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文献检索:
  • 转β—1,3—葡聚糖酶基因和几丁质酶基因棉花 下载全文
  • 为了提高棉花的抗枯、黄萎病的能力,用花粉管通道法,将烟草β-1,3-葡聚糖酶基因和菜豆几丁质酶基因导入棉花,获得了抗卡那霉素的转化植株。经PCR、PCR-Southern Blot检测,证明两种基因已插入到棉花基因组中。
  • 应用RD—PCR技术制备基因芯片靶基因片段 下载全文
  • 应用RD-PCR技术分离SH-SY5Y细胞的基因片段。从正常培养的SH-SY5Y细胞中提取总RNA,经oligo(dT)纤维素柱纯化分离出mRNA,然后以oligo(dT18)为锚定引物反转录生成单链cDNA,再以此为模板合成DNA的第二条链;将双链DNA经Sau3AI酶切之后,接上接头,经通用引物和选择性引物进行扩增;然后与载体pMD18-T相连,克隆鉴定、筛选、测序。所分离的cDNA片段经过扩增后用于制备基因芯片的靶基因,杂交检测的结果表明,此种方法所分离的基因片段可以用于基因芯片的靶基因片段,所制备的芯片将为进一步研究神经细胞基因表达提供了条件。
  • 红Ji木的3′端延长随机引物扩增DNA(3′—ERPAD)标记 下载全文
  • 为了对116个10-mer随机引物的RAPD分子标记进行深入了解,探讨分子标记与园艺性状的关系,筛出多态性明显、重复性好、亮度大、分子量也较大(1031bp以上)的10-mer随机引物,在其3‘端添加一任意碱基,对14个红木材料和2个来源不同的生态型木材料进行3‘-ERPAD标记分析。发现在S2和S35的延伸引物中能够得到最佳扩增结果的引物对是S2-G+S2-C和S35-A+S35-C,它们的扩增结果都含有与各自基本引物相同的差异扩增带,这些差异带分别是S21500、S21031和S353000、S35900、S35560。通过与园艺性状比较,发现S21500片段可能与控制叶色的基因有关。
  • 罗伯逊易位群体遗传结构的DNA指纹分析 下载全文
  • 用微卫星探针(GGAT)4得到了罗伯逊易位猪群体内共9个家猪品种的DNA指纹图。1-9品种依次为:13/17罗伯逊易位纯合子猪群体、13/17罗伯逊易位杂合子猪群体、13/17罗伯逊易位杂合子猪互交所得到的正常核型猪群体(杂交0号)、丹系长白猪群体、加系双肌臂杜洛克猪群体、加系双肌臀大约克猪群体、加系双肌臀长白猪群体、丹系长白猪与13/17易位杂合子猪产生的杂交后备猪群体(杂交1号)、杜洛克猪与13/17易位杂合子猪产生的杂交后备猪群体(杂交2号)。根据指纹带型计算了每个群体的相似系数(F)、平均等位基因频率(Q)、最底平均杂合率(H)和遗传距离指数(D)。9个品种的相似系数介于0.546-0.931,根据各品种之间的遗传距离指数作出矩阵图,并据此绘制出品种间亲缘关系树状聚类图。
  • 高梁抗蚜基因的RAPD分析 下载全文
  • 应用RAPD技术BSA法,对高梁抗蚜基因进行分析,筛选了500个随机引物,共扩增出1614条谱带,得到了10个具有稳定多态性标记的引物,分别为OPA-01、OPP-09、OPP-14、OPH-19、OPN-08、OPN-07、OPN-20、OPY-14、OPS-20、OPJ-06。
  • 人胃及其癌组织的RAPD的多态性分析 下载全文
  • 为了研究细胞癌变后DNA结构的改变,探讨这种改变和肿瘤发生、发展 的关系,用AP-PCR扩增胃癌及其癌旁和正常组织DNA。结果表明,引物P1(5′CGGCCCCGGT3′)对上述三种组织的扩增产物的电泳图谱表现出多态性;然而,引物P2(5′TTTGCCCGGT3′)对上述三种组织的扩增产物的电泳带型一样,没有表现出多态性。这说明,细胞癌变后DNA结构在引物PI顺序处发生了突变;这些突变可能和细胞的癌变有关。
  • 利用RAPD标记鉴定甜菜无融合生殖的同一性 下载全文
  • 目的:对具有无融合生殖特性的带有白花甜菜染色体的栽培甜菜单体附加系M14三代材料进行同一性鉴定。方法:通过RAPD随机扩增技术对M14三代材料的基因组DNA的扩增多态性进行分析。结果表明,M141998年、1999年、2000年三代材料的RAPD位点高度一致,遗传相似度S=1,遗传距离D=0,从而表明M14三代个体完全一样。结论:初步确定M14材料无融合生殖基因在其后代中是稳定传递的。
  • 鼠透明带3(ZP3)融合蛋白表达以及抗血清制备 下载全文
  • 鼠透明带3(mZP3)作为精子的初级受体,是鼠透明带中的一种主要糖蛋白,抗鼠透明带3抗体能够阻断精卵的结合,达到不育的效果,因此mZP3是免疫避孕研究的重要候选抗原。从小鼠卵巢中提取总RNA,分离mRNA,反转录获得cDNA,将cDNA连接到测序载体pUCm-T质粒上,通过序列测定和分析得到正确的mZP3 cDNA。经内切酶EcoR I和XhoI处理,将mZP3 cDNA克隆至融合蛋白表达载体pGEX-4T-1中,在T4 DNA连接酶的作用下构建融合表达载体pGEX-mZP3,转化大肠杆菌BL-21菌株,利用IPTG诱导后获得可溶性的蛋白质产物,经过SDS-PAGE鉴定,表达的融合蛋白GST-mZP3分子质量约为72kD左右,纯化的融合蛋白免疫兔子,获得效价为1:1000的抗血清,Western blot检测抗血清具有针对mZP3融合蛋白的专一性,为进一步开展mZP3的免疫功能检测的研究奠定 了基础。
  • 地衣芽孢杆菌感受态细胞的形成及高效电转化 下载全文
  • 芽孢杆菌在营养缺乏的饥饿状态下,细胞易产生感受态因子,处于生长芽孢时期的芽孢杆菌更容易产生感受态。基于此原则利用芽孢杆菌极限营养培养基通过体外处理诱导使地衣芽孢杆菌产生感受态性能,同时调整参数,建立了感受态细胞对质粒pAPR的高效电转化方法。当质粒DNA浓度为1.5μg/ml、转化时电压为1750V的时候,可以得到261个转化子,经鉴定均为阳性克隆子。而常规电转化的最高仅为20个转化子。为以芽孢杆菌为宿主进行高效电转化提供了模型,也为建立适合工业应用的分泌型表达载体的构建打下了一定基础。
  • 小麦—黑麦染色体易位系的细胞学鉴定 下载全文
  • 用C-带技术分析了普通小麦“中国春”、黑麦“胜利”及小黑麦与普通小麦经辐射处理的后代中产生的并经多代纯化的5个带有黑麦某些性状的普通小麦品系的根尖染色体,结果表明:品系98-5-1为1A/1R纯合易位系,具有抗锈病、抗白粉病等基因,可作为诱导小片段易位的资源。作者提出在小麦-黑麦易位系鉴定中应用更高分辩率的G-带技术识别黑麦染色体片段或小片段易位。
  • 阿维菌素高产菌株的选育I 下载全文
  • 目的:全面了解阿维菌产生菌S.avermitilis的生长特性并获得阿维菌素的高产菌株。方法:以S.avermitilis Y20为出发菌株,考察该菌株的菌落特征和发酵特性,分别利用紫外线(UV)、亚硝酸(HNO3)及亚硝基胍(NTG)并结合L-异亮氨酸(L-Ⅱe)诱导等手段对出发菌株Y20进行诱变处理。结果:获得高产阿维菌素变异株H336,发酵单位达到852μg/ml。结论:与出发菌株相比,突变株阿维菌素的产量稳定,发酵单位提高了10倍以上。
  • 内切β—1,3—葡聚糖酶产生菌的分离筛选与鉴定 下载全文
  • 以茯苓多糖为碳源,以蓝色茯苓多糖为内切β-1,3-葡聚糖酶活力测定底物,从不同样品中筛选到4株产内切β-1,3-葡聚糖酶活力较高的菌株,经TLC分析酶解产物表明其中三株的酶解产物主要为二糖、三糖、四糖,另外一株的酶解产物主要为二糖。对其中一株内切酶活力最高(3.73U2/ml)的菌株经鉴定为生孢噬胞菌(Sporocytophaga)。
  • 竹红菌素产生菌的筛选与鉴定 下载全文
  • 通过多点采集、反复筛选,从野生竹黄子实体中筛选出1株产北醌类光敏色素的真菌。通过对菌株的个体形态特征、菌落形态特征进行观察,结合其显微结构特征最终鉴定为竹黄菌(Shiraia bambuscola)。
  • 几种提取RNA的方法 下载全文
  • 以肝脏组织和NDV感染的鸡胚尿囊液为例,简单介绍了几种提取细胞或组织液中总RNA及mRNA的方法-SOD-蛋白酶K法、异硫氰酸胍法、loigo(dT)纤维素亲和层析法。SDS-蛋白酶K法提取RNA经济可靠,但纯度稍低;异硫氰酸胍法适于提取细胞中的总RNA,纯度较高;利用ligo(dT)能与mRNA poly(A^+)尾结合的特性提取组织细胞中的mRNA.
  • 利用微波炉快速筛选大肠杆菌阳性克隆 下载全文
  • 利用微波炉制备的质粒模板可以非常可靠地进行PCR扩增,由此可以快速地达到筛选大肠杆菌阳性克隆的目的。
  • 猪传染性胃肠炎病毒重组核衣壳(N)蛋白的纯化 下载全文
  • 通过对大肠杆菌表达,经载体pPROEXHTb克隆的TGEV重组N蛋白纯化方法中一系列条件的探索,最终得到了纯化融合蛋白的最佳优化方法。即在裂解液中含有1mM PMSF的条件下,分别经过2倍体积的bufferA和bufferB洗脱后,再收集pH5.9,含有80mM咪唑的1倍体积bufferC洗脱液,在波长280nm处检测蛋白吸收值A,再将峰值经SDS-PAGE电泳分析,可得到纯度较高的融合蛋白。
  • 小剂量连续诱导法提高红豆杉细胞中紫杉醇含量 下载全文
  • 比较了小剂量连续诱导与一次性大剂量加入诱导子对红豆杉细胞H2O2含量、生物量及紫杉醇含量等方面影响的差异。结果表明:小剂量连续诱导组H2O2相对含量、生物量及紫杉醇含量都将一次性大剂量加入诱导子组高。前者三个指标的值分别为:17.6OD410/g、27.84g/100ml、5.0(1/万DW),后者三个指标的值分别为:12OD40/g、24.51g/100ml、1.2(1/万DW)。
  • 灌注色谱法快速分离纯化茶薪菇金属硫蛋白 下载全文
  • 为建立一种快速高效分离Cd诱导茶薪菇金属硫蛋白(MT)的方法,以灌注色谱技术为平台,采用BioCAD 700E灌注色谱系统分离纯化Cd诱导茶薪菇金属硫蛋白,并对色谱条件进行了优化,结果表明:经优化相关参数(缓冲液pH值8.2,流速5ml/min,洗脱体积10CV)建立的快速灌注色谱法能高效地进行茶薪菇Cd-MT分离,且具有快速、高效、自动化操作、易放大等优点。
  • 真菌菌丝中类胡萝卜素的提取方法 下载全文
  • 建立一种从丝状真菌的菌丝体中快速提取类胡萝卜素的方法。发现类胡萝卜素在菌丝体中以色素颗粒形式存在。当饱和NaCl溶液存在于磨碎的菌丝体中,色素颗粒被破坏,类胡萝卜素可以被石油醚萃取。该方法适合根霉属(Rhizopus)、笄霉属(Choanephora)、毛霉属(Mucor)、脉孢霉属(Neurspora)、镰胞霉属(Fusarium)、布拉霉属(Blakeslea)、根霉属(Rhizopus)等丝状真菌菌丝体中类胡萝卜素的提取。
  • 寡核苷酸合成的一种优化方法 下载全文
  • 为提高寡核苷酸的合成效率,结合本实验室研制出的探针并行合成装置,提出了一种寡核苷酸合成的优化方法,可有效减少合成的循环次数,同时使合成成本降低、合成时间缩短,合成效率大大提高。
  • Matrex Cellufine Sulfate在重组HBsAg纯化中的应用 下载全文
  • 建立纯化重组CHO细胞HBsAg的新工艺。将含有HBsAg的重组CHO细胞培养收获液,采用Butyl S Sepharose疏水作用柱层析、Matrex Cellufine Sulfate亲和柱层析、Sepharose 4FF凝胶过滤柱层析进行纯化,得到HBsAg纯品,该HBsAg经检定合格。HBsAg回收率为72%。
  • 芽孢杆菌DY—32对原油的降粘作用 下载全文
  • 筛选得到了一株能利用原油为碳源生长的菌株DY-32,实验中发现此菌对不同的原油都有降粘效果。环境因素如培养时间、接种量及培养温度对降粘率影响很大,确定其最适降粘温度为55℃,而培养基的pH值和NaCl浓度对降粘率的影响不显著,但辅助营养物质的加入能够提高DY-32的降粘率。气相色谱的结果表明原油经DY-32作用后,其中的一些组分被降解,因此,此菌能降粘的主要机理是通过其在原油培养基中生长利用了原油中的组分达到了降粘目的。实验证明此菌在微生物提高原油采收率及烃类物质的生物修复中有很好的应用潜力。
  • 中药对双歧杆菌生长的影响 下载全文
  • 选用23种常用中药对双歧杆菌进行了体外生长促进实验,结果发现12.5%的黄芪、芦根、桠葫芦分别对双歧杆菌有明显的促进生长作用。同一中药不同浓度对双歧杆菌的增殖效果存在差异。
  • 山羊毛提取L—胱氨酸水解条件的研究 下载全文
  • 对山羊毛原料提取L-胱氨酸过程中水解条件对收率的影响进行了研究,经正交试验确定最佳工艺条件,可使收率在未回收母液情况下达4.6-4.8%。
  • 纤维素酶的固体培养方法 下载全文
  • 通过对菌株产酶能力的测定,确定了绿色木霉(Trichoderma viride)HWO7作为生产菌株。研究了培养基组成、培养条件和培养过程对产酶能力的影响,确定了固体培养生产纤维素酶的生产工艺。研究了纤维素酶的酶学特性。在确定工艺条件下,曲料的绝干酶活力(CMC-Na)达2605.1u/g,产品收率79.0%。
  • 一串红天然色素及其稳定性研究 下载全文
  • 以新疆地产一串红(Salvia splendens Ker-Gawl)的花为实验材料,从光、温度、pH值、还原介质、氧化介质、防腐剂、金属离子等影响因子方向对色素的稳定性进行了初步研究。结果表明:该色素属于花青苷类色素;对光、温度等比较稳定;可在偏酸或中性介质中使用;耐还原性和耐氧化性较差;蔗糖、防腐剂以及大多数金属离子对色素的稳定性无不良影响,但Fe^3+、Pb^2+和Sn^2+对色素的稳定性有一定影响。
  • 棉花喷施核酸(DNA)效果探讨 下载全文
  • 在棉花的不同生长期采用不同浓度的脱氧核糖核酸(DNA)溶液喷施叶面,测试施用DNA对棉花生长及其产量的影响。结果表明:现蕾斯喷施促进营养生长明显,但对棉花产量影响较小;盛花期喷施对营养生长和生殖生长均有促进,棉花产量提高幅度大;浓度为1‰的DNA溶液比浓度为0.5‰的对棉花产量的提高作用大。结论:在棉花生长的盛花时期,叶面喷施‰浓度的DNA溶液,能明显促进其生长发育和产量的提高。
  • 直接从土壤中提取DNA的方法 下载全文
  • 重组CHO乙肝疫苗细胞培养收换液工艺改进 下载全文
  • 利用CHO细胞生产重组乙肝疫苗,在细胞培养收换液工艺中建立管道化生产线。采用大罐配成新鲜工作液,过滤除菌,经管道直接输入细胞培养瓶内;细胞培养上清的收集也经管道或直接倒入不锈钢罐内。工艺改进后,细胞原液收获率提高15%,配液污染率降低12%,同时降低了成本。
  • 登革病毒感染性转录体技术 下载全文
  • 转基因植物转录后基因沉默的克服对策 下载全文
  • 甲醇酵母表达系统研究进展 下载全文
  • 甲醇酵母是一种新的基因表达系统,有着许多突出的优点。多种重组蛋白已在甲醇酵母获得成功表达.该文综述几种甲醇酵母表达系统的特点和现状。
  • 重组杆状病毒杀虫剂研究进展 下载全文
  • 从缺失病毒非必须基因增加杀虫效果,插入外源基因提高杀虫速度、修饰病毒本身基因扩大杀虫谱等三个方面综述了目前构建重组杆状病毒杀虫剂的主要策略。
  • 影响毕赤酵母高效表达外源蛋白的因素 下载全文
  • 分析了毕赤酵母高效表达外源蛋白的机理以及影响毕赤酵母表达外源蛋白的作用因素。
  • 植物组培污染防治的研究概况 下载全文
  • 蛋白错折叠及其纠正机制 下载全文
  • 分子标记技术及其进展(Ⅱ) 下载全文
  • 综述了几类分子标记的概念、基本原理,并简要地介绍了各种技术的优缺点。
  • 转β—1,3—葡聚糖酶基因和几丁质酶基因棉花(崔百明 陈正华 等)
    应用RD—PCR技术制备基因芯片靶基因片段(张宝 郑文岭 等)
    红Ji木的3′端延长随机引物扩增DNA(3′—ERPAD)标记(李晨东 唐前瑞 等)
    罗伯逊易位群体遗传结构的DNA指纹分析(杨建军 徐晓立 等)
    高梁抗蚜基因的RAPD分析(李Yue莹 赵妹华 等)
    人胃及其癌组织的RAPD的多态性分析(汪成富 夏瑜)
    利用RAPD标记鉴定甜菜无融合生殖的同一性(康传红 韩晓云 等)
    鼠透明带3(ZP3)融合蛋白表达以及抗血清制备(张富春 钱东 等)
    地衣芽孢杆菌感受态细胞的形成及高效电转化(唐雪明 邵蔚蓝 等)
    小麦—黑麦染色体易位系的细胞学鉴定(赵燕丽)
    阿维菌素高产菌株的选育I(阎浩林 何汉洲 等)
    内切β—1,3—葡聚糖酶产生菌的分离筛选与鉴定(张作明 张灏 等)
    竹红菌素产生菌的筛选与鉴定(张灏 石贵阳 等)
    几种提取RNA的方法(李燕 王恩秀 等)
    利用微波炉快速筛选大肠杆菌阳性克隆(罗樨 赫然 等)
    猪传染性胃肠炎病毒重组核衣壳(N)蛋白的纯化(高继国 唐丽杰 等)
    小剂量连续诱导法提高红豆杉细胞中紫杉醇含量(苏湘鄂 梅兴国 等)
    灌注色谱法快速分离纯化茶薪菇金属硫蛋白(刘安玲 朱必凤 等)
    真菌菌丝中类胡萝卜素的提取方法(张建法 黄为一 等)
    寡核苷酸合成的一种优化方法(张玉骥 朱纪军 等)
    Matrex Cellufine Sulfate在重组HBsAg纯化中的应用(陈万革 金立杰 等)
    芽孢杆菌DY—32对原油的降粘作用(张惠殊 李清心 等)
    中药对双歧杆菌生长的影响(朱晓慧 唐宝英 等)
    山羊毛提取L—胱氨酸水解条件的研究(熊洁羽 王国军 等)
    纤维素酶的固体培养方法(曹亚彬 郭丽姝 等)
    一串红天然色素及其稳定性研究(彭子模 刘晓云 等)
    棉花喷施核酸(DNA)效果探讨(王俊云 常新奎 等)
    直接从土壤中提取DNA的方法(张汉波 段昌群)
    重组CHO乙肝疫苗细胞培养收换液工艺改进(金立杰 孙俊业 等)
    登革病毒感染性转录体技术(赵卫 曹虹 等)
    转基因植物转录后基因沉默的克服对策(段红英 卢龙斗 等)
    甲醇酵母表达系统研究进展(韦宇拓 赵颖怡 等)
    重组杆状病毒杀虫剂研究进展(惠丰立 彭建新)
    影响毕赤酵母高效表达外源蛋白的因素(邬小兵 乐国伟 等)
    植物组培污染防治的研究概况(马翠萍 孙仲序 等)
    蛋白错折叠及其纠正机制(王菊芳 李志勇)
    分子标记技术及其进展(Ⅱ)(王志林 吴新荣 等)
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