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  • 大腹圆蛛主壶腹腺cDNA文库构建和丝蛋白基因筛选 下载全文
  • 首次通过反转录-置换法和使用pUC18质粒成功构建大腹圆蛛(Araneus ventricosus)主壶腹腺(major ampullate gland)cDNA基因文库,并以鸟枪法从中筛选出具有典型重复结构的大腹圆蛛主壶腹丝蛋白cDNA基因AvF1,大小为1744bp,编码区为1572bp,编码氨基酸524个,分子量为42489.55Da,典型的重复结构为(GGP)nGGX。与现有已知的蛛丝蛋白基因中三带金蛛(Argiope trifas-ciata)鞭毛样丝基因(AtfF)有最高的同源性69.3%。大腹圆蛛主壶腹腺cDNA文库的构建和蛛丝蛋白新基因的克隆,为提供大腹圆蛛蛛丝蛋白基因背景和进一步研究蛛丝蛋白奠定了基础。
  • 大肠杆菌ubiC基因的克隆及序列分析 下载全文
  • 研究以克隆得到正确序列的大肠杆菌ubiC基因目的,实验通过PCR方法从大肠杆菌基因组中扩增得到了ubiC基因,扩增产物克隆到pUC118载体,转化大肠杆菌JM109,DNA序列分析结果表明克隆得到的大肠杆菌ubiC基因碱基序列正确。
  • hCGβ真核表达载体的构建和瞬时表达筛选 下载全文
  • 为探讨人绒毛膜促性腺激素β亚基(hCGβ)基因避孕疫苗的可能性,利用DNA重组技术将hCGβ的基因片段连接到真核表达载体pCMV4上,酶切分析鉴定正确构建了质粒DNApCMV4-hCGβ,将质粒DNApCMV4-hCGβ通过脂质体转染的方法导入体外培养的Hela细胞,双抗夹心ELISA法检测质粒DNApCMV4-hCGβ在Hela细胞瞬时表达系统中特异性的表达了hCGβ。结果表明hCGβ表达含量24h为6.78ng/ml,48h为15.24ng/ml,说明在体外瞬时表达了特异性hCGβ的pCMV4-hCGβ真核表达载体能够作为DNA疫苗使用,为pCMV4-hCGβ质粒DNA免疫小鼠进行DNA避孕疫苗的研究奠定了基础。
  • 猪β2—AR基因重组质粒的快速筛选 下载全文
  • 为建立一种高效快速鉴定重组质粒的实验方法,将猪β2-肾上腺素能受体(β2-AR)基因与pET-32C重组,构建β2-AR基因表达载体pET32CAR,以T7启动子引物和猪β2-肾上腺素能受体基因特异性引物为PCR引物,挑取重组质粒转化单菌落直接进行PCR,产物经电泳发现,5个候选克隆中有3个克隆扩增出了一条约2kb的特异性条带,并且插入方向正确,随机选取其中1个克隆用限制性酶切鉴定以及DNA测序验证PCR筛选的正确性,研究结果表明;在采用PCR方法对重组克隆进行鉴定时,可以直接使用细菌菌落参与反应,而无须提取克隆的DNA,与传统的实验方法相比,筛选的时间缩短至3-4h,大大提高了重组DNA的筛选效率。
  • 犬2型腺病毒E3区的克隆及其缺失改造 下载全文
  • 为构建可用于插入外源基因的犬2型腺病毒(CAV-2)E3区表达载体,用KpnI对CAV-2DNA进行酶切,回收含E3区的KpnIB片段并将其克隆到质粒pBluescriptⅡKS(+)中,获得了正向和反向插入的重组质粒,并对E3区进行了序列测定,根据E3区两末端的序列合成了两对突变引物,每对引物分别在E3区的24986bp及26360bp处各引入一个BglⅡ酶切位点,以E3区正向插入的重组质粒pBE3-2为模板分别用两对突变引物经PCR法连续进行两次点突变,通过BglⅡ酶切,最终筛选到在E3区的首尾两端各引入一个BglⅡ酶切位点的突变重组质粒pBEM,利用BglⅡ酶切将E3区切除约1.4kb的片段,然后在缺失部位插入了人工接头,接头设计了5个单一酶切位点,得到的pBE3L质粒可用于外源基因的插入。
  • 高温乳糖酶基因在大肠杆菌中的高效表达 下载全文
  • 来源于嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus stearothermophilus)的β-半乳糖苷酶基因bgaB经克隆,测序后,转入大肠杆菌高效表达载体pET-20(b)中,重组菌在IPTG诱导下,表达出的重组蛋白比酶活量为6.66U/mg。比出发菌株高50倍。
  • 真核基因的快速克隆及表达 下载全文
  • 以细胞间隙连接蛋白基因Cx26作为目的基因,通过T-A载体介导,构建真核表达重组载体pcDNA3.1(+) /Cx26,重组表达载体转染人鼻咽癌细胞株HNE1,表达Cx26间隙连接蛋白。
  • 有机浮渣降解菌株的筛选及初步研究 下载全文
  • 通过筛选三株能降解烃类菌株及浮渣成分的化学分析,对炼油厂有机浮渣有较好的处理效果。并对其降解最适条件进行了系列研究,结果:将有机浮渣按一定比例稀释,按10%接种量添加混菌溶液,35℃摇瓶培养2d,降解率达90%以上。
  • 樱桃砧木叶片和叶柄再生体系的构建 下载全文
  • 以樱桃的两个砧木品种大青叶和大叶的组培苗为试材,通过5个激素因子的正交试验设计,建立了叶圆盘和叶柄片段的再生体系,研究出最佳愈伤组织形成和根苗分化的培养基,以提高组培快繁系数,并为基础转化提供技术保证。
  • 铜对鲫鱼脾细胞超微结构的影响 下载全文
  • 应用透射电镜的方法,研究了三种铜离子浓度对鲫鱼脾细胞超微结构的影响。结果表明:脾细胞超微结构变化明显,主要表现在线粒体和内质网,线粒体双层膜解体,形成空白区,嵴断裂,膨大和扭曲,内质网亦变化明显。
  • 小球藻生物富集锌、镉机制的研究 下载全文
  • 藻类对许多重金属具有较强的生物富集能力,小球藻(Chlorella spp.)分别在不同系列Zn^2+,Cd^2+浓度下培养8d间隔2d,测定小球藻的生物量及Zn和Cd的含量。结果表明,小球藻随水体中Zn^2+和Cd^2+的浓度不同,在重重金属水体中暴露时间不同,具有不同的富集速率和能力。
  • 分离芸芥植物基因组DNA的一种方法 下载全文
  • 介绍一种能较好地分离植物基因组DNA的方法-SDS法,通过不同芸芥植物材料的多次实验,证明该方法分离芸芥的基因组DNA产率(7.5μg/gFW),纯度(OD260=1.7-1.9)和分子量(50kb左右)都较高,完全能满足RAPD分析的需要,与目前普遍使用的CTAB法相比,SDS法简单,快速,成本低。
  • PCR对转基因玉米CBH351品系的鉴定检测 下载全文
  • 成功建立了转基因玉米CBH351(Starlink^TM)的筛选和品系鉴定检测的PCR方法,该方法根据玉米自身IVR基因作为内源特异参照基因来检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果,设计检测CaMV35S启动子的引物扩增195bp,来对转基因玉米进行筛选检测;并进一步设计转基因玉米CBH351(StarlinkTM)品系转化质粒图谱中CaMV35S启动子和Cry9C边界位置基因特异性引物扩增170bp,以及目标基因Cry9C的右端与CaMV35S终止子的左端边界位置基因特异性引物扩增171bp,以此来鉴定检测CBH351(StarlinkTM)的品系。
  • 两种新型培养细胞数量检测技术的探索 下载全文
  • 将SRB比色法和结晶紫比色法与MTT比色法与MTT比色法在96孔板培养HeLa细胞的数量及活力测量精确度和操作方法上进行了对比。试验结果显示:SRB比色法和结晶紫比色法的最佳检测波长均为490nm。最佳染液浓度分别为0.4%和0.25%。SRB比色法的检测精确度略逊于MTT法,结晶紫比色法与MTT法无显著差异。另外,此两种检测方法的操作过程更为简便,所需时间也较短,可在一定范围内取代MTT比色法。
  • 微生物杀虫剂Bt53菌株的发酵培养基优化 下载全文
  • 运用正交试验L27(3^13)设计法对鳞翅目昆虫高毒效的苏云金杆菌Bt53菌株进行培养基优化试验,在培养温度30±1℃,50ml/500ml三角瓶,摇床转速180r/min条件下,苏云金杆菌53菌株的发酵最佳培养基是(%);碳源0.5,氮源A2.0,氮源B0.10,氮源C0.25,磷酸氢二钾0.75,碳酸钙0.15,硫酸镁0.018及pH8.0。
  • 羧肽酶B活力及稳定性研究 下载全文
  • 研究在不同pH,温度条件下,从猪胰脏中提取的羧肽酶B的稳定性,其活力最佳pH范围在7.5-8.5,最佳温度为55℃。
  • 影响克拉维酸生物合成的氨基酸 下载全文
  • 发酵液的氨基酸分析显示,谷氨酸,精氨酸,天门冬氨酸,丙氨酸易被棒状链霉菌利用,发酵培养基中添加上述氨基酸后,谷氨酸,精氨酸有利于克拉维酸的生物合成,适时添加谷氨酸,精氨酸可分别提高克拉维酸的产量约25%和12%;而蛋氨酸,半胱氨酸含S氨基酸对克拉维酸生物合成不利,不同来源的黄豆粉作发酵培养基氮源,因其组成中某些氨基酸含量的差异。可使克拉维酸的产量相差百分之十几。
  • 发酵条件对短梗霉多糖产量的影响 下载全文
  • 对短梗霉发酵培养基的初始pH,初始蔗糖浓度,酵母膏浓度,NH4^+浓度,接种量和装液量等发酵条件对短梗霉多糖发酵影响进行了研究。结果表明,发酵条件对多糖发酵有显著的影响,当初始pH,初始蔗糖浓度,NH4^+浓度,酵母膏浓度和装液量分别为6.5,5.0%,0.5g/L,0.2%和25ml时多糖的产量达到最大值;但接种量在2.0%-7.0%之间对多糖的产量影响不大,可见,通过对培养条件的调整,有助于短梗霉多糖的产量的提高。
  • 糖化酶在丝素膜上的固定化及性质研究 下载全文
  • 利用丝素作糖化酶的固定化载体,应用包埋法和共价交联法两种方法,制备了固定化糖化酶丝素膜,研究结果表明,共价交联法制备的酶膜活力较高,且回收率可达50%以上;与溶液酶相比,固定化酶的最适温度提高了10℃,热稳定性与贮存稳定性也有了很大提高。
  • HRP在模拟人体胃肠环境中的稳定性研究 下载全文
  • 以中国药典中的人工胃液和人工肠液模拟人体胃肠环境,对过辣根氧化物酶的稳定性进行了一系列单独及综合研究。结果表明,辣根过氧化物酶在人工胃液中受到很强的破坏,20min后,其活性仅存1.1%,主要由胃酸破坏,而在人工肠液中则较为稳定,1.5h后,其活性仍存在89%,同时还发现,天然结构的辣根过氧化物酶对胰蛋白酶具有较强的耐受力。
  • S3307浸种对黄瓜幼苗生理的影响 下载全文
  • 用S3307粉剂不同浓度对“夏丰一号”黄瓜浸种,研究S3307对幼苗生长的生理效应,目的是得到培育黄瓜壮苗适宜的处理浓度。结果表明:与对照相比,经10,20,50μg/L的S3307浸种后,均不同程度地增加了黄瓜幼苗叶片中叶绿素和可溶性糖含量,提高了叶片光合速率和SOD活性,降低了MDA含量,其中,以20μg/L浸种处理16h的效果最佳。
  • 外源基因在叶绿体表达系统中高效表达研究进展 下载全文
  • 综述叶绿体表达系统的特点,转化方法,同质化研究及提高外源基因在叶绿体基因组中表达水平的研究状况。
  • 隐马尔科夫过程在基因识别中的应用 下载全文
  • 用非数学语言描述了隐马尔科夫过程(hidden mark-ov model,HMM),介绍了HMM用于基因识别的原理及基于HMM开发的,比较常用的基因识别程序。
  • 基因工程菌产类胡萝卜素的研究进展 下载全文
  • 从类胡萝卜素的合成机理,类胡萝卜素代谢酶的基因,类胡萝卜素分子育种及微生物类胡萝卜素代谢等方面概述了用基因工程菌产类胡萝卜素的研究进展。
  • RAPD在植物育种上的应用及其技术校正 下载全文
  • 表皮生长因子与前列腺增生及前列腺癌的关系 下载全文
  • 肝细胞生长因子的生物学功能与应用 下载全文
  • 植物防御反应的生化调控 下载全文
  • 植物原生质体培养研究进展 下载全文
  • 植酸酶的研究进展 下载全文
  • 从三个方面综述了植酸酶的研究进展:(1)植酸酶的种类及来源;(2)植酸酶的性质;(3)植酸酶基因及基因工程。
  • 植物蔗糖酸结构和作用研究进展 下载全文
  • 对植物蔗糖酶的多态性,分子结构以及蔗糖酶转基因对植物生长发育的影响作一综述。
  • 新型生物可降解塑料—多聚羟基烷酸研究进展 下载全文
  • 大腹圆蛛主壶腹腺cDNA文库构建和丝蛋白基因筛选(任洪林 柳增善 等)
    大肠杆菌ubiC基因的克隆及序列分析(李大力 王丹 等)
    hCGβ真核表达载体的构建和瞬时表达筛选(张富春 王妮 等)
    猪β2—AR基因重组质粒的快速筛选(陈勇 周光宏 等)
    犬2型腺病毒E3区的克隆及其缺失改造(邱薇 夏咸柱 等)
    高温乳糖酶基因在大肠杆菌中的高效表达(陈卫 张灏 等)
    真核基因的快速克隆及表达(向秋 李小玲 等)
    有机浮渣降解菌株的筛选及初步研究(姚晓畔 荆Zhe)
    樱桃砧木叶片和叶柄再生体系的构建(孙仲序 刘静 等)
    铜对鲫鱼脾细胞超微结构的影响(凌善锋 唐光辉 等)
    小球藻生物富集锌、镉机制的研究(刘艳 刘艳 等)
    分离芸芥植物基因组DNA的一种方法(钟军)
    PCR对转基因玉米CBH351品系的鉴定检测(曹际娟 曹远银 等)
    两种新型培养细胞数量检测技术的探索(薄芯 曲宁)
    微生物杀虫剂Bt53菌株的发酵培养基优化(高家合 王革 等)
    羧肽酶B活力及稳定性研究(王伟刚 孔毅 等)
    影响克拉维酸生物合成的氨基酸(朱薇玲)
    发酵条件对短梗霉多糖产量的影响(李焰红 王长海)
    糖化酶在丝素膜上的固定化及性质研究(戴玉锦)
    HRP在模拟人体胃肠环境中的稳定性研究(马剑敏 靳萍 等)
    S3307浸种对黄瓜幼苗生理的影响(彭世勇 李洪忠)
    外源基因在叶绿体表达系统中高效表达研究进展(钱炳俊 周志刚 等)
    隐马尔科夫过程在基因识别中的应用(周海廷)
    基因工程菌产类胡萝卜素的研究进展(杨远帆 倪辉)
    RAPD在植物育种上的应用及其技术校正(程培周 王宪泽)
    表皮生长因子与前列腺增生及前列腺癌的关系(王洪军 于永利 等)
    肝细胞生长因子的生物学功能与应用(陈晓丽 黄东东 等)
    植物防御反应的生化调控(王瑞刚)
    植物原生质体培养研究进展(张红梅 王俊丽)
    植酸酶的研究进展(马丽苹 彭远义)
    植物蔗糖酸结构和作用研究进展(周胜军 徐志豪)
    新型生物可降解塑料—多聚羟基烷酸研究进展(黄海东 赵良启)
    《生物技术》封面

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    主  编:沙长青

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