设为首页 | 加入收藏
文献检索:

银杏叶提取物对糖尿病大鼠心肌内皮素和一氧化氮水平的影响


□ 毛宇飞 陈国荣 李旭升 毛孙忠 陈筱菲 李安乐

摘 要:

内皮素(ET)和一氧化氮(NO)与糖尿病慢性并发症的发生、发展密切相关。我们以往的研究表明银杏叶提取物(extract of Ginsko biloba,EGb)可通过抗脂质过氧化作用和降低NO水平而对糖尿病心肌产生保护作用。为进一步探讨其作用机制,本文观察了EGb对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血浆、心肌组织NO和ET水平的影响。

作者单位:金华职业技术学院医学院基础部病理教研室,浙江 金华 321017

【关键词】  糖尿病;银杏叶提取物;心肌;内皮素;一氧化氮

  内皮素(et)和一氧化氮(no)与糖尿病慢性并发症的发生、发展密切相关。我们以往的研究表明银杏叶提取物(extract of gingko biloba,egb)可通过抗脂质过氧化作用和降低no水平而对糖尿病心肌产生保护作用〔1〕。为进一步探讨其作用机制,本文观察了egb对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠血浆、心肌组织no和et水平的影响。

  1  材料与方法

  1.1  动物分组及处理 

  雄性sd大鼠30只(温州医学院实验动物中心提供),体重(180~220)g,随机分成对照组、糖尿病组、egb治疗组,每组10只。后2组大鼠在禁食12 h后按50 mg/kg腹腔注射链脲佐菌素(sigma公司产品,溶于0.1 mmol/l枸椽酸缓冲液内,ph4.0),注射后72 h测血糖≥13.8 mmol/l为模型成功。对照组腹腔注射等容积枸椽酸缓冲液。此后,egb治疗组按8 mg·kg-1·d-1剂量腹腔注射egb(北京双鹤天然药物有限公司,批号319163.0405),对照组及糖尿病组腹腔注射等容积生理盐水,每天1次,连续5 w。

  1.2  血清、血浆的制备 

  上述3组大鼠,分别股动脉取血2 ml,肝素抗凝,4℃,3 000 r/min离心10 min,分离血浆,-30℃冰箱保存,待测et和no。取血3 ml,室温凝固约60 min,3 000 r/min离心20 min,分离血清,置于-30℃低温冰箱冷冻保存,待测血糖、胰岛素。

  1.3  心肌组织匀浆的制备 

  取心肌组织用4℃预冷生理盐水洗净血液,滤纸吸干水分后称重,每克心肌组织加10ml生理盐水,置匀浆机上10 000 r/min×10 s×3次,制备10%匀浆,4 000 r/min离心10 min,取上清液。

  1.4  有关生化指标检测

  以葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖(glu)浓度、放射免疫法测定胰岛素(ins)和et含量。试剂盒从中国原子能研究所购置。no含量用硝酸还原酶法测定no-2/no-3含量来代表。一氧化氮合酶(nos)及诱导型一氧化氮合酶(inos)与结构型一氧化氮合酶(cnos)的活性用化学比色法测定。试剂盒购自南京建成生物工程研究所。以考马斯亮蓝法测定蛋白含量。

  1.5  统计学处理 

  数值以x±s表示,用spss10.0统计软件进行统计分析,多组比较用单因素方差分析;两组比较用t检验。

  2  结  果

  2.1  血液glu、ins、et、no变化
 
  与对照组相比,糖尿病组大鼠血糖值显著升高(p<0.01),血清胰岛素明显下降(p<0.05)。egb治疗组与糖尿病组大鼠相比血糖显著降低(p<0.05),血清胰岛素水平升高(p<0.05)。egb治疗组大鼠血浆内et水平均低于对照组(p<0.05),而对照组、egb治疗组与糖尿病组相比差异均无显著性(p>0.05)。糖尿病组大鼠血浆no水平显著高于对照组(p<0.01),而egb治疗组大鼠血浆no水平与糖尿病组相比有明显降低(p<0.05)。见表1。表1  各组血液glu、ins、et和no水平变化(略)

  2.2  心肌组织et、no指标变化 

  糖尿病组大鼠心肌组织内et水平明显高于对照组(p<0.05),egb治疗组et水平低于糖尿病组,但p>0.05。糖尿病组大鼠心肌组织内no水平和nos活性均高于对照组(p<0.01或p<0.05),其中inos 活性明显高于对照组(p<0.05),cnos活性则升高不明显(p>0.05)。与糖尿病组比较,egb治疗组no水平、nos活性和inos活性明显降低(p<0.01 和p<0.05);cnos活性亦见降低,但不明显(p>0.05)。见表2。表2  各组心肌组织生化指标变化(略)

  3  讨  论

    本研究显示,egb可升高血清ins含量,降低糖尿病大鼠的血糖。vasseur等〔2〕电生理研究发现,egb对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的胰岛β细胞具有保护作用,本研究也支持这一观点,提示egb可能对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠胰岛β细胞有一定的修复作用,使胰岛素分泌增多从而改善了糖代谢。

    no和et是由内皮细胞分泌的一对相互拮抗的血管活性物质,共同参与血管张力的调节,正常生理条件下,no 和et 存在着反馈性调节从而保持相对平衡。由于高血糖时存在血管内皮细胞损伤,导致内皮功能障碍,内皮细胞合成和(或)释放no、et 异常〔3〕。现已明确,源于cnos的no主要调节多种生理功能,而源于inos的no在正常生理情况下极少表达,当存在诱导因素而被激活时,常表现为no的持续大量生成,过量的no扩散到细胞后造成细胞损伤而成为一种细胞毒分子〔4〕。本研究显示糖尿病大鼠血浆、心肌组织no水平升高,并主要为inos合成。高浓度no对细胞有毒性损伤作用,还可以破坏细胞dna的结构和抑制dna复制有关的关键酶的活性,干扰细胞正常生理活动。

    本实验发现造模5 w的糖尿病大鼠血浆et水平与正常对照组相比并无显著性差异,而心肌组织et水平下降(p<0.05)。kakizawa等〔5〕认为,缺氧、血管内皮损伤、多种细胞因子、凝血酶、高胰岛素血症、高甘油三酯血症等因素均可促进et合成及释放增多,糖尿病患者,尤其是合并慢性血管并发症者几乎均存在上述诸因素。但是本研究中,关于糖尿病大鼠et水平的改变报道不一。takahashi〔6〕在研究中观察到,用链脲佐菌素诱导的 wistar 大鼠糖尿病模型4 d后,肺组织et 显著低于对照组,肾组织et 增高,但没有显著差别,而血浆et未能测到,作者估计可能是高血糖抑制了et 的分泌。李英等〔7〕研究链脲佐菌素诱发的糖尿病大鼠时发现,第1周时大鼠血浆et值无明显差异,第2、第4周时,糖尿病组显著高于正常对照组。其机制尚不清楚,可能由于循环et水平受糖尿病类型、是否存在高胰岛素血症、病程长短和血管并发症严重程度等多种因素的影响。本研究同时发现egb治疗组的血浆et水平高于糖尿病组,而心肌et 水平与糖尿病组比较无差异,可见单从et来研究其对心肌的作用,存在相对局限性。

    本实验中,糖尿病模型大鼠心肌et与inos异常,说明在糖尿病早期,心肌也出现了血管内皮功能异常,并可能成为日后糖尿病心肌病发生的潜在危害。egb有清除氧自由基、抑制inos的活性及其mrna的表达从而抑制no的产生等作用〔8〕。本研究证实egb能降低血浆no水平,抑制心肌组织中inos活性,降低no产生,从而保护糖尿病对心肌组织所造成的损害。

【参考文献】 ......(未完,请点击下方“在线阅读”)

特别说明:本文献摘要信息,由维普资讯网提供,本站只提供索引,不对该文献的全文内容负责,不提供免费的全文下载服务。

关于我们 | 网站声明 | 合作伙伴 | 联系方式 | IP查询
金月芽期刊网 2021 触屏版 繁體版 电脑版 京ICP备13008804号-2