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文献检索:
  • pcDNA3.1表达载体转染对细胞生长的影响 下载全文
  • 为了探讨真核表达载体转染对细胞生长的影响,通过脂质体介导将pcDNA3.1(+)表达载体DNA转染鼻咽癌细胞系HNE1,G418筛选后,Southern杂交鉴定稳定表达细胞株,以HNE1细胞为对照,观察pcDNA3.1(+)/HNE1克隆细胞的生物学特性;结果显示,在pcDNA3.1(+)/HNE1阳性克隆中,一株细胞克隆培养过程中发生自溶性死亡,一株细胞生长明显受到抑制,另一株细胞生长无明显影响,揭示在宿主细胞中pcDNA3.1(+)DNA与宿主基因组DNA发生了随机整合,从而表现不同的细胞生物学改变。
  • 重组逆转录病毒的制备、浓缩及保存研究 下载全文
  • 选择含有新霉素磷酸转移酶Ⅱ(Neo^R)的重组逆转录病毒载体,用包装细胞进行包装,得到了含有重组逆转录病毒粒子的病毒上清,该病毒上清经差速离心法浓缩后,-80℃无任何添加物的情况下保存3个月,体外感染靶细胞NIH3T3以测定其滴度,冻存前后的浓缩病毒上清的感染滴度无明显降低,经过冻存的浓缩病毒上清的感染滴度仍可达到10^6cfu/ml,具有理想的感染靶细胞的能力。
  • 一种新的质粒克隆载体的稳定性和拷贝数的测定 下载全文
  • 为了研究CoIE2质粒的复制及其调控机理,构建了一种新的质粒克隆载体pBluescript22+,并且测定了它在宿主中的稳定性和拷贝数。结果表明,在宿主菌繁殖40代前,它在宿主菌中的拷贝数达到最高,之后便很快下降,虽然在宿主菌繁殖到180代时它仍未从所有宿主菌中完全丢失;而且,加入氯霉素可以提高它在宿主中的拷贝数。这提示,为了获得更多的质粒,应在宿主菌培养40代前并在向培养液中加入氯霉素继续培养2h内收获质粒。
  • 南丰蜜桔基因组DNA RAPD—PCR最佳反应体系的建立 下载全文
  • 以南丰蜜桔树叶为基因组DNA提取材料,建立了其RAPD-PCR分析的最佳反应体系:模板DNA1.5ng/μl,随机引物0.6μM·L^-1,dNTPs各0.1mM·L^-1,MgCl2 2.0mM·L^-1,BSA250ng/μl,Tris-HCl10mM·L^-1,pH9.0,KCl50mM·L^-1,Nonidet P40 0.1%,Taq酶0.5u,总反应体积20μl。
  • 茉莉酸甲酯与真菌诱导物、水杨酸组合对红豆杉细胞中紫杉醇含量的影响 下载全文
  • 比较了茉莉酸甲酯与真菌诱导物、水杨酸组合对红豆杉细胞几个抗病相关指标(POD、CAT活力、H2O2含量)及紫杉醇含量的影响,3种信号分子的组合对POD、CAT、H2O2及紫杉醇含量的影响是不一致的,MJ单独添加,MJ与SA联合作用以及MJ与F5联合作用都可使POD活力增加,且12h后H2O2含量均升高,约在48h达到高峰,为对照的2倍左右,但72h后,MJ单独添加和MJ与SA联合作用组中H2O2含量变化不大,F5与MJ联合作用则使H2O2含量持续比对照高。MJ单独添加使CAT酶活在144h后才较对照低,F5、SA的加入都可使CAT酶活下降,SA的作用更显著。说明三者的诱导途径并不完全一样,以SA和MJ联合添加对紫杉醇合成的促进作用最大,含量达到细胞干重的0.04%。
  • 酵母天然酶系生物合成谷胱甘肽 下载全文
  • 利用酵母细胞本身具有的谷胱甘肽(GSH)合成酶和ATP合成GSH。在含有半胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸的反应液中,加入已充分洗涤的酵母细胞,37℃孵育8h后,酵母体内可积累15mg/g(dry cell weight)以上的GSH,而对照组仅5mg/g(dry cell weight)。同时也研究了树脂法和铜盐法相结合分离纯化GSH。实验结果初步表明,利用酵母细胞中的天然谷胱甘肽合成酶和ATP,可使前体物质快速转化成GSH,是可行的。
  • 苏云金杆菌SD—5菌株发酵生理学研究及生产 下载全文
  • 通过苏云金杆菌SD-5菌株对混合氨基酸的抗性及在3吨发酵罐中发酵生理学的研究,显示SD-5菌株具有优良的发酵性能。用正交试验设计方法筛选出SD-5菌株发酵培养基配方,菌数可达110-130亿/ml,芽孢率达95%以上。
  • 培养条件对毛栓菌菌丝体生长和多酚氧化酶分泌的影响 下载全文
  • 研究了碳源、氮源、培养温度、初始pH值、接种量、通气量等条件对毛栓菌(Trametes trogii)菌丝体生长及多酚氧化酶分泌的影响;结果表明,不同碳源和氮源对菌丝体生长影响较大,对多酚氧化酶分沁也有较大影响,麦草粉和麸皮为碳源,玉米粉、硫酸铵为氮源有利于多酚氧化酶的分泌;初始pH值对酶活影响较小,培养温度、通气量等对酶活影响较大。
  • 快速筛选产β—葡聚糖酶曲霉及抗阻遏育种 下载全文
  • 采用改良琼脂块鉴定平板法进行产β-葡聚糖酶曲霉的快速筛选。其中温度、初始pH、平板厚度及去氧胆酸钠的浓度都影响曲霉产β-葡聚糖酶分解底物所形成水解圈大小及透明度。同时研究发现,高浓度的葡萄糖对曲霉合成β-葡聚糖酶具有阻遏作用,通过改变分离培养基的葡萄糖浓度,结合诱变育种可以快速筛选到抗葡萄糖阻遏的高产β-葡聚糖酶的菌株。
  • 生物絮凝剂产生菌的分离与鉴定 下载全文
  • 通过多点采样,多次反复筛选,从旱田土壤中筛选出1株具有高絮凝活性的细菌。细菌生长过程均可产生具有絮凝作用的胞外分泌物,经实验对内蒙天然碱碱泥具有高絮凝作用。通过对菌株的个体形态特征、菌落形态特征、运动性进行观察;同时对其接触酶、氧化酶等生理生化指标进行了测试,最终确定为粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)。
  • 内切型菊粉酶生产菌株的筛选及诱变选育 下载全文
  • 采用透明圈法筛选得到了产菊粉酶的多株菌株,并得到了1株产内切型菊粉酶较高的隐球酵母属(Cryptococcus)菌株L1,以L1作为出发菌株经Co^60诱变后,得到1株产内切型菊粉酶最好菌株C10,其诱变后低聚果糖得率比诱变前提高了52.6%,酶活力提高了51.9%。
  • 碳源对产紫青霉产菊粉酶的影响 下载全文
  • 试验不同碳源对产紫青霉菊粉酶生产情况的影响。结果表明,果糖、菊糖、菊芋浸汁作为碳源是菊粉酶生产较理想的诱导因子,但过量的果糖会产生阻遏。经菊糖作为主要碳源和唯一碳源筛选的菌株产酶能力可提高6-7倍。同时在发酵前期加入易利用的碳源培养菌体,后期利用菊糖诱导酶的产生,可使酶产量提高2倍。
  • pH、温度和癸酸对厌氧颗粒污泥产甲烷毒性关系的研究 下载全文
  • 在间歇培养中研究了癸酸对UASB反应器厌氧颗粒污泥的产甲烷毒性,并考察了pH、温度和癸酸抑制的关系。结果表明,癸酸对厌氧颗粒污泥产甲烷活性有强烈的抑制,对厌氧颗粒污泥比产甲烷活性产生50%抑制的浓度为1.9mmol/L。pH影响癸酸在液相中的存在形式,pH越低,游离癸酸比例越大,对厌氧颗粒污泥的抑制越严重。高温条件下癸酸使厌氧颗粒污泥的结构变得松散,对厌氧颗粒污泥产甲烷毒性较中温和低温条件下严重。
  • 红酵母RY—981类胡萝卜素发酵助剂的研究 下载全文
  • 通过探索几种促进剂和前体对红酵母RY-981类胡萝卜素发酵的影响,从中选出了番茄汁和花生油2种对红酵母生长及其类胡萝卜素合成具有显著促进作用的发酵助剂,并确定了适宜的用量。应用试验和发酵过程动态分析表明,这2种发酵助剂增产效果明显(当同时添加番茄汁2.6mL/L和花生油1ml/L时,菌体量、类胡萝卜素含量和产量可分别比对照组提高53.13%、20.29%和84.07%),且对发酵过程菌体生长及生理代谢规律无不良影响。
  • 橄榄星孢小单孢菌M—41孢子的耐热性和热活化效应的初步研究 下载全文
  • 温度在50℃-80℃时,于20min内,对由新鲜斜面制备的橄榄星孢小单孢菌M-41的孢子悬浮液做耐热试验,结果表明,温度低于60℃时,对该菌株的孢子生长培养无影响,如超过此温度,则存活孢子数量减少。与此同时,研究了孢子的热处理效应,发现经4℃贮存1个月后的菌株斜面的孢子,在平板培养中可形成的菌落数仅为原孢子总数的1/10,此时大部分斜面孢子处于休眠状态,但当这孢子在50℃经15min和60℃经5min加热处理后,在平板上可形成的菌落数则分别增加6倍、4倍,表明这些处于活的非可培养状态的休眠孢子,可应用热活化处理去激活孢子发芽生长。
  • 一种改进的甲醛—琼脂糖凝胶电泳 下载全文
  • DMF提取微藻叶绿素a方法的改进 下载全文
  • HPLC—ELSD法检测红豆杉细胞悬浮培养液中糖组分 下载全文
  • 建立了红豆杉细胞悬浮培养液中蔗糖、葡萄糖、果糖的HPLC的检测方法。样品经提取后,在Sugar PAK1型糖柱上以水为流动相,以Sedex55蒸发光散射检测器进行检测。蔗糖、葡萄糖、果糖的线性范围为10μg/ml-3000μg/ml。回收率分别为95.8%、94.4%、94.2%。
  • 烤烟品种RAPD产物Synergel与琼脂糖凝胶电泳比较 下载全文
  • 比较了12个烤烟品种RAPD产物Synergel与琼脂糖凝胶电泳,结果表明:Synergel电泳有较强的多态性,易于区别不同品种之间的差异,克服了琼脂糖凝胶电泳多态性差的缺点,可减轻繁重的引物筛选工作。
  • TLC—紫外分光光度法定量检测紫杉醇 下载全文
  • 采用TLC法进行了红豆杉培养细胞中紫杉醇的分离、纯化。展层剂为甲醇-氯仿(1:12)时,分离出与紫杉醇标准品Rf值相同的色斑。同时,结合紫外分光光度法进行紫杉醇的定量检测,其平均回收率为HPLC法的91.82%。
  • 盐藻固定化培养的初步研究 下载全文
  • 以海藻酸钙为载体,考察了CaCl2浓度、胶球大小、密度及初始细胞密度等条件对盐藻固定化培养的影响,确定了该藻生长的优化条件:当藻 细胞密度大于10^6cell/ml,CaCl2浓度为0.15ml/L,注射用针头为6^#,在50ml培养液中加入150个微藻胶球时,藻细胞的生长量最大。
  • 橡胶止血带表面细菌调查与医院感染关系的探讨 下载全文
  • pcDNA3.1表达载体转染对细胞生长的影响(余鹰 周鸣 等)
    重组逆转录病毒的制备、浓缩及保存研究(王凤阳 扈荣良 等)
    一种新的质粒克隆载体的稳定性和拷贝数的测定(陈军 张高川 等)
    南丰蜜桔基因组DNA RAPD—PCR最佳反应体系的建立(郑敏 罗玉萍 等)
    茉莉酸甲酯与真菌诱导物、水杨酸组合对红豆杉细胞中紫杉醇含量的影响(苏湘鄂 梅兴国 等)
    酵母天然酶系生物合成谷胱甘肽(王正刚 蔡正森 等)
    苏云金杆菌SD—5菌株发酵生理学研究及生产(李世国 李跃 等)
    培养条件对毛栓菌菌丝体生长和多酚氧化酶分泌的影响(刘兴坦 王宜磊)
    快速筛选产β—葡聚糖酶曲霉及抗阻遏育种(郑毅 段慧明 等)
    生物絮凝剂产生菌的分离与鉴定(张通 卢文玉 等)
    内切型菊粉酶生产菌株的筛选及诱变选育(王艳 金征宇 等)
    碳源对产紫青霉产菊粉酶的影响(张介驰 于德水 等)
    pH、温度和癸酸对厌氧颗粒污泥产甲烷毒性关系的研究(周洪波 周琪 等)
    红酵母RY—981类胡萝卜素发酵助剂的研究(王岁楼 张鑫 等)
    橄榄星孢小单孢菌M—41孢子的耐热性和热活化效应的初步研究(倪雍富 朱坚屏)
    一种改进的甲醛—琼脂糖凝胶电泳(张领兵 魏松红 等)
    DMF提取微藻叶绿素a方法的改进(潘欣 李建宏 等)
    HPLC—ELSD法检测红豆杉细胞悬浮培养液中糖组分(梅兴国 柯铁 等)
    烤烟品种RAPD产物Synergel与琼脂糖凝胶电泳比较(汪安云 李天飞 等)
    TLC—紫外分光光度法定量检测紫杉醇(庄晓蕾 于树宏 等)
    盐藻固定化培养的初步研究(李英敏 杨海波 等)
    橡胶止血带表面细菌调查与医院感染关系的探讨(邢忠)
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