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用基因组DNA制备独特型抗淋巴瘤核酸疫苗的实验研究


□ 林宁晶 朱平 等

摘 要:

本研究观察从人B细胞淋巴瘤细胞系基因组DNA及RNA分别构建的表达载体作为核酸疫苗诱导小鼠产生抗肿瘤免疫反应的情况。分别提取人B淋巴瘤细胞系Namalwa细胞的基因组DNA及RNA,将免疫球蛋白重链可变区(IgHV)基因片段克隆到pcDNA3.0真核表达载体中作为独特型核酸疫苗,其中DNA 核酸疫苗用LipofectAMINE转染COS细胞,多面手用RT-PCR观察转录及剪接的情况。两种不同来源的核酸疫苗分别肌内注射免疫小鼠后,用间接免疫荧光法检测抗独特型抗体的生成。结果发现,基因组DNA来源的核酸疫苗在COS细胞中能成功地转录,转录产物大小为477bp,其中86bp的内含子区域被剪接;两种疫苗免疫动物后均可诱导针对Namalwa细胞特异的抗独特型抗体,并于第6周达高峰。结论提示,淋巴瘤基因组DNA和RNA来源的IgHV基因片段均可制备核酸疫苗,能诱发小鼠产生抗淋巴瘤免疫反应。


【关键词】  基因组dna


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