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BA-ELISA定量检测人血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa、CD62p的表达及其临床应用


□ 张有涛[1] 赵益明[2] 朱明清[2] 蒋敏[1] 程寅峰[1] 史进方[1] 顾国浩[1] 阮长耿[2]

[1]苏州大学附属第一医院 检验科,江苏苏州215006 [2]苏州大学附属第一医院 江苏省血液研究所、卫生部血栓与止血重点实验室,江苏苏州215006

摘 要:

目的建立测定血小板膜糖蛋白功能的生物素一亲和素-酶联免疫吸附(BA-ELISA)方法,并探讨其临床应用价值。方法采用抗血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa(membraneglycoproteinⅡb/Ⅲa,GPⅡb/Ⅲa)单抗7E3和抗血小板CD62p单抗SZ51及生物素一亲和素系统建立BA-ELISA方法,并应用该方法检测50名健康志愿者、30名急性心肌梗死(AMI)、30名急性脑梗死(ACI)和30名糖尿病(DM)患者的血小板膜糖蛋白功能,并与流式细胞术(FCM)测定结果进行比较。同时,应用该方法对抑制性单抗SZ21和阿司匹林抑制血小板活化的功能效果进行测定。结果该方法检测血小板计数敏感度低达3.13×10^9/L(7E3包被板)和6.25×10^9/L(SZ51包被板),批内和批间变异系数分别为6.23%~8.35%和4.38%-5.78%。测得AMI、ACI和DM患者ADP诱导的(未诱导的)血小板的GPⅡb/ⅢaCD62p表达量均显著高于健康志愿者(P〈0.01)。BA-ELISA测定表明,SZ21和阿司匹林可明显抑制ADP诱导的血小板功能。该方法和FCM同时测定健康志愿者、AMI、ACI和DM患者的GPⅡb/Ⅲa和CD62p表达水平。测定数据经直线回归分析得r=0.86。结论BA-ELISA检测血小板的膜糖蛋白,可精确判断血小板的功能状态,为指导临床预防、诊治、评估疾病提供简便、可行的方法。活化的血小板膜糖蛋白测定可从凝血的角度对上述疾病的早期诊断、病情进展的判断、抗血栓药物的评估以及判断疾病的预后起到辅助作用。

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