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  • 陆地棉EST长度多态性与其SSR分布特征相关性分析 免费阅读 下载全文
  • 目的:分析陆地棉EST长度多态性与其SSR分布特征的相关性。方法:从NCBI公共数据库下载陆地棉EST序列,应用SSRIT搜索SSR,分析20000条无冗余的EST序列。结果:在剔除低质量和冗余的序列后,得到全长为7363.878kb的无冗余EST序列7322条,其中含有SSR位点的EST序列数520条,占被分析EST比例的2.60%。长度在400bp以下的EST序列含SSR的比例为1.46%;长度在400bp以上的EST序列含SSR的比例为8.94%。在1—6bp的重复基元中,二核苷酸重复基元的SSR重复频率最高,占总数的63.46%,其次是三核苷酸,占总数的34.04%。二核苷酸类型(AG)n、(AT)n和三核苷酸类型(AAG)n、(ACC)n、(ACT)n、(AAT)n是SSR的主要重复基元。结论:棉花EST—SSR可用于棉花分子标记,为有针对性设计陆地棉EST—SSR引物奠定基础。
  • SMART技术构建栀子cDNA文库 免费阅读 下载全文
  • 目的:构建栀子叶片cDNA文库。方法:提取栀子叶片总RNA。利用SMART技术合成双链cDNA。双链cDNA经限制酶Sfil酶切后与pDNR—LIB质粒连接。利用电刺激转化法将重组质粒导人E.coi DH5 α而获得文库。利用PCR法检测文库的重组率。结果:原始文库滴度为2.63×10^5 cfu/ml。随机检测文库中的15个克隆,表明重组率约为86.7%。选择14个插入片段的长度在400bp以上的克隆进行测序和生物信息学分析,结果预测的全长基因占所检测序列的64.3%。结论:成功构建了栀子叶片的cDNA文库,为栀子基因的结构和功能的研究提供了基础。
  • 水稻胚乳特异性启动子的克隆及序列分析 免费阅读 下载全文
  • 目的:克隆获得水稻胚乳特异表达启动子pGluB-1。方法:采用PCR方法从水稻“台粳9号”基因组DNA中扩增出pGluB-1启动子序列,并克隆至pMD20-T载体上,酶切鉴定后进行测序并对测序结果进行生物信息学分析。结果:获得大小为1353bp的pGluB-1启动子序列,该序列与已报道序列的同源性为97%。启动子功能预测及顺式作用元件分析表晨所克隆的启动子序列含有ACGT基序、AACA基序、GCN4基序和醇溶蛋白框等胚乳特异表达必需的调控元件,其序列差异可能是由于不同品种个体差异及多态性的影响。结论:成功克隆出pGluB—1启动子,为实现外源目的基因在水稻胚乳中特异性表达奠定了实验基础。
  • 嗜热古菌S.solfataricus小热激蛋白基因的克隆及表达 免费阅读 下载全文
  • 目的:3A嗜热古菌Sulfolobus solfataricus中克隆一种新的小热激蛋白SsHsp14.1的基因,并研究其表达和生物活性。方法:用PCR技术以S.solfatarictts基囚组为模板扩增得到目的基因序列片段,并将其克隆到pET-28a(+)中,转化到Ecoli BL21(DE3)中经IPTG诱导表达,纯化后对产物进行生物活性测定。结果:从菌株S.solfataricus中克隆出目的基因,该基因的编码框由375个碱基组成,编码的蛋白质由124个氨基酸组成。含该质粒的大肠杆菌经诱导表达了一个与预期理论值相符的约14kDa的蛋白,利朋亲和层析和凝胶柱分离纯化了重组蛋白。试验证明纯化后的重组SsHsp14.1具有分子伴侣活性,重组蛋白在体内表达时能提高Ecoli细胞的耐热性。结论:成功克隆SsHsp14.1基因并表达出蛋白,并明确了其分子伴侣活性,为该热激蛋白的研究和应用奠定基础。
  • 人抗酶抑制因子-1的克隆与原核表达 免费阅读 下载全文
  • 目的:克隆人抗酶抑制因子-1(omithine decarboxylase antizyme inhibitor—1,OAZI-1)cDNA,建立在大肠杆菌中原核表达并纯化人OAZI-1蛋白的实验技术。方法:巢式RT—PCR法从人A549总RNA中扩增人OAZI—1 cDNA并构建pET-28a/OAZI-1原核表达质粒。该质粒转化大肠杆菌原核表达菌BL21(DE3)后IPTG诱导表达。诱导表达出的重组蛋白用Ni—NTA树脂亲和层析纯化。SDS—PAGE和Western法检测重组OAZI—1蛋白的表达和纯化。结果:成功克隆出编码全长人OAZI-1的eDNA序列,并构建出原核表达质粒pET-28a/OAZI—1。DNA测序分析,重组质粒中的OAZI—1 cDNA无突变,与6XHis标签框架对接正确。重组质粒转化人大肠杆菌表达菌BL21(DE3)中后,可用IPTG诱导表达出重组OAZI—1蛋白,该重组蛋白可用Ni—NTA树脂亲和层析纯化。结论:成功建立了人抗酶抑制因子的原核表达和纯化的实验方法,为后续OAZI-1的功能研究奠定了基础。
  • 极端耐热木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌中的整合表达 免费阅读 下载全文
  • 目的:为了在枯草芽孢杆菌中整合表达极端耐热木聚糖酶。方法:将嗜热网球菌(Dictyoglomus thermophilum)Rt46B.1的极端耐热木聚糖酶基因xynB通过穿梭载体pDL整合到B.subtilisl68染色体上,使其实现表达。结果:极端耐热木聚糖基因在枯草芽孢杆菌中成功整合并表达。结论:基因工程菌B.subtilis168-xynB能外泌表达极端耐热木聚糖酶,且表达水平为0.7321U/mL,比在大肠杆菌中的高。酶学性质表明,此酶分子量约为24kD,其最适反应温度为85℃,最适反应pH值为6.5,且在弱碱性条件下稳定。
  • 高糖应激致人PRKCD基因过表达内皮细胞模型构建及鉴定 免费阅读 下载全文
  • 目的:构建高糖应激下人PRKCD基因过表达内皮细胞模型并攀定。方法:设计含Age Ⅰ和Nhe Ⅰ酶切位点的PRKCD基因上下游引物.以含PRKCD基因的原始质粒为模版,PCR扩增获得PRKCD全部序列,经Age Ⅰ和Nhe Ⅰ酶切后与同样酶切后的真核表达载体pDC316-LacZα重组扶得穿梭质粒pDC316-PRKCD,经PCR及酶切、基凶测序整定后,与腺病毒骨架质粒pBHGlox△E1,3Cre共转染293细胞获得重组腺病毒Ad5-PRKCD,行PCR鉴定并反复纯化扩增后用TCID50法测定病毒滴度。分组培养人脐静脉内皮细胞,转染萤组腺病毒后于高糖(25mmol/L)负荷,并没立空载体对照及渗透压对照组,以免疫荧光法检测PKC5在细胞中的表达。结果:目的基因成功插入穿梭质粒,基因洲序结果与GenBank公布序列一致,重组腺病毒Ad5-PRKCD经PCR鉴定及免疫荧光鉴定成功。测得病毒滴度为1.0×10^10 IU/ml。激光共焦聚观察高糖负荷下.胞内PRKCD翻译产物PKC8荧光表达强度明显增强,为正常对照组的1.5倍(P〈0.05),高糖负荷下内皮细胞感染重组腺病毒后PKC8荧光强度明显增加,浆/核荧光强度比值较高糖组进一步降低了35%(P〈0.05),提示核转位明鼎。结论:成功构建了人重组腺病毒Ad5-PRKCD并有效转染人脐静脉内皮细胞,高糖负荷使PKC5表达上调并发生核转位激活,为筛选稳定表达PKC8的内皮细胞株及其蛋白复合体奠定了基础。
  • 矿物作用下A.ferrooxidans中磁小体相关基因的差异表达 免费阅读 下载全文
  • 目的:研究氧化亚铁硫杆菌(Acidithiobacilhts ferrooxidans,A.f)中与磁小体形成相关的mpsA、magA、thy和mamB基因分别在黄铁矿、黄铜矿、磁黄铁矿和闪锌矿的作用下的表达差异,寻找有利于磁小体形成的最佳培养矿物能源。方法:测量以不同硫化矿为能源时的菌体生长特性,用实时定量PCR方法研究与磁小体形成相关基因的表达差异。结果:在以磁黄铁矿为能源时,菌的生长量及多数基因的表达量优于其它三种矿,四个基因相对表达量分别为1.15、2.35、1.32、2.68。结论:磁黄铁矿是A./中磁小体形成的最佳矿物能源。
  • LuxAB标记荧光假单胞菌的菜心根际定殖研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:利用三亲本杂交方法将luxAB发光酶基因标记至荧光假单胞菌PF20001上,所获得的标记菌株PF20001-Lux能稳定发光。将该标记菌株制成微生物制剂,接种菜心进一步研究它在菜心根际的定殖动态和散布规律。方法:利用三亲本杂交方法将luxAB发光酶基因标记至荧光假单胞菌PF20001上,将该菌施与菜心生长土壤中,通过接合子发光检测及发光菌落的平板计数来分析荧光假单胞菌在菜心根际的定殖分布情况。结果:PF20001-Lux在根系周围的土壤中的有一定的定殖率,在根内主要定殖在3—4cm根内。PF20001-Lux在菜心种植后7d前就达到最高定殖水平达3.8×10^5CFU/g,随后逐渐下降。结论:PF20001-lux在菜心根际具备良好的适应能力。
  • 产γ-氨基丁酸屎肠球菌的鉴定及其谷氨酸脱羧酶酶学性质 免费阅读 下载全文
  • 目的:鉴定1株产γ氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)的乳酸菌HS3,并研究了其谷氨酸脱羧酶(Glutamate deearboxylase,GAD)粗酶酶学性质。方法:根据形态培养特征、生理生化特征和16S rDNA序列比对及系统发育分析对菌株HS3进行了鉴定。采用菌体细胞破碎后的粗酶液,研究了温度、pH和金属离子对酶活的影响。结果:菌株HS3的形态培养和生理生化特征符合肠球菌属(Enterococcus)特征,其16S rDNA序列与Enterococcus faecium(EU717962)16S rDNA序列同源性达99%,鉴定菌株HS3为屎肠球菌(Enterococcus faecium),菌株HS3GAD最适作用温度为40℃,最适作用pH4.5。酶的热稳定较好,50℃处理4h,在pH3.5~6.0酶活基本稳定。Ca^2+对酶有激活作用,5mmol/L和50mmol/L浓度酶活分别提高了37.41%和17.43%。Ba^2+和Zn^2+在5mmol/L浓度时激活作用明显,而Mg^2+在5mmol/L浓度激活作用较好。结论:菌株HS3的GAD活力较高,稳定性较好,为生物合成GABA提供了新的微生物菌种资源。
  • 阿魏菇多糖高产菌的离子束和激光复合诱变育种 免费阅读 下载全文
  • 目的:诱变筛选阿魏菇多糖高产菌,探索食用菌的离子束和激光复合诱变育种方法。方法:尝试用阿魏菇菌丝单细胞为靶材,以离子束注入和激光辐照为复合诱变手段,采用营养缺陷型筛选办法定性初筛,摇瓶发酵定量复筛。结果:通过离子束注入诱变,获得了2株菌丝体多糖产量分别达到551.80mg/L和659.46mg/L、较1号出发菌株提高了46.5%和75.2%的多糖高产菌PFPH—1和PFPH-2;在此基础上,以激光辐照为复合诱变手段,获得了1株菌丝体多糖产量达到762.50mg/L、较出发菌株PFPH-2提高了15.63%的多糖高产菌PFPH-3。结论:离子束和激光复合诱变育种方法在改良阿魏菇多糖高产性状方面诱变功效显著。
  • 耐碱性木聚糖酶产酶菌株的选育 免费阅读 下载全文
  • 目的:筛选出产碱性木聚糖酶酶活力高的菌株。方法:从碱性环境中采集样品,以自制木聚糖为惟一利碳源,采用刚果红透明圈法于摇瓶发酵法相结合筛选出18株产木聚糖酶酶活较高的菌株,其中1株酶活最高可达335.14 IU/ml。结果:通过培养特性及形态特征初步鉴定为芽孢杆菌。对部分酶学性质研究的结果表明:其作用最适温度60℃,最适pH8.0,在pH9.0条件下仍具有80%酶活力。结论:属于耐碱性木聚糖酶,具有很好的工业应用前景。
  • NTG诱变农抗702产生菌链霉菌702的研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:筛选出产抗真菌活性物质的高产链霉菌702突变株。方法:分别以链霉菌702菌株为试验材料,以庆大霉素为敏感抗尘素,NTC诱变链寄菌702菌株,获得抗庆大霉素突变株。结果:NTC处理90min对菌株的致死率可达73.46%,突变率高达23.64%,经过摇瓶筛选获得高产突变株20-29-12,产素单位达到1443μg/mL,比出发菌株提高了38.08%。结论:采用抗药性致死突变标志的NTC诱变筛选模型可以获得产抗真菌活性物质的链霉菌702高产菌株。
  • 皱边石杉内生真菌DNA提取有效方法比较 免费阅读 下载全文
  • 目的:优化确定适用于皱边石杉内生真菌DNA提取的有效方法,并评价其效果。方法:运用氯化苄改良法、CTAB改良法分别提取皱边石杉内生真菌菌丝体DNA。结果:氯化苄改良法可从17个内生真菌菌丝体中均获得了高质量的DNA,除5、13、14号生长缓慢的内生真菌其菌丝体DNA浓度≤60ng/μL,其余样品的DNA浓度均≥200ng,/μL。而CTAB改良法仅适宜于平板培养菌落生长迅速、菌落疏松,发酵培养菌丝体产量高的1、2、3、9、10、12号菌株。结论:氯化苄改良法是适宜于皱边石杉内生真菌DNA提取的理想方法。
  • 高粱抗丝黑穗病SSR—PCR反应体系的优化 免费阅读 下载全文
  • 目的:找到一种可用于高粱抗丝黑穗病SSR—PCR扩增最适宜的反应体系。方法:利用单因素体系优化的方法,对SSR—PCR反应休系中Taq酶、dNTPs、MgCl2、模板DNA以及引物用量进行了优化,并且用不同引物、不同模板DNA对该优化结果进行验证。结果:实验表明,Taq酶、dNTPs、MgCl2、模扳DNA以及引物的不同用量均对PCR反应结果有显著的影响。最适宜高粱抗丝黑穗病20μl SSR—PCR的反应体系为1U/μL Taq酶2.5μmmol/L dNTPs 1.Oμl,25mmol/L MgCl2 1.5μl,模版DNA2.0-μl(50ng),10μmol/L引物1.5μl,10×Btfffer 2.0μl。验证结果表明,该体系扩增出的条带清晰且稳定。结论:该结果为今后利用SSR—PCR标记技术研究分析高粱抗丝黑穗病奠定了基础。
  • SYBR green实时荧光定量PCR检测微小RNA21的方法建立及在食管鳞癌中的应用 免费阅读 下载全文
  • 目的:建立SYBR green实时荧光定量PCR检测微小RNA miR-21的技术平台及应用。方法:设计微小RNA21和U6的的颈环结构反转录引物和PCR扩增引物,以U6为内参利用SYBR green实时荧光定量PCR法检测小鼠各器官中的微小RNA21的含量。提取16例食管鳞癌患者的肿瘤组织及其近旁组织中的总RNA,检测其微小RNA21表达水平。结果:SYBR green实时荧光定量PCR检测U6和微小RNA21含量的熔解曲线单一,PCR产物特异。在Balb/c小鼠的4种器官中,肝脏、脾脏、肾脏分别为脑组织的8.71、5.38、3.47倍。16对食管鳞癌患者的样本中,14例微小RNA21的拷贝数高于其近旁组织约10.58倍(P〈0.01)。结论:此研究成功建立了SYBR green荧光定量PCR法检测小鼠和人微小RNA-21含量的技术平台,为进一步阐述miR-21在食管鳞癌的发生中的作用提供了新方向。
  • 一株分离自酸梅酱的酵母菌的分离鉴定 免费阅读 下载全文
  • 目的:分离及鉴定来自于新疆塔城民间自制酸梅酱中的酵母菌。方法:用NLI/NIA引物对扩增酵母菌株的26S rDNAD1/D2区,测序结果进行序列分析,用Neighbour—joining(N—J)方法构建系统发育进化树,同时结合酵母的传统形态学鉴定对菌株进行鉴定。结果:26S rDNA D1/D2区序列分析表明菌株KKS与Metschnikowi aff.fructicola D3895相近,相似率为99.2%。在N—J法构建的系统发育进化树中,菌株KKS与Metschnikowia aff.fructicola聚类在同一分枝上。结论:从新疆塔城民间自制酸梅酱中分离得到一株酵母菌并将该菌株鉴定为Metschnikowia aff.fructicola;
  • 正交设计法优化三岛柴胡愈伤组织培养基 免费阅读 下载全文
  • 目的:优化三岛柴胡愈伤组织培养条件。方法:采用正交设计法,以相对生长速率、鲜重和干重为考察指标,对三岛柴胡愈伤组织生长的MS培养基成分进行单因素多水平和多因素多水平考察。结果:最佳培养基为:MS+3%蔗糖+10/40 mmol·L^-1 NH4^+/NO3^-+3.75mmol·L^-1 HPO4^2-+NAA(0.005mg·ml^-1)+6-BA(0.010mg·ml^-1)。最佳培养条件下,愈伤组织相对生长速率为0.1548,干重达0.1668g·瓶^-1。结论:2,4-D与NAA配合使用可以促进三岛柴胡愈伤组织快速生长,L9(3^4)正交设计实验中愈伤组织干重明显高于单因子实验设计的。
  • 基于遗传算法和支持向量机的乳杆菌发酵过程建模 免费阅读 下载全文
  • 由于生化反应过程的复杂性和高度非线性,多数简单的数学模型不能准确描述。该文基于Matlab软件,利用改进的支持向量机(v—SVR)对植物乳酸杆菌发酵这一典型生化过程进行研究,应用遗传算法估计模型最优参数,建立植物乳杆菌的菌体密度预测模型。同时建立传统的logistic动力学模型以进行比较。结果表明,采用结合遗传算法的v—SVR预测模型拟合误差小,皮尔森相关系数(R)更高,可以较好地预测乳酸杆菌的发酵过程,为其优化控制及放大提供依据。
  • 顶羽菊提取物清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成能力的研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:测定顶羽菊不同提取物对亚硝酸钠的清除能力以及对亚硝胺合成的阻断能力。方法:通过索氏提取法和浸提法提取顶羽菊的活性成分,在模拟人体胃液条件下,采用分光光度法测定顶羽菊不同提取物对亚硝酸钠的清除能力和对亚硝胺合成的阻断能力,并与Vc进行了比较。结果:顶羽菊提取物对亚硝酸钠的清除率和对亚硝胺合成的阻断率与其浓度呈正相关,醇提物和水提物对亚硝酸钠的清除率分别可达60%、58%,对亚硝胺合成的阻断率可达86.6%、48.6%。结论:通过与Vc的对照分析可知,顶羽菊提取物具有较强的清除亚硝酸钠和阻断亚硝胺合成的能力。
  • 迎春花色素提取及抗氧化性研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:提取迎春花黄色素研究其抗氧化性能。方法:利用对羟基自由基(OH^-·)和超氧阴离子自由基(O2^-·)的清除能力研究迎春花色素的抗氧化性能。结果:随着迎春花色素量的增加,其清除OH^-·和O2^-·的能力逐渐提高,最高分别可达31.5%和91.0%。结论:迎春花色素对超氧阴离子和羟基自由基均具有较强的清除能力。
  • 细胞因子组合对肝癌细胞HepG2生长的影响 免费阅读 下载全文
  • 目的:探讨细胞因子组合在休外对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用。方法:采用正交试验法,3种细胞因子(IFN—α 2a、IL-2和CM—CSF)分别选择3种浓度,共分为9组组合,利用MTT比包法,检测细胞因子组合处理96h后,对HepG2细胞生长的抑制作用,筛选3种细胞因子最佳组合,并进行形态学观察。结果:处理96h后,不同浓度细胞因子组合对HepG2细胞的生长均有抑制作用,最佳组合为A1B1C1,其抑制率为64.61%。显微镜下可见,绌胞变圆,胞浆中颗粒增多,增殖变慢,细胞间接触不紧密,细胞周围碎片增多。结论:已筛选到3种细胞因子的最佳组合,其在休外能够抑制HepG2细胞的生长。
  • 高活力5’-磷酸二酯酶制备及水解RNA的研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:获得高活力5'-磷酸二酯酶液,提高核酸RNA酶解效率。方法:采用超滤和盐析技术对从麦芽根浸提液中纯化5’-磷酸二酯酶工艺进行研究,采用单因子试验法优化酶解工艺条件。结果:浸提液依次经过5万Da超滤膜浓缩、40%饱和度硫酸铵盐析、5万Da超滤膜脱盐后,酶活力可达1500U/ml;第1次超滤膜透过液可作为浸提液循环使用,酶活力是水浸提的1.15倍;第2次超滤膜透过液浓缩5倍后,可回收56.46%硫酸铵,浓缩母液可按1:2比例循环使厢;在底物浓度5.8%、酶用量8%、反应时间211条件下,RNA酶解率可达95%。结论:初步建立了适合工业化规模的核苷酸生产新工艺。
  • 琼氏不动杆菌FM208850产果胶酶的发酵条件优化 免费阅读 下载全文
  • 目的:优化琼氏不动杆菌FM208850发酵生产果胶酶的培养基组成及发酵条件,以提高其产量。方法:在研究碳源、氮源、无机盐的种类及量的单因素实验基础上,选取香蕉皮、牛肉膏、NaCl和CaCl2做4因素3水平的正交试验。结果:FM208850产果胶酶的最适培养基组成为:香蕉皮2%,牛肉膏0.25%,NaCl 0.2%,CaCl2 0.3%;发酵条件为:初始pH7.0、32℃、2%接种量,培养12h。最优条件下酶活可达160.7U/mL。结论:琼氏不动杆菌FM208850作为新型果胶酶产生菌及罗布麻脱胶菌种,利用香蕉皮作为其发酵产果胶酶的碳源和诱导物是可行的,为其综合利用开辟了新思路。
  • 黑曲霉固态发酵苹果渣产β-甘露聚糖酶的工艺优化 免费阅读 下载全文
  • 目的:对黑曲霉SL~08固态发酵苹果渣生产β-甘露聚糖酶的生产工艺进行优化,旨在探寻苹果渣的综合利用方式,降低β-甘露聚糖酶的生产成本。方法:采用Plackett—Burman试验设计和响应面法进行优化。结果:最佳培养基组成为苹果渣与棉粕1:1(w/w)、尿素2%(w/w)、KH2PO4 0.1%(w/w)、初始含水率59%(w/w)、CaCl 20.2%(w/w)、MgCl 2 0.1%(w/w),300C恒温培养48h,β-甘露聚糖酶酶活力可达539U/g干曲,比基础培养基提高了28.3%,达到了以豆粕与麸皮为生产原料时的产酶水平。结论:采用黑曲霉SL-08对苹果渣进行固态发酵是一种有效的生物转化方式,既可用于β-甘露聚糖酶的生产,取代豆粕与麸皮等常规原料,降低生产成本;也可以对苹果渣进行综合利用。
  • 竹材木素降解菌发酵条件优化及竹材降解红外光谱分析 免费阅读 下载全文
  • 目的:对所筛选菌株进行发酵条件的优化,以期找到适合该菌的最佳培养条件。方法:通过单因素试验及正交试验,得到最佳培养条件,并且对降解后的竹材结构进行红外光谱分析。结果:得到最佳培养条件:培养温度350C,初始pH5.5,摇瓶装量40mL,摇床转速160r/min时,该菌株具有较高的酶活力。Mnp和Lip酶活力分别达到631U/L和340U/L,比原发酵条件提高了45.9%、49.3%。、红外光谱分析后发现竹材中的术质素结构被严重破坏,难降解的大分子长键烃被切断成易降解的小分子短键烃。结论:所筛选菌株对竹材木质素有选择性降解能力,确定其发酵条件后为进一步试验奠定基础。
  • 高效生物表面活性剂产生菌筛选及其性质研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:获得产高效生物表面活性剂的菌株并获得优化培养基。方法:通过从山东文登某加油站附近长期污染富含油质的土壤中逐步采用富集培养基和平板筛选培养基分离筛选菌株并进行优化培养寻找最优生长培养和高产生物表面活性剂的条件。结果:筛选出产表面活性剂的微生物12株,分别命名为BSF1#-BSF12#,从中筛选出1株高效表面活性剂产生菌BSF8#,优化培养结果表明BSF8#的最佳生长pH在7.5左右,最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为蛋白胨,BSF8#培养基中最佳NaCl浓度为2g/L。BSF8#菌株可将发酵液的表面张力由最初的48.29mN/m降到27.79mN/m,上层乳化状发酵液的排油圈最大直径超过7.5cm,并经红外光谱分析确定其生物表面活性剂为1个糖肽类化合物。结论:BSFS#菌株产生的生物表面活性剂活性突出,有较大的开发潜力。
  • 微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件的优化 免费阅读 下载全文
  • 目的:从好氧活性污泥、土壤和河泥中分离筛选具有较高活性的絮凝剂产生菌,并优化其培养条件;方法:通过常规分离获得目的菌株,运用单因素法考察培养时间、培养温度、发酵液初始pH值及临床转速对菌株絮凝活性的影响;结果:得到了絮凝活性较高的菌株,经过优化得出,其最佳培养时间和温度分别为48h和30℃,发酵液最佳初始pH值为7.0,最佳摇床转速为120r/min,在壤佳培养条件下,RF-32对高岭土悬浊液絮凝率为84.32%。结论:从活性污泥中可筛选出较高活性的絮凝剂产生菌,研究发现,菌株的絮凝活性与其生长量呈同步增长趋势,并在一段时间后达到一稳定值。培养时间、培养温度、发酵液初始pH值及摇床转速均能通过一定的作用因素对菌株生长情况产生影响,进而影响其絮凝活性。
  • 絮凝法预处理透明质酸发酵液的研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:提高透明质酸的纯度。方法:研究了絮凝预处理发酵液对醇沉法提取透明质酸的影响,并通过正交试验对预处理条件进行了优化。结果:明矾可作为最佳絮凝剂,正交实验最佳絮凝条件为:絮凝剂添加量1000mg/L、絮凝温度30℃、絮凝转速60r/min、絮凝时间20min。在该条件下处理的HA发酵液相对于未经过处理的对照组,菌体去除率可提高42.6%,蛋白去除率可提高5.9%。
  • 枸杞多糖抗氧化作用的研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:研究枸杞粗多糖(Lycium Barbanlm Polysaccharide,LBP)在小鼠体内的抗氧化作用。方法:用高(400mg/kg·d)、中(200mg/kg·d)、低(100mg/kg·d)剂量的枸杞粗多糖生理盐水溶液对D-半乳糖(100mg/kg·d)之衰老模型小鼠和正常小鼠灌胃。结果:枸杞粗多糖能较显著(P〈0.01)提高小鼠血清、肝脏及脑组织中SOD活性,降低MDA含量;极显著(P〈0.01)提高正常小鼠常压耐缺氧能力和游泳抗疲劳能力;此外小鼠的脾指数和胸腺指数均得到显著提高,表明枸杞粗多糖对提高小鼠的机体免疫水平具有重要的促进作用。结论:枸杞粗多糖对小鼠具有显著的抗氧化、抗衰老作用。
  • 羊血铜锌超氧化物歧化酶(Cu—ZnSOD)的分离纯化 免费阅读 下载全文
  • 目的:对羊血进行提取SOD。方法:采用有机溶剂去除血红蛋白、热变性、丙酮沉淀、DEAE-32离子交换柱层析的方法,对羊红细胞Cu,Zn—SOD进行分离纯化。利用非变性凝胶电泳NBT活性染色鉴定SOD,SDS—PAGE测定分子量。结果:表明1000ml羊血中得到SOD干粉1257mg,总活力为79453U,比活力为3871.4U/mg。活性染色结果证明羊帆SOD有2条带,表明已达到电泳纯。SDS—PAGE测得SOD亚基分子量分别为16.71kDa、15.97kDa。H2O2对羊血CoZn—SOD活性有抑制作用,通过紫外光谱扫描,羊血SOD在231nm处有最大吸收峰。
  • 玉米须天然维生素E的提取工艺研究 免费阅读 下载全文
  • 目的:为充分利用玉米须植物资源,探讨玉米须维生素E的工艺流程最佳提取方法和影响因素。方法:采用索氏回流提取法和甲酯化法对玉米须维生素E进行提取,用紫外分光光度法测定含量。结果:由单因素实验和正交实验得出的最佳提取工艺条件是:提取时间2h,料液比为1:10,甲酯化温度70℃,甲酯化时间1h,得率为0.056%。影响因素依次为:甲酯化时间〉甲酯花温度〉料液比〉提取时间:结论:试验方法简单易操作,且提取效率高、污染少,是提取玉米须维生素E的有效途径,该试验得出玉米须维生素E的含量为0.056%。
  • 微生物环氧化物水解酶的研究进展 免费阅读 下载全文
  • 环氧化物水解酶(EH)是一类能催化外消旋环氧化物水解生成有光学活性的环氧化物和二醇的酶,应用前景广阔。自然界筛选到的微生物往往仔在产酶活力低、对映体选择性不高等问题。近年来,基因工程技术的发展及其在微生物环氧化物水解酶中的应用,改善了酶的催化特性,为酶的工业化应用提供了条件。该文简单介绍了微生物环氧化物水解酶的催化反应机制和快速检测方法,详细命邹了巧氧化物水解酶基因工程方面的研究进展。
  • 叶蛋白提取方法的比较及发酵酸法的应用前景 免费阅读 下载全文
  • 概述了叶蛋自提取的几种方法,其中有水溶液提墩法、加热法(60%加热、90%加热)、酸碱法、纯蛋白质沉淀法、盐析法、凝聚剂沉淀法、超滤法、电浓缩法、反胶团相转移法、有机溶剂沉淀法、发酵酸法等。将发酵酸法和其他的提取方法进行了比较,重点讲述了堡酵选提取叶蛋自的啦点:堑指出叶蛋白在今后开发利用巾的良好前景。
  • 根瘤菌选育研究进展 免费阅读 下载全文
  • 生物固氮是一个全球性的战略课题,其中豆科植物与根瘤菌共生固氮一直是生物固氮研究的焦点。该文从菌株选育的角度,通过对比总结国内外根瘤菌选育方法的研究进展,详细阐述了各种育种方法在根瘤菌选育过程中的应用和优缺点,指出筛选周期过长和筛选技术低效是当前研究中的限制问题,并进一步对选育工作的前景进行了展望。
  • [Research Papers]
    陆地棉EST长度多态性与其SSR分布特征相关性分析(王亚男 陈允峰 樊洪泓 李廷春 林毅 蔡永萍)
    SMART技术构建栀子cDNA文库(高蓝 朱碧云 黄欣)
    水稻胚乳特异性启动子的克隆及序列分析(许明 张铃 黄志伟 程祖锌 杨志坚)
    嗜热古菌S.solfataricus小热激蛋白基因的克隆及表达(徐迅 王永华)
    人抗酶抑制因子-1的克隆与原核表达(何玲 韩钰 王艳林)
    极端耐热木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌中的整合表达(张伟[1,2] 李冠[2] 娄恺[1])
    高糖应激致人PRKCD基因过表达内皮细胞模型构建及鉴定(孙芳[1] 周波[1] 林雪波[1] 段炼[2] 李启富[1])
    矿物作用下A.ferrooxidans中磁小体相关基因的差异表达(刘新星 张剑 郭玉洁 郭宁)
    LuxAB标记荧光假单胞菌的菜心根际定殖研究(夏枫耿[1] 张玲华[2] 梁淑娃[1] 李姣清[2] 王彦[2] 程庆[2] 徐臣超[2])
    产γ-氨基丁酸屎肠球菌的鉴定及其谷氨酸脱羧酶酶学性质(李云 杨胜远 杨韵晴 黄荣城 陈郁娜 刘祥流)
    阿魏菇多糖高产菌的离子束和激光复合诱变育种(陈恒雷[1,2] 武宝山[1] 石伟娜[1] 曾宪贤[1])
    耐碱性木聚糖酶产酶菌株的选育(问清江 吴小杰 李叶昕 慕娟 党永)
    NTG诱变农抗702产生菌链霉菌702的研究(涂璇 刘霞 涂晓嵘 涂国全)
    [Technique and Methods]
    皱边石杉内生真菌DNA提取有效方法比较(禹利君 高思青 史云峰 杨培迪 张慧 黄歌阳)
    高粱抗丝黑穗病SSR—PCR反应体系的优化(牛楠 陆丹 李玥莹)
    SYBR green实时荧光定量PCR检测微小RNA21的方法建立及在食管鳞癌中的应用(马文静[1] 李鲁[2] 吕国栋[1] 刘涛[1] 郑树涛[1] 霍奇[1] 林仁勇[1] 卢晓梅[1])
    一株分离自酸梅酱的酵母菌的分离鉴定(邝海菊 肖婷 何香 兰晓君 艾尔肯·热合曼 索菲娅)
    正交设计法优化三岛柴胡愈伤组织培养基(李善文 张东向)
    基于遗传算法和支持向量机的乳杆菌发酵过程建模(张丽靖[1,2] 宋智健[1] 庄建芬[3] 杨郁[1])
    顶羽菊提取物清除亚硝酸盐及阻断亚硝胺合成能力的研究(库尔班·吐松 展锐 张宏 苏力坦·阿巴白克力)
    迎春花色素提取及抗氧化性研究(高昌勇)
    细胞因子组合对肝癌细胞HepG2生长的影响(徐艳玲 袁彦宝 高晋 孙笛 赵小琳 金立杰)
    [Development and Application]
    高活力5’-磷酸二酯酶制备及水解RNA的研究(张一平[1,2] 华洵璐[1,2] 李靖[1,2] 谢骏[1] 何义进[1])
    琼氏不动杆菌FM208850产果胶酶的发酵条件优化(翟秋梅[1] 薛卫巍[2] 薛永常[1] 郑来久[3])
    黑曲霉固态发酵苹果渣产β-甘露聚糖酶的工艺优化(庄童琳[1,2] 郭凤霞[1] 刘成[2] 朱彤[2] 孙中涛[2])
    竹材木素降解菌发酵条件优化及竹材降解红外光谱分析(周德明 董晓娜 陈彧)
    高效生物表面活性剂产生菌筛选及其性质研究(赵辉[1,2] 闫华晓[1] 杨腾[1] 王霞[1] 苏晓璐[1] 李翔[1] 王德龙[1])
    微生物絮凝剂产生菌的筛选及培养条件的优化(陈文明[1] 魏维鑫[2] 刘标[1])
    絮凝法预处理透明质酸发酵液的研究(吴华昌 马钦元 邓静 徐静 陈哲)
    枸杞多糖抗氧化作用的研究(龚涛[1] 王晓辉[2] 赵靓[1] 马力[1])
    羊血铜锌超氧化物歧化酶(Cu—ZnSOD)的分离纯化(高巍 孙庆林)
    玉米须天然维生素E的提取工艺研究(张宏 库尔班·吐松 阿依帕夏·亚森 萨亚哈提·哈力拜克 苏力坦·阿巴白克力)
    [Review Articles]
    微生物环氧化物水解酶的研究进展(壮晓健 金火喜 胡忠策 郑裕国)
    叶蛋白提取方法的比较及发酵酸法的应用前景(王世宽[1,2] 于海光[1] 许艳丽[1])
    根瘤菌选育研究进展(范运梁 刘雪 戴美学)
    《生物技术》封面
      2010年
    • 01
    • 02

    主管单位:黑龙江省科学院

    主办单位:黑龙江省微黑龙江省科学院微生物研究所

    主  编:沙长青

    地  址:哈尔滨市道里区兆麟街68号

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