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文献检索:
  • 匍枝根霉抑制性消减杂交差异文库的构建及分析
  • 目的:研究匍枝根霉纤维素酶表达相关的调控基因。方法:使用抑制性消减杂交技术(SSH),成功构建了匍枝根霉纤维素酶系的表达差异cDNA文库。随机挑选200个阳性克隆子并进行测序,最终获得30个差异表达片段(ESTs)。结果:与Gen—Bank比对后,获得了匍枝根霉纤维素酶表达过程中涉及的相关重要调控基因信息,包括纤维素酶系中的纤维二糖水解酶以及半纤维素酶系中的甘露糖苷酶等多种关键酶的信息。结论:为进一步研究与匍枝根霉纤维素酶表达相关的基因调控机制奠定了基础。
  • 海岛棉抗枯萎病相关GbNPR1基因的克隆及其表达分析
  • 目的:克隆海岛棉GbNPR1基因并研究该基因在抗病及抗病信号传导中的功能。方法:根据已报道的棉花NPR1基因序列设计1对特异引物,利用RT—PCR从新海21号克隆CbNPR1基因并对其序列进行生物信息学分析;通过实时定量PCR技术检测海岛棉经枯萎病菌侵染、水杨酸和乙烯诱导后该基因的表达特性。结果:GbNPR1基因编码587个氨基酸,与可可树中NPR1基因编码的氨基酸同源性最高(89.61%),其蛋白含有保守的BTB/POZ、ANK和NPR1-jike—C结构域;枯萎病菌侵染,水杨酸和乙烯诱导均可使GbNPR1明显上调表达,枯萎病菌侵染3h,水杨酸和乙烯诱导2h表达量最高。结论:GbNPRl基因在棉花抵御枯萎病菌侵染及植物抗病信号转导过程中起一定作用。
  • 西瓜牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因的克隆及表达分析
  • 目的:了解拢牛儿基拢牛儿基焦磷酸合成酶基因(GGPS)在4种不同瓤色西瓜果实发育过程中的表达变化,将为西瓜类胡萝b素基因操作提供工具。方法:通过RT—PCR和RACE技术从西瓜果实中克隆GGPS的cDNA全长,用生物信息学方法分析其序列及推测氨基酸序列,并用实时定量PCR技术检测GGPS在不同瓤色果实发育过程的表达水平。结果:GGPS基因cD—NA全长1445bp(GenBank登录号为KF914758),其开放阅读框为1092bp,编码363个氨基酸。预测其氨基酸序列N末端存在转运肽信号序列。西瓜GGPS与甜瓜和黄瓜GGPS的序列同源性高达90%以上。GGPS在红瓤西瓜中的表达量最高,白瓤西瓜中最低。结论:克隆获得的GGPS可能对西瓜果实中类胡萝b素的积累具有重要影响。
  • 猪去乙酰化酶SIRT2的克隆表达
  • 目的:原核表达猪去乙酰化酶SIRT2(sirtuin2,SIRT2)。方法:采用RT—PCR扩增包含SIRT2的完整编码序列;通过酶切连接将SIRT2完整编码序列克隆至表达载体pET28a(+)中,转入大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达和亲和层析纯化;经免疫印迹Western—blotting分析初步评价SIRT2的抗原性和特异性。结果:重组原核表达质粒pET28a—SIRT2经测序证明构建正确,表达的重组蛋白相对分子质量约47kDa,能被相关抗体所识别。结论:具有免疫原性的猪去乙酰化酶SIRT2在大肠杆菌中成功表达,可以此为基础进一步研究猪的SIRT2。
  • pGEX-4T-3-MFGF21表达载体的构建、表达与纯化
  • 目的:构建小鼠FGF21(fibroblast growth factor 21,FGF21)重组表达载体pGEX-4T-3-MFGF21,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化后获得小鼠FGF21融合蛋白。方法:提取小鼠肝脏总RNA后,经RT—PCR扩增获得目的片段,将其克隆至pMD19-T进行保存。以T载体为模板,扩增MFGF21 mat-peptide,构建重组原核表达载体pGEX-4T-3-MFGF21。将重组质粒转化至大肠杆菌菌株B121(DE3)中,在不同IPTG浓度、温度及转速下对表达载体进行诱导表达,优化表达条件,表达产物经SDS-PAGE电泳以鉴定是否为可溶性表达,采用亲和层析法纯化各表达产物后,进行Western blotting鉴定。结果:成功构建重组表达载体pGEX-4T-3-MFGF21,对其进行可溶性表达后成功纯化出GST-MFGF21,经Western-blotting鉴定为目的蛋白。结论:成功构建pGEX-4T-3-MFGF21,得到纯化的GST-MFGF21蛋白。
  • 两拷贝β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达
  • 目的:旨在获得高效分泌表达的两拷贝,β-甘露聚糖酶(β—ma.nase)毕赤酵母工程菌株。方法:以作者研究室保藏的黑曲霉β-mannaseX33菌株(X33-β-mannase)为出发菌株,体外构建两拷贝重组质粒pPIC—mannase,用电击法转化至X33感受态细胞,用抗生素Zeocin筛选阳性转化子,用BMGY培养基培养,BMMY诱导其表达,利用DNS法测定酶活。结果:实验已成功构建了两拷贝β—mannase毕赤酵母工程菌株,50L发酵罐培养7d后,β—mannase产酶水平达到21300U/ml。
  • 果蝇硒蛋白dSelK基因重组腺病毒构建与表达
  • 目的:利用AdEasy腺病毒载体系统构建果蝇硒蛋白dSelK基因重组腺病毒并在AD-293细胞中包装扩增。方法:PCR扩增dSelK目的片段连接到穿梭载体pShuttle—CMV上,用电转化法将线性化的pShuttle-CMV-dSelK穿梭载体转入含腺病毒骨架质粒AdEasyl的BJ5183大肠杆菌电感受态细胞中,构建重组腺病毒载体AdEasy—dSelK,线性化后转染AD-293细胞进行包装,并传代扩增,TCID50法测病毒滴度,Westernblot鉴定。结果:成功构建腺病毒载体AdEasy—dSelK,经AD一293细胞包装扩增得到重组腺病毒,滴度为107.5。Westernblot鉴定AdEasy—dSelK成功表达。结论:成功构建重组腺病毒载体pAdEasy—dseJK,为硒蛋白功能研究奠定基础。
  • 贵州黑山羊、贵州白山羊TFB1M基因第7外显子SNP研究
  • 目的:研究TFB1M基因编码区多态性,筛选出对山羊肉质有显著影响的SNPs位点,以期为山羊品种选种选育提供科学依据。方法:采用DNA池结合PCR直接测序技术分析TFB1M基因在贵州本地山羊的多态性,估算等位基因频率,利用在线软件分析TFB1M基因RNA二级结构及其蛋白二级、三级结构。结果:在TFBIM基因中筛选到2个SNPs:A76G和3"221G,其中A76G为同义突变;T221G错义突变,导致编码的半胱氨酸(Cys)变为甘氨酸(Gly)。RNA二级结构最小自由能改变,贵州黑山羊RNA二级结构稳定性增强。贵州黑山羊p折叠链增加1%,仪螺旋增加4%,混乱度也上升l%。β转角减少4,α螺旋增加6,自由卷曲减少3,延伸链增加1。结论:SNPs位点对TFBIM基因RNA二级结构及其蛋白结构均有影响。
  • 全基因组预测禾谷炭疽菌的分泌蛋白
  • 目的:禾谷炭疽菌侵染玉米、小麦等农作物引起的炭疽病,给农业生产造成了巨大经济损失。分泌蛋白在植物病原菌对植物侵染、定殖、扩展等致病过程中,发挥着重要作用。对禾谷炭疽菌分泌蛋白进行预测,并对其特征进行明确。方法:利用SignalP、ProtComp、TMHMM、big—PIFungalPredictor和TargetP预测程序对禾谷炭疽菌中120006条蛋白质序列进行分泌蛋白找寻,同时,对上述分泌蛋白的氨基酸分布、信号肽长度大小、信号肽切割位点以及理化性质等进行分析。结果:禾谷炭疽菌含有分泌蛋白为630个,其氨基酸长度多集中于100~600aa之间;信号肽长度以17~20个aa的序列最为集中;信号肽切割位点属于A—X—A类型;分泌蛋白在分子量、等电点、稳定系数方面均存在差异,但大多数分泌蛋白属于亲水性蛋白。此外,上述分泌蛋白中,具有预测功能的蛋白为330个,其功能较多的集中于酶类,包括d一半乳糖苷酶、B一木聚糖酶、p一木糖苷酶等。结论:通过上述生物信息学分析方法有效地实现了禾谷炭疽菌分泌蛋白的预测,分泌蛋白的信号肽切割位点类型与已经报道的致病疫霉、粗糙脉孢霉等分泌蛋白信号肽切割位点一致,分泌蛋白功能涉及较多的酶类,也与其他已经报道的病菌分泌蛋白功能相类似。
  • 透明颤菌血红蛋白基因克隆及植物表达载体的构建
  • 透明颤菌血红蛋白是一种专性好氧的氧结合蛋白。目的:以VHb基因构建植物表达载体,并在大肠杆菌中实现表达。方法:使利用试剂盒提取透明颤菌血红蛋白的总DNA,以其为模板通过PCR克隆VHb基因。结果:克隆得到VHb基因片段的长度约为0.5kb,与NCBI上公布的VHb基因序列最大同源性达99%。结论:通过酶切鉴定及PCR检测,成功构建重组植物表达载体p3300-vhb—superpromoter—Tnos。
  • 巨噬细胞RAW264.7不同转染方法的比较
  • 目的:采用不同的转染方法介导siRNA片段转染小鼠巨噬细胞,对不同细胞转染方法进行比较。方法:分别采用脂质体转染、罗氏转染试剂转染、电穿孔法和慢病毒介导siRNA片段转染小鼠巨噬细胞,然后通过流式细胞仪分析不同转染方法的转染效率,并测定对细胞活性的影响以及目的基因的表达水平。结果:慢病毒介导siRNA转染小鼠巨噬细胞效率最高,可达34.75±5.30%,且RNA干扰效果最好;其次为罗氏转染试剂转染和电穿孔法,但电穿孔法细胞活力最低;脂质体转染效率最低,仅为12.17±1.53%,但细胞活力最好。结论:通过对4种小鼠巨噬细胞转染方法的比较,明确了4种转染方法的优缺点,为小鼠巨噬细胞转染提供了实验依据。
  • 禽流感病毒基因的密码子偏好性及聚类分析
  • 目的:研究禽流感病毒基因的密码子偏好性及进化关系,为禽流感的防控和疫苗开发提供理论基础。方法:运用多种生物信息学分析软件,对17种流感亚型病毒基因进行密码子偏好性及聚类分析。结果:mN9亚型禽流感病毒基因偏好使用UUC、CUU、CUC、AUA。UCU、ACU、CAA和UGC等8个密码子。聚类分析表明,H7N9病毒与H7N3、H5N1、H9N2、H11N9病毒的亲缘关系最近;不同年份的H7N9亚型禽流感病毒中,H7N9(2013)病毒与H7N9(2009)病毒的亲缘关系最近,而与其他年份发生的H7N9病毒的亲缘关系均较远。结论:H7N9亚型禽流感病毒在碱基组成上偏爱使用以A或U结尾的密码子,具有独特的密码子使用特性;H7N9(2013)病毒并不是起源于以往发生过的H7N9病毒的突变,而是随病毒进化出现的新重配病毒。
  • Bacillius naganoensis普鲁兰酶基因的分子改造及酶学性质研究
  • 目的:通过缺失原酶上氨基酸残基,提高普鲁兰酶的酶活,并对其突变体重组酶进行酶学特性研究。方法:以Bacillius naganoensis基因组DNA为模板,PCR扩增大小为2781bp的普鲁兰酶编码基因,并通过PCR方法缺失原酶上的前78个氨基酸残基,获得突变体PulA234,将编码基因酶切连接到表达载体pET-22b(+),转化Escherichia coli BL21(DE3)。IPTG诱导表达后对表达产物进行SDS—PAGE和酶学特性研究。结果:突变体发酵液的酶活是原酶的19倍,SDS—PAGE电泳结果显示有明显特异性条带,分子质量约为100kDa。该突变酶的最适反应温度为60℃,最适pH为4.75,在pH3.8~6.6范围内活性稳定,cu2+、ca2+对酶活有激活作用。结论:经改造的重组酶酶活力有所提高,具有良好的pH和酸稳定性,为普鲁兰酶酶制剂工业化生产及应用奠定基础。
  • AMP经p38MAPK修复H2O2致卫星细胞损伤机制分析
  • 目的:探索AMP修复H2O2损伤骨骼肌卫星细胞作用机制。方法:取新生大鼠后肢肌肉传代培养获取卫星细胞,用各浓度AMP修复卫星细胞建立0.1mmol/LH2O2化学损伤模型;同时研究24h、48h、72h的AMP对损伤细胞保护,使用MTr与Gi—emsa染色,DAPI+FITC+PI荧光染色及免疫细胞荧光抗体检测。结果:各浓度AMP对卫星细胞作用不同,0.3125、0.15625rag/mL对细胞有损伤;2.5mg/mLAMP溶液对细胞增值和化学损伤修复最明显,5、1.25mg/mLAMP增值和化学损伤修复其次;以24h优于48h、72h,同时AMP修复细胞随时间延伸逐渐降低。其机制:(1)提高AMP/ATP比率激活AMPK蛋白调节细胞生物合成和增值;(2)增强凋亡抑制因子Bcl-2、抑制凋亡促进因子Bax。结论:适当浓度AMP对细胞能增值并经p38MAPK信号通路修复H2O2损伤卫星细胞。
  • 农杆菌介导的胀果甘草愈伤组织遗传转化
  • 目的:旨在建立一个农杆菌介导的甘草愈伤组织遗传转化的可行方案,并对转化条件进行优化。方法:选择EHA105和LBA4404两种根癌农杆菌菌株,热激法转入含有绿色荧光蛋白GFP基因的植物表达载体pBll21-gfp,挑选转化的农杆菌用于侵染胀果甘草愈伤组织。设置不同培养时间的愈伤组织作为受体材料和农杆菌不同侵染时间两组条件,经共培养后的甘草愈伤组织进行荧光检测。结果:愈伤组织在含有100mg/l卡那霉素的继代培养基上进行筛选培养,得到了具有卡那霉素抗性的转化甘草愈伤组织,转化愈伤组织经继代培养基后在紫外光下仍可见绿色荧光,PCR检测转化愈伤组织基因组中含有gfp基因。结论:试验建立了农杆菌介导的甘草愈伤组织的遗传转化体系,为目的基因导入甘草细胞利用基因工程手段调控甘草次生代谢产物生物合成的研究奠定了基础。
  • 表达ORFV F1L基因的重组山羊痘病毒的构建及初步鉴定
  • 目的:研制安全有效的预防羊口疮的重组山羊痘病毒活载体疫苗。方法:采用PCR技术扩增ORFV的F1L基因,将其与载体pUC—T1l2连接,同时酶切插入LacZ报告基因和Pb56双向启动子,构建重组转移载体pUC—TKl2-LacZ—F1L,将其转染至已感染山羊痘病毒疫苗株的BHK-21细胞,进行同源重组。通过蓝白斑筛选,收获重组病毒并进行PCR初步鉴定。结果:获得了全长为1023bp的F1L基因,测序结果与GenBank公布的标准序列同源性为99.9%。构建了重组转移载体pTL—nL,转染BHK-21细胞后,获得了重组山羊痘病毒蓝色蚀斑。结论:该研究成功获得了含有羊传染性脓疱病毒FIL基因的重组山羊痘病毒疫苗候选株rGPV—F1L,为羊传染性脓疱病基因工程活载体疫苗的研制奠定基础。
  • SH—SY5Y神经细胞氧化损伤时microRNA-199a和Sirt1表达变化
  • 目的:观察神经细胞氧化损伤时microRNA-199a(miRNA-199a)和Sirtl表达的变化,探讨miRNA-199a对Sirtl的调控作用。方法:不同浓度双氧水(600/μmol/L,12001μmo]/L)刺激体外培养的SH—SY5Y细胞12h造成损伤。MTr检测细胞活力,DCFA—DA探针检测细胞内活性氧水平,Hochest染色分析细胞凋亡,RT—PCR检测miRNA-199a的表达,细胞免疫荧光和Westernblot检测Sirtl蛋白水平。结果:6001μxmol/L和1200μmol/L双氧水刺激SH—SY5Y后细胞活力显著下降,分别降低27.0%和53.6%;ROS荧光强度细胞凋亡显著上升且具有浓度依赖性;miRNA-199a的表达明显上升,分别上升23.0%和51.0%;Sirtl蛋白表达量下降具有浓度依赖性。结论:双氧水刺激SH—SY5Y神经细胞时miRNA-199a表达升高,Sirtl的表达降低。Sirtl水平降低与miRNA-199a通过调控Sirtl表达参与氧化损伤有关。
  • 高生物量草分枝杆菌突变株诱变选育的研究
  • 目的:为了获得具有提高人体免疫力的草分支杆菌菌株的生长量。方法:采用紫外线和硫酸二乙酯两种方法,对其原始菌株进行复合诱变,筛选生长能力强的突变菌株。结果:实验结果表明紫外线诱变最佳处理时间为90S,硫酸二乙酯诱变最佳处理时间为50min,筛选出生长能力强的3株突变株(50min-1、50min-4和50min-7),其生长能力较原菌株分别提高了62%、57%和59%。通过方差分析来检测这3株突变菌株的遗传稳定性,结果显示传代次数对突变株50min-1和50min-4的生长量影响不显著,而对50min-7的生长量的影响显著,因此50min-1和50min-4具有遗传稳定性。结论:研究结果为草分支杆菌的发酵研究提供了优良菌株。
  • 好氧反硝化细菌N22’种子培养基的优化
  • 目的:优化好氧反硝化细菌N22’的种子培养基,提高对数期末期细菌浓度。方法:采用Plackett—Burman设计对影响N22’细菌浓度的因素进行评估并筛选出具有显著效应的因素KNO3(X3)、KH2PO4(X4)和K2HPO4(X5),经过最陡爬坡实验接近3个因素的最大响应区域后,应用Box—Behnken设计和响应面分析法确定3个因素的最优水平。结果:优化后的种子培养基:柠檬酸钠6g,KNO3 2.72g,KH2PO4 1.35g,K2HPO4 1.12g,MgSO4·7H2O 0.25g,CaCl2 0.025g/L,FeSO4·7H2O 0.025g,EDTA 0.125g/L;蒸馏水1000mL,初始pH值7.0。优化后发酵液对数期末期细菌浓度达到1.6840×10^12cfu/mL,比优化前1.6327×10^11cfu/mL提高了9.31倍。结论:Plackett—Burman设计结合响应面分析方法优化了菌株N22’的种子培养基。
  • 大肠杆菌利用木糖发酵产琥珀酸的研究
  • 目的:研究大肠杆菌以木糖为碳源发酵产琥珀酸。方法:首先比较了实验室保藏的7种野生型大肠杆菌利用木糖发酵产琥珀酸的产量和得率,结果:表明野生型菌株琥珀酸对木糖的得率集中在0.34g/g-0.53g/g之间,得率较低,副产物主要为乳酸、乙酸。然后选取其中2株菌(E.coli MG1655与EcoliC-1)进行基因敲除,构建了IdhA和棚双基因缺失的MLB和CLB菌株,以减少副产物的积累。两阶段摇瓶发酵结果表明,琥珀酸得率从0.40g/g分别提高到了0.89g/g及0.90g/s,而产量分别从4.92g/L、5.58g/L提高到11.52g/L、11.81g/L。结论:通过基因敲除后,大肠杆菌能够利用木糖发酵产琥珀酸,琥珀酸得率可以达到0.90g/g。
  • 三种免疫增强剂对禽流感疫苗免疫效果的影响
  • 目的:探讨鸭IL-8真核表达质粒、细菌内毒素和黄芪多糖分别作为免疫增强剂对鸭禽流感疫苗的免疫增强效果。方法:选取5日龄清洁级三穗麻鸭共175只,平均分为重组质粒组、细菌内毒素组、黄芪多糖组、常规免疫组、阴性对照组。结果:①免疫后第38—66日龄期间,重组质粒组平均抗体效价最高,细菌内毒素组平均抗体效价也高于常规免疫组;②免疫后第24—66日龄,重组质粒组机体IL-2平均水平最高,第24日龄时细菌内毒素组与常规免疫组差异极显著(P〈0.01);③在免疫后第24—38日龄,重组质粒组机体IL-8平均水平与其他各实验组均存在差异性;④在免疫后第24—66日龄,重组质粒组平均体重与常规免疫组均存在极显著差异(P〈0.01)。结论:鸭IL-8真核表达质粒对鸭免疫应答及体重增加均有促进作用,细菌内毒素在免疫方面有一定的促进作用。
  • 4株真眼点藻的生长及光合生理特性
  • 目的:研究4株真眼点藻(Eustigmatos sp.、Eustigmatos polyphem、Vischeria helvetica、Nannochloropsis oculata)的生长、色素组成及光合生理特性。方法:采用重量法、HPLC和分光光度法及液相氧电极法测定藻细胞的色素组成和光合生理指标在不同时相的变化。结果:4种藻最大生物质浓度分别为:9.4g·L-1(E.sp.)、10.42g·L。(E.polyphem)、7.26g·L-1(V.helvetica)和7.15g·L-1(moculata);随培养时间延长,其chlorophylla/β-carotene和violaxanthin/β—carotene的值均降低,最大光合速率先上升后下降,最大呼吸速率则不断上升;N.oculata的最大光合速率和呼吸速率达到最高,分别为59.62μmol O2·mg~Ch/a·h。和54.23μmol O2·mg-1 Chla·h~;4种藻的77K低温荧光发射光谱均没有高等植物PS I 730nm处的特征峰。结论:真眼点藻的生长与光合生理特征具有种间差异性,其77K低温荧光发射光谱与高等植物相比具有特异性。
  • 2株狼尾草根际芽孢杆菌(Bacillusspp.)的分离与特性分析
  • 目的:从狼尾草根际土中分离出具有多种生物学特性和促生效果的芽孢杆菌。方法:土样经过80℃处理,得到2株菌。对其溶磷、合成IAA和嗜铁索能力进行测定。用2株菌处理小麦种子,评价其促生效果。结果t菌株WXD2—1和WXD2—2溶解磷的能力分别为(26.994-1.74)μg/mL和(31.99±4.43)μg/mL;随着L—Trp浓度的增加,两个菌株的IAA合成量也相应增加;菌株WXD2—2合成嗜铁素能力高于菌株WXD2—1。分别用菌株WXD2—1和WXD2—2处理小麦种子,生物量与对照相比均有显著增加(P〈0.05),且菌株WXD2—1促生效果较菌株WXD2—2更好。结论:分离出的芽孢杆菌具有溶磷、合成IAA和嗜铁素能力,能够促进小麦的生长。
  • 革兰阴性菌外膜蛋白A研究进展
  • 外膜蛋白A是革兰阴性菌主要的外膜蛋白,是细菌入侵细胞的作用蛋白,也是宿主免疫系统清除细菌的靶向识别蛋白;介导多种疾病的产生,同时也激活机体的免疫机制对抗细菌的感染;与细菌生物膜的形成有关;并且在动物疫苗上有较好的应用前景。此外,对人类健康、畜禽养殖,以及水产养殖影响巨大。该文将就OmpA蛋白结构分类、性质、作用、实际应用等方面作一综述。
  • 黑龙江省科学院微生物研究所应用医学微生物研究室
  • 应用医学微生物研究室成立于1969年,前身为免疫研究室,是国内第一家免疫专业实验室,主要从事感染与免疫方面的研究,卫生部绿雠菌专业实验室依托该室技术力量组建。近年来,共承担完成国家、省部级项目30余项,获国家、省部级奖7项。发表论文100余篇,出版专著5部,申请发明专利30余项,获10余项发明々利授权。
  • [论著]
    匍枝根霉抑制性消减杂交差异文库的构建及分析(宋哲玮;汤斌;李松;李祥林)
    海岛棉抗枯萎病相关GbNPR1基因的克隆及其表达分析(柴蒙亮;何兰兰;韩泽刚;赵曾强;张薇)
    西瓜牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因的克隆及表达分析(吕品;李娜;谷辉辉;赵文恩)
    猪去乙酰化酶SIRT2的克隆表达(江学斌;马苗鹏;司徒嘉欣;肖淑君;杨军;楚品品;蔡海明;施巨清;张玲华)
    pGEX-4T-3-MFGF21表达载体的构建、表达与纯化(唐青蓝[1,2];许庆忠;张礼林;雷霆雯;李红梅)
    两拷贝β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达(聂金梅;李阳源;刘金山)
    果蝇硒蛋白dSelK基因重组腺病毒构建与表达(娄虹;许鑫;潘子瑶;张保华;贲松彬;陈长兰)
    贵州黑山羊、贵州白山羊TFB1M基因第7外显子SNP研究(孙岩岩;蔡惠芬;罗卫星;刘若余;谢海强;宋桃伟;刘彬)
    全基因组预测禾谷炭疽菌的分泌蛋白(韩长志)
    [技术与方法]
    透明颤菌血红蛋白基因克隆及植物表达载体的构建(肖宇;孙力;王晓飞;高宇)
    巨噬细胞RAW264.7不同转染方法的比较(李亚;付强;张俊波;张辉;陈创夫)
    禽流感病毒基因的密码子偏好性及聚类分析(宋乔乔;柴志欣;钟金城)
    Bacillius naganoensis普鲁兰酶基因的分子改造及酶学性质研究(秦艳[1,2];谢能中;曹薇;王青艳;米慧芝;申乃坤;黄日波[1,2])
    AMP经p38MAPK修复H2O2致卫星细胞损伤机制分析(陶丽君;朱道立;费飞;黄宝珠;张红红)
    农杆菌介导的胀果甘草愈伤组织遗传转化(陈子龙;梁玉玲[1,2];鲜于梁艳;韦阅)
    [开发与应用]
    表达ORFV F1L基因的重组山羊痘病毒的构建及初步鉴定(张倩;王震;倪伟;付强;李瑞芳;张辉;陈创夫)
    SH—SY5Y神经细胞氧化损伤时microRNA-199a和Sirt1表达变化(万静枝;袁丁;邓丽丽;张长城;刘朝奇;周志勇;王婷)
    高生物量草分枝杆菌突变株诱变选育的研究(祝芳;彭剑勇;于晓丹;王铜生;李楠;吕淑霞;马镝)
    好氧反硝化细菌N22’种子培养基的优化(郭端强;王孝娟;尚亚君;王美姿;单林娜)
    大肠杆菌利用木糖发酵产琥珀酸的研究(唐绪位;李运杰;李志敏;叶勤)
    三种免疫增强剂对禽流感疫苗免疫效果的影响(阮涌;嵇辛勤;文明;刘廷江;李世静)
    4株真眼点藻的生长及光合生理特性(王元丽;李其雨;李爱芬;张成武)
    2株狼尾草根际芽孢杆菌(Bacillusspp.)的分离与特性分析(王晓丹;刘佳莉;张丹;郭长虹)
    [专题综述]
    革兰阴性菌外膜蛋白A研究进展(陈春琳;俱雄;万健;刘祥)
    黑龙江省科学院微生物研究所应用医学微生物研究室
    《生物技术》封面

    主管单位:黑龙江省科学院

    主办单位:黑龙江省微黑龙江省科学院微生物研究所

    主  编:沙长青

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