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文献检索:
  • 甘油脱水酶gldC基因克隆、表达与鉴定 免费阅读 下载全文
  • 目的:表达及纯化甘油脱水酶γ亚基蛋白。方法:使用PCR及DNA重组技术,将甘油脱水酶7亚基基因gldC重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL—c2x中,在大肠杆菌中进行表达。结果:转化重组质粒pMAL/gldC的大肠杆菌经IPTG诱导,SDS—PAGE分析显示表达出的MBP—gldC融合蛋白相对分子质量约66kD,与预期大小一致,并经Western blot分析证实。用直链淀粉树脂亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白。结论:成功地获得甘油脱水酶γ亚基融合蛋白,以便进一步研究其生物学性能。
  • 家蝇抗菌肽Cecropin-His_6融合基因的克隆、序列分析及其表达载体构建 免费阅读 下载全文
  • 克隆家蝇幼虫抗菌肽Cecropin—His_6融合基因,构建其真核表达载体,为更深入的抗菌肽活性研究及制备新型肽类抗生素创造条件。该文从家蝇幼虫组织中提取总RNA,RT—PCR扩增编码Cecropin开放阅读框cDNA序列,将其克隆至pUCm—T载体进行序列测定;然后用含6×His标签序列的下游引物克隆Cecropin—His_6融合基因,并将其构建于真核表达载体pcDNA3.1(+)中;同时应用生物信息学对融合基因的理化性质和二级结构进行预测分析。结果表明,RT—PCR扩增得到约230bp的目的cDNA片段。与Genebank中报道的家蝇Cecropin cDNA序列存在一个无义变异差异(Lys:AAG→AAA);6×His标签成功融合到Cecropin的C端。Cecropin—His_6融合基因的克隆和真核表达载体的成功构建,为进一步制备抗耐药菌的肽类抗生素奠定了基础。
  • 芽孢杆菌酰基高丝氨酸内酯酶基因的克隆及表达 免费阅读 下载全文
  • N-酰基高丝氨酸内酯(N—acyl—homoserine hctones.AHLs)作为细菌群体应答系统(Quorum—sensing)中的关键信号分子,其浓度是决定许多动、植物病原菌致病基因的表达的关键因子,酰基高丝氨酸内酯酶基因可以水解AHk丹子的内酯键,使.MILs失去生物活性,从而减弱致病菌的危害.该研究旨在从芽孢杆菌中克隆酰基高丝氨酸内酯酶基因并获得纯化蛋白。根据已知酰基高丝氨酸内酯酶基因的保守序列设计引物,利用PCR方法从2株芽孢杆菌的基因组DNA中克隆出阿个基因SS1和SS10。利用在基因库中进行同源比对.结果表明SS1和SS10编码的蛋白产物SS1和SS10均为酰基高丝氨酸内酯酶。将两个基因在大肠杆菌中诱导表达,通过亲和层析获得了纯化蛋白。
  • KATP通道基因在大鼠组织中的表达 免费阅读 下载全文
  • 为检测大鼠肺动脉平滑肌及支气管平滑肌中KATP.通道亚基的表达情况,应用RT-PCR技术.从原代培养的Wistar大鼠肺动脉平滑肌及支气管平滑肌细胞第3—5代提取总RNA,逆转录.并进行PCR扩增鉴定.发现肺动脉平滑肌细胞有Kir6.1、SUR1和SUR2B的表达,其中SUR1表达量较弱,支气管平滑肌细胞有Kir6.1和SUR2B的表达。
  • 对高粱BTAM428×ICS—12B杂交F3代及部分抗感品种的SCAR分析 免费阅读 下载全文
  • 用与抗蚜基因紧密连锁的OPN—17 727、OPN-08 373 RAPD标记,转化得到的SCAR标记对F3代及部分抗感品种进行SCAR检测。将F2代抗感群体留种种于田间,取在孕穗期F3植株叶片提取总DNA进行SCAR分析,得到了F3抗感个体的特异性谱带,同时在部分抗性品种中也得到了OPN-07 727、OPN-08 373二条特异谱带,而感性品种中则未见.从而为分子标记辅助育种提供了可靠的依据。
  • 广东地区SARS—COV细胞培养模型的建立和初步应用 免费阅读 下载全文
  • 目的:建立中国广东地区SARS—CoV细胞培养模型。方法:通过将SARS—CoV广东地区分离株GD322在Vero E6细胞中连续传代,检测TCID50,获得稳定的细胞模型。利用此细胞培养模型,对不同温度、紫外线等条件下SARS-CoV的存活时间进行了比较。对重组人复合干扰素α抗病毒效果进行了筛查。结果与结论:SARS—CoV对外界环境抵抗力比普通冠状病毒强,对重组人复合干扰素α有较高的敏感性,抑制指数达4.9。
  • 等位基因特异性引物PCR技术及其应用研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:研究建立等位基因特异性引物PCR技术体系,并将其应用于基因单核苷酸多态性研究工作。方法:通过美国国家生物信息中心(NCBI)的genBank获取基因序列及其相应位点的SNP信息。利用Primer5.0软件设计引物,并经NCBI的Blast2.0软件检验其特异性。结果:建立了单一等位基因特异性引物PCR(SASP—PCR)与嵌套式等位基因特异性引物PCR(NASP-PCR)两种技术,并应用于β2肾上腺素受体及内皮源性一氧化氮合酶基因单核苷酸多态性的研究,证实该技术的稳定性和优越性。结论:等位基因特异性引物PCR技术是一种更为简便、特异性较高、费用少的、便于推广的SNP检测方法,特别是在群体基因单核苷酸多态性研究中更有优势。
  • 菌株S.tz的抗菌活性及其生物学研究 免费阅读 下载全文
  • 从沈阳天柱山土壤中分离到一种链霉菌S.tz,试验表明它所产生的水溶性抗生素不但对植物病毒有较好的防效.而且具有很强的抗真菌活性,对甜瓜枯萎病菌.番茄叶霉病菌,烟草赤星病菌等多种植物病原真菌表现强烈的抑菌效果,该菌株的形态特征.培养特征、生理生化特性等种的鉴定特征与不吸水链霉菌(Streptomyces ahygroscopicus)相似,初步鉴定该菌株是不吸水链霉菌的一个新的变种。
  • 苏云金芽孢杆菌HD-1伴孢晶体水解规律的研究 免费阅读 下载全文
  • 采用HCl将蛋白质彻底水解的方法对苏云金芽孢杆菌HD-1伴孢晶体的水解规律和酸水解条件下芳香族氨基酸的被破坏程度进行了研究,不经衍生HPLC法直接测定水解样中酪氨酸的含量。得出酸水解的最佳时间为24h、水解剂的用量为1.0mlHCl/mg伴孢晶体、水解最佳温度为110℃。该研究为Bt制剂毒力效价的测定奠定了基础。
  • 蜜蜂酯酶同工酶的比较研究 免费阅读 下载全文
  • 用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法分析了膜翅目蜜蜂总科4个属,即切叶花蜂属、甜花蜂属、熊蜂属和蜜警属的工蜂以及蜜蜂属的不同种个体样品的酯酶同工酶。结果表明:蜜蜂总科内各属间酶谱明显不同,每个属都有各自固定的谱型,彼此容易区分。同一属内不同种蜜蜂的同工酶谱相似,其中黑色蜜蜂和黑腹蜜蜂以及黄色蜜蜂和黑腹蜜蜂亲缘关系最近;而黑色蜜蜂和黄腹蜜蜂以及黄色蜜蜂和黄腹亲缘关系最远。此外,在实验的基础上讨论了用酯酶同工酶电泳酶谱作为昆虫分类学研究手段的可行性。
  • 反胶束体系中维生素E的胆甾醇酯酶催化水解 免费阅读 下载全文
  • 目的:探索反胶束体系中维生素E醋酸酯的酶促水解规律。方法:以维生素E醋酸酯的水解产物α-生育酚的生成量为检测指标,考察温度、pH值、离子强度、酶浓度、表面活性剂浓度、体系含水量等反应条件对胆甾醇酯酶催化活性的影响。结果:在卵磷脂/胆固醇/环己烷反胶束体系中,胆甾醇酯酶对维生素E醋酸酯具有催化活性。结论:胆甾醇酯酶发挥水解活性的最佳反应条件如下:温度为38℃,体系pH值为8.0,胆甾醇酯酶浓度为11U·mL^-1,牛磺胆酸钠浓度为50mmol·L^-1,表面活性剂浓度为0.02mol·L^-1,含水量W0为10.5。
  • 亚硝化细菌的分离和特性的研究 免费阅读 下载全文
  • 从厌氧/好氧(A/O)工艺的废水处理系统活性污泥中分离出亚硝化细菌A5,鉴定为亚硝化单胞菌(Nitrosomonas sp.).并对其特性进行了研究。得出氨氧化作用最适的温度为32℃,最适的pH值为8.0,需要充足的溶解氧。另外.亚硝化细菌A5具有较高的耐盐能力,NaCl或Na2SO4浓度为50g/L范围内,其氨氧化作用没有受到明显的抑制,适合于投加到处理含有较高的溶解性盐和较高离子强度的废水生化处理系统中去除氨氮。
  • 茁芽短梗霉原生质体激光诱变及高产菌株筛选 免费阅读 下载全文
  • 目的:通过普鲁兰(pullulan)产生菌-茁芽短梗霉(Aureobasidium Pullulans)原生质体的激光诱变,以得到普鲁兰高产菌株。方法:利用正交实验研究了茁芽短梗霉原生质体的制备与再生并确定了其最佳条件为:菌体以1%的甘氨酸预处理;在0.1mol/L pH 6.0柠檬酸一柠檬酸钠缓冲液,含0.7mol/L NaCl的高渗稳定液中;经蜗牛酶0.2%、纤维素酶0.1%、溶菌酶0.2%的混合酶酶解15min。采用He-Ne激光诱变茁芽短梗霉原生质体筛选得到普鲁兰高产菌株J208,其蔗糖转化率达到53.3%,是原始菌株的10.6倍。结论:用激光诱变茁芽短梗霉原生质体是获得普鲁兰高产菌株的新途径。
  • 诱变选育高产海藻糖的酵母菌株 免费阅读 下载全文
  • 以酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae HY01为出发菌株,分别对其进行化学诱变和紫外诱变。选用5-溴尿嘧啶和盐酸平阳霉素两种低毒性诱变剂联合使用,通过均匀设计确定了两种诱变剂的最佳配比即5-Bu浓度为300umol/L、平阳霉素浓度为5umol/L时,获得一定数量的正突变株,最高海藻糖含量是15.98%。在紫外诱变过程中经摇瓶初筛、复筛获得了高产海藻糖菌株,其海藻糖含量为19.52%,比出发菌株提高了35%。
  • 产1,3-丙二醇菌株丁酸梭菌的诱变育种 免费阅读 下载全文
  • 甘油由丁酸梭菌转化成1,3-丙二醇的研究是厌氧条件下进行。为了获得1,3-丙二醇的高产突变株,以丁酸梭菌为出发菌株进行诱变处理。经过硫酸二乙酯(DES)化学诱变得到2株高产正突变株C.but2031和C.but2046,再经过紫外线和亚硝基胍(NTG)复合诱变得到突变株C.but3037。经过初筛、复筛和传代实验,表明其是稳定的突变株。C.but3037的1,3-丙二醇产量由出发菌株的2.2g/L提高到15.7g/L,提高了6.13倍,
  • 两种富集方法相结合对蓖麻毒素进行SELEX筛选研究 免费阅读 下载全文
  • 为了获得能特异识别具有细胞毒性的蓖麻毒素蛋白寡核苷酸适配子,体外构建了含40个随机序列全长87nt的随机ssDNA文库,采用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术方法,结合微孔板和亲和树脂两种分离、富集方法,经过数轮筛选,文库与蓖麻毒素的结合率达到了38.5%。结果表明,以亲和树脂为分离介质进行筛选,富集效果非常明显。
  • 酪酸菌对动物肠道致病菌体外拮抗作用的研究 免费阅读 下载全文
  • 探讨了酪酸菌对三种畜禽肠道致病菌的体外拮抗作用。将酪酸菌分别和猪大肠杆菌、鸡大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌三种畜禽肠道致病菌按不同的比例混合接种于CL液体培养基中进行厌氧培养,培养过程中三种致病菌的活菌数急剧下降,30h后的菌落数都逐渐降为零。说明酪酸菌在体外实验中对上述三种畜禽肠道致病菌都有较强的拮抗作用,其中酪酸菌对猪大肠杆菌、鸡大肠杆菌和鸡白痢沙门氏菌的最佳接种比例分别为:10:1~100:1、10:1~100:1和5:1~10:1。
  • RAPD技术在黑糯玉米亲缘关系划分上的应用 免费阅读 下载全文
  • 以8个黑糯玉米自交系为试验材料,利用CTAB微量提取法从幼苗中提取DNA,进行RAPD扩增,筛选出3个能产生稳定遗传多态性的引物,分别是OP—A01、OP—A11和OP-006;利用这些引物的扩增出的指纹图谱,进行聚类分析,可将8个自交系划分为4个类群,与各个自交系的来源基本一致。表明RAPD可以用于黑糯玉米亲缘关系的划分。
  • 杜鹃花RAPD条件的优化 免费阅读 下载全文
  • 以井冈山杜鹃为材料建立了杜鹃花RAPD反应优化体系,用于杜鹃花遗传多样性分析,以改进的CTAB法提取杜鹃花属植物杜鹃花叶片总DNA,分别测试了镁离子浓度、dNTP浓度、模板DNA含量、引物浓度、DNA聚合酶量对反应结果的影响。通过各因子的组合比较,建立了杜鹃花RAPD优化体系:20uL PCR反应体积,10×Taq酶配套缓冲液(2uL);1U Taq酶;模板DNA10ng;13.32pmol引物;2.12mmol·L^-1MgCl2;dATP、dCTP、dGTP和dITP各0.15mmol·L^-1。
  • PCR快速筛选重组克隆方法的建立 免费阅读 下载全文
  • 目的:建立一种PCR技术快速筛选重组克隆的方法。方法:用Triton裂解菌落作为模板,以pMD-18T载体多克隆位点设计的引物与目的基因猪β-INF引物设计不同组合,PCR扩增待检重组克隆。结果:PCR技术快速筛选出猪β-INF重组克隆并鉴定了插入方向。结论:在采用PCR方法直接使用细菌菌落参与反应可以快速筛选重组克隆。
  • 顽拗植物龙眼基因组DNA提取方法的研究 免费阅读 下载全文
  • 为从顽拗植物龙眼(Dimocarpus longan Lour.)叶片中获得可供后续分子生物学操作的基因组DNA.针对其组织细胞内富含多酚、多糖、单宁及色素等物质的特点,采用改进的CTAB法和SDS法,即在核裂解之前先破碎细胞.将存在于细胞质中的次生物质去除后再裂解细胞桉.结合其它一些改进措施.提取到的DNA沉淀呈纯白色.极易溶解于TE中。两种改进方法的OD260和OD280比值分别达到1.82和1.73,其鲜叶基因组DNA产量分别为103ug/g和127ug/g:RAPD扩增条带清晰,丰富.完全满足后续分子生物学操作的要求,其中改良CTAB方法效果更为理想,与之埘比.传统的CTAB法和SDS法提取到的DNA沉淀呈浅黄色甚至红褐色,很难被TE溶解,其OD260和OD280比值均低于1.5,也得不到扩增产物。
  • 用CHO细胞进行SCE检验方法探索 免费阅读 下载全文
  • 以姐妹染色单体交换(sister chromatid exchange,SCE)为指标,是继微核检测之后对各种化学物质的遗传毒性做进一步研究的有效方法。通过对化学物质进行SCE的数据统计,可以在一定程度上反映其致突变作用,是遗传毒性的敏感指标。试验中,应用CHO细胞株为主要材料,建立了以体外培养细胞SCE试验方法。在CHO细胞SCE试验中,在正式制片处理前3~4h加入秋水仙素;细胞通过65~70min低渗;第3次固定甲醇-冰乙酸比例为1:2;在加入5-溴脱氧尿嘧啶(BUda)后1~1.5个细胞周期后对细胞进行收获能取到最佳制片效果,得到良好的检测效果。
  • 吸附层析法从啤酒废酵母中提取谷胱甘肽 免费阅读 下载全文
  • 以壳聚糖作为吸附剂,通过吸附层析法从啤酒废酵母泥为原料,经预处理和细胞破碎后得到的富含谷胱甘肽的抽提液中,分离纯化还原型谷胱甘肽。根据试验结果确定最佳提取条件为:上柱啤酒废酵母抽提液的最适pH值为7.0,最适洗脱剂为pH值为4.4的磷酸盐缓冲液。在最适吸附条件下,还原型谷胱甘肽的平均洗脱率为84.18%,平均回收率79.55%。说明此法是可行的。
  • 一种碱裂解菌液直接电泳快速筛选重组子的方法 免费阅读 下载全文
  • 目的:从碱裂解法提取质粒DNA的原理.经过实验摸索获得一种快速、经济、结果可靠的菌液直接碱裂解电泳筛选重组子的方法。方法:不需提取质粒DNA.只需将细菌培养液碱裂解后直接进行普通琼脂糖凝胶电泳分析,就可以快速筛选出转化重组子。结果:结果和提取质粒酶切鉴定鉴定结果一致。结论:经实验证明菌液直接碱裂解电泳筛选重组子是一种快速、经济、可靠的方法。
  • 感受态细胞制备与保存方法的比较研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:确立一个能制备高转化率感受态细胞并长期维持其感受性的实验方案。方法:比较CaCl2法、TSS法、超高效法制备感受态细胞的效果,选用三者中较好的方法进一步探讨不同生长期(OD值0.2~1.1)的细菌对制备感受态细胞的影响,并分别比较了不同冷冻保护剂(7%DMSO,10%甘油)于-20℃、-80℃冰箱保存感受态细胞的效果。结果:三种方法获得的感受态细胞转化率差异极显著(P<0.01)。采用超高效法,OD值为0.36(或0.58)时收集菌体可获得1.1×10^8的高转化率的感受态细胞,以7%的DMSO为冷冻保护剂保存感受态细胞可维持10^7以上的转化率40d以上。
  • 杏鲍菇原生质体制备与再生条件初探 免费阅读 下载全文
  • 研究酶浓度、酶解时间、酶解温度、培养时间、稳渗剂种类、pH值和几种再生培养基对杏鲍菇原生质体制备与再生的影响。最适条件为:在30℃、pH5.5、1.5%溶壁酶条件下,以0.6mol/L甘露醇作为稳渗剂,酶解2.5h,原生质体产量达到2.90×107个/mL。将所得原生质体过滤、纯化、稀释后涂布再生培养基,再生率为0.18%。为利用原生质体技术进行杏鲍菇育种奠定了基础。
  • 氯霉素酶联免疫检测方法的研究 免费阅读 下载全文
  • 通过活化琥珀氯霉素的羧基使其与蛋白联结合成了免疫抗原,并制备了氯霉素的多克隆抗体,建立了氯霉素直接竞争酶联免疫检测方法,检测时间在1h之内。抗体的ELISA效价达3.2×10^5以上,I50为12.9ng/ml,检测范围为0.24ng/ml-678.8ng/ml。抗体与琥珀氯霉素的交叉反应率为174.54%,与其它抗生素的交叉反应率均小于0.01%。牛奶样品中平均添加回收率为106.56%。所建立的氯霉素酶联免疫检测方法达到了我国牛奶氯霉素残留限量0.25ng/ml的要求,为国产的商品化氯霉素酶免疫检测试剂盒的研制莫定了基础。
  • 高山红景天营养器官解剖学的研究 免费阅读 下载全文
  • 利用光学显微镜和扫描电镜对高山红景天营养器官进行了详细观察,结果表明:高山红景天营养器官结构与双子叶多年生草本植物解剖结构相似。其地下部分的根茎和根较发达。营养器官储藏物质分布有一定规律,其含量依次为根茎>根>茎>叶,这与药用部位相吻合。并对高山红景天生存环境与其结构相关性进行了讨论。
  • 腺苷甲硫氨酸合成酶的提取纯化研究 免费阅读 下载全文
  • 腺苷蛋氨酸具有转甲基、转硫和转氨丙基等重要生理作用,已成为治疗疾病的重要药物。目的:为腺苷蛋氨酸合酶的基因克隆做准备。方法:研究了腺苷甲硫氨酸合成酶的提取和纯化。腺苷蛋氨酸合酶为胞内酶,其提取需先进行细胞破碎,然后进行盐析和离子交换层析等方法来纯化。酵母的破壁试验考察了研磨、加入有机溶剂和超声波等不同的破碎方法。结果:超声波破碎法最好,得到粗酶液的酶活力为0.934U/ml;经过硫酸铵盐析后,利用离子交换层析法纯化腺苷甲硫氨酸合成酶,作出了腺苷甲硫氨酸合成酶的穿透曲线和洗脱曲线。
  • 利用大孔吸附树脂提取蜀葵花色素的研究 免费阅读 下载全文
  • 研究利用大孔树脂吸附和分离蜀葵(Althaearosea(L.)Cavan)花红色素,比较了D-072、D-401、D-301-G、D-101、NKA-9、D-290、D-110七种树脂对该色素的静态吸附情况以及不同极性解吸剂对吸附色素的树脂洗脱的效果,从中选择出吸附和解吸效果最佳的树脂以及较适的解吸剂。结果表明:用D-401大孔吸附树脂作吸附剂,色素吸附率达91%;解吸剂用含0.1%HCl的60%酸化乙醇,色素可被充分洗脱下来,解吸效果较好;树脂通过回收再生后可重复利用。大孔吸附树脂法精制蜀葵花色素工艺相对简单,原料、试剂利用率较高。
  • 生物脱硫菌根癌土壤杆菌UP-3的固定化研究 免费阅读 下载全文
  • 生物脱硫催化剂固定化研究对生物脱硫技术的推广应用具有重要的意义。该文以筛选出的具有脱硫能力的根癌土壤杆菌UP-3为固定化研究对象,二苯并噻吩(DBT)为生物催化脱硫的模型化合物,主要考察了菌株UP-3的培养条件、固定化方法和载体、固定化操作条件和固定化细胞的使用条件。结果表明:以桑特斯培养基在30℃下培养28h的根癌土壤杆菌UP-3具有最佳活性。采用3wt%海藻酸钠水溶液为包埋载体,液菌比为20:1,在4℃下1wt%CaCl2水溶液中固定化24h,得到的固定化细胞脱硫性能最好。在30℃下,反应6d可将浓度为625mg/L的DBT降解60%以上。
  • 蔗渣浆CEH漂白废水的毒性及毒性污染负荷的研究 免费阅读 下载全文
  • 采用发光细菌法对蔗渣浆CEH三段漂白废水进行了毒性研究,其中C段废水的毒性最大,其EC50为28.83%,属于强毒级别;E段、H段废水的E%分别为68.92%、267.9%,分别属于毒、无毒级别;其中C段的毒性排放负荷约占总废水毒性排放负荷的67.5%左右;结果表明,漂白废水的毒性排放负荷较大,约为423.92(TU·m^3,吨浆),相当于42.93(g HgCl2/吨浆),对其治理不容忽视。
  • 小球藻对镉离子的吸附速率方程 免费阅读 下载全文
  • 研究了小球藻对Cd^2+的吸附动力学。研究表明,小球藻对Cd^2+有一定的吸附作用,在吸附的起始阶段,吸附速率较快,且随温度的升高吸附速率增大,吸附过程在20min内达到平衡。结果还表明,该吸附是简单的一级反应,并由此建立了吸附反应的速率方程,推算出吸附反应的活化能Ea=31.42kl/mol。
  • 相思根瘤菌培养基优化及其固氮酶活性研究 免费阅读 下载全文
  • 研究了2株相思根瘤菌在4种培养基中的生长情况,并在此基础上应用正交实验19(34)对相思根瘤菌进行优化培养基研究,筛选出相思根瘤菌优化培养基配方。结果表明:MZ菌株与YM2菌株在各自优化培养基的菌体数量高达8.2×10^9个/mL与6.3×10^9个/mL,分别为原有培养基的3.64倍与1.14倍;另外用乙炔还原法测得它们的最高固氮酶活性分别为0.963ug.mL^-1.d^-1与0.280ug.mL^-1.d^-1。
  • 一株根瘤菌培养条件优化及代谢调控研究 免费阅读 下载全文
  • 研究了柠条根瘤菌的生理学特性,通过摇瓶试验确定了最佳培养基配方和最适培养条件,应用10L-自动控制发酵罐在优化条件下进行了分批发酵试验,并以月桂酸盐为调节剂进行底物水平的代谢调控。试验结果表明,该菌株生长速率快(0.6608g·L^-1·h^-1)、发酵周期短(27h)、产物PHB产量高(6.61g/L),通过代谢词控可获得3-羟基丁酸和3-羟基辛酸异型共聚体[P(HB-HO)],是一株生产性状优良的生产菌株,有着良好的开发应用前景。
  • 假单胞菌S-2降解甲胺磷性能的研究 免费阅读 下载全文
  • 从甲胺磷生产车间分离到一株假单胞菌编号为S-2。S-2可利用甲胺磷为唯一氮源,但不能利用甲胺磷为唯一磷源。该文对S-2体内具有的降解甲胺磷的酶类进行了研究,初步断定:S-2可代谢产生酸性磷酸酶,主要在胞外降解甲胺磷。S-2在甲胺磷诱导的情况下,这些降解酶类可大量聚积。用诱导过的菌液降解甲胺磷比未经诱导的快了2d左右。
  • 丽格海棠的组织培养 免费阅读 下载全文
  • 由于丽格海棠通过扦插获得的量有限,进口种子的价格又很昂贵,所以以它的叶、茎、花茎、叶柄等营养器官作为外植体,进行组织培养来快速获得丽格海棠。通过诱导芽分化和诱导愈伤两种途径,研究不同植物生长调节剂及浓度,对外植体萌发和生根的影响。研究表明基本培养基为MS,最佳分化培养基为6-BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.mg/L;花土:沙子=1:1,是丽格海棠最佳的驯化移栽基质,在该基质中生根苗移栽成活率达90%。
  • 黑木耳多糖的提取与纯化 免费阅读 下载全文
  • 黑木耳干子实体经复合酶解结合热水浸提法提取,超过滤,鞣酸法去蛋白,DEAE-52和Sephacryl S-400分子筛柱层析纯化得到精美糖(AAP1)。其含糖量为89.5%。经薄板层析得到单一斑点,经琼脂糖凝胶电泳得到单一区带,表明为分子大小均一的单一组分多糖。
  • 番茄蔗糖代谢关键基因的分子生物学研究 免费阅读 下载全文
  • 蔗糖代谢相关的酶类主要有转化酶、蔗糖合成酶和蔗糖磷酸合成酶。该文着重对番茄中这些酶的编码基因表达与转基因方面的近期研究进行分析评述。
  • RNA干扰应用新进展 免费阅读 下载全文
  • RNAi是dsRNA诱导的序列特异的基因沉默,siRNA是主要诱因。该文重点综述siRNA的特征、合成方式、转染及转染后检测方法的研究进展;RNAi技术在细胞信号传导途径分析、冗余基因确定、基因功能检测、基因治疗、药物开发等研究领域应用新进展及在相关应用领域仍待解决的问题。
  • 单链构象多态性技术在微生物群落动态监测中的应用 免费阅读 下载全文
  • 详述了单链构象多态性技术实现的基本过程和关键步骤.以及在微生物群落结构和动态分析中的应用。还针对SSCP技术存在的问题,根据实践经验提出了一些改进建议,认为在进行复杂微生物群落分析时,应采用低pH值(pH77)的TBE电泳缓冲液,并以λ核酸外切酶将PER产物中的反意义链去掉,从而减少大量非特异的异源双链带的出现,提高技术的分辨率。采用淡技术能够很好地监测到群落中优势种群的动态变化,从而为工艺运行提供了可靠的依据。
  • Myogenin基因的分子生物学综述 免费阅读 下载全文
  • 对肌细胞生成素(myogenin,MyoG)的作用机制及其基因的定位、结构、遗传变异及其与经济性状的关系等进行了综述。
  • 抗植物细菌病害基因工程的研究进展 免费阅读 下载全文
  • 综述了利用基因工程技术提高植物抵抗细菌病害能力的研究进展。植物抗细菌病害基因工程的方法包括:阻断病原细菌的致病途径,强化植物抗病反应及其信号转导途径,导入植物防御基因,导入非植物源抗菌蛋白的编码基因,利用细胞调亡反应控制病害的发生。随着基因组学和功能基因组学的发展,和对植物与病原细菌之间相互作用更深入的了解,植物抗细菌病害基因工程所面临的问题会逐步得到解决,因此利用植物基因工程技术培育抗病品种将具有广阔的应用前景。
  • HIV-1分型技术进展 免费阅读 下载全文
  • 建立发展大规模、准确、快速、经济的HTV-1分型技术对于及时监测HTV-1流行状况,预测流行趋势,制定科学的防治策略具有重要的参考价值。该文就近年来HTV-1基因分型、血清学分型、表型分型等分型技术的发展及其优缺点做一综合比较。
  • 棉花黄萎病及其抗病育种的研究 免费阅读 下载全文
  • 就棉花黄萎病菌的致病机理、棉花的抗黄萎病机制、抗黄萎病的遗传方式以及抗黄萎病棉花育种等方面的研究进行了综述。
  • [论著]
    甘油脱水酶gldC基因克隆、表达与鉴定(陈永胜 刘长江 刘春萍 邵敬伟 翟景波)
    家蝇抗菌肽Cecropin-His_6融合基因的克隆、序列分析及其表达载体构建(徐建华 朱家勇 金小宝 许琴英)
    芽孢杆菌酰基高丝氨酸内酯酶基因的克隆及表达(宋水山 马宏 贾振华 高振贤 王艳敏 吴志国)
    KATP通道基因在大鼠组织中的表达(宋苏 李从强 何光源)
    对高粱BTAM428×ICS—12B杂交F3代及部分抗感品种的SCAR分析(李玥莹 赵姝华 马纯艳)
    广东地区SARS—COV细胞培养模型的建立和初步应用(赵卫 方丹云 周经姣 张文炳 晏辉钧 胡族琼 龙北国 江丽芳)
    等位基因特异性引物PCR技术及其应用研究(马厚勋 牛永红 李章勇 谢正祥)
    菌株S.tz的抗菌活性及其生物学研究(杜春梅 吴元华 平文祥)
    苏云金芽孢杆菌HD-1伴孢晶体水解规律的研究(曲冬梅 弓爱君 王丽华 高鹤永)
    蜜蜂酯酶同工酶的比较研究(何士敏 肖静 白士博)
    反胶束体系中维生素E的胆甾醇酯酶催化水解(许琼明 袁悦 王中彦 莫凤奎)
    亚硝化细菌的分离和特性的研究(曾国驱 许玫英 梁燕珍 岑英华 邓穗儿 孙国萍)
    茁芽短梗霉原生质体激光诱变及高产菌株筛选(王雪松 王莹 于晓迪 杨庆鑫 于笑坤 初宇卓 范豪 刘兰英)
    诱变选育高产海藻糖的酵母菌株(张丽杰 邸进申 全学军 赵天涛 张雪莲 李英杰)
    产1,3-丙二醇菌株丁酸梭菌的诱变育种(李凤梅 刘长江 郑艳 王希尧)
    两种富集方法相结合对蓖麻毒素进行SELEX筛选研究(唐吉军 谢剑炜 邵宁生 沈晓书)
    酪酸菌对动物肠道致病菌体外拮抗作用的研究(唐宝英 朱晓慧 刘佳)
    [技术与方法]
    RAPD技术在黑糯玉米亲缘关系划分上的应用(郭彦 杨洪双 周国利 于立权 吴玉厚)
    杜鹃花RAPD条件的优化(赵喜华 王曼莹)
    PCR快速筛选重组克隆方法的建立(张传生 耿立英 杨娜娜 孟春花 朱靖 杜立新)
    顽拗植物龙眼基因组DNA提取方法的研究(肖璇 孙敏 王心燕 乔爱民)
    用CHO细胞进行SCE检验方法探索(薄芯 李京霞)
    吸附层析法从啤酒废酵母中提取谷胱甘肽(邱雁临 殷伟 潘飞 杨翠珍)
    一种碱裂解菌液直接电泳快速筛选重组子的方法(熊敏 李青 李文涵 费世江 吴雄文)
    感受态细胞制备与保存方法的比较研究(罗婵 汤刚彬 谢体三 石德顺)
    杏鲍菇原生质体制备与再生条件初探(刘敏 李娟 周波 贾乐)
    氯霉素酶联免疫检测方法的研究(赵静 王保民 李召虎 何钟佩 田晓莉 段留生 殷俐娜 李季)
    高山红景天营养器官解剖学的研究(王泽方 胡宝忠)
    [开发与应用]
    腺苷甲硫氨酸合成酶的提取纯化研究(陈小龙 王远山 郑裕国)
    利用大孔吸附树脂提取蜀葵花色素的研究(孙健 蒋跃明 彭子模)
    生物脱硫菌根癌土壤杆菌UP-3的固定化研究(张建辉 侯影飞 俞继仙 孔瑛)
    蔗渣浆CEH漂白废水的毒性及毒性污染负荷的研究(方战强 李友明 陈中豪)
    小球藻对镉离子的吸附速率方程(李英敏 杨海波 吕福荣 刘艳 张欣华 于媛)
    相思根瘤菌培养基优化及其固氮酶活性研究(尚军红 康丽华 罗玉萍 江业根 马海宾)
    一株根瘤菌培养条件优化及代谢调控研究(张建国 冯涛 肖婧凡 赵良启)
    假单胞菌S-2降解甲胺磷性能的研究(武晓炜 吴志国 王艳敏 董超 张丽萍 史延茂 杨迎霞)
    丽格海棠的组织培养(李海燕 徐永清 樊锐锋 胡宝忠)
    黑木耳多糖的提取与纯化(孔祥辉 张介驰 戴肖东 李景鹏)
    [专题综述]
    番茄蔗糖代谢关键基因的分子生物学研究(姜晶 李天来)
    RNA干扰应用新进展(徐庆华 付畅 黄永芬)
    单链构象多态性技术在微生物群落动态监测中的应用(赵阳国 任南琪 王爱杰 刘广民 王旭)
    Myogenin基因的分子生物学综述(周国利 朱奇 吴玉厚 郭彦)
    抗植物细菌病害基因工程的研究进展(王艳敏 贾振华 高振贤 马宏 张霞 宋水山)
    HIV-1分型技术进展(张喜红 袁均林)
    棉花黄萎病及其抗病育种的研究(丁笑生 于广丽)
    《生物技术》封面

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