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文献检索:
  • 携带猪β干扰素基因的鸡输卵管生物反应器逆转录病毒载体的构建 免费阅读 下载全文
  • 为构建携带猪β干扰素基因的鸡输卵管生物反应器逆转录病毒载体,用PCR技术扩增了猪β干扰素基因和卵清蛋白5调控序列,然后将其重组到切除了P70启动子的逆转录病毒载体pLNHX中。用酶切和PCR等方法对重组质粒进行鉴定,结果表明,卵清蛋白5‘调控序列和猪β干扰素基因已正确克隆至逆转录病毒载体pLNHX中。为进一步制备高滴度,高感染性的逆转录病毒,从而制作鸡的输卵管生物反应器奠定实验基础。
  • 人促红细胞生成素鸡输卵管特异表达载体的构建 免费阅读 下载全文
  • 通过PCR技术从产蛋鸡输卵管基因组中扩增出1.1kb的鸡卵清蛋白5‘端调控区,将其亚克隆人pMD18-T载体的多克隆位点)命名为pOV),经酶切和测序鉴定可作为调控序列来启动外源基因的表达。然后从pOV上切下卵清蛋白5‘端调控区,再将其亚克隆入pBCE经SaⅡ和HindⅢ双酶切的切口处,酶切鉴定为正向插入,成功构建了鸡卵清蛋白5‘端调控区调控人促红细胞生成素的质粒表达载体pOV-hEPO,为制备生产人促红细胞生成素的鸡输卵管生物反应奠定了基础。
  • 油菜种子特异表达napin基因启动子的克隆及序列分析 免费阅读 下载全文
  • 通过PCR扩增,从油菜(Brassica napus cv.XY15)中克隆了种子特异表达napin基因启动子,序列分析表明,该启动子有1147个核苷酸,与已报道的序列比较,其核苷酸的同源性为99.9%和99.4%,这是一个新的napin基因启动子,已将其登录到GenBank,登录号为AF420598.
  • 血小板生成素改构体基因的克隆和序列分析 免费阅读 下载全文
  • 采用PCR技术,根据文献报道的鼠TPO成熟肽基因序列,设计并合成两对引物,以鼠TPO cDNA为模板,扩增获得mTPO N端153个氨基酸的478bp cDNA片段及鼠TPO全长1032bp cDNA片段,mTPO153片段与合成的碱性成纤维生长因子序列中Lys119-Lys135as的51bp肝素结合位点DNA片段连接,克隆到M13mp18及M13mp19载体中进行双向测序;同时将扩增的鼠TPO全长cDNA片段克隆到M13mp18及M13mp19载体中进行双向测序。证明获得鼠血小板生成素与肝素结合位点基因及鼠TPO全长基因,继之以pMAL-C2X为表达载体构建表达质粒,并经PCR及酶切鉴定。
  • 深黄被孢霉Δ6—脂肪酸脱氢酶基因导入大豆 免费阅读 下载全文
  • 采用农杆菌介导的大豆子叶节转化系统成功地将深黄被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因导入大豆。从发芽5—7d的大豆菌苗切取子叶节外植体,经农杆菌浸染和共培养后,在含50mg/L卡那霉素的选择培养基上培养2-4w后,从子叶节处诱导出抗性不定芽,将不定芽转移到伸长培养基上,4-6w后长至2-3cm高的再生苗,再将再生苗切下转入生根培养基,2-6w生根,生根后的再生植株经逐渐锻炼移入花盆中,部分移栽成活的T0植株能正常开花结荚。从T0植株上收获T1种子,按株系种植。T0和T1代经PCR检测和DNA分子杂交分析,证明外源基因已导入并整合到大豆的基因组内并能遗传给后代。
  • 山蛭基因组DNA的提取及其PCR扩增产物的分析 免费阅读 下载全文
  • 利用PCR技术从海南山蛭体内分离山蛭素(抗凝血蛋白)基因,首先需获得不带有山蛭体表色素且完整的山蛭基因组DNA,本试验通过结合使用SDS-蛋白酶裂解法和CTAB法,有效的去除了山蛭基因组DNA提取过程中难以去除的色素,得到的基因组DNA保持完整,无降解,以之作为模板,进行PCR扩增,获得一个长度约为237bp的特异性片段,此片段与印度山蛭蛭素的cDNA大小几乎一致。初步表明,这个序列没有内含子,而仅是海南山蛭蛭素的编码序列。
  • 猕猴桃干叶片DNA的提取及叶绿体基因PCR—RFLP反应 免费阅读 下载全文
  • 采用CTAB法猕猴桃干叶片提取总DNA,运用PCR技术扩增出rbcL和psbA两个叶绿体基因片段,分别用两种限制性内切酶对它们进行酶切分析,实验结果表明,当CTAB提取液体积数为750ul,猕猴桃叶片质量为10mg时,所得到的猕猴桃DNA的质量较为理想:DNA模板量为250ng时,扩增到的特异性条带明亮,无拖尾,2个基因的酶切结果共得到25个限制性位点,其中24个具有多态性,为从cpDNA水平探讨猕猴桃属植物的系统发育打下了坚实的基础。
  • 突变型hIL—2在Pichia pastoris中直接诱导表达条件研究 免费阅读 下载全文
  • 为了简化突变型白细胞介素-2(mutant variant human interleukin-2,MvIL-2)在毕赤酵母中的表达工艺,作者参照传统方法,设计了一种新的表达方法-直接诱导法,在该实验中,在摇瓶条件下,对OD600,诱导时间这两个重要的参数进行了重点研究,并对表达蛋白的抗原性和生物学活性进行鉴定,结果表明:在pH6.0,温度30℃,转速280r/min的条件下进行培养,菌体密度(OD600)达到40时直接在发酵液中加入1%的甲醇进行诱导表达,间隔24h补充同上浓度的甲醇,96h收集发酵液,以相同体积的培养基最后获得的总目的蛋白来比较,直接诱导法的产量是传统诱导法产量的5倍,Western blot的抗原性检测和MTT生物学活性实验证明表达的蛋白是特异性蛋白,MTT法测得突变型IL-2具有4倍于同样在毕赤酵母中表达的天然IL-2的生物活性。
  • Fe(Ⅱ)对漆酶催化活性的影响 免费阅读 下载全文
  • 以2,2-连氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)为底物,在pH4.5的条件下,用分光光度法考察了Fe^2+离子存在下的漆酶催化氧化反应,发现Fe^2+离子对漆酶的催化活性显示出抑制作用,并进一步探讨了其抑制特征,抑制位点和作用方式。结果表明,Fe^2+离子对漆酶催化活性抑制属竞争性抑制过程,抑制作用是通过还原ABTS来实现的。
  • 毛栓菌漆酶诱导及部分特性研究 免费阅读 下载全文
  • 研究了碳源、氮源、愈创木酚、香兰素及培养条件下对漆酶分泌的影响;结果表明,麦草粉作碳源,(NH4)2SO4作氮源有利于漆酶的分泌,适宜浓度的愈创木酚和香兰素等对漆酶的产生有一定的作用。pH在3.0-8.0的范围内对漆酶的分泌影响差别不大,培养温度,接种量,通气量对漆酶的分泌有较大影响,漆酶最适pH为4.0,最适反应温度为30℃,K+,Zn^2+,Cu^2+离子可激活漆酶,而Ag^+,Fe^3+,Cl^-离子可抑制漆酶活性,漆酶的Km值为1.81×10^-3mol/L
  • 胶原蛋白水解肽磷酸化的研究 免费阅读 下载全文
  • 在三聚磷酸钠作用下,胶原活性肽能够发生非酶磷酸化,共价连接磷酸基团,用正交实验法优选磷酸化条件,反应温度对磷酸化水平影响最大,pH值影响次之,在优选的磷酸化条件下(pH9.0,80℃,反应3h),磷酸化水平约为每分子胶原能够共价连接上约2分子磷酸基团。
  • 原子力显微镜对壳聚糖分形结构的研究 免费阅读 下载全文
  • 利用原子力显微镜(Atomic Force Microscope,AFM)研究了壳聚糖分子在云母表面的分形聚集生长过程,并对壳聚糖分形生长的作用机理及其生长过程进行研究,发现壳聚糖分子在聚集生长过程呈传统的具有分形特征的正态分布和奇异分布。在壳聚糖聚集生长过程中,由于溶液的自然挥发,形成了云母基片中心位置的壳聚糖浓度相对较高,而周围壳聚糖的浓度相对较低的阶梯分布,因此呈现出中部的胶粒大而周围的胶粒较小的现象。AFM图像显示在云母片的中心部位壳聚糖分子聚集生长为“树”形结构而在边缘部位呈“星”形结构,这两种结构都具有典型的自相似性,壳聚糖的分形生长与其计算机模拟树形模式和DLCA模式拟合得很好。
  • 黑曲霉N25株产植酸酶及酶促反应条件研究 免费阅读 下载全文
  • 从植物种子中研究筛选出高产植酸酶的黑曲霉N25,进行了最适液体培养基的筛选,研究了黑曲霉N25在玉米半合成液体培养基中所产植酸酶的最适酶促反应条件。结果表明:在四种培养基中,玉米半合成液体培养基为最适培养基,黑曲霉N25产植酸酶高峰期在96h,黑曲霉N25所产植酸酶的酶促反应最适pH为2.6和4.6,并具有很好的热稳定性,一定浓度的Ca^2+,Mg^2+,Mn^2+,Cr^3+,Li^+,EDTA和高磷是植酸酶活性的抑制剂,1.0mmol/ml聚乙二醇1000,0.3nmol/mL Fe^2+和低磷对植酸酶活性具有激活作用。
  • G418和氯霉素作为转基因盐藻的抗生素筛选标记 免费阅读 下载全文
  • 寻找可以作为筛选标记的抗生素是进行盐藻转基因的前提,尤其是分子更小,反应更灵敏的抗生素,通过降低培养液中NaCl浓度至0.25mol/L以后,进行抗生素筛选,得到了一种可以作为筛选标记的抗生素-G418,700μg/ml G418在第5d即比较完全地杀死野生型盐藻细胞,由于未知的原因,实验中氯霉素表现出的抑制浓度是400μg/ml,作用时间是10d以上,不同于已有报道。在含1.5mol/L NaCl的盐藻培养基中,氯霉素,潮霉素,壮观霉素,G418,氨苄青霉素,卡那霉素都没有表现出杀死盐藻细胞的能力,这说明G418在低盐培养基中可以作为一种快速有效的筛选转基因盐藻的抗生素筛选标记。
  • 同时提取油茶中DNA和RNA的简便方法 免费阅读 下载全文
  • 介绍了一种以CTAB提取方法为基础,结合其它DNA和RNA提取方法,经反复实验建立的一种同时提取油茶DNA和RNA的简便方法。该方法能有效地去除植物组织中酚类和多糖等次生物质的影响,所得到的DNA和RNA纯度高,完整性好,可以用于进一步的如DNA分析,mRNA的分离,RT-PCR,构建cDNA文库和基因表达分析等实验。
  • 四种杆状病毒血清学关系的研究 免费阅读 下载全文
  • 血清学性质可作为病毒分类鉴定的依据,为此作者提纯芹菜夜蛾核多角体病毒-D克隆株(SfaMNPV-D)与棉铃虫单粒包埋核型多角体病毒(HaSNPV),斜纹夜蛾核型多角体病毒(SLMNPV),粉蚊夜蛾颗粒体病毒(TnGV)等四种杆状病毒的病毒粒子和多角体蛋白(颗粒体蛋白)作为抗原免疫家兔后制取抗血清,经1%琼脂糖免疫电泳,结果发现多角体病毒之间血清关系比与颗粒病毒血清学关系更密切。
  • 鲫鱼血清凝集素的生物学性质研究 免费阅读 下载全文
  • 采用硫酸铵盐析和梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,从鲫鱼血清中分离出一种天然凝集素,对其生物学性质进行研究。结果表明,该凝集素能够识别和凝集多种细菌,红细胞和酵母,不被透析,耐热,耐碱,抗DNase,RNase,SDS,对胰蛋白酶,糖苷酶和β-巯基乙醇敏感等特性,是一种分子量为67kD,等电点为6.2的糖蛋白分子,其活性能被乳糖、半乳糖,甘露糖和重金属离子所抑制,能显著促进巨噬细胞的吞噬,杀菌能力,是一种重要的免疫调节分子。
  • D—核糖生产菌株的生长形态变化及快速记录方法 免费阅读 下载全文
  • 细胞形态和变化是微生物发酵过程中细胞生长和代谢产物合成速率的重要表征因素,该研究以微生物发酵生产D-核糖为研究体系,采用生物显微镜,图形采集器,图形采集软件等,建立了微生物发酵过程中细胞的形态和变化的快速记录方法,并用此方法观察D-核糖生产菌株的生长形态变化。
  • 应用微波辐射促进组织块浸银染色 免费阅读 下载全文
  • 目的:探索微波辐射对组织块浸银染色各步骤的作用及微波在其中的应用方法。方法:在组织块浸银染色过程中,对组织块的固定,浸银,还原等步骤进行不同强度的微波辐射处理。结果:微波辐射明显促进了浸银,还原作用,应用适宜强度的微波辐射染色效果比常规染色有更多的优点。结论:恰当地应用微波辐射缩短组织块浸银染色时程,切实可行。
  • 基于遗传算法的麦角固醇分批发酵动力学参数估算 免费阅读 下载全文
  • 把遗传算法应用于求解麦角固醇分批发酵动力学模型参数,能进一步提高麦角固醇分批发酵过程状态变量的计算值与实验值的吻合程序,在计算机上对动力学模型进行了拟合,模拟值与实验值对比显示,该动力学模型能很好地反映麦角固醇分批发酵过程。
  • 以甘蔗糖蜜为碳源发酵生产海藻糖的研究 免费阅读 下载全文
  • 对以甘蔗糖蜜为碳源生产海藻糖的工艺条件进行了研究,结果表明,甘蔗糖蜜完全可以提供酵母菌体生长和海藻糖合成所需的碳源,以28g鲜酵母/L的接种量,流加培养14d(其中培养11h后调pH至5.0,加入1.5%NaCl,升温至39℃继续培养3h),可使海藻糖的产量达9.4g/L。
  • 小球藻吸附镍离子的研究 免费阅读 下载全文
  • 在小球藻液中分别添加含不同浓度的Ni^2+,NH4^+ N,PO4^3--P溶液,研究小球藻吸附Ni2+的能力。实验结果表明,小球藻对Ni^2+的生物吸附经历了一快一慢两个过程。随着Ni^2+的浓度的增加,小球藻对Ni^2+的吸附量不断增加,在最佳pH为8.0-8.5的条件下,低氮磷浓度的组合,升高温度或加强光照有利于小球藻对Ni^2+的吸附。20℃和30℃下,小球藻对Ni^2+的吸附符合Fluendlich等温模型,小球藻在对数生长期时对Ni^2+的富集能力最强。
  • 血脂康与阿托伐他汀降脂作用的比较 免费阅读 下载全文
  • 目的:比较血脂康与阿托伐他汀对高脂血症大鼠的降脂作用,方法:40只Wistar大鼠(雄性,160-180g)平均分成四组;正常对照组,模型组,血脂康组,阿托伐他汀组,连续给药28d。结果:血脂康组和阿托伐他汀组与模型组相比,总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)参数值下降明显,血脂康组依次下降10%,17%,13%,阿托伐他汀组依次下降11%,33%,16%,经t检验,降低差异均显著(P<0.05),结论:血脂康与阿托伐他汀对高脂血症大鼠均有良好的降脂作用,阿托伐他汀降TG作用优于血脂康。
  • 不同化学因子对喜树细胞悬浮培养生长效应的研究 免费阅读 下载全文
  • 实验研究了不同种类,不同浓度的植物生长调节物质及其组合和其它三种化学因子对喜树悬浮培养细胞生长的影响。结果表明:单因子以NAA效果最好,其中NAA最佳浓度为0.5mg/L,组合因子此单因子更有利于细胞的生长,以NAA0.5mg/L+KT0.1mg/L的效果最佳,在其它三种化学因子中,B5培养基和White培养基较有利于细胞的生长,蔗糖的最佳浓度为40mg/L,葡萄糖在一定范围内随着其浓度的增加,细胞的生长速度也相应增加。
  • 烟叶果胶质分解菌的选育 免费阅读 下载全文
  • 从烟叶叶面分离到产果胶酶真菌18株,在此基础上,进行液体培养,测定酶活,得到一株酶活性较高的黄曲霉DPE-005,对该菌株产酶培养基的碳、氮源进行正交法研究,正交实验的结果表明,影响该菌产酶活性的因素依次为A(麸皮)>B(乳糖)>C(果胶)>D(硫酸铵),其最佳组合为A2B3C3D1。最适产酶条件为:麸皮4.0%,果胶0.3%,乳糖1.5%(NH4)2SO40.5%,KH2PO4 0.25%,MgSO4·7H2O 0.05%,NaNO3 0.02%,FeSO4·7H2O 0.001%,起始pH6.0,在28℃摇床培养7d产酶量达到最高。以玉溪B3F烟叶为材料,施加DPE-005菌株所产酶液,在50℃贮存12h,经化学成分检测,结果表明,果胶质降低了18.15%。
  • 分子标记技术在水杉研究中的应用 免费阅读 下载全文
  • 简述同工酶,RELP和以PCR为基础的RAPD,SCAR,SSR这几种分子标记在水杉的研究中应用现状,着重分析将分子标记应用于水杉(属)系统分类研究中的前景。
  • 根癌土壤杆菌转化水稻研究进展 免费阅读 下载全文
  • 就根癌土壤杆菌介导的水稻基因转化的研究现状,影响转化的一些因素和利用根癌土壤杆菌转化水稻的一些应用作一综述,并对目前根癌土壤杆菌介导水稻基因转化中存在的问题及解决办法作出评价。
  • 微生物纤维素酶分子生物学研究进展 免费阅读 下载全文
  • 概述了近二十年来纤维素酶分子生物学的研究情况,包括纤维素酶合成调控,纤维素酶基因结构,基因复制及纤维素酶合成调控。
  • 微生物脂肪酶分子改造研究进展 免费阅读 下载全文
  • 国外纳豆激酶的开发现状 免费阅读 下载全文
  • 概述了目前国内开发纳豆激酶的现状,应用情况和市场动态,供研究开发者参阅。
  • 氧化亚铁硫杆菌生物冶金的新进展 免费阅读 下载全文
  • 综述了Thiobacillus ferrooxidans生物冶金的催化作用机制,能量变化,细胞外多聚物和基底金属在浸出过程中的作用和影响,以及温度,矿物的大小,空气分离器,pH,细菌载体的影响。
  • 微核技术及其在监测水质污染中的应用 免费阅读 下载全文
  • 微核技术作为染色体损伤的快速检测方法,近年来就获得广泛应用,紫露草微核技术,蚕豆根尖细胞微核技术应用于水质污染监测取得实质性进展,具有良好的指示作用。
  • 植酸酶分子结构与功能研究进展 免费阅读 下载全文
  • 根据植酸酶的最新研究进展,综述了植酸酶的分子结构与空间构象,作用机制和对植酸降解的途径及其在酶学和蛋白质组学中的地位,并且对植酸酶今后研究发展方向作一探讨。
  • 携带猪β干扰素基因的鸡输卵管生物反应器逆转录病毒载体的构建(王继英 张大龙 杜立新)
    人促红细胞生成素鸡输卵管特异表达载体的构建(赵英会 闫艳春 杜立新 张念华)
    油菜种子特异表达napin基因启动子的克隆及序列分析(熊兴华 官春云 李恂 谭小力 李家洋)
    血小板生成素改构体基因的克隆和序列分析(李彬 蔡英林 韩忠朝 郭娟 顾洁 刘澎)
    深黄被孢霉Δ6—脂肪酸脱氢酶基因导入大豆(卜云萍 王广科 胡国武 孙红妍 任勇 李航 李明春 邢来君)
    山蛭基因组DNA的提取及其PCR扩增产物的分析(谭琳 康由发 施江 郑学勤)
    猕猴桃干叶片DNA的提取及叶绿体基因PCR—RFLP反应(李健仔 李思光 罗玉萍)
    突变型hIL—2在Pichia pastoris中直接诱导表达条件研究(郭芝刚 欧阳克清 杨红 高虹 李新平 陈云高 蔡绍皙)
    Fe(Ⅱ)对漆酶催化活性的影响(王习文 詹怀宇)
    毛栓菌漆酶诱导及部分特性研究(王宜磊)
    胶原蛋白水解肽磷酸化的研究(史景熙 郭睿 蔡国平)
    原子力显微镜对壳聚糖分形结构的研究(王彬 蔡继业 夏科 梁志红 王小燕 陈勇)
    黑曲霉N25株产植酸酶及酶促反应条件研究(王红宁 谢晶 吴琦 刘世贵 陈惠)
    G418和氯霉素作为转基因盐藻的抗生素筛选标记(李杰 黄洁虹 俞梅敏 茹炳根)
    同时提取油茶中DNA和RNA的简便方法(张智俊 谭晓风 陈永忠)
    四种杆状病毒血清学关系的研究(高建明 郭胜娟 彭建新 洪华珠)
    鲫鱼血清凝集素的生物学性质研究(凌善锋)
    D—核糖生产菌株的生长形态变化及快速记录方法(荆迎军 吴兆亮 彭彦峰)
    应用微波辐射促进组织块浸银染色(楚德昌)
    基于遗传算法的麦角固醇分批发酵动力学参数估算(熊宁波 魏纪平 张国政)
    以甘蔗糖蜜为碳源发酵生产海藻糖的研究(王兰 肖冬光)
    小球藻吸附镍离子的研究(吕福荣 杨海波 李英敏 张欣华 于媛 刘艳)
    血脂康与阿托伐他汀降脂作用的比较(曲晓军 夏海华 孙建华 于冲 刘宇峰 王金英)
    不同化学因子对喜树细胞悬浮培养生长效应的研究(高桂珍 周吉源 秦凡)
    烟叶果胶质分解菌的选育(邓国宾 李成斌 李雪梅 杨伟祖 周瑾 张灼)
    分子标记技术在水杉研究中的应用(钟华 谢婷婷 刘中来)
    根癌土壤杆菌转化水稻研究进展(周小云 饶力群)
    微生物纤维素酶分子生物学研究进展(张鸿雁 陈锡时)
    微生物脂肪酶分子改造研究进展(唐良华 夏黎明 苏敏)
    国外纳豆激酶的开发现状(陈丽娟 沙长青 奚新伟 刘宇峰 王佳龙)
    氧化亚铁硫杆菌生物冶金的新进展(乐长高 姜国芳 刘云海)
    微核技术及其在监测水质污染中的应用(刘瑞祥 任嘉红 金山 常惠丽)
    植酸酶分子结构与功能研究进展(程海娜 莫湘涛 陈宇 夏立秋)
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