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碱性成纤维细胞生长因子和转化生长因子-β1对表皮干细胞增殖和分化的作用


□ 王鹏;舒斌;徐盈斌;祁少海;刘旭盛;刘建;周子恒;陈蕾;周飞;谢举临

中山大学附属第一医院烧伤科

摘 要:

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和转化生长因子-β1(TGF-β1)对体外培养的表皮干细胞(ESC)增殖和分化的作用。方法从10只1~3 d龄SD大鼠提取ESC,实验选用第2代细胞。按随机数字表法将细胞分为bFGF组、TGF-β1组、bFGF+SU5402组和TGF-β1+SB505124组和对照组,各干预组角质形成细胞无血清培养基中分别加入10 ng/mLbFGF、10 ng/mLTGF-β1、10 ng/mLbFGF+10μM-SU5402(bFGF受体抑制剂)、10 ng/mLTGF-β1+1 uM-SB505124(TGF-β1受体抑制剂),对照组不做处理,于处理后即刻、1、3、7、10 d 5个时间点显微镜下观察各组细胞形态,以MTS法检测各组ESC增殖情况,取各组处理后10 d细胞以Transwell法检测迁移能力,并采用实时荧光定量RT-PCR法及免疫印迹法检测各组基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ、Ⅲ型胶原的相对表达量。结果 bFGF组ESC较对照组增殖能力(t=6.65,P<0.01)及迁移能力(t=7.50,P<0.01)显著增强,MMP-1表达(t=12.90,P<0.01)明显增高,而α-SMA(t=-30.31,P<0.01)、Ⅰ型胶原(t=-10.61,P<0.01)和Ⅲ型胶原的表达量明显偏低(t=-7.91,P<0.01);TGF-β1组ESC与对照组相比增殖能力(t=-3.36,P<0.05)及迁移能力(t=-3.96,P=0.01)显著减弱,MMP-1表达(t=-8.81,P<0.01)明显减少,而α-SMA(t=15.92,P<0.01)、Ⅰ型胶原(t=-16.47,P<0.01)和Ⅲ型胶原(t=22.80,P<0.01)的表达量较对照组明显偏高;bFGF+SU5402组ESC增殖迁移能力及分化程度较对照组均无明显差别(P>0.05),而TGF-β1+SB505124组ESC迁移能力较对照组显著增强(t=9.81,P<0.01)。结论 bFGF可以显著促进ESC增殖和迁移,进而减少Ⅰ、Ⅲ型胶原的形成;而TGF-β1在抑制ESC增殖及迁移,进而促进Ⅰ、Ⅲ型胶原的形成。

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