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文献检索:
  • 参苓白术散抗脂多糖致肠隐窝上皮细胞损伤的作用及其机制
  • 目的研究参苓白术散抗脂多糖(LPS)诱导肠隐窝上皮细胞(IEC-6)损伤作用及其机制。方法用200μg·mL~(-1)LPS复制模型,将IEC-6细胞分为10组:空白对照组,模型组,低(4%)、中(8%)、高(16%)剂量参苓白术散含药血清组,10%胎牛血清(FBS)阴性对照组,ROCK阻断剂Y27632组,MLCK阻断剂ML-7组,MAPK抑制剂SB203580组,ERK抑制剂PD98059组。通过MTT法检测LPS细胞毒性;用蛋白质印迹法(western blot)检测p38MAPK、ERK1/2通路蛋白水平;用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术测定肿瘤坏死因子(TNF-α)mRNA的表达;通过激光共聚焦测定细胞骨架结构蛋白纤维肌动蛋白(F-actin)的变化。结果 MTT实验中,不同浓度的LPS对IEC-6有不同程度的抑制、损伤作用。Western blot和RT-PCR结果显示,与空白对照组比较,模型组IEC-6细胞p38MAPK、磷酸化ERK1/2、TNF-αmRNA水平明显上升;而参苓白术散含药血清对其有明显的下调作用(P〈0.01,P〈0.05)。激光共聚焦检测F-actin实验中,模型组与空白组比较细胞微丝纤维表达显著增多;而参苓白术散含药血清组相对于模型组,细胞微丝纤维表达明显下降。结论参苓白术散含药血清对LPS诱导的IEC-6细胞损伤具有保护作用。
  • 姜黄素对血管紧张素Ⅱ刺激下内皮细胞的保护作用与机制研究
  • 目的研究姜黄素对血管紧张素Ⅱ刺激下人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)的保护性作用及其机制。方法采用MTT法检测HUVECs的细胞活力;生化比色法和ELISA法检测细胞培养上清中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、乳酸脱氢酶(LDH)、一氧化氮(NO)及内皮素-1(ET-1)的含量;实时RT-PCR检测HUVECs的Caspase 3、Caspase 9、Bcl-2、Bax基因的mRNA相对表达水平。结果 1×10~(-7)mol·L~(-1)AngⅡ刺激可以使HUVECs活力降低,使细胞培养上清中SOD、NO含量减少,使MDA、LDH及ET-1含量升高。AngⅡ刺激下HUVECs的Caspase 3、Caspase 9、Bax基因的mRNA相对表达水平均有所上调,Bcl-2基因的mRNA相对表达水平有所下调。不同剂量的姜黄素能够减少AngⅡ刺激下对HUVECs的损伤作用,能够上调SOD、NO的含量及Bcl-2基因的mRNA相对表达水平,同时下调MDA、ET-1及LDH含量及Caspase 3、Caspase 9、Bax基因的mRNA相对表达水平。结论姜黄素对于AngⅡ刺激下的HUVECs具有保护作用,其机制可能与减少细胞氧化应激损伤以及抑制细胞线粒体途径凋亡有关。
  • 党参水提物对D-半乳糖致衰老小鼠肝组织microRNA表达谱的影响
  • 目的研究党参水提物对衰老模型小鼠肝组织micro RNA(miRNA)表达谱的影响,探究中药党参抗衰老的分子机制。方法将100只昆明种小鼠,随机分为正常对照组,D-半乳糖致衰老模型组,低、中、高党参剂量干预组。连续造模42 d,随时监测模型小鼠的一般症状和体质量变化;并在造模结束后检测各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)和碱性磷酸酶(ALP)的值变化;利用Affymetrix miRNA 4.0微阵列芯片筛选了D-半乳糖致小鼠衰老和高剂量党参干预衰老过程中差异表达的miRNA,利用生物信息学工具对芯片结果进行聚类及信号通路分析。结果与正常对照组小鼠比较,衰老模型组小鼠血清ALT和ALP值显著升高(P〈0.05);与衰老模型组比较,党参干预组小鼠血清ALT和ALP值有下降趋势,其中高剂量干预组ALP下降较显著(P〈0.05);芯片聚类分析显示衰老模型组的miRNA表达谱与正常对照组和高剂量党参干预组明显分开,而高剂量党参干预组和正常对照组的miRNA表达谱聚在一起;D-半乳糖致衰老和党参抗衰老相关的差异表达miRNA主要都属于7个miRNA基因簇(miR-466a/b cluster、miR-297a cluster、miR-145a cluster、miR-486 cluster、miR-299a cluster、miR-127 cluster和miR-134 cluster);生物信息学分析显示致衰老过程中差异表达miRNA的靶基因功能显著富集于29条信号通路(P〈0.01),党参干预过程中差异表达miRNA的靶基因,参与调控的信号通路有67个(P〈0.01)。结论 miRNA的靶向调控作用在D-半乳糖致衰老及党参抗衰老过程中发挥着重要作用。
  • 参附注射液对前列腺癌PC-3细胞免疫逃逸的影响
  • 目的研究参附注射液(SF)对前列腺癌PC-3细胞免疫逃逸的影响及可能机制。方法实验设立空白对照组(包括PC-3细胞组、淋巴细胞Jurkat细胞组、PC-3-Jurkat共培养组),参附注射液低、中、高(5,10,20μL·m L~(-1))剂量组。用MTT法检测PC-3细胞活性,Hoechst 33258检测PC-3细胞凋亡,Annexin V/PI染色流式细胞术检测Jurkat细胞凋亡,同时用流式细胞术检测PC-3细胞表面CD95表达。结果分别与对照组比较,作用24 h后,SF中、高剂量组PC-3细胞凋亡增多(P〈0.05),SF低、中、高剂量组Jurkat细胞凋亡减少,同时SF低、中、高剂量组PC-3细胞表面CD95阳性表达率增高。结论 SF对PC-3-Jurkat共培养体系中淋巴细胞凋亡有抑制作用,增强PC-3细胞表面CD95表达,SF可能通过此途径阻滞前列腺癌细胞的免疫逃逸,从而发挥抗肿瘤作用。
  • 马鞭草经皮透过液对B16黑色素瘤细胞的作用
  • 目的研究马鞭草经皮透过液对B16黑色素瘤细胞的作用,在细胞水平上验证其具有美白活性。方法使用MTT法测定马鞭草经皮透过液对B16细胞增殖的影响;L-Dopa氧化法测定经皮透过液对B16黑色素瘤细胞内酪氨酸酶活性的影响;NaOH裂解法测定细胞内黑色素含量的影响;DAPI染色法检测细胞凋亡情况。结果马鞭草经皮透过液对B16黑色素瘤细胞的增殖、酪氨酸酶活性以及细胞内黑色素含量均有抑制作用,且其浓度越高抑制作用越强。结论马鞭草经皮透过液不仅影响B16黑色素瘤细胞的增殖,同时也影响细胞内酪氨酸酶的活性以及黑色素的合成,提示马鞭草具有对皮肤美白活性的功效,对开发成天然美白产品具有良好前景。
  • 右归丸干预肾间质纤维化的作用机制研究
  • 目的探讨右归丸对腺嘌呤诱导的大鼠肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis,RIF)的干预作用。方法取SD大鼠50只,随机分为空白对照组,模型组,右归丸低、中、高(2.25,4.50,9.00 g·kg~(-1))剂量组,每组10只。每天上午8点各组给予腺嘌呤(0.15 g·kg~(-1))灌胃制备RIF模型,空白对照组给予等量生理盐水,下午17点右归丸各组灌胃给予相应剂量的右归丸,给药体积均为10 m L·kg~(-1),空白对照组和模型组给予等量生理盐水,连续15 d。给药期间定期测定大鼠体质量,实验结束称取各组大鼠肾质量并计算肾指数,肾组织进行病理HE染色,测定血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)水平,抗氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),炎性因子白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)。结果与空白对照组比较,模型组大鼠体质量显著降低(P〈0.01),肾质量、肾指数显著增加(P〈0.01),SCr、BUN水平显著增加(P〈0.01),肾小管重度萎缩、坏死。炎细胞浸润、纤维结缔组织增生,SOD显著降低、MDA显著增加(P〈0.05,P〈0.01),炎性因子IL-1β和IL-6显著增加(P〈0.05,P〈0.01)。与模型组比较,右归丸组对大鼠体质量有一定的改善作用,差异无统计学意义(P〉0.05);但可减轻大鼠肾质量、肾指数(P〈0.01),显著降低SCr、BUN水平(P〈0.05),对肾小管重度坏死萎缩、炎细胞浸润及纤维结缔组织增生均有不同程度的改善作用,有显著增加SOD、降低MDA的作用(P〈0.05),能够显著降低炎性因子IL-1β和IL-6的水平(P〈0.05,P〈0.01)。结论右归丸对腺嘌呤诱导的RIF有明显的改善作用。
  • 生姜乙醇提取物改善果糖所致大鼠脂肪肝的作用机制研究
  • 目的观察姜提取物改善果糖所致大鼠脂肪肝的作用,并探讨其可能的作用机制。方法取SD大鼠24只,随机分为4组,每组6只,即正常对照组(给予正常饮食饮水),模型组(给予10%果糖水),姜提取物低、高剂量组20,50 mg·kg~(-1),给予姜提取物灌胃,连续28 d。用酶法和ELISA检测血浆葡萄糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)和胰岛素含量,苏木精-伊红(HE)染色和油红-O染色观察肝脏组织中的脂肪沉积程度,RT-PCR和Western blot法检测肝脏相关基因和蛋白表达。结果姜提取物逆转了果糖过量消耗引起的大鼠肝脏甘油三酯的过度堆积(P〈0.05)、肝细胞空泡化的增加和肝脏油红-O染色面积的增加(P〈0.05)。然而,姜提取物并不影响大鼠食物摄入量和体质量。姜提取物能够抑制肝脏二脂酰甘油酰基转移酶(DGAT)-2 mRNA和蛋白的过表达(P〈0.05),但对肝X受体(LXR)、DGAT-1、单酰甘油酰基转移酶(MGAT)-1、MGAT-2、激素敏感脂肪酶(HSL)和脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)mRNA的表达无影响。结论姜提取物可能通过抑制介导肝脏甘油三酯生物合成的关键酶DGAT-2的过表达,从而改善果糖所致大鼠脂肪肝。
  • 左归丸对化疗致POF模型小鼠卵巢Cx37及mRNA表达的影响
  • 目的通过观察左归丸对化疗致卵巢早衰(POF)模型小鼠卵巢Cx37蛋白及mRNA表达的影响,探讨左归丸治疗POF的作用与机制。方法将昆明雌性小鼠72只随机分为空白组,模型组,戊酸雌二醇片组,左归丸低、中、高剂量组。除空白组小鼠腹腔注射等量生理盐水外,其余各组小鼠均按30 mg·kg~(-1)剂量腹腔注射环磷酰胺,每天1次,连续20 d,复制POF模型;同时从造模第1天开始按剂量要求进行灌胃给药,每天1次,连续30 d。末次给药2 h后处死小鼠,摘取双侧卵巢,部分卵巢组织液氮保存。采用RT-PCR法检测卵巢Cx37 mRNA表达;采用Western-blot法检测卵巢Cx37蛋白的表达;采用免疫组化方法检测卵巢组织Cx37蛋白的分布。结果左归丸可有效增强化疗致POF模型小鼠卵巢Cx37 mRNA基因表达(P〈0.05,P〈0.01),增强卵巢组织Cx37蛋白表达(P〈0.05),增加Cx37蛋白在卵巢颗粒细胞中的分布(P〈0.05)。结论左归丸可有效增强化疗致POF模型小鼠卵巢组织Cx37mRNA表达,上调Cx37蛋白在卵巢组织中的分布与表达,改善化疗致POF模型小鼠卵巢组织缝隙连接功能,恢复卵巢功能。
  • 参苓白术散对NAFLD大鼠肝脏脂质代谢及SIRT1/UCP2通路的影响
  • 目的观察参苓白术散对高脂饲料建立的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠脂质代谢及沉默信息调节因子1(SIRT1)/解偶联蛋白2(UCP2)通路的调控机制。方法取SD大鼠32只,随机分为4组,即正常组,模型组,参苓白术散高、低剂量组(30,10 g·kg~(-1)),每组8只。采用高脂饲料喂养大鼠16周建立NAFLD大鼠模型,给药组大鼠灌服参苓白术散,16周后取血和肝组织样本,全自动生化仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量;对肝组织进行油红O染色;实时荧光定量RT-PCR仪检测肝组织SIRT1、UCP2 mRNA表达水平;Western blotting检测肝组织SIRT1、UCP2蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠病理证实肝组织脂质蓄积严重,血清TG、TC含量明显升高(P〈0.01),肝组织SIRT1 mRNA及蛋白表达均显著降低(P〈0.05),UCP2 mRNA及蛋白表达显著升高(P〈0.05,P〈0.01)。与模型组比较,参苓白术散高、低剂量组肝组织脂质蓄积明显改善,血清TG、TC含量明显下降(P〈0.05),肝组织SIRT1 mRNA和蛋白表达均显著上调(P〈0.05,P〈0.01),UCP2 mRNA和蛋白表达显著降低(P〈0.01),其中,参苓白术散高剂量组较低剂量组效果好;但二者比较差异无统计学意义。结论参苓白术散能够改善高脂饮食诱导的NAFLD大鼠脂肪代谢紊乱、减轻肝脏脂质蓄积,其作用机制可能与肝细胞内SIRT1/UCP2通路的激活有关。
  • 来源于海洋真菌的Oxalicumone A诱导肝细胞L-02凋亡的毒性作用机制研究
  • 目的评价来源于海洋真菌Penicillium sp.的新药候选化合物Oxalicumone A(POA)对人正常肝细胞L-02的细胞毒性作用,初步探讨POA诱导其凋亡的作用机制。方法以体外培养的L-02为实验对象,CCK-8检测细胞存活率;Hoechst 33258染色观察细胞形态学的改变;流式细胞仪检测细胞凋亡率和增殖周期;Western blot检测凋亡相关蛋白Fas、Bax以及Bcl-2的表达。结果 CCK-8检测结果表明,POA对L-02细胞有一定的时间、浓度依赖性的抑制作用;Hoechst 33258染色可见细胞出现核固缩、碎裂、浓染等典型的凋亡细胞形态学改变;流式细胞仪检测显示细胞早期凋亡率和Sub-G1、S、G2/M期出现了相应比例的增加;Western blot法表明POA显著增加了凋亡蛋白Fas、Bax表达(P〈0.05),降低了抗凋亡蛋白Bcl-2表达(P〈0.05)。结论 POA体外诱导L-02细胞毒活性,产生凋亡并经过线粒体信号通路,其作用机制与Bcl-2表达下调以及Fas、Bax表达上调有关。
  • 青蒿素类药联合紫杉醇对小鼠黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用
  • 目的观察青蒿琥酯(ATS)、双氢青蒿素(DHA)和紫杉醇(Taxol)及ATS联合Taxol对小鼠黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用,评价各组药物对小鼠黑色素瘤B16细胞的杀伤作用,初步探讨ATS与Taxol联合给药对小鼠黑色素瘤B16细胞是否有协同增效作用。方法采用CCK-8法检测ATS、DHA和Taxol单药对小鼠黑色素瘤B16细胞作用24 h和48 h的抑制作用,并计算半数抑制浓度(IC_(50))值;检测ATS联合Taxol不同配比AT(1∶1)、AT(3∶2)和AT(7∶3)对小鼠黑色素瘤B16细胞作用48 h的抑制作用。运用质量作用中效定理和药物合并指数定理分析两药联合是否具有协同增效作用。结果 ATS、DHA和Taxol单药作用于小鼠黑色素瘤B16细胞的IC_(50)值,在24 h时,分别为126.56,86.09,3.27μmol·L~(-1);在48 h时,分别为1.36,15.11,0.97μmol·L~(-1)。ATS联合Taxol 3个浓度组AT(1∶1)、AT(3∶2)和AT(7∶3)对小鼠黑色素瘤B16细胞作用48 h,联合用药合并指数(CI)均小于1。结论 ATS、DHA和Taxol单药对小鼠黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用随着药物浓度和时间的增加而明显增加,呈剂量和时间依赖性。青蒿琥酯联合紫杉醇抑制小鼠黑色素瘤B16细胞增殖,有良好的协同增效作用。
  • β-细辛醚对阿尔茨海默病细胞模型的作用及对神经元突触功能可塑性的影响
  • 目的探索β-细辛醚对于阿尔茨海默病(Alzheimer's Disease,AD)细胞模型的作用及其可能机制。方法选用Aβ1-42的浓度为10μmol·L~(-1)作为建模条件,以NG108-15细胞为研究对象,建立体外AD细胞模型,β-细辛醚低、中、高剂量组(6.25,12.5,25μmol·L~(-1))分别进行干预,通过MTT法检测细胞活力,并观察β-细辛醚对细胞形态学的影响以及Wesstern blot法检测细胞突触的相关功能蛋白突触素蛋白(Synaptophysin,SYP)、以及AMPA受体亚单位(Glutamatergic receptor 2,GluR2)的表达。结果 MTT结果显示,β-细辛醚高剂量组干预24 h后能显著减轻Aβ1-42的毒性损伤(P〈0.05)。从细胞形态上看,细辛醚各剂量组跟模型组差异显著,跟溶媒对照组比较无明显差异。与模型组SYP相对表达量比较,溶媒对照组、β-细辛醚中、高剂量组差异均有统计学意义(P〈0.05)。β-细辛醚中、高剂量组的SYP表达量显著上调。而各组GluR2相对表达量比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论β-细辛醚高剂量组能显著改善细胞形态以及提高细胞活力,具有一定的神经保护作用,可能是通过上调SYP的表达,从而影响突触功能,改善认知。
  • 柴胡皂苷d对肝星状细胞ERα和ERβ蛋白水平的调节
  • 目的研究柴胡皂苷d对肝星状细胞ERα和ERβ蛋白的调节作用。方法体外培养肝星状细胞系HSC-T6,细胞铺板24 h后,用柴胡皂苷d或雌二醇处理HSC-T6细胞;或者先以雌激素受体拮抗剂(ICI-182.780)预处理细胞30 min后,再用柴胡皂苷d或雌二醇处理细胞。用Western blot方法观察柴胡皂苷d对雌激素受体表达的影响。结果柴胡皂苷d(5μmol·L~(-1))和雌二醇(1μmol·L~(-1))处理细胞后能显著提高HSC-T6细胞ERα和ERβ蛋白的表达水平,且作用24 h后的上调作用最显著(P〈0.01);柴胡皂苷d和雌二醇上调ERβ表达的作用比上调ERα表达的作用强。结论柴胡皂苷d能够上调HSC-T6细胞ERα和ERβ蛋白表达,是一种雌激素受体调节剂。
  • 多次给药法评价芪灯明目胶囊对葛根素生物利用度的影响
  • 目的研究芪灯明目胶囊胶囊配伍对葛根中葛根素口服生物利用度的影响。方法选取单次给予葛根提取物20 min后血浆葛根素浓度变异较小的健康SD大鼠12只,按葛根素浓度从大到小交错分配为芪灯明目胶囊组及葛根提取物组,分别灌胃给予芪灯明目胶囊及葛根提取物(均相当于葛根素100 mg·kg~(-1)),每4h给药1次,共3次。每次给药后采集当次给药5,20 min血液及末次给药后6,8h血液,分离血浆,采用HPLC-UV法测定葛根素浓度。ADAPT5.1软件计算药动学参数,并采用kinetica 5.5软件生物等效性模块对C_(max)、T_(max)AUC_(0-t)、AUC_(0-∞)进行等效性检验。结果大鼠血浆中葛根素药-时曲线采用无滞后时间的二房室模型拟合较优;芪灯明目胶囊组给药后葛根素K_a、C_(max)、AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)有降低趋势,但各参数等效性检验差异无统计学意义。结论芪灯明目胶囊组方配伍对葛根素生物利用度无明显影响;多次给药的生物等效性评价方法与临床应用吻合,实验结果稳定可靠。
  • UPLC-MS/MS测定金茵清热口服液中绿原酸和大黄素血药浓度及大鼠体内药代动力学研究
  • 目的建立UPLC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中绿原酸与大黄素的含量,并对金茵清热口服液主要成分绿原酸、大黄素进行药代动力学研究。方法血浆样品经乙酸乙酯液液萃取后,经Waters BEH C_(18)色谱柱分离,采用梯度洗脱模式,流动相为甲醇(A)-2 mmol·L~(-1)乙酸铵水溶液(B)。UPLC-MS/MS法测定不同时间点血浆中绿原酸和大黄素血药浓度,多反应离子监测(MRM)模式进行定量分析,用于监测的离子反应对分别为m/z353.1→191.0(绿原酸)、m/z 150.1→107.0(内标对乙酰氨基酚)和m/z 269.1→241.0(大黄素),DAS3.2.7数据处理软件对数据进行统计学处理。结果绿原酸在2.5□2500 ng·mL~(-1),大黄素在1.9□1900 ng·mL~(-1),具有良好的线性关系,平均回收率均大于74%,日内和日间精密度(相对标准偏差,RSD)均〈9.4%。绿原酸药动学参数:t_(1/2)=(426.5±43.2)min,AUC_(0-t)=(255.2±73.2)ng·mL~(-1)·h.AUC_(0-∞)=(271.1±93.3)ng·mL~(-1)·h,T_(max)=(50.0±6.1)min;大黄素药动学参数为:t_(1/2)=(129.0±44.6)min,AUC_(0-t)=(147.4±93.0)ng·mL~(-1)·h,AUC_(0-∞)=(22.5±4.4)ng·mL~(-1)·h,T_(max)=(118.0±12.3)min。结论本研究建立了金茵清热口服液中绿原酸、大黄素在大鼠血药浓度的测定方法,该方法准确、灵敏、稳定性好、回收率高,适用于其药动学的研究。
  • 高脂血症大鼠造模过程中血液代谢组学研究
  • 目的采用超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-TOF-MS)代谢组学法动态观察高脂血症大鼠造模过程中血液的代谢轮廓的改变,寻找高脂血症演化过程中的生物标志物。方法将SD大鼠分成正常对照组和模型组,运用高脂乳剂灌胃法复制高脂血症大鼠模型,并收集不同时间点的血样,采用UPLC-TOF-MS检测并进行主成分分析。结果随着造模时间的延长,高脂血症大鼠血清代谢轮廓呈现动态演变。与正常对照组比较,模型组鞘磷脂、乙酰糖蛋白、谷酰胺、3-羟基丁酸、甲硫氨酸、甜菜碱、磷脂酰胆碱、柠檬酸、乌头酸、肌酸、3-吲哚硫酸、赖氨酸、甘氨酸等21种物质发生明显改变。结论在高脂血症进展过程中,不仅大鼠血液脂质代谢发生了紊乱,而且还伴随着糖代谢、氨基酸代谢的紊乱以及炎症和氧化应激。
  • 红景天对慢性冷应激大鼠模型血浆和尿液代谢组的影响
  • 目的应用基于核磁共振氢谱(nuclear magnetic resonance ~1H,NMR ~1H)的代谢组学方法研究红景天对慢性冷应激刺激模型大鼠血浆和尿液代谢组的影响。方法雄性Wistar大鼠30只,随机分为3组:正常对照组、模型组和红景天组。模型组和红景天组大鼠每天置于4℃环境中4 h,连续刺激2周,同时红景天组给予红景天水煎液5 g·kg~(-1)·d~(-1)灌胃。正常对照组和模型组给予等体积的纯净水灌胃。采集大鼠血浆和尿液的NMR ~1H谱,运用主成分分析法(principal component analysis,PCA)进行数据分析。结果红景天组与模型组代谢特征明显不同,其代谢特征更接近正常对照组。与模型组比较,红景天组血浆中甘氨酸升高,乳酸、乙酰乙酸、肌酸、肌酐、甘油磷脂胆碱、磷脂胆碱、牛磺酸、氧化三甲胺和甜菜碱降低;尿液中色氨酸增加,α-酮戊二酸、乙酰乙酸、柠檬酸、氧化三甲胺、甜菜碱、牛磺酸和马尿酸减少。结论红景天能够调控机体能量代谢,以及牛磺酸、氨基酸(甘氨酸和色氨酸)和胆碱的代谢,对冷应激状态下代谢紊乱大鼠具有保护作用。
  • 基于蛋白质组学技术筛选葛根芩连汤防治胰岛素抵抗作用的血清差异表达蛋白
  • 目的采用蛋白质组学技术筛选鉴定2型糖尿病胰岛素抵抗模型大鼠模型组、葛根芩连汤组血清差异表达蛋白,推测葛根芩连汤防治胰岛素抵抗的机制。方法葛根芩连汤组和模型组通过体内高脂饲料联合链脲佐菌素建立大鼠胰岛素抵抗动物模型,连续灌胃给药3个月,于末次给药后1h,取血清,去除高丰度蛋白后,进行蛋白变性、还原、烷基化、酶解及脱盐后,利用液相Thermo EASY-nlc1000和质谱仪LTQ orbitrap Elite分析鉴定,利用Xcalibur软件和Thermo Proteome discoverer1,4进行数据处理,采用SIEVE v2.1×64进行无标定量分析寻找相关差异蛋白,筛选并鉴定差异表达蛋白,并对差异表达蛋白进行生物信息学分析。结果通过质谱鉴定分析,葛根芩连汤组与模型组差异表达蛋白76个,其中上调49个,下调27个。分析显示差异蛋白主要涉及细胞周期调控、炎症反应、信号通路调节等生物过程。其中上调蛋白磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)(Q63788)、胰岛素受体底物蛋白(IRS)(P35570)等以及下调蛋白载脂蛋白C-Ⅲ(APOC-Ⅲ)(P〈06759)、肝型脂肪酸结合蛋白(FABP1)(P〈02692)等差异蛋白可能参与了胰岛素信号转导等通路。结论通过有效的比较分析,得到了一些参与胰岛素信号转导等通路的差异表达蛋白,为研究葛根芩连汤防治胰岛素抵抗的分子机制提供了新靶点。
  • 南药“凉粉草”药材水溶性成分HPLC指纹图谱鉴别研究
  • 目的建立南药"凉粉草"水溶性成分的HPLC指纹图谱,为药材质量控制提供依据。方法采用Kromasil C_(18)(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,流速1.0 mL·min~(-1),检测波长254nm,柱温25℃。结果建立凉粉草药材水溶性成分HPLC指纹图谱,确定11个共有色谱峰,并指认图谱中的5个色谱峰,分别为咖啡酸、异槲皮苷、迷迭香酸苷、紫云英苷、迷迭香酸。对16批凉粉草药材指纹图谱进行聚类分析和主成分分析,筛选并判断合格样品,以合格样品构建指纹图谱共有模式,并用国家药典委员会中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004B版)对其质量进行分析与评价。结论该色谱方法简单、准确、重复性好,可用于凉粉草药材的质量评价。
  • 赤芝孢子油软胶囊与常见植物油所含植物脂肪酸甘油酯HPLC指纹图谱比较
  • 目的建立赤芝孢子油软胶囊中植物脂肪酸甘油酯的HPLC-ELSD指纹图谱,并与植物油HPLC色谱图进行比较。方法采用高效液相色谱.蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定14批赤芝孢子油软胶囊与7种植物油样品。色谱柱为Diamonsil C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-异丙醇(体积比为51:49),流速:1.0 mL·min~(-1),ELSD漂移管温度:47℃,载气流速:3.2 L·min~(-1)。结果建立了赤芝孢子油软胶囊中植物脂肪酸甘油酯的HPLC-ELSD指纹图谱,标定了10个共有色谱峰,采用对照品指认了其中4个峰。赤芝孢子油软胶囊HPLC-ELSD指纹图谱与植物油的液相色谱图存在明显的差异。结论该方法简便、特异、重现性好,可为赤芝孢子油软胶囊的质量控制提供参考。
  • 黄连的UPLC-MS/MS指纹图谱研究
  • 目的建立黄连超高效液相色谱—三重四级杆串联质谱(UPLC-MS/MS)指纹图谱分析方法,为其质量控制、研究开发和应用提供科学依据。方法采用ACQUITY UPLC BEHC_(18)色谱柱(1.7μm,100mm×2.1 mm),以水(A,含0.05%甲酸)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱;柱温:40℃,流速:0.4 mL·min~(-1),进样量2μL。利用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)》对其进行相似度评价。结果建立了黄连UPLC-MS/MS指纹图谱的共有模式,确定了18个共有峰,并根据对照品和参考文献指认了5个共有峰,对11批不同产地和品种的药材相似度进行了考察,其相似度在0.90以上。结论首次建立了黄连药材UPLC-MS/MS指纹图谱分析方法,该分析方法快速、灵敏、简便,可为黄连药材各品种的质量控制提供实验依据。
  • 科技论文“前言”和“讨论”的撰写方法
  • 1."前言"的写法(1)突出重点。在回顾前人所作的研究工作时,应找具有代表性的、与本研究关系最密切的资料来阐述,避免写成文献综述。(2)注意深度。在论述本人所作研究时,一些普及的、为公众所熟知的原理和知识,不必一一赘述,如教科书中早已有的公式,众所周知的基础理论等等。(3)审慎评价。在介绍自己的研究成果时,切忌拔高或降低,比如一些词汇:"国内首创"、"从未见报道"、"国际水平"、"国内领先”、“填补空白”等,都属拔高的评价;而诸如“不足之处敬请原谅”、“限于时间和水平”、“请读者批评指正”等语言,则属大可不必客气的俗语,均应避免使用。只要如实报道自己的成果就行了,质量高低读者自会评价。(4)-g列图表。因为前言只是简要地阐述论文的研究情况,故一些详细的研究数据和资料如图、表、公式、照片等不宜列入。
  • 地黄炮制前后化学成分的UHPLC-Q-TOF/MS比较研究
  • 目的比较地黄生品、酒品、蒸制品各项质控指标及化学成分的差异。方法按照中国药典2010版标准,测定地黄不同炮制品的水分、总灰分、醇溶性浸出物,并建立HPLC方法比较地黄不同炮制品主要化学成分的差异,考察方法的线性、精密度、稳定性、重复性及加样回收率,同时使用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UHPLC-Q-TOF/MS)鉴定地黄不同炮制品的主要差异化学成分。结果地黄酒品和蒸品的水分分别为6.06%和10.02%,总灰分分别为6.70%和6.47%,酸不溶性灰分分别为2.63%和2.39%,水溶性浸出物分别为72.62%和77.81%,测定结果均符合中国药典2010版的要求。运用高分辨质谱鉴定了8个主要差异化学成分,即连翘酯苷E、洋地黄叶苷B、焦地黄苯乙醇苷A1、毛蕊花糖苷、异麦角甾苷、连翘酯苷、焦地黄苯乙醇苷D和地黄苷。结论地黄经炮制后梓醇含量显著上升,而其他主要化学成分的含量显著降低,这可能是不同炮制品临床功效存在差异的主要原因。
  • 生物诱导法所产不同部位沉香挥发油成分分析
  • 目的评价生物诱导法刺激白木香所产不同部位沉香质量。方法以乙醚冷浸法对提取诱导6个月后所得沉香挥发油,采用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对其挥发油进行分析。结果共鉴定出159个成分,包括白木香木质部外侧黑色结香部分(B部分)86个成分,内侧棕色初结香部分(Z部分)73个成分;B部分以色酮类、芳香族类、倍半萜类等沉香特征性成分为主,Z部分以直链烷烃类为主。结论生物诱导法首先影响到的木质部外层(B部位)已含有丰富的沉香特征性成分,而后期影响到的木质部内层(Z部分)鲜见沉香特征性成分,说明该法是从外及内逐步影响白木香木质部,所形成的沉香质量也有显著差异。
  • 乌参醒脑滴丸中银杏萜类内酯成分的质量控制研究
  • 目的控制银杏叶提取物原料质量并建立乌参醒脑滴丸中萜类内酯成分的含量测定方法。方法采用AB-8大孔吸附树脂进行银杏叶萜类内酯提取优化,HPLC-ELSD法检测4种萜类内酯白果内酯及银杏内酯仁、A、B的含量,优选提取部位入药。优化色谱条件,采用Diamonsil-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5.0μm)色谱柱,柱温34℃;以甲醇-0.2%甲酸水为流动相进行梯度洗脱,流速为0.7 mL·min~(-1);蒸发光散射检测器检测,载气压力为30 psi,漂移管温度为80℃,同时测定乌参醒脑滴丸中白果内酯、银杏内酯仁、银杏内酯A、银杏内酯B的含量。结果乌参醒脑滴丸优选60%乙醇提取部位干浸膏进行成药制剂,滴丸制剂中4种成分(白果内酯及银杏内酯C、A、B)分别在4.77~47.70mg·mL~(-1),2.31-23.10mg·mL~(-1),4.79~47.94mg·mL~(-1),2.32~23.25mg·mL~(-1)浓度的常用对数(X)与峰面积的常用对数(Y)呈良好的线性关系。其4种萜类内酯成分的平均回收率分别为92.1%,91.5%,93.7%,93.7%;RSD分别为2.31%,2.77%,2.12%,1.36%。结论 HPLC-ELSD法测定乌参醒脑滴丸4种萜类内酯分离度好,专属性强。该研究可保证乌参醒脑滴丸萜类内酯成分原料可控,成分可控。
  • 结合药效学优选麻荆颗粒中麻黄提取方法
  • 目的优选麻黄最佳提取溶剂和提取方法。方法以麻黄提取物中麻黄碱含量为指标,考察水煎法、乙醇回流提取法的提取率,并结合药效学实验进行提取溶剂和提取方法的优选。结果麻黄醇提提取率为68.39%,水提提取率为62.16%,小鼠止咳、祛痰药效学实验2种工艺均有显著效果,麻黄水提方法祛痰效果更佳。结论水提方法生产更加经济简便,最终采用水提方法。
  • 抑乳调经颗粒含量测定方法的研究
  • 目的通过定量测定抑乳调经颗粒中多种指标成分,公式评分法综合评价制剂的质量,进一步完善其质量标准。方法采用高效液相色谱法(HPLC)对抑乳调经颗粒中君药成分水晶兰苷,臣药成分苔黑粉葡萄糖苷,佐药成分芍药苷,使药成分甘草苷,进行含量测定。结果 4种成分分别在2.156~53.9μg·mL~(-1)(r=0.9999),2.03~50.75μg·mL~(-1)(r=0.9998),3.26~81.5μg·mL~(-1)(r=0.9999),1.42~35.5μg·mL~(-1)(r=0.9999)范围内线性关系良好,加样回收率分别为100.32%,99.43%,101.61%,98.96%。结论该方法准确可靠,能全面控制该颗粒的内在质量,可作为该颗粒的含量测定标准。
  • 丹参饮超临界CO_2提取工艺研究
  • 目的优选丹参饮中脂溶性成分超临界CO_2提取的最佳工艺条件。方法以丹参饮超临界CO_2提取物中乙酸龙脑酯、隐丹参酮、丹参酮ⅡA的含量为指标,采取U_5(5~3)均匀设计实验方案,考察提取压力、提取温度、提取时间3个因素对提取工艺的影响。结果优选工艺为提取压力30 MPa、提取温度45℃、提取时间2.5 h。在此条件下,提取物中乙酸龙脑酯、隐丹参酮、丹参酮ⅡA含量的综合评分为91.93。结论该工艺具有萃取率高、速度快、操作简单等优点,可用于丹参饮中脂溶性成分的提取。
  • 芪元颗粒中总黄酮的提取纯化工艺研究
  • 目的优选芪元颗粒中总黄酮的提取和纯化工艺。方法以出膏率和总黄酮得率作为考察指标,采用L_9(3~4)正交试验确定最佳的提取工艺条件;并以pH值、时间、温度、上样量、洗脱溶剂种类和体积为影响因素,通过比较聚酰胺对芪元颗粒中总黄酮的吸附率与解吸率,确定最佳纯化工艺条件。结果最佳的提取工艺:用6倍量70%的乙醇提取2次,每次0.5 h;最佳的纯化工艺:上样量为8 mL(浓度6.28 mg·m L~(-1)),在pH=6,温度为20℃的条件下,控制流速为1 mL·min~(-1),吸附1.5 h,之后用90%的乙醇100 mL进行洗脱。结论所得提取和纯化工艺简单可行,效果良好。
  • 热毒宁注射液治疗普通型登革热的有效性及安全性临床研究
  • 目的评价热毒宁注射液治疗登革热(普通型)住院患者的有效性和安全性。方法总计143位登革热(普通型)住院患者纳入研究,随机分为对照组和试验组,对照组接受对症治疗,试验组在对症治疗基础上使用热毒宁注射液。研究主要终点为患者发热缓解时间、治疗1周内血白细胞与血小板恢复正常率和治疗1周内疾病痊愈率。结果试验组发热缓解时间显著短于对照组(P〈0.0001),治疗1周内试验组血白细胞和血小板恢复正常率明显高于对照组(P〈0.0001),治疗1周内疾病痊愈率试验组明显高于对照组(P〈0.0001)。结论热毒宁注射液在对症治疗基础上治疗普通型登革热具有较好疗效,特别是退热效果具有明显优势。
  • 登革热诊疗指南(2014年第2版)
  • 登革热是由登革病毒引起的急性传染病,主要通过埃及伊蚊或白纹伊蚊叮咬传播。一、病原学登革病毒属黄病毒科黄病毒属。登革病毒颗粒呈球形,直径45~55 nm。登革病毒共有4个血清型(DENV-1、DENV-2、DENV-3和DENV-4),4种血清型均可感染人,其中2型重症率及病死率均高于其他型。
  • 自噬对庆大霉素诱导的大鼠肾损伤及修复作用的研究
  • 目的探究自噬在庆大霉素诱导的大鼠肾损伤及修复过程中的作用。方法健康SD大鼠随机分为:生理盐水(NS)组,庆大霉素(gentamicin,GM)组和雷帕霉素(rapamycin,RAP)组。NS组大鼠腹腔注射NS,其他各组大鼠每天腹腔注射GM 100 mg·kg~(-1),同时RAP组大鼠每天灌胃RAP 1.5 mg·kg~(-1),连续7 d。分别在给药2,7,17 d后采集动物肾、血、尿液等样本。观察各组大鼠肾指数、血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,Bun)、尿液中肾损伤分子1(Kidney Injury Molecule1,Kim~(-1))表达水平及不同时期微管相关蛋白1轻链3(Microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)的变化情况。HE染色观察各时间点肾组织病理变化。结果与NS组比较,连续7 d给予GM后,GM组和RAP组均表现出肾指数、血Bun和Scr、尿Kim-1等水平显著升高(P〈0.05,P〈0.01),而在第17天时,GM组和RAP组大鼠均表现出肾指数、血Bun和Scr、尿Kim-1等不同水平的降低,且RAP组降低程度较GM组明显。在第7天时,与NS组比较,GM组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著性降低(P〈0.05),RAP组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值显著性升高(P〈0.01),在第17 d时,GM组和RAP组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均显著性升高(P〈0.05)。HE染色表明肾损伤水平出现损伤加剧后的修复现象。结论自噬能够延缓GM诱导的肾损伤的发生,同时在肾损伤后修复过程中,自噬发挥重要的保护作用。
  • 丹皮酚心血管活性的研究进展
  • 丹皮酚是毛茛科植物牡丹根皮和萝摩科植物徐长卿全草的主要活性成分。近年来其心血管活性作用受到广泛关注,但尚未应用于临床。本文综述了丹皮酚的心血管活性作用。结果表明,丹皮酚具有显著的抗高血压、改善血液流变性、抗动脉粥样硬化、保护缺血组织、抗缺血再灌注性损伤、抗心律失常等多方面的心血管活性作用。因此,丹皮酚的心血管活性作用应引起足够的重视,宜加强其基础理论、实验及增加临床适应症等研究,尽早将其应用于临床。
  • 热休克蛋白与肺癌相关性的研究进展
  • 热休克蛋白作为细胞抵抗外界刺激的产物,能够快速清除异常或变性蛋白而保护细胞免受损伤。近年来研究发现肿瘤细胞中热休克蛋白的水平高于正常细胞,过度表达的热休克蛋白在肿瘤的发生发展过程中起重要作用,且影响肿瘤的治疗效果。本文概述了热休克蛋白与肺癌相关性的研究,总结用于肺癌治疗的热休克蛋白抑制剂的研究现状,并探讨了从中药中筛选高效低毒热休克蛋白抑制剂的可行性,为研究肺癌发病机理及开发高效肺癌药物提供相关参考。
  • 《中药新药与临床药理》杂志稿约(2016年)
  • 《中药新药与临床药理》杂志是由国家食品药品监督管理总局主管,广州中医药大学主办的一份中医药学术期刊,国内外公开发行,1990年创刊。标准刊号:ISSN 1003-9783,CN 44-1308/R,现为双月刊,邮发代号:46-210。该杂志是全面报道中药新药研究与开发的学术性期刊,为中国中文核心期刊、中国科技核心期刊(统计源期刊)及中国科学引文数据库来源期刊(CSCD)、RCCSE中国核心学术期刊。为保证期刊质量,加强对刊物的科学管理,有利于进入国内权威的检索系统和数据库,促进国内外学术交流,根据国家的有关标准和科技期刊的编排规范,我刊对来稿做出如下要求。
  • [药效与毒理学研究]
    参苓白术散抗脂多糖致肠隐窝上皮细胞损伤的作用及其机制(刘玉晖;刘志勇;廖旺娣;肖雄;游宇)
    姜黄素对血管紧张素Ⅱ刺激下内皮细胞的保护作用与机制研究(董正妮;云彩霞;田立俊)
    党参水提物对D-半乳糖致衰老小鼠肝组织microRNA表达谱的影响(王晶;李海龙[1,2];耿广琴;楚惠媛;王勇;陈彻)
    参附注射液对前列腺癌PC-3细胞免疫逃逸的影响(白遵光;吕立国;吴巧玲;张娴;王昭辉;代睿欣;陈志强)
    马鞭草经皮透过液对B16黑色素瘤细胞的作用(郭殷锐;李沁莹;张广唱;苏雪芬;王剑)
    右归丸干预肾间质纤维化的作用机制研究(陈叶香;许立;孙帅军;王曼;王新宇;蒋宝平;余黎;喻斌)
    生姜乙醇提取物改善果糖所致大鼠脂肪肝的作用机制研究(陈婷;姚玲;柯大智;左国伟;曹纬国;王尚;马朋;蒋丽蓉;Johji Yamahara;Yuhao Li[2,6];王建伟)
    左归丸对化疗致POF模型小鼠卵巢Cx37及mRNA表达的影响(阳松威;孙晓峰;贺又舜;陈聪;龚力民)
    参苓白术散对NAFLD大鼠肝脏脂质代谢及SIRT1/UCP2通路的影响(张玉佩;杨钦河;金玲;孔怡琳;邓远军;李媛媛;梁荫基;韩莉;王观龙;张金文;程少冰)
    来源于海洋真菌的Oxalicumone A诱导肝细胞L-02凋亡的毒性作用机制研究(石思;郭坤彬;王翔宇;闵剑斌;李伟荣)
    青蒿素类药联合紫杉醇对小鼠黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用(薛林路;李国铭;邓长生;王琪;徐勤;宋健平[1,2])
    β-细辛醚对阿尔茨海默病细胞模型的作用及对神经元突触功能可塑性的影响(刘四军;陈惠芳;张一帆;王莹莹;陈云波;王奇)
    柴胡皂苷d对肝星状细胞ERα和ERβ蛋白水平的调节(李勇;刘进锴;林柳兵;阙任烨;沈艳婷;陶智会)
    [药物动力学研究]
    多次给药法评价芪灯明目胶囊对葛根素生物利用度的影响(张艳;徐佑东;胡樱凡;孟宪丽;王平)
    UPLC-MS/MS测定金茵清热口服液中绿原酸和大黄素血药浓度及大鼠体内药代动力学研究(张晨宁;刘瑞梅;杨光义;魏晋宝;叶方;杜士明[1,2])
    [组学研究]
    高脂血症大鼠造模过程中血液代谢组学研究(罗朵生[1,2];李坤平;朴胜华;郭姣[1,2])
    红景天对慢性冷应激大鼠模型血浆和尿液代谢组的影响(王亚玲[1,2];韩智慧[1,2];郑凌云;潘思娜[1,2];杨永霞)
    基于蛋白质组学技术筛选葛根芩连汤防治胰岛素抵抗作用的血清差异表达蛋白(章常华;涂秀英;熊淑平;盛军庆;关志宇;于梅;魏学鑫)
    [指纹图谱研究]
    南药“凉粉草”药材水溶性成分HPLC指纹图谱鉴别研究(韦智灵;林朝展;祝晨蔯)
    赤芝孢子油软胶囊与常见植物油所含植物脂肪酸甘油酯HPLC指纹图谱比较(董昕;王腾华;褚晨亮;李斯达;高幼衡)
    黄连的UPLC-MS/MS指纹图谱研究(张建锋;刘文;张石宇;吴增光)
    科技论文“前言”和“讨论”的撰写方法
    [质量分析研究]
    地黄炮制前后化学成分的UHPLC-Q-TOF/MS比较研究(陶益;蒋妍慧;唐克建;李伟东;蔡宝昌)
    生物诱导法所产不同部位沉香挥发油成分分析(雷胄熙;吴泽青;林励;李宇邦)
    乌参醒脑滴丸中银杏萜类内酯成分的质量控制研究(赵文静;杨雄辉;范辉[1,2];谭珍;邓德城;杨剑湖;贝伟剑)
    结合药效学优选麻荆颗粒中麻黄提取方法(孟硕;张鹏;葛争艳;金龙;刘建勋)
    抑乳调经颗粒含量测定方法的研究(王丽莉;凡华;潘莉;魏媛怡;王娴;王春霞)
    [工艺研究]
    丹参饮超临界CO_2提取工艺研究(林辉;徐大量;王硕辉;吴德跃;刘方敏)
    芪元颗粒中总黄酮的提取纯化工艺研究(梁惠珍;门九章;李霞;曹晓强)
    [临床研究]
    热毒宁注射液治疗普通型登革热的有效性及安全性临床研究(杨忠奇;冼绍祥;刘南;张伟;刘志辉;于浩;萧伟)
    登革热诊疗指南(2014年第2版)
    [方法学研究]
    自噬对庆大霉素诱导的大鼠肾损伤及修复作用的研究(孙帅军;陈叶香;王新宇;王曼;蒋宝平[1,2];许立[1,2])
    [综述]
    丹皮酚心血管活性的研究进展(张金艳;赵乐;李贻奎;翁维良)
    热休克蛋白与肺癌相关性的研究进展(刘海玲[1,2];李旦;孙帅)
    《中药新药与临床药理》杂志稿约(2016年)
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