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文献检索:
  • 人白细胞介素-38基因的克隆及序列分析
  • 目的:克隆人IL-38基因全长编码区cDNA,并对其进行序列分析。方法:从人皮肤组织中提取总RNA,逆转录为cD-NA,用热启动PCR方法,扩增人IL-38基因的编码区cDNA,通过限制性内切酶酶切后,定向插入pcDNA3.1质粒载体,构建真核表达质粒载体pcDNA3.1-hIL-38,然后进行酶切鉴定与序列分析。结果:人IL-38基因的PCR产物和重组载体经凝胶电泳和酶切鉴定、序列分析证实,其序列与GenBank中数据一致。人IL-38基因的全长编码序列为459bp,编码152个氨基酸。结论:成功的克隆了人IL-38基因并构建了其真核表达质粒载体,为以后深入研究IL-38的生物学功能奠定了物质基础。
  • 嗜水气单胞菌气溶素基因克隆与蛋白结构预测
  • 目的:对嗜水气单胞菌气溶素(Aer)基因进行克隆、序列分析及蛋白三级结构(3D结构)预测。方法:利用PCR方法扩增嗜水气单胞菌Zf1菌株的Aer基因,进行生物信息学分析。结果:获得Aer基因长1479bp,推导编码493aa,预测Aer蛋白抗原表位位于44-48、230-236、355-361、370-374和447-459,并含有APT结构域(PF03440)、Aer结构域(PF01117),以及2个高度保守序列SYLAHYLGYAWVGG(140-153)和GFLRWGGNAW(343-352)。Aer蛋白的3D结构与模板(PDB:3G40_B)相似性达93.79%,其中气溶素生理活性相关亚单位(PS50233)构成Aer的核心区,抗原表位(447-459)位于c端外侧表面,并与拉马钱德兰图检测分析Aer蛋白的空间结构基本一致。结论:对嗜水气单胞Zf1菌株Aer基因编码蛋白分子进行结构和功能分析,有助于理解其致病机理,为进一步验证Aer生物学特性提供科学参考。
  • 人T-钙粘蛋白基因克隆和真核表达载体的构建
  • 目的:克隆出人T-钙粘蛋白基因,并应用pEGFP-NI构建其重组真核表达载体。方法:Trizol液氮研磨法提取出人子宫平滑肌组织总RNA。设计一对分别含有EcoRI、BamHI酶切位点的人T-钙粘蛋白基因上下游引物。利用PfxDNA聚合酶高保真RT-PCR扩增cDNA,并将其连接到pEGFP-NI的多克隆位点,然后通过卡那霉素抗性筛选、双酶切及PCR鉴定,选取鉴定正确的克隆测序。结果:提取的人子宫平滑肌组织总RNA可清楚看到28S、18S和5SrRNA带形。反转录出的cDNA为2.142kb,将其与pEGFP-NI均进行EcoRI和BamHI酶切,之后用T4连接酶将二者进行连接,产物电泳可见在7500bp附近有一条带,即为pEGrY-NI/T-cadherin,双酶切与测序结果表明目的基因序列克隆正确。结论:重组真核表达载体pEGFP-N1/T-cadherin构建成功,为下一步研究人T-钙粘蛋白基因在黑色素瘤中的作用奠定基础。
  • IHH基因多点突变病毒载体构建及表达
  • 目的:构建携带IHHwT和E95K、E95G、/XE95、D100E突变体的RCAS病毒载体,并验证其有效性;优化RCAS病毒收集方法。方法:PCR扩增得到人IHH基因,采用原位杂交和半定量PCR的方法来验证上述载体能否过表达IHHmRNA;采用细胞裂解法收集RCAS—GFP病毒,通过鸡胚注射、冰冻切片观察的方法了解鸡胚感染情况。结果:构建的上述RCAS病毒载体在鸡胚细胞成功表达;优化了RCAS病毒收集方法,使最终滴度达10^8IU/ml。结论:该研究为在鸡胚肢芽中过表达不同IHH突变体蛋白打好了基础。
  • β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的高效表达
  • 目的:构建高效表达β甘孬聚糖酶的毕赤酵母工程菌,研究重组菌的产酶水平。方法:从魔芋地土壤中筛选出1株高产β-甘露聚糖酶的菌株;生理生化鉴定及16SrDNA测序结果为芽孢杆菌,命名为Bacillussp.QYW-1(GenBank登录号JX524224);以Bacillussp.QYW-1基因组DNA为模板,克隆获得一段1084bp的β-甘露聚糖酶基因manW(GenBank登录号JX869490),其编码360个氨基酸,分子量40kD,属糖苷水解酶家族26;SignalP4.0分析含一段25个氨基酸的信号肽,将优化设计的β-甘露聚糖酶基因序列插入表达载体pPIC9K中,获得重组质粒pPIC9K—manW;BglI酶切线性化后电转化PichiapastorisGS115中。结果:经大量筛选,获得高效表达的菌株rnanWl,摇瓶发酵结果:该酶最适pH6.5,最适温度37℃,具有良好的热稳定性和耐酸性,酶活达1180U/mL。结论:重组酶具有良好的应用前景。
  • 布菌rBLS蛋白重组表达载体的构建与诱导表达
  • 目的:构建猪型布鲁氏菌BLS分子原核表达载体,并进行诱导表达,为下一步关于BLS分子聚合功能的研究提供基础。方法:利用pET-28a(+)大肠杆菌原核表达系统,构建弘基因表达载体;利用IPTG诱导rBLS重组蛋白表达。结果:成功构建了布鲁氏菌地基因的原核表达载体,重组蛋白分子量为21kDa。结论:rBIS重组蛋白能够被大肠杆菌原核表达系统正确表达。
  • BPI23-haFGF融合蛋白在毕赤酵母中表达条件的优化
  • 目的:通过优化毕赤酵母的表达参数,为提高BPI23-haFGF融合蛋白在毕赤酵母中的表达量创造条件。方法:采用小型摇瓶培养系统,对重组毕赤酵母菌X-33/pPICZαA-BPI23-haFGF在含有蛋白酶抑制剂PMSF以及不同诱导时间、培养温度、甲醇浓度及培养液pH值条件下进行表达,将表达上清进行SDS-PAGE电泳,并用QuantityoneVolumeRect Tool和Dentitytool进行分析。结果:在诱导培养基中加入0.5mmol/LPMSF后,BPI23-haFGFF融合蛋白降解得到缓解,诱导表达96h表达量达到高峰;在培养温度28℃,甲醇浓度为1.0%,培养液pH6.0时,BPI23-haFGF表达量最高,含量比优化前提高了91.6%。结论:该研究为BPI23-haFGF融合蛋白后期的大规模发酵及深入研究其生物学功能奠定了基础。
  • 合成海藻糖乳酸菌重组菌株的构建及其抗逆性评价
  • 目的:构建表达载体pMG76e-OtsBA,合成重组菌,分析内源合成海藻糖对重组菌多重胁迫具有保护作用。方法:将OtsBA基因克隆与表达载体pMG76e酶切后连接转化,得到重组表达载体pMG76e-OtsBA,并通过Bio-RadGenePulsor电穿孔法将重组质粒转入副干酪乳杆菌L14中,检测蛋白的表达后对其抗逆性进行评价。结果:成功构建了重组菌株,表达蛋白方面没有明显的差异。在抗逆性方面,重组菌株对热胁迫的耐受性在10min时相比提高62倍,对H2O2胁迫的耐受性在15min时提高5倍,渗透胁迫的耐受性在1h时提高1倍,对酸胁迫的耐受性没有显著提高,冷冻干燥处理后的对数期重组菌株存活率相比提高3倍。结论:成功获得重组菌株,内源合成海藻糖对于重组菌的多重胁迫整体具有保护作用。
  • 甘蔗ATP合酶基因的电子克隆及生物信息学分析
  • 目的:运用电子克隆的方法获得甘蔗中的ATP合酶基因。方法:以小麦中一个ATP合酶基因为种子序列,对甘蔗的EST数据库进行搜索,应用相关软件进行聚类分析、拼接组装和延长。结果:获得一个ATP合酶基因SATPCI的cDNA序列全长,该序列长1415bp,包含一个完整的1077bp的ORF,编码358个氨基酸,且与水稻、玉米、高粱和葡萄等其他植物的ATP合酶具有高度的同源性。结论:电子克隆获得的cDNA序列为完整的甘蔗ATP合酶基因全长cDNA。
  • 绵羊MSTN多克隆抗体的制备及细胞毒性分析
  • 目的:研究绵羊肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)多克隆抗体的安全性。方法:将绵羊MSTN成熟肽基因克隆至原核表达载体pET-32a(+),转化至B121(DE3)中;利用Ni—NTA亲和层析法纯化目的蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,West—ern blotting鉴定其免疫原性;ELISA检测抗体效价;通过检测乳酸脱氢酶(1acticdehydrogenase,LDH)的水平研究其细胞毒性。结果:成功获得了330bp的绵羊MSTN成熟肽基因,表达蛋白分子量约为33kDa,纯度达90%以上;Westernblot检测表明MSTN蛋白具有免疫原活性;ELISA检测证实制备的抗体可与抗原蛋白特异性结合,抗体效价为1:25600,细胞毒性试验表明高浓度的多克隆抗体(200μg/mL)对肌肉细胞无毒害作用。结论:制备的绵羊MSTN多克隆抗体具有生物学活性,对肌肉细胞无细胞毒性,为促生长效果验证提供了安全保障。
  • 东北设施黑土土壤微生物总DNA提取方法探讨
  • 目的:找到一种适合东北设施高腐殖含量黑土土壤微生物总DNA简单易行的提取方法。方法:采用5种不同的DNA提取方法进行土壤总DNA提取。结果:5种提取方法的DNA产量在6.88-29.71μg/g,OD260/OD280值为1.03-1.27,OD260/OD230值为0.65-0.88,经纯化后均可进行PCR扩增。但经改进的方法E提取DNA产量最高,纯度最好。结论:方法E一加人TENP和PBS缓冲液预处理的提取方法是一种适宜东北设施黑土土壤微生物总DNA批量提取简单易行的方法。
  • 海南温泉嗜热菌的16SrDNA分析
  • 目的:确定24株海南温泉嗜热菌菌株的分类地位。方法:Blastn分析菌株16SrDNA序列同源性;邻接法构建菌株16SrDNA序列系统发育进化树并分析菌株的进化位置;Clustax比对分析菌株的相似度和进化距离。结果:菌株LY5和LY4的16SrDNA序列与Geobacillus pallidu, strain B 1, partial sequence ( GenBank : HM030740. 1 )的16SrDNA序列同源性分别为98%和97%,其他菌株的16SrDNA序列与Geobacillus subterraneus , strain R - 35641 ( GenBank : FN428689. 1 )的16SrDNA序列的同源性均大于96%。Clustax比对分析表明26株菌16SrDNA序列前段(1-70bp)、中段(70bp-1420bp)、后段(1420-1484bp)的相似度分别为40%、100%和60%,进化距离分析表明菌株GT7、LY4和LY5与其他菌株进化距离较远,其余菌株之间进化距离差异不明显。综上所述,初步将24株温泉嗜热菌鉴定为土芽孢杆菌属(Geobacillus sp.)。结论:16SrDNA序列分析可用于温泉嗜热菌的鉴定。
  • 百合psbA-trnH基因序列变异及遗传多样性分析
  • 目的:通过对叶绿体基因psbA-trnH序列变化差异来研究百合遗传多样性。方法:利用PCR技术扩增百合叶绿体ps-bA-trnH基因片段并测序,再用生物软件Clustalx2、Mega5.0、DnaSP对测序结果进行分析。结果:扩增的psbA-tmH基因片段长度约为469-583bp,GC含量为34.47-35.20%,其核苷酸变异位点27个,信息位点12个,变异位点主要集中在88-107bp区域,根据这些变异位点供试材料可以分为3类,核苷酸的多样性为0.01150。结论:叶绿体基因trnH-psbA序列可以区分百合种间的差异,可以作为一种很好方法来研究遗传多样性。
  • 原代成人皮肤真皮成纤维细胞系的构建
  • 目的:对人皮肤成纤维细胞进行分离、纯化、培养及细胞鉴定,探讨优化的分离及纯化方法,为构建表皮-真皮皮肤模型提供种子细胞。方法:使用两步消化法提取人真皮层,酶消化法提取成纤维细胞后培养数代,对细胞进行形态学观察,HE染色,免疫细胞化学鉴定细胞标志物Vimentin,MTT法测定细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:利用倒置显微镜及HE染色,可见细胞为散在分布的壁细胞,细胞汇流时呈鱼群样或漩涡状排列,细胞在30代内形态保持不变;细胞增殖曲线大体呈S型,流式细胞仪测得细胞凋亡率分别为(8.15±0.618)%和(7.83±0.415)%。结论:优化提取真皮成纤维细胞的方法,构建2株不同年龄的真皮成纤维细胞系,为药妆研究以及重组皮肤模型的研究奠定了基础。
  • FTIR法快速测定产油微藻细胞内生化组分
  • 目的:以类波氏真眼点藻(Eustigmatos cf.polyphem)为材料,建立一种测定微藻细胞内生化组分的便捷方法。方法:利用丌、IR法与Lowry法、重量法及苯酚-硫酸法测定不同氮浓度条件下E.cf.polyphem细胞内蛋白质、脂和碳水化合物含量的时相变化。结果:随时相的迁移,蛋白质不断降低,总脂含量不断升高,碳水化合物先升高后降低;最终总脂含量在低氮组达到最高为66.1%,最高生物量为9.15gL^-1;蛋白质和碳水化合物含量在高氮组达到最高,分别为13.05gL^-1和23.36gL^-1。两种方法测得的结果具有相关性(R^2=0.9820;R^2=0.9531;R^2=0.9033)。结论:FTIR是一种测定微藻内生化组分的高效可靠的方法。
  • 一种简单准确的微生物活菌计数方法
  • 摘要:目的:探讨微量点样法用于计数微生物活菌数的可行性。方法:分析了菌种、培养基和点样量对测定结果的影响,并与平板涂布法计数结果进行了比较和相关性及线性回归分析。结果:微量点样法的菌落生长特点受菌种、培养基和点样量的影响较小;活菌计数结果与平板涂布法相比,(1)对8种测试菌株(约10^8CFU/mL)均没有显著性差异(P〉0.05);(2)对4种不同类型细菌( Escherichia coli , Pseudomonas aeruginosa , Streptococctts pneumoniae and Bacteroides fr agilis,约10^7-10^9CFU/mL)均具有极显著的直线回归关系(P〈0.01,17,=5),其回归方程分别为Y=1.0740x-0.4144(R^2=0.9881),Y=0.8100x+1.4789(R^2=0.9977),Y=1.1194x-0.7373(R2=0.9806),Y=0.9107x+0.772(R^2=0.9812)。结论:微量点样法简化了平板涂布法的操作过程,适应性广、准确性高,因此,是一种简单、经济的细菌活菌计数方法。
  • 一株产PseurotinA的虎杖内生真菌CB50及其活性研究
  • 目的:对分离自虎杖茎部的内生真菌进行鉴定,并对其发酵物进行化学成分的分离、结构鉴定及活性研究。方法:将CB50进行ITS序列鉴定,并将其发酵产物进行分离,对分离出的化合物1通过1H-NMR、13C-NMR、DEPT-90、DEPT-135、HMBC和HUQC鉴定。并对化合物1进行抗菌和抗肿瘤活性实验。结果:CB50被鉴定为Penicillium brevicompactum。化合物1为Pseurotln A。Pseurotin A生物活性研究结果如下:抗菌实验结果显示PseurofinA对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)具有较强的抑制作用;抗肿瘤活性测试结果显示PseurotlnA对人肺癌细胞株A549有一定的抑制作用。结论:首次从虎杖内生真菌中分离得到PseuronfinA,并证明其具有明显的抗肺炎克雷伯氏茵(Klebsiella pneumoniae)和枯草芽孢杆菌(舶硪ksubt~)活性和抗人肺癌细胞株A549活性,菌株经鉴定为Penicillium brevicompactum。
  • 抗动物病原菌的芽孢杆菌筛选及系统发育分析
  • 目的:从肉鸡养殖场土样中筛选抑制动物源病原菌大肠杆菌和沙门氏菌的益生芽孢杆菌。方法:用96孔板高通量筛选的方法分离能抑制病原菌的芽孢杆菌;扩增、比对16SrRNA及gyrB序列,确定菌株属种。结果:(1)共筛选到5株能抑制病原菌的芽孢杆菌,其中1株BP-14抑菌作用最强,对动物源的3株大肠杆菌E1、E3、E4及1株鸡沙门氏菌SCI的抑菌率超过75%;(2)经BLAST分析和构建系统发育树,确定BP-14为短小芽孢杆菌。结论:利用高通量筛选的方法,在肉鸡养殖场土样中分离到一株芽孢杆菌BP-14,对动物源病原菌有着较好的抑制作用,经鉴定为短小芽孢杆菌。
  • 微氧条件下产酸菌的分离及性能测定
  • 目的:为了获得产酸性能好的菌种。方法:从微氧水解酸化反应器中分离纯化得到产酸菌,根据其性能测定结果选择产酸量大的菌株研究其最适生长及产酸条件。结果:从该工况下分离纯化得到的9株产酸菌中,同等条件下菌c产酸量最大,为1156.34mg/L。结论:通过单因子实验确定菌c最佳生长条件为:温度30℃,pH5.5,接种比3%,装液量100mL。
  • 响应面法优化拜氏梭菌产丁醇培养基
  • 目的:对拜氏梭菌发酵糖蜜生产丁醇培养基进行优化。方法:通过Plackett-Burman试验设计筛选出拜氏梭菌发酵糖蜜生产丁醇发酵培养基中8因素分别对丁醇产量的影响并进行评价。结果:主要影响因子为糖蜜、酵母粉和碳酸钙。根据实验结果对主要影响因子的大致范围进行估计,选定合适的浓度,采用最陡爬坡试验和Box-Behnken试验进行优化,Design-Expert8.0软件二次回归分析,所得主要因素的最佳浓度为:糖蜜121.6g/L,酵母粉12.4g/L,碳酸钙3.43g/L。结论:经过优化拜氏梭菌发酵糖蜜生产丁醇产量可达到12.83g/L,比优化前的10.04g/L提高了27.79%。
  • 响应面法优化巨大芽孢杆菌RB10的发酵培养条件
  • 目的:探明生防菌株巨大芽孢杆菌RBIO的发酵培养条件,提高其抑菌活性。方法:首先采用麸皮和豆粕作为供试菌的碳氮源,通过单因素(C源、N源)优化实验得出豆粕1.0%、麸皮1.5%的条件下具有较好抑菌效果。采用Plaekett-Burman设计筛选出主要影响因素为麸皮、豆粕和pH。最后再进行Box-Benhnken(响应面)试验分析。结果:RB10的最佳发酵培养基配方:麸皮0.98%、豆粕1.14%、初始pH7.39;最佳发酵条件:接种量1.5%、温度39℃、发酵时间78h、转速190r/min。在此发酵条件下,拮抗细菌RB10的抑菌率为69.416%,比之前采用正交试验优化发酵培养条件后的抑菌活性提高了28.524%,与理论值69.974%相差0.797%(理论误差〈1%),实验值与预测值基本相符。结论:响应面法优化出的RB10的发酵培养条件参数准确可靠,证实了模型的有效性。
  • 玉米秸秆发酵生产碱性木聚糖酶
  • 目的:Bacillus pumilus M-26以玉米秸秆为碳源发酵生产碱性木聚糖酶。方法:首先确定碳源组成及浓度、氮源组成及浓度、无机盐种类及浓度,然后通过正交试验得出摇瓶发酵的培养基配方,最后进行20L发酵罐发酵及发酵液处理制备碱性木聚糖酶工艺条件研究。结果:碳源(8%):玉米秸秆:麸皮=4:3;氮源:酵母膏和氯化铵;无机盐:氯化钠、氯化钙及硫酸镁。摇瓶发酵条件,37℃、220r/h、48h,发酵罐发酵条件,37℃、24h。发酵培养基组成:玉米秸秆复合碳源8%,MgS043mmol/L,氯化钠3mmol/L,氯化钙7mmol/L,氯化铵0.9%,KHP040.4%,酵母膏0.3%,pH8.0。摇瓶发酵最高产酶活力620IU/ml,发酵罐发酵最高产酶活力1815.82IU/ml。碱性木聚糖酶制剂收率80%以上,产品酶活30000IU/g,发酵产酶能力800000IU/L。结论:玉米秸秆与麸皮组成复合碳源经BacilluspumilusM-26发酵生产碱性木聚糖酶,摇瓶产酶活力620IU/ml,发酵罐产酶活力1815.82IU/ml。
  • 重组蛋白可溶性表达促进标签的研究进展
  • 重组蛋白表达在现代生物学技术发展中起着重要的推动作用。通过利用宿主实现外源性蛋白表达,为一些重要蛋白尤其是人源蛋白的结构和功能研究的提供了强有力的工具。促溶标签的应用可以有效地解决重组蛋白表达时常遇到的溶解性问题,并且这些标签还能够对重组蛋白产量、结构和纯化等有一定影响。该综述介绍了几种常见的促溶标签的特性,对其各自的应用特点进行总结,归纳促溶标签最新研究进展。根据文献报导就应用时存在的一些问题和进行探讨,最后展望了促溶标签研究可能产生突破的方面,以便研究者在实验中选择合适的标签。
  • [论著]
    人白细胞介素-38基因的克隆及序列分析(袁仙丽;徐玉莲;高雪明;李燕;李明才;王亚清;高巧艳)
    嗜水气单胞菌气溶素基因克隆与蛋白结构预测(李雪;王艺;兰云;沈晓静;胡秀彩;吕爱军)
    人T-钙粘蛋白基因克隆和真核表达载体的构建(段昕所;孙立新;胡晓梅;邢恩鸿;刘海燕;陆洁)
    IHH基因多点突变病毒载体构建及表达(刘燕芳;陶一昕;贺林;马钢)
    β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的高效表达(唐卫华;王瑞明;肖静;李丕武;曲丽娜;孙红梅;杨亚威)
    布菌rBLS蛋白重组表达载体的构建与诱导表达(杜志强;程佳;王建英)
    BPI23-haFGF融合蛋白在毕赤酵母中表达条件的优化(马艳;金小宝;李小波;许银叶;鲍冬梅)
    合成海藻糖乳酸菌重组菌株的构建及其抗逆性评价(陈喜玲;魏艳杰;左芳雷;刘苗;陈尚武)
    甘蔗ATP合酶基因的电子克隆及生物信息学分析(张云鹤;曹翠岩;邢慧清;黄赛楠;李玥莹)
    绵羊MSTN多克隆抗体的制备及细胞毒性分析(郭吉星;张辉;胡圣伟;李天森;张文智;贺志瑞;张豫;孙志华;陈创夫)
    [技术与方法]
    东北设施黑土土壤微生物总DNA提取方法探讨(刘昕昕;孟令波;潘明阳;李淑敏)
    海南温泉嗜热菌的16SrDNA分析(吴红萍;孟甜;张飞官;陈永安;李文芳;王丙乾;王锐萍)
    百合psbA-trnH基因序列变异及遗传多样性分析(熊勇;陈名红;熊华斌)
    原代成人皮肤真皮成纤维细胞系的构建(安子扬[1,2];董金皋;邢仕歌;田世民[2,1];殷宏;郑立新;田春兆)
    FTIR法快速测定产油微藻细胞内生化组分(陈小妹;张敬键;吕雪娟;夏嵩;万凌琳;李爱芬;张成武)
    一种简单准确的微生物活菌计数方法(吴窈画;李正华;谈书华)
    [开发与应用]
    一株产PseurotinA的虎杖内生真菌CB50及其活性研究(肖青;叶仁元;何艳;田杰伟;雷祖超;田永强[2,3])
    抗动物病原菌的芽孢杆菌筛选及系统发育分析(彭虹旎;梁莉;马俊孝;孙超)
    微氧条件下产酸菌的分离及性能测定(宋秀兰;李娟娟)
    响应面法优化拜氏梭菌产丁醇培养基(裴建新;庞浩;郭媛;林丽华;黎贞崇;黄日波)
    响应面法优化巨大芽孢杆菌RB10的发酵培养条件(印杨;伊艳杰;李瑞芳;李佳明;崔伟伟;李玉冲)
    玉米秸秆发酵生产碱性木聚糖酶(问清江;慕娟;党永;李叶昕;高育凯;景振龙;贺聪莹;颜阳欣)
    [专题综述]
    重组蛋白可溶性表达促进标签的研究进展(李祥魁;范翠英;崔亚君;刘璇)
    《生物技术》封面

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