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  • 肾脏疾病的干细胞治疗 免费阅读 下载全文
  • 肾脏是一个高度复杂的器官,由超过30种以上不同类型的细胞组成,如肾小管上皮细胞、间质细胞、肾小球细胞和血管细胞等。这些细胞和组织的增殖速率、更新和再生的能力差异较大,即使是肾单位的不同成分,增殖能力也各不相同。肾小球脏层上皮细胞(或足细胞)属终末分化类细胞,几乎没有增殖能力。若足细胞因坏死、凋亡或分解而失去,邻近的足细胞不会通过增殖来替代,而近曲小管正常生理状态下能缓慢更新,一旦发生损伤,肾小管细胞即发生广泛性的增殖。现在有6.5%-10.0%的普通人群患有不同程度的肾脏疾病,许多难治性肾脏疾病即使积极治疗,最终仍然进入尿毒症阶段。
  • 获得人体干细胞效率将提高百倍 免费阅读 下载全文
  • 在诱导皮肤细胞等人体细胞重组成千细胞的过程中,科学界一般使用4个调节蛋白。但现在,英国科学家表示,通过在这一过程中多添加两个调控因子,他们将获得人体干细胞的效率提高了100倍。与此同时,该方法也能以更快的速度得到质量更好的干细胞。
  • 异源基因α1,3半乳糖转移酶与增强型绿色荧光蛋白融合对荧光蛋白表达的影响 免费阅读 下载全文
  • 目的研究异源(猪)基因α1,3半乳糖转移酶(3GT)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因形成的融合蛋白对其荧光表达量的影响。方法BamHI,EcoRI酶切pcDNA3.1-α1,3GT重组载体后,回收含α1,3GT的片段,与BamHI、EcoRI酶切回收的pEGFP-N1载体连接,并酶切、测序鉴定重组真核表达载体pEGFP/α1,3GT。将该表达载体转染人肺癌细胞A549、人胚肾细胞293FT,EGFP的表达用荧光显微镜观察和流式细胞仪进行荧光定量分析。结果pEGFP.N1载体转染A549和293FT后48h的转染阳性率分别80.5%和86.5%;pEGFP/α1,3GT载体转染A549和293FT细胞后48h的转染效率则为75.8%和81.2%。A549细胞空白对照,转染pEGFP-N1和pEGFP/α1,3GT载体的A549细胞平均荧光强度分别为1.21、0.956;293FT细胞空白对照,pEGFP-N1和pEGFP/α1,3GT载体的293FT细胞平均荧光表达量分别为7.66、1.00。结论pEGFP/α1,3GT融合蛋白的生成抑制了绿色荧光蛋白的表达强度。
  • 英科学家研制人造血二年内进行临床试验 免费阅读 下载全文
  • 科学家利用干细胞制造人造血,2年内将在英国进行试验。进行该研究(能够提供工业规模的生产)的科学家认为,这将改变输血的现状,避免医院血源枯竭,能够救助数千名在战场和车祸中受伤的生命。心脏移植、心脏搭桥手术和癌症患者也能从中受益,这确保了他们在手术期间有充足的血液供应。
  • 组织相容性Ⅰ类相关链A位点基因多态性在预判肾移植物排斥中的意义 免费阅读 下载全文
  • 目的研究组织相容性Ⅰ类相关链A位点(MICA)基因多态性和抗MICA特异性抗体在。肾移植排斥反应发生中的意义。方法采用免疫磁珠液相芯片技术对40例肾移植患者在移植术前和移植术后1个月、3个月、6个月、1年和2年动态检测抗MICA抗体的特异性和阳性分值的变化,同时采用SSOP方法分析16对肾移植供受者的MICA基因分型,并把MICA基因具有相同抗原表位的特征性分为G1组和G2组。结果在40例肾移植中尸体供肾35例,亲缘活体供肾5例。35例肾移植受者均带肾存活良好,其中33例接受动态随访。移植术前预存抗MICA抗体为12例,其中抗MICA抗体10例、抗HLA-Ⅰ类+MICA抗体2例:4例分为MICA-G1组、6例分为MICA-G2组、2例共为MICA-G1和G2组。16对供受者MICA等位基因频率分布:在MICA-G1组中频率M^*002最高,M^*007次之;MICA-G2组中频率M^*008最高,M^*009和M^*019次之。33例移植术后有4例新生抗MICA抗体,3例新生抗HLA抗体,均为抗供者特异性抗体和抗非供者特异性抗体。移植术前预存抗MICA抗体,在移植术后1-2年的动态随访中其特异性均未改变,而抗体的阳性分值呈现高低的变化。12例移植术前预存抗MICA抗体中的3例和抗体阴性1例移植术后发生急性排斥反应,临床表现为发热,尿量减少,肌酐和肾动脉阻力指数升高。33例动态随访资料显示:无论是MICA基因频率分布特点,还是抗MICA特异性抗体类型与排斥反应的关系,M^*002、M^*004、M^*008、M^*019和M^*001基因型最常见,但未见MICA^*012和MICA^*006基因型。结论移植术前分析供受者的MICA基因多态性,受者的特异性抗体鉴定和特征性分组;移植术后动态监测抗MICA抗体的变化,是肾移植术后预防急性和慢性移植物排斥的重要靶分子。
  • 不同方法分离的成人睾丸支持细胞与胰岛共移植的效果对比 免费阅读 下载全文
  • 目的比较成人睾丸支持(Sertoli)细胞不同分离方法的效果,建立成人Sertoli细胞简便高效的分离方法。方法将质量相等的睾丸组织按照不同分离方法随机分为3组:A组采用胰蛋白酶、DNA酶、胶原酶和透明质酸酶一步消化法;B组采用胰蛋白酶和DNA酶第一步消化,胶原酶和透明质酸酶第二步消化;C组采用胰蛋白酶和DNA酶第一步消化,透明质酸酶第二步消化,胶原酶第三步消化;D组为对照组。采用形态学观察和免疫组化鉴定Sertoli细胞;MTT法和流式细胞仪法测定3组Sertoli细胞的活性和纯度;应用生存分析方法比较3组Sertoli细胞与胰岛共移植至糖尿病鼠的效果。结果分离获得的细胞经形态学和免疫组化鉴定,具有Sertoli细胞的特征,A、B、C三组Sertoli细胞的纯度分别为(85.17±1.8)%、(92.33±2.5)%和(93.12±2.6)%,B组和C组的Sertoli细胞纯度显著高于A组(t=7.35,t=7.95,P=0.00,P=0.00)。B组Sertoli细胞活性于培养14d时达到峰值,此后缓慢下降。B组Sertoli细胞活性显著高于A组和C组(t=4.02,t=2.77,P=0.00,P=0.01),且B组Sertoli细胞与胰岛共移植术后胰岛移植物存活时间显著高于A、c、D组(F=165.548,P=0.000)。结论采用两步消化的方法能够获得纯度和活性较高的Sertoli细胞,其与胰岛共移植能够显著延长移植物存活。
  • 骨形成蛋白Ⅱ型突变受体基因转染对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响 免费阅读 下载全文
  • 目的探讨骨形成蛋白(BMPs)与口腔鳞癌的发生、发展的可能关系。方法将含有BMP-Ⅱ突变受体的真核表达载体转染入Tea8113舌癌细胞,筛选和鉴定后,构建稳定表达BMP-Ⅱ突变受体的细胞株tBRⅡ-Tea8113。对tBRⅡ—Tca8113细胞和Tca8113细胞分别进行MTT检测,流式细胞仪(FCM)分析、BrdU标记检测细胞的增殖活性及DNA合成;检测tBRⅡ-Tca8113细胞和Tea8113细胞的凋亡及细胞周期相关因子(CyclinD1,CDK-4,p27,p57)的表达。结果Tea8113细胞和tBRⅡ-Tea8113细胞的增殖指数MTT检测为0.47±0.01和0.35±0.008(t=22.953,P=0.000),BrdU检测为12.0±3.4和23.0±1.9(f=6.918,P=0.000),FCM检测为6.3和7.9;两组的凋亡指数为3.7±1.2和8.7±1.6(t=29.583,P=0.000);细胞周期因子在Tca8113和tBRⅡ-ca8113细胞中的平均灰度测量值为CyclinD1(186.5±2.4和145.6±3.9,t=28.244,P=0.000),CDK4(169.9±2.9和129.5±3.2,t=29.583,P=0.000),p27(110.1±1.1和167.34-1.8,f=85.754,P=0.000),p57(107.9±2.1和156.8±2.2,t=50.844,P=0.000)。结论BMPs及其受体可能在口腔上皮组织的恶变过程中有重要作用,研究结果为探讨BMPs信号在上皮性肿瘤中的作用提供了重要依据。tBRⅡ-Tea8113细胞的建立,进一步表明了BMPs及其受体在口腔上皮组织的恶变过程中有重要作用,并为进一步探讨BMP信号在上皮性肿瘤的恶变过程中的作用奠定了基础。
  • 一种简单的人脐带间充质干细胞分离培养方法 免费阅读 下载全文
  • 目的建立一种简单的人脐带间充质干细胞分离培养方法。方法取新鲜脐带,剪成5cm长的小段,直接剪碎为糊状,加入含10%胎牛血清的DMEM/F12在培养瓶中培养,光学显微镜下观察细胞的生长特征,运用流式细胞仪检测分析细胞的抗原标志表达,并检测其体外多向分化潜能。结果运用不剥离血管组织、不用酶消化的组织贴块培养法可以从新鲜脐带中分离到贴壁生长的成纤维细胞样细胞,这些细胞表达CD29、CD44、CD90和CD105,并可在体外诱导分化为脂肪、骨和软骨细胞。结论运用不剥离血管组织、不用酶消化的组织贴块培养法可以从人脐带中分离到问充质干细胞,其生物学特性与骨髓间充质干细胞相似。
  • 青藤碱对人外周血CD4^+T淋巴细胞增殖和细胞内Ca^2+浓度影响的体外研究 免费阅读 下载全文
  • 目的探讨青藤碱(SIN)对人外周血CD4^+T淋巴细胞增殖和细胞内Ca^2+浓度的体外影响及其效应机制。方法建立体外人外周血CD4^+T淋巴细胞模型,分别作以下处理:(1)空白对照组;(2)环孢素(CsA)组(50ng/m1);(3)低浓度SIN组(10μmol/1);(4)中浓度SIN组(200μmol/1);(5)高浓度SIN组(1000μmol/1)。分别用MTT比色法和流式细胞术(FCM)检测CD4^+细胞增殖和细胞内Ca^2+荧光强度。采用方差分析比较各组间差异的统计学意义。结果(1)高浓度SIN组、中浓度SIN组与其他各组细胞增殖抑制率存在差异(F=1444.228,P=0.000);(2)FCM检测细胞内Ca^2+浓度结果:中浓度SIN组、高浓度SIN组与其他各组差异有统计学意义(F=479.055,P=0.000);(3)经SIN处理后,人外周血CD4^+T淋巴细胞增殖抑制率和细胞内Ca^2+浓度之间存在负相关r=-0.836,P=0.005)。结论SIN能浓度依赖性地抑制人外周血CD4^+T淋巴细胞增殖和细胞内Ca^2+浓度升高,人外周血CD4^+T淋巴细胞增殖抑制率和细胞内Ca^2+浓度之间存在显著性负相关。
  • 成人胰岛细胞移植25例次临床研究 免费阅读 下载全文
  • 目的建立新型成人胰岛细胞分离纯化方法,观察成人胰岛细胞移植的安全性与有效性。方法对14例l型糖尿病(T1DM)患者进行PFC与UW液双层冷藏胰腺,Liberase酶消化,COBE2991型专用胰岛细胞分离机分离及连续密度梯度纯化,获取高纯度与高活性的胰岛细胞。采用外科方法,将短期培养的胰岛细胞经门静脉移植到肝脏内。术后监测血糖与胰岛素用量、C肽与糖化血红蛋白水平以及肝。肾功能,采用t检验与术前比较差异的统计学意义。结果47个胰腺成功分离胰岛细胞,平均数量32.5万IEQ、纯度81.4%、活率93.2%、刺激指数3.26,病原学结果均阴性。14例T1DM患者实施成人胰岛细胞移植25次,每次移植平均胰岛数量为10200IEQ/kg。采用无激素免疫抑制治疗。随访18个月至5年,8例完全撤除胰岛素,6例胰岛素用量较术前减少60%以上。术后血糖稳定维持在正常水平,C肽均超过0.5ng/ml,糖化血红蛋白基本正常,肝肾功能稳定维持正常,无胰岛移植并发症。结论新型成人胰岛细胞分离纯化方法可靠,成人胰岛细胞移植治疗1型糖尿病临床疗效较好,手术简捷,安全性好。
  • 第五届全国肝病免疫和生物治疗研讨会通知 免费阅读 下载全文
  • 会议地点:北京大成路九号 由中国免疫学分会感染免疫分会、全军传染病学专业委员会主办,生物谷的第五届全国肝病免疫和生物治疗研讨会将于2012年4月13-14日在北京召开。本次会议拟将基础研究与临床治疗密切结合,邀请国内著名肝病免疫及生物治疗的基础研究和临床专家,着重介绍本领域前沿进展、研究成果和最新技术。主要内容包括:肝病的临床免疫学研究进展,免疫细胞治疗技术,干细胞治疗技术等。旨在通过会议促进专家交流,为基础研究与临床研究有机结合搭建桥梁。
  • 供体骨髓干细胞输注联合肝移植治疗终末期肝病的近期效果观察 免费阅读 下载全文
  • 目的评价供体骨髓干细胞输注联合肝移植治疗终末期肝病的近期效果。方法2008年3月至2009年1月本中心30例肝移植受者分为两组,实验组8例,行同期供体骨髓干细胞联合肝脏移植;对照组22例,仅行肝脏移植,不行骨髓干细胞输注。观察两组受者术后免疫抑制剂(甲基强的松龙、他克莫司)用量、肝功能(谷氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶等)变化、急性排斥反应和感染并发症发生情况,以及术后住院时间和费用。采用,检验、方差分析及确切概率法进行统计学分析。结果实验组术后甲基强的松龙总用量和出院时每日他克莫司用量显著低于对照组[甲基强的松龙分别为(1314±105)mg,(1884±256)mg,t=6.060,P=0.000;他克莫司分别为(3.73±0.35)mg/d,(4.93±0.62)mg/d,,=5.147,P=0.000]。术后第1天实验组血清谷氨酸转氨酶、天冬氨酸转氨酶均显著低于对照组[谷氨酸转氨酶分别为(875.2±325.5)IU/L,(1350.4±482.7)IU/L,t=2.543,P=0.016,天冬氨酸转氨酶分别为(646.2±184.9)IU/L,(1021.8±325.4)IU/L,t=3.067,P=0.005]。术后第3天也低于对照组[谷氨酸转氨酶分别为(252.9±35.8)IU/L,(343.5±47.8)IU/L,f=4.866,P=0.000,天冬氨酸转氨酶分别为(227.8±38.0)IU/L,(310.8±61.7)IU/L,t=3.545,P=0.001]。结论同期供体骨髓干细胞联合肝脏移植可以降低术后免疫抑制剂用量,减轻术后早期肝脏损伤,不增加治疗风险,是一种安全有效的治疗方法。
  • 自体骨髓单个核细胞移植治疗缺血性下肢血管病变患者254例 免费阅读 下载全文
  • 目的探讨自体骨髓单个核细胞移植在下肢缺血性疾病治疗中的应用并评价其疗效。方法回顾性总结分析解放军第四六三医院细胞治疗中心2003年11月至2008年8月住院的具有完整随访资料的下肢缺血性疾病患者254例,经动员后采集及分离自体骨髓,行下肢自体骨髓单个核细胞移植术。随访时间为1年。术后随访指标:3、6、12个月后复查皮温、深感觉、经皮氧分压和踝肱比,随访疼痛、冷感和跛行距离,观察溃疡和坏疽情况。采用F检验分析差异的统计学意义。结果完成随访254例患者。(1)患者的疼痛缓解率为61.8%(157例/254例),冷感缓解率缓解率74.0%(188例/254例),跛行好转率40.2%(102例/254例),溃疡好转率59.0%(36例/61例),坏疽截肢6例,脱落愈合5例,无变化8例,扩大7例;(2)患者下肢皮温由32.89℃±2.19℃上升至35.52℃±2.26℃(t=13.32,P=0.000),深感觉缓解由(26.20±15.78)mV下降至(20.34±10.86)mV(t=4.901,P=0.000),经皮氧分压由(26.46±18.49)mmHg上升至(34.14±14.99)mmHg(t=5.157,P=0.000),踝肱比由0.62±0.36上升至0.84±0.24(t=8.104,P=0.000)。结论骨髓单个核细胞移植治疗下肢缺血性血管病有效,是一种简单的、有效的治疗下肢动脉缺血性疾病的方法。
  • 自体骨髓间充质干细胞治疗雷诺氏病一例 免费阅读 下载全文
  • 雷诺氏病属上肢缺血性疾病,治疗手段包括药物、血管旁路移植术和介入手术等,疗效常不理想,致残率高。再生医学的发展使细胞治疗成为近年尝试的一项新技术。动物实验及临床研究均表明人体外周血、脐血及骨髓问充质干细胞有修复病变血管和促进血管新生的功能。我院近来用自体骨髓间充质干细胞治疗雷诺氏病1例。
  • 胰腺癌干细胞研究现状 免费阅读 下载全文
  • 胰腺癌是恶性程度非常高、预后非常差的消化道肿瘤之一。大部分患者发现时已属无法手术切除的晚期胰腺癌,并对放化疗不敏感。最近的研究表明胰腺癌干细胞是胰腺癌发生和进展的源头,并对放疗和化疗导致的凋亡耐受,对胰腺癌干细胞自我更新和耐药机制的深入研究可能发现对胰腺癌更有效的治疗措施。现对胰腺癌干细胞研究现状作一综述。
  • 肠黏膜更新的源泉——小肠干细胞 免费阅读 下载全文
  • 随着细胞分选和基因标记技术逐渐成熟,干细胞研究由原来的干细胞移植雏形—骨髓移植研究逐步发展成为一个新兴的学科。作为机体内细胞更新最快的组织器官之一——小肠,其干细胞的研究日益受到人们的关注。由于小肠黏膜单层上皮细胞的简单结构和特有的昼夜更新节律,小肠干细胞成为继造血干细胞和皮肤干细胞之后新的研究热点。同时,由于部分肠道疾病导致的黏膜破坏,肠功能难以自我代偿,小肠干细胞移植为肠黏膜的再生和肠功能的恢复提供了新的前景。
  • 《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》第1卷(2011年)总目次 免费阅读 下载全文
  • [专家论坛]
    肾脏疾病的干细胞治疗(杨顺良 谭建明)
    [学术动态]
    获得人体干细胞效率将提高百倍
    [实验研究]
    异源基因α1,3半乳糖转移酶与增强型绿色荧光蛋白融合对荧光蛋白表达的影响(唐晶[1] 谢柏臻[2] 李鹏飞[1] 姚琴[2] 赵涣阁[3] 卓慧钦[2] 刘祖国[4] 赵永祥[5])
    [学术动态]
    英科学家研制人造血二年内进行临床试验
    [实验研究]
    组织相容性Ⅰ类相关链A位点基因多态性在预判肾移植物排斥中的意义(袁晓妮[1] 何军[1] 侯建全[2] 温端改[2] 鲍晓晶[1] 邱桥成[1] 王乾[2] 钟键[2] 李强[1])
    不同方法分离的成人睾丸支持细胞与胰岛共移植的效果对比(李杨 薛武军 田晓辉 宋焕瑾 宋勇 丁小明 冯新顺 丁晨光)
    骨形成蛋白Ⅱ型突变受体基因转染对口腔鳞癌细胞增殖和凋亡的影响(傅升[1] 吕红兵[2] 刘源[3] 何黎升[3] 樊丽娜[1] 金岩[3])
    一种简单的人脐带间充质干细胞分离培养方法(庞荣清[1] 何洁[1] 李福兵[1] 赵晶[1] 阮光萍[1] 王桂华[2] 瞿良[3] 李黎[4] 蔡学敏[1] 潘兴华[1])
    青藤碱对人外周血CD4^+T淋巴细胞增殖和细胞内Ca^2+浓度影响的体外研究(王毅 钱坤 罗志刚 秦国庆 李建军)
    [临床研究]
    成人胰岛细胞移植25例次临床研究(谭建明 杨顺良 蔡锦全 吴卫真 郭君其 黄梁浒 王庆华 吴志贤 陈津)
    [消息]
    第五届全国肝病免疫和生物治疗研讨会通知
    [临床研究]
    供体骨髓干细胞输注联合肝移植治疗终末期肝病的近期效果观察(江艺 张小进 吕立志 杨芳 蔡秋程 潘凡)
    自体骨髓单个核细胞移植治疗缺血性下肢血管病变患者254例(许忆峰 杨晓凤 吴雁翔 王红梅 张轶斌 吕乃武 单鸿 崔激平 周金旭)
    [病例报告]
    自体骨髓间充质干细胞治疗雷诺氏病一例(吕铁明 黎成金 罗芳 谭建明)
    [综述]
    胰腺癌干细胞研究现状(刘俊[1] 董维平[2])
    肠黏膜更新的源泉——小肠干细胞(平晓春[1] 李幼生[2])

    《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》第1卷(2011年)总目次
    《中华细胞与干细胞杂志(电子版)》封面
      2011年
    • 01
    • 02

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