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文献检索:
  • 大腹园蛛鞭毛样丝蛋白cDNA克隆 下载全文
  • 应用RT-PCR技术,从大腹圆蛛(Araneus ventricosus)壶腹腺中扩增出鞭毛样丝蛋白基因(flagelldid-form silk protein gene),经1.5%琼脂糖凝胶电泳分离,WizardPCR Preps DNA Purification System回收后,将其克隆在pGEM-T载体中,经限制性核酸内切酶鉴定和核苷酸序列分析证实,构建的重组擀粒pSF1中含有蜂蛛鞭毛样丝蛋白基因,且含有3个重复序列。
  • Bacillus licheniformis6816碱性蛋白酶基因在E.coli中的克隆和表达 下载全文
  • 用PCR方法从地衣芽孢杆菌6816中扩增了碱性蛋白酶基因(apr),扩增的1.14kb的DNA片段插入到大肠杆菌载体pET-20b中,构建成重组分泌型表达载体pAPR1。pAPR1中碱性蛋白酶基因在大肠杆菌宿主JM109(DE3)中得到表达,SDS-PAGE分析显示融合表达产物的分子量为30kD,同核酸序列测定所推导的值相符,表达产物占细胞总蛋白的7.5%,重组菌的酶活比出发菌株提高了3.3倍,研究发现,重组的碱性蛋白酶在进入大肠杆菌周质空间时存在前肽自动脱落的现象。
  • 含霍乱肠毒素B亚单位基因植物表达载体的构建 下载全文
  • 构建含CTB基因的植物双元表达载体,采用高保真PCR方法调出CTB基因,经测序证实核酸序列正确后,再亚克隆到含植物表达调控原件的载体上,采用冻融法和电击法,将含CTB的植物表达载体转入根癌农杆菌中,通过一系列分子克隆的方法获得含CTB基因的植物双元表达载体pBI-CTB和pBI-CTBK,并经酶切证实。
  • 叶绿体超氧化物歧化酶(ChlSOD)基因的构建及序列分析 下载全文
  • 构建叶绿体超氧化物歧化酶基因(ChlSOD),采用RT-PCR方法分离豌豆RUBP羧化酶小亚基导肽基因(TP),定向克隆至pUC19测序,定向克隆烟草MnSOD成熟蛋白基因(SODm)至pUC19;采用平粘端连接法将二者在pUC19中构成嵌合基因ChlSOD,并对此基因进行序列分析,序列分析表明:TPcDNATP,12bp的Linker及615bp SODm。TP与ChlSOD基因的序列分析与国外报道序列完全吻合。
  • ^60Co—γ射线对唐菖蒲染色体的影响 下载全文
  • 4组各16枚唐菖蒲种球分别经4Kγ、8kγ和15kγ剂量^60Co-γ射线照射后培养根尖,组织学制片,盐酸地衣红染色,光学显微镜观察。结果表明,与对照组相比,经过照射的样本细胞内具有染色体桥、核空泡化、落后染色体等染色体畸变现象,其中4kγ-8kγ剂量的^60Co-γ射线是较为适宜的唐菖蒲育种的照射剂量。
  • 人腔前卵泡分离及培养 下载全文
  • 采用机械吹打、胶原酶消化、镜下显微解剖及胶原酶消化加镜下显微解剖4种卵泡提取方式并相互对比,将分离得到的腔前卵泡在含FSH0.5IU/mL、1.0IU/mL和2.0IU/mL的培养液中培养,检测其E2分泌量。与机械吹打、胶原酶消化相比,胶原酶消化加镜下显微解剖法不仅提取卵泡多(P<0.01),而且可以得到原始、初级=次级各级卵泡,但操作时间较长(P<0.01)。得到的腔前卵泡在FSH为0.5IU/mL、1.0IU/mL和2.d01IU/mL的培养液中培养,所分泌的E2分别为10.86pg±4.11pg、31.55pg±9.34pg和43.82pg±18.76pg,较之对照组的4.99pg±2.09pg有显著性差异(P<0.01),E2的分泌量与FSH浓度呈剂量依赖性关系。FSH有促进腔前卵泡分泌E2的作用。
  • 轮枝菌诱导棉花细胞的氧化迸发 下载全文
  • 大丽轮枝菌(Verticilium dahliae kleb.)是引起棉花黄萎病的病原真菌。使用从大丽轮枝菌V44(高毒)和V64(低毒)的菌丝体制备的各市县导物(I44和I64)作用悬浮培养的豫棉6号(感性)和豫棉8号(耐性)细胞系,用过氧化物酶法测定诱导后30min内的反应性氧变化,发现仅有不亲和性较高的体系,即弱毒力的大丽轮枝菌(V64)和耐性的豫棉8号所组成的体系(I64-Y8)表现最高的反应性氧迸发,3min-6min时增加61.8%。使用显著低于杀菌浓度的剂量的水杨酸(SA)和H2O2作用上述大丽轮枝菌,发现水杨酸和H2O2都能影响微生物,经1mmol/L水杨酸和0.2mmol/LH2O2作用后的微生物,其所产生的诱导物对植物细胞反应性氧的诱导作用要高于未被作用的微生物的诱导物,两种化学性质的影响的共同点是使反应性氧迸发的峰值时间提前,峰值增加,水杨酸提前12min,H2O2的影响还突出表现在使反应性氧迸发的曲线锐化,即峰使时间范围的平均每分钟增加率表现显著增加,9min-12min时达到109%。
  • 酶降解烟叶中细胞壁物质 下载全文
  • 烟叶中以细胞壁物质存在的碳水化合物在燃吸时产生不良影响,在一定条件下向烟叶中施加一定量的纤维素酶和果胶酶,使部分细胞壁物质降解为水溶性糖,烟质得到改善,纤维素酶和果胶酶最佳用量均为每克烟叶30u酶量(活力),最佳作用条件为;烟叶水分25%,作用温度50℃,作用时间4h,且在真空条件下可使细胞壁物质降解更有效,可降解烟叶中细胞壁物质10%左右,烟叶的评吸质量得到明显改善。
  • 固体发酵法制取植酸酶 下载全文
  • 对植酸酶产生菌进行了诱变育种,分离纯化;采用固体培养法生产植酸酶及对酶的热稳定性进行了研究,研究结果表明以麸皮为主要培养基成分,添加2%葡萄糖,1%(NH4)2SO4,0.02%MgCl2,40ml水,29℃恒温培养8d-10d后,其酶活可达5615u/g.ssc。用含CaCl22%的pH5.0的醋酸缓冲液抽提效果好,相对酶活达94%。经提取。粗酶粉活力可达80130u/g。温度升高70℃,处理1h,相对酶活为90%。
  • 产氨短杆菌与枯草杆菌发酵产肌苷比较试验 下载全文
  • 采用诱变得来的枯草杆菌GMI-741帮产氨短杆菌GMA-2892在1.2L自控发酵罐上进行肌苷发酵试验,产氨短杆菌GMA-2802在种子培养基中培养15h后,菌浓度达1.0×10^11个/mddl。而同样条件下,枯草杆菌GMI-741菌浓度只有9.50×10^9个/ml。在1.2L自控发酵罐上发酵时,GMA-2802发酵周期54h,产肌苷达20.40g/L,发酵液主要原材料成本为441.1元/吨;GMI-741发酵周期60h,产肌苷达19.52g/L,发酵液主要原材料成本为559.1元/吨。
  • 稀土元素对红豆杉细胞悬浮培养及紫杉醇合成的影响 下载全文
  • 研究了在250mL摇瓶中,不同浓度的硝酸镧、硫酸铈铵、硝酸亚铈3种稀土化合物对细胞生长及紫杉醇分泌和释放的影响。结果表明,在培养初期加入稀土元素。3种不同稀土化合物对细胞生长影响强弱不同,但趋势相似,均使细胞的延迟期缩短。1ppm的Ce^4+促进细胞生长的效果最明显。细胞干重第17d达到10.9g/L。在指数期加入稀土元素。10ppmCe^3+刺激细胞生长的效果最明显,细胞干重最高值达到11.5g/dL,比对照高1.5g/L,而10ppm的La^3+抑制细胞的生长。经稀土元素处理后,细胞胞内和胞外紫杉醇含量都有大幅度的提高,其中以10ppmCe^3+处理,胞外紫杉醇释放率最大,达37.7%。
  • 栖热菌属热稳定DNA聚合酶 下载全文
  • 一种新的分子武器—SAGE 下载全文
  • 阐述了SAGE(serial analysis of gene expression)的原理和操作方法,综述了SAGE目前在生物学硌方面的应用进展,并着重对SAGE在植物分子生态学中的应用前景提出了设想。
  • 耐草甘膦基因克隆和作物转化研究新进展 下载全文
  • 评述了耐草甘膦基因克隆和作物转化研究的新进展。生物耐草甘膦的机理主要在于1)过量表达EPSPS(磷酸烯醇式丙酮酰莽草酸合成酶)基因;2)EPSPS基因发生突变而对草甘膦的亲和力减弱。或3)解毒酶作用。现已从大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、矮牵牛、拟南芥、烟草、胡萝卜等中克隆了aroA等EPSPS基因并进行了分子生物学研究。作物转基因抗草甘膦育种主要通过三条途径;1)转入经过修饰的或突变的耐草甘膦EPSPS基因,2)转入过表达的EPSPS基因;3)导入草甘膦代谢酶基因。
  • 树突状细胞与抗肿瘤免疫 下载全文
  • 提高免疫系统对肿瘤的杀伤能力是肿瘤免疫学上目的,随着对免疫肿瘤抗原的了解以及对T细胞免疫反应和肿瘤逃逸机制的进一步认识。方面军一目的已取得了进展,体内含量稀少的抗原递呈细胞-树突状细胞(DC8)是这些机制的关键。体外从外周血祖细胞诱导扩增这些细胞为肿瘤治疗开辟了新纪元。DC8作为肿瘤疫苗,在B细胞淋巴瘤、黑色素瘤、前列腺癌等病人身上已有了一定的疗效。
  • EMSA法分析STAT5信号分子与周期蛋白cyclinB1的相互作用 下载全文
  • 利用蛋白凝胶电脉迁移率变动分析法(EMSA)分析STAT5信号分子与周期蛋白cyclinB1的相互作用。探针位于cyclinB1启动子区的-783到-754之间,该区域包含SATAT5与cyclinB1的结合序列TTN5AA。STAT5与cyclinB1共形成a、b和c三条蛋白滞后带,当用点突变的探针作用时,仅剩下滞后带a和滞后带c,因此滞后带b可能为STAT5与cyclinB1的特异性结合条带。
  • 双梯度超薄胶PAGE分离DNA及其银染与回收 下载全文
  • 双浓度梯度超薄胶PAGE分离DDRT-PCR扩增产物表明,在30cm长的凝胶板上能清晰分辨长度仅差1bp的DNA,清楚的显示出100多条分离谱带,并可直接从银染PAGE胶中回收DNA谱带。
  • 超临界CO2萃取真菌油脂及其脂肪酸组成分析 下载全文
  • 采用超临界CO2萃取雅致枝霉的油脂,从最小样品需要量、处理样品能力及油脂得率等方面将其与索氏提取法进行综合对比评价,并对两种方法提取的雅致枝霉油脂的脂肪酸组成进行气相色谱分析,索氏法的油脂得率最高,但耗时较长(>6h),样品需要量大(>2000mg),且提取的油脂中杂质较多;超临界CO2萃取法油脂得率较索氏法低,但提取的油脂中杂质较少,单位时间内样品处理能力强,是索氏法的6倍,且可处理微量样品(50mg),气相色谱分析结果表明两种方法提取的油脂,均含12种已知脂肪酸,且每种脂肪酸的含量相近,综合各项指标考虑,超临界CO2萃取法优于索氏法,是一种简便、有效的真菌油脂提取方法,适合油脂及多不饱和脂肪酸高产株菌筛选的实施应用需要。
  • 微波浸提法测定塔拉豆多糖的含量 下载全文
  • 用水浴浸提法和微波浸提法完成了54个塔拉豆样品中的塔拉豆多糖含量的测定实验,比较了这两种方法的分析结果、测定成本以及在可操作性等方面的异同,实验结果表明,水浴法与微波法所得到的测定结果是一致的,但微波法的成本才是水浴法的1/25左右,而工效却是它的3倍多,说明微波法浸提法是一种简便、快速、高效低耗的测定方法,值得推广应用。
  • 《生物技术》封面

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