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文献检索:
  • 单增李斯特菌hfq基因的克隆及分子特征分析
  • 目的:了解单增李斯特菌(Listeriamonocytogenes,LM)SB5野毒株ncRNA伴侣分子怕基因及其编码蛋白质的分子生物学特征。方法:利用PCR方法对hfq基因进行扩增、克隆及测序,对魄向基因分子特征进行分析,预测其编码蛋白质的二三级结构及功能活性位点,对其进行同源性及遗传变异分析。结果:LMhfq基因全长234bp,编码77个氨基酸,对推导的Hfq氨基酸序列分析发现从N端到C端包含1个饯一螺旋及5个β-折叠,具有RNA结合位点及六聚体结合位点。LM-SB5hfq基因核苷酸序列与李斯特菌属各菌株同源率为94.5~100%,与其他种属细菌同源率为36.19—62.39%。结论:Hfq蛋白具有RNA的结合位点,可能在细菌ncRNA调节基因表达过程中发挥重要作用。
  • DNA甲基化敏感位点(CCGG)文库克隆载体的构建
  • 目的:旨在建立一种简便易行的DNA甲基化文库构建载体,用于筛选细胞中具有甲基化敏感性CCGG位点的DNA片段。方法:根据HpaⅡ/MspI酶切体系对甲基化酶敏感性不同的特点,通过在PCR引物中添加CCGG酶切位点的方法,将扩增得到的目的片段连接到无CpG甲基化的质粒载体上。结果:成功构建了含双CCGG位点的pCpGfree-HpaII/MspI-1质粒载体。结论:所构建的pCpGfree-hpaⅡ/MspI-1质粒载体CCGG位点未发生甲基化,故可以用于构建含有甲基化CCGG序列的DNA甲基化文库。
  • 人GNAS1基因克隆、真核表达载体的构建及瞬时转染Hela细胞
  • 目的:克隆人GNASl基因编码区序列、构建真核表达载体并瞬时转染Hela细胞。方法:通过RT—PCR克隆GNASl基因编码序列,亚克隆至pMDl9载体,测序鉴定正确后,通过酶切连接至真核表达载体pEGFP—N1,通过菌液PCR和酶切鉴定获得pEGFP—GNASl重组质粒;表达载体以Lipofectamine2000介导转染Hela细胞,并用实时定量PCR检测外源基因在Hela细胞中的表达。结果:克隆到GNASl基因并获得了pEGFP—GNASl表达载体,在Hela细胞中获得了GNASl的过量表达。结论:成功克隆了GNASl基因编码序列,并构建其真核表达载体,瞬时转染至Hela细胞,为进一步深入研究Gsct蛋白生物学作用奠定基础。
  • 贵州山羊品种DQA1基因第3外显子遗传变异分析
  • 目的:通过筛选3个贵州地方山羊种OQAl基因Exon3的SNPs位点并做相应的遗传变异分析,为今后山羊抗病育种及地方山羊品种的选育提供理论依据。方法:采用构建品种DNA池与直接测序的方法,对三个贵州地方山羊种群共514只个体的DQAl基因外显子3进行遗传变异分析。结果:在3个山羊品种中共筛选得到4个SNPs,G71A(同义突变)、T100C(Asn→ser)、G202A(Pr0→Leu)、A223G(Met→Thr)。生物信息学分析发现,G202A位点变异虽未引起mRNA二级结构的变化,但最小自由能降低,结构稳定性增强;DQAI基因Exon3的不同基因型的蛋白质二级结构中均不含有仅螺旋。结论:三个贵州地方山羊种DQAl基因外显子3中含有较丰富的多态性,G202A位点变异在mRNA二级结构及蛋白质二级结构中与其他基因型具有较明显的差异。
  • HPV-16早期基因E1在果蝇细胞S2中的表达和鉴定
  • 目的:在果蝇s2细胞中表达人乳头瘤病毒16型(HPV-16)El。方法:PCR扩增HPV-16E1全长,将PCR产物连接至pMDl8-T并测序鉴定,继而将HPV-16E1构建至果蝇表达载体pMT/Bip/V5-HisA中。大量提取pMT/Bip/V5/His-E1重组表达载体并与筛选质粒pCoBlast共转染果蝇s2细胞,经杀稻瘟菌素(BlasticidinS)筛选获得具有抗性的稳定转染s2细胞。提取稳转s2细胞基因组DNA,PCR鉴定s2细胞中整合的E1。以终浓度为5Ixmol/LCdCl2诱导表达,收集上清进行SDS-PAGE及Westernblot鉴定。结果:双酶切及测序结果显示HPV-16E1基因已克隆人重组质粒pMT/Bip/V5-E1,PCR和Westernblot结果表明HPV-16E1基因已整合至果蝇s2细胞基因组并稳定表达。结论:获得HPV-16E1转染的果蝇s2细胞株,该细胞株可持续稳定表达E1蛋白。
  • nisinZ部分操纵子基因超表达对nisinZ合成的影响
  • 目的:构建表达载体pMG76e-nisABTCI,合成重组菌,分析nisin合成基因簇中的nisABTCl超表达对nisin生物合成的影响。方法:将nisABTCI基因克隆与表达载体pMG76e酶切后连接转化,并通过Bio-RadGenePulsor电穿孔法将重组质粒载体转入Lactococcus Lactis N401中,得到重组菌株Nd01C。对比工程菌和原始产生菌的nisinZ产量。以16SrRNA为内参基因,通过半定量RT-PCR方法,比较分析原始菌株N401和3株重组菌株中nisin合成基因簇中的11个基因的表达情况。结果:成功构建重组菌株,重组菌株的nisinZ产量提高了70%左右。半定量RT-PCR结果表明不同菌株的nisin合成基因的表达表现出了不同的特征。与菌株N401相比,3株重组菌株的大部分基因上调了。结论:nisABTCI超表达明显地提高nisin产量约70%。上调的基因可能对nisin合成效率的提高具有关键作用。
  • 融合蛋白Somatostatin—HSA不同串联体形式的表达及活性分析
  • 目的:构建人生长抑素(somatostatin,SST)不同串联体形式与人血清白蛋白(HSA)的融合蛋白,比较其在毕氏酵母中的表达情况以及生物活性高低。方法:PCR法扩增获得SSTl4和SST28的二联体和三联体基因,酶切连接形成与HSA的融和基因,并克隆到酵母表达载体pPIC9K中,电击转化毕氏酵母GSll5进行高效表达。结果:4种融和蛋白在毕氏酵母中表达水平各不相同,其中(SST28)2-HSA的表达量最高,为200mg/L;(SSTl4)3-HSA的表达量最低,仅50mg/L;(SSTl4)2-HSA和(SST28),-HSA产量居中。药效学分析发现与天然SST-14标准品相比,(SSTl4):-HSA药效最佳且具有长效性。结论:融合蛋白(SSTl4):-HSA有望弥补SST单体自身半衰期过短的不足,打开SST长效药物发展的新篇章。
  • 疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶在大肠杆菌中的表达与纯化
  • 目的:实现疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus Lipase,TLL)在大肠杆菌中的可溶性表达,并建讧有效的纯化方法。方法:根据疏棉状嗜热丝孢蒲脂肪酶序列和大肠杆菌密码子的偏爱性,合成了疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶DNA序列,克隆至大肠杆菌表达载体PET-32a(+)中,通过筛选得到阳性重组载体,并转化人大肠杆菌Rosetta(DE3),诱导表达并利用SDS-PAGE电泳检测重组脂肪酶表达情况,并通过Ni柱亲和层析对目的蛋白TLL进行纯化,透析脱盐后,TEV酶切重组融合蛋白,再利用亲和层析纯化得到酶切后的脂肪酶,检测其酶活。结果:得到了可溶性表达的TLL,检测酶切前后脂肪酶的比活性:酶切前达5.7×106U/mg,酶切后达8.9×105U/mg。结论:实现了疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶的可溶性表达,并得到有效纯化,同时证明TEV酶切目的蛋白对其活性影响微小,为之后对其进行环化打下基础。
  • 杆状病毒PK-1亚细胞定位分析
  • 目的:制备苜蓿银纹夜蛾核多角体病毒PK-1抗体,利用抗体分析PK-1在病毒感染过程中的亚细胞定位。方法:根据pk-1基因序列设计引物,扩增全长序列,将其克隆到原核表达载体pMal—c2x。利用原核表达目的蛋白质,将产物进行亲和层析,获得纯化蛋白。将纯化的融合蛋白免疫兔子制备抗血清,利用PK-1抗血清进行免疫荧光分析PK-1在病毒感染过程中的亚细胞定位。结果:成功原核表达并纯化PK-1融合蛋白,获得PK-1兔多克隆抗血清,并确定了PK-1在病毒的感染过程的亚细胞定位。结论:在杆状病毒感染后的16h,PK-1主要定位在细胞质中,随后扩散到细胞核中,在感染后24h分布在整个细胞中,到感染后48~72h,PK-1又重新定位在细胞质中,这些结果为进一步分析PK-1的功能奠定了基础。
  • 小麦CPP转录因子基因的电子克隆及生物信息学分析
  • 目的:运用电子克隆的方法获得小麦中的CPP转录因子基因。方法:以水稻的CPP转录因子作为探针,对小麦的EST数据库进行搜索,应用相关软件进行聚类分析、拼接组装和延长。结果:克隆出4个小麦CPP基因,分别命名为TaCPPl、TaCPP2、TaCPP3和TaCPP4,序列长度分别为977bp、3022bp、1582bp和1156bp,开放阅读框为975bp、2298bp、720bp和750bp。4个CPP类型蛋白质都具有一个或两个CXC域,而且多数还拥有完整的CRC结构域。结论:4个小麦CPP基因与水稻cPP蛋白具有高度的同源性。研究结果为进一步实验克隆和研究其功能提供了理论基础。
  • 黑腹果蝇CG18853基因编码蛋白的生物信息学分析
  • 目的:利用生物信息学方法分析黑腹果蝇CGl8853基因编码蛋白的结构和功能。方法:基于NCBI数据库中黑腹果蝇CGl8853基因编码蛋白的氨基酸序列,从蛋白质的理化性质、跨膜区、信号肽、亚细胞定位、结构域、三维结构及不同物种间同源蛋白进化关系等方面进行分析。结果:果蝇CGl8853蛋白的理论分子量约38.5kDa,理论等电点为8.80。CGl8853蛋白为不稳定亲水性蛋白,无跨膜区和信号肽,具有DNA光修复酶FAD结合结构域。果蝇CGl8853蛋白与模板3umv.1.A有60.87%的氨基酸序列一致;CGl8853蛋白与长鼻袋鼠、金鱼、拟南芥、粳稻的编码产物高度同源。结论:黑腹果蝇CGl8853蛋白具有DNA光修复酶家族的典型结构,可能在细胞核中参与DNA损伤修复过程。
  • 聚球藻Synechococcus sp.PCC 7336基因组结构解析
  • 目的:对新测序菌株Synechococcussp.PCC7336的基因组结构分析。方法:利用多种生物信息学工具进行基本信息分析。构建本地比对数据库进行多序列比对分析。构建本地注释数据库进行基因、蛋白质功能分析。基于16S rRNA构建进化树对不同菌株进行聚类并分析进化差异。结果:GC含量为53.7%,共有5096个蛋白质编码基因,47个RNA基因和不同类型的重复回文序列。与光合作用相关的基因分为9大类,信号传导以“双组分调控系统”为代表,11个次级代谢基因簇合成生物活性物质。进化分析显示其与传统聚球藻菌株差异较大,而与无类囊体蓝藻亲缘关系更密切。结论:Synechococcussp.PCC7336是聚球藻属中一个特殊的菌株,在基因组结构、基因数量、进化历程等方面都与其他菌株存在较大差异。
  • 贵州本地山羊TFB1M基因启动子区多态性生物信息学分析
  • 摘要:目的:采用DNA池结合PCR技术,筛选TFBlM基因启动子区SNP位点,并分析其对启动子区的影响。方法:利用多种生物信息学软件预测TFBlM基因核心启动子范围、转录因子结合位点、CpG岛。结果:TFBlM基因启动子区发现1个SNP位点G-234A。TFSEARCH软件预测结果显示TFBlM基因启动子区转录因子ADRl与Spl位置调换,且ADRl位置的提前导致TFBlM基因转录效率增高。结论:G-234A位点可能影响TFBlM基因转录,试验结果为进一步分析TFBlM基因启动子区功能奠定基础。
  • BRAF和TP53基因热点突变的构建
  • 目的:构建BRAF和TP53基因多个位点的点突变质粒,为进一步研究其在肿瘤形成中的作用奠定基础。方法:以HEK-293T基因组DNA为模板构建含BRAF600、TP53175和TP53248位点的野生型质粒,利用MutanBEsT^tm“定点突变方法获得含BRAF^V600E、TP53^R175C和TP53^R248W等突变位点的突变型质粒,并进行DNA测序鉴定。结果:DNA测序结果显示构建的三个点突变与实验设计完全一致。结论:成功构建了BRAF^V600E、TP53R175C和TP53^r248w三个具有不同突变位点的突变型质粒,MutanBESTTM点突变技术是一种简单、快速、高效的基因定点突变方法。
  • 鸟分枝杆菌的分离鉴定及其基因组文库构建
  • 目的:构建鸟分枝杆菌基因组文库。方法:利用16SrRNA基因测序法对15例HIV/AIDS患者痰分枝杆菌培养阳性标本进行菌种鉴定,分离出鸟分枝杆菌。鸟分枝杆菌基因组DNA和pUCl9载体经同尾酶Sau3AI和BarnH1分别酶切后连接,连接产物转化大肠杆菌JMl09而获得文库。通过计算文库滴度、酶切分析克隆子来评价文库质量。结果:15株分枝杆菌经鉴定,有9株结核分枝杆菌、4株鸟分枝杆菌和2株脓肿分枝杆菌。所构建鸟分枝杆菌基因组文库滴度为2.58×105cfu/ml。随机挑选9个克隆进行BarnHI酶切分析,可见到插入片段大小约在0.5kb~1kb之间。结论:从HIV/AIDS患者中分离出鸟分枝杆菌,并成功构建了鸟分枝杆菌基因组文库,为研究鸟分枝杆菌致病基因的结构和功能提供了基础。
  • 云南松基因组微卫星富集文库的序列特征分析
  • 目的:分析基因组微卫星富集文库的序列特征,探索云南松基因组微卫星的分布特征或变异规律。方法:采用磁珠富集法,从云南松基因组DNA的RsaI酶切产物中富集微卫星片段,富集片段经洗脱分离、载体连接及转化等环节,对富集文库鉴定和测序,分析序列特征。结果:在测序获得的159条序列中,有143条序列含有重复次数不少于3次的微卫星序列,序列长度为135~1138bp,平均520bp,克隆比例为89.94%。在这些序列中,以二核苷酸重复类型最多(56.64%),其次是三核苷酸,有51条(35.66%),此外,出现少量(7.70%)重复类型为4—6bp的微卫星序列;各重复单元的碱基组成以探针及其互补序列为主,并出现少量的非探针类型;重复次数介于3—15,随着重复单元长度的增加而出现的频率降低。结论:分析了云南松基因组微卫星富集文库微卫星重复类型、重复单元碱基组成及其序列长度变异,为进一步分析云南松基因组微卫星的分布特征或变异规律奠定基础,进而为开发SSR引物提供基础信息。
  • 玉米黑粉菌实时荧光定量PCR检测方法的建立
  • 目的:建立利用实时荧光定量PCR对玉米黑粉菌[Ustilagomaydis(Dc.)Corda]快速定量检测的方法。方法:以玉米黑粉菌Bactin基因为内参基因,以含有βactin基因的具浓度梯度pMDl9T—Simple质粒为标准品,接种黑粉菌后不同时间点的玉米叶片作为样本用以检验该方法的实用性。结果:建立了利用实时荧光定量PCR对玉米黑粉菌进行定量分析的方法。该方法重复性好、特异性强、灵敏性高,对玉米黑粉菌的最低检出率为19拷贝/反应,可以准确检测经注射接种后1d的玉米叶片中的黑粉菌量。结论:建立的实时荧光定量PCR方法可用于玉米黑粉菌菌量的检测。
  • 电脉冲刺激法提高小鼠miR-122表达的研究
  • 目的:电脉冲能够改变细胞膜的通透性,促进外源DNA进入细胞内。通过基因导入仪电脉冲刺激已注入质粒pcD-NA3.0-miR-122的小鼠肌肉细胞,检测对小鼠miR-122表达的影响。方法:将扩增得到的pre-miR-122克隆到真核表达载体pcDNA3.0上,构建pcDNA3.0-miR-122表达质粒。利用基因导入仪分别将生理盐水、pcDNA3.0、pcDNA3.0-miR-122质粒DNA导入小鼠腿部肌肉,然后进行电脉冲刺激。qRT-PCR测定各组小鼠血清及肝脏中的miR-122水平,同时检测肝癌组织和经CecropinXJ处理的肝癌组织中的miR-122水平。结果:基因导入仪电脉冲刺激已注入pcDNA3.0-miR-122的腿部肌肉组织后,小鼠血清和肝脏中miR-122的表达分别提高了23和11倍,经CecropinXJ处理的小鼠肝癌组织中miR-122的表达比对照高1.6倍。结论:电脉冲刺激能够显著提高小鼠体内miR-122的表达,为探讨miR-122表达对肝癌生长影响的调控作用奠定基础。
  • 抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体的设计与构建
  • 目的:分析设计抗菌肽MagaininH多拷贝串联体表达质粒并进行构建验证。方法:根据GeneBank中提供的抗菌肽Ma—gaininⅡ氨基酸序列,结合表达菌株毕赤酵母密码子偏爱性,设计出MagaininⅡ的表达序列,并于其两端插入一对同尾酶SalI和XhoI的酶切识别序列及裂解位点AGA,人工合成后插入质粒载体pUCl9中,利用同尾酶法构建抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体。结果:经M13引物进行PCR及SalI/pstⅠ双酶切进行鉴定,成功构建出抗菌肽MagaininII1—5拷贝串联体重组质粒。结论:该研究设计的MagaininⅡ串联体构建方法可行。
  • 贵州黑山羊STAT5A基因多态性及其与生长性状关联分析
  • 目的:探讨STATSA基因SNP与贵州黑山羊生长性状关联性,旨在为山羊选种选育提供更好的科学依据。方法:以贵州黑山羊为研究对象,采用DNA池法及PCR-SSCP技术检测STATSA基因单核苷酸多态性。结果:贵州黑山羊STATSA基因内含子6和外显子7分别检测到1个SNP位点T-90C和C+69T,位点T-90C为2种基因型,分别命名为CC和Tc。基因型与生长性状关联分析显示,贵州黑山羊TC基因型个体的胸围显著高于CC基因型个体(P〈0.05),而其余4个指标均差异不显著(P〉0.05);实验山羊群体基因频率和基因型频率处于哈代-温伯格平衡状态(P〉0.05)。结论:研究结果提示:STATSA基因可能是影响山羊胸围的主效基因或与主效基因连锁,T-90C位点可望作为提高山羊个体生长性能的分子遗传标记。
  • 一株与血红铆钉菇相关的青霉属菌株的分离与鉴定
  • 目的:鉴定一株从采自北京市房山区的野生血红铆钉菇中分离得到的丝状真菌,分析其遗传地位,为进一步研究该菌株与血红铆钉菇的关系奠定基础。方法:以血红铆钉菇为材料,进行了组织分离,获得1株丝状真菌菌株,编号为JZB2120006,对其进行了形态学鉴定,并提取了基因组DNA,进行了ITS片段的扩增、测序及系统发育分析。结果:分子生物学鉴定结果表明,该菌株与PenicilliumsclerotiorumZZ07-5菌株有99.3%的同源性。结论:结合形态学特征将该菌株鉴定为Psclerotiorum,ITS基因序列GenBank登录号为KC594044。
  • 肌酸激酶同工酶MB的原核表达、纯化及冻干品制备
  • 目的:制备稳定性好、特异性强、灵敏度高的肌酸激酶同工酶质控品。方法:将密码子优化后的肌酸激酶M亚基和B亚基序列合成后构建表达载体PET28-M、PET28a-B;将其分别转入B121(DE3)后,用0.5mmol/LIPTG37℃诱导表达得到肌酸激酶同工酶MM和BB;MM和BB分别经Ni2+纯化后按一定比例混合处理、完成后期折叠得到MB;研究蛋白MB最佳冻干工艺,并跟踪冻干品稳定性。结果:目的蛋白M亚基和B亚基分子量大小均为45kD左右,1:1混合25℃静置16h后具有较高的灵敏度和较强的特异性。蛋白冻干后形态良好,37℃可以稳定保存11d;25℃、4℃可以稳定保存4个月以上。结论:该蛋白的冻干制品成本低、稳定性好、特异性强、灵敏度高,可用于定性定量肌酸激酶同工酶CK-MB检测试剂盒的质控品。
  • 酶法生产L-半胱氨酸产酶培养基的研究
  • 摘要:目的:找到能够高效合成L-半胱氨酸合成酶的培养基。方法:研究进行了假单胞菌F12在复合培养基和简单培养基合成L-半胱氨酸能力的对比及产酶过程分析。结果:简单培养基生长的菌体合成L-半胱氨酸能力较高,单位菌体产生L-半胱氨酸能力比复合培养基增大1倍;DL-2-氨基-△2-噻唑啉-4-羧酸(DL-ATC)诱导L-半胱氨酸合成酶的产生;葡萄糖的存在不利于产酶,后期酶的比生产速率为-0.11U/mgDCW·h,对照中为4.04U/mgDCW·h。结论:以DL-ATC为碳氮源的基本培养基最有利于产酶。
  • 高产紫杉醇菌株发酵条件优化
  • 目的:优化WY2菌株发酵条件,提高紫杉醇的产量,为后续研究奠定基础。方法:采用不同的培养基、初始PH、温度、摇床转速、培养时间对曼地亚红豆杉内生真菌进行组合优化培养,测定其对紫杉醇产量的影响。通过正交试验,进一步探究前体物质对紫杉醇产量的影响。结果:使用YES发酵培养基,初始pH值为6.0,培养温度为30℃,摇床转速200r/min为址仆培养条件。当向培养琏Ilfl加入20mg/l的苯丙氨酸、10mg/l的乙酸铵、5mg/l的络氨酸、20mg/1的甘氨酸时,紫杉醪产键渺并提高,达到547μg./1,比初始产量高337%。结论:按照优化后的培养条件,添加合适的前体物质,能够显著提高紫杉醇的产量,满足更大的医药需求。
  • 3-羟基丙酸生产菌育种的研究进展
  • 摘要:3-基丙酸是一种无手性有机酸,同时也是工业上重要的平台化合物,广泛应用于许多化工产品的合成,如聚3-羟基丙酸、丙烯酸和丙烯酰胺。该文综述了国内外近年来对3-羟基丙酸菌株选育工作的研究成果,尤其是基因工程育种方面的研究工作,并对3-羟基丙酸菌种选育存在的问题及下一步研究方向进行探讨。
  • [论著]
    单增李斯特菌hfq基因的克隆及分子特征分析(彭叶龙;乔军;孟庆玲;谢堃;陈诚;刘田莉;马玉;才学鹏;陈创夫)
    DNA甲基化敏感位点(CCGG)文库克隆载体的构建(满红涛;郑可欣;徐艳;张梅;马世良)
    人GNAS1基因克隆、真核表达载体的构建及瞬时转染Hela细胞(李兴暖;王庭;汪涛;刘建云;熊建军;李卫东)
    贵州山羊品种DQA1基因第3外显子遗传变异分析(刘彬;蔡惠芬;张依裕;刘若余;罗卫星)
    HPV-16早期基因E1在果蝇细胞S2中的表达和鉴定(赵晓飞;刘琼;郭景霞;刘晓娟;曾贝妮;马正海)
    nisinZ部分操纵子基因超表达对nisinZ合成的影响(汪蕊;刘秀丽;左芳雷;任发政;陈尚武)
    融合蛋白Somatostatin—HSA不同串联体形式的表达及活性分析(范俊;丁月娣;杨润琳;李文新)
    疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶在大肠杆菌中的表达与纯化(王烃;郭国光;时健;郝兵;王慧;张守涛)
    杆状病毒PK-1亚细胞定位分析(陈雅婷;郭凯;李敏;赵淑玲;吕孝敏;梁昌镛)
    小麦CPP转录因子基因的电子克隆及生物信息学分析(孟超敏;姬俊华;李雪林;尚家)
    黑腹果蝇CG18853基因编码蛋白的生物信息学分析(刘洪超;李玉秀;邹先明;涂心明)
    聚球藻Synechococcus sp.PCC 7336基因组结构解析(李益;饶妮妮;刘汉明;杨峰)
    贵州本地山羊TFB1M基因启动子区多态性生物信息学分析(孙岩岩;罗卫星;谢海强;宋桃伟;刘彬;蔡惠芬)
    [技术与方法]
    BRAF和TP53基因热点突变的构建(张环宇[1,2];王改平;李晓芳;姚谨;陈倩倩;樊路娟)
    鸟分枝杆菌的分离鉴定及其基因组文库构建(姚奇;王爱妍;凌敏)
    云南松基因组微卫星富集文库的序列特征分析(许玉兰[1,2];白青松;张瑞丽;田斌;王大玮;何承忠;蔡年辉;康向阳;段安安)
    玉米黑粉菌实时荧光定量PCR检测方法的建立(魏国荣;李凯瑞;黄雪玲)
    电脉冲刺激法提高小鼠miR-122表达的研究(吴艳玲;夏丽洁;张富春)
    抗菌肽MagaininⅡ多拷贝串联体的设计与构建(成娟丽[1,2];李锋;王红;林金水)
    贵州黑山羊STAT5A基因多态性及其与生长性状关联分析(谢海强;孙岩岩;龚俞;焦仁刚;盘道兴;杨永强;刘若余)
    一株与血红铆钉菇相关的青霉属菌株的分离与鉴定(马元伟;刘宇;马康;许峰;王守现;王兰青)
    [开发与应用]
    肌酸激酶同工酶MB的原核表达、纯化及冻干品制备(任艳娜;才蕾;钱伟;武建伟;唐时幸)
    酶法生产L-半胱氨酸产酶培养基的研究(范翠丽;李志敏;叶勤)
    高产紫杉醇菌株发酵条件优化(乔广军;张海峰;汪忠山;彭国良)
    [专题综述]
    3-羟基丙酸生产菌育种的研究进展(吴孔阳;杨同香;刘飞)
    《生物技术》封面

    主管单位:黑龙江省科学院

    主办单位:黑龙江省微黑龙江省科学院微生物研究所

    主  编:沙长青

    地  址:哈尔滨市道里区兆麟街68号

    邮政编码:150010

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