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  • M2e合成肽流感通用疫苗的研究 免费阅读 收费下载
  • M2蛋白是甲型流感病毒的跨膜蛋白,其优点为不易变异,且N端24个氨基酸组成的胞外区(M2e)十分保守,适合作为通用流感疫苗的靶标。因此本实验将4个拷贝的M2e通过赖氨酸与通用Th细胞表位偶联获得M2e分支肽(M2e-MAP),添加弗氏佐剂制备成合成肽疫苗免疫小鼠,评价其免疫原性及异源攻毒保护效力。ELISA实验结果表明,该疫苗能刺激机体产生高水平的抗M2e特异性IgG抗体;细胞因子IL-4的检测进一步说明了其能诱导产生高的体液免疫应答水平,ELISPOT实验从IL-4和IFN-γ两个方面分别说明了该疫苗不仅可以诱导高的体液免疫应答,而且能刺激机体产生高水平的细胞免疫应答。对免疫小鼠攻H9N2,通过肺病毒分离滴定和肺组织病理切片等方法检测攻毒保护效果,结果均表明,M2e分支肽疫苗能对异源病毒的攻击产生较好的保护效力。上述结果为流感通用疫苗的研究提供了一种参考思路。
  • LT粘膜佐剂对鸡新城疫疫苗的免疫增强作用研究 免费阅读 收费下载
  • 研究大肠杆菌热敏性肠毒素突变体蛋白(heat—labile enterotoxin,LTRG)对鸡新城覆(Newcastle disease virus,NDV)疫苗经不同途径接种效果的影响。以NDV LaSota株作为共免疫原,与LTRG重组蛋白经滴鼻、口服及肌肉注射三种途径接种雏鸡,通过血清IgG抗体、HI抗体及粘膜分泌型IgA抗体水平变化,评价不同途径接种LTRG对NDV疫苗的免疫效果的影响。结果显示:①三种途径接种.LTRG均能显著增强NDV疫苗的免疫抗体水平,免疫雏鸡血清抗体和粘膜抗体水平均高于NDV疫苗单独免疫组;②LTRG对NDV疫苗免疫增强作用,以滴鼻接种最显著:二、三免后LTRG+NDV滴鼻组与NDV组血清IgG、粘膜IgA差异均显著(P〈0.01、P〈0.05);IJTRG+NDV口服与NDV组血清IgG差异不显著(P〉0.05)、粘膜IgA差异极显著(P〈0.01);LTRG+NDV肌注与NDV组IgG差异不显著(P〉0.05)、粘膜IgA差异显著(P〈0.05);③三种免疫途径比较:血清IgG抗体水平差异均不明显(P〉0.05);滴鼻、口服免疫可诱导雏鸡产生较高的粘膜IgA抗体、血清HI抗体。由此可见:LTRG粘膜佐剂对NDV疫苗免疫增强作用,以粘膜(滴鼻、口服)途径接种效果最为显著,能诱导高水平的粘膜IgA抗体及血清抗体。
  • H9N2亚型禽流感病毒灭活苗最小免疫剂量及抗体消长规律的初步研究 免费阅读 收费下载
  • H9N2亚型禽流感疫苗在我国普遍使用,在强大免疫压力下,H9N2亚型禽流感病毒变异加快,现有商品化灭活苗无法完全保护免疫鸡免受H9N2亚型禽流感病毒流行株的感染。为此,本研究以从近期流行毒株中筛选出的一株H9N2亚型禽流感病毒A/Chicken/shanghai/441/2009(H9N2)(简称为SH441)为种毒,制备灭活苗,进行了最小免疫剂量及抗体消长规律的初步研究。将制备的H9N2亚型禽流感灭活苗以0.01、0.02、0.04、0.05、0.08mL/只的不同剂量,胸部肌肉途径免疫3周龄SPF鸡只,并于免疫后21天静脉感染SH441病毒,结果显示该疫苗最小免疫剂量为0.02mL/只。以0.05mL/只剂量免疫SPF鸡只,该疫苗能刺激SPF鸡只产生较高的HI抗体滴度,且在免疫后第5周达到峰值(12Log2以上),随后稍有下降但保持相对稳定,且在免疫后29周时依然保持在7Log2以上。这些结果为为该疫苗的进一步开发奠定了良好的基础。
  • 新城疫病毒Class I强毒株磷蛋白在细胞中的表达与定位 免费阅读 收费下载
  • 根据ClassI新城疫病毒分离株9a5b编码序列设计特异性引物扩增P蛋白基因,原核表达后利用纯化的蛋白免疫BALB/C小鼠制备单克隆抗体,经二次亚克隆后筛选到4株针对P蛋白的单克隆抗体,利用所得单抗进行P蛋白在细胞内定位分析,NDV9a5b株按5M.O.I感染量接种DFl单层细胞,当PI=4h时,P蛋白呈点状弥散分布于细胞浆内;PI=6~8h时,P蛋白聚集于细胞核周围;PI=12h时,P蛋白呈单极化聚集于细胞核一侧;而PI=16h后开始形成合胞体,P蛋白在单个细胞中仍呈现单极分布;当PI=48h时,细胞核已发生碎裂,荧光强度有所减弱。本研究为深入开展P蛋白在病毒增殖以及细胞周期中的作用机制研究奠定了基础。
  • 蓝舌病病毒内蒙古分离株的特性研究 免费阅读 收费下载
  • 蓝舌病病毒内蒙古株是继云南株、四川株之后,从隐性感染的山羊血液中分离获得的目前在中国唯一一株接近于蓝舌病毒血清17型的毒株。将他与云南毒株和美国17型毒株进行比较,发现其血清学反应群特异性完全相同;中和试验表明与云南毒株之间无交叉保护反应,与美国17型毒株有交叉保护反应,但中和不彻底;电镜下其形态与云南、美国毒株完全一致;核酸电泳分析,具有4组10基因片段,带型为3:3:3:1,第7、8、9片段不融合,与云南、美国毒株基本一致,但1、2、3组中迁移率有差异;人工接种绵羊、山羊、鸡胚,其病理变化和临床反应与云南、美国毒株比较有较大差异。
  • 蓝舌病病毒VP7蛋白的B细胞表位预测 免费阅读 收费下载
  • 根据前期试验中测得的蓝舌病病毒VP7蛋白的基因序列和推导的氨基酸序列,利用DNAStar软件和Biosun软件进行生物信息学预测,以单参数(亲水性、可及性、柔韧性、抗原性)预测为基础,结合二级结构预测来综合分析蓝舌病病毒VP7蛋白的B细胞表位。比较两种软件的预测结果发现,在蓝舌病病毒VP7蛋白的381个氨基酸序列中,第81~85、198~202、235~239、253~257区域有较好的亲水性、表面可及性和较高的抗原指数,并且在二级结构上含有易形成抗原袁位的转角和无规则卷曲,最有可能为蓝舌病病毒VP7蛋白的B细胞线性优势表位。上述预测和判定结果表明,在蓝舌病病毒VP7蛋白序列中存在优势B细胞线型表位,为进一步合成多肽并分析已获得的VP7蛋白单抗的结合表位奠定了基础。
  • 上海地区犬细小病毒的分离及VP2基因序列分析 免费阅读 收费下载
  • 为了解上海地区犬细小病毒流行毒株的情况,本研究使用病毒分离和PCR技术对上海某犬养殖场采集内脏样品进行了形态学、分子病毒学等鉴定。结果显示,病毒能在MDCK细胞上生长,并产生细胞变圆、破碎、脱落等细胞病变;能凝集猪红细胞。用犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)特异性引物对病毒进行PCR扩增,能够扩增出CPV特异性片段,经序列测定分析与GenBank FJ432316相近。本研究对了解和掌握犬细小病毒流行病学及其变异趋势具有重要的作用。
  • 猪繁殖与呼吸综合征病毒直接免疫荧光检测方法的建立 免费阅读 收费下载
  • 为了建立一种快速、准确的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)直接免疫荧光检测方法,对前期制备的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白单克隆抗体进行亲和层析法纯化,经异硫氰酸荧光素标记:通过对荧光染色的固定试剂、固定时间、染色时间和荧光抗体工作浓度的测定,确定荧光抗体染色法在PRRSV感染细胞和病料中的最佳工作条件。利用荧光抗体染色法对本实验室收集的62份病料进行检测,同时以RT-PCR进行验证,确定荧光染色法的检测符合率。结果显示,FITC标记的荧光抗体检测细胞培养物最佳工作条件:80%丙酮4℃固定20min,荧光抗体按1:400稀释,感作时间为1h;检测组织病料最佳工作条件:病料组织进行涂片后,用80%丙酮4℃固定30min,荧光抗体按1:200稀释,感作时间为2h;病料组织荧光检测与RT-PCR的检测一致率为74.2%。本研究建立的快速、准确的猪繁殖与呼吸综合征病毒直接免疫荧光检测方法为今后该疾病诊断奠定了基础。
  • 重组禽流感病毒(H5N2)的拯救及其生物学特性分析 免费阅读 收费下载
  • 为控制在我国流行的H5NI高致病性禽流感(Avian influenza virus,AIV)和筛选具有标记的疫苗毒株,用流行的H5NI亚型AIV的HA基因和H9N2亚型AIV的NA基因及H1N1亚型AIV(A/PR/8/34毒株)的6个内部基因通过流感8质粒反向遗传操作系统拯救了重组病毒rH5N2/PR8株。为了降低重组病毒的毒力,对H5N1亚型AIV的HA基因进行了修饰,使其裂解模式由PLRERRRKR↓GL修饰为PLIETR↓GL。将获得的rH5N2/PR8株在9日龄SPF鸡胚上连续传10代。该重组病毒的血凝效价稳定在1:2048,其半数感染量(EID50)可达10^-8.77/0.1mL。该病毒的毒力显著降低,对鸡胚的半数致死量(ELD60)为10^-5/0.1mL。将该病毒灭活与油佐剂乳化,制成灭活疫苗,给6周龄SFP鸡接种不同剂量,接种21d后,用H5N1流行野毒A/Chicken/SD/2010(H5N1)攻击,结果显示:接种剂量为0.1mL/只的试验组,10只鸡中有5只获得保护;接种0.3mL/只的试验组可获得100%保护。以上说明,本实验获得的重组病毒具有疫苗标记、繁殖滴度高、毒力低、免疫原性好等特点,非常适合作为“标记疫苗”候选株,为AIV(H5N1)的标记疫苗研发奠定了坚实基础。
  • 志贺氏菌样毒素Stx2e缺失突变株的构建及部分生物学特性的分析 免费阅读 收费下载
  • 水肿病是能由产志贺样毒素型大肠杆菌产生的Stx2e毒素引起的一种细菌传染病,对断奶仔猪有较高的致死率,常造成较大的经济。当前,Stx2e毒素影响病原菌与靶细胞之间的相互作用机制不明确,Stx2e基因缺失株作为后选疫苗的潜力有待确认。本研究中我们利用Red重组系统构建了大肠杆菌1522(serotype 0139:K12:H1)和1525(serotype 0157:H19)的Stx2e基因缺失株,并通过PCR检验,DNA测序手段以及Vero细胞毒性试验在细胞水平加以验证。研究发现,在同样的培养条件下,1522AStx2e株的生长特性与原型株相比没有差异,其分解发酵糖类和氨基酸的能力也未发生改变,但是相较野生株,Stx2e基因缺失株粘附猪肠上皮细胞IPEC—J2的能力大幅度降低,可达30%。将表达K99菌毛操纵子基因克隆入1522AStx2e中,该重组菌能够同时表达K99菌毛和自身的F18菌毛基因,且该重组株的粘附IPEC—J2细胞能力相较原型株增强近1倍。
  • 准噶尔盆地硬蜱区系考察与名录记述 免费阅读 收费下载
  • 蜱类与人类疾病关系密切,可以携带和传播多种重要病原。准噶尔盆地是我国第二大盆地,地处新疆北部,是我国虫媒疫病的自然疫源地。2010年~2012年期间,通过对新疆准噶尔盆地硬蜱区系考察与分类研究,共采获硬蜱标本19466枚,隶属5属21种,以草原革蜱(Dermacentor nuttalli Olenev)、亚洲璃眼蜱(Hyalomma asiaticum asiaticum Schulze)和银盾革蜱(Dermacentor niveus Neumann)为优势种类,分别占总蜱数的27.76%、23.39%、19.96%。该考察结果填补了近十几年来准噶尔盆地蜱类缺乏系统考察的空缺,考察名录代表了噶尔盆地最新蜱类物种。
  • 江西省2008~2012年家畜血吸虫病疫情回顾及实现2015年防控目标的风险分析 免费阅读 收费下载
  • 本文回顾了2008~2012年江西全省及纵向观测点家畜血吸虫病疫情状况,表明全省的流行区域在逐年缩小,全省家畜平均感染率从2008年的2.01%降至2012年的1.67%,疫情下降缓慢。为了实现2015年全省家畜平均感染率降至1%以下的防控目标,本文对达到防控目标的风险以及控制风险的措施进行了针对性分析。
  • 用重组抗原与商品化试剂盒对比检测牦牛的新孢子虫与弓形虫感染 免费阅读 收费下载
  • 用纯化的特异性重组抗原NcSRS2和TgSAG2作为包被抗原,经rELISA方法和商品化试剂盒,对采自新疆部分山区牦牛血清样品分别进行了新孢子虫和弓形虫抗体检测。rELISA检测结果显示,新孢子虫阳性率为5.4%(16/192),弓形虫阳性率为1.7%(5/192),与IDEXX公司新孢子虫试剂盒和北京永辉公司试剂盒符合率分别为98.9%、100%,未发现交叉感染的样品。表明建立的rELISA方法特异性好、重复性良好。
  • 细胞质膜蛋白质组学技术研究进展 免费阅读 收费下载
  • 质膜蛋白在细胞生命活动中执行着重要功能。高通量蛋白质组学技术结合生物信息学研究策略的迅速发展,为质膜蛋白的研究提供了新的手段和方法。本文从质膜蛋白的分离和富集、质膜蛋白复合物的分离、质膜蛋白的增溶及质膜蛋白质的生物信息学研究四方面对质膜蛋白质组学研究技术进行了综述。
  • 鸭坦布苏病毒研究进展 免费阅读 收费下载
  • 2010年以来中国大部分种鸭和蛋鸭养殖地区相继发生了以减料、产蛋下降和伴有一定死淘率为特征的传染病。该病发病急,传播快,死淘率高,给中国的养禽造成巨大的经济损失,仅2010年给中国的养鸭业造成的损失达50亿元。随着研究的深入,该病被确诊为是由一种新型病毒.鸭坦布苏病毒引起的传染病,本文围绕着该病的流行病学、临床症状、病理变化、病毒生物学特性、病毒检测方法及致病力等方面的研究进展进行综述,旨在为鸭坦布苏病的防控提供科学依据。
  • 关于庆祝《中国动物传染病学报》创刊二十周年学术征文及优秀论文评选活动的通知 免费阅读 收费下载
  • 《中国动物传染病学报》(原名《中国兽医寄生虫病》)双月刊是中华人民共和国农业部主管,中国农业科学院上海兽医研究所主办的中华人民共和国级学术类刊物。自1993年创刊,近二十年来,承蒙广大读者、作者的大力支持与厚爱及各届编委的悉心呵护和共同努力,本刊影响因子和引文频次均已位居全国畜牧兽医类期刊前列,先后荣获2002年首届《中国学术期刊(光盘版)检索与评价数据规范》执行优秀奖,2006全国畜牧兽医优秀期刊一等奖,2011年上海市期刊编校质量检查优秀奖等荣誉,为中国知网、万方数据库等国内各大数据库收录和中国学术期刊综合评价数据来源期刊。
  • [研究论文]
    M2e合成肽流感通用疫苗的研究(杨馥如 于海 马继红 周艳君 童光志)
    LT粘膜佐剂对鸡新城疫疫苗的免疫增强作用研究(唐思静[1,2] 哈卓[1] 赵艳敏[1] 马勋[3] 刘惠莉[1])
    H9N2亚型禽流感病毒灭活苗最小免疫剂量及抗体消长规律的初步研究(陈圆[1,2] 胡涛[1] 韩敏[2] 徐大伟[1] 申伟霞[1] 李雪松[1] 李国新[1] 滕巧泱[1] 李泽君[1])
    新城疫病毒Class I强毒株磷蛋白在细胞中的表达与定位(程靖华[1] 孙英杰[2] 陈鸿军[2] 仇旭升[2] 宋翠萍[2] 于圣青[2] 吴艳涛[1] 丁铲[2])
    蓝舌病病毒内蒙古分离株的特性研究(程建国[1] 刘俊[2] 解玉琴[2] 田建[3] 郝祯燕[2] 韩文芳[1])
    蓝舌病病毒VP7蛋白的B细胞表位预测(杜杰[1,2] 尹惠琼[2] 杨姝[2] 马玉媛[2] 韦平[1] 章金刚[2])
    上海地区犬细小病毒的分离及VP2基因序列分析(鞠厚斌 周锦萍 刘健 沈莉萍 杨德全 刘佩红)
    猪繁殖与呼吸综合征病毒直接免疫荧光检测方法的建立(米立娟[1] 吕宗吉[2] 马春全[2] 顾万军[2] 张守峰[1] 刘晔[1] 扈荣良[1])
    重组禽流感病毒(H5N2)的拯救及其生物学特性分析(杨禹[1] 邵卫星[2] 徐天刚[2] 王志亮[2] 乔薪瑗[1] 唐丽杰[1] 葛俊伟[1] 李一经[1])
    志贺氏菌样毒素Stx2e缺失突变株的构建及部分生物学特性的分析(张志强[1] 姜露[1] 李永慧[2] 段强德[1] 朱国强[1])
    准噶尔盆地硬蜱区系考察与名录记述(刘继荣[1] 米来[1] 王平福[2] 张艳艳[1] 薄新文[3])
    江西省2008~2012年家畜血吸虫病疫情回顾及实现2015年防控目标的风险分析(董长华 喻华 贺亮 谢巧 李建喜 宣亮)
    [简报]
    用重组抗原与商品化试剂盒对比检测牦牛的新孢子虫与弓形虫感染(闫双 陈千林 郭庆勇 王真 张玉婷 巴音查汗)
    [综述]
    细胞质膜蛋白质组学技术研究进展(高艳 吴永平 周继勇)
    鸭坦布苏病毒研究进展(刘志刚[1,2] 孙青松[3] 姚蓉[4] 刘冰心[2] 晁行周[2] 邹忠[2] 刘立峰[2] 吴彦[1] 郑爱芳[1] 赵苏红[2] 金梅林[2])

    关于庆祝《中国动物传染病学报》创刊二十周年学术征文及优秀论文评选活动的通知
    《中国动物传染病学报》封面
      2013年
    • 01
    • 03

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