可成功构建可非侵入性、定量、实时、精确和动态观测的膀胱癌全身多器官转移模型。
  • 自体外周血干细胞移植治疗下肢动脉缺血性疾病的10年随访分析 免费阅读 下载全文
  • 干细胞研究表明人体骨髓中的内皮祖细胞较外周血丰富、增殖能力强,动员到外周血能在缺血局部形成新生血管[1],从而达到治疗动脉缺血性疾病的目的,临床研究已经取得了初步成果[2-4],但缺乏长期随访结果,中山市人民医院普外二科对进行干细胞治疗的患者进行长达10年随访,分析结果如下。一、资料与方法1.临床资料:中山市人民医院普外二科自2004年3月至2007年2月为16例患者(16条患肢)实施了自体外周血干细胞移植术。
  • 稿约 免费阅读 下载全文
  • 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》为中华医学会主办的移植专业学术电子出版物,是一种在载体形式上与纸质媒体相互补的多媒体光盘(CD-ROM)。其以电子出版物特有的表现形式,图文声像并茂,具有很强的互动性。并以移植及相关专业医师和技术人员为主要读者对象,
  • 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》封面

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