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噻庚啶和山莨菪碱拮抗TNFα诱导的内皮细胞[Ca^2+]i增高


□ 王立赞 张庆柱 等

摘 要:

目的:研究噻庚啶(Cyp)和山莨菪碱(Ani)对肿瘤坏死因子(TNFα)诱导单个内皮细胞内Ca^2+浓度([Ca^2+]i)变化的影响,以探TNFα介导休克和Cyp,Ani的抗休克的机制。方法:人脐静脉内皮细胞株(ECV304)接种于35mm含2mL DMEM培养基的组织培养盘中培养。Fluo-3/AM负载细胞,激光扫描共聚焦显微技术(LSCM)测定单个内皮细胞[Ca^2+]i。结果:TNFα使单个内皮细胞[Ca^2+]i呈剂量依赖性升高,在60s内达到峰值,然后下降并保护在基础水平之上。共聚焦扫描图像显示细胞核区[Ca^2+]i升高比胞浆区明显,下降比胞浆区慢。Cyp(3×10^-5mol/L或6×10^-5mol/L)、Ani(2×10^-5mol/L或4×10^-5mol/L)均能显著抑制由TNFα(1.2×10^-9mol/L)诱导的单个内皮细胞[Ca^2+]i升高。结论:TNFα诱导内皮细胞[Ca^2+]i升高可能是TNFα介导休克的重要机制;Cyp和Ani抑制TNFα诱导的[Ca^2+]i升高可能是其抗休克作用的机制之一。

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